本發(fā)明屬于化學(xué)合成、分析化學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種分子印跡固相萃取膜的制備和應(yīng)用，具體是一種基于替代模板分子高選擇性孔雀石綠分子印跡膜的制備方法，及所制備膜適用于選擇性分離、萃取和富集水樣、動(dòng)物源性組織中痕量孔雀石綠及其類似物隱性孔雀石綠。

背景技術(shù)：

在一個(gè)完整的樣品分析過(guò)程中，前處理時(shí)間占用了70％-80％，而分析結(jié)果的誤差有60％以上來(lái)源于樣品的前處理步驟。分子印跡技術(shù)的出現(xiàn)改善了傳統(tǒng)固相萃取技術(shù)選擇性差的缺點(diǎn)，是一種基于其本身的特異“孔穴”對(duì)某類具有特定結(jié)構(gòu)的物質(zhì)的專一、精準(zhǔn)識(shí)別作用的前處理技術(shù)，具有快速高效、抗基質(zhì)干擾強(qiáng)、耐酸耐堿、機(jī)械強(qiáng)度高、選擇性好等優(yōu)點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)復(fù)雜樣品中痕量甚至超痕量目標(biāo)物的分離和富集。目前基于分子印跡聚合物的樣品前處理受到分析、環(huán)境、醫(yī)藥等領(lǐng)域的關(guān)注，但是存在以下幾個(gè)技術(shù)瓶頸仍有待解決：

(1)分子印跡技術(shù)通常采用目標(biāo)物本身作為模板分子，難以獲得完全除去模板分子的印跡聚合物，存在洗脫和泄漏的不確定性導(dǎo)致檢測(cè)“假陽(yáng)性”的風(fēng)險(xiǎn)。

(2)分子印跡聚合物的通透性差、傳質(zhì)速度慢，對(duì)目標(biāo)物的吸附平衡時(shí)間長(zhǎng)、洗脫條件要求高的問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有前處理技術(shù)的上述不足，提出以一種三苯甲烷類分子作為孔雀石綠的替代模板分子制備分子印跡膜，以解決分子印跡聚合物制備中模板分子價(jià)格高和使用中模板分子泄露等問(wèn)題，同時(shí)仍保持了分子印跡的識(shí)別能力?，F(xiàn)有的分子印跡材料存在印跡位點(diǎn)“包埋”過(guò)深，目標(biāo)分子在分子印跡聚合物上吸附慢、效率低的問(wèn)題，以具有疏松、多孔、快速滲濾作用的玻璃纖維膜作為底材來(lái)制備分子印跡聚合物膜，解決了萃取效率低和萃取容量較小的問(wèn)題。采用替代模板分子制備的分子印跡聚合物對(duì)動(dòng)物源食品進(jìn)行處理提取和凈化處理，大大縮短了每個(gè)樣品前處理的萃取前處理時(shí)間，特異性識(shí)別減少了樣品基質(zhì)的影響，使實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單、快捷，同時(shí)具有操作準(zhǔn)確、靈敏度高及重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供一種三苯甲烷類分子替代孔雀石綠的分子印跡固相萃取膜的制備方法，該方法采用三苯甲烷類物質(zhì)作為模板分子，采用玻璃纖維膜作為底材。具體而言，該方法包括如下步驟：

(1)將三苯甲烷類物質(zhì)、有機(jī)單體、有機(jī)交聯(lián)劑、有機(jī)溶劑、偶氮引發(fā)劑進(jìn)行超聲混溶處理，得到混合有機(jī)溶液；

(2)將所述混合有機(jī)溶液置于4℃冰箱靜置6h進(jìn)行預(yù)聚合，預(yù)聚合過(guò)程完成后取出所述預(yù)聚合溶液，通入氮?dú)鈹?shù)分鐘后，將所述混合有機(jī)溶液倒入反應(yīng)模具中，同時(shí)加入與模具尺寸匹配的底材，通過(guò)控制加液量的多少可以獲得不同厚度的夾心結(jié)構(gòu)聚合物膜；

