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一種快速顯色一步法檢測(cè)豬細(xì)小病毒的LAMP試劑盒的制作方法

文檔序號(hào):12250029閱讀:來源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.用于檢測(cè)豬細(xì)小病毒的特異性LAMP引物組,其特征在于:所述引物組為以下六條引物:

F3:5'-gCACACgCATCAAgACTCATAC-3',

B3:5'-TggTggTgAggTTgCTgATTC-3',

FIP:5'-gCATCgTCTTgTACCATTTgTCCCTgCCAgAACACgAAACATACAA-3',

BIP:5'-CCTTggTCACTAATAgATgCTAACgCAgTTTATTTCTgTCATgTTgTTggA-3',

FLoop:5'-TAAATTCAgAATCAggggTggC-3',

BLoop:5'-gCCAgTCCgCTggATTgAA-3'。

2.一種快速顯色一步法檢測(cè)豬細(xì)小病毒的LAMP試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的引物組。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒,其特征在于:還包括含有鈣黃素和錳離子的熒光染料。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒,其特征在于:所述熒光染料的用量為在25μL檢測(cè)體系中含有0.4-1.0μL。

5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任一所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒構(gòu)成LAMP檢測(cè)體系;25μL檢測(cè)體系的具體配置為:

PM預(yù)混引物:FIP/BIP (50UM) 0.4μL

FLOOP/BLOOP (50UM) 0.4μL

F3/B3 (10UM) 0.2μL

提取DNA 1.0-2.0μL

Bst酶 1.5μL

2×U-loadmix buffer 12.5μL

含有鈣黃素和錳離子的榮研Loopamp 熒光染料 0.4-1.0μL

DEPC-treated ddH2O 補(bǔ)充至25.0μL 。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒的檢測(cè)反應(yīng)條件為:63-65℃,45-90分鐘;終止反應(yīng)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒的檢測(cè)反應(yīng)條件為:63℃,45-60分鐘;終止反應(yīng)。

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