本發(fā)明涉及一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物及其應用，屬于醫(yī)藥技術領域。

背景技術：

最早的wnt信號通路的發(fā)現(xiàn)來自于對致癌病毒和果蠅發(fā)育機制的研究。wnt基因于1982年發(fā)現(xiàn)，最初是作為小鼠乳腺腫瘤病毒優(yōu)先整合的位點而被鑒定的，該基因能在細胞間傳遞增殖和分化信息，是一種癌基因，當時被命名為int基因(小鼠int-1和int-3)。隨后發(fā)現(xiàn)它與果蠅的無翅基因(wingless)屬于相同源基因(orthologousgene)，從而將二者結合命名為wnt基因。

至今已發(fā)現(xiàn)并克隆出19種wnt基因家族成員，人們將wnt基因所介導的信號轉導通路稱為wnt信號通路。wnt通路是一條十分保守的信號傳導通路。從低等生物果蠅直至高等哺乳動物，其成員都具有高度的同源性。wnt信號轉導通路參與了多種生物學過程的調控，包括胚胎的生長和形態(tài)發(fā)育、組織的穩(wěn)定、能量代謝的平衡以及干細胞的維持(logan等人，annu.rev.cell.dev.biol.,2004,20,781-810)。近年來人們在對干細胞的研究中發(fā)現(xiàn)，wnt信號通路對于表皮干細胞、腸干細胞、造血干細胞、神經干細胞、胚胎干細胞以及腫瘤干細胞的維持都起著重要的調控作用(reya等人，nature,2005,434,843-850)。

經典wnt信號通路是由胞膜外配體wnts蛋白同時與7次細胞跨膜的frizzled受體和輔助性受體lrp5/6結合后開啟wnt/β-catenin信號通路的傳導，并活化胞質內dsh蛋白，活化的dsh蛋白能抑制由apc蛋白、gsk-3β、axin、β-catenin等形成的降解復合體中的關鍵成分gsk-3β的活性，使β-catenin不被gsk-3β磷酸化從而避免了泛素蛋白酶體對其識別和降解，進而在胞質中逐漸積聚(boutros等人，mech.dev.,1999,83,27-37；perrimon，cell,1994,76,781-784)。當β-catenin在胞漿中積聚到一定濃度時就開始向細胞核轉移，并與胞核內的轉錄因子tcf/lefs結合導致β-cateninn的下游靶基因的啟動因子暴露出來而被激活表達，如激活c-myc、cyclin-d1、survivin、gastrin、vegf、asef等而導致細胞異常增殖。而在正常體細胞中，胞質內的β-catenin大部分與胞膜粘附蛋白e-cadherin及α-catenin結合形成復合體參與細胞骨架的調節(jié)，維持同型細胞的粘附，防止細胞轉移，少部分游離的β-catenin在胞漿內被降解復合體磷酸化后由泛素蛋白酶體識別并降解，保持胞內β-catenin低水平狀態(tài)，從而使wnt信號通路處于關閉狀態(tài)。

研究發(fā)現(xiàn)當wnt基因本身或通路其他任一成員因素發(fā)生變化使其不正常活化時，均有可能引起腫瘤的發(fā)生。例如，在結腸癌患者中廣泛存在wnt通路的調節(jié)因子包括apc、β-catenin、axin、tcf等基因的突變，從而造成與生長相關的基因的過量表達(klaus等人，nat.rev.cancer,2008,8,387-398)。lozzo等通過對100多份正常和腫瘤組織及10個人類腫瘤細胞系的研究發(fā)現(xiàn)在乳腺癌、肺癌、前列腺癌及黑色素瘤中均存在wnt-5amrna的過度表達，尤其是在乳腺癌中的表達異常明顯(lozzo等人，cancerresearch,1995,55,3495)。

wnt途徑的異?；罨诩毎┳?、腫瘤發(fā)生及腫瘤侵襲性過程中具有重要作用，而阻斷異常的wnt信號通路可以抑制腫瘤細胞增殖，誘導腫瘤細胞凋亡。因此，wnt信號通路具有較好的抗腫瘤靶向作用。

研究表明wnt信號通路中l(wèi)rp5過表達引起的異常wnt信號和一些癌癥相聯(lián)系(hoang等人，int.j.cancer,2004,109,106-111)。如前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、食管癌和胃癌。

β-catenin激活wnt信號通路能增加神經祖細胞的循環(huán)和擴增，而缺失會導致祖細胞間隔的缺失(chenn等人，science,2002,297,365-369)。wnt信號的異常活化在神經系統(tǒng)中是致瘤的(dahmen等人，cancerres.,2001,61,7039-7043)。

wnt信號通路可以促進全能造血干細胞的更新和維持，并且異常的wnt信號對于由全能造血干細胞導致的各種疾病和其它血液相關的癌癥負有責任(reya等人，nature,2005,434,843-850；willert等人，nature,2003,423,448-452)。

wnt信號傳導的失調也會通過誘導視網膜炎癥、血管滲漏、和新血管形成，導致糖尿病性視網膜病的發(fā)展。

近年來，腫瘤免疫治療成為研究熱點。腫瘤免疫治療的主要策略是利用免疫檢查點抑制劑，如ctla-4，pd-1和pd-l1的單抗等，阻斷t細胞上免疫抑制受體的活化。這種策略在多種腫瘤(如黑色素瘤和肺癌)的病人中效果顯著(特別是t細胞浸潤的腫瘤)，然而在沒有t細胞浸潤的腫瘤組織中，常常抗腫瘤免疫。研究表明(stefanispranger等人，nature,2015,523,231-235)，在t細胞浸潤和無t細胞浸潤的黑色素瘤的病人樣本，49％無t細胞浸潤的黑色素瘤存在高水平的活性β-catenin，而t細胞浸潤的病人僅有4％。活化的wnt/β-catenin信號通路在腫瘤中，使cd103+樹突細胞(dc細胞，t細胞免疫的哨衛(wèi))募集受阻，因而t細胞活化受阻不能浸潤腫瘤。因此，抑制wnt信號通路將有助于增強免疫檢查點抑制劑的抗腫瘤效果。wnt信號通路抑制劑與免疫檢查點抑制劑的聯(lián)合應用具有加成作用，優(yōu)于二者的單獨應用。

由上可見，要改善因上述wnt信號通路失常引起的的病癥，就需要提出有效的wnt信號通路調節(jié)劑。

技術實現(xiàn)要素：

鑒于上述現(xiàn)有技術存在的缺陷，本發(fā)明的目的是提出一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物及其應用，能夠有效拮抗wnt信號通路，從而能夠用于治療或預防因wnt信號通路失常引起的病癥。

本發(fā)明的目的通過以下技術方案得以實現(xiàn)：

一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物，及其藥學上可接受的鹽，具有式i所示的結構：

其中：

a為未被取代或被1-6個r⁶基團取代的5-14元含有1-4個雜原子的雜芳環(huán)、6-12元芳環(huán)、3-6元環(huán)烷基或3-6元雜環(huán)烷基，所述雜芳環(huán)和雜環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者a為未被取代或被1-2個r⁶基團取代的其中x¹為n或cr⁶；

b選自氫原子、氰基、鹵代基、羥基、c3-8環(huán)烷基、c2-8烯基或c2-8炔基、c1-8磺?；?、c1-8磺酰胺基、c1-8烷氧基、c1-8酯基、c1-8?；?、c1-8酰胺基、c1-8氧代脲基、c1-8脲基、未被取代或被1-3個r¹²取代基取代的c1-8烷基、-nr⁷r⁸；或者b選自未被取代或被1-3個r⁹基團取代的苯環(huán)、未被取代或被1-3個r¹⁰基團取代的5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)、未被取代或被1-3個r¹¹基團取代的5-7元含有1-3個雜原子的飽和雜環(huán)，所述雜芳環(huán)和飽和雜環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；

