一、技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種紫草寧硫辛酸酯類衍生物的制備及其在腫瘤抑制方面的應(yīng)用。

二、

背景技術(shù)：

紫草寧具有多重藥理活性，如殺菌、消炎、抗氧化、抗病毒、抗腫瘤等。近年來研究表明，它作為先導(dǎo)物在抑制腫瘤細(xì)胞增殖的功能分子研究方面有很大的潛力。如：yangfan等于2006年在《internationaljournalofcancer》第119期p1184-1193頁發(fā)表的sh-7，anewsynthesizedshikoninderivative，exertingitspotentanti-tumoractivitiesasatopoisomeraseinhibitor(sh-7，一種合成獲得的新型紫草寧衍生物通過拓?fù)洚悩?gòu)酶發(fā)揮其有效的抗癌活性)文章表明，以紫草寧骨架進(jìn)行修飾的紫草寧衍生物對拓?fù)洚悩?gòu)酶的抑制作用顯著優(yōu)于紫草寧，同時該衍生物能夠抑制s-180，smmc-7721，bel-7402以及pc-3四株癌細(xì)胞的生長，這說明該紫草寧酯在腫瘤抑制方面具有很好的活性。

本課題組在多年的研究過程中，獲得了多系列紫草寧衍生物，并申請了相關(guān)專利：紫草寧含氟羧酸酯類衍生物及其合成方法和應(yīng)用(申請?zhí)枺?01110412497.4)以及紫草寧肉桂酸酯類衍生物及其合成方法和應(yīng)用(申請?zhí)枺?01210002020.3)，發(fā)現(xiàn)了若干具有高效抑制腫瘤細(xì)胞活性的功能分子。

由于紫草寧本身對正常組織、細(xì)胞具有較強(qiáng)的毒副作用，因此對紫草寧進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，提高抗癌活性，克服其缺點，獲得高效低毒的衍生物成為主要的研究課題。

三、

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明以紫草寧為起始原料，通過半合成獲得一類新穎紫草寧羧酸酯類衍生物?？鼓[瘤活性表明，該衍生物對腫瘤細(xì)胞株hcpg2、mcf-7、hela具有明顯的抑制活性，其中在hela細(xì)胞活性結(jié)果中，化合物1活性最優(yōu)，ic50值達(dá)到1.54±0.17μm；在hepg2細(xì)胞活性結(jié)果中，化合物9活性最優(yōu)，ic50值達(dá)到10.69±0.53μm；在mcf-7細(xì)胞活性結(jié)果中，化合物5活性最優(yōu)，ic50值達(dá)到4.02±0.14μm。

本發(fā)明需要解決的問題是提供一類結(jié)構(gòu)新穎的紫草寧羧酸酯類衍生物及其制備方法和在腫瘤抑制中的應(yīng)用。

本發(fā)明的紫草寧硫辛酸酯類衍生物結(jié)構(gòu)式如式i所示：

本發(fā)明的式i結(jié)構(gòu)紫草寧羧酸酯類衍生物是通過紫草寧與相應(yīng)羧酸的半合成得到新穎的結(jié)構(gòu)活性功能化合物。

本發(fā)明通過體外腫瘤細(xì)胞抑制活性證明紫草寧羧酸衍生物對hepg2、mcf-7、hela具有明顯的抑制活性，其中化合物1對hela的抑制活性最強(qiáng)，ic50值達(dá)1.54±0.17μm，詳見附圖1、2、3。通過毒性實驗證明了這一類新穎的化合物對非洲綠猴腎細(xì)胞(vero)毒副作用低，ic50值都大于85μm，而紫草寧的毒性較大ic50值為6.77μm，詳見附圖4。此外，細(xì)胞黏附實驗證明，化合物1能減弱hela細(xì)胞的黏附能力，詳見附圖5。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比較其有益效果：

在本發(fā)明中，所獲紫草寧硫辛酸酯類衍生物與紫草寧相比，均具有明顯的腫瘤細(xì)胞抑制活性，部分新穎化合物對腫瘤細(xì)胞株的抑制活性明顯優(yōu)于其母體分子紫草寧，并且毒副作用低。同時化合物1對hela細(xì)胞增殖的抑制最為明顯，且能減弱其黏附性。本研究擬通過流式、激光共聚焦及westernblot手段對藥物作用機(jī)制進(jìn)行深入探究。

