技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種氮雜螺酮類化合物，具體涉及坦度螺酮硫酸鹽及其制備方法和用途。屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：坦度螺酮屬于氮雜螺酮類藥物，化學(xué)名為(3aα,4β,7β,7aα)-六氫-2-[4[4-(2-嘧啶基)-1-(哌嗪基)-丁基]-4,7-亞甲基-1H-異吲哚-1,3(2H)-二酮，分子結(jié)構(gòu)式如下：坦度螺酮最早是由日本住友制藥株式會社研制而成，于1996年在日本獲準上市。它是一種5-羥色胺受體激動劑，屬于第3代抗焦慮藥，主要用于治療焦慮或其他伴焦慮狀態(tài)的疾病。在腦內(nèi)，它能與集中分布在情感中樞的海馬、中隔、腳間核、杏仁核等大腦邊緣系統(tǒng)以及縫腺核的5-HT1A受體選擇性地結(jié)合，通過激動5-HT1A自身受體，調(diào)節(jié)從中縫核投射至海馬的5-羥色胺，抑制行動抑制系統(tǒng)的5-羥色胺效應(yīng)，發(fā)揮抗焦慮作用。相較于原形藥物氮雜螺酮和同類衍生物丁螺環(huán)酮，坦度螺酮具有更高的選擇性抗焦慮作用，這種作用與地西泮相近，但在神經(jīng)運動性功能損害和藥物濫用等方面的毒副作用卻比地西泮小。由于作用機制的特異性，坦度螺酮及其鹽在臨床上用于治療焦慮癥時，具有用藥安全性高、副反應(yīng)少、無松弛肌肉和鎮(zhèn)靜作用、無依賴性和停藥戒斷現(xiàn)象、長期應(yīng)用后在體內(nèi)無蓄積等優(yōu)點。還有研究表明，坦度螺酮及其鹽除了抗焦慮的作用外，在其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療或輔助性治療方面也具有相當(dāng)好的應(yīng)用。坦度螺酮及其鹽具有一定的抗抑郁作用，對于混合有焦慮和抑郁的病人療效十分顯著，并且可以通過抗焦慮和抗抑郁效應(yīng)改善植物神經(jīng)癥狀，如腸激惹綜合征、功能性消化不良、術(shù)后惡心和嘔吐等。它還是治療中樞性神經(jīng)系統(tǒng)共濟失調(diào)的有效藥物，可以明顯改善患者小腦共濟失調(diào)的癥狀。對于患有神經(jīng)衰弱、老年癡呆或者精神分裂的患者，它還能有效提高記憶力，治療增齡性記憶障礙，顯著改善精神分裂癥患者的陳述性記憶、邏輯記憶和口語成對聯(lián)想等。此外，有研究表明作為5-羥色胺受體激動劑的坦度螺酮及其鹽還具有降眼壓的活性，可以用于治療由于內(nèi)皮細胞增殖、炎癥、血管滲透性提高或血管生成等引起的眼部疾病，例如糖尿病性視網(wǎng)膜病、年齡相關(guān)性黃斑變性、視網(wǎng)膜水腫、青光眼等等。可見，坦度螺酮及其鹽具有非常良好的臨床治療優(yōu)勢和廣闊的市場前景。在臨床用藥中，有近一半的藥物分子都是以鹽的形式存在和給藥的。用帶相反電荷的分子或離子與藥物進行成鹽，可以有效改善藥物某些不理想的物理化學(xué)或生物藥學(xué)性質(zhì)，例如改變藥物的溶解度、降低吸濕性、提高穩(wěn)定性、改變?nèi)埸c、改善研磨性能、便于制備純化、提高滲透性等等。坦度螺酮的水溶性差，成鹽后可以有效改善其水溶性和物理化學(xué)穩(wěn)定性，提高生物利用度，因此，坦度螺酮鹽在醫(yī)學(xué)應(yīng)用中往往比其原形藥物坦度螺酮更具有優(yōu)勢，有利于最大限度的發(fā)揮出藥物的作用。例如目前市場上銷售的主要為枸櫞酸坦度螺酮，它通常以片劑或膠囊劑的形式廣泛應(yīng)用于焦慮癥等相關(guān)疾病的治療，具有比較成熟的臨床應(yīng)用研究。目前，針對坦度螺酮鹽的研究主要集中在枸櫞酸鹽。例如，US4507303、US4818756、CN101362751A等文獻中報道了枸櫞酸坦度螺酮的制備方法。目前還未見坦度螺酮硫酸鹽晶型的相關(guān)報道。