本發(fā)明屬于一種鮮海參的深加工處理方法，具體地說，涉及一種海參不同組織低分子量多肽酒的加工方法。

背景技術(shù)：

海參是一種珍貴的滋補(bǔ)佳品，不僅高蛋白、無膽固醇和低脂肪，而且含有豐富的微量元素和活性成分如酸性粘多糖、皂苷等?，F(xiàn)代研究表明，海參腸和海參生殖腺中也含有大量的營養(yǎng)物質(zhì)和微量元素，其蛋白質(zhì)含量高，是優(yōu)質(zhì)的多肽來源。與蛋白質(zhì)相比，多肽溶解性好、易吸收、無抗原性、安全性高。海參活性肽具有抗腫瘤、抗疲勞、抗氧化，調(diào)節(jié)血脂和血糖，增強(qiáng)人體免疫力等功效。將海參膠原蛋白水解成海參多肽提高了海參的生物效價(jià)和生理功能。

我國是最早釀酒的國家，現(xiàn)在已發(fā)展到能生產(chǎn)各種濃度、各種香型、各種含酒的飲料?！侗静菥V目》記載：酒，天之美祿也。少飲可以和血行氣，壯神御寒，消愁遣興。隨著人們生活水平的不斷提高，人們對(duì)自身健康也越來越重視，營養(yǎng)酒的需求也越來越大。海參酒是一種新型高檔次又有營養(yǎng)的保健酒，使人們?cè)陲嬀频耐瑫r(shí)，獲得健康，近年來逐漸成為研究熱點(diǎn)。

中國發(fā)明專利CN1546633A提供了海參酒及其釀造工藝，通過將鮮活海參除內(nèi)臟和黍米分別清洗、浸泡和蒸煮后，與淀粉酶、酸性蛋白酶、米曲活化酵母，加入總米燒酒重量10%的米燒酒，打靶，封缸，在28℃條件下發(fā)酵72小時(shí)后，加入總米燒酒重量40%的米燒酒，72小時(shí)后再加入剩余的米燒酒，發(fā)酵20天后澄清殺菌，勾兌控制酒精度為18°，包裝即為成品。

中國發(fā)明專利CN101584474A公布了一種海參藍(lán)莓保健酒及其加工方法，將去內(nèi)臟的鮮海參95-98℃煮30min，冷卻干燥粉碎制粉。過20目篩得到海參粉。人參和枸杞子清洗除雜后干燥粉碎，過20目篩。藍(lán)莓清洗去雜，破碎，在1.8-2.5mpa擠壓，果汁加熱滅菌、真空抽濾。海參粉0.3-0.5份、人參粉0-0.4份、枸杞子粉0-0.8份，加入純糧高度白酒100份醇化3次后分離出澄清液，加入蜂蜜、甜味劑、Vc和藍(lán)莓汁調(diào)制，滅菌制成。

中國發(fā)明專利CN101899380A公布了一種海參酒及其釀造工藝，包括鮮海參去內(nèi)臟后加入1-5‰的復(fù)合蛋白酶和1-7‰風(fēng)味酶，在30-55℃下蒸煮3-8小時(shí)，再在70-90℃下保溫15分鐘，用糧食酒浸提中草藥30天，粗濾制得中草藥浸提液，以糧食酒為基液，海參酶解液質(zhì)量比10-70%、中草藥浸提液為1-30%勾兌調(diào)配制得。

中國發(fā)明專利CN101974394A公布了納米海參酒及其制備方法，是將海參攪碎并密封加熱膠化冷凍干燥至含水<10%，經(jīng)三次粉碎至細(xì)度達(dá)到10~1000nm，加入蛋白酶在40-70℃酶解1-5h，滅酶離心進(jìn)行冷凍或噴霧干燥，干燥物加入到食用酒進(jìn)行勾兌、過濾而得。

