阿爾茨海默病(AD)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)變性疾病并且導(dǎo)致中年以上人口中的進(jìn)行性癡呆的產(chǎn)生。其臨床癥狀是記憶、認(rèn)知、暫時(shí)和局部定向、判斷和推理的損害，以及嚴(yán)重的情緒紊亂。目前還沒有可以預(yù)防該疾病或其進(jìn)展或穩(wěn)定地逆轉(zhuǎn)其臨床癥狀的有效治療。在所有具有高預(yù)期壽命的社會(huì)中AD成為主要的健康問題，并且也成為這些社會(huì)健康體系的顯著經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。AD的特征在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的2個(gè)主要病理學(xué)特征：淀粉樣蛋白斑塊的出現(xiàn)和神經(jīng)元纖維纏結(jié)(Hardy等，TheamyloidhypothesisofAlzheimer′sdisease：progressandproblemsontheroadtotherapeutics(阿爾茲海默病的淀粉樣蛋白假說：通向治療之路的進(jìn)展和問題)，Science.2002Jul19；297(5580)：353-6，Selkoe，Cellbiologyoftheamyloidbeta-proteinprecursorandthemechanismofAlzheimer′sdisease(淀粉樣蛋白β-蛋白前體的細(xì)胞生物學(xué)和阿爾茨海默病的機(jī)制)，AnnuRevCellBiol.1994；10：373-403)。在唐氏綜合征(三體性21)患者中通常也發(fā)現(xiàn)有這兩個(gè)病理學(xué)特征，其在早期也顯示出類似AD的癥狀。神經(jīng)元纖維纏結(jié)是微管結(jié)合蛋白τ(MAPT)的細(xì)胞內(nèi)聚集體。淀粉樣蛋白斑塊出現(xiàn)在細(xì)胞外空間；它們的主要組分為Aβ-肽。后者是源于β-淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)經(jīng)由一系列蛋白裂解步驟的一組蛋白水解片段。已經(jīng)識(shí)別出數(shù)種形式的APP，其中最大量的是695、751和770個(gè)氨基酸長(zhǎng)度的蛋白質(zhì)。它們都經(jīng)由不同的剪接產(chǎn)生于一個(gè)基因。Aβ-肽源自與APP相同的結(jié)構(gòu)域但是在它們的N-和C-端不同，主要物種為40和42個(gè)氨基酸長(zhǎng)度。存在強(qiáng)烈暗示聚集的Aβ-肽是AD的發(fā)病機(jī)理中的必需分子的數(shù)個(gè)證據(jù)鏈：1)由Aβ-肽形成的淀粉樣蛋白斑塊是AD病理學(xué)的不變部分；2)Aβ-肽對(duì)于神經(jīng)元是有毒的；3)在家族性阿爾茨海默病(FAD)中，在致病基因APP、PSN1、PSN2上的突變導(dǎo)致增加水平的Aβ-肽和早期大腦淀粉樣變性；4)表達(dá)了這種FAD基因的轉(zhuǎn)基因小鼠展現(xiàn)出帶有與人類疾病的很多類似處的病理學(xué)。Aβ-肽由APP通過名為β-和γ-分泌酶的2個(gè)蛋白水解酶的連續(xù)作用產(chǎn)生。β-分泌酶首先將在跨膜結(jié)構(gòu)域(TM)外側(cè)大約28個(gè)氨基酸的APP細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域斷開以產(chǎn)生含有TM-和細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域(CTFβ)的APP的C端片段。CTFβ是γ-分泌酶的底物，其在TM內(nèi)的數(shù)個(gè)相鄰位置裂解以產(chǎn)生Aβ肽和細(xì)胞質(zhì)片段。γ-分泌酶是至少4個(gè)不同蛋白質(zhì)的復(fù)合物，其催化亞基非常類似早老素蛋白(PSEN1、PSEN2)。β-分泌酶(BACE1，Asp2；BACE表示β位APP裂解酶)是通過跨膜結(jié)構(gòu)域錨定至膜中的天冬氨酰蛋白酶(Vassar等，Beta-secretasecleavageofAlzheimer′samyloidprecursorproteinbythetransmembraneasparticproteaseBACE(跨膜天冬氨酸蛋白酶BACE對(duì)阿爾茨海默淀粉樣蛋白前體蛋白的β-分泌酶裂解)，Science.1999Oct22；286(5440)：735)。它在人類機(jī)體的很多組織中被表達(dá)，但是其水平在CNS中尤其高。BACE1基因在小鼠中的基因消除清楚地顯示其活性對(duì)于導(dǎo)致Aβ-肽的產(chǎn)生的APP加工是重要的，在沒有BACE1的情況下不產(chǎn)生Aβ-肽(Luo等，MicedeficientinBACE1，theAlzheimer′sbeta-secretase，havenormalphenotypeandabolishedbeta-amyloidgeneration(阿爾茨海默β-分泌酶，BACE1缺陷小鼠具有正常的表型，并且消除了β-淀粉樣蛋白的產(chǎn)生)，NatNeurosci.2001Mar；4(3)：231-2，Roberds等，BACEknockoutmicearehealthydespitelackingtheprimarybeta-secretaseactivityinbrain：implicationsforAlzheimer′sdiseasetherapeutics(BACE基因敲除小鼠是健康的，盡管大腦中缺少基本的β-分泌酶活性：提示阿爾茨海默病的治療方法)，HumMolGenet.2001Jun1；10(12)：1317-24)。通過基因工程表達(dá)人類APP基因并在衰老過程中形成廣泛淀粉樣蛋白斑塊和阿爾茨海默病樣病理學(xué)的小鼠，當(dāng)通過將BACE1等位基因之一基因消除降低β-分泌酶活性時(shí)不再表現(xiàn)為這樣(McConlogue等，PartialreductionofBACE1hasdramaticeffectsonAlzheimerplaqueandsynapticpathologyinAPPTransgenicMice(BACE1的部分減少對(duì)APP轉(zhuǎn)基因小鼠中的阿爾茨海默斑塊和突觸病理學(xué)具有極大的影響).JBiolChem.2007Sep7；282(36)：26326)。因此推測(cè)BACE1活性的抑制劑可以是可用于阿爾茨海默病(AD)治療干預(yù)的藥劑。WO2012138734、WO2014099768、WO20140099788和WO2014093190描述了用于治療阿爾茨海默病的化合物。此外，β-淀粉樣肽在神經(jīng)組織(例如，大腦)之中，之上或周圍的形成或者形成和沉積被本發(fā)明的化合物抑制，即抑制由APP或APP片段產(chǎn)生Aβ。本發(fā)明提供式I的新化合物，它們的制備，基于根據(jù)本發(fā)明的化合物的藥物以及它們的制備，以及式I化合物在控制或防止疾病如阿爾茨海默病中的用途。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明提供具有BACE1抑制性質(zhì)的三氮雜二環(huán)類化合物、其制備、包含其的藥物組合物及其作為治療活性物質(zhì)的用途。發(fā)明概述本發(fā)明提供式I化合物，或其藥用鹽，其中取代基和變量是如以下和權(quán)利要求中所述的。本發(fā)明的化合物具有Asp2(β-分泌酶，BACE1或膜天冬氨酸蛋白酶-2(Memapsin-2))抑制活性并且因此可以在特征在于升高的β-淀粉樣蛋白水平和/或β-淀粉樣蛋白低聚物和/或β-淀粉樣蛋白斑以及進(jìn)一步的沉積物的疾病和病癥，尤其是阿爾茨海默病的治療性和/或預(yù)防性治療中使用。發(fā)明詳述本發(fā)明提供式I化合物以及它們的藥用鹽，上述化合物的制備，含有它們的藥物及其制備，以及上述化合物在治療性和/或預(yù)防性治療與抑制BACE1相關(guān)的疾病和病癥，如阿爾茨海默病中的用途。此外，本發(fā)明的化合物通過抑制由APP或APP片段產(chǎn)生Aβ來抑制β-淀粉樣蛋白斑在神經(jīng)組織(例如，大腦)中、上或周圍的形成或形成和沉積。不管被討論的術(shù)語單獨(dú)或與其他基團(tuán)組合地出現(xiàn)，下列對(duì)本說明書中使用的一般術(shù)語的定義均適用。除非另外指明，則本申請(qǐng)中使用的下列術(shù)語，包括說明書和權(quán)利要求書，均具有下面給出的定義。必須指出的是，當(dāng)在說明書和所附權(quán)利要求中使用時(shí)，單數(shù)形式“一個(gè)”、“一種”和“所述”包括復(fù)數(shù)指代物，除非上下文另外明確地規(guī)定。術(shù)語“C1-6-烷基”，單獨(dú)或與其它基團(tuán)組合，表示烴基，所述烴基可以是直鏈或具有單個(gè)或多個(gè)分支的支鏈，其中所述烷基基團(tuán)通常包含1至6個(gè)碳原子，例如，甲基(Me)、乙基(Et)、丙基、異丙基(i-丙基)、正丁基、i-丁基(異丁基)、2-丁基(仲丁基)、t-丁基(叔丁基)、異戊基、2-乙基-丙基(2-甲基-丙基)、1，2-二甲基-丙基等。特別的“C1-6-烷基”是“C1-3-烷基”。具體基團(tuán)是甲基和乙基。最具體的基團(tuán)是甲基。術(shù)語“鹵素-C1-6-烷基”，單獨(dú)或與其它基團(tuán)組合，是指如本文所定義的C1-6-烷基，其被一個(gè)或多個(gè)鹵素，特別是1-5個(gè)鹵素，更特別是1-3個(gè)鹵素取代。特別的鹵素是氟，特別的“鹵素-C1-6-烷基”是氟-C1-6-烷基并且特別的“鹵素-C1-3-烷基”是氟-C1-3-烷基。實(shí)例是三氟甲基、二氟甲基、氟甲基等。具體的基團(tuán)是氟甲基。術(shù)語“氰基”，單獨(dú)或與其它基團(tuán)組合，是指N≡C-(NC-)。術(shù)語“鹵素”，單獨(dú)或與其它基團(tuán)組合，表示氯(Cl)、碘(I)、氟(F)和溴(Br)。特別的“鹵素”是Cl、I和F。具體基團(tuán)是F。術(shù)語“雜芳基”，單獨(dú)或與其它基團(tuán)組合，是指這樣的芳香碳環(huán)基團(tuán)，其具有單個(gè)4至8元環(huán)，尤其是5至8元環(huán)，或包含6至14個(gè)，尤其是6至10個(gè)環(huán)原子的多個(gè)稠合環(huán)，并且含有1、2或3個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S的雜原子，尤其是1N或2N，在所述基團(tuán)中至少一個(gè)雜環(huán)是芳香性的?！半s芳基”的實(shí)例包括苯并呋喃基、苯并咪唑基、1H-苯并咪唑基、苯并嗪基、苯并唑基、苯并噻嗪基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、苯并三唑基、呋喃基、咪唑基、吲唑基、1H-吲唑基、吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、唑基、吡嗪基、吡唑基(pyrazolyl)(吡唑基(pyrazyl))、1H-吡唑基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基(pyrimidinyl)(嘧啶基(pyrimidyl))、吡咯基、喹啉基、四唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、6，7-二氫-5H-[1]氮茚基等。一個(gè)特別的″雜芳基″是吡啶基。一個(gè)具體的″雜芳基″是吡啶-2-基。術(shù)語“芳基”是指包含6至10個(gè)碳環(huán)原子的單價(jià)芳族碳環(huán)單環(huán)或二環(huán)的環(huán)體系。芳基部分的實(shí)例包括苯基和萘基。具體的“芳基”是苯基。術(shù)語“藥用鹽”是指適合與人類和動(dòng)物的組織接觸使用的鹽。與無機(jī)和有機(jī)酸的合適的鹽的實(shí)例為，但是不限于：乙酸、檸檬酸、甲酸、富馬酸、鹽酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對(duì)甲苯磺酸、琥珀酸、硫磺酸(硫酸)、酒石酸、三氟乙酸等。具體的酸是甲酸、三氟乙酸和鹽酸。具體的酸是鹽酸、三氟乙酸和富馬酸。術(shù)語“藥用載體”和“藥用輔助物質(zhì)”是指與制劑的其他成分相容的載體和輔助物質(zhì)如稀釋劑或賦形劑。術(shù)語“藥物組合物”包括包含預(yù)定量或比例的特定成分的產(chǎn)品，以及通過組合特定量的特定成分直接地或間接地得到的任何產(chǎn)品。