四：附圖說明

圖1表示化合物1-18及紫草寧對hepg2細(xì)胞增殖的抑制

圖2表示化合物1-18及紫草寧對mcf-7細(xì)胞增殖的抑制

圖3表示化合物1-18及紫草寧對hela細(xì)胞增殖的抑制

圖4表示化合物1-18及紫草寧對vero細(xì)胞增殖的抑制

圖5表示化合物1能減弱腫瘤細(xì)胞hela的黏附能力

五：具體實施方式

實例一：紫草寧羧酸酯類衍生物的制備

α-硫辛酸(1mol)懸浮于水(500ml)中，加入碳酸氫鈉(1mol)。攪拌該混合物，產(chǎn)生澄清溶液。將所得淺黃色溶液加冰冷卻，在攪拌情況下少量分批加入固體硼氫化鈉(2mol)。將溶液在冰浴中攪拌30分鐘，然后在室溫攪拌30分鐘。渾濁溶液加冰冷卻，用2m鹽酸調(diào)ph至1，會出現(xiàn)油狀物。用氯仿萃取該溶液，用無水硫酸鎂干燥，過濾，在室溫下減壓蒸發(fā)溶劑，的6，8-二巰基辛酸。

在氮氣氛下，向二氯甲烷中的6，8-二巰基辛酸(1mol)中加入醛(1mol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，冷卻至-25℃，加入三氟化硼乙醚，并且使反應(yīng)溫?zé)嶂潦覝?，蒸發(fā)溶劑后，通過乙酸乙酯和石油醚重結(jié)晶得到目標(biāo)產(chǎn)物。

冰浴條件下，于50ml圓底燒瓶中依次加入紫草寧、相應(yīng)硫辛酸衍生物、精制二氯甲烷和催化劑，tlc檢測反應(yīng)完全，經(jīng)薄板層析分離(v乙酸乙酯∶v不油醚＝1∶5)得到相應(yīng)紫草寧羧酸酯類衍生物。

相應(yīng)化合物的理化數(shù)據(jù)如下：

化合物1：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)，12.43(s，1h，-oh)，7.45(dd，j＝7.9，1.5hz，2h，ar-h)，7.38-7.28(m，3h，ar-h)，7.18(s，2h，ar-h)，6.97(s，1h，ar-h)，6.01(dd，j＝6.5，4.6hz，1h，-o-ch)，5.16(d，j＝3.0hz，1h，ar-ch)，5.10(t，j＝7.2hz，1h，-c＝ch)，3.11-2.92(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)，2.53-2.33(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)，2.18(d，j＝15.4hz，1h，c-ch2-c＝c)，1.68(s，3h，c＝c-ch3)，1.57(s，3h，c＝c-ch3)，1.82-1.41(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)，1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物2：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.53(t，j＝20.6hz，1h，ar-h)；7.17(d，j＝7.4hz，5h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.02(t，1h，-o-ch)；5.30(s，1h，ar-ch)；5.10(s，1h，-c＝ch)；3.16-2.87(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.54-2.25(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.43(s，3h，ar-ch3)；2.19(d，j＝14.0hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.80-1.39(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.26(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物3：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.60(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.34(d，j＝8.0hz，2h，ar-h)；7.17(s，2h，ar-h)；7.14(d，j＝7.9hz，2h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.02(dt，j＝14.5，7.2hz，1h，-o-ch)；5.15-5.05(m，j＝6.8hz，2h，ar-ch，-c＝ch)；3.09-2.88(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.35(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.33(s，3h，ar-ch3)；2.17(d，j＝13.5hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.75-1.42(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.26(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物4：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.57(d，j＝7.6hz，1h，ar-h)；7.27(t，1h，ar-h)；7.18(s，2h，ar-h)；7.00-6.83(m，3h，ar-h)；6.01(dt，j＝10.0，5.0hz，1h，-o-ch)；5.70(d，j＝1.6hz，1h，ar-ch)；5.10(t，j＝7.3hz，1h，-c＝ch)；3.86(s，3h，ar-och3)；3.15-2.83(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)，2.54-2.27(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.19(d.j＝13.8hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.84-1.41(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.27(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物5：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.58(s，1h，-oh)；12.41(s，1h，-oh)；7.36(d，j＝8.7hz，2h，ar-h)；7.18(s，2h，ar-h)；6.93(s，1h，ar-h)；6.84(d，j＝8.7hz，2h，ar-h)；5.99(dt，j＝11.3，5.5hz，1h，-o-ch)；5.15-5.05(m，j＝6.8hz，2h，ar-ch，-c＝ch)；3.78(s，3h，-o-ch3)；3.02-2.89(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.51-2.31(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.20-2.08(m，1h，c-ch2-c＝c)；1.69(s，3h，c＝c-ch3)；1.59(s，3h，c＝c-ch3)；1.77～1.39(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.24(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c)..

