發(fā)明背景毒蕈堿性乙酰膽堿受體(mAChR)是介導(dǎo)神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中的作用的G蛋白偶聯(lián)受體超家族成員。已經(jīng)克隆了五個(gè)mAChR亞型，M1至M5。M1mAChR主要在皮層、海馬、紋狀體和丘腦中突觸后表達(dá)；M2mAChR主要位于腦干和丘腦中，不過(guò)也存在于皮層、海馬和紋狀體中，在那里它們位于膽堿能突觸末梢上(Langmead等人，2008BrJPharmacol)。然而，M2mAChR還在心臟組織(其中它們介導(dǎo)心臟的迷走神經(jīng)支配)上以及平滑肌和外分泌腺中外周表達(dá)。M3mAChR以相對(duì)低的水平在CNS中表達(dá)，但在平滑肌和腺組織如汗腺和唾液腺中廣泛表達(dá)(Langmead等人，2008BrJPharmacol)。中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的蕈毒堿受體，特別是M1mAChR，在介導(dǎo)高級(jí)認(rèn)知過(guò)程方面起關(guān)鍵作用。與認(rèn)知損害相關(guān)的疾病，如阿爾茨海默病，伴隨基底前腦中膽堿能神經(jīng)元的喪失(Whitehouse等人，1982Science)。在也具有認(rèn)知損害作為臨床現(xiàn)象重要組分的精神分裂癥中，在精神分裂癥受試者的前額皮質(zhì)、海馬和尾狀殼核中的mAChR密度降低(Dean等人，2002MolPsychiatry)。此外，在動(dòng)物模型中，中央膽堿能通路的阻斷或損傷導(dǎo)致嚴(yán)重的認(rèn)知缺陷并且已經(jīng)顯示非選擇性mAChR拮抗劑在精神病患者中誘導(dǎo)擬精神病作用。膽堿能替代療法主要基于使用乙酰膽堿酯酶抑制劑以防止內(nèi)源性乙酰膽堿分解。已經(jīng)顯示這些化合物在臨床中對(duì)征候性認(rèn)知能力下降顯示功效，但是產(chǎn)生因刺激外周M2和M3mAChR所致的劑量限制性不良事件，包括胃腸道運(yùn)動(dòng)性紊亂、心動(dòng)過(guò)緩、惡心和嘔吐(http：//www.drugs.com/pro/donepezil.html；http：//www.drugs.com/pro/rivastigmine.html)。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)嘗試已經(jīng)指向鑒別M1mAChR直接激動(dòng)劑，目的在于引起認(rèn)知功能選擇性改善，伴隨有利的不良作用特征。此類(lèi)嘗試導(dǎo)致鑒別了由化合物如呫諾美林、AF267B、沙可美林、米拉美林和西維美林示例的一系列激動(dòng)劑。這些化合物中許多已經(jīng)顯示在嚙齒類(lèi)和/或非人靈長(zhǎng)類(lèi)中的臨床前認(rèn)知模型中非常有效。米拉美林已經(jīng)在嚙齒類(lèi)中對(duì)莨菪堿誘導(dǎo)的工作記憶和空間記憶缺陷顯示功效；沙可美林在狨猴中在目視物體區(qū)分任務(wù)中展示功效并且呫諾美林在被動(dòng)回避范例中逆轉(zhuǎn)mAChR拮抗劑誘導(dǎo)的認(rèn)知表現(xiàn)缺陷。阿爾茨海默病(AD)是侵襲老年人的最常見(jiàn)的神經(jīng)變性病癥(2006年全球2660萬(wàn)人)，導(dǎo)致嚴(yán)重的記憶喪失和認(rèn)知功能障礙。該疾病的病原學(xué)是復(fù)雜的，但是以兩種標(biāo)志性腦病狀為特征：主要由淀粉樣蛋白-β肽(Aβ)組成的淀粉樣蛋白斑聚集，以及由過(guò)度磷酸化的τ蛋白形成的神經(jīng)原纖維纏結(jié)。認(rèn)為Aβ積累是AD進(jìn)展中的核心特征，因而，用于治療AD的許多假定療法目前靶向?qū)β產(chǎn)生的抑制。Aβ源自膜結(jié)合型淀粉樣前體蛋白(APP)的蛋白水解切割。APP由兩條途徑加工：非淀粉樣蛋白生成途徑和淀粉樣蛋白生成途徑。APP被γ-分泌酶切割是兩條途徑共有的，但是在非淀粉樣蛋白生成途徑中，APP被α-分泌酶切割以得到可溶性APPα。然而，在淀粉樣蛋白生成途徑中，APP被β-分泌酶切割以得到可溶性APPβ以及Aβ。體外研究已經(jīng)顯示，mAChR激動(dòng)劑可以促進(jìn)APP向可溶性方向加工(非淀粉樣蛋白生成途徑)。體內(nèi)研究顯示，mAChR激動(dòng)劑(AF267B)改變3xTgAD轉(zhuǎn)基因小鼠(阿爾茨海默病不同組分的模型)中的疾病樣病狀(Caccamo等人，2006Neuron)。已經(jīng)顯示mAChR激動(dòng)劑西維美林在阿爾茨海默患者中導(dǎo)致Aβ腦脊液水平小但明顯的降低，因此顯示潛在的調(diào)節(jié)疾病功效(Nitsch等人，2000Neurol)。臨床前研究已經(jīng)提示，mAChR激動(dòng)劑以一系列臨床前范例顯示非典型抗精神病藥樣特征。mAChR激動(dòng)劑呫諾美林可逆轉(zhuǎn)多巴胺介導(dǎo)的多種行為，包括大鼠中苯丙胺誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)、小鼠中阿撲嗎啡誘導(dǎo)的攀爬、單側(cè)6-OH-DA損傷的大鼠中多巴胺激動(dòng)劑驅(qū)動(dòng)的翻轉(zhuǎn)以及猴(無(wú)EPS易患性)中苯丙胺誘導(dǎo)的運(yùn)動(dòng)不安定。還已經(jīng)顯示它抑制A10，但是不抑制A9，多巴胺細(xì)胞放電和條件化回避，并且在大鼠中誘導(dǎo)前額皮質(zhì)和伏核中的c-fos表達(dá)，但是不誘導(dǎo)紋狀體中的c-fos表達(dá)。這些數(shù)據(jù)均提示為非典型抗精神病藥樣特征(Mirza等人，1999CNSDrugRev)。毒蕈堿受體也已涉及成癮(addicition)的神經(jīng)生物學(xué)?？煽ㄒ蚝推渌砂a性物質(zhì)的增強(qiáng)作用是由中腦邊緣多巴胺系統(tǒng)介導(dǎo)的，其中行為和神經(jīng)化學(xué)研究已經(jīng)顯示膽堿能毒蕈堿受體亞型在多巴胺能神經(jīng)傳遞的調(diào)節(jié)中起重要作用。例如M(4)(-/-)小鼠由于暴露于可卡因而展示出顯著增強(qiáng)的獎(jiǎng)勵(lì)驅(qū)動(dòng)行為(Schmidt等人Psychopharmacology(2011)8月；216(3)：367-78)。此外，已經(jīng)展示呫諾美林可阻斷這些模型中可卡因的作用。毒蕈堿受體也參與運(yùn)動(dòng)的控制，并且潛在代表以下疾病的新型治療：運(yùn)動(dòng)障礙，例如帕金森病、ADHD、亨延頓病、圖雷特綜合征以及與作為潛在致病因素驅(qū)動(dòng)疾病的與多巴胺能功能障礙有關(guān)的其他綜合征。呫諾美林、沙可美林、米拉美林和西維美林均已推進(jìn)到用于治療阿爾茨海默病和/或精神分裂癥的臨床開(kāi)發(fā)的各個(gè)階段。呫諾美林的II期臨床研究展示其對(duì)于各種認(rèn)知癥狀范圍(包括與阿爾茨海默病有關(guān)的行為干擾和幻覺(jué))的功效(Bodick等人，1997ArchNeurol)。該化合物還在精神分裂癥患者的小型II期研究中得以評(píng)估并且導(dǎo)致與安慰劑對(duì)照相比陽(yáng)性和陰性癥狀顯著減少(Shekhar等人，2008AmJPsych)。然而，在所有臨床研究中呫諾美林和其他有關(guān)mAChR激動(dòng)劑已經(jīng)展示對(duì)于膽堿能不良事件的不可接受的安全界限，所述膽堿能不良事件包括惡心、胃腸道疼痛、腹瀉(diahorrhea)、大量出汗(出汗過(guò)多)、多涎(分泌唾液過(guò)多)、暈厥和心動(dòng)過(guò)緩。毒蕈堿受體參與中樞和外周疼痛。疼痛可分為三個(gè)不同類(lèi)型：急性、炎性和神經(jīng)性。急性疼痛在維持生物安全免受可能產(chǎn)生組織損傷的刺激方面起重要保護(hù)作用；然而需要進(jìn)行術(shù)后疼痛的處理。炎性疼痛可由于許多原因出現(xiàn)，包括組織損傷、自身免疫反應(yīng)和病原體侵入，并且由導(dǎo)致神經(jīng)元炎癥和疼痛的炎性介質(zhì)(如神經(jīng)肽和前列腺素)的作用觸發(fā)。神經(jīng)性疼痛與針對(duì)非疼痛刺激的異常疼痛感覺(jué)有關(guān)。神經(jīng)性疼痛與多種不同疾病/創(chuàng)傷例如脊髓損傷、多發(fā)性硬化、糖尿病(糖尿病性神經(jīng)病)、病毒感染(例如HIV或皰疹)有關(guān)。它也常見(jiàn)于癌癥，原因在于疾病或化療的副作用。已經(jīng)顯示毒蕈堿受體的活化可通過(guò)活化脊髓和腦中更高疼痛中心內(nèi)的受體而在多種疼痛狀態(tài)下止痛。已經(jīng)顯示通過(guò)乙酰膽堿酯酶抑制劑增加乙酰膽堿的內(nèi)源水平，用激動(dòng)劑或變構(gòu)調(diào)節(jié)劑直接活化毒蕈堿受體具有止痛活性。相比之下，用拮抗劑或使用敲除小鼠阻斷毒蕈堿受體會(huì)增加疼痛敏感性。D.F.Fiorino和M.Garcia-Guzman，2012綜述了M1受體在疼痛中作用的證據(jù)。最近，已經(jīng)鑒別了少量化合物，所述化合物顯示對(duì)于M1mAChR亞型超過(guò)外周表達(dá)的mAChR亞型的改進(jìn)的選擇性(Bridges等人，2008BioorgMedChemLett；Johnson等人，2010BioorgMedChemLett；Budzik等人，2010ACSMedChemLett)。盡管相比M3mAChR亞型的選擇性水平增加，但這些化合物中的一些對(duì)該亞型和M2mAChR亞型均保持顯著的激動(dòng)劑活性。在本文中，我們描述了一系列化合物，它們出乎意料地顯示出對(duì)于M1和/或M4mAChR超過(guò)M2和M3受體亞型的高水平的選擇性。附圖說(shuō)明圖的描述可見(jiàn)于實(shí)驗(yàn)部分B和C。圖1顯示，發(fā)現(xiàn)實(shí)施例1-33異構(gòu)體2以劑量依賴性方式逆轉(zhuǎn)莨菪堿誘導(dǎo)的遺忘癥，其近似ED50為約10mg/kg(po)。30mg/kg的作用類(lèi)似于用作陽(yáng)性對(duì)照的膽堿酯酶抑制劑多奈哌齊(0.1mg/kg，ip)產(chǎn)生的作用。圖2顯示了新型測(cè)試化合物對(duì)于大鼠中d-苯丙胺誘導(dǎo)的多動(dòng)的作用。通過(guò)d-苯丙胺引發(fā)的多動(dòng)(或快速移動(dòng))的抑制，評(píng)估了大鼠中的抗精神病樣行為。顯示了實(shí)施例1-21異構(gòu)體2、1-32異構(gòu)體2、1-33異構(gòu)體2、2-7異構(gòu)體2和2-17異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)。本發(fā)明本發(fā)明提供具有作為毒蕈堿M1和/或M4受體激動(dòng)劑的活性的化合物。更具體地，本發(fā)明提供展現(xiàn)出對(duì)M1受體和/或M4受體相對(duì)于M2和M3受體亞型的選擇性的化合物。因此，在一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.1)中，本發(fā)明提供式(1)的化合物：或其鹽，其中Q為含有1、2、3或4個(gè)選自N、O和S的雜原子環(huán)成員的五元或六元單環(huán)雜環(huán)；R1選自氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)；R2選自氫；氟；氯；溴；氰基；羥基；甲氧基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；C1-6非芳族烴基；或R1和R2可以結(jié)合在一起形成6元稠合的芳環(huán)；R3選自氫；氟；氰基；羥基；氨基；和C1-9非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；R4為氫或C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；R5、R6和R7相同或不同，并且各自獨(dú)立地選自氫、任選地被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的非芳族C1-4烴基，或式CH2N(Ra)COORb的基團(tuán)；Ra選自氫和非芳族C1-4烴基；Rb是非芳族C1-4烴基，其任選地被選自以下的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代：氟；氯；溴；氰基；羥基；甲氧基；氨基；或環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；并且虛線指示任選的第二碳-碳鍵，前提是當(dāng)?shù)诙?碳鍵存在時(shí)，則R3不存在。