眾所周知，對于藥物而言，不同成鹽形式的化合物可能具有不同的晶型，同一種成鹽形式的化合物還可能存在多晶型。而不同的晶型又有可能具有不同的顏色、熔點、穩(wěn)定性、表觀溶解度、溶解速率等等，這些性質(zhì)會直接影響到藥物制劑的穩(wěn)定性、溶解度、吸濕性、生物利用度等，并由此導(dǎo)致藥品質(zhì)量和臨床藥效的差異。無定型是一種特殊的晶型狀態(tài)，是多晶型藥物的一種存在形式。藥物以無定型的形態(tài)存在時，其理化性質(zhì)及臨床藥效特征常有別于一般的晶型藥物。無定型狀態(tài)的固體藥物往往具有較好的體外溶出和體內(nèi)吸收性質(zhì)，并有可能起到更好的臨床效果。因此，對于坦度螺酮硫酸鹽的相關(guān)晶型的制備與研究是非常有意義的。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供性質(zhì)穩(wěn)定，水溶性良好的硫酸坦度螺酮無定型和晶型I以及它們的制備方法、藥物組合物和用途。本發(fā)明提供了一種無定型硫酸坦度螺酮化合物，采用CuKα輻射源對本化合物進行X射線粉末衍射，其X射線粉末衍射圖中無特征峰；優(yōu)選地，該化合物具有基本如圖1、圖2或者圖3所示的X射線粉末衍射圖特征。本發(fā)明無定型硫酸坦度螺酮化合物的結(jié)構(gòu)式為：本發(fā)明還提供了上述無定型硫酸坦度螺酮的制備方法，它包括如下操作工序：A、取坦度螺酮，加入溶劑1，加熱溶解，再加入硫酸溶液，待反應(yīng)完全，反應(yīng)液備用；B、反應(yīng)液濃縮，即得無定型硫酸坦度螺酮；或者，C、反應(yīng)液濃縮后，再加入溶劑2溶解，濃縮得到無定型硫酸坦度螺酮。其中，步驟A中所述硫酸溶液是硫酸水溶液、硫酸甲醇溶液、硫酸乙醇溶液中的任意一種。進一步地，所述硫酸水溶液質(zhì)量分數(shù)為10％-40％，更優(yōu)選為20％-30％。進一步地，所述硫酸甲醇溶液質(zhì)量分數(shù)為5％-25％，更優(yōu)選為10％-20％。進一步地，所述硫酸乙醇溶液質(zhì)量分數(shù)為5％-25％，更優(yōu)選為10％-20％。進一步地，步驟A中，所述溶劑1選自醇類溶劑、酮類溶劑、醚類溶劑、酯類溶劑、乙腈的任意一種或其組合，優(yōu)選甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、異丙醇、四氫呋喃的任意一種或其組合。進一步地，步驟A中，加熱溶解溫度為30-100℃，優(yōu)選30-80℃。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與硫酸的摩爾比小于等于1∶1。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與溶劑1的質(zhì)量體積比為1∶1-30g/mL。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與硫酸的摩爾比為1：1-2。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與溶劑1的質(zhì)量體積比為1∶3-20g/mL。進一步地，步驟C中，所述溶劑2選自醇類溶劑、酮類溶劑、醚類溶劑、酯類溶劑、乙腈的任意一種或其組合，優(yōu)選甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、異丙醇、四氫呋喃的任意一種或其組合。進一步地，步驟C中，溶劑2的用量體積(mL)為步驟A中坦度螺酮質(zhì)量(g)的1-30倍。進一步地，步驟C中，溶劑2的用量體積(mL)為步驟A中坦度螺酮質(zhì)量(g)的1-20倍。