尤其是，它包括包含一種或多種活性組分，和任選的包含惰性成分的載體的產(chǎn)品，以及由任何兩種以上的成分的組合、復(fù)合或聚集，或者由一種或多種成分的分解，或由一種或多種成分的其他類型的反應(yīng)或相互作用直接地或間接地得到的任何產(chǎn)物。術(shù)語“抑制劑”表示與特定受體的特定配體競(jìng)爭(zhēng)、減少或防止該特定受體與該特定配體的結(jié)合或者減少或防止特定蛋白的功能的抑制的化合物。術(shù)語“半最大抑制濃度”(IC50)是指在體外獲得生物過程的50％抑制所需的特定化合物的濃度?？梢詫C50值對(duì)數(shù)地轉(zhuǎn)換為pIC50值(-logIC50)，其中較大的值表示指數(shù)地增加的潛力。IC50值不是絕對(duì)值而依賴于試驗(yàn)條件例如所采用的濃度。可以將IC50值使用Cheng-Prusoff公式(Biochem.Pharmacol.(1973)22：3099)轉(zhuǎn)換為絕對(duì)抑制常數(shù)(Ki)。術(shù)語“抑制常數(shù)”(Ki)是指特定抑制劑對(duì)受體的絕對(duì)結(jié)合親和性。其使用競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合測(cè)定測(cè)量，并且等于如果不存在競(jìng)爭(zhēng)配體(例如放射性配體)特定抑制劑將占據(jù)受體的50％的情況下的濃度?？梢詫i值對(duì)數(shù)地轉(zhuǎn)換為pKi值(-logKi)，其中較大的值表示指數(shù)地增加的潛力。“治療有效量”意指當(dāng)被給藥于受試者用于治療疾病狀態(tài)時(shí)，足以實(shí)現(xiàn)對(duì)于疾病狀態(tài)的這種治療的化合物的量?！爸委熡行Я俊睂⒁蕾囉诨衔?、所治療的疾病狀態(tài)、所治療的疾病的嚴(yán)重性、受試者的年齡和相對(duì)健康狀況、給藥的路線和形式、主治醫(yī)師或獸醫(yī)師的判斷以及其他因素而變化。術(shù)語“如本文所定義的”和“如本文所描述的”當(dāng)涉及變量時(shí)通過引用結(jié)合變量的寬泛定義以及如果有的話，具體的、更具體的和最具體的定義。當(dāng)涉及化學(xué)反應(yīng)時(shí)術(shù)語“處理”、“接觸”和“反應(yīng)”意指在合適的條件下加入或混合兩種以上的試劑以制備所示和/或所需的產(chǎn)物。應(yīng)該明白產(chǎn)生所示和/或所需產(chǎn)物的反應(yīng)可能不一定直接得自最初加入的兩種試劑的組合，即，在混合物中可能產(chǎn)生最終導(dǎo)致所示和/或所需產(chǎn)物的形成的一種或多種中間體。術(shù)語“芳族的”是指如文獻(xiàn)中所定義的芳香性的傳統(tǒng)概念，尤其是在IUPAC-CompendiumofChemicalTerminology，2nd，A.D.McNaught&A.Wilkinson(Eds).BlackwellScientificPublications，Oxford(1997)中所定義。術(shù)語“藥用賦形劑”是指在配制藥物產(chǎn)品中使用的不具有治療活性并且無毒的任意成分，如崩解劑、粘合劑、填充劑、溶劑、緩沖劑、張度劑、穩(wěn)定劑、抗氧化劑、表面活性劑或潤(rùn)滑劑。當(dāng)在化學(xué)結(jié)構(gòu)中存在手性碳時(shí)，意圖是該結(jié)構(gòu)包括作為純立體異構(gòu)體的與該手性碳相關(guān)的所有立體異構(gòu)體以及其混合物。本發(fā)明還提供藥物組合物、使用上述化合物的方法和制備上述化合物的方法。所有單獨(dú)的實(shí)施方案可以進(jìn)行組合。本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案提供式I化合物，其中R1選自由以下各項(xiàng)組成的組：i)芳基，ii)被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的取代基取代的芳基：氰基、C1-6-烷基、鹵素-C1-6-烷基和鹵素，iii)雜芳基，iv)被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的取代基取代的雜芳基：氰基、C1-6-烷基、鹵素-C1-6-烷基和鹵素，并且R2連同R4一起選自由以下各項(xiàng)組成的組：i)-(CH2)x-，其中x＝3或4；被1或2個(gè)鹵素-C1-6-烷基取代，和ii)-(CH2)-(CY2)z-(CH2)-，其中各個(gè)個(gè)體Y＝H或F并且z＝1或2；R3選自由以下各項(xiàng)組成的組：i)C1-6-烷基，和ii)鹵素-C1-6-烷基；或其藥用鹽。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R1選自由以下各項(xiàng)組成的組：i)芳基，ii)被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的取代基取代的芳基：氰基、C1-6-烷基、鹵素-C1-6-烷基和鹵素，iii)雜芳基，iv)被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下各項(xiàng)的取代基取代的雜芳基：氰基、C1-6-烷基、鹵素-C1-6-烷基和鹵素，并且R2連同R4一起是-(CH2)x-，其中x＝3或4；R3選自由以下各項(xiàng)組成的組：i)C1-6-烷基，和ii)鹵素-C1-6-烷基；或其藥用鹽。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，所述化合物具有式Ia，其中R1，R2，R4和R4如本文所述。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，所述化合物具有式Ic，其中R1、R2、R4和R4如本文中所述。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，所述化合物具有式Id，其中R1、R2、R4和R4如本文中所述。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R1是被1-2個(gè)獨(dú)立地選自氰基和C1-6-烷基的取代基取代的雜芳基。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R1是被1-2個(gè)獨(dú)立地選自氰基和C1-6-烷基的取代基取代的吡啶基。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R1是5-氰基-3-甲基-吡啶-2基或5-氰基-吡啶-2基。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R2和R4一起是-(CH2)-(CY2)z-(CH2)-，Y是H并且z是2。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R3是C1-6-烷基。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R3是甲基。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R3是鹵素-C1-6-烷基。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R3是-CH2F。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其中R3是-CHF2。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其選自由以下各項(xiàng)組成的組：5-氰基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aS)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺，N-[6-[(1S，10S)-8-氨基-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺，5-氰基-3-甲基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aS)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺，5-氰基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aR)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺，N-[6-[(1R，10S)-8-氨基-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺，N-[6-[(1R，10S)-8-氨基-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺，和N-[6-[(1S，10S)-8-氨基-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及如本文所述的式I的化合物，其選自由以下各項(xiàng)組成的組：5-氰基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aR)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺，5-氰基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aS)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺，5-氰基-3-甲基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aS)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺，N-[6-[(1S，10S)-8-氨基-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺，和N-[6-[(1R，10S)-8-氨基-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案涉及一種方法，所述方法包括將式XI’的化合物與式XII’的化合物反應(yīng)，得到式I的化合物。其中R1、R2、R3和R4如本文中所定義。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供通過本文所述的方法制備的如本文所述的式I化合物。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物，其用作治療活性物質(zhì)。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物，其用作BACE1活性的抑制劑。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物，其用作治療活性物質(zhì)，所述治療活性物質(zhì)用于治療性和/或預(yù)防性治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平(elevatedβ-amyloidlevels)和/或β-淀粉樣蛋白低聚物(β-amyloidoligomers)和/或β-淀粉樣蛋白斑和進(jìn)一步沉淀(β-amyloidplaquesandfurtherdeposits)為特征的疾病和病癥或阿爾茨海默病(Alzheimer′sdisease)。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物，其用作治療活性物質(zhì)，所述治療活性物質(zhì)用于治療性和/或預(yù)防性治療阿爾茨海默病。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含如本文所述的式I化合物和藥用載體和/或藥用輔助物質(zhì)。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于抑制BACE1活性。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療性和/或預(yù)防性治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平和/或β-淀粉樣蛋白低聚物和/或β-淀粉樣蛋白斑和進(jìn)一步沉淀為特征的疾病和病癥或阿爾茨海默病。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療性和/或預(yù)防性治療阿爾茨海默病。