本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及VEGFR-2抑制劑及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
：持續(xù)性血管生成可以是各種疾病的誘因，例如血管瘤、血管纖維瘤、惡性腎壞死、栓塞性微血管病綜合癥、肝癌、胃腸道間質(zhì)瘤等等，或者可導(dǎo)致上述疾病的惡化。持續(xù)性血管生成是由血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)通過(guò)其受體誘發(fā)的，為使VEGF可發(fā)揮該作用，VEGF必須結(jié)合至受體，并誘發(fā)酪氨酸磷酸化。直接或者間接抑制VEGF受體可誘引治療此等疾病以及其他由VEGF誘發(fā)的病理性血管生成和血管滲透性病癥如腫瘤血管生產(chǎn)。例如，已知腫瘤的生長(zhǎng)可用可溶性受體以及抗VEGF的抗體來(lái)抑制。作為VEGF的主要受體，VEGFR-2主要在血管內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，可與VEGF-A以及VEGF-C相結(jié)合，刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖、增加血管通透性和新血管生成。許多由VEGF所引起的內(nèi)皮細(xì)胞生理或病理的改變主要是由VEGFR-2所介導(dǎo)，例如增殖、遷移、存活和通透性的改變等靶向VEGFR-2的小分子類腫瘤血管生成抑制劑是通過(guò)作用于VEGFR-2胞內(nèi)激酶活性區(qū)上的ATP結(jié)合位點(diǎn)，競(jìng)爭(zhēng)性抑制ATP與受體結(jié)合，抑制VEGFR-2自磷酸化，從而阻斷VEGF/VEGFR信號(hào)通路。從藥學(xué)角度來(lái)說(shuō)，研發(fā)針對(duì)VEGFR-2的小分子蛋白激酶抑制劑以用于治療與血管生長(zhǎng)有關(guān)的疾病是非常有價(jià)值的，本領(lǐng)域中現(xiàn)已公開(kāi)了多種抑制劑，如喹唑啉衍生物、苯并噻唑等激酶抑制，然而本領(lǐng)域仍然需要開(kāi)發(fā)新的蛋白酶抑制劑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種新的化合物、包含所述化合物的藥物組合物，以及將所述化合物或組合物用于治療由異常的VEGFR2所介導(dǎo)的疾病。本發(fā)明涉及一種通式I化合物：其中A代表或者n代表1或者2；X代表鹵素或者氫；R1代表環(huán)上任選的一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同的或不同的被鹵素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基，或者被基團(tuán)-OR3、-SR4、-SOR4、-SO2R4取代的芳基或雜芳基，或者被基團(tuán)-COOR5、-CONR6R7、-NHR15、-SR4、-SOR4、-SO2R4、-SCN、-PO(OR8)(OR9)、-CH＝CH-COR10或者-C≡C-R10取代或者不被取代的含氮芳香雜環(huán)；R2代表在苯環(huán)上任選的一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同或者不同的選自氫、鹵素、氰基、羥基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、C2-6烯基、氰基-C3-6環(huán)烷基、氰基-C1-6烷基、芳基-C1-6烷氧基、芳基氧基、C1-6烷基、鹵代-C1-6烷基或者基團(tuán)-SO2R4、OR3、-R3或-PO(OR8)(OR9)；或者，R2與苯環(huán)上任意相鄰的兩個(gè)碳原子一起形成C4-6環(huán)，該環(huán)可任選的包含氮原子、氧原子或硫原子，而且可任選的在一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同或者不同的被鹵素、氰基、C1-6烷基、鹵代-C1-6烷基、芳基或被基團(tuán)-OR3、-SR4、-SOR4或-SO2R4取代；R3代表氫、C1-12烷基、鹵代-C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基或者鹵代-C3-6環(huán)烷基，或者代表其中插入一個(gè)或者多個(gè)氧的C1-12烷基，或者代表基團(tuán)-(CH2)mNR6R7、-CH2CN或-CH2CF3；m代表1、2或者3；R4代表羥基、C1-6烷基、芳基、雜芳基或者代表基團(tuán)-NR6R7；R5代表氫或者代表任選被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代的C1-6烷基、C1-6烷氧基、芐基、芳基或雜芳基；R6和R7相互獨(dú)立的代表氫或者代表任選在一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同或者不同的被鹵素、氰基、C1-6烷基、苯基、羥基-C1-6烷基、鹵代-C1-6烷基或者被基團(tuán)-NR11R12、-OR3、C1-6烷基-OR3、-SR4、-SOR4或-SO2R4取代或者不被取代的C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基、C3-6環(huán)烯基、芳基或雜芳基，或者R6和R7與氮原子一起形成C3-8環(huán)，該環(huán)可任選的包含其他的氮、硫或氧原子，或者可包含基團(tuán)而且可任選在一個(gè)或多個(gè)位置處、相同或者不同的被鹵素、氰基、C16烷基、鹵代-C1-6烷基、芳基或被基團(tuán)-OR3、-SR4、-SOR4或-SO2R4取代；R8和R9相互獨(dú)立的代表氫或C1-6烷基；R10代表氫、C1-6烷基、三C1-6烷基甲硅烷基、芳基、雜芳基或者代表基團(tuán)-COR14；R11和R12相互獨(dú)立的代表氫或C1-6烷基，或者R11和R12一起形成5-7元環(huán)，該環(huán)可包含氧或硫原子或基團(tuán)-NR13；R13代表氫、C1-6烷基或芳基；R14代表氫、C1-6烷基或代表基團(tuán)-NR6R7；R15代表氫、烷基羰基、C3-6環(huán)烷基羰基、C1-6烷基磺?；?、C3-6環(huán)烷基磺?；?、4-C1-6烷基氨基磺?；交?-C3-6環(huán)烷基氨基磺?；交?。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R1代表環(huán)上任選的一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同的或不同的被鹵素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基，或者被基團(tuán)-OR3、-SO2R4取代的芳基或雜芳基，或者被基團(tuán)-COOR5、-CONR6R7、-NHR15、-SO2R4取代或者不被取代的含氮芳香雜環(huán)。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R1由下述結(jié)構(gòu)表示：其中，W、D、E相互獨(dú)立的代表氮或碳原子，其中至少有一個(gè)氮原子，至多有兩個(gè)氮原子；Y代表O或者NH；G代表氫或者任選在苯環(huán)的一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同的或者不同的選自鹵素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基，或者被基團(tuán)-OR3、-SO2R4取代的芳基或雜芳基，或者基團(tuán)-COOR5、-CONR6R7、-NHR15、-SO2R4；R15代表氫、C1-3烷基羰基、C3-4環(huán)烷基羰基、C1-3烷基磺酰基、環(huán)丙基磺?；?、4-C1-3烷基氨基磺?；交?、4-環(huán)丙基氨基磺酰基苯基。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R1由下述結(jié)構(gòu)表示：其中，W、D、E相互獨(dú)立的代表氮或碳原子，其中至少有一個(gè)氮原子，至多有兩個(gè)氮原子；Y代表O或者NH；G代表氫或者任選在苯環(huán)的一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同的或者不同的選自鹵素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基，或者被基團(tuán)-OR3、-SO2R4取代的芳基或雜芳基，或者基團(tuán)-COOR5、-CONR6R7、-NHR15、-SO2R4；R15代表氫、C1-3烷基羰基、C3-4環(huán)烷基羰基、C1-3烷基磺?；h(huán)丙基磺?；?、4-C1-3烷基氨基磺?；交?、4-環(huán)丙基氨基磺?；交?。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R2代表在苯環(huán)上任選的一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同或者不同的選自氫、鹵素、氰基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、氰基-C3-6環(huán)烷基、氰基-C1-6烷基、芳基-C1-6烷氧基、芳基氧基、C1-6烷基、鹵代-C1-6烷基或者基團(tuán)-R3，或者R2與苯環(huán)上任意相鄰的兩個(gè)碳原子一起形成C4-6環(huán)，該環(huán)可任選的包含氮原子、氧原子或硫原子，而且可任選的在一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同或者不同的被鹵素、氰基、C1-6烷基、鹵代-C1-6烷基、芳基或被基團(tuán)-OR3、-SO2R4取代。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R2代表在苯環(huán)上任選的一個(gè)或者兩個(gè)位置處、相同或者不同的選自氫、鹵素、氰基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、氰基-C3-6環(huán)烷基、氰基-C1-6烷基、芳基-C1-6烷氧基、芳基氧基、C1-6烷基、鹵代-C1-6烷基或者基團(tuán)-R3，或者R2與苯環(huán)上任意相鄰的兩個(gè)碳原子一起形成C4-6環(huán)，該環(huán)可包含氮原子，而且可任選的在一個(gè)或者多個(gè)位置處、相同或者不同的被鹵素、氰基、C1-6烷基、鹵代-C1-6烷基、芳基取代。