本發(fā)明屬于蔬菜育種及分子遺傳學領域，具體涉及細胞質(zhì)遺傳、進化和核質(zhì)互作機制，特別是分子水平上細胞質(zhì)雄性不育的恢復機理等領域。
背景技術(shù)：
Pol CMS是甘藍型油菜（B.napus）中發(fā)現(xiàn)的第一個有實用價值的雄性不育類型，后被轉(zhuǎn)育到大白菜(Brassica campestris L．ssp．pekinensis)等多種十字花科蔬菜作物中，是目前大白菜育種中應用比較廣泛的不育源之一。大白菜雜種優(yōu)勢明顯，雜交種是目前主要生產(chǎn)用種。目前生產(chǎn)中應用的雜交種，大多是通過自交不親和系和雄性不育兩用系配制。自交不親和系存在親本自交衰退、擴繁困難、制種成本高等缺點，而用雄性不育兩用系制種則要拔除50%的可育株，增加了育苗成本，費時費工，降低了制種產(chǎn)量，若拔除不徹底，則會降低種子純度。利用細胞質(zhì)雄性不育系進行雜種生產(chǎn)，可大大降低制種成本，避免自交不親和系和雄性不育兩用系的缺點?；謴拖凳抢眉毎|(zhì)雄性不育系生產(chǎn)油菜雜交種所必不可少的材料。Pol CMS轉(zhuǎn)入大白菜后，經(jīng)過廣泛測交，篩選到多個育性恢復材料。本研究利用圖位克隆技術(shù)定位到一個Pol CMS的恢復基因，并根據(jù)測序結(jié)果開發(fā)一個與恢復基因共分離的顯性標記，為在大白菜種質(zhì)資源中篩選恢復材料和分子標記輔助選擇育種奠定基礎。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一個大白菜polCMS的恢復基因，該基因編碼的蛋白質(zhì)及這種基因的檢測方法和應用。
在大白菜中該恢復基因可恢復polCMS的育性，使花藥正常發(fā)育，產(chǎn)生正常的花粉，其等位基因由于堿基突變而不具仍恢復pol CMS育性的功能。
這一個大白菜pol CMS的恢復基因，具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
所述的基因序列所編碼的蛋白質(zhì)，具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。
一對用于檢測上述基因的特異性PCR引物，序列為：
上游：5’-GGATGCGATCCTGATATTTG-3’
下游：5’-AGAGAGAGGCTACAGAACAAACT-3’
即SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的序列。
檢測這一個大白菜pol CMS的恢復基因的方法為，采用上述的特異性PCR引物對大白菜葉片所提取的DNA進行PCR擴增反應，能得到416 bp DNA序列，如SEQ ID No.5所示。該片段只能在含有pol CMS恢復基因的大白菜中能擴增得到，而在不具有恢復能力的大白菜中不能擴增出條帶（圖1）。
在本發(fā)明研究中，發(fā)明人設計的特異性PCR引物和檢測方法，不僅能對大白菜苗期所提取的DNA進行PCR擴增，還能用于大量篩選大白菜種質(zhì)資源。該PCR引物是利用引物設計軟件Primer 5.0，以大白菜polCMS的恢復基因及其等位基因之間的序列差異為基礎設計的。根據(jù)擴增條帶的有無能快速檢測到含有此基因的大白菜品種和種質(zhì)資源，其檢測的準確性高，操作簡單，成本低廉。若一個大白菜品種或種質(zhì)資源中含有此恢復基因，則用上述引物能夠擴增出長度為416 bp的特異性片段，若不含有此恢復基因，則擴增不出任何產(chǎn)物（圖1）。
含有一個大白菜polCMS的恢復基因的材料92S105（柯桂蘭，宋胭脂，趙利民，張魯剛等. 秦白四號大白菜選育. 陜西農(nóng)業(yè)科學,1996,No.4，12-15）是經(jīng)過測交驗證，并多代自交育成的各種農(nóng)藝性狀穩(wěn)定的品系。發(fā)明人在研究中將此品系與大白菜polCMS的不育系06J45（許小勇,孫希祿,方智遠,張魯剛. 大白菜CMS雄性不育發(fā)生相關(guān)基因的克隆與分析[J]. 西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版), 2014,42（12）: 119-125）進行雜交，并以06J45為母本用雜交一代回交構(gòu)建了BC1F1，進一步用雜合單株自交獲得BC1S2遺傳群體，利用SSR和InDel分子標記將含有一個大白菜pol CMS的恢復基因定位在白菜的第9號染色體上。
