本發(fā)明涉及生物
技術(shù)領(lǐng)域:
,具體涉及一種蛋白肽及其鈣螯合物與制備方法。
背景技術(shù):
:礦物質(zhì)是人體中必不可少的元素,尤其是鈣元素。鈣元素作為碳、氫、氧、氮四大元素后,人體含量最多的元素,其對(duì)人體的多種生理反應(yīng)起到不可或缺的作用。鈣元素重要的作用是維持人體骨骼的強(qiáng)度和密度,缺鈣會(huì)導(dǎo)致骨質(zhì)酥松;鈣可以控制心率和血壓,臨床上常用的鈣離子拮抗劑,通過(guò)抑制鈣離子經(jīng)細(xì)胞膜上的鈣通道進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),可有效降低人體舒張壓和收縮壓。人體會(huì)自動(dòng)吸收鈣離子,人體小腸刷狀緣能自動(dòng)分泌出小分子量的氨基酸或短肽鏈,當(dāng)遇到從胃部通過(guò)分解食物過(guò)來(lái)的游離鈣離子(Ca2+),氨基酸或短肽鏈會(huì)與游離鈣離子發(fā)生反應(yīng),形成中性的氨基酸螯合鈣,這種小分子量的氨基酸螯合鈣被小腸以整體形式吸收。吸收后,在細(xì)胞內(nèi)會(huì)自動(dòng)斷開(kāi)螯合鍵,重新分解成氨基酸和鈣離子,鈣離子通過(guò)門(mén)靜脈進(jìn)入血液,被輸送到全身各個(gè)器官。因此,除了鈣攝入不足導(dǎo)致人體缺鈣外,小腸中與鈣離子結(jié)合的氨基酸或短肽鏈分泌不足,無(wú)法與足量的鈣結(jié)合,導(dǎo)致吸收的鈣不足,也是人體缺鈣的原因之一。針對(duì)上述情況,體外合成氨基酸鈣螯合物和(或)蛋白肽鈣螯合物,通過(guò)服用這種鈣螯合物即可解決人體與鈣結(jié)合的氨基酸或短肽鏈不足導(dǎo)致人體吸收鈣不足的問(wèn)題。我國(guó)是大豆生產(chǎn)大國(guó),大豆中含有豐富的蛋白質(zhì)。我國(guó)已經(jīng)有成熟的方法從植物大豆中提取出大豆蛋白。然而大豆蛋白作為整蛋白,其分子量大,在人體消化吸收中,大豆蛋白需要先在酶的作用下分解成肽片段和(或)氨基酸,進(jìn)而再被人體吸收。通過(guò)一定的方法把大豆蛋白分解成小分子肽片段,再將肽片段與鈣發(fā)生反應(yīng)形成蛋白肽鈣螯合物,將成為有效解決人體缺鈣的方法之一。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足之處而提供了一種蛋白肽及其鈣螯合物與制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明所采取的技術(shù)方案為:一種蛋白肽的制備方法,其包括以下步驟:(1)大豆蛋白溶液的配制:將大豆蛋白粉溶解,配制成大豆蛋白溶液;(2)酶解:向大豆蛋白溶液中加入復(fù)合酶,進(jìn)行酶解;其中,復(fù)合酶為堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的混合物,堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶質(zhì)量比為1:(10-15),復(fù)合酶與大豆蛋白粉的質(zhì)量百分比為2-5%;(3)滅酶:將酶解反應(yīng)完成后的溶液進(jìn)行滅酶處理;(4)離心:將滅酶后溶液進(jìn)行離心處理,取上清液;(5)干燥:將離心后所得的上清液干燥處理后,得所述蛋白肽。本發(fā)明運(yùn)用復(fù)合酶水解大豆蛋白,使其分解成肽片段。本發(fā)明運(yùn)用堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶兩種酶的混合物作為反應(yīng)媒介,是因?yàn)檫@兩種酶最適反應(yīng)溫度相差不大,最適反應(yīng)pH值同屬于堿性范圍。兩種酶不會(huì)相互作為底物,分解對(duì)方,而是具有協(xié)同作用,使大豆蛋白達(dá)到最佳的水解度。