在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，R1由下述結(jié)構(gòu)表示：其中，p代表1、2或者3；同時(shí)由下述結(jié)構(gòu)表示：本發(fā)明的化合物優(yōu)選的選自下列化合物：3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-1-(4-吡啶基甲基)吡啶-2(1H)-酮N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-2-氟-5-((4-吡啶基甲基)氨基)苯甲酰胺N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-((4-吡啶基甲基)氨基)苯甲酰胺3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-1-(2-(4-吡啶基)乙基)吡啶-2(1H)-酮N-(4-(3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-2-氧代吡啶基-1(2H)-甲基)吡啶-2-基)乙酰胺3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-1-((2-((4-甲磺?；?苯基)氨基)吡啶-4-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-2-氟-5-(((2-((4-(甲磺?；?苯基)氨基)吡啶-4-基)甲基)氨基)苯甲酰胺N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(((2-((4-(甲磺?；?苯基)氨基)吡啶-4-基)甲基)氨基)苯甲酰胺4-(3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-2-氧代吡啶基-1(2H)-甲基)-N-環(huán)丙基吡啶酰胺4-(((3-((4-氯-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲?；?-4-氟苯基)氨基)甲基)-N-環(huán)丙基吡啶酰胺4-(((3-((4-氯-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)苯基)氨基)甲基)-N-環(huán)丙基吡啶酰胺3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-1-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-5-(((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)甲基)氨基)-2-氟-苯甲酰胺N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)甲基)氨基)苯甲酰胺3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-1-((6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)甲基)吡啶-2(1H)-酮N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-5-(((6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)甲基)氨基)-2-氟-苯甲酰胺N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(((6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)甲基)氨基)苯甲酰胺2-甲基-2-(4-(((2-氧代-1-(4-吡啶基甲基)-1,2-二氫吡啶-3-基)氨基)甲基)苯基)丙腈2-甲基-2-(4-(((2-氧代-1-(2-(4-吡啶基)乙基)-1,2-二氫吡啶-3-基)氨基)甲基)苯基)丙腈N-(4-(2-氰基丙烷-2-基)苯基)-3-((4-吡啶基甲基)氨基)苯甲酰胺N-(4-(2-氰基丙烷-2-基)苯基)-2-氟-5-((4-吡啶基甲基)氨基)苯甲酰胺4-((2-氧代-3-((4-三氟甲氧基)苯基)氨基)吡啶-1(2H)-基)甲基)吡啶甲酸甲酯1-((4-氨基噻吩[2.3-d]并嘧啶-5-基)甲基)-3-((4-苯氧基芐基)氨基)吡啶-2(1H)-酮5(((4-氨基噻吩[2.3-d]并嘧啶-5-基)甲基)氨基)-2-氟代-N-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)苯甲酰胺4-(((3-((3,3-二甲基吲哚啉-6-基)氨基甲?；?-4-氟代苯基)氨基)甲基)吡啶甲酸甲酯本發(fā)明的化合物可以由任何常規(guī)手段制備，實(shí)施例中提供了合成這些化合物的合適的方法。通常，可以根據(jù)下面描述的合成路徑制備式I化合物。1)當(dāng)A代表時(shí)，通式I化合物由結(jié)構(gòu)式表示，其合成方法可參照方案(一)或者方案(二)進(jìn)行：方案(一)其中，R1、R2、n如通式I中定義。當(dāng)通式I’化合物中的n代表2時(shí)，其合成方法還可參照方案(二)進(jìn)行：方案(二)：其中，R1、R2如通式I中定義。2)當(dāng)A代表時(shí)，通式I化合物由結(jié)構(gòu)式表示，其合成方法可參照方案(三)或者方案(四)進(jìn)行：方案(三)：其中，R1、R2、X如通式I中定義。