化合物6：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.18(s，2h，ar-h)；7.04-6.95(m，3h，ar-h)；6.82(d，j＝8.5hz，1h，ar-h)；6.02(dd，j＝7.0，4.6hz，1h，-o-ch)；5.10(t，j＝6.1hz，2h，ar-ch，-c＝ch)；3.90(s，3h，ar-och3)；3.87(s，3h，ar-och3)；3.05-2.91(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.35(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.17(d，j＝11.4hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.76-1.45(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)，1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物7：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.43(s，1h，-oh)；7.37(d，j＝8.1hz，2h，ar-h)；7.18(t，j＝4.0hz，4h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.02(dt，j＝14.5，7.2hz，1h，-o-ch)；5.15-5.05(m，2h，ar-ch，-c＝ch)，3.05-2.92(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.86(dt，j＝13.6，6.8hz，1h，-ch-(ch3)2)，2.47(dd，j＝15.0，7.5hz，1h，c-ch2-c＝c)；2.38(t，j＝7.4hz，2h，o＝c-ch2-c)；2.16(d，j＝14.5hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.78-1.40(m，7hc-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c)；1.23(s，3h，ar-c-ch3)；1.21(s，3h，ar-c-ch3).

化合物8：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.69-7.63(m，1h，ar-h)；7.36(dd，j＝7.6，1.7hz，1h，ar-h)；7.31-7.21(m，2h，ar-h)；7.18(s，2h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.02(dd，j＝6.5，4.7hz，1h，-o-ch)；5.63(d，j＝2.4hz，1h，ar-ch)；5.11(t，j＝7.2hz，1h，-c＝ch)；3.15-2.93(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.34(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.21(d，j＝14.0hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.72-1.44(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物9：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.38(d，j＝7.3hz，2h，ar-h)；7.30(d，j＝8.5hz，2h，ar-h)；7.18(s，2h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.01(dt，j＝12.7，6.3hz，1h，-o-ch)；5.16-5.06(m，2h，ar-ch，-c＝ch)；3.09-2.88(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.33(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.18(d，j＝14.5hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.76-1.42(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物10：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.60(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.59(dt，j＝7.8，1.4hz，1h，ar-h)；7.40(dd，j＝8.0，1.5hz，1h，ar-h)；7.22(t，j＝5.8hz，1h，ar-h)；7.19(s，2h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.01(dt，j＝11.2，5.6hz，1h，-o-ch)；5.65(d，j＝2.8hz，1h，ar-ch)；5.10(t，.j＝7.1hz，1h，-c＝ch)；3.14-2.92(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.34(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.21(d，j＝14.2hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.69(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.73-1.43(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.27(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物11：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.60(d，j＝8.0hz，1h，ar-h)；7.38(d，j＝2.1hz，1h，ar-h)；7.22-7.15(m，3h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.01(dt，j＝10.3，5.3hz，1h，-o-ch)；5.56(d，j＝2.3hz，1h，ar-ch)；5.10(t，j＝7.6hz，1h，-c＝ch)；3.13-2.93(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.34(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.20(d，j＝11.9hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.73-1.43(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)，1.24(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物12：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.35～7.28(m，2h，ar-h)；7.18(s，2h，ar-h)；7.14(t，j＝8.0)hz，1h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.01(m，2h，-o-ch，ar-ch)；5.12(t，j＝7.2hz，1h，-c＝ch)；3.05-2.92(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.52-2.34(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.20(d，j＝14.1hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.71-1.53(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)，1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物13：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.61(s，1h，ar-h)；7.41(dd，j＝13.3，7.9hz，2h，ar-h)；7.21(t，j＝5.4hz，1h，ar-h)；7.18(s，2h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.01(dt，j＝10.7，5.4hz，1h，-o-ch)；5.11(t，j＝5.6hz，2h，ar-ch，-c＝ch)；3.05-2.92(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)，2.53-2.32(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.18(d，j＝13.2hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)，1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.80-1.39(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物14：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ12.58(s，1h，-oh)，12.42(s，1h，-oh)，7.72(s，1h，ar-h)，7.65(d，j＝7.7hz，1h，ar-h)，7.56(d，j＝7.9hz，1h，ar-h)，7.45(dd，j＝13.4，5.6hz，1h，ar-h)，7.18(s，2h，ar-h)，6.97(t，j＝1.0hz，1h，ar-h)，6.02(dd，j＝6.5，4.7hz，1h，-o-ch)，5.20(d，j＝3.5hz，1h，ar-ch)，5.10(t，j＝7.3hz，1h，-c＝ch)，3.07-2.94(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)，2.53-2.42(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)，2.39(t，j＝7.3hz，1h，c-ch2-c＝c)，2.26-2.13(m，1h，c-ch2-c＝c)，1.68(s，3h，c＝c-ch3)，1.79-1.53(m.5h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c)，1.57(s，3h，c＝c-ch3)，1.54-1.40(m，2h，c-ch2-c)，1.26(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物15：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.63-7.51(m，4h，ar-h)；7.19(s，2h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.01(dt，j＝12.7，6.3hz，1h，-o-ch)；5.20(t，j＝4.5hz，1h，ar-ch)；5.10(t，j＝7.3hz，1h，-c＝ch)；3.07-2.93(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.31(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.18(t，j＝11.9hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.69(s，3h，c＝c-ch3)；1.59(s，3h，c＝c-ch3)；1.79-1.60(m，5h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c)；1.59-1.41(m，2h，c-ch2-c)；1.24(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物16：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；8.20(d，j＝8.8hz，2h，ar-h)；7.63(d，j＝8.8hz，2h，ar-h)；7.18(s，2h，ar-h)；6.94(s，1h，ar-h)；6.02(dt，j＝14.5，7.2hz，1h，-o-ch)；5.22(d，j＝2.9hz，1h，ar-ch)；5.10(t，j＝7.2hz，1h，-c＝ch)；3.09-2.92(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.53-2.32(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.21(d，j＝14.8hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.79-1.37(m，7h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c)；1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