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文所述的式I化合物用于制備藥物的用途，所述藥物用于治療性和/或預(yù)防性治療阿爾茨海默病。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文中所述的式I化合物，所述化合物用于抑制BACE1活性。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文中所述的式I化合物，所述化合物用于治療性和/或預(yù)防性治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平和/或β-淀粉樣蛋白低聚物和/或β-淀粉樣蛋白斑和進(jìn)一步沉淀為特征的疾病和病癥或阿爾茨海默病。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供如本文中所述的式I化合物，所述化合物用于治療性和/或預(yù)防性治療阿爾茨海默病。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供一種用于抑制BACE1活性，特別是用于治療性和/或預(yù)防性治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平和/或β-淀粉樣蛋白低聚物和/或β-淀粉樣蛋白斑和進(jìn)一步沉淀為特征的疾病和病癥或阿爾茨海默病的方法，所述方法包括向人類或動(dòng)物施用如本文所述的式I化合物。本發(fā)明的一個(gè)特定實(shí)施方案提供一種用于治療性和/或預(yù)防性治療阿爾茨海默病的方法，所述方法包括向人類或動(dòng)物施用如本文所述的式I化合物。此外，本發(fā)明包括式I化合物的所有旋光異構(gòu)體，即非對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體混合物、外消旋混合物、所有它們相應(yīng)的對(duì)映體和/或互變異構(gòu)體以及它們的溶劑化物。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到式I化合物可以以互變異構(gòu)形式存在所有互變異構(gòu)形式都被涵蓋在本發(fā)明中。式I化合物可以含有一個(gè)以上不對(duì)稱中心，并且因此可以作為以下形式存在：外消旋物、外消旋混合物、單一對(duì)映體、非對(duì)映異構(gòu)體混合物和單獨(dú)的非對(duì)映異構(gòu)體。取決于分子上不同取代基的性質(zhì)，可以存在另外的不對(duì)稱中心。每個(gè)這種不對(duì)稱中心將獨(dú)立地產(chǎn)生兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體，并且意圖是以混合物形式的、作為純的或部分提純的化合物的所有可能的光學(xué)異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體均包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明意欲涵蓋這些化合物的所有這種同分異構(gòu)形式?？梢匀绫绢I(lǐng)域中所公知的通過本文所公開的方法的適當(dāng)修改形式實(shí)現(xiàn)這些非對(duì)映體的獨(dú)立合成或它們的層析分離?？梢酝ㄟ^結(jié)晶產(chǎn)物或結(jié)晶中間體的x射線晶體學(xué)確定它們的絕對(duì)立體化學(xué)，如果需要，將其用含有已知絕對(duì)構(gòu)型的不對(duì)稱中心的試劑衍生化。如果需要，可以將該化合物的外消旋混合物分離以將單獨(dú)的對(duì)映體分離?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域已知的方法進(jìn)行分離，如化合物的外消旋混合物與對(duì)映體純化合物的偶聯(lián)以形成非對(duì)映異構(gòu)體混合物，之后通過標(biāo)準(zhǔn)方法分離單獨(dú)的非對(duì)映異構(gòu)體，如分級(jí)結(jié)晶或色譜。在實(shí)施方案中，在提供旋光純對(duì)映異構(gòu)體的情況下，旋光純對(duì)映異構(gòu)體意指化合物含有＞90重量％的所需異構(gòu)體，特別是＞95重量％的所需異構(gòu)體，或者更特別是＞99重量％的所需異構(gòu)體，所述重量百分比基于化合物的一種或多種異構(gòu)體的總重量?？梢酝ㄟ^手性選擇合成或通過對(duì)映體的分離制備手性純或手性富集的化合物?？梢詫?duì)最終產(chǎn)物或者備選地對(duì)合適的中間體進(jìn)行對(duì)映體的分離。式I化合物可以通過許多合成路線例如方案1中所示制備。本發(fā)明式I化合物的制備可以通過順次或會(huì)聚的合成路線進(jìn)行。本發(fā)明化合物的合成示于以下方案1中。進(jìn)行所述反應(yīng)和所得產(chǎn)物的純化所需的技能是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。在下面對(duì)方法的描述中使用的取代基和標(biāo)志具有前文所給出的含義，除非有相反指示。更詳細(xì)地，式I的化合物可以通過以下給出的方法、通過實(shí)施例中給出的方法或通過類似方法制備。用于個(gè)別反應(yīng)步驟的合適反應(yīng)條件對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是已知的。反應(yīng)序列不限于下述方案中所展現(xiàn)的序列，然而，取決于起始材料它們相應(yīng)的反應(yīng)性，反應(yīng)步驟的序列可以自由改變。起始材料要么可商購(gòu)的，要么可以通過與下文給出的方法類似的方法、通過說明書中所引用的參考文獻(xiàn)中或?qū)嵤├兴龅姆椒ɑ蛲ㄟ^本領(lǐng)域已知的方法制備。方案1中所述的式I的化合物可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法分離和純化，如但不限于離子交換色譜、固相萃取、液-液萃取、二氧化硅色譜、結(jié)晶和制備型HPLC。更詳細(xì)地，根據(jù)本發(fā)明的式I化合物可以通過下文給出的方法和程序制備。制備式I化合物的一些典型程序在方案1中例示。方案1：化合物I的合成非商購(gòu)的通式A3的芳基酮可以由通過以下方式制備自吡啶A1的甲硅烷基保護(hù)的吡啶A2合成：與強(qiáng)堿例如LDA和烷基氯硅烷，優(yōu)選三乙基氯硅烷在惰性非質(zhì)子溶劑如四氫呋喃或二乙醚中反應(yīng)。然后可以將受保護(hù)的吡啶A2再次與強(qiáng)堿例如LDA和酰胺(例如對(duì)于R3＝Me為乙酰胺，優(yōu)選N，N-二甲基乙酰胺)，或LDA和酯(例如對(duì)于R3＝CHF2為二氟乙酸乙酯或?qū)τ赗3＝CH2F為氟乙酸甲酯)在惰性非質(zhì)子溶劑如四氫呋喃或二乙醚中反應(yīng)，從而提供所需的芳基酮A3。式A4的亞磺酰亞胺可以類似于T.P.Tang&J.A.Ellman，J.Org.Chem.1999，64，12通過以下方式制備：在路易斯酸如例如烷醇鈦(IV)，更特別地乙醇鈦(IV)存在下，在溶劑如醚例如二乙醚或更特別地四氫呋喃中，將式B3的芳基酮和亞磺酰胺，例如烷基亞磺酰胺，最特別地(R)-叔丁基亞磺酰胺或(S)-叔丁基亞磺酰胺縮合。式A4的亞磺酰亞胺向式A5的磺酰胺-磺酰亞胺酰胺的轉(zhuǎn)化可以通過如Tang&Ellman所述的手性定向取代基立體選擇性地進(jìn)行。式A4的亞磺酰亞胺可以在加成反應(yīng)中與由式B4的磺酰亞胺酰胺和堿如正丁基鋰、六甲基二硅氨基鋰或LDA產(chǎn)生的鋰化的磺酰亞胺酰胺在溶劑如醚，例如二乙醚或更特別地四氫呋喃中，在低溫，優(yōu)選地在-78℃反應(yīng)。其中R’＝SiEt3的式A5的磺酰胺-磺酰亞胺酰胺至其中R’＝H的式A6的去甲硅烷基化的磺酰胺-磺酰亞胺酰胺的轉(zhuǎn)化可以利用四丁基氟化銨或優(yōu)選氟化鉀，在酸例如乙酸的存在下，在醚或酰胺中，優(yōu)選在THF和二甲基甲酰胺的混合物中，在環(huán)境溫度至升高的溫度，優(yōu)選在23至40℃實(shí)現(xiàn)。其中R’＝H的式A6的磺酰胺-磺酰亞胺酰胺的手性定向基團(tuán)和2，4-二甲氧基芐基(DMB)的水解以提供式A7的氨基-磺酰亞胺酰胺可以通過以下方式實(shí)現(xiàn)：首先在溶劑如醚例如二乙醚、四氫呋喃或更特別地1，4-二烷中用無機(jī)酸例如硫酸或特別地鹽酸處理，其次用強(qiáng)的有機(jī)酸例如三氟乙酸處理(其中兩個(gè)步驟都優(yōu)選地在環(huán)境溫度進(jìn)行)。式A7的氨基磺酰亞胺酰胺與異硫氰酸酯如苯甲酰基異硫氰酸酯在溶劑如乙酸乙酯、四氫呋喃或乙腈中在0℃至80℃的溫度(優(yōu)選地23℃)的反應(yīng)提供式A8的硫脲磺酰亞胺酰胺。式A8的硫脲磺酰亞胺酰胺可以通過以下方式被環(huán)化成式A9的N-苯甲?；碾呋酋啺孵０罚和ㄟ^與碳二亞胺如例如二環(huán)己基碳二亞胺、二異丙基碳二亞胺或N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC·HCl)(優(yōu)選地EDC·HCl)在溶劑如乙酸乙酯、四氫呋喃或乙腈(優(yōu)選地乙腈)中在23℃至100℃(優(yōu)選地80℃)的溫度反應(yīng)而脫水。自式A9的N-苯甲酰化的脒磺酰亞胺酰胺至式A10的N-叔丁氧基羰基化的脒磺酰亞胺酰胺的保護(hù)基轉(zhuǎn)移可以通過以下方式以兩步法實(shí)現(xiàn)：首先與二碳酸二叔丁酯(Boc2O)在胺堿如三乙胺或N-乙基-N，N-二異丙基胺存在下，在溶劑如二氯甲烷、四氫呋喃或乙腈中，在0℃至40℃(優(yōu)選地23℃)的溫度反應(yīng)，從而提供式A18的雙?；碾呋酋啺孵０罚缓笸ㄟ^雙?；碾呋酋啺孵０放c胺親核試劑如例如二乙胺、二甲胺或氨(優(yōu)選地氨)在溶劑如二氯甲烷或四氫呋喃(優(yōu)選地四氫呋喃)中在0℃至40℃(優(yōu)選地23℃)的溫度的反應(yīng)選擇性地除去苯甲?；Ｊ紸10中的溴基團(tuán)向式A11中的胺基團(tuán)的轉(zhuǎn)化可以通過以下方式進(jìn)行：在L-抗壞血酸鹽和烷基-1，2-二胺(特別是反式-N，N′-二甲基環(huán)己烷-1，2-二胺)存在下在質(zhì)子溶劑如醇(特別是乙醇和水)中在升高的溫度(優(yōu)選地約70℃)與疊氮化物(特別是疊氮化鈉)和鹵化銅(I)(特別是碘化銅(I))反應(yīng)。芳胺A11與羧酸(R1-CO2H)偶聯(lián)以提供式A12的酰胺可以在環(huán)境溫度在非質(zhì)子溶劑如EtOAc中利用T3P實(shí)現(xiàn)；或備選地，羧酸(R1-CO2H)可以通過以下方式活化：在氯化溶劑如二氯甲烷中在0℃使用試劑如草酰氯或1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯胺(Ghosez試劑，CAS-no.26189-59-3)，之后在胺堿如三乙胺或二異丙基乙胺存在下在0℃至環(huán)境溫度與芳胺A11反應(yīng)。除去式A12的化合物中的保護(hù)性叔丁氧基羰基以產(chǎn)生通式I化合物可以通過酸如三氟乙酸在惰性溶劑如二氯甲烷中在0℃至環(huán)境溫度的溫度實(shí)現(xiàn)。方案2：中間體B4的合成式B2的甲烷亞磺酰氯可以如Youn，Joo-Hack；Herrmann，Rudolf在TetrahedronLetters1986，27(13)，1493-1494中所述通過在-30℃至35℃的溫度用硫酰氯和乙酸處理市售的式B1的二甲基二硫制備。粗的式B2的甲烷亞磺酰氯可以通過蒸餾純化或可以直接用于下個(gè)步驟以產(chǎn)生式B3的亞磺酰胺，這是通過在溶劑如二氯甲烷或四氫呋喃中，在開始低至-78℃并且溫?zé)嶂?℃或23℃的溫度與過量的胺R2-NH2或胺R2-NH2與胺堿如三乙胺或N-乙基-N，N-二異丙胺的混合物的簡(jiǎn)單反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。式B4的磺酰亞胺酰胺可以通過以下方式由式B3的亞磺酰胺制備：在惰性溶劑如乙腈、四氫呋喃或二氯甲烷(優(yōu)選二氯甲烷)中，在開始低至-78℃并且溫?zé)嶂?℃的溫度與氯化劑如N-氯琥珀酰胺或次氯酸叔丁酯(優(yōu)選次氯酸叔丁酯)反應(yīng)以產(chǎn)生中間體磺亞胺酰氯，之后在開始低至-78℃并且溫?zé)嶂?℃或23℃的溫度與過量的胺R4-NHDMB或胺R4-NHDMB與胺堿如三乙胺或N-乙基-N，N-二異丙胺的混合物反應(yīng)。胺R4-NHDMB通常通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法通過胺R4-NH2與2，4-二甲氧基苯甲醛的還原胺化制備?