方案(四)：其中，R1、R2、X如通式I中定義。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它包含至少一種本發(fā)明所述化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、結(jié)晶或混合物以及至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑、或輔助劑、或載體。本發(fā)明還提供了一種通式I化合物對(duì)VEGFR-2抑制活性影響的測(cè)試方法，具體的包括：將含有0.01M的磷酸鈉緩沖液(pH7.2-7.4)，0.15M的氯化鈉溶液以及酶促反應(yīng)底物的酶標(biāo)版中加入反應(yīng)緩沖液稀釋過(guò)的ATP溶液以及VEGFR-2蛋白。隨后設(shè)置實(shí)驗(yàn)組及空白組，即分別在上述體系中加入含待測(cè)化合物反應(yīng)液及不含待測(cè)化合物反應(yīng)液，依次加入一抗PY99，37℃搖床反應(yīng)0.5小時(shí)，二抗辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗鼠的IgG，37℃搖床反應(yīng)0.5小時(shí)。最后加入OPD顯色液反應(yīng)10分鐘后加入硫酸終止反應(yīng)，測(cè)定吸光度OD值?；衔锏囊种坡释ㄟ^(guò)下列公式求得：使用上述方法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的許多化合物具有的抑制率≥10％；本發(fā)明優(yōu)選的化合物具有的抑制率≥30％；本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的化合物具有的抑制率≥50％；由此確定，本發(fā)明化合物的效應(yīng)為一種有效的VEGFR-2抑制劑。根據(jù)本發(fā)明，通式I化合物可基于它們相對(duì)于VEGF受體的磷酸化作用的抑制活性用作藥物。根據(jù)它們的作用模式，本發(fā)明提供的化合物適合用于治療由持續(xù)性血管生成導(dǎo)致的疾病。由于通式I化合物已確定為VEGFR-2抑制劑，所以它們特別適合治療那些由VEGF受體導(dǎo)致的持續(xù)血管生成或者血管滲透性增加而引發(fā)或促進(jìn)的疾病。本發(fā)明還涉及本發(fā)明所述化合物在制備用于治療由由持續(xù)性血管生成導(dǎo)致的疾病的藥物中的應(yīng)用。術(shù)語(yǔ)解釋本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“烷基”是指其中所有碳-碳鍵都是單鍵的支鏈或者直鏈烴基，而術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”是指含有3-6個(gè)碳原子的單環(huán)。本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“鹵代C1-6烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)相同或者不同的鹵素原子取代的含有1-6個(gè)碳原子的烷基，術(shù)語(yǔ)“鹵代C3-6環(huán)烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)相同或者不同的鹵素原子取代的含有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，術(shù)語(yǔ)“氰基C1-6烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)氰基取代的含有1-6個(gè)碳原子的烷基，而術(shù)語(yǔ)“氰基C3-6環(huán)烷基”是指被一個(gè)或者多個(gè)氰基取代的含有3-6個(gè)碳原子的環(huán)烷基。本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“烯基”是指其中一個(gè)或者多個(gè)碳-碳鍵是雙鍵的支鏈或者直鏈烴基，而術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”是指含有3-6個(gè)碳原子的單環(huán)，其中一個(gè)或者多個(gè)碳-碳鍵為雙鍵。本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“烷氧基”是指-OR基團(tuán)，其中R是指烷基，如上述定義。本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“鹵代C1-6烷氧基”是指被一個(gè)或者多個(gè)相同或者不同的鹵素原子取代的含有1-6個(gè)碳原子的烷氧基。本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“芳基”是指6-14個(gè)碳原子的單環(huán)或者多環(huán)的烴基，所述烴基是具有至少一個(gè)提供基團(tuán)連接點(diǎn)的芳環(huán)。多環(huán)芳基可具有其中至少一個(gè)環(huán)為芳環(huán)的孤立環(huán)(例如二苯基)或者稠環(huán)(例如萘基)。