本發(fā)明的有益效果為：獲得了一個大白菜polCMS的恢復基因及快速檢測是否含有該基因的檢測方法，并且利用該方法可以快速檢測含有該基因的大白菜植株，其檢測準確性高，操作簡單，成本低廉。使得在大白菜種質(zhì)資源中大量篩選恢復系成為可能，從而減少大田人工測交和育性調(diào)查的工作量。另個通過本發(fā)明得到的一個大白菜polCMS的恢復基因可用于研究pol CMS/Rf系統(tǒng)中核質(zhì)互作的機理等，并且也可以作為標記性狀在大白菜細胞質(zhì)雄性不育系選育、雜交育種和雜交種的純度鑒定中得以應用。
附圖說明
圖1為本發(fā)明的特異性PCR引物對該基因進行PCR擴增的結(jié)果。F代表含有恢復基因的大白菜PCR擴增產(chǎn)物，S代表不含有恢復基因的大白菜的擴增產(chǎn)物。
具體實施方式
實施例1 白菜基因組總DNA的提取
1）取0.2g去掉主脈的白菜新鮮嫩葉片，塞入裝有鋼珠（鋼珠需要由質(zhì)量分數(shù)為75%的酒精清洗過）的2 mL的離心管中，放入液氮中速凍，利用組織研磨儀磨成粉末；
2）向離心管中加700 μl經(jīng)65℃預熱的CTAB提取液（CTAB：2％，Tris-HCl（pH=8.0）：100 mmol/L，EDTA：20 mmol/L，NaCl：1.4mol/L），再加入10 μL的β-巰基乙醇，迅速混勻；
3） 隨后將離心管放入65℃烘箱中，中間每間隔5-10min分鐘搖一次，溫浴45 min；
4）取出離心管，加入等體積的酚：氯仿：異戊醇（25:24:1）的混合物，搖勻15 min后，常溫下10000 r/min 離心10 min；
5）將上層液相（約700μl）轉(zhuǎn)移到另一離心管中，加入等體積的氯仿和異戊醇混合溶液（氯仿：異戊醇＝24：1），輕輕搖勻10 min，常溫下10000 r/min離心10 min；
6）取上清（約500 μl），加入2倍體積經(jīng)預冷的無水乙醇，輕輕混勻使DNA抱團，-20℃條件下沉淀30 min，4℃條件下8000 r/min離心5 min；
7）棄上清，加入500 μl質(zhì)量百分數(shù)為75%的乙醇洗滌沉淀2次后，沉淀物室溫晾干；
8）加入500 μl的無菌蒸餾水溶解DNA，加入0.29 μl的RNaseA（10 μg/μl），混勻后稍離心，37℃保溫30 min；
9）加入3 mol/L的NaAc溶液50 μL和2倍體積經(jīng)預冷的無水乙醇，輕輕混勻使DNA抱團，-20℃條件下沉淀30 min；
10）在4℃條件下，8000 r/min離心5 min，棄上清，加入質(zhì)量百分數(shù)為75％的乙醇清洗沉淀1～2次后，沉淀物室溫晾干，加入400 μl～500 μl的滅菌ddH2O溶解使用。
實施例2 PCR擴增和基因檢測
（一）分別獲得大白菜polCMS的恢復基因及其在不育系中的等位基因
1）20 μl PCR 反應體系為： 50 ng/μl的模板 DNA 為2 μl，2×Taq Master Mix 10 μl，10 μM的上、下游引物各1 μl，用無菌去離子水補充反應體系至20μl。
引物序列為：
上游：5’-GTTCTCTCTCTCCCACAAAGATT-3’
下游：5’-TTAAGCCCAAGTACCTCAGAAAC-3’
2）PCR 擴增反應在PCR儀上進行
溫度和反應條件為：94 ℃預變性5 min；然后94 ℃變性30 s，58℃退火 30 s，72℃延伸 2 min，共 35個循環(huán)；最后72℃再延伸10 min，4℃保存。
PCR擴增產(chǎn)物長度為2196 bp，恢復系大白菜中該基因測序結(jié)果如SEQ ID No.6，不育系大白菜中該基因測序結(jié)果如SEQ ID No.7。
使用DNA Star軟件包中的EditSeq軟件獲得該基因的ORF序列、并翻譯成氨基酸序列，恢復系大白菜氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，不育系大白菜氨基酸序列如SEQ ID No.8所示。