本發(fā)明還提供了另一種制備上述無定型硫酸坦度螺酮的方法，它包括如下操作工序：A、用硫酸和坦度螺酮成鹽，制備得到硫酸坦度螺酮；B、取硫酸坦度螺酮，加入有機溶劑，加熱溶解后，制得硫酸坦度螺酮溶液；C、自然冷卻至室溫，靜置，取沉淀，干燥，即得無定型硫酸坦度螺酮；或者，D、自然冷卻至室溫下放置，再置于-5±5℃下靜置，取沉淀，干燥，即得無定型硫酸坦度螺酮；或者，E、自然冷卻至室溫，濃縮脫除溶劑，干燥，即得無定型硫酸坦度螺酮。進一步地，步驟B中，加熱溶解溫度為30-100℃，硫酸坦度螺酮與有機溶劑的質(zhì)量體積比為1:1-30g/mL，所述有機溶劑選自醇類溶劑、酮類溶劑、醚類溶劑、酯類溶劑、乙腈的任意一種或其組合。其中，加熱溶解溫度優(yōu)選為35-85℃。其中，坦度螺酮與有機溶劑的質(zhì)量體積比優(yōu)選為1:3-20g/mL。其中，所述有機溶劑優(yōu)選為甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙醚的任意一種或其組合。進一步地，步驟C中，靜置時間為1-16小時，優(yōu)選為2-12小時；步驟D中，室溫下放置1-16小時，優(yōu)選為2-12小時，-5±5℃下靜置12小時以內(nèi)，優(yōu)選為8小時以內(nèi)。本發(fā)明還提供了上述無定型硫酸坦度螺酮在制備治療5-羥色胺或/和去甲腎上腺素再攝取相關(guān)疾病的藥物中的用途。其中，所述的藥物為治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病和眼部疾病的藥物，優(yōu)選為治療焦慮癥、抑郁癥、恐慌癥、孤獨癥、自閉癥、失眠癥、精神分裂癥、增齡性記憶障礙、神經(jīng)衰弱、老年癡呆、青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病、年齡相關(guān)性黃斑變性、視網(wǎng)膜水腫等疾病的藥物。進一步地，上述無定型硫酸坦度螺酮在制備5-羥色胺調(diào)節(jié)劑中的用途。其中，所述5-羥色胺調(diào)節(jié)劑為治療焦慮癥、抑郁癥或失眠癥的藥物。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它是以上述無定型硫酸坦度螺酮為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。本發(fā)明所述藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分，為本領(lǐng)域熟知的用于制備上述制劑的常用賦形劑或輔料。口服制劑或外用制劑常用的賦形劑或輔料包括但不僅限于填充劑(稀釋劑)、潤滑劑(助流劑或抗粘著劑)、分散劑、潤濕劑、粘合劑、調(diào)節(jié)劑、增溶劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、崩解劑等。粘合劑如糖漿、阿拉伯膠、明膠、淀粉漿、聚維酮、纖維素類衍生物等等；填充劑如乳糖、糊精、淀粉及其衍生物、纖維素類衍生物、無機鈣鹽、甘露醇、瓊脂粉等等；潤滑劑如微粉硅膠、硬脂酸及其鹽類、滑石粉、氫化植物油、聚乙二醇類等等；崩解劑如淀粉及其衍生物、交聯(lián)聚維酮、纖維素類衍生物等等；潤濕劑如水、醇類或其他有機溶劑等等。所述注射劑常用的賦形劑或輔料包括但不僅限于：抗氧劑如亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉等等；抑菌劑如苯酚、苯甲醇、羥丙甲酯、三氯叔丁醇等等；調(diào)節(jié)劑如鹽酸、枸櫞酸、氫氧化鉀(鈉)、緩沖劑等等；乳化劑如聚山梨酯80、卵磷脂、豆磷脂等等；增溶劑如吐溫80、膽汁、甘油等等。此外，還可將活性成分與藥學(xué)上可接受的緩控釋載體，按照本領(lǐng)域所熟知的緩控釋制劑的制備方法制成緩控釋制劑。本發(fā)明所述組合物的制劑形式，可以是液體制劑、氣體制劑、固體制劑和半固體制劑，優(yōu)選芳香水劑、溶液劑、注射劑、合劑、洗劑、搽劑、氣霧劑、噴霧劑、散劑、丸劑、片劑、膜劑、軟膏劑、栓劑、糊劑等常用劑型。