本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指6-14個(gè)碳原子的單環(huán)或者多環(huán)的烴基，所述環(huán)中含有一個(gè)或者多個(gè)氮原子、氧原子或者硫原子，所述烴基是具有至少一個(gè)提供基團(tuán)連接點(diǎn)的芳環(huán)。本發(fā)明所用的“含氮芳香雜環(huán)”是指5-14個(gè)碳原子的單環(huán)或者多環(huán)的烴基，所述環(huán)中含有至少一個(gè)氮原子，所述烴基是具有至少一個(gè)提供基團(tuán)連接點(diǎn)的芳環(huán)。下表所列的是出現(xiàn)在本發(fā)明中的英文縮寫及其所代表的中英文全稱，如有不含于下表中的英文縮寫出現(xiàn)在本發(fā)明中，則代表其得到普遍接受的含義。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述，但本發(fā)明的保護(hù)內(nèi)容不僅限于這些實(shí)施例。下列實(shí)施例中所用方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。本發(fā)明所述的原料和試劑可以通過(guò)市售購(gòu)買或者通過(guò)簡(jiǎn)單合成獲得。實(shí)施例1：3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-1-(4-吡啶基甲基)吡啶-2(1H)-酮(化合物1)步驟A：化合物1-a的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入4-氯甲基吡啶鹽酸鹽(39.3mmol)，3-硝基-2-吡啶酮(35.7mmol)，碳酸鉀(89.2mmol)以及DMF(250mL)，體系50℃攪拌4小時(shí)后，加水(250mL)稀釋，EA(3*250mL)萃取，飽和氯化鈉(100mL)洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離(先用EA,再用DCM:MeOH＝20:1)得到黃色固體(化合物1-a)共8g。步驟B：化合物1-b的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入1-a(26mmol)，Pd/C(0.6g)以及甲醇(30mL)，體系加壓(0.4bar)氫化，攪拌4小時(shí)后，過(guò)濾除去Pd/C，減壓蒸干溶劑，得到褐色固體(化合物1-b)共4.2g。步驟C：化合物1的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入1-b(9.4mmol)，4-氯-3-三氟甲基苯甲醛(10.4mmol)，DCM(50mL)以及5滴AcOH，體系室溫?cái)嚢?小時(shí)后僅有極少量產(chǎn)物生成，減壓蒸干溶劑，加入乙醇(40mL)，油浴加熱回流4小時(shí)發(fā)現(xiàn)原料僅余少量，體系冷卻后加入NaBH(OAc)3(14mmol)，室溫?cái)嚢?小時(shí)，反應(yīng)完全，加入飽和NaHCO3(20mL)淬滅，EA(3*100mL)萃取，飽和NaCl(100mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離得到粗品1.2g，將上述粗品溶于(10mL)DCM:MeOH＝20:1的混合溶劑中，室溫?cái)嚢柘轮鸬渭尤隕A至恰好有固體析出，攪拌0.5小時(shí)后，過(guò)濾，EA(2mL)洗滌得到類白色固體(化合物1)共500mg。1HNMR(400MHz,DMSO)δ8.54(d,J＝6.4Hz,2H),7.83(s,1H),7.68(d,J＝8.3Hz,1H),7.62(d,J＝8.3Hz,1H),7.44(d,J＝6.4Hz,2H),7.04(dd,J＝5.4,3.0Hz,1H),6.42(t,J＝6.5Hz,1H),6.16(s,1H),6.15(d,J＝2.5Hz,1H),5.29(s,2H),4.39(d,J＝6.5Hz,2H).實(shí)施例2：N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-2-氟-5-((4-吡啶基甲基)氨基)苯甲酰胺(化合物2)步驟A：化合物2-a的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入2-氟-5-硝基苯甲酸(27mmol)，DCM(100mL)，10滴DMF，0℃攪拌下逐滴加入草酰氯(81mmol)，滴畢后移至室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓蒸干溶劑以及多余的草酰氯，隨后加入DCM(100mL)，TEA(40.5mmol)，以及2-氯-5-氨基三氟甲基苯(27mmol)，室溫?cái)嚢?小時(shí)，減壓蒸干溶劑，加入丙酮(8mL)溶解，室溫?cái)嚢柘轮鸬渭尤隕A至恰好有固體析出，得到白色固體(化合物2-a)共9.2g。步驟B：化合物2-b的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入2-a(16.6mmol)，鐵屑(165.5mmol)，乙醇(100ml)以及60滴ACOH，加熱回流攪拌6小時(shí)，冷卻至室溫，過(guò)濾，濾液減壓蒸干，柱層析分離(洗脫劑為PE/EA)，得到黃色固體(化合物2-b)共6g。