因此，在一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.1a)中，本發(fā)明提供式(1a)的化合物：或其鹽，其中Q為含有1、2、3或4個(gè)選自N、O和S的雜原子環(huán)成員的五元或六元或七元單環(huán)雜環(huán)；R1選自氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)；R2選自氫；氟；氯；溴；氰基；羥基；甲氧基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；C1-6非芳族烴基；或R1和R2可以結(jié)合在一起形成6元稠合的芳環(huán)；R3選自氫；氟；氰基；羥基；氨基；和C1-9非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；R4為氫或C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；R5、R6和R7相同或不同，并且各自獨(dú)立地選自氫、任選地被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的非芳族C1-4烴基，或式CH2N(Ra)COORb的基團(tuán)；Ra選自氫和非芳族C1-4烴基；Rb是非芳族C1-4烴基，其任選地被選自以下的一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)取代：氟；氯；溴；氰基；羥基；甲氧基；氨基；或環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基；并且虛線指示任選的第二碳-碳鍵，前提是當(dāng)?shù)诙?碳鍵存在時(shí)，則R3不存在。因此，在一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.1b)中，本發(fā)明提供式(1b)的化合物：或其鹽，其中Q為經(jīng)任選取代的五元或六元或七元雜環(huán)，其含有1、2、3或4個(gè)選自N、O和S的雜原子環(huán)成員；R3選自氫；氟；氰基；羥基；氨基；和C1-9非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；R4為氫或C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；并且虛線指示任選的第二碳-碳鍵，前提是當(dāng)?shù)诙?碳鍵存在時(shí)，則R3不存在。式(1)、(1a)或(1b)的特定化合物如下面列出的實(shí)施方案1.2至1.180所定義。1.2根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其中Q為芳香或不飽和雜環(huán)。1.3根據(jù)實(shí)施方案1.2所述的化合物，其中Q為芳香雜環(huán)。1.4根據(jù)實(shí)施方案1.3所述的化合物，其中Q為含有氮環(huán)成員以及任選地一個(gè)或兩個(gè)另外的選自O(shè)、N和S的環(huán)成員的芳香雜環(huán)。1.5根據(jù)實(shí)施方案1.4所述的化合物，其中Q為含有氮環(huán)成員以及任選地一個(gè)另外的選自O(shè)、N和S的環(huán)成員的芳香雜環(huán)。1.6根據(jù)實(shí)施方案1.5所述的化合物，其中Q為含有一個(gè)或兩個(gè)氮環(huán)成員的芳香雜環(huán)。1.7根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.6中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Q為五元雜環(huán)，所述五元雜環(huán)與相鄰六元環(huán)通過(guò)所述五元雜環(huán)的碳原子相連。1.8根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.6中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Q為五元雜環(huán)，所述五元雜環(huán)與相鄰六元環(huán)通過(guò)所述五元雜環(huán)的氮原子相連。1.9根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其中Q選自1-吡咯基、2-咪唑基、1-吡唑基、3-吡唑基、5-吡唑基、2-噻唑基、2-噁唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、噁二唑基，及其互變異構(gòu)形式。1.10根據(jù)實(shí)施方案1.6所述的化合物，其中Q為吡咯環(huán)。1.11根據(jù)實(shí)施方案1.6所述的化合物，其中Q為咪唑環(huán)1.12根據(jù)實(shí)施方案1.6所述的化合物，其中Q為吡唑環(huán)。1.13根據(jù)實(shí)施方案1.6所述的化合物，其中Q選自1-吡唑基、3-吡唑基、5-吡唑基及其互變異構(gòu)形式。1.14根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其中Q為含有一個(gè)或多個(gè)氮原子的6元環(huán)。1.15根據(jù)實(shí)施方案1.14所述的化合物，其中Q為吡啶基、吡嗪基(pyrazyl)或含有0-2個(gè)C-C不飽和鍵的2-氧代-3N(3-哌啶-2-酮)環(huán)。1.16根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其中Q為5、6或7元不飽和雜環(huán)。1.17根據(jù)實(shí)施方案1.16所述的化合物，其中Q為5-吡咯烷基。1.18根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其中Q為雙環(huán)；其具有另一個(gè)連接到Q的環(huán)。1.19根據(jù)實(shí)施方案1.1b所述的化合物，其中Q具有一個(gè)或多個(gè)取代基，例如一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自一個(gè)R1和/或R5的取代基，其中R1和R2可以相同或不同。Q的另外的取代基可以包括(L)-R10、(L)-R11和(L)-R12，其中L為鍵或CH2基；R10、R11和R12獨(dú)立地選自氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR15；NR15R16；COR15；CSR15；COOR15；COSR15；OCOR15；NR17COR15；CONR15R16；CSNR15R16；NR17CONR15R16；R17COOR15；OCONR15R16；SR15；SOR15和SO2R15；C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)；其中經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)的任選的取代基選自由以下組成的基團(tuán)R8：氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；和C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；其中R15、R16和R17相同或不同，或可以結(jié)合在一起形成環(huán)，并且各自獨(dú)立地選自氫、非芳族C1-6烴基任選地被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；或式CH2N(Ra)COORb的基團(tuán)；或式(L)-R18的基團(tuán)，其中L為鍵或CH2基團(tuán)并且R18為經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)，其含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式；其中經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)的任選的取代基選自基團(tuán)R8。1.20根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.19中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5、COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)；其中經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)的任選的取代基選自由以下組成的基團(tuán)R8：氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；和C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；1.21根據(jù)實(shí)施方案1.20所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；C1-5非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)；其中經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)的任選的取代基選自由以下組成的基團(tuán)R8：氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；和C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；1.22根據(jù)實(shí)施方案1.21所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1或2個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元芳基或雜芳基環(huán)；其中經(jīng)任選取代的5元或6元芳基或雜芳基環(huán)的任選的取代基選自由以下組成的基團(tuán)R8：氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；和C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；1.23根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.19中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SO2R5；C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)，其中經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)的任選的取代基選自由以下組成的基團(tuán)R8：氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；和C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；1.24根據(jù)實(shí)施方案1.23所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；氰基；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SO2R5；和C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；1.25根據(jù)實(shí)施方案1.24所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；氰基；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；SO2R5；和C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代。1.26根據(jù)實(shí)施方案1.25所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；氰基；NR5R6；COR5；COOR5和C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代。1.27根據(jù)實(shí)施方案1.26所述的化合物，其中R1選自氫；氟；氯；氰基；NH2、COR5；COOR5和C1-4飽和的非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代。1.28根據(jù)實(shí)施方案1.27所述的化合物，其中R1選自氫；COR5；COOR5；CONR5R6和C1-4烷基。1.29根據(jù)實(shí)施方案1.28所述的化合物，其中R1選自氫；COR5；COOR5和C1-3烷基。1.30根據(jù)實(shí)施方案1.29所述的化合物，其中R1選自氫；甲基；乙基和COOR5.1.31根據(jù)實(shí)施方案1.30所述的化合物，其中R1為氫。