(3)向反應(yīng)器中通入氮?dú)?，一段時(shí)間后，密封反應(yīng)器，并加熱至50-70℃進(jìn)行聚合反應(yīng)，待所述聚合反應(yīng)結(jié)束后，對(duì)得到的分子印跡膜洗滌和除去三苯甲烷類替代模版分子，獲得對(duì)孔雀石綠及其類似物隱性孔雀石綠有選擇吸附作用的分子印跡聚合物膜。

在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述底材為玻璃纖維膜或者玻璃纖維氈。

在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，所述三苯甲烷類物質(zhì)選自選自三苯甲烷，烷基取代的三苯甲烷，堿性綠，酚酞，玫紅，胭脂紅等；其中烷基為C₁-C₆的烷基。

在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，上述步驟(1)中，有機(jī)單體能與模板分子三苯甲烷類分子形成穩(wěn)定的氫鍵、靜電作用、π-π共軛等非共價(jià)鍵作用，從而提高分子印跡聚合物膜的特異吸附性。該有機(jī)單體選自甲基丙烯酸、三氟甲基丙烯酸、丙烯酰胺、4-乙烯基苯甲酸、2-丙烯酰氨基-2-甲基-1-丙烷磺酸中的一種或多種。

該有機(jī)單體的加入的量與模板分子三苯甲烷類分子的摩爾比為(2-6)：1；在具體實(shí)施例中，該有機(jī)單體與模板分子三苯甲烷類分子的摩爾比為2：1、3：1、4：1、5：1、6：1等。該比例的有機(jī)單體能夠減少分子印跡聚合物的非特異吸附性，并增加其表面印跡位點(diǎn)的穩(wěn)定性，從而提高分子印跡膜的選擇性吸附能力。

在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，上述步驟(1)中有機(jī)交聯(lián)劑能使得模板分子-有機(jī)單體復(fù)合物在聚合反應(yīng)過(guò)程中交聯(lián)，形成穩(wěn)定的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)。在具體的實(shí)施例中，該有機(jī)交聯(lián)劑選自二甲基丙烯酸乙二醇酯、二乙烯基苯、三甲基丙烷三甲基丙烯酸酯中的一種或多種。

該有機(jī)交聯(lián)劑的加入的量與有機(jī)單體的摩爾比為(3-8)：1；在具體實(shí)施例中，該有機(jī)交聯(lián)劑與有機(jī)單體的摩爾比為3：1、4：1、5：1、6：1、7：1、8:1等。該比例的有機(jī)交聯(lián)劑能夠使得分子印跡膜的交聯(lián)度高、理化性質(zhì)穩(wěn)定、機(jī)械強(qiáng)度高，減少分子印跡聚合物的非特異吸附性，從而提高分子印跡膜的選擇性吸附能力、萃取容量和富集倍數(shù)。

在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，上述步驟(1)中有機(jī)溶劑能完全溶解聚合體系中的物質(zhì)，且不影響模板分子-有機(jī)單體復(fù)合物的非共價(jià)鍵作用，同時(shí)使得分子印跡膜存在適合的孔隙，從而增大其傳質(zhì)速率、分子識(shí)別速率和萃取容量。在具體實(shí)施例中，該有機(jī)溶劑選自甲苯、氯仿、乙腈、二甲基亞砜的一種多種。

在本發(fā)明一個(gè)具體的實(shí)施方式中，上述偶氮引發(fā)劑能在50-70℃下只形成一種自由基，且分解均勻，為一級(jí)反應(yīng)，不發(fā)生誘導(dǎo)分解，無(wú)其他副反應(yīng)，從而不影響模板-有機(jī)單體復(fù)合物間的非共價(jià)鍵作用，且使得模板-有機(jī)單體復(fù)合物間進(jìn)行的聚合反應(yīng)穩(wěn)定，反應(yīng)條件較易控制。而且在聚合反應(yīng)過(guò)程中，該偶氮類引發(fā)劑對(duì)溶劑和雜質(zhì)不敏感。在具體實(shí)施例中，該偶氮引發(fā)劑選自偶氮二異丁腈、偶氮二異庚腈和偶氮二異丁酸二甲酯中的一種或多種。