u為未被取代或被1-6個r¹³基團取代的6-12元芳環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-14元雜芳環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-7元雜環(huán)并苯環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-7元雜環(huán)并5-6元雜芳環(huán)、-or¹⁴、-nr¹⁴r¹⁵，所述雜環(huán)、雜芳環(huán)分別為含有1-4個雜原子的雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述雜環(huán)或雜芳環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者u為被5-6元芳環(huán)或雜芳環(huán)取代的c2-8烯基或c2-8炔基，所述雜環(huán)、雜芳環(huán)分別為含有1-4個雜原子的雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述雜環(huán)或雜芳環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者u為未被取代或被1-2個r¹³基團取代的其中x²為n或cr¹³；

l為價鍵或其中y為價鍵、-o-、-s-、-n(r¹⁸)-或-c(r¹⁸)(r¹⁹)-；

r¹、r²、r³各自獨立地選自氫原子、c1-6烷基、被1-3個分別選自鹵代基、羥基、氰基、c1-3烷基、c3-5環(huán)烷基和c1-3烷氧基的基團取代的c1-6烷基；

r⁴、r⁵分別選自氫原子、氰基、氨基、鹵代基、c1-8烷基、c3-8環(huán)烷基、c1-8烷氧基、-nh-c1-3烷基；

r⁶選自氫原子、鹵代基、氰基、羥基、氨基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c1-6烷氧基；或者r⁶選自被1-3個選自鹵代基、c1-3烷基、c3-6環(huán)烷基的取代基所取代的氨基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基或c1-6烷氧基；

r⁷、r⁸分別選自未被取代或被1-3個r¹²取代的氫原子、c1-8烷基、c3-8環(huán)烷基；或者r⁷和r⁸連同它們連接的原子成環(huán)；

r⁹、r¹⁰分別選自氫原子、鹵代基、氰基、羥基、氨基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c1-6烷氧基；或者r⁹、r¹⁰分別選自被1-3個選自鹵代基、c1-3烷基、c3-6環(huán)烷基的取代基取代的氨基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基或c1-6烷氧基；

r¹¹選自氫原子、鹵代基、氰基、羥基、氨基、c1-6烷氧基、c3-6環(huán)烷基、氧代、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹²選自氫原子、氰基、羥基、氨基、c1-6烷氧基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c2-6脲基、c2-6氧代脲基、-s(o)2-c1-3烷基、-n(r¹⁶)s(o)2-c1-3烷基、-n(r¹⁶)c(o)-c1-3烷基；

r¹³選自氫原子、氰基、鹵代基、羥基、氨基、c1-6烷氧基、c3-6環(huán)烷基、-s(o)2-c1-3烷基、-c(o)-c1-3烷基、-c(o)o-c1-3烷基、氧代基、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹⁴、r¹⁵分別選自氫原子、c3-6環(huán)烷基、c1-6烷基、5-6元芳環(huán)、5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)、5-6元含有1-3個雜原子的雜環(huán)、被1-3個r²⁰取代的c3-6環(huán)烷基、被1-3個r²⁰取代的c1-6烷基、被1-3個r²⁰取代的5-6元芳環(huán)、被1-3個r²⁰取代的5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)、被1-3個r²⁰取代的5-6元含有1-3個雜原子的雜環(huán)；所述雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者r¹⁴和r¹⁵連同它們連接的n原子成環(huán)；

r¹⁶、r¹⁷、r¹⁸、r¹⁹分別選自氫原子、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r²⁰選自氫原子、氰基、羥基、氨基、c1-6烷氧基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、5-6元芳環(huán)、5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)，所述雜原子包括n、o和s中的一種或多種；

r²¹選自氫原子、或c1-6烷基。

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，

b選自氫原子、氰基、鹵代基、羥基、c1-8磺?；?、c1-8磺酰胺基、c1-8烷氧基、c1-8?；1-8酰胺基、c1-8氧代脲基、c1-8脲基、c1-8烷基、-nr⁷r⁸；或者b選自未被取代或被1-3個r⁹基團取代的苯環(huán)、未被取代或被1-3個r¹⁰基團取代的5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)、未被取代或被1-3個r¹¹基團取代的5-7元含有1-3個雜原子的飽和雜環(huán)，所述雜芳環(huán)和飽和雜環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；

r¹為氫原子；

r²、r³分別選自氫原子、c1-6烷基；

r⁴、r⁵分別選自氫原子、氰基、鹵代基、c1-8烷基；

r⁶選自氫原子、鹵代基、氰基、羥基、氨基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c1-6烷氧基；或者r⁶選自被1-3個選自鹵代基、c1-3烷基、c3-6環(huán)烷基的取代基所取代的氨基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基或c1-6烷氧基；

r⁷、r⁸分別選自氫原子、c3-8環(huán)烷基、未被取代或被1-3個r¹²取代的c1-8烷基；或者r⁷和r⁸連同它們連接的原子成環(huán)；

r⁹、r¹⁰分別選自氫原子、鹵代基、氰基、c1-6烷基、c1-6烷氧基；或者r⁹、r¹⁰分別選自被1-3個鹵代基取代的c1-6烷基或c1-6烷氧基；

r¹¹選自氫原子、氧代基、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹²選自氫原子、氰基、c1-6烷基、c1-6磺酰胺基；

r¹³選自氫原子、氰基、鹵代基、氧代基、c1-6烷氧基、c3-6環(huán)烷基、c1-6?；?、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹⁴、r¹⁵分別選自氫原子、c3-6環(huán)烷基、未被取代或被1-3個r²⁰取代的c1-6烷基；或者r¹⁴和r¹⁵連同它們連接的n原子成環(huán)；

r¹⁶、r¹⁷、r¹⁸、r¹⁹各自獨立地選自氫原子、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r²⁰選自氫原子、氰基、羥基、c1-6烷氧基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、5-6元芳環(huán)、5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)，所述雜原子包括n、o和s中的一種或多種；

r²¹選自氫原子、或c1-6烷基。

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，a為未被取代或被1-6個r⁶基團取代的下列基團中的一種：

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，b為下列基團中的一種：

其中，n為0、1或2中。

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，l為價鍵。

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，該3-氟吡啶雜環(huán)化合物，及其藥學上可接受的鹽，具有式ii所示的結構：

其中，x³為n、或cr²²；

y¹、y²、y³、y⁴各自獨立地選自n或cr⁶；

u為未被取代或被1-6個r¹³基團取代的6-12元芳環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-14元雜芳環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-7元雜環(huán)并苯環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-7元雜環(huán)并5-6元雜芳環(huán)、-or¹⁴或-nr¹⁴r¹⁵，所述雜環(huán)、雜芳環(huán)分別為含有1-4個雜原子的雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述雜環(huán)或雜芳環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者u為被5-6元芳環(huán)或雜芳環(huán)取代的c2-8烯基或c2-8炔基，所述雜環(huán)、雜芳環(huán)分別為含有1-4個雜原子的雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述雜環(huán)或雜芳環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者u為未被取代或被1-2個r¹³基團取代的其中x²為n或cr¹³；

l是價鍵；

r¹和r⁴為氫原子；

r²和r³各自獨立地為氫原子或c1-3烷基；

r⁵選自氫原子、鹵代基、氰基、c1-3烷基；

r⁶選自氫原子、鹵代基、氰基、羥基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c1-6烷氧基；或者r⁶選自被1-3個選自鹵代基、c1-3烷基、c3-6環(huán)烷基的取代基所取代的c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基或c1-6烷氧基；

r¹⁰選自氫原子、鹵代基、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹³選自氫原子、氰基、鹵代基、氧代基、c1-6烷氧基、c3-6環(huán)烷基、c1-6酰基、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹⁴、r¹⁵分別選自氫原子、c3-6環(huán)烷基、未被取代或被1-3個r²⁰取代的c1-6烷基；或者r¹⁴和r¹⁵連同它們連接的n原子成環(huán)；

r²⁰選自氫原子、氰基、羥基、c1-6烷氧基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、5-6元芳環(huán)、5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)，所述雜原子包括n、o和s中的一種或多種；

r²¹、r²²分別獨立選自氫原子或c1-6烷基。

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，該3-氟吡啶雜環(huán)化合物，及其藥學上可接受的鹽，具有式iii所示的結構：