（二）檢測一個大白菜polCMS的恢復基因
1）10 μl PCR 反應體系為： 50ng/μl的模板 DNA 為1μl，2×Taq Master Mix 5μl，10μ M的上、下游引物各0.5μl，用無菌去離子水補充反應體系至10μl。
引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示：
上游：5’-GGATGCGATCCTGATATTTG-3’
下游：5’-AGAGAGAGGCTACAGAACAAACT-3’
2）PCR 擴增反應在PCR儀上進行
溫度和反應條件為：94 ℃預變性5 min；然后94 ℃變性30 s，55℃退火 30 s，72℃延伸30 s，共 35個循環(huán)；最后72℃再延伸10 min，4℃保存。
得到的擴增產(chǎn)物，上樣于1.5%瓊脂糖凝膠上并電泳，經(jīng)溴化乙錠染色后在凝膠成像儀上成像，結(jié)果如圖1所示，含有polCMS恢復基因的大白菜擴增出一條416 bp的條帶，其是SEQ ID No.1中的一段，而不育系或保持大白菜中則不能擴增出條帶。
<110> 西北農(nóng)林科技大學
<120> 一個大白菜pol CMS育性恢復基因及其檢測方法和應用
<160> 8
<210> 1
<211> 1953bp
<212> DNA
<213> 大白菜pol CMS的核苷酸序列
<400> 1
ATGGTGTTGAGGACACAGAGATGGAATCGTCTTACTACTTTGAGATTGGTTCATCTCCGT 60
TCAACTGAGACAGGTACTCTGAGAAATGCTGCTTTCTTCCAAAGCCCATACGACTTCTTC 120
TTCTGCGTACAAGGCTTCTCTGGTCTCACCAGCGATAGAAAGATGTCTTCTTACAAAGAG 180
AGATTGAGAAGTGGACTCGTCGATATCAAGAAGGATGATGTTGTGGCTCTGTTTCAGTCC 240
ATGCTTCGGTCTCGTCCTCTTCCTACGGTCATTGATTTCAACAGATTGTTTGGTTTACTT 300
GCCAGAACTAAACAGTACGATCTCGTGTTAGCTCTCTGCAAGCAAATGGAACTGAAAGGG 360
ATTGCGTATGACCTCTACACTCTCAACATTATGATCAATTGCTTCTGCAGGCGTCGGAAA 420
CTCGGTTTTGCTTTTTCCGCTATGGGGGAGATCTTCAAACTTGGGTATGAGCCTAACACA 480
GTCACATTTAACACCCTCCTCAATGGCTTATGTCTCGAGGGCAGAGTCTTTGAAGCTGTG 540
GAGTTAGTTGATTGTATGGTCCTAAGCCAACATGTACCAGATCTCATCACCCTCAACACT 600
CTTGTCAATGGGCTTTGTCTCAAAGATAGAGTGTCTGAAGCAGTGGATTTAATAGCTCGA 660
ATGATGGCTAATGGATGTCAACCCAATCAGTTTACCTATGGTCCAATCTTGAACAGAATG 720
TGTAAGTCTGGGAACACTGCCTCGGCCTTGGATCTGCTCAGGAAGATGGAACATAGAAAG 780
ATCAAGCCACACGTAGTCACATACACTATCATCATTGACAATCTTTGCAAAGATGGGAGA 840
CTCGACGATGCACTCAGCTTTTTCAGTGAAATGGAAACCAAAGGGATCAAAGCAAATGTC 900
TTTACCTACAACTCTCTCATAGGAAGCTTCTGTAGTTTTGGCAGATGGGATGATGGTGCA 960
CAGTTGCTGAGGGATATGATTACAAGGAAAATCACCCCCAACGTTGTCACTTTCAGTGCT 1020
TTGATTGATAGTCTTGTTAAAGAGGGAAAGCTTACTGAGGCTAAAGACTTGTACAATGAG 1080
ATGATCACAAGAGGCATAGAGCCTAACACCATTACATATAATTCTTTGATATATGGGCTG 1140