以上文獻(xiàn)公開的海參酒制作方法一般采用海參粉浸提營養(yǎng)成分或鮮海參酶解液、中草藥浸提液和糧食酒進(jìn)行發(fā)酵或勾兌，這些方法浸提液中主要成分是大分子蛋白質(zhì)和多糖，醇溶性不好，在酒中含量低；有些采用海參酶解液整體加入酒中，沒有對(duì)海參酶解液進(jìn)行分級(jí)，沒有考慮到不同分子量的海參活性肽功效。本發(fā)明采用鮮海參體壁、海參腸或海參生殖腺為原料，通過生物酶解、超濾分級(jí)、納濾脫鹽制得低分子量的海參活性多肽，得到的活性多肽分子量小。與大分子蛋白相比，低分子量多肽溶解性好，易吸收，功效作用明顯，與酒基勾兌后，可以得到高含量活性肽的海參酒。海參腸和海參生殖腺（俗稱“海參花”）是海參加工環(huán)節(jié)產(chǎn)生的下腳料，通常作為廢物丟棄，造成極大的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。相關(guān)研究表明海參腸和海參生殖腺蛋白質(zhì)含量較高，是優(yōu)質(zhì)多肽的重要來源。對(duì)海參腸和海參生殖腺的充分利用可以提高海參加工副產(chǎn)物的綜合利用，提升海參產(chǎn)業(yè)綜合經(jīng)濟(jì)效益。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有海參酒活性成分的不足和加工方法存在的問題，提供了一種海參不同組織低分子量多肽酒的制作方法。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：

1. 一種低分子量多肽海參酒的加工方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

A. 原料處理：將鮮活海參剖開，分離海參體壁、海參腸和海參生殖腺，清洗后分別加入物料2-4倍的純凈水分別進(jìn)行打漿、均質(zhì)，分別制得海參體壁、海參腸和海參生殖腺組織液；

B. 生物酶解：海參體壁酶解：選擇木瓜蛋白酶以3-5%的比例添加，55-70℃酶解5-7h，100℃滅酶5min；海參腸酶解：選擇木瓜蛋白酶，以2-4萬U/g添加，40-60℃酶解2-4h，100℃滅酶5min；海參生殖腺酶解：先從包括木瓜蛋白酶、復(fù)合蛋白酶在內(nèi)的中性蛋白酶中選擇1-2種，以1-4%比例先后或同時(shí)加入，50-70℃酶解3-5h，100℃滅酶5min，酶解液冷卻至40-50℃，然后再以0.5-1%的風(fēng)味蛋白酶或堿性蛋白酶，40-50℃酶解1-1.5h，100℃滅酶5min；

C. 離心分離：步驟B制得的不同組織的酶解液分別經(jīng)連續(xù)離心分離后，分別得到海參體壁、海參腸和海參生殖腺三種不同組織的多肽酶解液；

D. 超濾分級(jí)濃縮：步驟B制得的不同組織的多肽酶解液?jiǎn)为?dú)或者兩種以上混合后采用截留分子量5KDa、3KDa、1KDa的超濾膜對(duì)酶解液進(jìn)行分級(jí)過濾，經(jīng)3KDa和5KDa超濾膜截留濃縮后得到單組織或多組織中肽濃縮液；經(jīng)1KDa超濾膜截留得到小于1KDa單組織或多組織小肽液；

E. 納濾脫鹽濃縮：步驟D制得的單組織或多組織小肽液經(jīng)納濾脫鹽后，得到單組織或多組織小肽濃縮液；

F. 干燥：步驟D制得的單組織或多組織中肽濃縮液經(jīng)過真空冷凍干燥或噴霧干燥，制得單組織或多組織中肽海參多肽粉；步驟E制得的單組織或多組織小肽濃縮液經(jīng)過真空冷凍干燥或噴霧干燥，制得單組織或多組織小肽海參多肽粉；

G. 其他輔料浸提液：將枸杞、桑葚、蟲草一種或者多種混合后粉碎過篩，加入酒基浸提，利用超聲波輔助促進(jìn)功能成分的浸出，浸提液經(jīng)離心分離制得；

H. 勾兌：以酒基以基液，按比例加入單組織或多組織小肽濃縮液、單組織或多組織中肽海參多肽粉和/或單組織或多組織小肽海參多肽粉和/或其他輔料浸提液，攪拌均勻；

I. 陳化：將勾兌好的混合酒液密閉儲(chǔ)存，自然老熟；

J. 過濾灌裝：陳化的混合酒液過濾后，灌裝于成品罐。

進(jìn)一步地，步驟E中：經(jīng)超濾后的單組織或多組織小肽濃縮液采用截留分子量100Da的納濾膜進(jìn)行脫鹽后，濃縮得到濃度為0.4-0.6g/mL的單組織或多組織小肽濃縮液。

