1.一種金針菇單細胞選育優(yōu)良菌株的方法,其特征在于,它包括以下步驟:
S1. 接種培養(yǎng):在無菌環(huán)境下,取出發(fā)菌種塊,接種于菌絲體培養(yǎng)基中,在20~25℃靜置培養(yǎng)5~7d;
S2. 分離單細胞:取接種培養(yǎng)后的菌絲體3~5g放入容器中,加入細胞壁溶解酶制劑,在28~34℃下震蕩3~4h,過濾收集濾液用硫酸鎂溶液稀釋至單細胞濃度為1×103個/ml,得原生質(zhì)體懸浮液;
S3. 接種培養(yǎng)單細胞:取原生質(zhì)體懸浮液0.1ml涂抹接種于單細胞培養(yǎng)基表面,置于20~25℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)8~10d,待單細胞培養(yǎng)基表面生長出白色菌落后,選取單個菌落接種于新的單細胞培養(yǎng)基中,在20~25℃下繼續(xù)培養(yǎng),選取具有雙核單細胞菌株進行篩選試驗;
S4. 培養(yǎng)發(fā)菌:于無菌環(huán)境下在出菇培養(yǎng)基中接種雙核單細胞菌株,在20~25℃培養(yǎng)25~30d,長滿菌絲體;
S5. 出菇:將培養(yǎng)發(fā)菌后的菌袋移至出菇房內(nèi),去除表面菌種,控制出菇房溫度為7~15℃、空氣相對濕度為90~95%,光照強度為5~10Lx,待子實體生長至3~4cm時,子實體上套塑料筒,塑料筒下端扎口固定,上端扎口并保留直徑為2~3cm的透氣孔,子實體生長長度至20~22cm時采收;
S6. 篩選:對單細胞菌種和出發(fā)菌種進行菌絲體的生長速度、生育期、產(chǎn)量和產(chǎn)品質(zhì)量進行比較,篩選出產(chǎn)量高于出發(fā)菌種10%以上的單細胞菌種為優(yōu)良菌種。
2.如權(quán)利要求1所述的一種金針菇單細胞選育優(yōu)良菌株的方法,其特征在于,步驟S1所述菌絲體培養(yǎng)基每1000ml含有下述重量的原料:酵母粉:5~6g、葡萄糖:20~22g、加水定容至1000ml。
3.如權(quán)利要求1所述的一種金針菇單細胞選育優(yōu)良菌株的方法,其特征在于,步驟S2中所述分離酶制劑為溶壁酶溶于0.6mol的MgSO4溶液。
4.如權(quán)利要求1所述的一種金針菇單細胞選育優(yōu)良菌株的方法,其特征在于,步驟S3中所述單細胞培養(yǎng)基每1000ml含有下述重量的原料:馬鈴薯:180~200g、蔗糖:100~110g、瓊脂:20g、加水定容至1000ml。
5.如權(quán)利要求1所述的一種金針菇單細胞選育優(yōu)良菌株的方法,其特征在于,步驟S4中所述出菇培養(yǎng)基由下述重量份的原料組成:棉籽殼70~90、麩皮15~22、石膏0.5~2、石灰0.5~2。