其中：

y⁵、y⁶、y⁷、y⁸、y⁹、y¹⁰各自獨立地選自n或cr⁶；

b為氰基；

u為未被取代或被1-6個r¹³基團取代的6-12元芳環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-14元雜芳環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-7元雜環(huán)并苯環(huán)、未被取代或被1-6個r¹³基團取代的5-7元雜環(huán)并5-6元雜芳環(huán)、-or¹⁴或-nr¹⁴r¹⁵，所述雜環(huán)、雜芳環(huán)分別為含有1-4個雜原子的雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述雜環(huán)或雜芳環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者u為被5-6元芳環(huán)或雜芳環(huán)取代的c2-8烯基或c2-8炔基，所述雜環(huán)、雜芳環(huán)分別為含有1-4個雜原子的雜環(huán)或雜芳環(huán)，所述雜環(huán)或雜芳環(huán)的雜原子包括n、o和s中的一種或多種；或者u為未被取代或被1-2個r¹³基團取代的其中x²為n或cr¹³；

l是價鍵；

r¹和r⁴是氫原子；

r²和r³分別選自氫原子、甲基；

r⁵選自氫原子、鹵代基、氰基、c1-3烷基；

r⁶選自氫原子、鹵代基、氰基、羥基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c1-6烷氧基；或者r⁶選自被1-3個選自鹵代基、c1-3烷基、c3-6環(huán)烷基的取代基所取代的c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基或c1-6烷氧基；

r¹³選自氫原子、氰基、鹵代基、氧代基、c1-6烷氧基、c3-6環(huán)烷基、c1-6酰基、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹⁴、r¹⁵分別選自氫原子、c3-6環(huán)烷基、未被取代或被1-3個r²⁰取代的c1-6烷基；或者r¹⁴和r¹⁵連同它們連接的n原子成環(huán)；

r²⁰選自氫原子、氰基、羥基、c1-6烷氧基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、5-6元芳環(huán)、5-6元含有1-3個雜原子的雜芳環(huán)，所述雜原子包括n、o和s中的一種或多種；

r²¹為氫原子或c1-6烷基。

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，u為未被取代或被1-6個r¹³基團取代的下列基團中的一種：

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，該3-氟吡啶雜環(huán)化合物，及其藥學上可接受的鹽，具有式iv或式v所示的結構：

其中，x⁴、x⁵、x⁶、x⁷、x⁸、x⁹各自獨立選自n或cr¹³；

l是價鍵；

r¹和r⁴為氫原子；

r²和r³各自獨立地為氫原子或c1-3烷基；

r⁵選自氫原子、鹵代基、氰基、c1-3烷基；

r⁶選自氫原子、鹵代基、氰基、羥基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c1-6烷氧基；或者r⁶選自被1-3個選自鹵代基、c1-3烷基、c3-6環(huán)烷基的取代基所取代的c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基或c1-6烷氧基；

r¹⁰選自氫原子、鹵代基、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r¹³選自氫原子、氰基、鹵代基、c1-6烷氧基、c3-6環(huán)烷基、未被取代或被鹵代基取代的c1-6烷基；

r²³、r²⁴分別選自氫原子、c1-3烷基；或者r⁷和r⁸合并為氧代基；

r²⁵、r²⁶、r²⁷、r²⁸各自獨立選自氫原子或c1-3烷基。

上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物中，優(yōu)選的，該3-氟吡啶雜環(huán)化合物包括下列化合物中的一種或多種：

本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其包含治療有效量的上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物及其藥學上可接受的載體。

本發(fā)明還提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物的聯(lián)合應用組合物，該聯(lián)合應用組合物是權利要求1-11任一項所述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物及其藥學上可接受的鹽與抗腫瘤藥物、抗菌藥物、抗病毒藥物、抗寄生蟲病藥物、中樞神經系統(tǒng)系統(tǒng)藥物、抗骨質增生藥物、糖尿病藥物中的一種或幾種的組合進行聯(lián)合應用得到的組合物。

本發(fā)明還提供上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物在制備治療或預防wnt信號通路異常的藥物中的應用；所述治療或預防wnt信號通路異常的藥物包括治療乳腺癌、肺癌、膀胱癌、胰腺癌、肝癌、頭頸鱗狀上皮癌、甲狀腺癌、肉瘤、骨肉瘤、硬纖維瘤、黑色素瘤、前列腺癌、結腸直腸癌、卵巢癌、宮頸癌、食管癌、胃癌、骨髓瘤、淋巴瘤、套細胞淋巴瘤、皮膚t細胞淋巴瘤、慢性和非進行性貧血、自發(fā)性或原發(fā)性血小板增多癥、特發(fā)性骨髓纖維化、肺纖維化、腎臟纖維化、肝纖維化、肝硬化、糖尿病性視網膜病、巨球蛋白血癥、白血病、急性白血病、慢性白血病、淋巴性白血病、髓性白血病、骨髓增生異常綜合癥、骨髓增殖性病癥、腦瘤、星形細胞瘤、髓母細胞瘤、許旺細胞瘤、原發(fā)性神經外胚瘤、垂體瘤、以及寄生蟲病、血吸蟲病和瘧疾中的一種病癥或幾種病癥的組合的藥物及藥物組合物。

上述的藥物組合物是指以上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物及其藥學上可接受的鹽或載體作為組分的組合物，或者是上述的3-氟吡啶雜環(huán)化合物及其藥學上可接受的鹽與抗腫瘤藥物、抗菌藥物、抗病毒藥物、抗寄生蟲病藥物、中樞神經系統(tǒng)系統(tǒng)藥物、抗骨質增生藥物、糖尿病藥物中的一種或幾種的組合進行聯(lián)合應用得到的組合物。

本發(fā)明的突出效果為：

本發(fā)明的3-氟吡啶雜環(huán)化合物能夠有效拮抗wnt信號通路，從而能夠用于治療或預防因wnt信號通路失常引起的病癥。

附圖說明

圖1是實施例25中3-氟吡啶雜環(huán)化合物b4的細胞抑制測試結果曲線圖；

圖2是實施例25中3-氟吡啶雜環(huán)化合物b7的細胞抑制測試結果曲線圖。

具體實施方式

為了對本發(fā)明的技術特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，現(xiàn)對本發(fā)明的技術方案進行以下詳細說明，但不能理解為對本發(fā)明的可實施范圍的限定。下述實施例中所述實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所述試劑和材料，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑獲得。

下述的實施例中，所用溶劑和藥品均為分析純或化學純；溶劑在使用前均經過重新蒸餾；無水溶劑均按照標準方法或文獻方法進行處理。柱層析硅膠(100-200目)和薄層層析硅膠(gf254)為青島海洋化工廠和煙臺化工廠產品；如未特別說明，均采用石油醚(60-90℃)/乙酸乙酯(v/v)作為洗脫劑；顯色劑用碘或磷鉬酸的乙醇溶液；所有萃取溶劑未經說明均用無水na2so4干燥。¹hnmr用varian-400型核磁共振儀記錄，tms為內標。lc-ms用美國agilent公司1100型高效液相色譜-離子阱質譜聯(lián)用儀(lc-msdtrap)記錄，二極管陣列檢測器(dad)，檢測波長214nm和254nm，離子阱質譜(esi源)。hplc柱為ageladurashellc18(4.6×50mm，3.5μm)；流動相為0.1％nh4hco3水溶液：乙腈(5分鐘內從5：95到95：5)；流速為1.8ml/min。