步驟C：化合物2的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入2-b(12mmol)，4-氯甲基吡啶鹽酸鹽(36mmol)，NaH(24mmol)，NaI(12mmol)以及DMF(150mL)，體系60℃攪拌20小時(shí)后，加水(150mL)稀釋，EA(3*150mL)萃取，飽和NaCl(150mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，加入活性炭(15g)回流攪拌1小時(shí)脫色，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離(DCM/MeOH體系)得到粗品，將上述粗品EA(15mL)打漿，過(guò)濾，隨后再加入甲醇(10mL)打漿，過(guò)濾，得到類白色固體(化合物2)。1HNMR(400MHz,DMSO)δ10.69(s,1H),8.51(d,J＝5.9Hz,2H),8.30(d,J＝2.0Hz,1H),7.98(dd,J＝8.9,2.0Hz,1H),7.71(d,J＝8.8Hz,1H),7.35(d,J＝5.7Hz,2H),7.08(t,J＝9.4Hz,1H),6.81(dd,J＝5.6,3.0Hz,1H),6.71(dt,J＝8.6,3.6Hz,1H),6.59(t,J＝6.3Hz,1H),4.36(d,J＝6.2Hz,2H).實(shí)施例3：N-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-((4-吡啶基甲基)氨基)苯甲酰胺(化合物3)步驟A：化合物3-a的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入3-氨基苯甲酸(145.8mmol)以及甲醇(250mL)，體系0℃攪拌下滴加SOCl2(218.7mmol)，滴畢后室溫?cái)嚢?0小時(shí)，減壓蒸干溶劑，EA(80mL)打漿，過(guò)濾，得到白色固體(化合物3-a)共26g。步驟B：化合物3-b的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入3-a(53.3mmol)，4-氯甲基吡啶鹽酸鹽(79.9mmol)，K2CO3(239.8mmol)，NaI(7.99mmol)以及DMF(250mL)，體系40℃攪拌20小時(shí)后，加水(250mL)稀釋，EA(3*250mL)萃取，飽和NaCl(250mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離(DCM/MeOH體系)，得到粗品固體(化合物3-b)共6g。步驟C：化合物3的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入tBuOK(16.5mmol)以及THF(50mL)，室溫?cái)嚢?min，迅速加入3-b(8.3mmol)以及2-氯-5-氨基三氟甲苯(8.3mmol)，體系室溫?cái)嚢?小時(shí)，減壓蒸干溶劑，加水(50mL)稀釋，EA(3*50mL)萃取，飽和NaCl(50mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離(DCM/MeOH體系)得到粗品，將上述粗品EA(10mL)打漿，過(guò)濾，隨后再加入甲醇(5mL)打漿，過(guò)濾，得到類白色固體(化合物3)。1HNMR(400MHz,DMSO)δ10.48(s,1H),8.51(dd,J＝4.5,1.5Hz,2H),8.35(d,J＝2.5Hz,1H),8.08(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.69(d,J＝8.8Hz,1H),7.36(d,J＝5.9Hz,2H),7.23(t,J＝7.8Hz,1H),7.14(dd,J＝10.9,4.9Hz,2H),6.77(dd,J＝8.0,1.7Hz,1H),6.70(t,J＝6.2Hz,1H),4.40(d,J＝6.2Hz,2H).實(shí)施例4：3-((4-氯-3-(三氟甲基)芐基)氨基)-1-(2-(4-吡啶基)乙基)吡啶-2(1H)-酮(化合物4)步驟A：化合物4-a的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入4-乙烯基吡啶(71.4mmol)，3-硝基-2-吡啶酮(35.7mmol)以及乙醇(200mL)，體系由室溫加熱至80℃，攪拌10小時(shí)后，冷卻至室溫，減壓蒸干溶劑，柱層析分離(先用EA,再用DCM:MeOH＝20:1)，得到黃色固體(化合物4-a)共8g。步驟B：化合物4-b的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入4-a(24.5mmol)，Pd/C(0.6g)以及甲醇(30mL)，體系加壓(0.4bar)氫化，攪拌4小時(shí)后，過(guò)濾除去Pd/C，減壓蒸干溶劑，得到褐色固體(化合物4-b)共5g。步驟C：化合物4的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入4-b(9.3mmol)，4-氯-3-三氟甲基苯甲醛(25.7mmol)，DCM(50mL)，NaBH(OAc)3(6.4g)，以及5滴AcOH，體系室溫?cái)嚢?0小時(shí)后，加入飽和NaHCO3(20mL)淬滅，EA(3*150mL)萃取，飽和NaCl(150mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離得到藍(lán)色粗品1.7g，將上述粗品恰好溶于DCM:MeOH＝20:1的混合溶劑中，室溫?cái)嚢柘轮鸬渭尤隕A至恰好有固體析出，攪拌0.5小時(shí)后，過(guò)濾，EA(10mL)洗滌得到類白色固體(化合物4)。