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)方法獲得相應(yīng)的與酸的藥用鹽，例如通過將式I化合物溶解在合適的溶劑如二烷或四氫呋喃中并加入合適量的相應(yīng)的酸獲得。通?？梢酝ㄟ^過濾或通過色譜分離產(chǎn)物。用堿將式I化合物轉(zhuǎn)化為藥用鹽可以通過將這種化合物用這樣的堿處理而進(jìn)行。形成這種鹽的一種可能方法是例如通過向該化合物在合適的溶劑(例如乙醇、乙醇-水混合物、四氫呋喃-水混合物)中的溶液中，加入1/n當(dāng)量的堿鹽如M(OH)n，其中M＝金屬或銨陽離子，并且n＝氫氧根陰離子的數(shù)量，并且通過蒸發(fā)或冷凍干燥移除溶劑。特別的鹽是鹽酸鹽、甲酸鹽和三氟乙酸鹽。具體是鹽酸鹽。在其制備未被描述在實(shí)施例中的情況下，可以根據(jù)類似方法或根據(jù)在此給出的方法制備式I化合物以及所有中間體產(chǎn)物。原材料是可商購(gòu)的，本領(lǐng)域已知的或者可以通過本領(lǐng)域已知方法或與其類似的方法制備。應(yīng)理解，可以將本發(fā)明中通式I化合物在官能團(tuán)處進(jìn)行衍生以提供能夠在體內(nèi)轉(zhuǎn)化回母體化合物的衍生物。藥理學(xué)測(cè)試式I化合物和它們的藥用鹽擁有有價(jià)值的藥理學(xué)特性。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物與BACE1活性的抑制有關(guān)。按照在下文中給出的測(cè)試研究該化合物。細(xì)胞Aβ-降低測(cè)定：可以使用Aβ40AlphaLISA測(cè)定。將HEK293APP細(xì)胞接種在96孔微量滴定板中的細(xì)胞培養(yǎng)基(Iscove’s，加10％(v/v)胎牛血清、青霉素/鏈霉素)中，至約80％會(huì)合并且將化合物以在1/3體積培養(yǎng)基中的3x濃度加入(保持終DMSO濃度為1％v/v)。在加濕培養(yǎng)箱中在37℃和5％CO2下孵育18-20hrs后，收獲培養(yǎng)上清，用于使用Perkin-Elmer人淀粉樣蛋白β1-40(高特異性)試劑盒(Cat#AL275C)確定Aβ40濃度。在Perkin-ElmerWhiteOptiplate-384(Cat#6007290)中，將2ul培養(yǎng)上清與2μl10XAlphaLISA抗-hAβ受體珠+生物素化抗體抗-Aβ1-40Mix(50μg/mL/5nM)合并。室溫孵育1小時(shí)后，將16μl的1.25X鏈霉親和素(SA)供體珠制備物(25μg/mL)加入并且在暗處孵育30分鐘。然后使用EnVision-Alpha讀數(shù)器記錄在615nm處的光發(fā)射。將培養(yǎng)上清中Aβ40水平計(jì)算為最大信號(hào)(用1％DMSO而不用抑制劑處理的細(xì)胞)的百分比。使用ExcelXLfit軟件計(jì)算IC50值。表1：IC50值藥物組合物式I化合物和藥用鹽可以用作治療活性物質(zhì)，例如以藥物制劑的形式。該藥物制劑可以口服服用，例如，以片劑、包衣片劑、糖錠劑、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳劑或混懸劑形式。然而，也可以通過直腸實(shí)現(xiàn)給藥，例如，以栓劑的形式，或者經(jīng)腸胃外給藥，例如，以針劑的形式?？梢詫⑹絀化合物及其藥用鹽與制藥學(xué)惰性的、無機(jī)或有機(jī)的載體進(jìn)行加工用于制備藥物制劑。例如，可以使用乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等作為用于片劑、包衣片劑、糖錠和硬明膠膠囊的載體。適用于軟明膠膠囊的載體是例如植物油、蠟、脂肪以及半固體和液體多元醇等。然而，取決于活性成分的性質(zhì)，在軟明膠膠囊的情況下經(jīng)常不需要載體。用于制備溶液和糖漿的適合的載體是例如水、多元醇、甘油、植物油等。適用于栓劑的載體是，例如，天然或硬化油、蠟、脂肪和半液體或液體多元醇等。此外，藥物制劑可以含有藥用助劑物質(zhì)如防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、增香劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧化劑。它們還可以含有其它在治療學(xué)上有價(jià)值的物質(zhì)。含有式I化合物或其藥用鹽以及治療惰性載體的藥物也可以通過本發(fā)明提供，與用于其制備的方法一樣，所述方法包括將一種或多種式I化合物和/或其藥用鹽以及，如果需要，一種或多種其他有治療價(jià)值的物質(zhì)與一種或多種治療惰性載體一起制成蓋侖給藥形式。劑量可以在寬范圍內(nèi)變化，當(dāng)然，在每個(gè)具體病例中必須根據(jù)個(gè)體需求而調(diào)節(jié)。在口服給藥的情形中，用于成人的劑量可以從約0.01mg/天變化至約1000mg/天的通式I化合物或相應(yīng)量的其藥用鹽。該日劑量可以以單一劑量給藥或以分開的劑量給藥，并且此外，當(dāng)需要時(shí)，也可以超過該上限。以下實(shí)施例說明本發(fā)明，但不對(duì)其進(jìn)行限制，而是僅作為其示例。藥物制劑便利地含有約1-500mg，尤其是1-100mg的式I化合物。根據(jù)本發(fā)明的組合物的實(shí)例為：實(shí)施例A以通常方式制造具有以下組成的片劑：表2：可能的片劑組成制造過程：1.將成分1、2、3和4混合，并用純水粒化。2.將顆粒在50℃下干燥。3.使顆粒通過合適的研磨設(shè)備。4.加入成分5并混合三分鐘；在合適的壓機(jī)上壓制。實(shí)施例B-1制備具有以下組成的膠囊：表3：可能的膠囊成分組成制造過程：1.將成分1、2和3在合適的混合機(jī)中混合30分鐘。2.加入成分4和5，并混合3分鐘。3.填充至合適的膠囊中。將式I化合物、乳糖和玉米淀粉首先在混合機(jī)中混合，并且之后在粉碎機(jī)中混合。將混合物送回混合機(jī)；將滑石加入其中并充分混合。將混合物通過機(jī)器填充至合適的膠囊中，例如硬明膠膠囊。實(shí)施例B-2制備具有以下組成的軟明膠膠囊：成分mg/膠囊式I化合物5黃蠟8氫化大豆油8部分氫化的植物油34大豆油110總計(jì)165表4：可能的軟明膠膠囊成分組成成分mg/膠囊明膠75甘油85％32Karion838(干物質(zhì))二氧化鈦0.4氧化鐵黃1.1總計(jì)116.5表5：可能的軟明膠膠囊組成制造過程將式I化合物溶解在其他成分的溫暖熔體中，并將混合物填充至適當(dāng)大小的軟明膠膠囊中。根據(jù)一般程序處理所填充的軟明膠膠囊。實(shí)施例C制備以下組成的栓劑：成分mg/栓劑式I化合物15栓劑塊1285總計(jì)1300表6：可能的栓劑組成制造過程將栓劑塊在玻璃或鋼容器中熔化，充分混合并冷卻至45℃。之后，將細(xì)粉化的式I化合物加入其中并攪拌直至其完全分散。將混合物倒入合適大小的栓劑模具中，放置冷卻；之后將栓劑從模具移出并單獨(dú)地包裝在蠟紙或金屬箔中。實(shí)施例D制備以下組成的針劑：成分mg/針劑式I化合物3聚乙二醇400150乙酸適量至pH5.0針劑用水至1.0ml表7：可能的針劑組成制造過程將式I化合物溶解在聚乙二醇400和注射用水(部分)的混合物中。將pH通過乙酸調(diào)節(jié)至5.0。通過加入余量的水將體積調(diào)節(jié)至1.0ml。將溶液過濾，使用適當(dāng)過量裝入小瓶中并滅菌。實(shí)施例E制造以下組成的小藥囊：成分mg/小藥囊式I化合物50乳糖，細(xì)粉1015微晶纖維素(AVICELPH102)1400羧甲基纖維素鈉14聚乙烯吡咯烷酮K3010硬脂酸鎂10香味添加劑1總計(jì)2500表8：可能的小藥囊組成制造過程將式I化合物與乳糖、微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉混合，并且用聚乙烯吡咯烷酮在水中的混合物造粒。將顆粒與硬脂酸鎂和香味添加劑混合，并裝入小藥囊中。實(shí)驗(yàn)部分為說明本發(fā)明提供以下實(shí)施例。它們不應(yīng)被認(rèn)為是作為本發(fā)明的范圍的限定，而僅作為其代表。通用NMR：在BrukerAC-300頻譜儀上，在25℃，利用TMS(四甲基硅烷)或指定的氘化溶劑的殘余1H作為內(nèi)標(biāo)記錄1HNMR譜。MS：在Perkin-ElmerSCIEXAPI300上用正或負(fù)離子噴霧(ISP或ISN)法或在FinniganMATSSQ7000能譜儀上用電子轟擊法(EI，70eV)測(cè)量質(zhì)譜(MS)。LC-MS(ESI，正或負(fù)離子)數(shù)據(jù)在配備有WatersAcquity、CTCPAL自動(dòng)取樣器和WatersSQD單一四極質(zhì)譜儀的WatersUPLC-MSSystems上，使用ES離子化模式(正和/或負(fù))記錄。在ZorbaxEclipsePlusC181，7μm2.1×30mm柱上，在50℃；A＝在水中的0.01％甲酸，B＝流動(dòng)1的乙腈；梯度：0min3％B，0.2min3％B，2min97％B，1.7min97％B，2.0min97％B，實(shí)現(xiàn)分離。注射體積為2μL。MS(ESI，正或負(fù)離子)：FIA(流動(dòng)注射分析)-MS在AppliedBiosystemAPI150質(zhì)譜儀上記錄。樣品引入利用CTCPAL自動(dòng)取樣器和ShimadzuLC-10ADVPPump進(jìn)行。在沒有柱的情況下，樣品以50μL/min的乙腈和10mM乙酸銨的混合物(1∶1)的流速被直接沖至質(zhì)譜儀的ESI源。注射體積為2μL。通用縮寫：Boc＝叔丁氧基羰基，DCM＝二氯甲烷，EDC·HCl＝N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亞胺鹽酸鹽，EtOAc＝乙酸乙酯，HCl＝氯化氫，HPLC＝高效液相色譜，LDA＝二異丙基氨基鋰，MS＝質(zhì)譜，THF＝四氫呋喃，和T3P＝2，4，6-三丙基-1，3，5，2，4，6-三氧雜三磷雜環(huán)己烷-2，4，6-三氧化物。NMR：在BrukerAC-300頻譜儀上，在25℃，利用TMS(四甲基硅烷)或指定的氘化溶劑的殘余1H作為內(nèi)標(biāo)記錄1HNMR譜。MS：在Perkin-ElmerSCIEXAPI300上用正或負(fù)離子噴霧(ISP或ISN)法或在FinniganMATSSQ7000能譜儀上用電子轟擊法(EI，70eV)測(cè)量質(zhì)譜(MS)。中間體亞磺?；鶃啺稟4的合成A4a(R3＝Me)：(R，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺在22℃向1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)乙酮(根據(jù)Badiger，S.等人，國(guó)際專利申請(qǐng)WO2012095469A1制備)(8.13g)在THF(59ml)中的溶液中相繼加入(R)-(+)-叔丁基亞磺酰胺(3.26g)和乙醇鈦(IV)(11.2g)并將溶液在60℃攪拌6h。將混合物冷卻至22℃，用鹽水處理，將懸浮液攪拌10min并經(jīng)硅藻土(dicalite)過濾。將各層分離，將水層用乙酸乙酯萃取，將合并的有機(jī)層用水洗滌，干燥并蒸發(fā)。將殘余物通過急驟色譜(SiO2，正庚烷/EtOAc，5∶1)純化，得到標(biāo)題化合物(7.5g，70％)，為黃色油狀物。MS(ESI)：m/z＝435.3，437.3[M+H]+。A4b(R3＝CH2F)：(R，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2-氟亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺步驟1：在-40℃在惰性氣氛中向二異丙基胺(3.55g，5.00ml，35.1mmol，Eq：1.1)在四氫呋喃(80ml)中的溶液中逐滴加入n-BuLi(1.6M，在己烷中)(21.9ml，35.1mmol，Eq：1.1)。完成添加后，允許溶液溫?zé)嶂?10℃并攪拌10分鐘。將混合物再次冷卻至-78℃并逐滴加入2-溴-5-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶(9.26g，31.9mmol，Eq：1.00)(根據(jù)Badiger，S.等人，國(guó)際專利申請(qǐng)WO2012095469A1制備)在四氫呋喃(20ml)中的溶液，同時(shí)將內(nèi)部溫度保持低于-70℃。將黃色溶液在-78℃攪拌1小時(shí)，同時(shí)顏色變?yōu)樯罴t色。然后逐滴加入2-氟乙酸甲酯(3.52g，38.3mmol，Eq：1.2)。在30min內(nèi)將混合物溫?zé)嶂?10℃，并且隨后通過將混合物倒在飽和NH4Cl/1MHCl上猝滅。