上述關(guān)于偶氮引發(fā)劑的各實(shí)施例中，其用量可以是足量。在另一實(shí)施例中，該偶氮引發(fā)劑的添加量與模板分子三苯甲烷類化合物質(zhì)量比為(6-8)：1。在具體實(shí)施例中，偶氮引發(fā)劑與模板分子三苯甲烷類化合物的質(zhì)量比為6：1、6.5：1、7：1、7.5：1、8：1等。

為了使得該步驟(1)各反應(yīng)物充分的混合和溶解，在本發(fā)明具體的實(shí)施例中，將各反應(yīng)物混合后，可以將混合液采用超聲處理，具體的可以采用超聲助溶5-30分鐘。

上述步驟(2)中，在4℃冰箱靜置6h，是為步驟(1)中配制的混合有機(jī)溶液提供一個(gè)低溫且靜態(tài)的環(huán)境，使得模板分子與有機(jī)單體能形成穩(wěn)定的非共價(jià)鍵作用，從而提高分子印跡膜的選擇性。

上述向混合有機(jī)溶液中通入氮?dú)馐菫榱顺ゲ襟E(1)中配制的混合有機(jī)溶液中的氧氣，保證反應(yīng)順利發(fā)生。

上述向混合有機(jī)溶液中投入的玻璃纖維膜，作為表面印跡聚合物的載體，其類型可以選用親水型玻璃纖維膜或疏水型玻璃纖維膜。

上述選用的模具需要經(jīng)過(guò)表面處理，使得合成的分子印記聚合物不會(huì)發(fā)生粘璧現(xiàn)象。具體的，表面處理方式可以采用化學(xué)法，也可以直接在載玻片進(jìn)行惰性處理。

上述步驟(3)中，向反應(yīng)器中通入氮?dú)獠⑵涿芊?，是為了給聚合反應(yīng)提供一個(gè)無(wú)氧的環(huán)境，保證反應(yīng)順利發(fā)生。

上述將混合有機(jī)溶液加熱至50-70℃并保持該溫度直至混合有機(jī)溶液反應(yīng)完畢。在該50-70℃下，模板分子-有機(jī)單體復(fù)合物在交聯(lián)劑、偶氮引發(fā)劑等作用下發(fā)生聚合反應(yīng)。在一實(shí)施例中，該聚合反應(yīng)的溫度為60℃。

上述聚合反應(yīng)的時(shí)間應(yīng)該保證聚合反應(yīng)充分反應(yīng)直至反應(yīng)完畢。在一實(shí)施例中，反應(yīng)時(shí)間可以控制在6-12h，在具體實(shí)施例中，該聚合反應(yīng)在60℃下持續(xù)反應(yīng)8h。

上述聚合反應(yīng)完畢后，對(duì)所述分子印跡膜進(jìn)行洗滌，以除去其表面未參與反應(yīng)的物質(zhì)以及其他雜質(zhì)等。洗滌方式可以采用超純水、甲醇(色譜純)進(jìn)行反復(fù)清洗，在洗滌過(guò)程中可以采用往復(fù)式振蕩器和超聲中的一種或兩種相結(jié)合。

上述洗脫模板分子三苯甲烷類分子時(shí)，洗脫方式采用甲醇/乙酸、甲醇/氨水、甲醇進(jìn)行反復(fù)清洗，在洗脫過(guò)程中可以采用往復(fù)式振蕩器和超聲中的一種或兩種相結(jié)合