進(jìn)一步地，步驟G中：枸杞、桑葚、蟲草一種或者多種按比例混合后粉碎，過20-100目篩，加入5倍質(zhì)量的酒基浸提，浸提1-3天，每天超聲輔助1-3h。

進(jìn)一步地，所述的基液包括白酒基、黃酒基，單組織或多組織小肽濃縮液占總酒液質(zhì)量的30-40%，其他輔助浸提液質(zhì)量比為0-60%；或者，

單組織或多組織中肽粉占總酒液質(zhì)量的15-30%，其他輔助浸提液質(zhì)量比為0-60%；或者，

單組織或多組織小肽粉占總酒液質(zhì)量的15-30%，其他輔助浸提液質(zhì)量比為0-60%。

由于采用了上述技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明的有點(diǎn)在于：

經(jīng)過以上工藝加工后，該酒具有海參特有的鮮味，低分子量小肽含量高達(dá)15-30%，其中白酒型海參酒30-35度，黃酒型海參酒10-15度。該工藝中海參低分子量多肽是利用海參體壁、海參腸和海參生殖腺生物酶解，超濾分級(jí)、納濾脫鹽后得到的，使得海參加工過程中副產(chǎn)物得到充分利用，沒有引入有機(jī)溶劑等外來有毒有害物質(zhì)，加工過程綠色、環(huán)保。與蛋白質(zhì)相比，多肽具有良好的溶解性和穩(wěn)定性，該方法解決了海參酒中蛋白質(zhì)含量低，溶解性差，不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，同時(shí)海參多肽具有較高的功能活性。

具體實(shí)施方式

現(xiàn)舉幾個(gè)具體的例子，來對(duì)本發(fā)明做一個(gè)具體的說明。

實(shí)施例1：

1）鮮海參體壁去內(nèi)臟清洗后，以物料與水比例為1:3加入純凈水進(jìn)行打漿、均質(zhì)，不調(diào)pH，木瓜蛋白酶以4%比例加入，70℃酶解7h后，100℃滅酶5min。酶解液經(jīng)連續(xù)離心后，經(jīng)超濾膜分級(jí)，小分子肽濾過液經(jīng)納濾脫鹽，濃縮后得到濃度為0.5g/mL小于1KDa小肽濃縮液。

2）按海參體壁小于1KDa小肽濃縮液35%比例加入到白酒基中，注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得白酒型海參酒，其中小于1KDa小肽含量約為17%。

實(shí)施例2：

1）鮮海參體壁去內(nèi)臟清洗后，以物料與水比例為1:4加入純凈水進(jìn)行打漿、均質(zhì)，不調(diào)pH，木瓜蛋白酶以5%比例加入，65℃酶解5h后，100℃滅酶5min。酶解液經(jīng)連續(xù)離心后，經(jīng)超濾膜分級(jí)，小分子肽濾過液經(jīng)納濾脫鹽，濃縮后進(jìn)行真空冷凍干燥或噴霧干燥，制得不同分子量海參體壁多肽粉。

2）按海參體壁1-5KDa中肽粉30%比例加入到黃酒基中，注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得黃酒型海參酒，其中1-5KDa中肽含量約為30%。

3）按海參體壁小于1KDa小肽粉30%比例加入到黃酒基中，注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得黃酒型海參酒，其中小于1KDa小肽含量約為30%。

實(shí)施例3：

1）海參腸經(jīng)清洗后，以物料與水比例為1:2加入純凈水進(jìn)行打漿、均質(zhì)，不調(diào)pH，木瓜蛋白酶以3萬U/g的比例加入，50℃酶解3h后，100℃滅酶5min。酶解液經(jīng)連續(xù)離心后，經(jīng)超濾膜分級(jí)，小分子肽濾過液經(jīng)納濾脫鹽，濃縮后得到濃度為0.4g/mL小于1KDa小肽濃縮液。