通過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)得出,大豆蛋白分解物最大抗氧化力具有最佳水解度范圍,大豆蛋白水解度為18%-20%時(shí),抗氧化能力最佳。本發(fā)明制得的大豆蛋白分解物,大豆蛋白水解度為18.9%,因此具有較佳抗氧化能力。優(yōu)選地,所述步驟(1)中,大豆蛋白粉溶解后,進(jìn)行超聲處理,超聲功率為1000-2000W,超聲時(shí)間為20-40min,超聲處理的溫度為35-40℃。本發(fā)明運(yùn)用超聲預(yù)處理大豆蛋白,是因?yàn)榻?jīng)過(guò)超聲后的大豆蛋白,在水中分散得更加均勻,而且處理后,與酶反應(yīng)的活性基團(tuán)充分暴露,因此與酶反應(yīng)更加徹底。同時(shí),在較低強(qiáng)度的超聲作用下,超聲強(qiáng)度同酶活力呈正相關(guān)。這是因?yàn)槌暜a(chǎn)生的機(jī)械作用和加熱作用增加了底物分子與酶分子的能量,使其運(yùn)動(dòng)性加強(qiáng),相互間碰撞的幾率增大,同時(shí)也加強(qiáng)了介質(zhì)與酶之間的傳遞擴(kuò)散作用,超聲作用下產(chǎn)生的振動(dòng)及其氣泡的周圍界面有利于介質(zhì)中的底物分子進(jìn)入酶中心,也有利于產(chǎn)物分子進(jìn)入介質(zhì),提高酶促反應(yīng)速度。優(yōu)選地,所述堿性蛋白酶與所述風(fēng)味蛋白酶質(zhì)量比為1:12。當(dāng)堿性蛋白酶與所述風(fēng)味蛋白酶質(zhì)量比為1:12,所制備的蛋白肽抗氧化活性最高。優(yōu)選地,所述堿性蛋白酶的活性為115萬(wàn)U/g,所述風(fēng)味蛋白酶的活性為18.2萬(wàn)U/g。優(yōu)選地,所述酶解在pH值為7-8,溫度為50-60℃條件下進(jìn)行,酶解時(shí)間為3-4h。優(yōu)選地,所述步驟(4)和步驟(5)之間還包括步驟(4a):對(duì)離心后所得的上清液進(jìn)行超濾膜過(guò)濾。因?yàn)榇蠖箍寡趸氖欠肿恿繛?500KDa左右的小分子肽片段,本發(fā)明通過(guò)二次超濾,保留分子量為3000KDa以下的肽片段,能最大限度的富集具有抗氧化性的活性肽片段。優(yōu)選地,所述超濾膜過(guò)濾時(shí),第一次采用10KDa的超濾膜,在壓力為0.2MPa,溫度為44℃的條件下,過(guò)濾30min;第二次采用3KDa的超濾膜,在壓力為0.4MPa,溫度為44℃的條件下,過(guò)濾60min。本發(fā)明還提供了一種蛋白肽,所述蛋白肽是采用上述蛋白肽的制備方法制備所得。本發(fā)明還提供了一種蛋白肽鈣螯合物的制備方法,包括如下步驟:(a)將所述蛋白肽溶解,得蛋白肽溶液;(b)在蛋白肽溶液中加入氯化鈣溶液,在pH值為6-7,溫度為25-40℃的條件下反應(yīng)60-100min;其中蛋白肽與氯化鈣的質(zhì)量比為(10-15):1;(c)將反應(yīng)后的溶液進(jìn)行真空干燥,得所述蛋白肽鈣螯合物。本發(fā)明還提供了一種蛋白肽鈣螯合物,所述蛋白肽鈣螯合物是采用上述蛋白肽鈣螯合物的制備方法制備所得。所制備的蛋白肽鈣螯合物,分子量小,能有效地被小腸刷狀緣吸收,具有提高血液中鈣濃度的效果。本發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明所述蛋白肽,除了可用于與礦物質(zhì)鹽形成螯合物外,還具有一定的抗氧化性。自由基理論自從1900年被提出以來(lái),到目前為止已經(jīng)得到越來(lái)越充分的論證,自由基攻擊生命大分子造成組織細(xì)胞損傷,是引起機(jī)體衰老、腫瘤和一些其他疾病的根本原因。本發(fā)明所制得的大豆肽,是具有抗氧化功能的活性肽片段,其原理主要是螯合體內(nèi)金屬離子、作為供氫體或供電子體清除游離基和促進(jìn)過(guò)氧化物的分解。通過(guò)與多酚氧化酶(PPO)催化的醌式產(chǎn)物反應(yīng),能減少食物褐變,防止聚合氧化產(chǎn)物的生成,能抑制機(jī)體內(nèi)自由基的大量積累,對(duì)提高自由基清除機(jī)制起到一定功效。