TGCAACGACAAGCGCTTAGATGAAGCCAACCAGATGATGGACCTGATGGTTAGCAAGGGA 1200
TGCGATCCTGATATTTGGACGTATAATATCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAACAG 1260
GTTGATGATGGTATGAGACTATTCCGAAAGATGTCTCTGAGAGGAATGATTGCAGATACA 1320
GTGACTTATAGCACTCTCATCCAAGGGTTTTGTCAATCAAGAAAACTTATTGTCGCCAAA 1380
AAAGTCTTCCAAGAGATGGTCTCTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGCTATT 1440
TTGCTGGATGGGTTGTGTGACAATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGATCAA 1500
ATGCACAAGTGTAAGATGGAACTTGATATTGGTATATATAATATCATCATTCACGGGATG 1560
TGCAATGCAAATAAGGTCGATGATGCTTGGAGTTTGTTCTGTAGCCTCTCTCTCAAAGGA 1620
GTGAAGCGTGATATTCAGTCATACAACATAATGTTGTCAGGATTATGTAAGGGGAGCTCA 1680
TTGTCTGAAGCGGATGCATTGTTTAGAAAAATGAAGGAAGATGGGTATGAGCCAGATGGT 1740
TGTACGTACAATACACTTATCAGAGCACATCTTCGAGGTAATGACATAACAACTTCAGTT 1800
CAACTCATTGAAGAAATGAAGAGGTGTGGGTTCTCTTCAGATGCTTCCACCGTAAAGATT 1860
GTTATGGATATGTTATCGAGTGGTGAATTGGACAAAAGCTTTCTAAATATGCTTTCTGGT 1920
CCTTTTGGAGACAAATCATCATCGTTGGATTGA 1953
<210> 2
<211> 650bp
<212> DNA
<213> 大白菜pol CMS的氨基酸序列
<400> 2
MVLRTQRWNRLTTLRLVHLRSTETGTLRNAAFFQSPYDFFFCVQGFSGLTSDRKMSSYKE 60
RLRSGLVDIKKDDVVALFQSMLRSRPLPTVIDFNRLFGLLARTKQYDLVLALCKQMELKG 120
IAYDLYTLNIMINCFCRRRKLGFAFSAMGKIFKLGYEPNTVTFNTLLNGLCLEGRVFEAV 180
ELVDCMVLSQHVPDLITLNTIVNGLCLKDRVSEAVDLIARMMANGCQPNQFTYGPILNRM 240
CKSGNTASALDLLRKMEHRKIKPHVVTYTIIIDNLCKDGRLDDALSFFSEMETKGIKANV 300
FTYNSLIGSFCSFGRWDDGAQLLRDMITRKITPNVVTFSALIDSLVKEGKLTEAKDLYNE 360
MITRGIEPNTITYNSLIYGLCNDKRLDEANQMMDLMVSKGCDPDIWTYNILINGFCKAKQ 420
VDDGMRLFRKMSLRGMIADTVTYSTLIQGFCQSRKLIVAKKVFQEMVSQGVHPGIMTYAI 480
LLDGLCDNGELEEALGILDQMHKCKMELDIGIYNIIIHGMCNANKVDDAWSLFCSLSLKG 540
VKRDIQSYNIMLSGLCKRSSLSEADALFRKMKEDGYEPDGCTYNTLIRAHLRGNDITTSV 600
QLIEEMKRCGFSSDASTVKIVMDMLSSGELDKSFLNMLSGPFGDKSSSLD 650
<210> 3
<211> 20bp
<212> DNA
<213> 引物的核苷酸序列
<400> 3
GGATGCGATCCTGATATTTG 20
<210> 4
<211> 23bp
<212> DNA
<213> 引物的核苷酸序列
<400> 4
AGAGAGAGGCTACAGAACAAACT 23
<210> 5