本發(fā)明還提供了一種硫酸坦度螺酮晶型I，采用CuKα輻射源進行X射線粉末衍射時，其X射線粉末衍射圖中，2θ衍射角在15.3±0.2、21.3±0.2、22.2±0.2、23.0±0.2、28.4±0.2度有特征吸收峰。進一步地，2θ衍射角還在19.5±0.2、26.3±0.2、26.6±0.2度有特征吸收峰。進一步地，硫酸坦度螺酮晶型I具有基本如圖4所示的X射線粉末衍射圖特征。本發(fā)明硫酸坦度螺酮晶型I的結(jié)構(gòu)式為：本發(fā)明還提供了上述硫酸坦度螺酮晶型I的制備方法，它包括如下操作工序：A、取坦度螺酮，加入丙酮，加熱溶解后，再加硫酸乙醚溶液，待反應(yīng)完全，反應(yīng)液備用；B、反應(yīng)液濃縮干燥，即得硫酸坦度螺酮晶型I；或者，C、反應(yīng)液自然冷卻至室溫，取沉淀，干燥，即得硫酸坦度螺酮晶型I。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與硫酸的摩爾比小于等于1∶1。進一步地，步驟A中，加熱溶解溫度為30-45℃。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與丙酮的質(zhì)量體積比為1∶1-30g/mL。進一步地，步驟A中，硫酸乙醚溶液的質(zhì)量分數(shù)為3％-25％。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與硫酸的摩爾比為1：1-2。進一步地，步驟A中，坦度螺酮與丙酮的質(zhì)量體積比為1∶3-20g/mL。進一步地，步驟A中，硫酸乙醚溶液的質(zhì)量分數(shù)為5％-15％。本發(fā)明還提供了另一種制備上述硫酸坦度螺酮晶型I的方法，它包括如下操作工序：A、用硫酸和坦度螺酮成鹽，制備得到硫酸坦度螺酮；B、取硫酸坦度螺酮，加入有機溶劑，加熱溶解后，制得硫酸坦度螺酮溶液；C、自然冷卻至室溫，靜置，取沉淀，干燥，即得硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ；或者，D、自然冷卻至室溫下放置，再置于-5±5℃下靜置，取沉淀，干燥，即得硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ。進一步地，步驟B中，加熱溶解溫度為30-100℃，硫酸坦度螺酮與有機溶劑的質(zhì)量體積比為1:1-30g/mL，所述有機溶劑為醇類溶劑或者酮類溶劑。其中，步驟B中，加熱溶解溫度優(yōu)選為50-80℃。其中，硫酸坦度螺酮與有機溶劑的質(zhì)量體積比優(yōu)選為1:1-25g/mL，更優(yōu)選為1:3-20g/mL。其中，所述有機溶劑優(yōu)選為丙醇、異丙醇或者甲乙酮；更優(yōu)選異丙醇或者甲乙酮。進一步地，步驟C中，靜置時間為1-16小時，優(yōu)選為2-12小時；步驟D中，室溫下放置1-16小時，優(yōu)選為2-12小時，-5±5℃下靜置12小時以內(nèi)，優(yōu)選為8小時以內(nèi)。上述靜置時間的長短，決定該化合物析晶是否完全，對其收率有影響，但不會影響晶型的結(jié)構(gòu)。本發(fā)明還提供了上述硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ在制備治療5-羥色胺或/和去甲腎上腺素再攝取相關(guān)疾病的藥物中的用途。其中，所述的藥物為治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病和眼部疾病的藥物，優(yōu)選為治療焦慮癥、抑郁癥、恐慌癥、孤獨癥、自閉癥、失眠癥、精神分裂癥、增齡性記憶障礙、神經(jīng)衰弱、老年癡呆、青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病、年齡相關(guān)性黃斑變性、視網(wǎng)膜水腫等疾病的藥物。