1.一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于包括以下步驟:
1)菌種從莫干山野生金蟬花子實體上取白色孢子粉,顯微鑒別長橢圓形或圓形,單胞,壁光滑,無色,透明,多對稱,少數(shù)彎曲直徑3-10微米,常見1-3個油滴,經(jīng)過2-5次的接種純化及培養(yǎng),得到菌株作為菌種,所選取的菌株編號為HZXC0001號;
2)液體菌種培養(yǎng)基配方及處理:土豆150-250g、糖15-25g、瓊脂粉15-25g、純化水700-900g;進(jìn)行121℃高溫滅菌,滅菌時間30-60分鐘;
3)固體培養(yǎng)基配方及處理:按照剝殼小麥或大米:純化水為0.8-1.0:1.3-1.5,進(jìn)行121℃高溫滅菌,滅菌時間30-60分鐘,根據(jù)小麥蒸煮后的狀態(tài)適當(dāng)調(diào)整料水比,以小麥局部爆開、含水量適度為準(zhǔn),避免蒸煮后小麥為純顆粒狀;
4)液體菌種制備:將母種在無菌條件下接入液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)2-4天;
5)接種:將培養(yǎng)后的液體菌種接入固體培養(yǎng)基中,接種前液體菌種經(jīng)過0.5-2分鐘磁化處理,菌種液按照小麥量的8-12%的比例接種;
6)培養(yǎng):接種后暗培養(yǎng)溫度控制在15-20℃,光培養(yǎng)控制溫度在20-25℃,控制濕度在65-85%,控制培養(yǎng)環(huán)境二氧化碳濃度小于1000ppm,光照強(qiáng)度100-300Lx,培養(yǎng)時間為20-30天;
7)采收:孢子粉用旋風(fēng)除塵器進(jìn)行收集,收集后直接進(jìn)行烘干即可,子實體分割后裝盤,菌質(zhì)掰碎后轉(zhuǎn)盤,菌質(zhì)大小控制2-5cm,培養(yǎng)物的收集即為人工金蟬花獲取物,含:孢子粉、子實體、菌質(zhì);
8)除濕:將收獲后的子實體、菌質(zhì)放入除濕間,控制濕度30-40%,子實體時間控制在20-48h,培養(yǎng)基及菌絲體控制時間在50-72h;
9)烘干:溫度控制在60-80℃,時間控制在15-30h,水分小于8%為止;
10)裝袋:將烘干后的子實體裝入密封袋中。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,菌種從莫干山野生金蟬花孢子粉中選取,通過2-5次的純化及培養(yǎng)實驗,確定優(yōu)質(zhì)的菌種,將挑選出的菌株置于滅菌的薩式培養(yǎng)基斜面上,20-22℃下培養(yǎng)2-4天,待白色菌落長滿試管后,作為母種備用4℃保存或永久性保存于液氮罐中。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,液體菌種培養(yǎng)基配方:土豆150-250g、糖15-25g、瓊脂粉15-25g、純化水700-900g;處理方法:進(jìn)行121℃高溫滅菌,滅菌時間30-60分鐘,當(dāng)液體培養(yǎng)基的溫度冷卻到室溫后,在無菌環(huán)境下,按照1-3%的量接入母種,在20-22℃下,搖床培養(yǎng)3-5天,待菌絲轉(zhuǎn)成微紅棕色后作為液體菌種也備用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,液體菌種培養(yǎng)基接種前經(jīng)過0.5-2分鐘磁化處理。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,固體培養(yǎng)基配方:按照剝殼小麥或大米:純化水為0.8-1.0:1.3-1.5,處理方法:進(jìn)行121℃高溫滅菌,滅菌時間30-60分鐘,根據(jù)小麥蒸煮后的狀態(tài)適當(dāng)調(diào)整料水比,以小麥局部爆開、含水量適度為準(zhǔn),避免蒸煮后小麥為純顆粒狀。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,接種后暗培養(yǎng)溫度控制在15-20℃,光培養(yǎng)控制溫度在20-25℃,控制濕度在65-85%,控制培養(yǎng)環(huán)境二氧化碳濃度小于1000ppm,光照強(qiáng)度100-300Lx,培養(yǎng)時間為20-30天,培養(yǎng)環(huán)境為C級無菌區(qū)或者為開啟紫外線的普通潔凈管理區(qū)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,采收:孢子粉用旋風(fēng)除塵器進(jìn)行收集,收集后直接進(jìn)行50-70℃烘干,子實體在C級無菌區(qū)抽風(fēng)柜下進(jìn)行分割后裝盤,菌質(zhì)掰碎后轉(zhuǎn)盤,菌質(zhì)大小控制2-5cm。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,除濕:將收獲后的子實體、菌質(zhì)放入除濕間,開啟紫外滅菌燈,控制環(huán)境濕度30-40%,除濕機(jī)散熱口安裝于除濕間外部,控制房間溫度不高于28℃,子實體時間控制在20-48h,培養(yǎng)基及菌絲體控制時間在50-72h。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種人工金蟬花的菌種篩選、制備及生產(chǎn)培養(yǎng)方法,其特征在于,烘干:開啟烘箱排風(fēng),烘箱溫度控制在60-80℃,時間控制在15-30h,水分小于8%為止,孢子粉收集后直接烘干,子實體與菌質(zhì)除濕后再進(jìn)行烘干,烘干完成在負(fù)壓罩下裝袋,密封保存于陰涼干燥環(huán)境中。