1HNMR(400MHz,DMSO)δ8.45(d,J＝6.2Hz,2H),7.81(s,1H),7.68(d,J＝8.2Hz,1H),7.58(d,J＝8.3Hz,1H),7.52(d,J＝6.3Hz,2H),6.81(dd,J＝6.6,1.4Hz,1H),6.36(t,J＝6.6Hz,1H),6.04(d,J＝5.9Hz,1H),5.99(t,J＝7.0Hz,1H),4.37(d,J＝6.4Hz,2H),4.23(t,J＝7.1Hz,2H),3.15(t,J＝7.1Hz,2H).實(shí)施例5：化合物5-11以與實(shí)施例1或者實(shí)施例4類似的方法依次進(jìn)行步驟A、B、C三步反應(yīng)合成化合物5-13，如下表所示：實(shí)施例6：化合物14-25以與實(shí)施例2或者實(shí)施例3類似的方法依次進(jìn)行步驟A、B、C三步反應(yīng)合成化合物14-25，如下表所示：上述化合物的合成過(guò)程中涉及的部分原料合成如下列各實(shí)施例所示：實(shí)施例7：N-(4-(氯甲基)吡啶-2-基)乙酰胺鹽酸鹽(化合物26)反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入乙酸(27mmol)，DCM(100mL)，10滴DMF，0℃攪拌下逐滴加入草酰氯(81mmol)，滴畢后移至室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓蒸干溶劑以及多余的草酰氯，隨后加入DCM(100mL)，TEA(40.5mmol)，以及2-氨基-4-氯甲基吡啶鹽酸鹽(27mmol)，室溫?cái)嚢?小時(shí)，減壓蒸干溶劑，加入丙酮(8mL)溶解，室溫?cái)嚢柘轮鸬渭尤隕A至恰好有固體析出，得到白色固體(化合物26)共4.6g。實(shí)施例8：N-(4-(氯甲基)吡啶-2-基)環(huán)丙基甲酰胺(化合物27)以與實(shí)施例7類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例9：N-(4-(氯甲基)吡啶-2-基)甲磺酰胺(化合物28)以與實(shí)施例7類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例10：4-氯甲基-N-(4-(甲磺?；?苯基)吡啶-2-胺(化合物29)反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入2-氨基-4-氯甲基吡啶鹽酸鹽(53.3mmol)，4-氯苯基甲基砜(79.9mmol)，K2CO3(239.8mmol)，NaI(7.99mmol)以及DMF(250mL)，體系40℃攪拌20小時(shí)后，加水(250mL)稀釋，EA(3*250mL)萃取，飽和NaCl(250mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離，得到粗品(化合物29)共7.9g。實(shí)施例11：4-((4-(氯甲基)吡啶-2-基)氨基)-N-甲基苯磺酰胺(化合物30)以與實(shí)施例10類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例12：4-((4-(氯甲基)吡啶-2-基)氨基)-N-甲基苯甲酰胺(化合物31)以與實(shí)施例10類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例13：2-甲氧基羰基-4-(氯甲基)吡啶(化合物32)反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入4-(羥甲基)吡啶-2-羧酸(145.8mmol)，甲醇(150mL)以及DCM(150mL)，體系氮?dú)獗Ｗo(hù)下，0℃攪拌下逐滴滴加SOCl2(1.46mol)，滴畢室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓蒸干溶劑，EA(80mL)打漿，過(guò)濾，得到白色固體(化合物32)共22g。實(shí)施例14：(4-(氯甲基)吡啶-2-基)-N-環(huán)丙基甲酰胺(化合物33)反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入4-(羥甲基)吡啶-2-羧酸(145.8mmol)，DCM(200mL)以及10滴DMF，0℃攪拌下逐滴加入SOCl2(1.75mol)，滴畢移至室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓蒸干溶劑，隨后加入DCM(100mL)，TEA(40.5mmol)，以及環(huán)丙胺(175mmol)，室溫?cái)嚢?小時(shí)，減壓蒸干溶劑，室溫?cái)嚢柘轮鸬渭尤隕A至恰好有固體析出，得到白色固體(化合物33)共26g。實(shí)施例15：4-氯甲基-6,7-二甲氧基喹啉(化合物34)反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入4-甲醇基-6,7-二甲氧基喹啉(145.8mmol)，DCM(150mL)，體系氮?dú)獗Ｗo(hù)下，0℃攪拌下逐滴滴加SOCl2(1.46mol)，滴畢室溫?cái)嚢?小時(shí)后，減壓蒸干溶劑，EA(90mL)打漿，過(guò)濾，得到粉色固體(化合物34)共27g。