實施例1

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物及其合成方法。

(1)雜環(huán)化合物b1，其是由如下方法合成的：

1)中間體b1-2的合成:

50ml的兩口燒瓶，加入無水四氫呋喃20ml，氮氣保護，冷卻至-78℃，加入2.5n的lda四氫呋喃溶液(4.4ml,11mmol)，慢慢加入b1-1(1.15g,10mmol)。-78℃下攪拌1h，然后慢慢加入硼酸三異丙酯(2.82g,15mmol)。加完再在-78℃攪拌1.5h,慢慢升至室溫。2n氫氧化鈉水溶液5ml加入，攪拌10分鐘。分層，水相調ph為5，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗一次，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得白色固體(700mg,44％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.86(s,2h),7.99(d,j＝4.4hz,1h),7.43(m,1h)。

2)中間體b1-3的合成：

將b1-2(690mg,4.34mmol)和6-溴喹啉(749mg,3.61mmol)溶于35ml二氧六環(huán)和7ml水，加入碳酸鉀(1.25g,9.03mmol)和四三苯基磷鈀(161mg,0.14mmol)。置換氮氣，在100℃下攪拌反應8h。冷卻至室溫，加入10ml水，乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗。有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮。剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1-5:1)，得到白色固體(95mg，9％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.02(d,j＝4.0hz,1h),8.26(m,j＝4.4hz,2h),8.12(s,1h),8.08(d,j＝5.2hz,1h),7.93(m,1h),7.51(m,j＝4.0hz,1h),7.41(m,1h)。

3)中間體b1-4的合成：

將b1-3(70mg,0.29mmol)和對溴芐胺(107mg,0.58mmol)溶于2ml二甲基亞砜,加入碳酸鉀(80mg,0.58mmol)，加熱到120℃反應8h。待冷卻至室溫，水2ml加入，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗。有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮除去溶劑。剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1-5:1)，得到棕色固體(70mg,59％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.97(d,j＝2.8hz,1h),8.21(m,2h),8.05(s,1h),7.99(d,j＝5.2hz,1h),7.92(d,j＝8.8hz,1h),7.47(m,3h),7.30(d,j＝8.2hz,2h),6.78(m,1h),5.08(s,1h),4.72(d,j＝5.7hz,2h)。

4)產物b1的合成：

將中間體b1-4(50mg,0.12mmol)溶于3ml二氧六環(huán)和0.6ml水，加入2-甲基吡啶-4-頻哪醇硼酸酯(54mg,0.18mmol)，1,1'-二(二苯膦基)二茂鐵二氯化鈀(ii)(10mg,0.012mmol)，碳酸鈉(33mg,0.31mmol)。氮氣置換，100℃下反應8h。冷卻至室溫，加入10ml水，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機相經無水硫酸鈉干燥，濃縮除去溶劑。剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1)得到白色固體(18mg,35％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b1。

實施例2

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b2，其是由如下方法合成的：

1)中間體b2-2的合成：

將化合物b2-1(5g，34.3mmol)溶于乙腈(100ml)，加入nbs(18.3g，103mmol)和過氧化苯甲酰(829mg，3.43mmol)，回流過夜，冷卻到常溫，加入水(200ml)，乙酸乙酯(200ml×3)萃取，有機相用飽和食鹽水(300ml×3)洗，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝100:1)，得到黃色油狀物(7.45g，97％)。¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.23(d，j＝1.2hz，1h)，7.56-7.53(m，1h)，4.45(s，2h)。

2)中間體b2-3的合成：

將中間體b2-2(7.45g，33.1mmol)溶于dmf(50ml)，在冰浴下加入nan3(8.61g，132mmol)，50℃攪拌過夜，冷卻到常溫，加入水(100ml)，乙酸乙酯(100ml×3)萃取，有機相用飽和食鹽水(200ml×3)洗，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝50:1)，得到無色油狀物(5.6g，90％)。¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.19(s，1h)，7.50(d，j＝8.0hz，1h)，4.45(s，2h)。

3)中間體b2-4的合成：

將中間體b2-3(5.6g，29.9mmol)溶于四氫呋喃(50ml)，冰浴攪拌下分批加入pph3(8.6g，32.9mmol)，加熱回流，緩慢滴加水(10ml)，回流攪拌8小時，冷卻到常溫，乙酸乙酯(100ml)稀釋，用0.2m的鹽酸(100ml×2)萃取，水相用乙酸乙酯(100ml)洗一次，然后水相用2m的naoh水溶液把ph調節(jié)到9，乙酸乙酯(200ml×3)萃取，得到的有機相用無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(二氯甲烷:甲醇＝50:1)，得到棕色油狀物(2.57g，53％)。¹hnmr(400mhz，dmso)δ8.23(s，1h)，7.89(d，j＝9.6hz，1h)，3.75(s，2h)。

4)中間體b2-5的合成：

將中間體b2-4(2.36g，14.6mmol)溶于二氧六環(huán)/水(50ml/10ml)，加入2-甲基吡啶-4-頻哪醇硼酸酯(1.7g，16.1mmol)，碳酸鉀(8.09g，58.6mmol)，四三苯基磷鈀(847mg，0.73mmol)，氮氣置換，100℃攪拌過夜，冷卻到常溫，加入水(100ml)，二氯甲烷(100ml×6)萃取，有機相用無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(二氯甲烷:甲醇＝50:1-20:1加氨水)，得到棕色固體(2.5g，79％)。¹hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.61(d，j＝4.8hz，1h)，8.50(s，1h)，7.77(s，1h)，7.69(d，j＝4.0hz，1h)，7.58(d，j＝12.0hz，1h)，4.01(s，2h)，2.65(s，3h)。

5)產物b2的合成：

將b1-3(55mg,0.23mmol)和b2-5(59mg,0.27mmol)溶于2ml二甲基亞砜，加入碳酸鉀(63mg,0.45mmol)，加熱到120℃反應8h。待冷卻至室溫，加入2ml水，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1-1:1)，得棕色固體(30mg,30％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b2。

實施例3

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b3，其是由如下方法合成的：

1)中間體b3-2的合成：

將化合物b3-1(5g，25.4mmol)溶于乙腈(100ml)，加入nbs(6.8g，38mmol)和過氧化苯甲酰(100mg，0.41mmol)，回流過夜，然后補加過氧化苯甲酰(50mg，0.21mmol)，再回流12h。冷卻到常溫，濃縮蒸除溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝100:1-50:1)，得到固體(4.3g,61％)。

2)中間體b3-3的合成：

將中間體b3-2(2.3g,8.2mmol)溶于dmso(40ml)，在冰浴下加入nan3(637mg，9.8mmol)，常溫下攪拌30分鐘，加入水(100ml)，乙酸乙酯(100ml×3)萃取，有機相用飽和食鹽水(50ml×3)洗，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，得到白色固體(940mg,48％)，直接用于下一步反應。

3)中間體b3-4的合成：

將中間體b3-3(940mg,3.95mmol)溶于四氫呋喃(15ml)，冰浴攪拌下分批加入pph3(1.14g,4.34mmol)，然后緩慢滴加水(3ml)，加熱回流，攪拌過夜。待冷卻至室溫，乙酸乙酯(100ml)稀釋，用0.2m的鹽酸(20ml×2)萃取。水相合并，用乙酸乙酯(20ml)洗一次，然后水相用飽和碳酸鈉水溶液把ph調節(jié)到9，二氯甲烷(40ml×5)萃取，得到的有機相用飽和氯化鈉水溶液洗，經無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得到固體(570mg,68％),直接用于下一步反應。

