本發(fā)明屬于化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種酯苷及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

老鼠簕(Acanthus ilicifolius Linnaeus)是一種生長在熱帶海岸地帶的紅樹林植物，屬爵床科(Acanthaceae)老鼠簕屬(Acanthus)主要分布在我國廣西、廣東、海南、臺(tái)灣、福建沿海灘涂。老鼠簕收錄于《全國中草藥匯編》(1978年)，全株或跟入藥，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、止咳平喘之功效，主治淋巴細(xì)胞腫大、急慢性肝炎、肝脾腫大、胃痛、咳嗽、哮喘；在印度、泰國的傳統(tǒng)醫(yī)藥中用其枝葉治療類風(fēng)濕、神經(jīng)痛、蛇傷等，在我國民間也有將其作為抗肝炎用藥的歷史。早在1933年，kirtikar等就曾報(bào)道老鼠簕對(duì)于哮喘和麻痹癥有一定療效，老鼠簕的甲醇提取物有明顯的鎮(zhèn)痛、抗炎作用。

近年來，關(guān)于老鼠簕的研究有大量的報(bào)道。國內(nèi)外的研究表明，老鼠簕植物中含有多糖、生物堿、黃酮、萜類和甾體、飽和直鏈和支鏈烴、脂肪酸酯類等化合物。例如彭興等采用蒸餾水透析的制備方法對(duì)老鼠簕根、莖、葉中的多糖進(jìn)行了提取。田瑩等以料液比1:35，提取溫度90℃，提取時(shí)間3h，提取次數(shù)3次，老鼠簕植物里提取多糖。海芳等對(duì)老鼠簕的甲醇提取物的石油醚部分進(jìn)行了比較系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，分離得到9個(gè)甾醇化合物。

雖然有關(guān)老鼠簕的化學(xué)成分已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道，但這些研究絕大多數(shù)為老鼠簕的葉、莖等地上部分，老鼠簕根的研究幾乎為空白。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，對(duì)老鼠簕根進(jìn)行研究，分離得到一種具有抗炎活性的酯苷。

本發(fā)明的第一個(gè)方面是提供一種酯苷，所述酯苷為式(1)所示化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽：

本發(fā)明的第二個(gè)方面是提供一種前藥，其母體化合物為本發(fā)明第一個(gè)方面所述的酯苷。

本發(fā)明的第三個(gè)方面是提供一種組合物，所述組合物包含如本發(fā)明第一個(gè)方面所述的酯苷和/或本發(fā)明第二個(gè)方面所述的前藥。

本發(fā)明的第四個(gè)方面是提供如本發(fā)明第一個(gè)方面所述的酯苷和/或本發(fā)明第二個(gè)方面所述的前藥和/或本發(fā)明第三個(gè)方面所述的組合物在制備抗炎藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明第五個(gè)方面一種抗炎藥物，所述抗炎藥物的包含本發(fā)明第一個(gè)方面所述的酯苷和/或本發(fā)明第二個(gè)方面所述的前藥和/或本發(fā)明第三個(gè)方面所述的組合物。

本發(fā)明對(duì)老鼠簕根進(jìn)行研究，分離得到一種酯苷，其具有良好的抗炎性，可將其應(yīng)用于抗炎藥物，豐富的抗炎藥物的種類，同時(shí)也為老鼠簕根在抗炎功效上提供了進(jìn)一步的研究基礎(chǔ)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的研究，以更好地理解本發(fā)明。

化合物的制備

稱取干燥的老鼠簕根2.0kg，切成小片，加入95％EtOH(3×8.0L)，加熱至70℃左右，提取2h，提取3次。合并提取液，室溫減壓濃縮，得濃縮物。將濃縮物懸浮在水中，依次用石油醚和n-BuOH萃取。取n-BuOH萃取液，濃縮后得粗提物(20g)。取粗提物過硅膠柱(200-300目)，使用氯仿-丙酮(9:1→4:1→2:1)進(jìn)行梯度洗脫，得到6部分(Fr.A-F)。取Fr.C，使用Sephadex LH-20，以MeOH作為洗脫液，進(jìn)一步分離，得到6部分(subfracs.1-6)。取Subfracs.2，采用半制備高效液相色譜法(45％甲醇水溶液，2.0mL/min)進(jìn)行分離，得到式(1)所示化合物1。