進一步地，上述硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ在制備5-羥色胺調(diào)節(jié)劑中的用途。其中，所述5-羥色胺調(diào)節(jié)劑為治療焦慮癥、抑郁癥或失眠癥的藥物。本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，它是以上述硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ為活性成分，加上藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分制備而成的制劑。本發(fā)明所述藥學(xué)上可接受的輔料或輔助性成分，為本領(lǐng)域熟知的用于制備上述制劑的常用賦形劑或輔料?？诜苿┗蛲庥弥苿┏Ｓ玫馁x形劑或輔料包括但不僅限于填充劑(稀釋劑)、潤滑劑(助流劑或抗粘著劑)、分散劑、潤濕劑、粘合劑、調(diào)節(jié)劑、增溶劑、抗氧劑、抑菌劑、乳化劑、崩解劑等。粘合劑如糖漿、阿拉伯膠、明膠、淀粉漿、聚維酮、纖維素類衍生物等等；填充劑如乳糖、糊精、淀粉及其衍生物、纖維素類衍生物、無機鈣鹽、甘露醇、瓊脂粉等等；潤滑劑如微粉硅膠、硬脂酸及其鹽類、滑石粉、氫化植物油、聚乙二醇類等等；崩解劑如淀粉及其衍生物、交聯(lián)聚維酮、纖維素類衍生物等等；潤濕劑如水、醇類或其他有機溶劑等等。所述注射劑常用的賦形劑或輔料包括但不僅限于：抗氧劑如亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉等等；抑菌劑如苯酚、苯甲醇、羥丙甲酯、三氯叔丁醇等等；調(diào)節(jié)劑如鹽酸、枸櫞酸、氫氧化鉀(鈉)、緩沖劑等等；乳化劑如聚山梨酯80、卵磷脂、豆磷脂等等；增溶劑如吐溫80、膽汁、甘油等等。此外，還可將活性成分與藥學(xué)上可接受的緩控釋載體，按照本領(lǐng)域所熟知的緩控釋制劑的制備方法制成緩控釋制劑。本發(fā)明所述組合物的制劑形式，可以是液體制劑、氣體制劑、固體制劑和半固體制劑，優(yōu)選芳香水劑、溶液劑、注射劑、合劑、洗劑、搽劑、氣霧劑、噴霧劑、散劑、丸劑、片劑、膜劑、軟膏劑、栓劑、糊劑等常用劑型。本發(fā)明提供的硫酸坦度螺酮化合物，即無定型硫酸坦度螺酮和硫酸坦度螺酮晶型I，填補了現(xiàn)有技術(shù)的空白；與現(xiàn)有產(chǎn)品枸櫞酸坦度螺酮相比，本發(fā)明提供的硫酸坦度螺酮化合物，其性質(zhì)穩(wěn)定，水溶性良好，生物利用度高，為提高藥物的安全性和有效性提供了一種有效的解決途徑；另外，本發(fā)明硫酸坦度螺酮化合物的制備工藝簡單，收率高，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。以下通過具體實施例對本發(fā)明做進一步描述，然而，本發(fā)明并不限于下面的實施例，這些實施例不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。本領(lǐng)域技術(shù)人員在權(quán)利要求的范圍內(nèi)所作出的某些改變和調(diào)整也應(yīng)認為屬于本發(fā)明的范圍。附圖說明圖1是本發(fā)明實施例1提供的無定型硫酸坦度螺酮的X射線粉末衍射圖譜。圖2是本發(fā)明實施例3提供的無定型硫酸坦度螺酮的X射線粉末衍射圖譜。圖3是本發(fā)明實施例5提供的無定型硫酸坦度螺酮的X射線粉末衍射圖譜。圖4是本發(fā)明實施例7提供的硫酸坦度螺酮晶型I的X射線粉末衍射圖譜。具體實施方式本發(fā)明所用原料坦度螺酮是參照現(xiàn)有的制備工藝合成得到，例如CN101362751A、US5521313等文獻中報道的方法。當(dāng)然，除了通過現(xiàn)有方法合成以外，本發(fā)明所用坦度螺酮也可以通過購買市售商品得到。