4)中間體b3-5的合成：

將中間體b3-4(570mg,2.69mmol)溶于二氧六環(huán)/水(15ml/3ml)，加入2-甲基吡啶-4-頻哪醇硼酸酯(45％,1.43g,2.96mmol)，碳酸鉀(1.12g,8.07mmol)和四(三苯基磷)鈀(310mg,0.27mmol)，氮氣置換，100℃反應8h。待冷卻到常溫，反應液經硅藻土過濾，水(10ml)加入，乙酸乙酯(50ml×3)萃取。有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1-1:1)，得到灰色固體(570mg,95％)。

5)產物b3的合成：

將b1-3(50mg,0.21mmol)和b3-5(56mg,0.25mmol)溶于1ml二甲基亞砜，加入碳酸鉀(57mg,0.41mmol)，加熱到135℃反應12h。待冷卻至室溫，加入2ml水，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1-1:1)，得白色固體(20mg,23％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b3。

實施例4

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b4，其是由如下方法合成的：

1)中間體b4-2的合成：

將化合物b4-1(3g，23.4mmol)溶于乙腈(60ml)，加入nbs(5g，28mmol)和過氧化苯甲酰(57mg，0.23mmol)，回流18h，然后補加過氧化苯甲酰(28mg，0.12mmol)，再回流12h。冷卻到常溫，減壓濃縮，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝100:1-50:1)，得到固體(2.45g,51％)。

2)中間體b4-3的合成：

將中間體b4-2(2.9g,14mmol)溶于dmso(58ml)，在冰浴下加入nan3(1g，15mmol)，常溫下攪拌30分鐘，加入水(100ml)，乙酸乙酯(100ml×3)萃取，有機相用飽和食鹽水(100ml×3)洗，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，減壓蒸除溶劑，得到白色固體(2.2g,90％),直接用于下一步反應。

3)中間體b4-4的合成：

將中間體b4-3(2.2g,13mmol)溶于四氫呋喃(50ml)，冰浴攪拌下分批加入三苯基磷(3.8g,14mmol)，然后緩慢滴加水(10ml)，氮氣氣氛下加熱回流，攪拌過夜。待冷卻至室溫，乙酸乙酯(100ml)稀釋，用0.2m的鹽酸(20ml×2)萃取。水相合并，用乙酸乙酯(20ml)洗一次，然后水相用飽和碳酸鈉水溶液把ph調節(jié)到9，二氯甲烷(80ml×5)萃取，得到的有機相用飽和氯化鈉水溶液洗，經無水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得到固體(1.4g,75％),直接用于下一步反應。

4)中間體b4-5的合成：

將中間體b4-4(1g,7mmol)溶于二氧六環(huán)/水(30ml/6ml)，加入2-甲基吡啶-4-頻哪醇硼酸酯(45％,3.7g,7.7mmol)，碳酸鉀(2.9g,21mmol)和四(三苯基磷)鈀(809mg,0.7mmol)，氮氣置換，100℃反應8h。待冷卻到常溫，反應液經硅藻土過濾，水(10ml)加入，乙酸乙酯(50ml×3)萃取。有機相合并，用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1-1:1)，得到灰色固體(1.3g,93％)。

5)產物b4的合成：

將b1-3(50mg,0.21mmol)和b4-5(50mg,0.25mmol)溶于1ml二甲基亞砜，加入碳酸鉀(57mg,0.41mmol)，加熱到135℃反應12h。待冷卻至室溫，加入2ml水，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1-1:1)，得白色固體(18mg,20％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b4。

實施例5

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b5，其是由如下方法合成的：

將b1-3(80mg,0.33mmol)和b5-1(80mg,0.4mmol)溶于2ml二甲基亞砜，加入碳酸鉀(91mg,0.66mmol)，加熱到135℃反應12h。待冷卻至室溫，加入20ml水，用乙酸乙酯萃取三次。合并有機相，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝2:1-1:1)，得白色固體(50mg,30％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b5。

實施例6

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b6，其是由如下方法合成的：

將b1-2(84mg,0.35mmol)和b5-1(90mg,0.42mmol)溶于2ml二甲基亞砜，加入碳酸鉀(98mg,0.7mmol)，加熱到135℃反應18h。待冷卻至室溫，加入30ml水，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取。合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析純化(二氯甲烷：甲醇＝30:1)，得淺黃色固體(21mg,14％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b6。

實施例7

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b7，其是由如下方法合成的：

1)中間體b7-2的合成：

將b7-1(167mg,0.6mmol)和2,3-二氟吡啶-4-硼酸(105mg,0.66mmol)溶于二氧六環(huán)(4ml)和水(1ml)中，加入pd(dppf)cl2(39mg,0.048mmol)、dppf(26mg,0.048mmol)和磷酸鉀(254mg,1.2mmol)。氮氣保護下，用氮氣置換五次，加熱至100℃，反應12小時。冷卻至室溫后，減壓濃縮后經柱層析得白色固體(80mg,47％)。

2)產物b7的合成：

將b7-2(78mg,0.32mmol)和k2co3(88mg,0.64mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b2-5(104mg,0.48mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得黃色固體(15mg,11％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b7。

實施例8

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b8，其是由如下方法合成的：

將b1-3(121mg,0.5mmol)和k2co3(138mg,1.0mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b8-1(120mg,0.65mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得黃色固體(15mg,7％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b8。

實施例9

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b9，其是由如下方法合成的：

將b1-3(121mg,0.5mmol)和k2co3(138mg,1.0mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b9-1(112mg,0.65mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(20mg,10％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b9。

實施例10

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b10，其是由如下方法合成的：

1)中間體b10-2的合成：

將b10-1(2.5g,16.3mmol)溶于四氫呋喃/水(50ml/50ml)，加入碳酸鈉(5.2g,49mmol)，碘(11g,41mmol)，常溫攪拌4小時，加入水(50ml)，乙酸乙酯萃取(100ml*3)，有機相用硫代硫酸鈉溶液洗至顏色明顯退去，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，得到灰白色固體(4.1g,90％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,dmso)δ11.41(s,1h),8.33(d,j＝1.6hz,1h),7.53(d,j＝2.0hz,1h),3.86(s,3h)。

2)中間體b10-3的合成：

將b10-2(2.7g,9.6mmol)溶于dmf(50ml)，加入碳酸鉀(2.0g,14.5mmol)，碘甲烷(1.65g,11.6mmol)，常溫攪拌過夜。倒入水中(100ml)，乙酸乙酯(100ml*3)萃取，有機相用飽和食鹽水洗(150ml*6)，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝20:1)得到白色固體(1.88g,66％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.58(s,1h),7.53(s,1h),3.97(s,3h),3.96(s,3h)。

3)中間體b10-4的合成：

將硼氫化鈉(1.65g,43.3mmol)溶于乙醇(100ml)，將b10-3(2.54g,8.67mmol)溶于乙醇(30ml)在冰浴攪拌下滴加到上述溶液中，滴畢常溫攪拌20小時。減壓蒸餾除去大部分乙醇，加入水(100ml)，二氯甲烷萃取(100ml*3)，有機相用無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，得到無色油狀物(2.0g,87％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.18(d,j＝2.0hz,1h),8.13(s,1h),7.94(s,1h),7.09(s,1h),4.71(s,2h),3.92(s,3h)。

4)中間體b10-5的合成：

將b10-4(2.0g,7.55mmol)溶于二氯甲烷(40ml)，加入三乙胺(3.05g,30.2mmol)，常溫攪拌下緩慢滴加甲基磺酰氯(1.72g,15.1mmol)，常溫攪拌過夜。飽和食鹽水洗(50ml*2)，有機相用無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，得到黃色油狀物(1.9g,89％)。

5)中間體b10-6的合成：

將b10-5(1.9g,6.71mmol)溶于dmso(40ml)，加入疊氮化鈉(873mg,13.4mmol)，常溫攪拌8小時，加入水(50ml)，乙酸乙酯(50ml*3)萃取，有機相用飽和食鹽水洗(100ml*3)，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物過柱子(石油醚：乙酸乙酯＝10:1)得淺黃色油狀物(1.35g,69％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.96(d,j＝1.6hz,1h),6.96(d,j＝1.6hz,1h),4.38(s,2h),3.94(s,3h)。