本發(fā)明運(yùn)用復(fù)合酶水解大豆蛋白,制得的大豆蛋白分解物,具有最佳抗氧化能力。本發(fā)明制得的蛋白肽鈣螯合物分子量小,能有效被小腸刷狀緣吸收,具有提高血液中鈣濃度的效果。具體實(shí)施方式為更好的說(shuō)明本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn),下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1本發(fā)明所述蛋白肽制備方法的一種實(shí)施例,包括以下步驟:(1)大豆蛋白溶解,超聲預(yù)處理。將大豆蛋白粉配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的溶液,用超聲進(jìn)行預(yù)處理,超聲功率為1000W,超聲時(shí)間40min,超聲處理的初始溫度控制在35℃。(2)復(fù)合酶水解大豆蛋白。向大豆蛋白溶液中加入復(fù)合酶,復(fù)合酶與大豆蛋白粉的質(zhì)量百分比為2%,所用復(fù)合酶為堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合物,堿性蛋白酶活性為115萬(wàn)U/g,風(fēng)味蛋白酶活性為18.2萬(wàn)U/g,堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:10,水解溫度為50℃,pH值為7,反應(yīng)時(shí)間為4h。用1mol/LNaOH溶液或1mol/LHCl溶液調(diào)節(jié)pH值。(3)滅酶。反應(yīng)完成后,溶液升溫至80℃,滅酶15min。(4)離心。在4000r/min的離心速度下離心20min,離心后過(guò)濾取上清液。(5)超濾膜過(guò)濾。第一次選用10KDa的超濾膜,控制壓力為0.2MPa,溫度為44℃,過(guò)濾30min;第二次選用3KDa超濾膜,控制壓力為0.4MPa,溫度為44℃,過(guò)濾60min,真空干燥,得蛋白肽。實(shí)施例2本發(fā)明所述蛋白肽制備方法的一種實(shí)施例,包括以下步驟:(1)大豆蛋白溶解,超聲預(yù)處理。將大豆蛋白粉配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的溶液,用超聲進(jìn)行預(yù)處理,超聲功率為1500W,超聲時(shí)間20min,超聲處理初始溫度控制在40℃。(2)復(fù)合酶水解大豆蛋白。向大豆蛋白溶液中加入復(fù)合酶,復(fù)合酶與大豆蛋白粉的質(zhì)量百分比為3%,所用復(fù)合酶為堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合物,堿性蛋白酶活性為115萬(wàn)U/g,風(fēng)味蛋白酶活性為18.2萬(wàn)U/g,堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:12,水解溫度為55℃,pH值為7.3,反應(yīng)時(shí)間為4h。用1mol/LNaOH溶液或1mol/LHCl溶液調(diào)節(jié)pH值。(3)滅酶。反應(yīng)完成后,溶液快速升溫95℃,滅酶15min。(4)離心。在6000r/min的離心速度下離心20min,離心后過(guò)濾取上清液。(5)超濾膜過(guò)濾。第一次選用10KDa的超濾膜,控制壓力為0.2MPa,溫度為44℃,過(guò)濾30min;第二次選用3KDa超濾膜,控制壓力為0.4MPa,溫度為44℃,過(guò)濾60min,真空干燥,得蛋白肽。實(shí)施例3本發(fā)明所述蛋白肽制備方法的一種實(shí)施例,包括以下步驟:(1)大豆蛋白溶解,超聲預(yù)處理。將大豆蛋白粉配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的溶液,用超聲進(jìn)行預(yù)處理,超聲功率為2000W,超聲時(shí)間30min,超聲處理初始溫度控制在35℃。