實(shí)施例16：4-溴甲基-6,7-二甲氧基喹唑啉(化合物35)反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入6,7-二甲氧基-4-甲基喹唑啉(147mmol)，NBS(147mmol)，過(guò)氧化苯甲酰(25mmol)，以及四氯化碳(300mL)，體系加熱回流5小時(shí)，冷卻后體系依次加入水(250mL)，DCM(3*250mL)萃取，飽和NaCl(250mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，柱層析分離，得到粉色固體(化合物35)共14.2g。實(shí)施例17：4-溴甲基-7-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶(化合物36)以與實(shí)施例16類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例18：5-(溴甲基)噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-胺(化合物37)以與實(shí)施例16類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例19：化合物38步驟A：化合物38-a的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入對(duì)甲基苯乙腈(500mmol)，DMF(1000mL)，0℃攪拌下加入鈉氫(1mol)，保溫?cái)嚢?.5小時(shí)，移至室溫下加入碘甲烷(1mol)，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，加入甲醇(100mL)淬滅，隨后依次加水(250mL)，DCM(3*250mL)萃取，飽和NaCl(250mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，得到黃色油狀物(化合物38-a)共65g。步驟B：化合物38-b的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入38-a(100mmol)，吡啶(100mL)，水(200mL)，以及高錳酸鉀(500mmol)，體系加熱回流2小時(shí)，減壓蒸除吡啶，熱濾，濾液6MHCl酸化至pH為5-6，析出的固體過(guò)濾干燥，得到化合物38-b共15.2g。步驟C：2-(4-甲酰基苯基)-2-甲基丙腈(化合物38)化合物38的合成：反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入38-b(74mmol)，THF(200mL)，體系降溫至-20℃，攪拌下逐滴加入LiAlH4(285mmol)，保溫?cái)嚢?小時(shí)，隨后室溫?cái)嚢?小時(shí)，加入飽和氯化銨(300mL)淬滅，隨后加入氫氧化鈉(200mL)，攪拌1小時(shí)后加入水(150mL)，過(guò)濾，濾液用乙醚(150mL)洗滌，有機(jī)相濃縮，得到中間體粗品，置于反應(yīng)瓶中，隨后加入DCM(300mL)，體系置于冰浴攪拌，加入PCC(230mmol)，繼續(xù)攪拌1小時(shí)，隨后加入飽和碳酸氫鈉(50mL)淬滅，隨后依次加水(250mL)，DCM(3*250mL)萃取，飽和NaCl(250mL)洗滌，無(wú)水Na2SO4干燥，過(guò)濾，減壓蒸干溶劑，得到黃色油狀物(化合物38)共4.6g。實(shí)施例20：1-(4-甲酰基苯基)-1-氰基-環(huán)戊烷(化合物39)以與實(shí)施例19類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例21：1-(4-甲酰基苯基)-1-氰基-環(huán)丙烷(化合物40)以與實(shí)施例19類似的方法合成標(biāo)題化合物。實(shí)施例22:在本發(fā)明的某些化合物存在時(shí)對(duì)VEGFR-2激酶活性的抑制作用將含有0.01M的磷酸鈉緩沖液(pH7.2-7.4)，0.15M的氯化鈉溶液以及酶促反應(yīng)底物的酶標(biāo)版中加入反應(yīng)緩沖液稀釋過(guò)的ATP溶液以及VEGFR-2蛋白。隨后設(shè)置實(shí)驗(yàn)組及空白組，即分別在上述體系中加入10μM化合物1的反應(yīng)液及不含化合物1的反應(yīng)液，依次加入一抗PY99，37℃搖床反應(yīng)0.5小時(shí)，二抗辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記羊抗鼠的IgG，37℃搖床反應(yīng)0.5小時(shí)。最后加入OPD顯色液反應(yīng)10分鐘后加入硫酸終止反應(yīng)，測(cè)定吸光度OD值，并通過(guò)以下公式計(jì)算抑制率：結(jié)果如下表所示：濃度(μM)抑制率(％)化合物21054.73化合物31090.25化合物41018.00化合物241099.89此外，本發(fā)明還根據(jù)專利ZL200480021091.1進(jìn)行了小鼠VEGFR-2生化檢測(cè)(參見(jiàn)專利ZL200480021091.1，第31頁(yè)，實(shí)施例8)，本發(fā)明所述化合物也表現(xiàn)出對(duì)VEGFR-2激酶的顯著抑制，其中某些化合物對(duì)VEGFR-2激酶活性的抑制作用表現(xiàn)出1μM甚至更低的IC50值。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3