<211> 416bp
<212> DNA
<213> 擴增物的核苷酸序列
<400> 5
GGATGCGATCCTGATATTTGGACGTATAATATCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAA 60
CAGGTTGATGATGGTATGAGACTATTCCGAAAGATGTCTCTGAGAGGAATGATTGCAGAT 120
ACAGTGACTTATAGCACTCTCATCCAAGGGTTTTGTCAATCAAGAAAACTTATTGTCGCC 180
AAAAAAGTCTTCCAAGAGATGGTCTCTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGCT 240
ATTTTGCTGGATGGGTTGTGTGACAATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGAT 300
CAAATGCACAAGTGTAAGATGGAACTTGATATTGGTATATATAATATCATCATTCACGGG 360
ATGTGCAATGCAAATAAGGTCGATGATGCTTGGAGTTTGTTCTGTAGCCTCTCTCT 416
<210> 6
<211> 2194bp
<212> DNA
<213> 恢復系大白菜的擴增基因序列
<400> 6
GTTCTCTCTCTCCCACAAAGATTTTCAAAGCTCAGTCACTCAGAGAACGAATCTTTGTGT 60
GGCCTAAGAAGAAGAGGGCGATTCATTTGAAGCTCTAAGATGGTGTTGAGGACACAGAGA 120
TGGAATCGTCTTACTACTTTGAGATTGGTTCATCTCCGTTCAACTGAGACAGGTACTCTG 180
AGAAATGCTGCTTTCTTCCAAAGCCCATACGACTTCTTCTTCTGCGTACAAGGCTTCTCT 240
GGTCTCACCAGCGATAGAAAGATGTCTTCTTACAAAGAGAGATTGAGAAGTGGACTCGTC 300
GATATCAAGAAGGATGATGTTGTGGCTCTGTTTCAGTCCATGCTTCGGTCTCGTCCTCTT 360
CCTACGGTCATTGATTTCAACAGATTGTTTGGTTTACTTGCCAGAACTAAACAGTACGAT 420
CTCGTGTTAGCTCTCTGCAAGCAAATGGAACTGAAAGGGATTGCGTATGACCTCTACACT 480
CTCAACATTATGATCAATTGCTTCTGCAGGCGTCGGAAACTCGGTTTTGCTTTTCTGCTA 540
TGGGGAAGATCTTCAAACTTGGGTATGAGCCTAACACAGTCACATTTAACACCCTCCTCA 600
ATGGCTTATGTCTCGAGGGCAGAGTCTTTGAAGCTGTGGAGTTAGTTGATTGTATGGTCC 660
TAAGCCAACATGTACCAGATCTCATCACCCTCAACACTATTGTCAATGGGCTTTGTCTCA 720
AAGATAGAGTGTCTGAAGCAGTGGATTTAATAGCTCGAATGATGGCTAATGGATGTCAAC 780
CCAATCAGTTTACCTATGGTCCAATCTTGAACAGAATGTGTAAGTCTGGGAACACTGCCT 840
CGGCCTTGGATCTGCTCAGGAAGATGGAACATAGAAAGATCAAGCCACACGTAGTCACAT 900
ACACTATCATCATTGACAATCTTTGCAAAGATGGGAGACTCGACGATGCACTCAGCTTTT 960
TCAGTGAAATGGAAACCAAAGGGATCAAAGCAAATGTCTTTACCTACAACTCTCTCATAG 1020
GAAGCTTCTGTAGTTTTGGCAGATGGGATGATGGTGCACAGTTGCTGAGGGATATGATTA 1080
CAAGGAAAATCACCCCCAACGTTGTCACTTTCAGTGCTTTGATTGATAGTCTTGTTAAAG 1140