實施例1無定型硫酸坦度螺酮的制備稱取500g坦度螺酮，溶于3.5L異丙醇，加熱升溫至80℃，待溶解完全，加入427g30％的硫酸水溶液，繼續(xù)攪拌至反應(yīng)完全后停止加熱。反應(yīng)液濃縮脫除溶劑，再加入2.0L丙酮溶解，濃縮至干得到620g固體，即為無定型硫酸坦度螺酮，收率為98.7％，質(zhì)譜顯示其ESIm/z：383(M+)。采用DX-2700型X-射線粉末衍射儀對樣品晶相進行分析，CuKα輻射，測得無定型硫酸坦度螺酮的X射線粉末衍射圖譜見圖1，其X射線粉末衍射中無特征峰。實施例2無定型硫酸坦度螺酮的制備按照實施例1的方法制備無定型硫酸坦度螺酮，具體條件參見表1，坦度螺酮的投料量均為500g。各條件下所得產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)分析結(jié)果與實施例1的結(jié)構(gòu)分析結(jié)果無明顯差異，且X射線粉末衍射圖譜與實施例1無明顯差異。表1無定型硫酸坦度螺酮的制備注：表中混合溶劑比例均為體積比。實施例3無定型硫酸坦度螺酮的制備坦度螺酮與硫酸反應(yīng)，制備硫酸坦度螺酮。稱取200g硫酸坦度螺酮，加入1000mL乙醇，加熱升溫至80℃，待溶解完全，繼續(xù)攪拌30min后停止加熱，自然冷至室溫放置2小時，再于-5±5℃放置4小時，棄去上清液，得到類白色沉淀物，干燥，即得195g類白色粉末狀無定型硫酸坦度螺酮，收率為97.5％，質(zhì)譜顯示其ESIm/z：383(M+)。采用DX-2700型X-射線粉末衍射儀對樣品晶相進行分析，CuKα輻射，測得無定型硫酸坦度螺酮的X射線粉末衍射圖譜見圖2，其X射線粉末衍射中無特征峰，且圖2與圖1無明顯差異。實施例4無定型硫酸坦度螺酮的制備按照實施例3中所述方法制備無定型硫酸坦度螺酮，具體條件參見表2，硫酸坦度螺酮的投料量均為200g。各條件下所得產(chǎn)品的X射線粉末衍射圖譜與實施例3無明顯差異，確定其為無定型硫酸坦度螺酮。表2無定型硫酸坦度螺酮化合物的制備注：表中混合溶劑比例均為體積比。實施例5無定型硫酸坦度螺酮的制備坦度螺酮與硫酸反應(yīng)，制備硫酸坦度螺酮。稱取200g硫酸坦度螺酮，加入600mL甲醇，加熱升溫至70℃，待溶解完全，繼續(xù)攪拌30min后停止加熱，自然冷卻至25℃以下，濃縮脫除溶劑，干燥，即得199g類白色粉末狀無定型硫酸坦度螺酮，收率為99.5％，質(zhì)譜顯示其ESIm/z：383(M+)。采用DX-2700型X-射線粉末衍射儀對樣品晶相進行分析，CuKα輻射，測得無定型硫酸坦度螺酮的X射線粉末衍射圖譜見圖3，其X射線粉末衍射中無特征峰，且圖3與圖1無明顯差異。實施例6無定型硫酸坦度螺酮的制備按照實施例5中所述方法制備無定型硫酸坦度螺酮，具體條件參見表3，硫酸坦度螺酮的投料量均為200g。各條件下所得產(chǎn)品的X射線粉末衍射圖譜與實施例5無明顯差異，確定其為無定型硫酸坦度螺酮。表3無定型硫酸坦度螺酮化合物的制備注：表中混合溶劑比例均為體積比。實施例7硫酸坦度螺酮晶型I的制備稱取5g坦度螺酮，加入25mL的丙酮，加熱至35℃，待完全溶解后，加入13g的10％的硫酸乙醚溶液，攪拌至反應(yīng)完全，反應(yīng)液濃縮干燥，得到類白色的坦度螺酮晶型I6.24g，收率為99.4％，質(zhì)譜顯示其ESIm/z：383(M+)。采用DX-2700型X-射線粉末衍射儀對樣品晶相進行分析，CuKα輻射，測得硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ的X射線粉末衍射圖譜如圖4所示，其主要相關(guān)衍射數(shù)據(jù)見表4(2θ測量誤差為±0.2)。表4硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ的X射線粉末衍射數(shù)據(jù)實施例8硫酸坦度螺酮晶型I的制備按照實施例7的方法制備硫酸坦度螺酮晶型I，具體條件參見表5，坦度螺酮的投料量均為5g。