(2)復(fù)合酶水解大豆蛋白。向大豆蛋白溶液中加入復(fù)合酶,復(fù)合酶與大豆蛋白粉的質(zhì)量百分比為5%,所用復(fù)合酶為堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合物,堿性蛋白酶活性為115萬(wàn)U/g,風(fēng)味蛋白酶活性為18.2萬(wàn)U/g,堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:15,水解溫度為60℃,pH值為8,反應(yīng)時(shí)間為3h。用1mol/LNaOH溶液或1mol/LHCl溶液調(diào)節(jié)pH值。(3)滅酶。反應(yīng)完成后,溶液升溫至100℃,滅酶5min。(4)離心。在5000r/min的離心速度下離心20min,離心后過(guò)濾取上清液。(5)超濾膜過(guò)濾。第一次選用10KDa的超濾膜,控制壓力為0.2MPa,溫度為44℃,過(guò)濾30min;第二次選用3KDa超濾膜,控制壓力為0.4MPa,溫度為44℃,過(guò)濾60min,真空干燥,得蛋白肽。實(shí)施例4本實(shí)施所述蛋白肽的制備方法,其與實(shí)施例2所述蛋白肽的制備方法不同之處僅在于堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比的不同,本實(shí)施例中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:10。實(shí)施例5本實(shí)施所述蛋白肽的制備方法,其與實(shí)施例2所述蛋白肽的制備方法不同之處僅在于堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比的不同,本實(shí)施例中堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:15。實(shí)施例6:以下為實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4、實(shí)施例5中所制得的蛋白肽抗氧化活性試驗(yàn)的實(shí)施例。用亞油酸—硫氫酸鉀法測(cè)定抗氧化活性。在10mL具塞試管中加入0.2mol/L(pH=7.0)的磷酸鹽緩沖液1.5mL,加入實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4、實(shí)施例5制得的蛋白肽水溶液100uL,濃度為50mmol/L亞油酸的乙醇溶液(體積分?jǐn)?shù)95%)100uL和濃度為25mmol/L的FeCl2—EDTA溶液50uL,蓋上玻璃塞在50℃,100r/min的恒溫?fù)u床上反應(yīng)3h。取反應(yīng)有的混合液200uL,加入體積分?jǐn)?shù)為75%乙醇6mL,濃度為0.2mol/L氯化亞鐵溶液200uL,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%的KSCN200uL?;旌暇鶆蚝蠓磻?yīng)5min,在480nm下測(cè)定吸光度值A(chǔ)s,則被測(cè)物的過(guò)氧化抑制率(抗氧化活力)AA的計(jì)算公式為:AA(%)=[(A0-As)/A0]按照上述方法,我們測(cè)定實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4、實(shí)施例5制得的蛋白肽的抗氧化活性如下表:實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3實(shí)施例4實(shí)施例5AA(%)92.594.792.192.793.1從表格中可以看出,實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3、實(shí)施例4、實(shí)施例5制得的蛋白肽抗氧化活性均超過(guò)90%,抗氧化活性高,其中實(shí)施例2的抗氧化活性最高,即當(dāng)堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:12時(shí),所制備的蛋白肽抗氧化活性最高。