1.32根據(jù)實(shí)施方案1.30所述的化合物，其中R1為甲基或乙基。1.33根據(jù)實(shí)施方案1.20至1.30所述的化合物，其中R1為COOMe；COOEt；COMe；COEt；CONH2；CF3；CONHMe；CON(Me)2；COCF3；CO-環(huán)丙基；CO-環(huán)丁基；CONHEt；COH；NH2；OMe；1.34根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.33中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R2選自氫；氟；氯；溴；氰基；羥基；甲氧基；和C1-6非芳族烴基；或與R1結(jié)合在一起形成6元稠合的芳環(huán)。1.35根據(jù)實(shí)施方案1.34所述的化合物，其中R2選自氫；氟；羥基；甲氧基；和C1-6非芳族烴基。1.36根據(jù)實(shí)施方案1.35所述的化合物，其中R2選自氫；氟；甲氧基；和C1-4飽和的烴基。1.37根據(jù)實(shí)施方案1.36所述的化合物，其中R2選自氫；氟；甲氧基；和C1-4烷基。1.38根據(jù)實(shí)施方案1.37所述的化合物，其中R2選自氫和C1-3烷基。1.39根據(jù)實(shí)施方案1.38所述的化合物，其中R2選自氫和甲基。1.40根據(jù)實(shí)施方案1.34所述的化合物，其中R2與R1結(jié)合在一起形成6元稠合的芳環(huán)，其可以是芳基或雜芳基。1.41根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.40中任一項(xiàng)所述的化合物，其中虛線表示第二碳-碳鍵并且R3不存在。1.42根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.40中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R3存在并且任選的第二碳-碳鍵不存在。1.43根據(jù)實(shí)施方案1.42所述的化合物，其中R3選自氫；氟；氰基；羥基；氨基；和C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代。1.44根據(jù)實(shí)施方案1.43所述的化合物，其中R3選自氫；氟；氰基；羥基；氨基；和C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代。1.45根據(jù)實(shí)施方案1.44所述的化合物，其中R3選自氫；氟；氰基；羥基；氨基；C1-4烷基和C1-4烷氧基，其中C1-4烷基和C1-4烷氧基各自任選地被一至六個(gè)氟原子取代。1.46根據(jù)實(shí)施方案1.45所述的化合物，其中R3選自氫；氟；羥基和甲氧基。1.47根據(jù)實(shí)施方案1.46所述的化合物，其中R3為氫。1.48根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.47中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R4為氫或非環(huán)狀C1-6烴基。1.49根據(jù)實(shí)施方案1.48所述的化合物，其中R4為氫或非環(huán)狀C1-3烴基。1.50根據(jù)實(shí)施方案1.49所述的化合物，其中R4為氫或C1-3烷基或C2-3炔基。1.51根據(jù)實(shí)施方案1.50所述的化合物，其中R4選自氫、甲基、乙基、乙炔基和1-丙炔基。1.52根據(jù)實(shí)施方案1.51所述的化合物，其中R4選自氫和甲基。1.53根據(jù)實(shí)施方案1.52所述的化合物，其中R4為甲基。1.54根據(jù)前述實(shí)施方案中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R5，當(dāng)存在時(shí)，為任選地被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代的非芳族C1-4烴基；或式CH2N(Ra)COORb的基團(tuán)。1.55根據(jù)實(shí)施方案1.54所述的化合物，其中非芳族C1-4烴基為飽和的C1-4烴基。1.56根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.53中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R5，當(dāng)存在時(shí)，為氫。1.57根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.53中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R5，當(dāng)存在時(shí)，選自氫以及飽和的C1-4烴基。1.58根據(jù)實(shí)施方案1.55或?qū)嵤┓桨?.56所述的化合物，其中飽和的C1-4烴基為C1-4烷基。1.59根據(jù)實(shí)施方案1.58所述的化合物，其中飽和的C1-4烴基為C1-3烷基。1.60根據(jù)實(shí)施方案1.59所述的化合物，其中C1-3烷基選自甲基、乙基和異丙基。1.61根據(jù)實(shí)施方案1.60所述的化合物，其中C1-3烷基為乙基。1.62根據(jù)前述實(shí)施方案中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6，當(dāng)存在時(shí)，為非芳族C1-4烴基。1.63根據(jù)實(shí)施方案1.62所述的化合物，其中非芳族C1-4烴基為飽和的C1-4烴基。1.64根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.61中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R6，當(dāng)存在時(shí)，為氫。1.65根據(jù)實(shí)施方案1.63所述的化合物，其中飽和的C1-4烴基為C1-3烷基。1.66根據(jù)實(shí)施方案1.65所述的化合物，其中C1-3烷基選自甲基、乙基和異丙基。1.67根據(jù)中任一項(xiàng)所述的化合物前述實(shí)施方案其中R7，當(dāng)存在時(shí)，為非芳族C1-4烴基。1.68根據(jù)實(shí)施方案1.67所述的化合物，其中非芳族C1-4烴基為飽和的C1-4烴基。1.69根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.66中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R7，當(dāng)存在時(shí)，為氫。1.70根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.66中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R7，當(dāng)存在時(shí)，選自氫以及飽和的C1-4烴基。1.71根據(jù)實(shí)施方案1.68或?qū)嵤┓桨?.70所述的化合物，其中飽和的C1-4烴基為C1-4烷基。1.72根據(jù)實(shí)施方案1.71所述的化合物，其中飽和的C1-4烴基為C1-3烷基。1.73根據(jù)實(shí)施方案1.72所述的化合物，其中C1-3烷基選自甲基、乙基和異丙基。1.74根據(jù)前述實(shí)施方案中任一項(xiàng)所述的化合物，其中，當(dāng)R1為經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)時(shí)，其選自含有0、1或2或3個(gè)選自O(shè)、N和S及其氧化形式的雜原子的芳環(huán)。1.75根據(jù)實(shí)施方案1.74所述的化合物，其中芳環(huán)為碳環(huán)。1.76根據(jù)實(shí)施方案1.74所述的化合物，其中芳環(huán)為雜環(huán)。1.77根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.73中任一項(xiàng)所述的化合物，其中，當(dāng)R1為經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)時(shí)，其選自含有0、1或2或3個(gè)選自O(shè)、N和S及其氧化形式的雜原子的非芳環(huán)。1.78根據(jù)實(shí)施方案1.77所述的化合物，其中非芳環(huán)為碳環(huán)。1.79根據(jù)實(shí)施方案1.77所述的化合物，其中非芳環(huán)為雜環(huán)。1.80根據(jù)實(shí)施方案1.74至1.79中任一項(xiàng)所述的化合物，其中環(huán)為5-元環(huán)。1.81根據(jù)實(shí)施方案1.74至1.79中任一項(xiàng)所述的化合物，其中環(huán)為6-元環(huán)。1.82根據(jù)前述實(shí)施方案中任一項(xiàng)所述的化合物，其中，當(dāng)R1為經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)時(shí)，其被0、1、2或3個(gè)取代基R8取代。1.83根據(jù)實(shí)施方案1.82所述的化合物，其中存在0、1或2個(gè)取代基R8。1.84根據(jù)實(shí)施方案1.83所述的化合物，其中存在0個(gè)取代基R8。1.85根據(jù)實(shí)施方案1.82所述的化合物，其中存在1個(gè)取代基R8。1.86根據(jù)實(shí)施方案1.82所述的化合物，其中存在2個(gè)取代基R8。1.87根據(jù)實(shí)施方案1.81、1.82、1.83、1.85和1.86中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R8當(dāng)存在時(shí)選自氟；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；和C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；1.88根據(jù)實(shí)施方案1.87所述的化合物，其中R8選自氟；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5和SO2R5；和C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；1.89根據(jù)實(shí)施方案1.88所述的化合物，其中R8選自氟；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；和C1-4非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代。1.90根據(jù)實(shí)施方案1.89所述的化合物，其中R8選自氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；和C1-4烷基。1.91根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.40和1.42至1.53中任一項(xiàng)所述的化合物，其中部分：選自以下的基團(tuán)AAA至ACB：1.92根據(jù)所述的化合物，其具有式(2)或式2a：其中Q為經(jīng)任選取代的5或6元雜環(huán)或者雜芳環(huán)具有一個(gè)或多個(gè)氮原子，并且R4如實(shí)施方案1.48至1.53中任一項(xiàng)所定義；或其中Q為經(jīng)任選取代的5、6或7元雜環(huán)或者具有一個(gè)或多個(gè)氮原子的雜芳環(huán)，并且R4如實(shí)施方案1.48至1.53中任一項(xiàng)所定義。