與傳統(tǒng)的分子印跡聚合物合成技術(shù)相比，上述分子印跡膜制備方法以類似化合物作為替代模板分子，采用偶氮類引發(fā)劑在固定溫度下發(fā)生聚合反應(yīng)，聚合反應(yīng)條件簡(jiǎn)單，反應(yīng)穩(wěn)定、易于控制，無(wú)副反應(yīng)產(chǎn)物產(chǎn)生且成本較低。而且，制備的分子印跡聚合物膜理化性質(zhì)穩(wěn)定，對(duì)孔雀石綠和隱性孔雀石綠具有較強(qiáng)的特異吸附性，平衡時(shí)間短、萃取過(guò)程簡(jiǎn)單、萃取容量大、傳質(zhì)速率快且富集倍數(shù)高，適用于復(fù)雜樣品中痕量濃度的孔雀石綠和隱性孔雀石綠的快速分離、萃取和富集。為實(shí)驗(yàn)室常用的儀器法(如液相色譜、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀等)聯(lián)用，還可以與快速檢測(cè)法(如酶聯(lián)免疫法、膠體金免疫法和快速檢測(cè)試劑盒法等)聯(lián)用，提高結(jié)果的準(zhǔn)確度，滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)和快速篩查的需求，可望解決目前分析領(lǐng)域中樣品前處理技術(shù)的瓶頸，具有良好的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

下面將結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，附圖中：

圖1三苯甲烷類化合物為替代模板分子的分子印跡膜原理示意圖；

圖2分子印跡聚合物制備流程示意圖；

圖3分子印跡聚合膜萃取洗脫過(guò)程-洗脫過(guò)程示意圖；

圖4非分子印跡聚合膜的10000倍掃描電鏡SEM圖；

圖5分子印跡聚合膜的10000倍掃描電鏡SEM圖；

圖6分子印跡膜(MIP)與非分子印跡膜(NIP)萃取孔雀石綠和隱性孔雀石綠萃取量示意圖；

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：分子印跡固相萃取膜(MIP)的制備及應(yīng)用

S01：配置含有三苯甲烷、4-乙烯基苯甲酸、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯、偶氮引發(fā)劑偶氮二異丁腈的混合有機(jī)溶液：將三苯甲烷1mol、4-乙烯基苯甲酸2mol、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯6mol、有機(jī)溶劑甲苯適量、偶氮引發(fā)劑偶氮二異丁腈6mol進(jìn)行超聲混溶處理30min，得到混合溶液；

S02：將所述混合有機(jī)溶液置于4℃冰箱靜置6h進(jìn)行預(yù)聚，預(yù)聚完成后取出所述混合有機(jī)溶液，通入氮?dú)鈹?shù)分鐘后，將所述混合有機(jī)溶液倒入反應(yīng)模具中，同時(shí)加入與模具尺寸匹配的玻璃纖維膜，通過(guò)控制加液量的多少可以獲得不同厚度的聚合物膜；

S03：向反應(yīng)器中通入氮?dú)?，一段時(shí)間后，密封反應(yīng)器，并加熱至60℃進(jìn)行聚合反應(yīng)8h，待所述聚合反應(yīng)結(jié)束后，取下載玻片，對(duì)所述分子印跡膜進(jìn)行洗滌和除去三苯甲烷類替代模版分子獲得孔雀石綠分子印跡膜。

S04：分子印跡聚合物膜的應(yīng)用，取5g標(biāo)準(zhǔn)魚樣品(其中孔雀石綠的含量0.2ng/g)，加入1.4ml 0.1M乙酸鈉(ph4.8)和0.6ml 1M對(duì)甲苯磺酸，渦旋30s加入10ml乙腈，渦旋(或震蕩)5min加入2g無(wú)水硫酸鎂和4.5g中性氧化鋁，渦旋30s離心5min，取全部上清液(過(guò)膜)，約10ml，加入50μl氧化劑，靜置2min加入20ml超純水，放入膜片，置于往復(fù)式振蕩儀低速振蕩萃取15min取出膜片，80℃下烘干5-10min，0.5-1ml乙腈/乙酸(9:1，v/v)洗脫，正反各5次，收集洗脫液(300-500μl)，采用液相色譜測(cè)得孔雀石綠的含量為1.8ng/g，回收率90％。

實(shí)施例2分子印跡固相萃取膜(MIP)的制備及應(yīng)用

S01：配置含有三苯甲烷、三氟甲基丙烯酸、交聯(lián)劑二乙烯基苯、偶氮引發(fā)劑偶氮二異庚腈的混合有機(jī)溶液：將三苯甲烷1mol、三氟甲基丙烯酸3mol、交聯(lián)劑二乙烯基苯12mol、有機(jī)溶劑氯仿適量、偶氮引發(fā)劑偶氮二異庚腈7mol進(jìn)行超聲混溶處理30min，得到混合溶液；