6)中間體b10-7的合成：

將b10-6(1.35g,4.66mmol)溶于thf(20ml)，攪拌下緩慢加入三苯基膦(1.34g,5.12mmol)，加完加熱回流，加入水(2ml)，回流攪拌8小時，冷卻到常溫，加入乙酸乙酯(40ml)稀釋，用0.2m鹽酸(50ml)萃取，水相用乙酸乙酯(50ml)洗一次，氫氧化鈉固體調ph到10左右，二氯甲烷(50ml*6)萃取，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，得到淺黃色油狀物(1.18g,96％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(s,1h),7.07(s,1h),3.92(s,3h),3.89(s,2h)。

7)中間體b10-8的合成：

將b10-7(1.12g,4.24mmol)，中間體11(1.51g,50％,5.52mmol)溶于二氧六環(huán)/水(20ml/4ml)，加入碳酸鉀(2.34g,17.0mmol)、四三苯基膦鈀(245mg,0.212mmol)、氮氣置換，回流攪拌過夜。冷卻到常溫，用硅藻土抽濾，濾液用乙酸乙酯(100ml)稀釋后棄去水層，有機相用無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物過柱子(二氯甲烷：甲醇＝100:1到50:1)得到棕色油狀物(730mg,75％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.55(d,j＝5.2hz,1h),8.27(s,1h),7.71(s,1h),7.67(d,j＝5.2hz,1h),7.38(s,1h),3.99(s,2h),3.93(s,3h),2.62(s,3h)。

8)產物b10的合成：

將b1-3(104mg,0.43mmol)和k2co3(119mg,0.86mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b10-8(100mg,0.43mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得淺黃色固體(45mg,23％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b10。

實施例11

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b11，其是由如下方法合成的：

將b1-3(121mg,0.5mmol)和k2co3(138mg,1.0mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b11-1(122mg,0.65mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(30mg,14％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b11。

(12)雜環(huán)化合物b12，其是由如下方法合成的：

1)中間體b12-2的合成：

將b12-1(164mg,1.0mmol)和2,3-二氟吡啶-4-硼酸(175mg,1.1mmol)溶于二氧六環(huán)(4ml)和水(1ml)中，加入pd(dppf)cl2(65mg,0.08mmol)、dppf(44mg,0.08mmol)和磷酸鉀(424mg,2.0mmol)。氮氣保護下，用氮氣置換五次，加熱至100℃，反應12小時。冷卻至室溫后，減壓濃縮后經柱層析得白色固體(130mg,53％)。

2)產物b12的合成：

將b12-2(10mg,0.04mmol)和dipea(41mg,0.32mmol)溶于nmp(2ml)中，加入b2-5(17mg,0.08mmol)。氮氣保護下，加熱至130℃，反應24小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝20:1)得淺黃色固體(5mg,28％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b12。

實施例13

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b13，其是由如下方法合成的：

1)中間體b13-2的合成：

將b13-1(3.5g,15.7mmol)溶于dmf(15ml)，加入氰化鋅(3.7g,36.4mmol)和pd(pph3)4(1.8g,0.157mmol)，置換氮氣，120℃攪拌過夜，冷卻至室溫，加硅藻土過濾，濾液加200ml乙酸乙酯稀釋，飽和食鹽水洗，乙酸乙酯相用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝5:1-2:1)，得白色固體(2.3g,86％)。

2)中間體b13-3的合成：

將b13-2(2.3g,13.6mmol)溶于乙腈(50ml)，加入nbs(2.92g,16.4mmol)和過氧苯甲酰(331mg,0.14mmol)，攪拌回流過夜。待冷卻到常溫，加入100ml乙酸乙酯和100ml水分層，水相用乙酸乙酯萃取三次，有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1-5:1)，得到白色固體(2.5g,74.2％)。

3)中間體b13-4的合成：

將b13-3(2.5g,10mmol)溶于dmso(50ml)，加入nan3(986mg,15mmol)，50℃攪拌反應1h。冷卻到常溫，加入100ml乙酸乙酯和100ml水分層，水相用乙酸乙酯萃取三次，有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1-5:1)，得到淡黃色固體(2g,94％)。

4)中間體b13-5的合成：

將b13-4(2g,9.5mmol)溶于四氫呋喃(90ml),加入三苯基膦(2.77g,10.5mmol)，回流攪拌5min，再加入9ml水，繼續(xù)回流攪拌1h。加入100ml乙酸乙酯和100ml1nhcl分層。水相加入氨水調堿性，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到紫色粗品(890mg,51％)。

5)產物b13的合成：

將b13-5(90mg,0.49mmol)溶于nmp(1.5ml)，加入b1-3(100mg,0.41mmol)，dipea(420mg,3.3mmol)，120℃攪拌過夜。冷卻到常溫，加入50ml乙酸乙酯和50ml水分層，水相用乙酸乙酯萃取三次。有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(二氯甲烷:甲醇＝100:1-20:1)，得到淡黃色固體(18mg,9％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b13。

實施例14

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b14，其是由如下方法合成的：

1)中間體b14-2的合成：

將b14-1(209mg,1.0mmol)和2,3-二氟吡啶-4-硼酸(175mg,1.1mmol)溶于二氧六環(huán)(4ml)和水(1ml)中，加入pd(dppf)cl2(65mg,0.08mmol)、dppf(44mg,0.08mmol)和磷酸鉀(424mg,2.0mmol)。氮氣保護下，用氮氣置換五次，加熱至100℃，反應12小時。冷卻至室溫后，減壓濃縮后經柱層析得白色固體(100mg,41％)。

2)產物b14的合成：

將b14-2(40mg,0.17mmol)和dipea(170mg,1.32mmol)溶于nmp(2ml)中，加入b2-5(54mg,0.25mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得紅色固體(20mg,28％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b14。

實施例15

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b15，其是由如下方法合成的：

1)中間體b15-2的合成：

將b15-1(1.0g,7.2mmol)溶于dmf(20ml),加入硫代嗎啉(890mg,8.63mmol)，二異丙基乙基胺(1.9g,14mmol),40℃反應過夜，冷卻到常溫，加入水(100ml)，有固體析出，抽濾并干燥得到灰白色固體(1.36g,92％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.41(s,1h),7.62(d,j＝8.8hz,1h),6.59(d,j＝8.8hz,1h),4.05(s,4h),2.67(s,4h)。

2)中間體b15-3的合成：

將中間體b15-2(1.1g,5.4mmol)溶于二氯甲烷(50ml),冰浴攪拌下緩慢分批加入mcpba(2.18g,85％,10.7mmol),0℃繼續(xù)反應2小時。飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)加入,再攪拌30分鐘，分出有機相。水相再用二氯甲烷萃取(20ml)。合并有機相，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑得到白色固體(1.28g,100％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.48(s,1h),7.75(dd,j＝8.8,1.6hz,1h),6.77(d,j＝8.8hz,1h),4.25(s,4h),3.08(t,j＝4.6hz,4h)。

3)中間體b15-4的合成：

將中間體b15-3(600mg,2.53mmol)溶于thf/meoh(15ml/9ml),加入雷尼鎳(300mg),氨水(3ml),35℃反應4小時，用硅藻土抽濾，旋干溶劑，得到淺綠色固體(630mg,100％)。

4)產物b15的合成：

將b1-3(97mg,0.4mmol)和k2co3(110mg,0.8mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b15-4(96mg,0.4mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(35mg,19％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b15。