將混合物用EtOAc萃取兩次，用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2-氟乙酮(11.03g，31.5mmol，98.7％產(chǎn)率)，為黃色油狀物，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下使用。MS(ESI)：m/z＝350.3，352.3[M+H]+。步驟2：在23℃向1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2-氟乙酮(10.98g，28.2mmol，Eq：1.00)在THF(100ml)中的溶液中加入(R)-(+)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺(6.28g，50.8mmol，Eq：1.8)和乙醇鈦(IV)(29.0g，26.8ml，127mmol，Eq：4.5)。將深紅色反應(yīng)溶液在23℃攪拌16小時(shí)。將200ml的水和200ml的乙酸乙酯加入反應(yīng)混合物中。攪拌10min后，將漿液通過硅藻土墊過濾。將有機(jī)層分離并用水和鹽水洗滌。將水層用乙酸乙酯(100ml)反萃取。將合并的有機(jī)萃取物用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到褐色油狀物。將殘余物通過急驟色譜(70g硅膠，0-30％EtOAc，在庚烷中)純化，得到(R，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2-氟亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺(7.88g，17.4mmol，61.6％收率)，為黃色油狀物。MS(ESI)：m/z＝453.3，455.6[M+H]+。A4c(R3＝CHF2)：(S，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2，2-二氟亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺步驟1：將二異丙基胺(3.45g，4.86ml，34.1mmol，Eq：1.10）和THF(90ml)的溶液冷卻至-78℃。逐滴加入n-BuLi(1.6M，在己烷中)(21.3ml，34.1mmol，Eq：1.10)。加入完成后，將溶液溫?zé)嶂?10℃并攪拌20分鐘。將混合物再次冷卻至-78℃。在最大-60℃逐滴加入2-溴-5-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶(9g，31.0mmol，Eq：1.00)(根據(jù)Badiger，S.等人，國(guó)際專利申請(qǐng)WO2012095469A1制備)。將黃色溶液在-78℃攪拌2小時(shí)，同時(shí)顏色變?yōu)樯罴t色。然后逐滴加入二氟乙酸乙酯(4.62g，3.72ml，37.2mmol，Eq：1.20)。將混合物溫?zé)嶂?10℃，并且隨后通過將混合物倒在1MHCl上猝滅。將混合物用EtOAc萃取兩次，在Na2SO4上干燥，過濾并蒸發(fā)。將殘余物通過急驟色譜(硅膠，70g，0-30％EtOAc，在庚烷中)純化，得到1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2，2-二氟乙酮(3.75g，10.2mmol，32.8％收率)，為淺褐色油狀物。步驟2：在室溫向1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2，2-二氟乙酮(3.75g，10.2mmol，Eq：1.00)在四氫呋喃(40.7ml)中的溶液中加入(S)-(-)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺(2.22g，18.3mmol，Eq：1.8)和乙醇鈦(IV)(6.97g，6.33ml，30.5mmol，Eq：3.0)。將反應(yīng)混合物在23℃攪拌16小時(shí)并在60℃攪拌3小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入100ml的水和100ml的乙酸乙酯。攪拌10min后，將漿液通過硅藻土墊過濾。分離有機(jī)層并用水和鹽水洗滌。將水層用乙酸乙酯(100ml)反萃取。將合并的有機(jī)萃取物用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到褐色油狀物。將殘余物通過色譜(硅膠，50g，0-30％EtOAc，在庚烷中)中純化，得到(S，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2，2-二氟亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺(2.73g，5.79mmol，56.9％收率)，為黃色油狀物。MS(ESI)：m/z＝471.1，473.3[M+H]+。中間體亞磺酰胺B3的合成B3a：N-烯丙基甲亞磺酰胺步驟1：將1，2-二甲基硫烷(79.6g，75ml，846mmol，Eq：1.00)在乙酸(102g，96.7ml，1.69mol，Eq：2)中的溶液冷卻至-20℃(混合物固化)，開始逐滴加入磺酰二氯(354g，212ml，2.62mol，Eq：3.1)(1-2ml后，其形成橙色溶液)。完成添加后，在-20℃繼續(xù)攪拌1.5h。去除冷卻浴并且使反應(yīng)達(dá)到環(huán)境溫度(氣體逸出)。在35℃繼續(xù)攪拌1h。在40℃和150mbar，以旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器去除乙酰氯，并將殘余物通過蒸餾(在53mbar，沸點(diǎn)55℃)純化，得到甲亞磺酰氯(methanesulfinicchloride)(144.3g，1.46mol，86.6％收率)，為淺黃色液體。步驟2：在-78℃向丙-2-烯-1-胺(17.4g，22.9ml，304mmol，Eq：3.00)在二乙醚(312ml)中的溶液中逐滴加入甲亞磺酰氯(10g，101mmol，Eq：1.00)在二乙醚(37.5ml)中的溶液。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃并攪拌1h，得到懸浮液。向懸浮液中加入三勺Na2SO4，過濾并蒸發(fā)，得到N-烯丙基甲亞磺酰胺(10.73g，90.0mmol，88.7％收率)，為無色液體，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下使用。MS(ESI)：m/z＝120.0[M+H]+。中間體亞磺酰胺B4的合成B4a：2-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-1-甲基-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯1-氧化物步驟1：在23℃向2，4-二甲氧基苯甲醛(7.86g，47.3mmol，Eq：1.00)和丙-2-烯-1-胺(3.24g，4.26ml，56.8mmol，Eq：1.2)在1，2-二氯乙烷(100ml)中的溶液中分批加入三乙酰氧基硼氫化鈉(18.0g，85.1mmol，Eq：1.8)。將得到的混合物在23℃攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用1NNaOH和DCM萃取兩次。將合并的有機(jī)萃取物用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到無色油狀物(12.5g，128％)。將殘余物通過色譜(70g硅膠，0-100％乙酸乙酯，在庚烷中)純化，得到N-(2，4-二甲氧基芐基)丙-2-烯-1-胺(6.1g，29.4mmol，62.2％收率)，為無色油狀物。MS(ESI)：m/z＝208.1[M+H]+。步驟2：在暗處在-78℃向N-烯丙基甲烷亞磺酰胺(4g，33.6mmol，Eq：1.00)在二氯甲烷(270ml)中的溶液中加入次氯酸叔丁酯(3.83g，3.99ml，35.2mmol，Eq：1.05)(1.91g，1.99ml，17.6mmol，Eq：1.05)。在-78℃攪拌30min后，在10min內(nèi)逐滴加入N-(2，4-二甲氧基芐基)丙-2-烯-1-胺(8.35g，40.3mmol，Eq：1.2)和三乙胺(5.09g，7.02ml，50.3mmol，Eq：1.5)在二氯甲烷(90.0ml)中的溶液。去除冷卻浴并且將混合物攪拌，同時(shí)溫?zé)嶂镰h(huán)境溫度。2h后，將混合物倒在1MHCl上并用DCM萃取兩次。將合并的有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到粗制N，N′-二烯丙基-N-(2，4-二甲氧基芐基)甲磺酰亞胺酰胺(10.67g，32.9mmol，98.0％收率)，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下使用。MS(ESI)：m/z＝325.2[M+H]+。步驟3：在氬氣下向N，N′-二烯丙基-N-(2，4-二甲氧基芐基)甲磺酰亞胺酰胺(10.67g，32.9mmol，Eq：1.00)在二氯甲烷(400ml)中的溶液中加入三環(huán)己基膦[1，3-二(2，4，6-三甲基苯基)-4，5-二氫咪唑-2-亞基]釕(II)(GrubbsII，Grubbs第2代催化劑)(96.8mg，114μmol，Eq：0.05)。將反應(yīng)混合物在回流(50℃油浴)下攪拌2小時(shí)。將混合物蒸發(fā)并將殘余物通過柱色譜(200g硅膠，0-10％甲醇，在乙酸乙酯中)純化，得到2-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-1-甲基-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-4，7-二烯1-氧化物(6.25g，21.1mmol，64.1％收率)，為褐色油狀物。MS(ESI)：m/z＝297.2[M+H]+。步驟4：在氬氣下向2-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-1-甲基-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-4，7-二烯1-氧化物(6.25g，21.1mmol，Eq：1.00)在乙酸乙酯(350ml)中的溶液中加入10％Pd/C(1.12g，1.05mmol，Eq：0.05)。在氫氣下放置黑色懸浮液并攪拌2小時(shí)。再次加入700mg的10％Pd/C并且再次攪拌1h。然后將懸浮液再次在氬氣下放置并且將反應(yīng)混合物過濾并蒸發(fā)以得到。將粗制材料通過急驟色譜(50g硅膠，0-20％甲醇，在乙酸乙酯中)純化，得到2-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-1-甲基-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯1-氧化物(6.18g，20.7mmol，98.2％收率)，為褐色油狀物。MS(ESI)：m/z＝299.3[M+H]+。中間體A5的合成A5a(R3＝Me)：2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(R)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基甲硅烷基-吡啶-2-基)-2-[(R/S)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基]-1-甲基-乙基}-酰胺在-75℃向2-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-1-甲基-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯1-氧化物(1.92g，6.43mmol，Eq：2.0)在四氫呋喃(30ml)中的溶液中逐滴加入n-BuLi(1.6M，在己烷中)(3.98ml，6.37mmol，Eq：1.98)。將清澈溶液在-50℃攪拌2小時(shí)。然后在-75℃逐滴加入(R，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺(1.4g，3.21mmol，Eq：1.00)在四氫呋喃(10ml)中的溶液。將反應(yīng)混合物在-50℃攪拌3小時(shí)，并且在-75℃用10ml飽和NH4Cl-溶液和30ml水猝滅，接著用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。