實(shí)施例7本發(fā)明所述蛋白肽鈣螯合物的制備方法的一種實(shí)施例,包括以下步驟:(1)大豆蛋白溶解,超聲預(yù)處理。將大豆蛋白粉配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的溶液,用超聲進(jìn)行預(yù)處理,超聲功率為1800W,超聲時(shí)間20min,超聲處理初始溫度控制在40℃。(2)復(fù)合酶水解大豆蛋白。向大豆蛋白溶液中加入復(fù)合酶,復(fù)合酶與大豆蛋白粉的質(zhì)量百分比為3%,所用復(fù)合酶為堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合物,堿性蛋白酶活性為115萬(wàn)U/g,風(fēng)味蛋白酶活性為18.2萬(wàn)U/g,堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:12,水解溫度為55℃,pH值為7.5,反應(yīng)時(shí)間為4h。用1mol/LNaOH溶液或1mol/LHCl溶液調(diào)節(jié)pH值。(3)滅酶。反應(yīng)完成后,溶液升溫至100℃,滅酶15min。(4)離心。在5000r/min的離心速度下離心20min,離心后過(guò)濾取上清液。(5)超濾膜過(guò)濾。第一次選用10KDa的超濾膜,控制壓力為0.2MPa,溫度為44℃,過(guò)濾30min;第二次選用3KDa超濾膜,控制壓力為0.4MPa,溫度為44℃,過(guò)濾60min。(6)螯合物制備。超濾后加入0.05mol/L氯化鈣溶液,濾液中蛋白肽與氯化鈣的質(zhì)量比為10:1,pH值控制在7,溫度控制在30℃,反應(yīng)時(shí)間為60min,真空干燥,得所述蛋白肽鈣螯合物。實(shí)施例8本發(fā)明所述蛋白肽鈣螯合物的制備方法的一種實(shí)施例,包括以下步驟:(1)大豆蛋白溶解,超聲預(yù)處理。將大豆蛋白粉配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的溶液,用超聲進(jìn)行預(yù)處理,超聲功率為1200W,超聲時(shí)間20min,超聲處理初始溫度控制在40℃。(2)復(fù)合酶水解大豆蛋白。向大豆蛋白溶液中加入復(fù)合酶,復(fù)合酶與大豆蛋白粉的質(zhì)量百分比為2%,所用復(fù)合酶為堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合物,堿性蛋白酶活性為115萬(wàn)U/g,風(fēng)味蛋白酶活性為18.2萬(wàn)U/g,堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:10,水解溫度為60℃,pH值為8,反應(yīng)時(shí)間為4h。用1mol/LNaOH溶液或1mol/LHCl溶液調(diào)節(jié)pH值。(3)滅酶。反應(yīng)完成后,溶液升溫至90℃,滅酶15min。(4)離心。在4500r/min的離心速度下離心20min,離心后過(guò)濾取上清液。(5)超濾膜過(guò)濾。第一次選用10KDa的超濾膜,控制壓力為0.2MPa,溫度為44℃,過(guò)濾30min;第二次選用3KDa超濾膜,控制壓力為0.4MPa,溫度為44℃,過(guò)濾60min。(6)螯合物制備。超濾后加入0.05mol/L氯化鈣溶液,濾液中蛋白肽與氯化鈣質(zhì)量比為12:1,pH值控制在6.5,溫度控制在25℃,反應(yīng)時(shí)間為80min,真空干燥,得所述蛋白肽鈣螯合物。實(shí)施例9本發(fā)明所述蛋白肽鈣螯合物的制備方法的一種實(shí)施例,包括以下步驟:(1)大豆蛋白溶解,超聲預(yù)處理。