1.93根據(jù)式(2)或式(2a)所述的化合物，其中Q具有一個(gè)或多個(gè)取代基，例如一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自(L)-R10、(L)-R11和(L)-R12的取代基，其中L為鍵或CH2基；R10、R11和R12獨(dú)立地選自氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR15；NR15R16；COR15；CSR15；COOR15；COSR15；OCOR15；NR17COR15；CONR15R16；CSNR15R16；NR17CONR15R16；R17COOR15；OCONR15R16；SR15；SOR15和SO2R15；C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；以及含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式的經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)；其中經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)的任選的取代基選自由以下組成的基團(tuán)R8：氫；氟；氯；溴；氰基；氧代；羥基；OR5；NR5R6；COR5；COOR5；OCOR5；NR7COR5；CONR5R6；NR7CONR5R6；NR7COOR5；OCONR5R6；SR5；SOR5和SO2R5；和C1-6非芳族烴基，其任選地被一至六個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；其中R15、R16和R17相同或不同，或可以結(jié)合在一起形成環(huán)，并且各自獨(dú)立地選自氫、非芳族C1-6烴基任選地被一個(gè)或多個(gè)氟原子取代，并且其中烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子及其氧化形式替代；或式CH2N(Ra)COORb的基團(tuán)；或式(L)-R18的基團(tuán)，其中L為鍵或CH2基團(tuán)并且R18為經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)，其含有選自O(shè)、N和S的0、1、2或3個(gè)雜原子及其氧化形式；其中經(jīng)任選取代的5元或6元環(huán)的任選的取代基選自基團(tuán)R8。1.94根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.93所述的化合物，其具有式(3)：其中R1、R2和R4如實(shí)施方案1.1至1.40和1.42至1.90中任一項(xiàng)所定義并且環(huán)A為含有一個(gè)或兩個(gè)氮環(huán)成員的五元雜環(huán)或雜芳基環(huán)。1.95根據(jù)實(shí)施方案1.94所述的化合物，其中環(huán)A為含有兩個(gè)氮環(huán)成員的五元雜芳基環(huán)。1.96根據(jù)實(shí)施方案1.95所述的化合物，其中環(huán)A為咪唑環(huán)。1.97根據(jù)實(shí)施方案1.96所述的化合物，其具有式(4)：其中R1、R2和R4如實(shí)施方案1.1至1.40和1.42至1.90中任一項(xiàng)所定義。1.98根據(jù)實(shí)施方案1.95所述的化合物，其中環(huán)A為吡唑環(huán)。1.99根據(jù)實(shí)施方案1.98所述的化合物，其具有式(5)：其中R1、R2和R4如實(shí)施方案1.1至1.40和1.42至1.90中任一項(xiàng)所定義。1.100根據(jù)實(shí)施方案1.98所述的化合物，其具有式(6)：其中R1、R2和R4如實(shí)施方案1.1至1.40和1.42至1.90中任一項(xiàng)所定義。1.101根據(jù)實(shí)施方案1.94所述的化合物，其中環(huán)A為含有一個(gè)氮原子的5元雜環(huán)。1.102根據(jù)實(shí)施方案1.101所述的化合物，其具有式(7)：其中R1、R2和R4如實(shí)施方案1.1至1.40和1.42至1.90中任一項(xiàng)所定義。1.103根據(jù)實(shí)施方案1.101所述的化合物，其中部分：選自以下的基團(tuán)BAA至BCZ：1.104根據(jù)實(shí)施方案1.101所述的化合物，其具有式(8)：其中R1、R2和R4如實(shí)施方案1.1至1.40和1.42至1.90中任一項(xiàng)所定義。1.105根據(jù)實(shí)施方案1.101所述的化合物，其中部分：選自以下的基團(tuán)CAA至CBX：1.106根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其中Q為含有1、2、3或4個(gè)選自N、O和S的雜原子環(huán)成員的六元單環(huán)雜環(huán)。1.107根據(jù)實(shí)施方案1.106所述的化合物，其中部分：選自以下的基團(tuán)DAA至DBG：1.108根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其中Q為含有1、2、3或4個(gè)選自N、O和S的雜原子環(huán)成員的七元單環(huán)雜環(huán)。1.109根據(jù)實(shí)施方案1.108所述的化合物，其中部分：選自以下的基團(tuán)EAA至EAB：1.110根據(jù)實(shí)施方案1.1所述的化合物，其如實(shí)施例1-1至1-73、2-1至2-138、3-1至3-16、4-1至4-20或5-1至5-2中任一項(xiàng)所定義。1.111根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.110中任一項(xiàng)所述的化合物，其具有低于550的分子量。1.112根據(jù)實(shí)施方案1.111所述的化合物，其具有低于500的分子量。1.113根據(jù)實(shí)施方案1.112所述的化合物，其具有450或低于450的分子量。1.114根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.113中任一項(xiàng)所述的化合物，其呈鹽形式。1.115根據(jù)實(shí)施方案1.114所述的化合物，其中鹽為酸加成鹽。1.116根據(jù)實(shí)施方案1.115或?qū)嵤┓桨?.115所述的化合物，其中鹽為藥學(xué)上可接受的鹽。定義在本申請(qǐng)中，提供了下面的定義，除非另外指出。關(guān)于式(1)、(1a)或(1b)的化合物的用途的術(shù)語(yǔ)“治療”用于描述任何形式的干預(yù)，其中化合物施用于患有，或有風(fēng)險(xiǎn)患有，或潛在有風(fēng)險(xiǎn)患有所討論的疾病或病癥的受試者。因此，術(shù)語(yǔ)“治療”涵蓋防止性(預(yù)防性)治療和治療，其中顯示了疾病或病癥的可測(cè)量或可檢測(cè)的癥狀。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“有效治療量”(例如關(guān)于疾病或病狀的治療方法)是指可有效產(chǎn)生期望療效的化合物的量。例如，如果病狀為疼痛，則有效治療量為足以提供期望的疼痛緩解水平的量。疼痛緩解的期望水平可能是，例如，疼痛的完全去除或疼痛的嚴(yán)重程度的降低。如“C1-10非芳族烴基”或“非環(huán)狀C1-5非芳族烴基”中的術(shù)語(yǔ)“非芳族烴基”是指由碳和氫原子組成并且不合芳環(huán)的基團(tuán)。該烴基團(tuán)可以是完全飽和的或者可含有一個(gè)或多個(gè)碳-碳雙鍵或碳-碳三鍵或雙鍵和三鍵的混合物。烴基可以是直鏈或支鏈基團(tuán)，或者可由環(huán)狀基團(tuán)組成或含有環(huán)狀基團(tuán)。因此術(shù)語(yǔ)非芳族烴包括烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷基烷基、環(huán)烯基烷基等。除非另外指出，術(shù)語(yǔ)“烷基”、“烯基”、“炔基”、“環(huán)烷基”芳基、雜芳基和“環(huán)烯基”以其常規(guī)含義使用(例如如IUPAC金皮書(shū)(IUPACGoldBook)所定義)。如在“C1-4飽和的烴基”中的術(shù)語(yǔ)“飽和的烴基”是指不含碳-碳雙鍵或三鍵的烴基。因此，飽和的烴基可以是烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、烷基環(huán)烷基或烷基環(huán)烷基烷基。C1-4飽和的烴基的實(shí)例包括C1-4烷基、環(huán)丙基、環(huán)丁基和環(huán)丙基甲基。如本文使用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”，當(dāng)碳原子的特定數(shù)目允許時(shí)，包括單環(huán)環(huán)烷基(例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基)以及雙環(huán)和三環(huán)基團(tuán)。雙環(huán)環(huán)烷基包括橋環(huán)系統(tǒng)，例如雙環(huán)庚烷、雙環(huán)辛烷和金剛烷。在上述R1、R2、R3和R4的定義中，在規(guī)定時(shí)，非芳族烴基的一個(gè)或兩個(gè)但非全部碳原子可任選地被選自O(shè)、N和S的雜原子以及(在R1和R4的情況下)其氧化形式替代。應(yīng)理解，當(dāng)碳原子被雜原子替代時(shí)，雜原子與碳相比更低的化合價(jià)意味著與本來(lái)鍵合至被取代的碳原子相比將有更少的原子鍵合至雜原子。因此，例如，CH2基團(tuán)中的碳原子(四價(jià))被氧(二價(jià))取代將意味著所得到的分子將含有少兩個(gè)氫原子，而CH2基團(tuán)中的碳原子(四價(jià))被氮(三價(jià))取代將意味著所得到的分子將含有少一個(gè)氫原子。雜原子取代碳原子的實(shí)例包括用氧或硫取代-CH2-CH2-CH2-鏈中的碳原子，得到醚-CH2-O-CH2-或硫醚-CH2-S-CH2-，用氮取代基團(tuán)CH2-C≡C-H中的碳原子，得到腈(氰基)基團(tuán)CH2-C≡N，用C＝O取代基團(tuán)-CH2-CH2-CH2-中的碳原子，得到酮-CH2-C(O)-CH2-，用S＝O或SO2取代基團(tuán)-CH2-CH2-CH2-中的碳原子，得到亞砜-CH2-S(O)-CH2-或砜-CH2-S(O)2-CH2-，用C(O)NH取代-CH2-CH2-CH2-鏈中的碳原子，得到酰胺-CH2-CH2-C(O)-NH-，用氮取代-CH2-CH2-CH2-鏈中的碳原子，得到胺-CH2-NH-CH2-，以及用C(O)O取代-CH2-CH2-CH2-鏈中的碳原子，得到酯(或羧酸)-CH2-CH2-C(O)-O-。在每個(gè)此類(lèi)取代中，烴基的至少一個(gè)碳原子必須保留。鹽很多式(1)、(1a)或(1b)的化合物可以鹽形式(例如酸加成鹽)或者在某些情況下以有機(jī)堿和無(wú)機(jī)堿的鹽形式(例如羧酸鹽、磺酸鹽以及磷酸鹽)存在。所有此類(lèi)鹽均在本發(fā)明的范圍內(nèi)，并且對(duì)式(1)、(1a)或(1b)的化合物的參考包括如實(shí)施方案1.114至1.116所定義的化合物的鹽形式。所述鹽通常為酸加成鹽。本發(fā)明的鹽可以通過(guò)常規(guī)的化學(xué)方法從含有堿性或酸性部分的母體化合物合成，諸如描述于PharmaceuticalSalts：Properties，Selection，andUse，P.HeinrichStahl(編者)，CamilleG.Wermuth(編者)，ISBN：3-90639-026-8，Hardcover，388頁(yè)，2002年8月的方法。通常，可通過(guò)在水中或在有機(jī)溶劑中或在二者的混合物中將這些化合物的游離酸或堿形式與合適的堿或酸反應(yīng)來(lái)制備此類(lèi)鹽；通常使用非水性介質(zhì)諸如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。酸加成鹽(如實(shí)施方案1.120所定義)可以與多種酸(無(wú)機(jī)和有機(jī)酸)來(lái)形成。實(shí)施方案1.120中酸加成鹽的實(shí)例包括用選自由以下組成的組的酸形成的一元鹽或二元鹽：乙酸、2，2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗壞血酸(例如，L-抗壞血酸)、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙?；被郊姿?、丁酸、(+)樟腦酸、樟腦-磺酸、(+)-(1S)-樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)拉酸、十二烷基硫酸、乙烷-1，2-二磺酸、乙磺酸、2-羥基乙磺酸、甲酸、富馬酸、粘酸、龍膽酸、葡庚糖酸、D-葡糖酸、葡糖醛酸(例如D-葡糖醛酸)、谷氨酸(例如，L-谷氨酸)、α-酮戊二酸、乙醇酸、馬尿酸、氫鹵酸(例如氫溴酸、鹽酸、氫碘酸)、羥乙磺酸、乳酸(例如(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸)、乳糖酸、馬來(lái)酸、蘋(píng)果酸、(-)-L-蘋(píng)果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1，5-二磺酸、1-羥基-2-萘酸、煙堿酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、磷酸、丙酸、丙酮酸、L-焦谷氨酸、水楊酸、4-氨基-水楊酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、對(duì)-甲苯磺酸、十一碳烯酸以及戊酸，以及?；被岷完?yáng)離子交換樹(shù)脂。當(dāng)式(1)、(1a)或(1b)的化合物含有胺官能(function)時(shí)，這些可形成季銨鹽，例如根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的通過(guò)與烷基化試劑反應(yīng)的方法。