實施例16

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b16，其是由如下方法合成的：

1)中間體b16-2的合成：

將6-氯-3-氰基吡啶(1.5g,10.8mmol)溶于dmf(50ml),加入b16-1(2.59g,16.2mmol)，dipea(2.79g,21.6mmol)，100℃反應過夜。冷卻到常溫，水(100ml)加入,乙酸乙酯萃取(100ml*3),有機相用飽和食鹽水洗(200ml*6)，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝5:1-1:2)，得到灰白色固體(700mg,29％)。圖譜數(shù)據(jù)如下：¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.39(s,1h),7.58(dd,j＝8.8,1.6hz,1h),6.48(d,j＝8.8hz,1h),5.58(s,1h),4.05-4.01(m,2h),3.37(t,j＝5.8hz,2h),2.98(s,3h)。

2)中間體b16-3的合成：

將b16-2(660mg,2.93mmol)溶于thf/meoh(15ml/9ml),加入雷尼鎳(300mg),氨水(3ml),35℃反應4小時，用硅藻土抽濾，旋干溶劑，得到淺綠色油狀物(680mg,100％)。

3)產物b16的合成：

將b1-3(97mg,0.4mmol)和k2co3(110mg,0.8mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b16-3(91mg,0.4mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(53mg,29％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b16。

實施例17

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b17，其是由如下方法合成的：

將b1-3(97mg,0.4mmol)和k2co3(110mg,0.8mmol)溶于dmso(2ml)中，加入b17-1(82mg,0.4mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(20mg,12％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物

實施例18

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b18，其是由如下方法合成的：

1)中間體b18-2的合成：

將b18-1(200mg,1.0mmol)和b1-2(238mg,1.5mmol)溶于二氧六環(huán)(4ml)和水(1ml)中，加入pd(dppf)cl2(65mg,0.08mmol)、dppf(44mg,0.08mmol)和磷酸鉀(424mg,2.0mmol)。氮氣保護下，用氮氣置換五次，加熱至100℃，反應12小時。冷卻至室溫后，減壓濃縮后經柱層析得白色固體(135mg,58％)。

2)產物b18的合成：

將b18-2(50mg,0.21mmol)和dipea(217mg,1.68mmol)溶于nmp(2ml)中，加入b2-5(69mg,0.32mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得黃色固體(40mg,44％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b18。

實施例19

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b19，其是由如下方法合成的：

1)中間體b19-2的合成：

將b19-1(264mg,1.5mmol)和b1-2(358mg,2.25mmol)溶于二氧六環(huán)(8ml)和水(2ml)中，加入pd(dppf)cl2(55mg,0.075mmol)、dppf(42mg,0.075mmol)和磷酸鉀(798mg,3.0mmol)。氮氣保護下，用氮氣置換五次，加熱至100℃，反應12小時。冷卻至室溫后，減壓濃縮后經柱層析得白色固體(72mg,23％)。

2)產物b19的合成：

將b19-2(44mg,0.21mmol)和dipea(217mg,1.68mmol)溶于nmp(2ml)中，加入b2-5(69mg,0.32mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(50mg,59％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b19。

實施例20

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b20，其是由如下方法合成的：

1)中間體b20-2的合成：

將b20-1(288mg,1.5mmol)和b1-2(358mg,2.25mmol)溶于二氧六環(huán)(8ml)和水(2ml)中，加入pd(dppf)cl2(55mg,0.075mmol)、dppf(42mg,0.075mmol)和磷酸鉀(798mg,3.0mmol)。氮氣保護下，用氮氣置換五次，加熱至100℃，反應12小時。冷卻至室溫后，減壓濃縮后經柱層析得白色固體(90mg,26％)。

2)產物b20的合成：

將b20-2(47mg,0.21mmol)和dipea(217mg,1.68mmol)溶于nmp(2ml)中，加入b2-5(69mg,0.32mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(55mg,62％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b20。

實施例21

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b21，其是由如下方法合成的：

1)中間體b21-2的合成：

將nah(2.4g,60％,60mmol)置于100ml燒瓶中，加入干燥thf(40ml)，冰浴下加入b21-1(2.6g,15mmol)，反應1小時，加入碘甲烷，升至常溫反應3小時，加入飽和氯化銨溶液(40ml)，用二氯甲烷萃取(50ml*3)，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(石油醚：乙酸乙酯＝1:2)得黃色固體(2.5g,89％)。

2)中間體b21-3的合成：

將b21-2(199mg,1.0mmol)和b1-2(191mg,1.2mmol)溶于二氧六環(huán)(8ml)和水(2ml)中，加入pd(dppf)cl2(37mg,0.05mmol)、dppf(28mg,0.05mmol)和磷酸鉀(532mg,2.0mmol)。氮氣保護下，用氮氣置換五次，加熱至100℃，反應12小時。冷卻至室溫后，減壓濃縮后經柱層析得白色固體(30mg,14％)。

3)產物b21的合成：

將b21-3(30mg,0.135mmol)和dipea(139mg,1.08mmol)溶于nmp(1ml)中，加入b2-5(44mg,0.202mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得白色固體(15mg,27％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b21。

實施例22

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b22，其是由如下方法合成的：

1)中間體b22-2的合成：

向500ml的圓底燒瓶中加入dmf(6.1g,83.5mmol)，冰浴下滴加pocl3(36g,235mmol)，攪拌5分鐘后加入化合物b22-1，回流攪拌1h。冷卻到常溫，反應液倒入冰水中，攪拌五分鐘后濾出固體。固體用甲苯除水，剩余物經柱層析純化(石油醚：二氯甲烷＝1：1)得白色固體(5.1g,74％)。

2)中間體b22-3的合成：

將中間體b22-2(5.1g,25mmol)溶于四氫呋喃(150ml)，加入碘單質(7.6g,30mmol)nh4oh(125ml)，常溫攪拌過夜。加入硫代硫酸鈉固體攪拌30min，旋掉部分四氫呋喃，用乙酸乙酯(200ml*3)萃取。合并乙酸乙酯相，經無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得黃色固體(4.25g,84％)。

3)中間體b22-4的合成：

將中間體b22-3(2g,9.8mmol)溶于dmf(30ml),加入pd(pph3)4(1.14g,0.98mmol),三乙胺(16g,158mmol)，甲酸(2.45g,53.3mmol)，110℃攪拌2h。冷卻到常溫，加硅藻土過濾。濾液加100ml乙酸乙酯稀釋，用100ml飽和食鹽水洗。乙酸乙酯相干燥旋干，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1)得到白色固體(1.5g,91％)。

4)中間體b22-5的合成：

將中間體b22-4(1.5g,8.9mmol)溶于乙腈(50ml)，加入nbs(2.06g,11.57mmol)，過氧苯甲酰(216mg,0.89mmol)，攪拌回流過夜。冷卻到常溫，加100ml乙酸乙酯和100ml水萃取。乙酸乙酯相干燥旋干，剩余物經柱層析純化(石油醚:二氯甲烷＝2:3)得到白色固體(743mg,34％)。

5)中間體b22-6的合成：

將中間體b22-5(743mg,3mmol)溶于dmso(15ml)，加入nan3(293mg,4.5mmol)，50℃攪拌1h。冷卻到常溫，加75ml乙酸乙酯和75ml水萃取。乙酸乙酯相干燥旋干，剩余物經柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝10:1-5:1)得到白色固體(392mg,62％)。

6)中間體b22-7的合成：

將中間體b22-6(392mg,1.87mmol)溶于thf(10ml),加入pph3(541mg,2.1mmol),回流攪拌5min，加入1ml水，繼續(xù)回流攪拌1h，加乙酸乙酯和1nhcl分層。水相加入氨水調成堿性，加入100ml乙酸乙酯萃取，合并乙酸乙酯相，減壓濃縮得到粗品(340mg,99％)，為淡黃色固體。