各條件下所得產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)分析結(jié)果與實施例7的結(jié)構(gòu)分析結(jié)果無明顯差異，且X射線粉末衍射圖譜與實施例7無明顯差異。表5硫酸坦度螺酮晶型I的制備注：表中混合溶劑比例均為體積比。實施例9硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ的制備坦度螺酮與硫酸反應(yīng)，制備硫酸坦度螺酮。稱取200g硫酸坦度螺酮，加入600mL異丙醇，加熱升溫至80℃，待溶解完全，繼續(xù)攪拌30min后停止加熱，自然冷至室溫放置12小時，取沉淀，干燥，即得191g類白色的硫酸坦度螺酮晶型I，收率為95.5％，質(zhì)譜顯示其ESIm/z：383(M+)，所得產(chǎn)品的X射線粉末衍射圖譜與實施例7無明顯差異。實施例10硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ的制備坦度螺酮與硫酸反應(yīng)，制備硫酸坦度螺酮。稱取200g硫酸坦度螺酮，加入1000mL異丙醇，加熱升溫至70℃，待溶解完全，繼續(xù)攪拌30min后停止加熱，自然冷至室溫放置2小時，再于-5±5℃放置8小時，取沉淀，干燥，即得190g類白色的硫酸坦度螺酮晶型I，收率為95.0％。所得產(chǎn)品的X射線粉末衍射圖譜與實施例7無明顯差異。實施例11硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ的制備坦度螺酮與硫酸反應(yīng)，制備硫酸坦度螺酮。稱取200g硫酸坦度螺酮，加入4000mL甲乙酮，加熱升溫至50℃，待溶解完全，繼續(xù)攪拌30min后停止加熱，自然冷至室溫放置6小時，再于-5±5℃放置4小時，取沉淀，干燥，即得192g類白色的硫酸坦度螺酮晶型I，收率為96.0％。所得產(chǎn)品的X射線粉末衍射圖譜與實施例7無明顯差異。實施例12本發(fā)明的緩釋片將待制備量的硫酸坦度螺酮晶型I、羥丙基甲基纖維素和乳糖混合均勻，過篩，加入75％乙醇溶液制軟材，過20目篩制濕顆粒，于50℃左右烘干，20目篩整粒，加入硬脂酸鎂和滑石粉，混合均勻后壓片。實施例13本發(fā)明的膠囊劑將待制備量的硫酸坦度螺酮晶型I與淀粉通過等量遞增法混勻后，再與微晶纖維素混勻，制粒，裝膠囊即得。實施例14本發(fā)明的膠囊劑將待制備量的無定型硫酸坦度螺酮與淀粉通過等量遞增法混勻后，再與微晶纖維素混勻，制粒，裝膠囊即得。實施例15本發(fā)明的舌下片將原輔料分別過100目篩。將待制備量的無定型硫酸坦度螺酮與低取代羥丙甲基纖維素通過等量遞增法混勻，再依次加入甘露醇、乳糖淀粉，最后加入甜橙香精和硬脂酸鎂，混合均勻后壓片。實施例16本發(fā)明的局部眼用制劑將待制備量的無定型硫酸坦度螺酮、乙酸鈉、氯化鈉和依地酸二鈉混合，加入注射用水，充分溶解后，將pH調(diào)至約5.0，然后加入苯扎氯銨，并適當(dāng)調(diào)節(jié)溶液的pH至約5.0。以下通過試驗例說明本發(fā)明的有益效果。試驗例1：溶解度試驗試驗組1：本發(fā)明實施例1制備得到的無定型硫酸坦度螺酮；試驗組2：本發(fā)明實施例7制備得到的硫酸坦度螺酮晶型I；對照組：參照現(xiàn)有文獻(CN101880274A實施例7)公開方法制備得到的枸櫞酸坦度螺酮。稱取供試品2g，置于25±2℃的注射用水10mL中，振搖。1分鐘后，如若還有目視可見的溶質(zhì)顆粒，再補加供試品重量的5倍體積的水(即10mL水)，重復(fù)前述操作，直至完全溶解。記錄總用水量，結(jié)果見表6。表6溶解性比較研究無定型硫酸坦度螺酮硫酸坦度螺酮晶型Ⅰ枸櫞酸坦度螺酮總用水量(倍)總用水量(倍)總用水量(倍)51060表6中的溶解性試驗結(jié)果表明，本發(fā)明制備得到的無定型硫酸坦度螺酮和晶型I溶解所需要水量明顯比枸櫞酸坦度螺酮少，溶解性更優(yōu)。