此類(lèi)季銨化合物在式(1)、(1a)或(1b)的范圍內(nèi)。本發(fā)明的化合物可根據(jù)形成鹽的酸的pKa而作為一元鹽或二元鹽存在。本發(fā)明的化合物的鹽形式通常為藥學(xué)上可接受的鹽，并且藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例在Berge等人，1977，＂PharmaceuticallyAcceptableSalts，＂J.Pharm.Sci.，第66卷，第1-19頁(yè)中討論。然而，藥學(xué)上不可接受的鹽也可作為中間體形式制備，然后可將其轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的鹽?？捎糜诶绫景l(fā)明的化合物的純化或分離的此類(lèi)非藥學(xué)上可接受的鹽形式也形成本發(fā)明的部分。立體異構(gòu)體立體異構(gòu)體是異構(gòu)的分子，其具有相同分子式和鍵合原子的序列，而僅在其原子的空間三維取向上不同。所述立體異構(gòu)體可以是，例如，幾何異構(gòu)體或光學(xué)異構(gòu)體。幾何異構(gòu)體對(duì)于幾何異構(gòu)體，異構(gòu)現(xiàn)象是由于雙鍵的原子或基團(tuán)的不同取向，如在關(guān)于碳-碳雙鍵的順式和反式(Z和E)異構(gòu)、或關(guān)于酰胺鍵的順式和反式異構(gòu)體、或關(guān)于碳氮雙鍵(例如在肟中)的順式和反式異構(gòu)體、或關(guān)于限制性旋轉(zhuǎn)的鍵的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)、或關(guān)于諸如環(huán)烷環(huán)的環(huán)的順式和反式異構(gòu)中。因此，在另一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.121)中，本發(fā)明提供根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.116的任一項(xiàng)的化合物的幾何異構(gòu)體。光學(xué)異構(gòu)體在該式的化合物含有一個(gè)或多個(gè)手性中心，并且可以以兩個(gè)或多個(gè)光學(xué)異構(gòu)體的形式存在時(shí)，對(duì)化合物的稱(chēng)謂包括其所有光學(xué)異構(gòu)體形式(例如對(duì)映異構(gòu)體、差向異構(gòu)體和非對(duì)映異構(gòu)體)，如個(gè)別光學(xué)異構(gòu)體或混合物(例如外消旋混合物)或兩種或多種光學(xué)異構(gòu)體，除非上下文另外指出。因此，在另一實(shí)施方案(實(shí)施方案1.132)中，本發(fā)明提供根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.121中任一項(xiàng)所述的含有手性中心的化合物。光學(xué)異構(gòu)體可通過(guò)其光學(xué)活性進(jìn)行表征并鑒別(即，作為+和-異構(gòu)體或者d和l異構(gòu)體)或者它們可根據(jù)其絕對(duì)立體化學(xué)使用由Cahn、Ingold和Prelog開(kāi)發(fā)的“R和S”命名法進(jìn)行表征，參見(jiàn)AdvancedOrganicChemistry，JerryMarch，第4版，JohnWiley&Sons，NewYork，1992，第109-114頁(yè)，還參見(jiàn)Cahn，Ingold&Prelog，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，1966，5，385-415。光學(xué)異構(gòu)體可通過(guò)多種技術(shù)進(jìn)行分離，所述技術(shù)包括手性色譜法(在手性支撐體上的色譜分析)，并且此類(lèi)技術(shù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。作為手性色譜法的一個(gè)替代方案，光學(xué)異構(gòu)體可通過(guò)與手性酸如(+)-酒石酸、(-)-焦谷氨酸、(-)-二-甲苯?；?L-酒石酸、(+)-扁桃酸、(-)-蘋(píng)果酸以及(-)-樟腦磺酸形成非對(duì)映異構(gòu)鹽來(lái)分離，從而通過(guò)優(yōu)選結(jié)晶法分離非對(duì)映異構(gòu)體并且然后將所述鹽解離以獲得游離堿的單個(gè)對(duì)映體。當(dāng)本發(fā)明的化合物存在兩種或多種光學(xué)異構(gòu)體形式時(shí)，一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體的一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體可以表現(xiàn)出例如在生物活性方面優(yōu)于另一個(gè)對(duì)映異構(gòu)體的優(yōu)勢(shì)。因此，在某些情況下，可能希望僅一對(duì)對(duì)映體之一或者僅多種非對(duì)映體之一用作治療劑。因此，在另一實(shí)施方案(實(shí)施方案1.133)中，本發(fā)明提供含有根據(jù)實(shí)施方案1.132所述的具有一個(gè)或多個(gè)手性中心的化合物的組合物，其中至少55％(例如至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％或95％)的實(shí)施方案1.108的化合物以單一光學(xué)異構(gòu)體(例如對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體)存在。在一個(gè)一般的實(shí)施方案(實(shí)施方案1.134)中，實(shí)施方案1.132的化合物(或使用的化合物)的總量的99％或更多(例如基本上全部)以單一光學(xué)異構(gòu)體存在。例如，在一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.135)中所述化合物以單一對(duì)映異構(gòu)體存在。在另一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.136)中，該化合物以單一非對(duì)映異構(gòu)體存在。本發(fā)明還提供光學(xué)異構(gòu)體的混合物，其可以是外消旋或非-外消旋。因此，本發(fā)明提供：1.137根據(jù)實(shí)施方案1.132所述的化合物，所述化合物呈光學(xué)異構(gòu)體的外消旋混合物形式。1.138根據(jù)實(shí)施方案1.132所述的化合物，所述化合物呈非光學(xué)異構(gòu)體的外消旋混合物形式。同位素實(shí)施方案1.1至1.138的任一項(xiàng)所定義的本發(fā)明的化合物可含有一個(gè)或多個(gè)同位素取代，并且對(duì)特定元素的稱(chēng)謂包括在其范圍內(nèi)該元素的所有同位素。例如，對(duì)氫的稱(chēng)謂包括在其范圍1H、2H(D)和3H(T)內(nèi)。類(lèi)似地，對(duì)碳和氧的稱(chēng)謂分別包括在其范圍12C、13C和14C以及16O和18O內(nèi)。以類(lèi)似的方式，對(duì)具體官能團(tuán)的稱(chēng)謂也包括在其范圍內(nèi)的同位素變化，除非上下文另外指出。例如，對(duì)烷基諸如乙基的稱(chēng)謂也包括變化形式，其中該基團(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)氫原子呈氚或氚同位素的形式，例如如在所有五個(gè)氫原子呈氚同位素形式的乙基(全氚化乙基)中。同位素可以是放射性或者非放射性。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.140)中，實(shí)施方案1.1至1.138的任一項(xiàng)的化合物不含有放射性同位素。此類(lèi)化合物優(yōu)選用于治療用途。在另一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.141)中，然而，實(shí)施方案1.1至1.138的任一項(xiàng)的化合物可含有一個(gè)或多個(gè)放射性同位素。含有此類(lèi)放射性同位素的化合物可用于診斷環(huán)境。溶劑化物如實(shí)施方案1.1至1.141中任一項(xiàng)所定義的式(1)、(1a)或(1b)的化合物可形成溶劑合物。優(yōu)選的溶劑合物是通過(guò)并入非毒性藥學(xué)上可接受的溶劑分子(以下稱(chēng)之為溶劑化溶劑)的本發(fā)明的化合物的固態(tài)結(jié)構(gòu)(例如晶體結(jié)構(gòu))的溶劑合物。此類(lèi)溶劑的實(shí)例包括水、醇(諸如乙醇、異丙醇和丁醇)和二甲亞砜?？赏ㄟ^(guò)用溶劑或含有溶劑化溶劑的溶劑混合物使本發(fā)明的化合物重結(jié)晶來(lái)制備溶劑合物。在任意給定情況下無(wú)論是否已經(jīng)形成溶劑合物，都可以通過(guò)使化合物結(jié)晶使用眾所周知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)諸如熱重分析(TGE)、差示掃描量熱法(DSC)和X射線晶體學(xué)進(jìn)行分析來(lái)確定。所述溶劑合物可以是化學(xué)計(jì)量或者非化學(xué)計(jì)量的溶劑合物。特別優(yōu)選的溶劑合物是水合物，并且水合物的實(shí)例包括半水合物、單水合物和二水合物。因此，在進(jìn)一步的實(shí)施方案1.150和1.151中，本發(fā)明提供：1.151根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.141中任一項(xiàng)的化合物，所述化合物是溶劑合物的形式。1.152根據(jù)實(shí)施方案1.151的化合物，其中所述溶劑合物是水合物。對(duì)于溶劑合物和用于制備和表征它們的方法的更加詳細(xì)討論，參見(jiàn)Bryn等，Solid-StateChemistryofDrugs，第二版，由SSCI，IncofWestLafayette，IN，USA出版，1999，ISBN0-967-06710-3?？蛇x地，除了以水合物形式存在，本發(fā)明的化合物可以是無(wú)水的。因此，在另一實(shí)施方案(實(shí)施方案1.153)中，本發(fā)明提供如實(shí)施方案1.1至1.141中任一項(xiàng)所定義的無(wú)水形式(例如無(wú)水結(jié)晶形式)的化合物。結(jié)晶和非晶形形式實(shí)施方案1.1至1.153中任一項(xiàng)的化合物可以以結(jié)晶或非結(jié)晶(例如非晶形)狀態(tài)存在。無(wú)論化合物是否以結(jié)晶狀態(tài)存在，都可以容易地通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)諸如X射線粉末衍射(XRPD)來(lái)確定?？墒褂冒▎尉射線晶體學(xué)、X射線粉末衍射(XRPD)、差示掃描量熱法(DSC)和紅外光譜例如傅里葉變換紅外光譜(FTIR)的多種技術(shù)來(lái)表征晶體和它們的晶體結(jié)構(gòu)。不同濕度條件下的晶體行為可通過(guò)重量蒸汽吸附研究以及也通過(guò)XRPD進(jìn)行分析?；衔锞w結(jié)構(gòu)的確定可通過(guò)X射線晶體學(xué)進(jìn)行，而X射線晶體學(xué)可根據(jù)常規(guī)方法諸如本文所述的方法和描述于FundamentalsofCrystallography，C.Giacovazzo，H.L.Monaco，D.Viterbo，F(xiàn).Scordari，G.Gilli，G.Zanotti和M.Catti，(IntemationalUnionofCrystallography/OxfordUniversityPress，1992ISBN0-19-855578-4(p/b)，0-19-85579-2(h/b))的方法實(shí)施。該技術(shù)涉及對(duì)單晶體X射線衍射的分析和解釋。在非晶形固體中，通常存在于結(jié)晶形式中的三維結(jié)構(gòu)不存在，并且在非晶形形式中分子相對(duì)于彼此的位置基本上是隨機(jī)的，參見(jiàn)例如Hancock等，J.Pharm.Sci.(1997)，86，1)。因此，在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供：1.160根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.153中任一項(xiàng)的化合物，所述化合物是結(jié)晶形式。