將合并的有機(jī)萃取物用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到橙色油狀物。將殘余物通過急驟色譜(50g硅膠，0-80％EtOAc，在庚烷中)純化，得到2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(R)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基甲硅烷基-吡啶-2-基)-2-[(R/S)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基]-1-甲基-乙基}-酰胺，為2差向異構(gòu)體的1∶1混合物。MS(ESI)：m/z＝733.2；735.4[M+H]+。A5b(R3＝CH2F)：2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基硅烷基-吡啶-2-基)-1-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2-氟-乙基}-酰胺根據(jù)對(duì)于中間體A5a所描述的程序，從2-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-1-甲基-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯1-氧化物(2.6g，8.71mmol，Eq：1.98)和(R，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2-氟亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺(2g，4.41mmol，Eq：1.00)制備，得到2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基硅烷基-吡啶-2-基)-1-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2-氟-乙基}-酰胺(440mg，585μmol，13.3％收率)，為黃色固體，為2差向異構(gòu)體的1∶1混合物。MS(ESI)：m/z＝751.2；753.3[M+H]+。A5c(R3＝CHF2)：2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基硅烷基-吡啶-2-基)-1-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2，2-二氟-乙基}-酰胺根據(jù)對(duì)于中間體A5a所述的程序，從2-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-1-甲基-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯1-氧化物(1.47g，4.92mmol，Eq：1.9)和(S，E)-N-(1-(6-溴-3-氟-4-(三乙基甲硅烷基)吡啶-2-基)-2，2-二氟亞乙基)-2-甲基丙烷-2-亞磺酰胺(1.22g，2.59mmol，Eq：1.00)制備，得到2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基硅烷基-吡啶-2-基)-1-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2，2-二氟-乙基}-酰胺(1.545g，2.08mmol，77.5％收率)，為黃色膠狀物，為2差向異構(gòu)體的1∶1混合物。MS(ESI)：m/z＝769.5；771.6[M+H]+。中間體A6的合成A6a(R3＝Me)：2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(R)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(R/S)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基]-1-甲基-乙基}-酰胺在23℃向2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(R)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基甲硅烷基-吡啶-2-基)-2-[(R/S)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基]-1-甲基-乙基}-酰胺(3.82g，5.2mmol，Eq：1.00)在四氫呋喃(50ml)和DMF(10ml)中的溶液中加入乙酸(313mg，298μl，5.21mmol，Eq：1.0)和無水氟化鉀(302mg，5.21mmol，Eq：1.0)。將反應(yīng)混合物在23℃攪拌3小時(shí)。蒸發(fā)反應(yīng)混合物，隨后用乙酸乙酯/NaHCO3萃取兩次，用鹽水洗滌有機(jī)層，用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到粗制2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(R)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(R/S)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基]-1-甲基-乙基}-酰胺(2.88g，4.64mmol，89.3％收率)，為差向異構(gòu)體的1∶1混合物，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下使用。MS(ESI)：m/z＝619.3；621.5[M+H]+。A6b(R3＝CH2F)：2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2-氟-乙基}-酰胺根據(jù)對(duì)于中間體A6a所述的程序，從2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基硅烷基-吡啶-2-基)-1-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2-氟-乙基}-酰胺(780mg，1.04mmol，Eq：1.00)制備，得到2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2-氟-乙基}-酰胺(660mg，1.04mmol，99.8％收率)，為淺黃色油狀物，為差向異構(gòu)體的1∶1混合物，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下使用。MS(ESI)：m/z＝637.2；639.5[M+H]+。A6c(R3＝CHF2)：2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2，2-二氟-乙基}-酰胺根據(jù)對(duì)于中間體A6a所述的程序，從2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-4-三乙基硅烷基-吡啶-2-基)-1-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2，2-二氟-乙基}-酰胺(1.54g，2.00mmol，Eq：1.00)制備，得到2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2，2-二氟-乙基}-酰胺(1.49g，2.27mmol，99.8％收率，90％純度)，為淺黃色油狀物，為差向異構(gòu)體的1∶1混合物，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下即使用。MS(ESI)：m/z＝655.2；657.3[M+H]+。中間體A7的合成A7a(R3＝Me)：(2R)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1-[(1R/S)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺在23℃向2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(R)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(R/S)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基]-1-甲基-乙基}-酰胺(2.88g，4.64mmol，Eq：1.0)在THF(10ml)中的溶液中加入HCl(4N，在二烷中)(1.74ml，6.97mmol，Eq：1.5)。攪拌1h后，將反應(yīng)混合物蒸發(fā)。隨后加入TFA(26.5g，17.9ml，232mmol，Eq：100)并在23℃繼續(xù)攪拌18h。蒸發(fā)深紅色反應(yīng)溶液，用飽和NaHCO3-溶液/乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌有機(jī)層，用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)。將殘余物通過急驟色譜(20g硅膠，0-10％MeOH，在CH2Cl2中)純化，得到(2R)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1-[(1R/S)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺(700mg，1.92mmol，82.5％收率)，為淺褐色固體(差向異構(gòu)體的1∶1混合物)。MS(ESI)：m/z＝365.2；367.4[M+H]+。A7b(R3＝CH2F)：(2S)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1-氟-3-[(1S/R)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺根據(jù)對(duì)于中間體A7a所述的程序，從2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2-氟-乙基}-酰胺(650mg，1.02mmol，Eq：1.00)制備，得到(2S)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1-氟-3-[(1S/R)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺(320mg，835μmol，81.9％收率)，為白色固體(差向異構(gòu)體的1∶1混合物)。MS(ESI)：m/z＝383.2；385.4[M+H]+。A7c(R3＝CHF2)：(2S)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1，1-二氟-3-[(1S/R)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺根據(jù)對(duì)于中間體A7a所述的程序，從2-甲基-丙烷-2-亞磺酸{(S)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-2-[(S/R)-2-(2，4-二甲氧基-芐基)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基甲基]-2，2-二氟-乙基}-酰胺(1.49g，2.27mmol，Eq：1.00)制備，得到(2S)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1，1-二氟-3-[(1S/R)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺(780mg，1.94mmol，86％收率)，為白色固體(差向異構(gòu)體的1∶1混合物)。MS(ESI)：m/z＝401.2；403.4[M+H]+。中間體A8和A9的合成A9a(R3＝Me)：N-[(3R，4aR)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-苯甲酰胺A9b(R3＝Me)：N-[(3R，4aS)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-苯甲酰胺步驟1：在23℃向(R)-1-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-1-甲基-2-((R/S)-1-氧代-3，4，5，6-四氫-2H-1λ6-[1，2，7]硫雜二氮雜-1-基)-乙胺(690mg，1.89mmol，Eq：1.00)的混合物在四氫呋喃(34.5ml)中的溶液中加入異硫氰酸苯甲酰酯(339mg，279μl，2.08mmol，Eq：1.1)。