1.一種利用枯草芽孢桿菌高效表達(dá)豬防御素的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)選取豬防御素BD基因，在BD基因中加入SacB基因和SamyQ基因，得到改造蛋白SS-BD基因；
(2)將步驟(1)所得改造蛋白SS-BD基因的兩端進(jìn)行KpnI/BamHⅠ雙酶切獲得SS-BD目的基因片段；
(3)選用枯草芽孢桿菌質(zhì)粒載體pHT43進(jìn)行KpnI/BamHⅠ雙酶切，得到pHT43雙酶切載體基因片段；
(4)將步驟(2)所得物與步驟(3)所得物進(jìn)行連接和轉(zhuǎn)化，得到重組載體pHT-BD，將重組載體pHT-BD轉(zhuǎn)化入枯草芽孢桿菌上，篩選能生長在氯霉素平板上的陽性轉(zhuǎn)化子；
(5)將篩選出的陽性轉(zhuǎn)化子單克隆后接種于LB培養(yǎng)基中，置于搖床，在37℃、180rpm條件下過夜培養(yǎng)，得到一級(jí)培養(yǎng)液，將一級(jí)培養(yǎng)液按1％的接種量接種于50mL所述LB培養(yǎng)基中，置于搖床，在37℃、225rpm條件下培養(yǎng)，至OD600達(dá)到0.8時(shí)加入誘導(dǎo)劑至濃度按m/v計(jì)為2％，在37℃下誘導(dǎo)反應(yīng)24h。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述豬防御素BD基因的序列如下：
gaccactacatatgtgccaagaaaggggggacctgcaacttctccccctgcccgctcttcaacaggattgaagggacctgttacagtggcaaggccaagtgctgcatccgctga。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)是在改造蛋白SS-BD基因的5’端加入KpnI酶切位點(diǎn)，在3’端加入 BamHⅠ酶切位點(diǎn)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述SS-BD目的基因的序列如下：
KpnI 。
ggtaccccttttatgattttctatcaaacaaaagaggaaaatagaccagttgcaatccaaacgagagtctaatagaatgaggtcgaaaagtaaatcgcgcgggtttgttactgataaagcaggcaagacctaaaatgtgtaaagggcaaagtgtatactttggcgtcaccccttacatattttaggtctttttttattgtgcgtaactaacttgccatcttcaaacaggagggctggaagaagcagaccgctaacacagtacataaaaaaggagacatgaacgatgattcaaaaacgaaagcggacagtttcgttcagacttgtgcttatgtgcacgctgttatttgtcagtttgccgattacaaaaacatcagccgtagaccactacatatgtgccaagaaaggggggacctgcaacttctccccctgcccgctcttcaacaggattgaagggacctgttacagtggcaaggccaagtgctgcatccgctgaggatcc。
BamH Ⅰ。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(4)中枯草芽孢桿菌采用B.subtilis ROTA9300為宿主菌。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(4)中連接方法采用TAKARA的DNA Ligation Kit Ver2.1方法說明操作，轉(zhuǎn)化方法按照TAKARA的E.coli DH5αCompetent Cells的方法說明操作。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(5)中LB培養(yǎng)基為：胰蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，氯化鈉10g/L，氯霉素10μg/mL，pH為自然。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(5)中將每一份單克隆陽性轉(zhuǎn)化子加入5mL的LB培養(yǎng)基中。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(5)中 誘導(dǎo)劑為蔗糖。