1.161根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.153中任一項(xiàng)的化合物，其：(a)從50％至100％結(jié)晶，更特別地是至少50％結(jié)晶，或至少60％結(jié)晶，或至少70％結(jié)晶，或至少80％結(jié)晶，或至少90％結(jié)晶，或至少95％結(jié)晶，或至少98％結(jié)晶，或至少99％結(jié)晶，或至少99.5％結(jié)晶，或至少99.9％結(jié)晶，例如100％結(jié)晶。1.162根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.153中任一項(xiàng)的化合物，所述化合物呈非晶形形式。前藥如實(shí)施方案1.1至1.162中任一項(xiàng)所定義的式(1)、(1a)或(1b)的化合物可以以前藥形式存在。所謂“前藥”意指例如在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為如實(shí)施方案1.1至1.162中任一項(xiàng)所定義的式(1)、(1a)或(1b)的生物活性化合物的任何化合物。例如，一些前藥為活性化合物的酯(例如，生理上可接受的代謝上不穩(wěn)定的酯)。在代謝期間，酯基(-C(＝O)OR)被切割，以產(chǎn)生活性藥物。此類(lèi)酯可以通過(guò)例如存在于母體化合物的任何羥基適當(dāng)時(shí)與存在于母體化合物的任何其它反應(yīng)性基團(tuán)的在先保護(hù)的酯化、如有需要然后脫保護(hù)而形成。此外，一些前藥被酶促激活以產(chǎn)生活性化合物，或在進(jìn)一步化學(xué)反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生活性化合物(例如，如在ADEPT、GDEPT、LIDEPT等中)的化合物。例如，前藥可為糖衍生物或其它糖苷綴合物，或可為氨基酸酯衍生物。因此，在另一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.170)中，本發(fā)明提供了如實(shí)施方案1.1至1.170中任一項(xiàng)所定義的化合物的前藥，其中所述化合物包含在生理?xiàng)l件下可轉(zhuǎn)化以形成羥基或氨基的官能團(tuán)。復(fù)合物和包合物實(shí)施方案1.1至1.170中式(1)、(1a)或(1b)還包括實(shí)施方案1.1至1.170的化合物的復(fù)合物(例如與化合物諸如環(huán)糊精的包含復(fù)合物或包合物(clathrate)，或與金屬的復(fù)合物)。因此，在另一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案1.180)中，本發(fā)明提供呈復(fù)合物或包合物形式的根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.170中任一項(xiàng)的化合物。生物活性和治療用途本發(fā)明的化合物具有作為毒蕈堿M1受體激動(dòng)劑的活性?；衔锏亩巨A活性可以使用下面實(shí)施例A中描述的Phospho-ERK1/2測(cè)定進(jìn)行測(cè)定。本發(fā)明的化合物的顯著優(yōu)勢(shì)是它們對(duì)于M1受體相對(duì)于M2和M3受體亞型具有高度選擇性。本發(fā)明的化合物不是M2和M3受體亞型的激動(dòng)劑。例如，其中本發(fā)明的化合物通常具有針對(duì)實(shí)施例A中描述的功能測(cè)定中的M1受體至少6(優(yōu)選地，至少6.5)的pEC50數(shù)值和大于80(優(yōu)選地，大于95)的Emax數(shù)值，當(dāng)針對(duì)實(shí)施例A的功能測(cè)定中M2和M3亞型測(cè)試時(shí)，它們可具有低于5的pEC50數(shù)值和低于20％的Emax數(shù)值。本發(fā)明的一些化合物對(duì)于M4受體相對(duì)于M1受體也具有高度選擇性。此類(lèi)化合物的實(shí)例包括實(shí)施例1-6、1-9、1-21和2-17的化合物。本發(fā)明的其他化合物具有M1和M4受體的活性。此類(lèi)化合物的實(shí)例包括實(shí)施例1-1至1-4和1-8至1-10和2-116的化合物。因此，在實(shí)施方案2.1至2.9中，本發(fā)明提供：2.1根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其用于醫(yī)學(xué)用途。2.2根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其用作毒蕈堿M1和/或M4受體激動(dòng)劑。2.3根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其為毒蕈堿M1受體激動(dòng)劑，具有在本文實(shí)施例A的測(cè)定或與其基本上類(lèi)似的測(cè)定中針對(duì)M1受體范圍為6.0至8.1的pEC50以及至少90的Emax。2.4根據(jù)實(shí)施方案2.3所述的化合物，其為毒蕈堿M1受體激動(dòng)劑，具有范圍為6.5至7.5的pEC50。2.5根據(jù)實(shí)施方案2.3或?qū)嵤┓桨?.4所述的化合物，其具有針對(duì)M1受體至少95的Emax。2.6根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其為毒蕈堿M4受體激動(dòng)劑，具有在本文實(shí)施例A的測(cè)定或與其基本上類(lèi)似的測(cè)定中針對(duì)M4受體范圍為6.0至9.0的pEC50以及至少90的Emax。2.7根據(jù)實(shí)施方案2.6所述的化合物，其為毒蕈堿M4受體激動(dòng)劑，具有范圍為6.5至9.0的pEC50。2.8根據(jù)實(shí)施方案2.6或?qū)嵤┓桨?.7所述的化合物，其具有針對(duì)M4受體至少95的Emax。2.9根據(jù)實(shí)施方案2.3至2.8中任一項(xiàng)所述的化合物，其對(duì)于M1和/或M4受體相比毒蕈堿M2和M3受體具有選擇性。2.10根據(jù)實(shí)施方案2.9所述的化合物，其對(duì)于M1受體相比毒蕈堿M2和M3受體具有選擇性。2.11根據(jù)實(shí)施方案2.9所述的化合物，其對(duì)于M4受體相比毒蕈堿M2和M3受體具有選擇性。2.12根據(jù)實(shí)施方案2.3至2.5中任一項(xiàng)所述的化合物，其對(duì)于M1受體相比毒蕈堿M2，M3和M4受體具有選擇性。2.13根據(jù)實(shí)施方案2.6至2.8中任一項(xiàng)所述的化合物，其對(duì)于M4受體相比毒蕈堿M1、M2和M3受體具有選擇性。2.14根據(jù)實(shí)施方案2.3至2.8中任一項(xiàng)所述的化合物，其對(duì)于M1和M4受體相比毒蕈堿M2和M3受體具有選擇性。2.15根據(jù)實(shí)施方案2.3至2.14中任一項(xiàng)所述的化合物，其具有針對(duì)毒蕈堿M2和M3受體亞型低于5的pEC50和低于50的Emax。2.16根據(jù)實(shí)施方案2.15所述的化合物，其具有針對(duì)毒蕈堿M2和M3受體亞型低于4.5的pEC50和/或低于30的Emax。2.17根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180和實(shí)施方案2.3至2.16中任一項(xiàng)所述的化合物，其用于治療毒蕈堿M1受體介導(dǎo)的疾病或病狀。借助于它們的毒蕈堿M1和/或M4受體激動(dòng)劑活性，本發(fā)明的化合物可用于治療毒蕈堿M1和/或M4受體介導(dǎo)的阿爾茨海默病、精神分裂癥和其他精神障礙、認(rèn)知障礙以及其他疾病，并且也可用于治療各種類(lèi)型的疼痛。因此，在實(shí)施方案2.18至2.34中，本發(fā)明提供：2.18根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其用于治療認(rèn)知障礙或精神障礙。2.19根據(jù)實(shí)施方案2.18的用途的化合物，其中認(rèn)知障礙或精神障礙包括選自以下的病狀，由其引起或與其有關(guān)：認(rèn)知損傷、輕度認(rèn)知損傷、額顳癡呆、血管性癡呆、路易體癡呆(dementiawithLewybodies)、早老性癡呆、老年性癡呆、弗里德賴希共濟(jì)失調(diào)(Friederich’sataxia)、唐氏綜合征(Down＇ssyndrome)、亨延頓舞蹈癥(Huntington＇schorea)、運(yùn)動(dòng)過(guò)度、躁狂癥、圖雷特綜合征(Tourette’ssyndrome)、阿爾茨海默病(Alzheimer＇sdisease)、進(jìn)行性核上性麻痹、認(rèn)知功能的損傷(包括注意力、方向感、學(xué)習(xí)障礙)、記憶(即記憶障礙、遺忘癥、遺忘障礙、短暫性完全遺忘綜合征和年齡相關(guān)的記憶損傷)和語(yǔ)言功能；由于以下的認(rèn)知損傷：中風(fēng)、亨延頓病、皮克病(Pickdisease)、與艾滋病有關(guān)的癡呆或其他癡呆狀態(tài)，例如多發(fā)梗塞性癡呆、酒癮性癡呆、甲狀腺功能減退有關(guān)的癡呆，以及與其他退行性病癥，例如小腦萎縮和肌萎縮性側(cè)索硬化癥相關(guān)的癡呆；可能引起認(rèn)知衰退的其他急性或亞急性病狀，例如譫妄或抑郁(假性癡呆狀態(tài))創(chuàng)傷、頭創(chuàng)傷、年齡有關(guān)的認(rèn)知衰退、中風(fēng)、神經(jīng)變性、藥物誘導(dǎo)的狀態(tài)、神經(jīng)毒性藥物、年齡有關(guān)的認(rèn)知損傷、孤獨(dú)癥有關(guān)的認(rèn)知損傷、唐氏綜合征、與精神病有關(guān)的認(rèn)知缺陷，以及與電驚厥治療有關(guān)的認(rèn)知障礙；由于以下的認(rèn)知障礙：藥物濫用或藥物戒斷(包括尼古丁、大麻、苯丙胺、可卡因)、注意缺陷多動(dòng)障礙(ADHD)和運(yùn)動(dòng)障礙性病癥(例如帕金森病、精神安定劑誘導(dǎo)的帕金森癥)，以及遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙、精神分裂癥、精神分裂癥樣病、精神病性抑郁、躁狂癥、急性躁狂癥，偏執(zhí)型、致幻型和妄想型障礙，人格障礙、強(qiáng)迫癥、分裂型障礙、妄想癥，由于惡性腫瘤、代謝病癥、內(nèi)分泌疾病或發(fā)作性睡病的精神病，由于藥物濫用或藥物戒斷的精神病，雙相障礙、癲癇和分裂情感性障礙。2.20根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其用于治療阿爾茨海默病。2.21根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其用于治療精神分裂癥。2.22一種受試者(例如哺乳動(dòng)物患者諸如人，例如需要此類(lèi)治療的人)中認(rèn)知障礙的治療方法，所述方法包括施用治療有效劑量的根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物。2.23根據(jù)實(shí)施方案2.20所述的方法，其中認(rèn)知障礙包含如實(shí)施方案2.19所定義的病狀，由其引起或與其有關(guān)。2.24根據(jù)實(shí)施方案2.23所述的方法，其中認(rèn)知障礙由阿爾茨海默病引起或與阿爾茨海默病有關(guān)。2.25根據(jù)實(shí)施方案2.24所述的方法，其中認(rèn)知障礙為精神分裂癥。2.26根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物用于生產(chǎn)用于治療認(rèn)知障礙的藥物的用途。2.27根據(jù)實(shí)施方案2.26的用途，其中認(rèn)知障礙包含如實(shí)施方案2.11所定義的病狀，由其引起或與其有關(guān)。2.28根據(jù)實(shí)施方案2.27的用途，其中認(rèn)知障礙由阿爾茨海默病引起或與阿爾茨海默病有關(guān)。2.29根據(jù)實(shí)施方案2.29的用途，其中認(rèn)知障礙為精神分裂癥。2.30根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其用于治療或減輕以下的嚴(yán)重程度：急性、慢性、神經(jīng)性或炎性疼痛，關(guān)節(jié)炎、偏頭痛、叢集性頭痛、三叉神經(jīng)痛、帶狀皰疹性神經(jīng)痛、一般神經(jīng)痛、內(nèi)臟痛、骨關(guān)節(jié)炎疼痛、帶狀皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病性神經(jīng)病、神經(jīng)根痛、坐骨神經(jīng)痛、背痛、頭痛或頸痛、嚴(yán)重或頑固性疼痛、傷害性疼痛、爆發(fā)性疼痛、術(shù)后疼痛，或癌癥疼痛。