化合物17：¹hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.43(s，1h，-oh)；7.18(s，2h，ar-h)；6.97(s，1h，ar-h)；6.02(dd，j＝7.2，4.6hz，1h，-o-ch)；5.11(t，j＝7.2hz，1h，-c＝ch)；4.06(dd，j＝4.9，2.4hz，1h，ch-ch)；2.97-2.72(m，3h，c-ch2-s，c-ch-s)；2.54-2.31(m，3h，o＝c-ch2-c，c-ch2-c＝c)；2.12(d，j＝10.8hz，1h，c-ch2-c＝c)；1.68(s，3h，c＝c-ch3)；1.57(s，3h，c＝c-ch3)；1.94-1.40(m，16h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c，c-ch2-c，ch-h)；1.26(td，j＝22.1，10.9hz，3h，c-c-c-ch2-c-c-c-c，ch-h).

化合物18：1hnmr(300mhz，cdcl3)δ：12.59(s，1h，-oh)；12.42(s，1h，-oh)；7.18(s，2h)；6.98(s，1h)；6.02(dt，j＝14.5，7.2hz，1h，-o-ch)；5.11(t，j＝7.2hz，1h，-c＝ch)；3.67-3.48(m，1h，c-ch-s)；3.28-3.03(m，2h，c-ch2-s)；2.54-2.35(m，4h，o＝c-ch2-c，c-c-c-c-c-c-ch2-c)；1.69(s，3h，c＝c-ch3)；1.59(s，3h，c＝c-ch3)；1.77-1.60(m，5h，c-c-ch2-ch2-ch2-c-c-c)；1.55-1.38(m，2h，c-ch2-c)；1.25(s，1h，c-c-c-ch2-c-c-c-c).

實例二：式i類紫草寧硫辛酸酯類衍生物的應(yīng)用

以hepg2、hela、mcf-7、vero細(xì)胞株作為檢測株，mtt比色法為檢測方法，通過對式i類紫草寧酸酸酯類衍生物體外腫瘤細(xì)胞抑制活性研究發(fā)現(xiàn)，該類新穎結(jié)構(gòu)衍生物具有明顯的體外腫瘤細(xì)胞抑制活性，并且對正常細(xì)胞毒性較低。結(jié)果見附圖1、2、3、4。

實例三：化合物1減弱hela細(xì)胞的黏附性

以不同濃度(0，0.7，1.4，2.8，5.6μm)化合物1作用于hela細(xì)胞，處理24h，收集細(xì)胞，計數(shù)；向96孔板中加50μl纖連蛋白或?qū)舆B聯(lián)蛋白(10μg/ml)4℃過夜。取出96孔板，用0.2％bsa(50μl)室溫封閉2h。用pbs洗兩遍，加入等量的收集的細(xì)胞，37℃，5％co2孵育30-40min。用pbs洗兩遍，加入mtt孵育4h之后在570nm光波長下測od值。結(jié)果見附圖5(a，b)。

本發(fā)明所述紫草寧硫辛酸酯類衍生物可制備成抗腫瘤藥物。