在23℃攪拌1小時(shí)后，蒸發(fā)淺黃色溶液，得到中間體硫脲A8a/b，其直接用于下一步驟。步驟2：將來自步驟1的中間體硫脲A8a/b溶解在乙腈(34.5ml)中并且加入EDC·HCl(543mg，2.83mmol，Eq：1.5)并將反應(yīng)混合物在80℃攪拌2小時(shí)。將淺黃色溶液蒸發(fā)并將殘余物通過色譜(20g硅膠，0-50％EtOAc，在庚烷中)純化，得到N-[(3R，4aR)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-苯甲酰胺(240mg，485μmol，25.7％收率)(為較快洗脫的異構(gòu)體)和N-[(3R，4aS)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-苯甲酰胺(220mg，445μmol，23.6％收率)(為較慢洗脫的異構(gòu)體)MS(ESI)：m/z＝494.3；496.2[M+H]+。A9c(R3＝CH2F)：N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]苯甲酰胺根據(jù)對(duì)于中間體A9a/b所述的程序，以兩個(gè)步驟從(2S)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1-氟-3-[(1S/R)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺(320mg，835μmol，Eq：1.00)制備，得到N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]苯甲酰胺(332mg，648μmol，77.6％收率)，為白色泡沫(差向異構(gòu)體的1∶1混合物)。MS(ESI)：m/z＝512.2；514.3[M+H]+。A9d(R3＝CHF2)：N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]苯甲酰胺根據(jù)對(duì)于中間體A9a/b所述的程序，以兩個(gè)步驟從(2S)-2-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-1，1-二氟-3-[(1S/R)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7-二氮雜環(huán)庚-7-烯-1-基]丙-2-胺(780mg，1.94mmol，Eq：1.00)制備，得到N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]苯甲酰胺(1.066g，1.94mmol，99％收率，90％純度)，為白色固體(差向異構(gòu)體的1∶1混合物)。MS(ESI)：m/z＝530.3；532.4[M+H]+。中間體A10的合成A10a(R3＝Me)：(3R，4aR)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯步驟1：在23℃向N-[(3R，4aR)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-苯甲酰胺(230mg，465μmol，Eq：1.00)在四氫呋喃(4ml)中的溶液中加入三乙胺(104mg，143μl，1.02mmol，Eq：2.2)和DMAP(11.4mg，93.0μmol，Eq：0.2)，接著加入Boc2O(223mg，1.02mmol，Eq：2.2)。將反應(yīng)混合物在23℃攪拌4小時(shí)。蒸發(fā)所有揮發(fā)物，得到中間體N-Boc/N-苯甲?；衔?，其直接用于下一步驟。步驟2：將來自步驟1的中間體N-Boc/N-苯甲?；衔锶芙庠诩状?2ml)中并加入氨(7N，在甲醇中)(1.66ml，11.6mmol，Eq：25)，并將混合物在23℃攪拌30min。蒸發(fā)所有揮發(fā)物并將殘余物通過色譜(20g硅膠，0-50％EtOAc，在庚烷中)純化，得到(3R，4aR)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯(168mg，343μmol，73.6％收率)，為白色泡沫。MS(ESI)：m/z＝490.1；492.2[M+H]+。A10b(R3＝Me)：(3R，4aS)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯步驟1：在23℃向N-[(3R，4aS)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-苯甲酰胺(253mg，512μmol，Eq：1.00)在四氫呋喃(4ml)中的溶液中加入三乙胺(114mg，157μl，1.13mmol，Eq：2.2)和DMAP(12.5mg，102μmol，Eq：0.2)，接著加入Boc2O(246mg，1.13mmol，Eq：2.2)。將反應(yīng)混合物在23℃攪拌4小時(shí)。蒸發(fā)所有揮發(fā)物，得到中間體N-Boc/N-苯甲?；衔?，其直接用于下一步驟。步驟2：將來自步驟1的中間體N-Boc/N-苯甲?；衔锶芙庠诩状?2ml)中并且加入氨(7N，在甲醇中)(1.66ml，11.6mmol，Eq：25)并且將混合物在23℃攪拌30min。蒸發(fā)所有揮發(fā)物并將殘余物通過色譜(20g硅膠，0-50％EtOAc，在庚烷中)純化，得到(3R，4aS)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯(213mg，434μmol，84.9％收率)，為白色泡沫。MS(ESI)：m/z＝490.1；492.2[M+H]+。A10c(R3＝CH2F)：N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)對(duì)于中間體A10所述的程序，從N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]苯甲酰胺(328mg，640μmol，Eq：1.00)制備，得到N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(242mg，476μmol，74.4％收率)，為白色泡沫(差向異構(gòu)體的1∶1混合物)。MS(ESI)：m/z＝508.3；510.2[M+H]+。A10d(R3＝CHF2)：N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)對(duì)于中間體A10所述的程序，從N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]苯甲酰胺(1.06g，1.93mmol，Eq：1.00)制備，得到N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(684mg，1.30mmol，67.3％收率)，為白色泡沫(差向異構(gòu)體的1∶1混合物)。MS(ESI)：m/z＝526.4；528.2[M+H]+。中間體Boc-氨基吡啶A11的合成A11a(R3＝Me)：[(3R，4aR)-3-(6-氨基-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯在23℃向(3R，4aR)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯(167mg，341μmol，Eq：1.00)在二烷(3.00ml)和水(1.00ml)中的溶液中加入疊氮化鈉(177mg，2.72mmol，Eq：8.0)，接著加入碘化銅(I)(25.9mg，136μmol，Eq：0.4)、L-抗壞血酸鈉(13.5mg，68.1μmol，Eq：0.2)并且最后加入反式-N，N′-二甲基環(huán)己烷-1，2-二胺(29.1mg，32.2μl，204μmol，Eq：0.6)。在70℃將黑色反應(yīng)混合物攪拌30min。將深綠色反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3-溶液猝滅，然后用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到褐色油狀物，將其通過急驟色譜(10g硅膠；0-100％乙酸乙酯，在庚烷中)純化，得到[(3R，4aR)-3-(6-氨基-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯(36mg，84.4μmol，24.8％收率)，為淺黃色泡沫。MS(ESI)：m/z＝427.4[M+H]+。A11b(R3＝Me)：[(3R，4aS)-3-(6-氨基-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯在23℃向(3R，4aS)-3-(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯(213mg，434μmol，Eq：1.00)在二烷(3.00ml)和水(1.00ml)中的溶液中加入疊氮化鈉(226mg，3.47mmol，Eq：8.0)，接著加入碘化銅(I)(33.1mg，174μmol，Eq：0.4)、L抗壞血酸鈉(17.2mg，86.9μmol，Eq：0.2)并且最后加入反式-N，N′-二甲基環(huán)己烷-1，2-二胺(37.1mg，41.1μl，261μmol，Eq：0.6)。將黑色反應(yīng)混合物在70℃攪拌1h。將深綠色反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3-溶液猝滅，然后用乙酸乙酯萃取兩次。將合并的有機(jī)層用Na2SO4干燥，過濾并蒸發(fā)，得到褐色油狀物，將其通過急驟色譜(10g硅膠；0-20％甲醇于二氯甲烷中)純化，得到[(3R，4aS)-3-(6-氨基-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯(154mg，307μmol，70.7％收率)，為灰白色固體。MS(ESI)：m/z＝427.4[M+H]+。A11c(R3＝CH2F)：N-[(1S，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯A11d(R3＝CH2F)：N-[(1R，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)對(duì)于中間體A11所述的程序，從N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(242mg，476μmol，Eq：1.00)制備，得到較快洗脫的異構(gòu)體N-[(1S，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(61mg，137μmol，28.8％收率)，為白色泡沫，以及得到較慢洗脫的異構(gòu)體N-[(1R，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(76mg，171μmol，35.9％收率)，為淺黃色固體。MS(ESI)：m/z＝445.4[M+H]+。A11e(R3＝CHF2)：N-[(1S，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯A11f(R3＝CHF2)：N-[(1R，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)對(duì)于中間體A11所述的程序，從N-[(1R/S，10S)-10-(6-溴-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(684mg，1.30mmol，Eq：1.00)制備，得到較快洗脫的異構(gòu)體N-[(1S，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(87mg，188μmol，14.5％收率)，為黃色泡沫，并且得到較慢洗脫的異構(gòu)N-[(1R，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(156mg，337μmol，25.9％收率)，為淺褐色泡沫。MS(ESI)：m/z＝463.5[M+H]+。中間體Boc-酰胺A12脫保護(hù)的酰胺I的合成用于將Boc-氨基吡啶A11與酸偶聯(lián)得到Boc-酰胺A12的通用程序T3P-方法：在22℃向Boc-氨基吡啶A11(0.10mmol)和酸(0.2mmol)在EtOAc(1.2ml)中的溶液中加入T3P(50％，在EtOAc中，0.09ml，0.15mmol)并繼續(xù)攪拌2h。