技術(shù)特征：

1.一種針對(duì)目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行DNA甲基化測(cè)序的方法，所述方法包括：

a)提供包含目標(biāo)核酸序列的核酸樣品和與目標(biāo)核酸序列一致或?qū)δ繕?biāo)序列具有特異性的誘餌序列；

b)以所述誘餌序列為模板進(jìn)行體外鏈聚合酶擴(kuò)增得到DNA雙鏈池，隨后對(duì)DNA雙鏈池進(jìn)行體外DNA甲基轉(zhuǎn)移酶處理和亞硫酸鹽的處理，進(jìn)而通過(guò)體外轉(zhuǎn)錄制備核酸類似物，所述核酸類似物帶有結(jié)合部分，例如生物素結(jié)合部分；

c)使所述核酸樣品片段化并進(jìn)行亞硫酸鹽處理，優(yōu)選制備全基因組DNA甲基化文庫(kù)；

d)所述核酸類似物與所述處理的核酸樣品雜交，使得所述核酸類似物與所述處理的核酸樣品中的目標(biāo)區(qū)域核酸形成核酸類似物/DNA雜交復(fù)合物；

e)通過(guò)所述結(jié)合部分，去除所述處理的核酸樣品中的非目標(biāo)區(qū)域的核酸；

f)對(duì)步驟e)后獲得的目標(biāo)區(qū)域核酸進(jìn)行測(cè)序。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，步驟b)中所述的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶選自如下的一種或多種：dam甲基轉(zhuǎn)移酶、AluI甲基轉(zhuǎn)移酶、CpG甲基轉(zhuǎn)移酶(M.SssI)、EcoRI甲基轉(zhuǎn)移酶、G9a甲基轉(zhuǎn)移酶、GpC甲基轉(zhuǎn)移酶(M.CviPI)、Human DNA(cytosine-5)甲基轉(zhuǎn)移酶(Dnmt1)、Human PRMT1甲基轉(zhuǎn)移酶、MspI甲基轉(zhuǎn)移酶、SET7甲基轉(zhuǎn)移酶、SET8甲基轉(zhuǎn)移酶和T4Phageβ-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(T4-BGT)等。

3.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，步驟e)和f)之間還包括步驟f’)：對(duì)所述核酸類似物/DNA雜交復(fù)合物進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)所述片段化的核酸樣品中的目標(biāo)區(qū)域核酸進(jìn)行富集。

4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中步驟b)中利用核酸類似物GNA、LNA、PNA、TNA或嗎啉核酸進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄，制備核酸類似物。

5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述誘餌序列具有選自如下的特性：i)自身不產(chǎn)生發(fā)夾結(jié)構(gòu)并且相互之間無(wú)二聚體產(chǎn)生，ii)拷貝數(shù)根據(jù)所述目標(biāo)核酸序列的GC含量和/或空間結(jié)構(gòu)進(jìn)行補(bǔ)償，iii)當(dāng)所述目標(biāo)區(qū)域是極高或者極低GC含量區(qū)域時(shí)或者當(dāng)目標(biāo)區(qū)域是低復(fù)雜度區(qū)域時(shí)，用所述目標(biāo)區(qū)域兩側(cè)區(qū)域作為替代區(qū)域設(shè)計(jì)誘餌，設(shè)計(jì)方法與所述目標(biāo)區(qū)域一致，iv)無(wú)特異性結(jié)合。

6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中ii)中拷貝數(shù)根據(jù)所述目標(biāo)核酸序列的GC含量進(jìn)行補(bǔ)償是指：以GC含量在50％的誘餌序列拷貝數(shù)系數(shù)為基準(zhǔn)1，GC含量10％-90％之間每偏離1％，誘餌序列拷貝數(shù)系數(shù)增加0.08-0.12。

7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述誘餌序列在固體載體上，例如在微陣列載玻片上。

8.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中對(duì)每個(gè)目標(biāo)區(qū)域，所述誘餌序列是在特異性、二聚體、發(fā)卡結(jié)構(gòu)以及與目標(biāo)區(qū)域的相對(duì)位置方面綜合評(píng)分最優(yōu)的一個(gè)或者多個(gè)誘餌序列，所述綜合評(píng)分通過(guò)如下的打分函數(shù)進(jìn)行：S＝a×S_特異性+b×S_二聚體+c×S_{發(fā)卡結(jié)構(gòu)}+d×S_{相對(duì)距離}，其中a＝0.26-0.34、b＝0.08-0.12、c＝0.17-0.23、d＝0.35-0.45，具體的打分計(jì)算方法如下：

S_特異性的打分計(jì)算：對(duì)新設(shè)計(jì)的任一條誘餌序列，在基因組上對(duì)其進(jìn)行序列比對(duì)，對(duì)其每一條比對(duì)上的序列分別計(jì)算所述誘餌序列與比對(duì)上的序列之間Tm，所述誘餌序列與目標(biāo)區(qū)域T_m其與任一比對(duì)上序列T_m之差≥5℃，優(yōu)選≥10℃，計(jì)算所述誘餌序列與所有比對(duì)上的序列之間的平均Tm，S_特異性＝1-Tm_平均值/(Tm_{目標(biāo)}-5)，優(yōu)選S_特異性＝1-Tm_平均值/(Tm_{目標(biāo)}-10)，其中Tm_平均值是誘餌序列與所有非特異區(qū)域比對(duì)結(jié)果的平均Tm值，Tm_{目標(biāo)}是誘餌序列與目標(biāo)區(qū)域T_m；

S_二聚體的打分計(jì)算：對(duì)新設(shè)計(jì)的任一條誘餌序列，與每一條已經(jīng)設(shè)計(jì)的誘餌序列進(jìn)行二聚體比對(duì)分析，對(duì)其每一條比對(duì)上的序列分別計(jì)算所述誘餌序列與所述比對(duì)上的誘餌序列之間的Tm，所述T_m<47℃，計(jì)算所述誘餌序列與所有比對(duì)上的誘餌序列之間的平均Tm，S_二聚體＝(47–Tm_平均值)/47，優(yōu)選T_m<37℃，計(jì)算所述誘餌序列與所有比對(duì)上的誘餌序列之間的平均Tm，S_二聚體＝(37–Tm_平均值)/37；

S_{發(fā)卡結(jié)構(gòu)}的打分計(jì)算：對(duì)任一條誘餌序列，計(jì)算其最佳的自身比對(duì)結(jié)構(gòu)，并計(jì)算所述結(jié)構(gòu)的Tm，所述T_m<47℃，并且S_{發(fā)卡結(jié)構(gòu)}＝(47–Tm)/47，所述Tm<47℃，并且S_{發(fā)卡結(jié)構(gòu)}＝(37–Tm_平均值)/37；

S_{相對(duì)距離}的打分計(jì)算：對(duì)于目標(biāo)區(qū)域坐標(biāo)，對(duì)新設(shè)計(jì)的任一條誘餌序列，計(jì)算其與所述目標(biāo)區(qū)域坐標(biāo)差值δ_Distance，δ_Distance小于150，S_{相對(duì)距離}＝(150-δ_Distance)/150。

9.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)涉及到的誘餌序列。

10.包括權(quán)利要求9所述的誘餌序列的試劑盒，所述試劑盒還包括雙鏈接頭分子、多種不同的寡核苷酸探針。