7)產物b22的合成：

將中間體b22-7(62mg,est.0.34mmol)溶于dmso(1.5ml)，加入b1-3(51mg,0.21mmol)，k2co3(58mg,0.42mmol)，135℃攪拌過夜，冷卻到常溫，加入50ml乙酸乙酯和50ml水萃取，乙酸乙酯相干燥旋干，固體柱層析(二氯甲烷:甲醇＝100:1到20:1)，得到紅色固體(4mg,5％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b22。

實施例23

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b23，其是由如下方法合成的：

1)中間體b23-2的合成：

將b23-1(2g,9.1mmol)溶于dmf(15ml)，加入氰化鋅(2.1g,18.0mmol)和pd(pph3)4(1.1g,0.09mmol)，置換氮氣，120℃攪拌過夜，冷卻至室溫，加硅藻土過濾，濾液加200ml乙酸乙酯稀釋，飽和食鹽水洗，乙酸乙酯相用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝4:1)，得白色固體(1.5g,98％)。

2)中間體b23-3的合成：

將b23-2(1.5g,8.9mmol)溶于乙腈(80ml)，加入nbs(1.9g,17.8mmol)和過氧苯甲酰(216mg,0.9mmol)，攪拌回流過夜。待冷卻到常溫，加入100ml乙酸乙酯和100ml水分層，水相用乙酸乙酯萃取三次，有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(二氯甲烷:石油醚＝8:1)，得到白淡黃色固體(1g,45％)。

3)中間體b23-4的合成：

將b23-4(1g,4.1mmol)溶于dmso(20ml)，加入nan3(395mg,6.2mmol)，50℃攪拌反應1h。冷卻到常溫，加入100ml乙酸乙酯和100ml水分層，水相用乙酸乙酯萃取三次，有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1-5:1)，得到棕黃色固體(800mg,93％)。

4)中間體b23-5的合成：

將b23-4(800mg,3.8mmol)溶于四氫呋喃(20ml),加入三苯基膦(1.1g,4.2mmol)，回流攪拌5min，再加入2ml水，繼續(xù)回流攪拌1h。加入100ml乙酸乙酯和100ml1nhcl分層。水相加入氨水調堿性，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，得到淡黃色粗品(400mg,56％)。

5)產物b23的合成：

將b23-5(56mg,0.31mmol)溶于nmp(1.5ml)，加入b1-3(50mg,0.21mmol)，dipea(212mg,1.6mmol)，120℃攪拌過夜。冷卻到常溫，加入50ml乙酸乙酯和50ml水分層，水相用乙酸乙酯萃取三次。有機相合并，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮，經柱層析純化(二氯甲烷:甲醇＝100:1-20:1)，得到淡綠色固體(4mg,3.2％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b23。

實施例24

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b24，其是由如下方法合成的：

1)中間體b24-2的合成：

將乙二胺(14.5ml,216mmol)加入到b24-1(1g,7.2mmol)中，常溫攪拌2小時。碳酸鉀(4g,28.8mmol)加入，繼續(xù)攪拌1小時。抽濾濾除固體，濾液減壓濃縮。然后加入dmf，再減壓濃縮，重復兩次，至完全除去剩余的乙二胺，得褐色油狀液體(1.2g，粗品)，直接用于下一步。

2)產物b24的合成：

將中間體b24-2(40mg,0.24mmol)溶于nmp(1.5ml)，加入b1-2(50mg,0.21mmol)，dipea(215mg,1.64mmol)，135℃攪拌過夜。冷卻到常溫，加入50ml乙酸乙酯和50ml水分層。水相用乙酸乙酯萃取三次。合并乙酸乙酯相，經無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。剩余物經柱層析純化(二氯甲烷：甲醇＝200:1-100:1)，得到白色固體(28mg,30％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b24。

實施例25

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b25，其是由如下方法合成的：

將b3-5(104mg,0.4mmol)和dipea(206mg,1.6mmol)溶于nmp(1ml)中，加入b7-2(49mg,0.2mmol)。氮氣保護下，加熱至135℃，反應18小時。冷卻至室溫后，加入水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml*3)萃取，合并有機相，用飽和食鹽水(30ml*3)洗，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮后經柱層析(二氯甲烷：甲醇＝30:1)得黃色固體(42mg,48％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b25。

實施例26

本實施例提供一種3-氟吡啶雜環(huán)化合物b38，其是由如下方法合成的：

1)中間體b38-2的合成：

將b38-1(1.7g,10mmol),2,3-二氟-4-碘吡啶(4.8g,20mmol)，碳酸色(16.3g,50mmol),三(二亞芐基丙酮)二鈀(460mg,0.5mmol)溶于甲苯中，在氮氣保護下，加熱回流12小時，冷卻至室溫，經硅藻土過濾旋干柱層析純化(石油醚：乙酸乙酯＝4:1-1:1)得黃色固體(2.3g,88％).¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.48(d,j＝4.2hz,1h),7.72(d,j＝5.6hz,1h),7.45(d,j＝7.6hz,1h),7.17(m,1h),6.69(m,1h),4.57(s,2h),3.81(m,2h),3.18(m,2h).

2)中間體b38-2的合成：

將b38-2(50mg,0.21mmol)和b2-5(66mg,0.3mmol)溶于1ml二甲基亞砜，加入碳酸鉀(131mg,1.0mmol)，加熱到160℃反應12h。待冷卻至室溫，加入5ml水，用乙酸乙酯萃取(10ml×3)。合并有機相，用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，濾除硫酸鈉，旋干溶劑，剩余物經柱層析純化(石油醚:乙酸乙酯＝1:1-0:1)，得黃色固體(4mg,5％)。經過核磁圖譜解析(圖譜數(shù)據(jù)見表1)，所得到的固體為化合物b38。

表1列出了實施例1-26及其類似步驟獲得的化合物b1-b38的解析結構和波譜數(shù)據(jù)。

表1

實施例27

本實施例對實施例1-26制備得到的3-氟吡啶雜環(huán)化合物b1-b25和b38，以及按照實施例1-26的類似步驟獲得的化合物b26-b37對wnt信號通路的抑制能力進行測定。

lwnt3a細胞(crl-2647，atcc)培養(yǎng)在含有10％胎牛血清(hyclone)的dmem培養(yǎng)基(gibico)中。hek293stf穩(wěn)定克隆細胞(轉染有“super-topflash”tcf熒光報告質粒的hek293細胞)培養(yǎng)在完全培養(yǎng)基(含有4mml-谷氨酰胺、1.5g/l碳酸氫鈉、4.5g/l葡萄糖、6μg/ml殺稻瘟菌素和10％胎牛血清的dmem培養(yǎng)基)中。當lwnt3a細胞和hek293stf穩(wěn)定克隆細胞培養(yǎng)至匯合度為90％時分別收獲，并以1:1的比例混合。100μl/孔的混合細胞培養(yǎng)液加入到96孔板中，使最終的細胞濃度為12000個細胞/孔，然后再培養(yǎng)24h。被測化合物用dmso逐級稀釋，然后再用dmem培養(yǎng)基稀釋到所要濃度。取20μl化合物溶液加入到前述的裝有細胞培養(yǎng)液的96孔板中，然后于37℃孵化48h。最后每孔中加入50μl熒光素酶溶液(brigh-glo，promega)，常溫下振搖5分鐘。發(fā)光信號用酶標儀(pherastarfs，bmg)測定，然后根據(jù)不同濃度化合物對發(fā)光信號的抑制結果計算出化合物的ic50值(效價)。以b4和b7為例，如圖1和圖2所示，得到抑制結果圖；其余化合物的測試圖基本相同。整體結果如表2(雜環(huán)化合物b1-b38對wnt信號通路的抑制能力測定實驗的結果)所示。ic50值越低，代表該雜環(huán)化合物的活性越高。

表2

由上表2可見，本發(fā)明實施例得到的雜環(huán)化合物，能夠作為wnt信號通路的有效拮抗劑，能夠有效阻斷wnt信號通路，從而能夠用于治療或預防因wnt信號通路失常引起的病癥。