AGGGAAAGCTTACTGAGGCTAAAGACTTGTACAATGAGATGATCACAAGAGGCATAGAGC 1200
CTAACACCATTACATATAATTCTTTGATATATGGGCTGTGCAACGACAAGCGCTTAGATG 1260
AAGCCAACCAGATGATGGACCTGATGGTTAGCAAGGGATGCGATCCTGATATTTGGACGT 1320
ATAATATCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAACAGGTTGATGATGGTATGAGACTAT 1380
TCCGAAAGATGTCTCTGAGAGGAATGATTGCAGATACAGTGACTTATAGCACTCTCATCC 1440
AAGGGTTTTGTCAATCAAGAAAACTTATTGTCGCCAAAAAAGTCTTCCAAGAGATGGTCT 1500
CTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGCTATTTTGCTGGATGGGTTGTGTGACA 1560
ATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGATCAAATGCACAAGTGTAAGATGGAAC 1620
TTGATATTGGTATATATAATATCATCATTCACGGGATGTGCAATGCAAATAAGGTCGATG 1680
ATGCTTGGAGTTTGTTCTGTAGCCTCTCTCTCAAAGGAGTGAAGCGTGATATTCAGTCAT 1740
ACAACATAATGTTGTCAGGATTATGTAAGAGGAGCTCATTGTCTGAAGCGGATGCATTGT 1800
TTAGAAAAATGAAGGAAGATGGGTATGAGCCAGATGGTTGTACGTACAATACACTTATCA 1860
GAGCACATCTTCGAGGTAATGACATAACAACTTCAGTTCAACTCATTGAAGAAATGAAGA 1920
GGTGTGGGTTCTCTTCAGATGCTTCCACCGTAAAGATTGTTATGGATATGTTATCGAGTG 1980
GTGAATTGGACAAAAGCTTTCTAAATATGCTTTCTGGTCCTTTTGGAGACAAATCATCAT 2040
CGTTGGATTGAAATAAATCTTCTTGGAAGACGCTGGTGAGCCTTGTCGGAAGGGAGATGT 2100
GCACTTGCTAATTAATATGTCTTCTTAGAATGTTTGGATCTTATCCGCAAGAGACAAAGT 2160
CCCGGTTAATGGTTTCTGAGGTACTTGGGCTTAA 2194
<210> 7
<211> 2195bp
<212> DNA
<213> 不育系大白菜的擴增基因序列
<400> 7
GTTCTCTCTCTCCCACAAAGATTTTCAAAGCTCAGTCACTCAGAGAACGAATCTTTGTGT 60
GGCCTAAGAAGAAGAGGGCGATTCATTTGAAGCTCTAAGATGGTGTTGAGGACACAGAGA 120
TGGAATCGTCTTACTACTTTGAGATTGGTTCATCTCCGTTCAACTGAGACAGGTACTCTG 180
AGAAATGCTGCTTTCTTCCAAAGCCCATACGACTTCTTCTTCTGCGTACAAGGCTTCTCT 240
GGTCTCACCAGCGATAGAAAGATGTCTTCTTACAAAGAGAGATTGAGAAGTGGTCTCGTC 300
GATATCAAGAAGGATGATGCTGTTGCTCTGTTTCAGTCCATGCTTCGGTCTCGTCCTCTT 360
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ATGGGGGAGATCTTCAAACTTGGGTATGAGCCTAACACAGTCACATTTAACACCCTCCTC 600
AATGGCTTATGTCTCGAGGGCAGAGTCTTTGAAGCTGTGGAGTTAGTTGATTGTATGGTC 660
