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一種食品及飼料中雞源成分快速檢測(cè)試劑盒及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12249875閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種用于檢測(cè)食品及飼料中雞源成分的基因,其為內(nèi)標(biāo)基因Actb,具有SEQ ID NO.1所示的序列。

2.權(quán)利要求1所述的基因在檢測(cè)雞源成分中的應(yīng)用。

3.權(quán)利要求1所述的基因在食品或飼料中雞成分鑒定中的應(yīng)用。

4.用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述基因的特異性LAMP引物組合,包括以下4條引物:

F3:5’-CCCAAGAAAGATGGCTGGAA-3’;

B3:5’-AGAGGCTACAGCTTCACCA-3’;

FIP:5’-AGCTGCCTCTAGCTCTTCCCTAAACCTCTCATTGCCAATGGT-3’;

BIP:5’-GTGGCCATCTCCTGCTCGAAACCGAGAGAGAAATTGTGCGT-3’。

5.權(quán)利要求4所述的特異性LAMP引物組合在雞源成分鑒定中的應(yīng)用。

6.權(quán)利要求4所述的特異性LAMP引物組合在制備雞源成分檢測(cè)試劑盒或檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。

7.一種含有權(quán)利要求4所述特異性LAMP引物組合的檢測(cè)雞源成分試劑盒。

8.一種檢測(cè)食品及飼料中雞源成分的方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)待測(cè)樣品提取DNA;

(2)以提取DNA為模板,采用權(quán)利要求4所述特異性LAMP引物組合進(jìn)行LAMP檢測(cè);

(3)結(jié)果判斷:采用2%瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行產(chǎn)物判定,出現(xiàn)階梯狀條帶證明擴(kuò)增成功,含有目的基因。

9.如權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,步驟(2)所述LAMP檢測(cè),其25μL LAMP檢測(cè)體系的具體配置為:1x Thermopol buffer,0.4mM dNTP,3mM MgSO4,1.0M甜菜堿,1.6μM引物FIP,1.6μM引物BIP,0.2μM引物F3,0.2μM引物B3,8U Bst DNA聚合酶大片段。

10.如權(quán)利要求8或9所述的方法,其特征在于,LAMP檢測(cè)反應(yīng)條件為:60-65℃恒溫1h,85℃5min,然后終止反應(yīng)。

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