2）按海參腸小于1KDa小肽濃縮液40%比例加入到白酒基中，注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得白酒型海參酒，其中小于1KDa小肽含量約為16%。

實(shí)施例4：

1）海參生殖腺經(jīng)清洗后，以物料與水比例為1:4加入純凈水進(jìn)行打漿、均質(zhì)，不調(diào)pH，采用木瓜蛋白酶與復(fù)合蛋白酶，按各自質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%比例加入，70℃酶解3.5h，100℃滅酶5min，酶解液冷卻至40℃時(shí)，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%風(fēng)味蛋白酶，45℃酶解1h，100℃滅酶5min。酶解液經(jīng)連續(xù)離心后，經(jīng)超濾膜分級(jí)，小分子肽濾過液經(jīng)納濾脫鹽，濃縮后得到濃度為0.6g/mL小于1KDa小肽濃縮液。

2）枸杞、蟲草按2:1比例混合后，粉碎后，過50目篩，加入5倍質(zhì)量的酒基浸提，浸提3天，每天超聲輔助3h，浸提液離心，取上清液。

3）按海參生殖腺小于1KDa小肽濃縮液40%、其他輔料浸提液50%的比例混合均勻加入到白酒基中，過濾后注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得白酒型海參酒，其中小于1KDa小肽含量約為24%。

實(shí)施例5：

1）海參生殖腺經(jīng)清洗后，以物料與水比例為1:3加入純凈水進(jìn)行打漿、均質(zhì)，不調(diào)pH，采用木瓜蛋白酶與復(fù)合蛋白酶，按各自質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%比例加入，70℃酶解3h，100℃滅酶5min，酶解液冷卻至40℃時(shí)，再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%風(fēng)味蛋白酶，50℃酶解0.5h，100℃時(shí)滅酶5min。酶解液經(jīng)連續(xù)離心后，經(jīng)超濾膜分級(jí)，小分子肽濾過液經(jīng)納濾脫鹽，濃縮后進(jìn)行真空冷凍干燥或噴霧干燥，制得不同分子量海參生殖腺多肽粉。

2）枸杞粉碎后，過20目篩，加入5倍質(zhì)量的酒基浸提，浸提3天，每天超聲輔助3h，浸提液離心，取上清液。

3）按海參生殖腺1-5KDa中肽粉30%、其他輔料浸提液40%比例混合均勻加入到黃酒基中，過濾后注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得黃酒型海參酒，其中1-5KDa中肽含量約為30%。

4）按海參生殖腺小于1KDa小肽粉20%、其他輔料浸提液50%比例混合均勻加入到黃酒基中，過濾后注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得黃酒型海參酒，其中小于1KDa小肽含量約為20%。

實(shí)施例6：

1）鮮海參體壁去內(nèi)臟清洗后，以物料與水比例為1:2加入純凈水進(jìn)行打漿、均質(zhì)，不調(diào)pH，木瓜蛋白酶以3%比例加入，70℃酶解6h，100℃滅酶5min。酶解液經(jīng)連續(xù)離心后，經(jīng)超濾膜分級(jí)，小分子肽濾過液經(jīng)納濾脫鹽。海參腸經(jīng)清洗后，以物料與水比例為1:3加入純凈水進(jìn)行打漿、均質(zhì)，不調(diào)pH，木瓜蛋白酶以4萬U/g的比例加入，50℃酶解2.5h，100℃滅酶5min。酶解液經(jīng)連續(xù)離心后，經(jīng)超濾膜分級(jí)，小分子肽濾過液經(jīng)納濾脫鹽。海參體壁與海參腸小于1KDa小肽液混合均勻后濃縮得到濃度為0.5g/mL小于1KDa兩組織小肽濃縮液。

2）按小于1KDa兩組織小肽濃縮液40%比例加入到白酒基中，注入儲(chǔ)罐中儲(chǔ)存，密閉，進(jìn)行自然陳化，離心灌裝制得白酒型海參酒，其中小于1KDa小肽含量約為20%。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，本發(fā)明的保護(hù)范圍并不僅局限于上述實(shí)施例，凡屬于本發(fā)明思路下的技術(shù)方案均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理前提下的若干改進(jìn)，這些改進(jìn)也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。