2.31治療或減輕以下的嚴(yán)重程度的方法：急性、慢性、神經(jīng)性或炎性疼痛，關(guān)節(jié)炎、偏頭痛、叢集性頭痛、三叉神經(jīng)痛、帶狀皰疹性神經(jīng)痛、一般神經(jīng)痛、內(nèi)臟痛、骨關(guān)節(jié)炎疼痛、帶狀皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病性神經(jīng)病、神經(jīng)根痛、坐骨神經(jīng)痛、背痛、頭痛或頸痛、嚴(yán)重或頑固性疼痛、傷害性疼痛、爆發(fā)性疼痛、術(shù)后疼痛，或癌癥疼痛，所述方法包括施用治療有效劑量的根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物。2.32根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物，其用于治療外周病癥，例如在青光眼中降低眼內(nèi)壓，以及治療干眼癥和口干，包括舍格倫綜合征.2.33外周病癥的治療方法，例如在青光眼中降低眼內(nèi)壓，以及治療干眼癥和口干，包括舍格倫綜合征，所述方法包括施用治療有效劑量的根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物。2.34根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物用于生產(chǎn)藥物的用途，所述藥物用于治療或減輕以下的嚴(yán)重程度：急性、慢性、神經(jīng)性或炎性疼痛，關(guān)節(jié)炎、偏頭痛、叢集性頭痛、三叉神經(jīng)痛、帶狀皰疹性神經(jīng)痛、一般神經(jīng)痛、內(nèi)臟痛、骨關(guān)節(jié)炎疼痛、帶狀皰疹后神經(jīng)痛、糖尿病性神經(jīng)病、神經(jīng)根痛、坐骨神經(jīng)痛、背痛、頭痛或頸痛、嚴(yán)重或頑固性疼痛、傷害性疼痛、爆發(fā)性疼痛、術(shù)后疼痛，或癌癥疼痛或用于治療外周病癥，例如在青光眼中降低眼內(nèi)壓，以及治療干眼癥和口干，包括舍格倫綜合征。2.35根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物用于治療成癮的用途。2.36根據(jù)實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所述的化合物用于治療以下的用途：運(yùn)動(dòng)障礙，例如帕金森病、ADHD、亨延頓病、圖雷特綜合征以及與作為潛在致病因素驅(qū)動(dòng)疾病的多巴胺能功能障礙有關(guān)的其他綜合征。用于制備式(1)、(1a)或(1b)的化合物的方法式(1)、(1a)或(1b)的化合物可根據(jù)技術(shù)人員所熟知的合成方法以及如本文所述進(jìn)行制備。因此，在另一實(shí)施方案(實(shí)施方案3.1)中，本發(fā)明提供用于制備如實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所定義的化合物的工藝，所述工藝包括：(A)式(10)的化合物與式(11)的化合物：在還原胺化條件下的反應(yīng)；其中R1、R2、R3、R4和Q如實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所定義；或(B)式(12)的化合物：與式C1-C(＝O)-CH2-R4的化合物在堿存在下的反應(yīng)；或(C)式(10)的化合物與式(13)的化合物：在親核取代條件下的反應(yīng)；其中R1、R2、R3、R4和Q如實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所定義；并且任選地：(D)將一種式(1)、(1a)或(1b)的化合物轉(zhuǎn)化為另一種式(1)、(1a)或(1b)的化合物。在工藝變體(A)中，哌啶雜環(huán)(10)與取代的酮(11)在還原胺化條件下反應(yīng)。還原胺化反應(yīng)通常在環(huán)境溫度下進(jìn)行，使用在溶劑(例如含有醋酸的二氯甲烷或二氯乙烷)中的氫硼化物還原劑(例如三乙酰氧基硼氫化鈉)。在工藝變體(C)中，哌啶雜環(huán)(10)與磺酸酯(13，R＝甲基、三氟甲基或4-甲基苯基)發(fā)生親核取代反應(yīng)，所述反應(yīng)通常在輕微加熱(例如到約40℃至約70℃的溫度)下純凈，無(wú)溶劑，或在適合的溶劑(例如四氫呋喃、乙腈或二甲基乙酰胺)中進(jìn)行。式(12)的中間體化合物可通過(guò)下面方案1顯示的系列反應(yīng)制備。方案1在反應(yīng)方案1中，哌啶雜環(huán)(10)與Boc-保護(hù)的螺酮(14)在還原胺化條件下反應(yīng)。還原胺化反應(yīng)通常在輕微加熱(例如到約40℃至約70℃的溫度)下，在氰基硼氫化鈉結(jié)合氯化鋅或三乙酰氧基硼氫化鈉結(jié)合異丙醇鈦存在下、在溶劑(例如含有醋酸的二氯甲烷或二氯乙烷)中進(jìn)行，得到中間體哌啶化合物(15)，然后將其通過(guò)用酸(例如三氟乙酸的二氯甲烷溶液)處理去除Boc基團(tuán)脫保護(hù)，得到化合物(12)。式(12)的化合物也可通過(guò)下面方案2顯示的反應(yīng)順序進(jìn)行。方案2在方案2中，使用硼氫化鈉的甲醇溶液將Boc-保護(hù)的螺酮(14)還原為醇(16)。然后在叔胺例如三乙胺或N，N-二異丙基乙胺存在下，使用相應(yīng)的磺酰氯的二氯甲烷溶液將醇(16)活化為磺酸酯(17，R＝甲基、三氟甲基或4-甲基苯基)。磺酸酯(17)與哌啶雜環(huán)(10)發(fā)生親核取代反應(yīng)，所述反應(yīng)通常在輕微加熱(例如到約40℃至約70℃的溫度)下純凈，無(wú)溶劑，或在適合的溶劑(例如四氫呋喃、乙腈或二甲基乙酰胺)中進(jìn)行，得到化合物(15)，然后將其通過(guò)用酸(例如三氟乙酸的二氯甲烷溶液)處理去除Boc基團(tuán)脫保護(hù)，得到化合物(12)。一旦形成，一種式(1)、(1a)或(1b)的化合物，或其受保護(hù)的衍生物，可通過(guò)技術(shù)人員熟知的方法轉(zhuǎn)化為另一種式(1)、(1a)或(1b)的化合物。將一個(gè)官能團(tuán)轉(zhuǎn)化為另一個(gè)官能團(tuán)的合成方法的實(shí)例示于標(biāo)準(zhǔn)教科書(shū)，諸如AdvancedOrganicChemistry和OrganicSyntheses(參見(jiàn)上述引用)或Fiesers’ReagentsforOrganicSynthesis，第1-17卷，JohnWiley，MaryFieser編(ISBN：0-471-58283-2)。這些轉(zhuǎn)化的實(shí)例包括酰胺鍵形成、脲形成、氨基甲酸酯形成、烷基化反應(yīng)、N-芳基化反應(yīng)和C-C鍵偶合反應(yīng)。在上述的許多反應(yīng)中，可能需要保護(hù)一個(gè)或多個(gè)基團(tuán)來(lái)防止反應(yīng)發(fā)生在分子上不希望的位置。保護(hù)基團(tuán)的實(shí)例以及保護(hù)官能團(tuán)和脫保護(hù)官能團(tuán)的方法可見(jiàn)于ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis(T.Greene和P.Wuts；第3版；JohnWileyandSons，1999)。通過(guò)上述方法制備的化合物可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的多種方法的任一種分離和純化，此類(lèi)方法的實(shí)例包括重結(jié)晶和色譜技術(shù)諸如柱色譜(例如快速色譜)和HPLC。藥物制劑雖然單獨(dú)施用活性化合物為可能的，但是優(yōu)選的是將其提供為藥物組合物(例如，制劑)。因此，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案4.1)中，提供包含至少一種如實(shí)施方案1.1至1.180中任一項(xiàng)所定義的式(1)、(1a)或(1b)的化合物以及至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。在一個(gè)實(shí)施方案(實(shí)施方案4.2)中，組合物為片劑組合物。在另一實(shí)施方案(實(shí)施方案4.3)中，組合物為膠囊組合物。藥學(xué)上可接受的賦形劑可以選自，例如，載體(例如固體、液體或半固體載體)、佐劑、稀釋劑(例如固體稀釋劑諸如填充劑或增量劑；和液體稀釋劑諸如溶劑和共溶劑)、成粒劑、粘合劑、助流劑、包衣劑、控釋劑(例如延遲釋放或延遲聚合物或蠟)、粘合劑、崩解劑、緩沖劑、潤(rùn)滑劑、防腐劑、抗真菌劑和抗細(xì)菌劑、抗氧化劑、緩沖劑、張力調(diào)節(jié)劑、增稠劑、調(diào)味劑、甜味劑、色素、增塑劑、掩味劑、穩(wěn)定劑或藥物組合物中常規(guī)使用的任何其它賦形劑。本文所用的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的”意指在合理的醫(yī)療判斷范圍內(nèi)適用于與受試者(例如人類(lèi)受試者)的組織接觸，而沒(méi)有過(guò)度的與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱(chēng)的毒性、刺激性、過(guò)敏性響應(yīng)或其它問(wèn)題或并發(fā)癥的化合物、物質(zhì)、組合物和/或劑型。從與制劑的其它成分相容的意義上說(shuō)，每種賦形劑也必須是“可接受的”?？梢园凑找阎夹g(shù)配制包含式(1)、(1a)或(1b)的化合物的藥物組合物，參見(jiàn)例如，Remington’sPharmaceuticalSciences，MackPublishingCompany，Easton，PA，USA。藥物組合物可為適用于口服、腸胃外、局部、鼻內(nèi)、支氣管內(nèi)、舌下、眼、耳、直腸內(nèi)、陰道內(nèi)或經(jīng)皮施用的任何形式。適于口服施用的藥物劑型包括片劑(包衣或未包衣)、膠囊(硬殼或軟殼)、囊片(caplet)、丸劑、錠劑、糖漿、溶液、粉劑、顆粒劑、酏劑和混懸劑、舌下片劑、膜片(wafer)或片如口腔貼劑。片劑組合物可含有單位劑量的活性化合物和惰性稀釋劑或載體諸如糖或糖醇；如乳糖、蔗糖、山梨糖醇或甘露糖醇；和/或非糖衍生的稀釋劑諸如碳酸鈉、磷酸鈣、碳酸鈣、或纖維素或其衍生物諸如微晶纖維素(MCC)、甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和淀粉諸如玉米淀粉。片劑還可以含有此類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)成分如粘合劑和成粒劑諸如聚乙烯吡咯烷酮、崩解劑(例如溶脹的交聯(lián)聚合物諸如交聯(lián)的羧甲基纖維素)、潤(rùn)滑劑(例如硬脂酸酯)、防腐劑(例如對(duì)羥基苯甲酸酯)、抗氧化劑(例如BHT)、緩沖劑(例如磷酸鹽或檸檬酸鹽緩沖液)和泡騰劑諸如檸檬酸鹽/碳酸氫鹽的混合物。此類(lèi)賦形劑為已熟知的并且在此不需要詳細(xì)討論。片劑可被設(shè)計(jì)為在與胃液接觸時(shí)釋放藥物(即釋片劑)或者持續(xù)長(zhǎng)時(shí)間段或在胃腸道的特定區(qū)域內(nèi)以受控的方式釋放藥物(控釋片劑)。藥物組合物通常包含約1％(w/w)至約95％，優(yōu)選％(w/w)活性成分和約99％(w/w)至5％(w/w)的藥學(xué)上可接受的賦形劑(例如如上文所定義)或此類(lèi)賦形劑的組合。優(yōu)選地，該組合物包含約20％(w/w)至約90％(w/w)活性成分和80％(w/w)至10％的藥學(xué)賦形劑或賦形劑的組合。藥物組合物包含約1％至約95％，優(yōu)選約20％至約90％的活性成分。本發(fā)明的藥物組合物可以是，例如，單位劑量形式，諸如以安瓿、小瓶、栓劑、預(yù)充注射器、糖衣丸、粉劑、片劑或膠囊的形式。片劑和膠囊可含有，例如，0-20％崩解劑、0-5％潤(rùn)滑劑、0-5％流動(dòng)助劑和/或0-99％(w/w)填充劑/或增量劑(取決于藥物劑量)。它們還可含有0-10％(w/w)聚合物粘合劑、0-5％(w/w)抗氧化劑、0-5％(w/w)色素。緩釋片另外通常含有0-99％(w/w)控制(例如延遲)釋放的聚合物(取決于劑量)。所述片劑或膠囊的薄膜包衣通常含有0-10％(w/w)聚合物、0-3％(w/w)色素和/或0-2％(w/w)增塑劑。胃腸外制劑通常含有0-20％(w/w)緩沖劑、0-50％(w/w)共溶劑和/或0-99％(w/w)注射用水(WFI)(取決于劑量和是否冷凍干燥)。用于肌肉內(nèi)緩釋的制劑還可含有0-99％(w/w)油。所述藥物制劑可以在單個(gè)包裝、通常泡罩包裝內(nèi)含有整個(gè)治療過(guò)程的“患者包”的形式提供給患者。式(1)、(1a)或(1b)的化合物通常將以單位劑量形式呈現(xiàn)并且同樣地，通常將含有足夠的化合物以提供所需的生物學(xué)活性水平。例如，制劑可含有1納克至2克的活性成分，例如1納克至2毫克的活性成分。在這些范圍內(nèi)，化合物的具體亞范圍是0.1毫克至2克的活性成分(更通常是10毫克至1克，例如50毫克至500毫克)，或1微克至20毫克(例如1微克至10毫克，例如0.1毫克至2毫克的活性成分)。對(duì)于口服組合物，單位劑量形式可含有1毫克至2克，更通常10毫克至1克，例如50毫克至1克，例如100毫克至1克的活性化合物?