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GGAAGCTTCTGTAGTTTTGGCAGATGGGATGATGGTGCACAGTTGCTGAGGGATATGATT 1080
ACAAGGAAAATCACCCCCAACGTTGTCACTTTCAGTGCTTTGATTGATAGTCTTGTTAAA 1140
GAGGGAAAGCTTACTGAGGCTAAAGACTTGTACAATGAGATGATCACAAGAGGCATAGAT 1200
CCTAATACCATTACATATAGTACTTTGATATATGGGTTGTGCATGGAGAACCGCTTAGAT 1260
GAAGCCAACCAGATGATGGACCTCATGGTTAGCAAGGGATGCGATCCTGATATCGTGACG 1320
TTTAATGTCCTTATAAACGGATTTTGTAAGGCTAAACAGGTTGATGTTGGTATGAGACTA 1380
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TCTCAAGGTGTTCATCCTGGTATTATGACTTATGGTATTTTGCTGGATGGGTTGTGTGAC 1560
AATGGCGAACTAGAAGAGGCTTTGGGAATACTTGATCAAATGCACAAGTGTAAGATGGAA 1620
CTTGATATTGGTATATATAGTATCATCATTCACGGGTTGTGCAATGCAAGTAAGATCGAT 1680
GATGCTTGGGATCTATTCTGTAGCCTCTCTCTCAAAGGAGTGAAGCGTGATATTCAGTCA 1740
TACAACATAATGTTGTCAGGATTATGTAAAAGGAGCTCATTGTCTGAAGCGGATGCATTG 1800
TTTAGAAAAATGAAGGAAGATGGGTATGAGCCAGATGGTTGTACGTACAATACACTTATC 1860
AGAGCACATCTTCGAGGTAGTGACATAACAACTTCAGTTCAACTCATTGAAGAAATGAAG 1920
AGGTGTGGGTTCTCTTCAGATGCTTCCACCGTAAAGATTGTTATGGATATGCTATCAAGT 1980
GGTGAATTGGACAAAAGCTTTCTAAATATGCTTTCTGGTCCTTTTGGAGACAAATCATCA 2040
TTGTTGGATTGAAATAAATCTTCTTGGAAGACGCTGGTGAGCCTTGTCGGAAGGGAGATG 2100
TGCACTTGCTAATTAATATGTCTTCTTAGAATGTTTGGATCTTATCCGCAAGAGACAAAG 2160
TCCCGGTTAATGGTTTCTGAGGTACTTGGGCTTAA 2195
<210> 8
<211> 649bp
<212> DNA
<213> 不育系大白菜氨基酸序列
<400> 8
MVLRTQRWNRLTTLRLVHLRSTETGTLRNAAFFQSPYDFFFCVQGFSGLTSDRKMSSYKE 60
RLRGLVDIKKDDAVALFQSMLRSRPLPTVIDFNRLFGLLARTKQYDLVLALCKQMELKGI 120
AYDLYTLNIMINCFCRRRKLGFAFSAMGEIFKLGYEPNTVTFNTLLNGLCLEGRVFEAVE 180
LVDCMVLSQHVPDLITLNTIVNGLCLKDRVSEAVDLIARMMDKGCQADQFTYGPILNRMC 240
KSGNTASALDLLRKMEHRKIKPHVVTYNIIIDNLCKDGRLDDALSFFSEMETKGIKADVI 300
TYNSLIGSFCSFGRWDDGAQLLRDMITRKITPNVVTFSALIDSLVKEGKLTEAKDLYNEM 360
ITRGIDPNTITYSTLIYGLCMENRLDEANQMMDLMVSKGCDPDIVTFNVLINGFCKAKQV 420
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LIEEMKRCGFSSDASTVKIVMDMLSSGELDKSFLNMLSGPFGDKSSLLD 649