加入另一部分的T3P(0.05ml，0.08mmol)并繼續(xù)攪拌2h。將混合物在飽和NaHCO3水溶液和EtOAc之間分配，干燥有機(jī)層，蒸發(fā)并將殘余物通過急驟色譜(SiO2，EtOAc在庚烷中的梯度)純化，得到Boc-酰胺A12。Ghosez’s試劑方法：在0℃向酸(197μmol，Eq：1.5)在無水二氯甲烷(1.5ml)中的懸浮液中逐滴加入1-氯-N，N，2-三甲基丙烯基胺(Ghosez’s試劑)(52.8mg，395μmol，Eq：3)并將混合物在0℃攪拌1小時(shí)。然后在0℃將混合物加入至Boc-氨基吡啶A11(132μmol，Eq：1.00)和二異丙基乙胺(51.0mg，69.0μl，395μmol，Eq：3)在無水二氯甲烷(1.5ml)中的溶液中。去除冰浴并將混合物在環(huán)境溫度攪拌1至16小時(shí)。在環(huán)境溫度完全蒸發(fā)并直接通過急驟色譜(硅膠，EtOAc在庚烷中的梯度)純化，得到Boc-酰胺A12。用于將Boc-酰胺A12脫保護(hù)得到酰胺I的通用程序在22℃向Boc-酰胺A12(0.04mmol)在二氯甲烷(0.5ml)中的溶液中加入三氟乙酸(1.2mmol)并繼續(xù)攪拌16h。蒸發(fā)混合物，將殘余物用EtOAc稀釋并再次蒸發(fā)。將殘余物用二乙醚/戊烷研磨，過濾懸浮液并干燥殘余物，得到酰胺I。備選處理以得到游離堿：在攪拌16h后，在真空中去除所有揮發(fā)物，將殘余物在EtOAc和飽和NaHCO3-溶液之間分配，將有機(jī)層用鹽水洗滌并用Na2SO4干燥。過濾并在真空中去除溶劑，留下粗產(chǎn)物，將其通過急驟色譜純化，得到酰胺I。A12a(R3＝Me)：((3R，4aR)-3-{6-[(5-氰基-吡啶-2-羰基)-氨基]-3-氟-吡啶-2-基}-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基)-氨基甲酸叔丁酯根據(jù)Ghosez’s試劑-方法，將[(3R，4aR)-3-(6-氨基-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯A11a(28mg，65.6μmol)與5-氰基甲基吡啶酸偶聯(lián)，得到標(biāo)題化合物(64mg，69.0μmol，105％收率)，為黃色油狀物，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下即使用。MS(ESI)：m/z＝557.5[M+H]+。A12b(R3＝Me)：((3R，4aS)-3-{6-[(5-氰基-吡啶-2-羰基)-氨基]-3-氟-吡啶-2-基}-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基)-氨基甲酸叔丁酯根據(jù)Ghosez’s試劑-方法，將[(3R，4aS)-3-(6-氨基-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯A11b(71mg，166μmol)與5-氰基甲基吡啶酸偶聯(lián)，急驟色譜(SiO2，MeOH在DCM中的梯度，0至20％MeOH)后，得到標(biāo)題化合物(144mg，186μmol，112％收率)，為黃色油狀物，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下即使用。MS(ESI)：m/z＝557.4[M+H]+。A12c(R3＝Me)：((3R，4aS)-3-{6-[(5-氰基-3-甲基-吡啶-2-羰基)-氨基]-3-氟-吡啶-2-基}-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基)-氨基甲酸叔丁酯根據(jù)Ghosez’s試劑-方法，將[(3R，4aS)-3-(6-氨基-3-氟-吡啶-2-基)-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基]-氨基甲酸叔丁酯A11b(35mg，82.1μmol)與5-氰基-3-甲基甲基吡啶酸偶聯(lián)，得到粗制標(biāo)題化合物(70mg，85.9μmol，105％收率)，為黃色油狀物，其在未經(jīng)進(jìn)一步純化下即使用。MS(ESI)：m/z＝571.3[M+H]+。A12d(R3＝CH2F)：N-[(1S，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)Ghosez’s試劑-方法，將N-[(1S，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯A11c(61mg，137μmol)與5-氰基甲基吡啶酸偶聯(lián)，在急驟色譜(硅膠，10g，0-80％EtOAc，在庚烷中)后，得到標(biāo)題化合物(39mg，67.9μmol，49.5％收率)，為淺黃色泡沫。MS(ESI)：m/z＝575.5[M+H]+。A12e(R3＝CH2F)：N-[(1R，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)Ghosez’s試劑-方法，將N-[(1R，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯A11d(76mg，171μmol)與5-氰基甲基吡啶酸偶聯(lián)，在急驟色譜(硅膠，10g，0-80％EtOAc，在庚烷中)后，得到標(biāo)題化合物(84mg，146μmol，85.5％收率)，為黃色泡沫。MS(ESI)：m/z＝575.5[M+H]+。A12f(R3＝CHF2)：N-[(1S，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)Ghosez’s試劑-方法，將N-[(1S，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯A11e(51mg，110μmol)與5-氰基甲基吡啶酸偶聯(lián)，在急驟色譜(硅膠，10g，0-80％EtOAc，在庚烷中)后，得到標(biāo)題化合物(38mg，64.1μmol，58.2％收率)，為淺褐色泡沫。MS(ESI)：m/z＝593.5[M+H]+。A12g(R3＝CHF2)：N-[(1R，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯根據(jù)Ghosez’s試劑-方法，將N-[(1R，10S)-10-(6-氨基-3-氟吡啶-2-基)-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯A11f(100mg，216μmol)與5-氰基甲基吡啶酸偶聯(lián)，在急驟色譜(硅膠，10g，0-80％EtOAc，在庚烷中)后，得到標(biāo)題化合物(71mg，120μmol，55.4％收率)，為灰白色泡沫。MS(ESI)：m/z＝593.4[M+H]+。實(shí)施例15-氰基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aR)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺將((3R，4aR)-3-{6-[(5-氰基-吡啶-2-羰基)-氨基]-3-氟-吡啶-2-基}-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基)-氨基甲酸叔丁酯(60mg，64.7μmol，Eq：1.00)用TFA在DCM中脫保護(hù)，在急驟色譜(SiO2，5g，0-10％MeOH，在EtOAc中)后，得到標(biāo)題化合物(12mg，26.3μmol，40.6％收率)，為淺褐色固體。MS(ISP)：m/z＝457.2[(M+H)+]。實(shí)施例25-氰基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aS)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺將((3R，4aS)-3-{6-[(5-氰基-吡啶-2-羰基)-氨基]-3-氟-吡啶-2-基}-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基)-氨基甲酸叔丁酯(144mg，186μmol，Eq：1.00)用TFA在DCM中脫保護(hù)，在急驟色譜(SiO2，5g，0-10％MeOH，在EtOAc+DCM/MeOH/NH4OH110∶10∶1中)后，得到標(biāo)題化合物(53mg，116μmol，62.3％收率)，為灰白色固體。MS(ISP)：m/z＝457.3[(M+H)+]。實(shí)施例35-氰基-3-甲基-吡啶-2-甲酸[6-((3R，4aS)-1-氨基-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-3-基)-5-氟-吡啶-2-基]-酰胺將((3R，4aS)-3-{6-[(5-氰基-3-甲基-吡啶-2-羰基)-氨基]-3-氟-吡啶-2-基}-3-甲基-4a-氧代-3，4，6，7，8，9-六氫-4aλ6-硫雜-2，5，9a-三氮雜-苯并環(huán)庚烯-1-基)-氨基甲酸叔丁酯(70mg，85.9μmol，Eq：1.00)用TFA在DCM中脫保護(hù)，在急驟色譜(SiO2，10g，0-10％MeOH，在EtOAc+DCM/MeOH/NH4OH110∶10∶1中)后，得到標(biāo)題化合物(18mg，38.3μmol，44.6％收率)，為淺褐色泡沫。MS(ISP)：m/z＝471.3[(M+H)+]。實(shí)施例4N-[6-[(1S，10S)-8-氨基-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺將N-[(1S，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(39mg，67.9μmol，Eq：1.00)用TFA在DCM中脫保護(hù)，在急驟色譜(SiO2，5g，0-10％MeOH，在EtOAc+DCM/MeOH/NH4OH110∶10∶1中)后，得到標(biāo)題化合物(8.5mg，17.9μmol，26.4％收率)，為灰白色固體。MS(ISP)：m/z＝475.2[(M+H)+]。實(shí)施例5N-[6-[(1R，10S)-8-氨基-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺將N-[(1R，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(84mg，146μmol，Eq：1.00)用TFA在DCM中脫保護(hù)，在急驟色譜(SiO2，5g，0-10％MeOH，在EtOAc+DCM/MeOH/NH4OH110∶10∶1中)后，得到標(biāo)題化合物(42mg，88.5μmol，60.5％收率)，為淺黃色泡沫.MS(ISP)：m/z＝475.2[(M+H)+]。實(shí)施例6N-[6-[(1S，10S)-8-氨基-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺將N-[(1S，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(38mg，64.1μmol，Eq：1.00)用TFA在DCM中脫保護(hù)，在急驟色譜(SiO2，5g，0-10％MeOH，在EtOAc+DCM/MeOH/NH4OH110∶10∶1中)后，得到標(biāo)題化合物(22mg，17.9μmol，69.7％收率)，為淺黃色泡沫。MS(ISP)：m/z＝493.3[(M+H)+]。實(shí)施例7N-[6-[(1R，10S)-8-氨基-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-10-基]-5-氟吡啶-2-基]-5-氰基吡啶-2-甲酰胺將N-[(1R，10S)-10-[6-[(5-氰基吡啶-2-羰基)氨基]-3-氟吡啶-2-基]-10-(二氟甲基)-1-氧代-1λ6-硫雜-2，7，9-三氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-1，8-二烯-8-基]氨基甲酸叔丁酯(71mg，120μmol，Eq：1.00)用TFA在DCM中脫保護(hù)，在急驟色譜(SiO2，5g，0-5％MeOH，在DCM中)后，得到標(biāo)題化合物(57mg，115.9μmol，96.6％收率)，為淺黃色泡沫。MS(ISP)：m/z＝493.2[(M+H)+]。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3