1.用于檢測(cè)豬細(xì)小病毒的特異性LAMP引物組,其特征在于:所述引物組為以下六條引物:
F3:5'-gCACACgCATCAAgACTCATAC-3',
B3:5'-TggTggTgAggTTgCTgATTC-3',
FIP:5'-gCATCgTCTTgTACCATTTgTCCCTgCCAgAACACgAAACATACAA-3',
BIP:5'-CCTTggTCACTAATAgATgCTAACgCAgTTTATTTCTgTCATgTTgTTggA-3',
FLoop:5'-TAAATTCAgAATCAggggTggC-3',
BLoop:5'-gCCAgTCCgCTggATTgAA-3'。
2.一種快速顯色一步法檢測(cè)豬細(xì)小病毒的LAMP試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括權(quán)利要求1所述的引物組。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒,其特征在于:還包括含有鈣黃素和錳離子的熒光染料。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒,其特征在于:所述熒光染料的用量為在25μL檢測(cè)體系中含有0.4-1.0μL。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4任一所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒構(gòu)成LAMP檢測(cè)體系;25μL檢測(cè)體系的具體配置為:
PM預(yù)混引物:FIP/BIP (50UM) 0.4μL
FLOOP/BLOOP (50UM) 0.4μL
F3/B3 (10UM) 0.2μL
提取DNA 1.0-2.0μL
Bst酶 1.5μL
2×U-loadmix buffer 12.5μL
含有鈣黃素和錳離子的榮研Loopamp 熒光染料 0.4-1.0μL
DEPC-treated ddH2O 補(bǔ)充至25.0μL 。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒的檢測(cè)反應(yīng)條件為:63-65℃,45-90分鐘;終止反應(yīng)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒,其特征在于:所述試劑盒的檢測(cè)反應(yīng)條件為:63℃,45-60分鐘;終止反應(yīng)。