本發(fā)明屬于肽或蛋白質(zhì)的提取方法，特別涉及一種以干美洲大蠊為原料，利用生物酶解技術(shù)，提取美洲大蠊小分子肽的方法。

背景技術(shù)：

美洲大蠊，俗稱蟑螂，是世界上生命力最強(qiáng)、最古老，至今繁衍最成功的昆蟲類群之一。美洲大蠊性寒味咸，有毒，有辛辣味、有散瘀、消積、解毒、利水、消腫等功能?，F(xiàn)代研究表明其還具有抗癌作用。

美洲大蠊(蟑螂)是傳統(tǒng)的中藥材，常以干燥或鮮成蟲入藥，亦有將其制成超微粉末的美洲大蠊精粉出現(xiàn)，用于保健品或藥物中。但由于傳統(tǒng)習(xí)慣，患者難以接受，藥效也難以完全發(fā)揮。

經(jīng)研究，美洲大蠊干蟲體提取物，含有多元醇類、粘氨酸、粘糖氨酸及多種氨基酸等活性物質(zhì)。更有，經(jīng)多年研究發(fā)現(xiàn)，美洲大蠊表皮含有鞏膜質(zhì)和甲殼質(zhì)、溴、鋅、鎳、猛、鉀、鈣、鈦、氯、硫、硅、鋁、鎂等元素。肌肉水解13種氨基酸。此外，身體貯藏微生素B1、維生素B2、煙酸和抗壞血酸等，淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原兒茶酸葡萄甙等。全體含麥角硫因、龍蝦肌堿、胡蘆巴堿、甘氨酸、甜菜堿、肛堿、三甲胺、腺嘌呤等。通過提取美洲大蠊小分子肽工藝，既能夠避免美洲大蠊全蟲對患者的視覺沖擊，又能夠提高藥材的生物利用度，充分發(fā)揮其應(yīng)有的功效。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種從美洲大蠊中提取小分子肽的方法，以干美洲大蠊為原料，利用復(fù)合酶梯度酶解提取小分子肽。充分開發(fā)美洲大蠊資源中的具有高附加值的小分子肽，以彌補(bǔ)該領(lǐng)域的研究空白，取得經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：一種從美洲大蠊中提取小分子肽的方法，其工藝步驟：

(1)原料預(yù)粉碎：干美洲大蠊經(jīng)木粉粉碎機(jī)粉碎成30-40目的粉末；

(2)動態(tài)提取漿液：采用動態(tài)微壓提取罐提取，提取時(shí)加入10倍水(以原料重計(jì))升溫升壓至110℃、0.05MPa，恒溫微高壓條件下攪拌提取1-2小時(shí)，提取結(jié)束后提取液排入湯罐，提取后的渣子排出；

(3)復(fù)合酶梯度酶解(加酶量以原料計(jì))：提取液由湯罐排進(jìn)水解罐，升溫滅菌后降溫至50℃，加入100U/g的木聚糖酶酶解1-2小時(shí)；再加入150U/g的果膠酶酶解1-2小時(shí)；再加入NaOH溶液調(diào)pH至6.0，加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解2-3小時(shí)。每個(gè)酶解過程中每隔0.5小時(shí)攪拌5分鐘，使酶解均勻充分進(jìn)行；

(4)膜分離：滅酶滅菌后的酶解液經(jīng)多功能無機(jī)陶瓷膜分離設(shè)備超濾，過濾至清液儲罐；

(5)雙效真空節(jié)能濃縮：過濾液經(jīng)雙效真空節(jié)能濃縮設(shè)備濃縮，一效真空度與溫度分別控制-0.06MPa、70-80℃，二效真空度與溫度分別控制在-0.08MPa、50-60℃，以波美度為指標(biāo)，綜合控制濃縮溫度、真空度及供汽壓力；

(6)高速離心噴霧干燥：經(jīng)過升溫至80℃達(dá)到滅菌效果的濃縮液，由高速離心噴霧干燥造粒機(jī)噴霧干燥；

(7)成品包裝：采用密封包裝。

本發(fā)明具有以下技術(shù)效果：利用木聚糖酶、果膠酶、木瓜蛋白酶復(fù)合梯度酶解，再經(jīng)木瓜蛋白酶對蛋白質(zhì)進(jìn)行酶解，提取出的小分子肽提取率較高，極易被人體吸收。其操作工藝步驟簡便、各環(huán)節(jié)易于控制，加工成本低。

附圖說明

圖1是本發(fā)明一種從美洲大蠊中提取小分子肽的方法的工藝示意圖

具體實(shí)施方式

為了更好的理解本發(fā)明的技術(shù)方案，下面詳細(xì)描述本發(fā)明提供的實(shí)施例。

本發(fā)明實(shí)施例提供了一種從美洲大蠊中提取小分子肽的方法，包括以下步驟：

(1)原料預(yù)粉碎：干美洲大蠊經(jīng)木粉粉碎機(jī)粉碎成30-40目的粉末；

(2)動態(tài)提?。翰捎脛討B(tài)微壓提取罐提取，此設(shè)備主要用于對微小顆粒物質(zhì)以水為介質(zhì)在攪拌狀態(tài)下進(jìn)行微高壓提取，設(shè)有攪拌裝置更利于物料有效成分較充分溶出，同時(shí)又可避免高溫高壓對物質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞而造成有效成分流失。提取時(shí)加入10倍水(以原料重計(jì))、升溫升壓至110℃、0.05MPa，恒溫微高壓攪拌提取1小時(shí)，提取后提取液排入湯罐，提取渣子排出；

(3)復(fù)合酶梯度酶解(加酶量以原料計(jì))：提取液由湯罐排進(jìn)水解罐，升溫滅菌后降溫至50℃，加入100U/g的木聚糖酶酶解1.5小時(shí)；再加入150U/g的果膠酶酶解1.5小時(shí)；再加入NaOH溶液調(diào)pH至6.0，加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解3小時(shí)。每個(gè)酶解過程中每隔0.5小時(shí)攪拌5分鐘，使酶解均勻充分進(jìn)行。通過實(shí)驗(yàn)最終確定酶解最優(yōu)工藝：在55℃條件下，首先加入100U/g的木聚糖酶酶解1.5小時(shí)；再加入150U/g的果膠酶酶解1.5小時(shí)；再加入NaOH溶液調(diào)pH至6.0，加入3200U/g的木瓜蛋白酶酶解3小時(shí)。經(jīng)測定水解度為：21.8％，出成率為：24.63％

(4)膜分離：滅酶滅菌后的酶解液經(jīng)多功能無機(jī)陶瓷膜分離設(shè)備進(jìn)行超濾，過濾至清液儲罐。過濾過程中無需額外助劑，具有物料無變相、常(低)溫低壓操作、能耗小等特點(diǎn)，且物料分離精度高、透過液澄清透明，非常適宜于分離對熱敏性、高純度等要求高的物質(zhì)；

(5)雙效真空節(jié)能濃縮：過濾液經(jīng)雙效真空節(jié)能濃縮設(shè)備進(jìn)行濃縮。設(shè)定一效真空度與溫度分別控制-0.06MPa、80℃，二效真空度與溫度分別控制在-0.08MPa、60℃，以波美度為指標(biāo)，綜合控制濃縮溫度、真空度及供汽壓力；

(6)干燥：經(jīng)過升溫至80℃達(dá)到滅菌效果的濃縮液，由高速離心噴霧干燥造粒機(jī)噴粉干燥，水分含量降至5％左右，送入集粉器；

(7)成品包裝：采用密封包裝。經(jīng)測定，成品中主要含有：小分子肽、多種氨基酸等。