將大豆蛋白粉配制成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%的溶液,用超聲進(jìn)行預(yù)處理,超聲功率為1500W,超聲時(shí)間20min,超聲處理初始溫度控制在40℃。(2)復(fù)合酶水解大豆蛋白。向大豆蛋白溶液中加入復(fù)合酶,復(fù)合酶與大豆蛋白粉的質(zhì)量百分比為5%,所用復(fù)合酶為堿性蛋白酶和風(fēng)味蛋白酶的混合物,堿性蛋白酶活性為115萬(wàn)U/g,風(fēng)味蛋白酶活性為18.2萬(wàn)U/g,堿性蛋白酶與風(fēng)味蛋白酶的質(zhì)量比為1:15,水解溫度為60℃,pH值為8,反應(yīng)時(shí)間為4h。用1mol/LNaOH溶液或1mol/LHCl溶液調(diào)節(jié)pH值。(3)滅酶。反應(yīng)完成后,溶液升溫至90℃,滅酶15min。(4)離心。在4500r/min的離心速度下離心20min,離心后過(guò)濾取上清液。(5)超濾膜過(guò)濾。第一次選用10KDa的超濾膜,控制壓力為0.2MPa,溫度為44℃,過(guò)濾30min;第二次選用3KDa超濾膜,控制壓力為0.4MPa,溫度為44℃,過(guò)濾60min。(6)螯合物制備。超濾后加入0.05mol/L氯化鈣溶液,濾液中蛋白肽與氯化鈣的質(zhì)量比為15:1,pH值控制在6,溫度控制在40℃,反應(yīng)時(shí)間為100min,真空干燥,得所述蛋白肽鈣螯合物。實(shí)施例10以下是本發(fā)明所制備的蛋白肽鈣螯合物的生物活性的實(shí)施例。鈣元素在生物體內(nèi)的主要作用是維持骨骼的生長(zhǎng)于發(fā)育,因此我們以骨密度為指標(biāo),測(cè)定本發(fā)明制備方法所制得的蛋白肽鈣螯合物的生物活性。(1)取30只五周齡的斷乳雌性SD大鼠,適應(yīng)飼養(yǎng)兩周后全部進(jìn)行卵巢切除手術(shù),手術(shù)后以低鈣飼料(鈣含量為0.03%)飼養(yǎng)至第4周。(2)第4周后將大鼠隨機(jī)分成3組,每組10只。第一組為低鈣對(duì)照組,繼續(xù)喂以低鈣飼料;第二組為碳酸鈣組,喂以碳酸鈣飼料;第三組為鈣螯合物組,喂以本發(fā)明所述方法制得的蛋白肽鈣螯合物。(3)三組大鼠分別飼養(yǎng)4周,1周后將全部大鼠處死,分離出大鼠左股骨,將肌肉和結(jié)締組織分離干凈,用QDR-4000型骨密度儀測(cè)定大鼠股骨中點(diǎn)及股骨遠(yuǎn)心端骨密度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表:動(dòng)物數(shù)(只)中點(diǎn)骨密度(g/cm2)遠(yuǎn)心端骨密度(g/cm2)低鈣對(duì)照組100.092±0.0050.142±0.009碳酸鈣組100.109±0.004*0.158±0.011*鈣螯合物組100.124±0.010*#0.169±0.009*#*表示與低鈣對(duì)照組相比有顯著性差異(P<0.05),#表示與碳酸鈣組相比有顯著性差異(P<0.05)。從結(jié)果可以看出,碳酸鈣組與鈣螯合物組均能有效提高大鼠中骨密度,因此服用碳酸鈣和鈣螯合物能增加鈣質(zhì)的吸收。鈣螯合物組大鼠在骨密度數(shù)據(jù)上明顯高于碳酸鈣組,說(shuō)明通過(guò)本制備方法制得的鈣螯合物更能促進(jìn)鈣的吸收。最后所應(yīng)當(dāng)說(shuō)明的是,以上實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制,盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說(shuō)明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換,而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3