S02：將所述混合有機(jī)溶液置于4℃冰箱靜置6h進(jìn)行預(yù)聚，預(yù)聚完成后取出所述混合有機(jī)溶液，通入氮?dú)鈹?shù)分鐘后，將所述混合有機(jī)溶液倒入反應(yīng)模具中，同時(shí)加入與模具尺寸匹配的玻璃纖維膜，通過(guò)控制加液量的多少可以獲得不同厚度的聚合物膜；

S03：向反應(yīng)器中通入氮?dú)?，一段時(shí)間后，密封反應(yīng)器，并加熱至60℃進(jìn)行聚合反應(yīng)8h，待所述聚合反應(yīng)結(jié)束后，取下載玻片，對(duì)所述分子印跡膜進(jìn)行洗滌和除去三苯甲烷替代模版分子獲得孔雀石綠分子印跡膜。

S04：分子印跡聚合物膜的應(yīng)用，取5g標(biāo)準(zhǔn)魚樣品(其中孔雀石綠的含量0.2ng/g)，加入1.4ml 0.1M乙酸鈉(ph4.8)和0.6ml 1M對(duì)甲苯磺酸，渦旋30s加入10ml乙腈，渦旋(或震蕩)5min加入2g無(wú)水硫酸鎂和4.5g中性氧化鋁，渦旋30s離心5min，取全部上清液(過(guò)膜)，約10ml，加入50μl氧化劑，靜置2min加入20ml超純水，放入膜片，置于往復(fù)式振蕩儀低速振蕩萃取15min取出膜片，80℃下烘干5-10min，0.5-1ml乙腈/乙酸(9:1，v/v)洗脫，正反各5次，收集洗脫液(300-500μl)，采用液相色譜測(cè)得孔雀石綠的含量為1.85ng/g，回收率92.5％。

實(shí)施例3分子印跡固相萃取膜(MIP)的制備及應(yīng)用

S01：配置含有酚酞、丙烯酰胺、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯、偶氮引發(fā)劑偶氮二異丁酸二甲酯的混合有機(jī)溶液：將酚酞1mol、丙烯酰胺3mol、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯12mol、有機(jī)溶劑乙腈適量、偶氮引發(fā)劑偶氮二異丁酸二甲酯7mol進(jìn)行超聲混溶處理30min，得到混合溶液；

S02：將所述混合有機(jī)溶液置于4℃冰箱靜置6h進(jìn)行預(yù)聚，預(yù)聚完成后取出所述混合有機(jī)溶液，通入氮?dú)鈹?shù)分鐘后，將所述混合有機(jī)溶液倒入反應(yīng)模具中，同時(shí)加入與模具尺寸匹配的玻璃纖維膜，通過(guò)控制加液量的多少可以獲得不同厚度的聚合物膜；

S03：向反應(yīng)器中通入氮?dú)猓欢螘r(shí)間后，密封反應(yīng)器，并加熱至60℃進(jìn)行聚合反應(yīng)8h，待所述聚合反應(yīng)結(jié)束后，取下載玻片，對(duì)所述分子印跡膜進(jìn)行洗滌和除去酚酞替代模版分子獲得孔雀石綠分子印跡膜。

S04：分子印跡聚合物膜的應(yīng)用，取5g標(biāo)準(zhǔn)魚樣品(其中孔雀石綠的含量0.2ng/g)，加入1.4ml 0.1M乙酸鈉(ph4.8)和0.6ml 1M對(duì)甲苯磺酸，渦旋30s加入10ml乙腈，渦旋(或震蕩)5min加入2g無(wú)水硫酸鎂和4.5g中性氧化鋁，渦旋30s離心5min，取全部上清液(過(guò)膜)，約10ml，加入50μl氧化劑，靜置2min加入20ml超純水，放入膜片，置于往復(fù)式振蕩儀低速振蕩萃取15min取出膜片，80℃下烘干5-10min，0.5-1ml乙腈/乙酸(9:1，v/v)洗脫，正反各5次，收集洗脫液(300-500μl)，采用液相色譜測(cè)得孔雀石綠的含量為1.86ng/g，回收率93.0％。