通常情況下，好的水溶性不僅為藥物療效和安全性提供了有力的保證，而且還可以減少臨床用藥時產(chǎn)生的刺激，提高病人的依從性，這種優(yōu)勢在注射劑和眼部制劑的應(yīng)用中尤為突出。試驗例2：穩(wěn)定性效果試驗試驗組1：本發(fā)明實施例1制備得到的無定型硫酸坦度螺酮；試驗組2：本發(fā)明實施例7制備得到的硫酸坦度螺酮晶型I；對照組：參照現(xiàn)有文獻(CN101880274A實施例7)公開方法制備得到的枸櫞酸坦度螺酮。穩(wěn)定性考察條件包括：(1)熱降解：取供試品約200mg，置于60℃干燥箱中放置；(2)光降解：取供試品約200mg，置于光照度為4500±500lx的環(huán)境中放置；(3)高濕降解：取供試品約200mg，置于放有KNO3飽和溶液的干燥器中室溫放置。穩(wěn)定性試驗結(jié)果見表7。表7穩(wěn)定性試驗結(jié)果由表7中的試驗結(jié)果表明，本發(fā)明制備的硫酸坦度螺酮無定型和晶型I，在高溫、高濕、光照的條件下，純度均無明顯變化。由此可見，本發(fā)明提供的硫酸坦度螺酮無定型和晶型I不僅純度高，而且質(zhì)量穩(wěn)定可控，適合藥物制劑的制造和長期儲存。試驗例3：生物利用度試驗試驗組1：本發(fā)明實施例1制備得到的無定型硫酸坦度螺酮；試驗組2：本發(fā)明實施例7制備得到的硫酸坦度螺酮晶型I；對照組：參照現(xiàn)有文獻(CN101880274A實施例7)公開方法制備得到的枸櫞酸坦度螺酮。將18只健康雄性SD大鼠隨機分為3組，每組6只，每組分別口服給予相當(dāng)于10mg/kg(按坦度螺酮堿計)劑量的硫酸坦度螺酮晶型I、無定型硫酸坦度螺酮、對照組枸櫞酸坦度螺酮。將受試樣品在給藥前配置成1mg/mL濃度的水溶液。大鼠在給藥前禁食12小時，并于給藥4小時后恢復(fù)進食。給藥前取空白血，并于給藥后的0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、10和24小時預(yù)設(shè)時間間隔眼緣取血0.5mL置于含肝素的離心管中，以4000轉(zhuǎn)/min離心10min分離血漿，取上清液，測定血漿中坦度螺酮的濃度，計算出藥代動力學(xué)參數(shù)，結(jié)果見表8。表8藥動學(xué)參數(shù)比較結(jié)果受試對象AUC(ng·h/mL)T1/2(h)Tmax(h)Cmax(ng/mL)無定型硫酸坦度螺酮148.7±35.61.2±0.10.9±0.132.9±19.3硫酸坦度螺酮晶型I136.8±33.21.2±0.10.9±0.127.2±18.5枸櫞酸坦度螺酮45.1±12.21.4±0.11.3±0.15.6±1.4由表8中的試驗結(jié)果顯示：與現(xiàn)有產(chǎn)品枸櫞酸坦度螺酮相比較，無定型硫酸坦度螺酮的達峰時間(Tmax)縮短了30％，峰濃度(Cmax)提高了近6倍，平均血藥濃度-時間曲線下面積(AUC)值提高了約3.3倍；硫酸坦度螺酮晶型I的達峰時間(Tmax)縮短了30％，峰濃度(Cmax)增加了約5倍，平均血藥濃度-時間曲線下面積(AUC)值提高了超過3倍?？梢?，本發(fā)明的硫酸坦度螺酮無定型和晶型I的Tmax值明顯縮短，Cmax和AUC值顯著增加，說明本發(fā)明硫酸坦度螺酮無定型和晶型I比枸櫞酸坦度螺酮起效時間更快，能更迅速的發(fā)揮作用；而且具有更高的生物利用度，能更好的發(fā)揮藥用效果。綜上所述，與現(xiàn)有產(chǎn)品枸櫞酸坦度螺酮相比，本發(fā)明提供的硫酸坦度螺酮化合物，即無定型硫酸坦度螺酮和硫酸坦度螺酮晶型I，其性質(zhì)穩(wěn)定，水溶性良好，生物利用度顯著提高，為提高藥物的有效性和安全性提供了一種有效的解決途徑；另外，本發(fā)明化合物的制備工藝簡單，收率高，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。當(dāng)前第1頁1 2 3