結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1為白色無定型粉末，其紫外光譜顯示λ_max為336、287和250nm。經(jīng)高分辨電噴霧電離質(zhì)譜(high resolution electrospray ionization mass spectroscopy，HRESIMS)分析(m/z)，其化學(xué)式為C₂₄H₂₈O₁₄。其紅外光譜顯示了羥基基團(tuán)的吸收帶(3450cm^-1)，羰基和和芳香結(jié)構(gòu)(1608、1516cm^-1)其¹H NMR光譜顯示4個(gè)芳烴質(zhì)子[δ＝7.24(2H,s,H-2',6'),7.22(2H,s,H-2",H-6")]。¹H NMR數(shù)據(jù)還顯示了在δ_H 3.82(6H,s)和δ_H 3.80(6H,s)存在兩個(gè)甲氧基基團(tuán)。這些NMR信號(hào)表明，兩個(gè)苯環(huán)為丁香酸基團(tuán)(P.Parhoodeh,M.Rahmani,M.N.Hashim,M.A.Sukari,G.E.C.Lian(2010).Lignans and other constituents from aerial parts of Haplophyllum Villosum.Molecules.16,2268-2273.)這點(diǎn)也被其¹³C NMR光譜數(shù)據(jù)所印證：δ_C 57.0(3',5',3",5"-OMe),121.2(C-1'),108.6(C-2'),149.1(C-3'),142.7(C-4'),149.1(C-5'),108.6(C-6'),120.2(C-1"),108.5(C-2"),149.1(C-3"'),142.4(C-4"),149.1(C-5"),108.5(C-6")。其余的共振歸屬于一個(gè)葡糖基部分：[δ＝5.89(d,J＝8.4Hz,H-1),5.20(dd,J＝10.8,8.4Hz,H-2),3.89(dd,J＝12.0,1.2Hz,H-6a),3.84(t,J＝8.4Hz,H-4),3.75(dd,J＝12.0,4.8Hz,H-6b),3.56(m,H-3,5),94.8(C-1),75.1(C-2),79.4(C-5),71.6(C-4),75.8(C-3),62.4(C-6)]。根據(jù)上述總結(jié)，表明化合物1為一種丁香酸-葡萄糖苷衍生物(O.Hefer,R.(1981).Stereochemistry of tetrahydrofurofuran derivatives-circular dichroism and absolute conformation.Tetrahedron.37,1181-1186.)。根據(jù)H-1和C-7'的HMBC相關(guān)以及H-2和C-7″的相關(guān)可以確定丁香酸基團(tuán)和葡萄糖苷的聯(lián)系。經(jīng)GC分析鑒定知，酶法水解化合物1得到D-葡萄糖。因此，化合物1的被確定為式(1)所述化合物：

抗炎活性研究

RAW264.7細(xì)胞的培養(yǎng)和上清的制備

RAW246.7巨噬細(xì)胞加入含10％的胎牛血清、100U/mL青霉素、鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基，置于5％CO₂、37℃培養(yǎng)箱中生長。細(xì)胞培養(yǎng)至對(duì)數(shù)生長期，用0.25％胰蛋白酶消化，懸浮于含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，調(diào)整細(xì)胞濃度為1×10⁵/mL，接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔100μL，于37℃、5％CO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后，換含不同濃度化合物1的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)，并加入LPS，終濃度為1μg/mL，同時(shí)設(shè)定空白組、模型組、陽性對(duì)照組(氨基胍)，繼續(xù)孵育48h，收集細(xì)胞培養(yǎng)的上清液，進(jìn)行一氧化氮(NO)測定。

NO的測定

Griess試劑的制備：①1％對(duì)氨基苯磺酸溶于5％的磷酸中；②0.1％N-1-奈乙二胺鹽酸鹽；③臨用前將①和②等體積混合。

取100μL培養(yǎng)上清與100μLGriess試劑混合，37℃避光作用30min，在570nm處用酶標(biāo)儀測其吸收值，用DMEM培養(yǎng)基作空白對(duì)照，以亞硝酸鹽的濃度代表NO的水平，以亞硝酸鹽的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算上清液中NO的含量。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果

化合物1抑制NO生成的IC₅₀為12μM/mL，該化合物具有優(yōu)良的抗炎作用。

以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限制于以上描述的具體實(shí)施例。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，任何對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的等同修改和替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。