實(shí)施例4：分子印跡固相萃取膜(MIP)的制備及應(yīng)用

S01：配置含有堿性品紅、甲基丙烯酸、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯、偶氮引發(fā)劑偶氮二異丁酸二甲酯的混合有機(jī)溶液：將堿性品紅1mol、甲基丙烯酸3mol、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯12mol、有機(jī)溶劑氯仿適量、偶氮引發(fā)劑偶氮二異丁酸二甲酯7mol進(jìn)行超聲混溶處理30min，得到混合溶液；

S02：將所述混合有機(jī)溶液置于4℃冰箱靜置6h進(jìn)行預(yù)聚，預(yù)聚完成后取出所述混合有機(jī)溶液，通入氮?dú)鈹?shù)分鐘后，將所述混合有機(jī)溶液倒入反應(yīng)模具中，同時(shí)加入與模具尺寸匹配的玻璃纖維膜，通過(guò)控制加液量的多少可以獲得不同厚度的聚合物膜；

S03：向反應(yīng)器中通入氮?dú)?，一段時(shí)間后，密封反應(yīng)器，并加熱至60℃進(jìn)行聚合反應(yīng)8h，待所述聚合反應(yīng)結(jié)束后，取下載玻片，對(duì)所述分子印跡膜進(jìn)行洗滌和除去堿性品紅替代模版分子獲得孔雀石綠分子印跡膜。

S04：分子印跡聚合物膜的應(yīng)用，取5g標(biāo)準(zhǔn)魚樣品(其中孔雀石綠的含量0.2ng/g)，加入1.4ml 0.1M乙酸鈉(ph4.8)和0.6ml 1M對(duì)甲苯磺酸，渦旋30s加入10ml乙腈，渦旋(或震蕩)5min加入2g無(wú)水硫酸鎂和4.5g中性氧化鋁，渦旋30s離心5min，取全部上清液(過(guò)膜)，約10ml，加入50μl氧化劑，靜置2min加入20ml超純水，放入膜片，置于往復(fù)式振蕩儀低速振蕩萃取15min取出膜片，80℃下烘干5-10min，0.5-1ml乙腈/乙酸(9:1，v/v)洗脫，正反各5次，收集洗脫液(300-500μl)，采用液相色譜測(cè)得孔雀石綠的含量為1.85ng/g，回收率92.5％。

對(duì)比例1：

制備分子印跡固相萃取膜時(shí)，采用孔雀石綠本身作為模板分子，其他操作同實(shí)施例1。

采用液相色譜測(cè)得孔雀石綠的含量為0.190ng/g，回收率95％。

實(shí)施例5不同加標(biāo)濃度下分子印跡固相萃取膜(MIP)和非分子印跡固相萃取膜(NIP)的萃取量

配置三組空白萃取環(huán)境(含有10ml乙腈和20ml超純水)，加標(biāo)濃度分別為1、2、5ng/ml，放入膜片，置于往復(fù)式振蕩儀低速振蕩萃取15min取出膜片，80℃下烘干5-10min，0.5-1ml乙腈/乙酸(9:1，v/v)洗脫，正反各5次，收集洗脫液(300-500μl)，采用液相色譜測(cè)得孔雀石綠和隱性孔雀石綠的含量。

其中，附圖6為不同加標(biāo)濃度下測(cè)得的洗脫液中孔雀石綠和隱性孔雀石綠的濃度。在三個(gè)加標(biāo)濃度下，MIP對(duì)于孔雀石綠和隱性孔雀石綠的萃取量均大于NIP，且MIP對(duì)孔雀石綠的富集倍數(shù)大于14(富集倍數(shù)＝洗脫液的濃度/加標(biāo)濃度)，對(duì)隱性孔雀石綠的富集倍數(shù)大于6，說(shuō)明本專利所制備的分子印跡固相萃取膜對(duì)孔雀石綠和隱性孔雀石綠均有較好的特異吸附性。