技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種實現(xiàn)植物基因組外源基因定點整合的方法，包括如下步驟：步驟一、構(gòu)建能夠在植株基因組的目的整合位點區(qū)域進行基因組編輯的打靶載體，該打靶載體包括整合靶位點序列和Cas9核酸酶表達元件；步驟二、構(gòu)建外源基因轉(zhuǎn)化載體，并將該外源基因轉(zhuǎn)化載體隨機整合到植株的基因組中，得到轉(zhuǎn)化有該外源基因的轉(zhuǎn)基因株系，其中，外源基因轉(zhuǎn)化載體包含整合位點序列和與目的整合位點兩翼相同的同源臂序列，且該同源臂序列位于整合位點序列和外源基因之間；步驟三、將打靶載體轉(zhuǎn)化入轉(zhuǎn)基因株系內(nèi)，篩選得到只含有定點整合到目的整合位點區(qū)域的株系。本發(fā)明能夠提高植物定點整合外源基因的成功率。

技術(shù)研發(fā)人員：宋書鋒;李新奇;李莉;張大兵;符習(xí)勤;袁定陽;袁隆平
受保護的技術(shù)使用者：湖南雜交水稻研究中心
文檔號碼：201610602370
技術(shù)研發(fā)日：2016.07.27
技術(shù)公布日：2016.12.21