；钚曰衔飳⒁宰阋赃_(dá)到所需療效的量(有效量)施用于有需要的患者(例如人或動(dòng)物患者)。所施用的化合物的精確量可由指導(dǎo)醫(yī)師根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)程序決定。實(shí)施例本發(fā)明現(xiàn)在將通過(guò)參考以下實(shí)施例中所述的特定實(shí)施方案進(jìn)行闡述，但不限于這些實(shí)施方案。實(shí)施例1-1至5-2已經(jīng)制備了下面表1中顯示的實(shí)施例1-1至5-2的化合物。它們的NMR和LCMS性質(zhì)以及用于制備它們的方法列于表3。表1一般程序其中不包括制備途徑，相關(guān)中間體可商購(gòu)獲得。使用商業(yè)試劑而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。室溫(rt)是指約20-27℃。在Bruker或Jeol儀器上、在400MHz下記錄1HNMR光譜?；瘜W(xué)位移數(shù)值表示為百萬(wàn)分率(ppm)，即(δ：)-數(shù)值。以下縮寫(xiě)用于NMR信號(hào)的多重性：s＝單峰、br＝寬峰、d＝雙重峰、t＝三重峰、q＝四重峰、quint＝五重峰、td＝三重雙重峰、tt＝三重三重峰、qd＝四重雙重峰、ddd＝雙重雙重雙重峰、ddt＝雙重雙重三重峰、m＝多重峰。偶合常數(shù)以J數(shù)值列出，按Hz計(jì)量。對(duì)NMR和質(zhì)譜結(jié)果加以校正，以便將背景峰考慮在內(nèi)。色譜是指使用60-120目硅膠進(jìn)行并且在氮?dú)鈮毫?快速色譜)條件下實(shí)施的柱色譜。用于監(jiān)測(cè)反應(yīng)的TLC是指使用特定流動(dòng)相和硅膠F254(Merck)作為固定相的TLC運(yùn)行。微波介導(dǎo)的反應(yīng)在BiotageInitiator或CEMDiscover微波反應(yīng)器中實(shí)施。LCMS實(shí)驗(yàn)通常使用如對(duì)每種化合物特定的電噴霧條件，在以下條件下進(jìn)行：LCMS方法A和B儀器：WatersAlliance2795，Waters2996PDA檢測(cè)器，MicromassZQ；柱：WatersX-BridgeC-18，2.5微米，2.1x20mm或PhenomenexGemini-NXC-18，3微米，2.0x30mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑D的C溶液(％)]：方法A：0.00/2、0.10/2、2.50/95、3.50/95、3.55/2、4.00/2或方法B：0.00/2、0.10/2、8.40/95、9.40/95、9.50/2、10.00/2；溶劑：溶劑C＝2.5LH2O+2.5mL氨水；溶劑D＝2.5LMeCN+135mLH2O+2.5mL氨溶液)；進(jìn)樣體積3μL；UV檢測(cè)230至400nM；柱溫45℃；流速1.5mL/min。LCMS方法C儀器：Agilent1260InfinityLC，具有二極管陣列檢測(cè)器，Agilent6120B單四極桿MS，具有API-ES源；柱：PhenomenexGemini-NXC-18，3微米，2.0x30mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：方法：0.00/5、2.00/95、2.50/95、2.60/5、3.00/5；溶劑：溶劑A＝2.5LH2O+2.5mL(28％NH3的H2O溶液)；溶劑B＝2.5LMeCN+129mLH2O+2.7mL(28％NH3的H2O溶液)；進(jìn)樣體積0.5μL；UV檢測(cè)190至400nM；柱溫40℃；流速1.5mL/min。LCMS方法D和E儀器：HP1100，具有G1315ADAD，MicromassZQ；柱：WatersX-BridgeC-18，2.5微米，2.1x20mm或PhenomenexGemini-NXC-18，3微米，2.0x30mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑D的C溶液(％)]：方法D：0.00/2、0.10/2、2.50/95、3.50/95、3.55/2、4.00/2或方法E：0.00/2、0.10/2、8.40/95、9.40/95、9.50/2、10.00/2；溶劑：溶劑C＝2.5LH2O+2.5mL28％氨的H2O溶液；溶劑D＝2.5LMeCN+135mLH2O+2.5mL28％氨的H2O溶液)；進(jìn)樣體積1μL；UV檢測(cè)230至400nM；質(zhì)量檢測(cè)130至800AMU(+ve和-ve電噴霧)；柱溫45℃；流速1.5mL/min。LCMS方法F：儀器：WatersAcquityH級(jí)，光電二極管陣列，SQ檢測(cè)器；柱：BEHC18，1.7微米，2.1x50mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/5、0.40/5、0.8/35、1.20/55、2.50/100、3.30/1004.00/5；溶劑：溶劑A＝5mM乙酸銨和0.1％甲酸的H2O溶液；溶劑B＝0.1％甲酸的MeCN溶液；進(jìn)樣體積2μL；UV檢測(cè)200至400nM；質(zhì)量檢測(cè)100至1200AMU(+ve電噴霧)；柱在環(huán)境溫度下；流速0.5mL/min。LCMS方法G：儀器：Waters2695，光電二極管陣列，ZQ-2000檢測(cè)器；柱：X-BridgeC18，5微米，150x4.6mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/10、5.00/90、7.00/100、11.00/100、11.01/1012.00/10；溶劑：溶劑A＝0.1％氨的H2O溶液；溶劑B＝0.1％氨的MeCN溶液；進(jìn)樣體積10μL；UV檢測(cè)200至400nM；質(zhì)量檢測(cè)60至1000AMU(+ve電噴霧)；柱在環(huán)境溫度下；流速1.0mL/min。LCMS方法H：儀器：Waters2695，光電二極管陣列，ZQ-2000檢測(cè)器；柱：X-BridgeC18，5微米，150x4.6mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/100、7.00/50、9.00/0、11.00/0、11.01/100、12.00/100；溶劑：溶劑A＝0.1％氨的H2O溶液；溶劑B＝0.1％氨的MeCN溶液；進(jìn)樣體積10μL；UV檢測(cè)200至400nM；質(zhì)量檢測(cè)60至1000AMU(+ve電噴霧)；柱在環(huán)境溫度下；流速1.0mL/min。LCMS方法I：儀器：Waters2695，光電二極管陣列，ZQ-2000檢測(cè)器；柱：X-BridgeC18，3.5微米，150x4.6mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/5、5.00/90、5.80/95、10/95；溶劑：溶劑A＝0.1％氨的H2O溶液；溶劑B＝0.1％氨的MeCN溶液；進(jìn)樣體積10μL；UV檢測(cè)200至400nM；質(zhì)量檢測(cè)60至1000AMU(+ve電噴霧)；柱在環(huán)境溫度下；流速1.0mL/min。LCMS方法J：儀器：Waters2695，光電二極管陣列，ZQ-2000檢測(cè)器；柱：X-BridgeC18，5微米，150x4.6mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.01/10、5.00/90、7.00/100、11.00/100、11.01/10、12.00/10；溶劑：溶劑A＝20mM乙酸銨的H2O溶液；溶劑B＝MeOH；進(jìn)樣體積10μL；UV檢測(cè)200至400nM；質(zhì)量檢測(cè)60至1000AMU(+ve電噴霧)；柱在環(huán)境溫度下；流速1.0mL/min。LCMS方法K：儀器：Waters2695，光電二極管陣列，ZQ-2000檢測(cè)器；柱：X-BridgeC18，3.5微米，50x4.6mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.01/0、0.20/0、5.00/90、5.80/95、7.20/95、7.21/100、10.00/100；溶劑：溶劑A＝0.1％氨的H2O溶液；溶劑B＝0.1％氨的MeCN溶液；進(jìn)樣體積10μL；UV檢測(cè)200至400nM；質(zhì)量檢測(cè)60至1000AMU(+ve電噴霧)；柱在環(huán)境溫度下；流速1.0mL/min。LCMS方法L儀器：WatersAcquityUPLC，Waters3100PDA檢測(cè)器，SQD；柱：AcquityBEHC-18，1.7微米，2.1x100mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/2、2.00/2、7.00/50、8.50/80、9.50/2、10.0/2；溶劑：溶劑A＝5mM乙酸銨的水溶液；溶劑B＝乙腈；進(jìn)樣體積1μL；檢測(cè)波長(zhǎng)214nm；柱溫30℃；流速0.3mL/min。LCMS方法M儀器：Agilent1260Infinity系列UHPLC；ELSD：Agilent1260infinity；柱：AcquityC-18，1.7微米，2.1x50mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/10、1.00/10、2.00/15、4.50/55、6.00/90、8.00/90、9.00/10、10.00/10；溶劑：A＝5mM乙酸銨的水溶液，B＝乙腈；進(jìn)樣體積：1μL；通過(guò)ELSD檢測(cè)；柱溫：40℃；流速：0.6mL/min。LCMS方法N儀器：WatersAcquityUPLC，Waters3100PDA檢測(cè)器，SQD；柱：AcquityBEHC-18，1.7微米，2.1x100mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/2、0.50/2、1.50/20、4.00/92、5.00/92、5.50/50、6.00/2；溶劑：溶劑A＝5mM乙酸銨的水溶液；溶劑B＝乙腈；進(jìn)樣體積1μL；檢測(cè)波長(zhǎng)214nm；柱溫35℃；流速0.6mL/min。LCMS方法O儀器：WatersAcquityUPLC，Waters3100PDA檢測(cè)器，SQD；柱：AcquityHSS-T3，1.8微米，2.1x100mm；梯度[時(shí)間(min)/溶劑B的A溶液(％)]：0.00/10、1.00/10、2.00/15、4.50/55、6.00/90、8.00/90、9.00/10、10.00/10；溶劑：溶劑A＝0.1％三氟乙酸的水溶液；溶劑B＝乙腈；進(jìn)樣體積1μL；檢測(cè)波長(zhǎng)214nm；柱溫30℃；流速0.3mL/min。實(shí)驗(yàn)部分的LCMS數(shù)據(jù)按以下形式給出：質(zhì)量離子，滯留時(shí)間，UV活性?？s寫(xiě)AcOH＝醋酸CDI＝1，1′-羰基二咪唑d＝天DAST＝三氟化二乙氨基硫DCE＝二氯乙烷DCM＝二氯甲烷DIPEA＝二異丙基乙胺DIAD＝偶氮二甲酸二異丙酯DMF＝二甲基甲酰胺DMP＝戴斯-馬丁氧化劑(Dess-Martinperiodinane)DMSO＝二甲亞砜ES＝電噴霧電離EtOAc＝乙酸乙酯h＝小時(shí)HATU＝1-[雙(二甲基氨基)亞甲基]-1H-1，2，3-三唑并[4，5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽HPLC＝高效液相色譜LC＝液相色譜LiAlH4/LAH＝氫化鋁鋰MeCN＝乙腈MeOH＝甲醇min＝分鐘MS＝質(zhì)譜Et3N＝三乙胺NMR＝核磁共振rt＝室溫sat.＝飽和的sol.＝溶液STAB＝三乙酰氧基硼氫化鈉THF＝四氫呋喃TLC＝薄層色譜前綴n-、s-、i-、t-和tert-具有它們的常規(guī)含義：正、仲、異和叔。中間體的合成：用于制備中間體2，2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的程序?qū)?-Boc-2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷(3.37g，15mmol)分批加至氯化氫(4M二噁烷溶液，50mL，210mmol)。注意：泡騰。24h后，將反應(yīng)物真空濃縮，并將殘留固體溶解于Et3N(4.18ml，30mmol)和DCM(66mL)的混合物。完成溶解后，立即將溶液冷卻至0℃，然后滴加氯甲酸乙酯(1.57mL，16.5mmol)。18h后，將混合物傾入二氯甲烷(100mL)和NaHCO3(水溶液)(100mL)，并萃取(2×100mL)。收集有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，然后將殘余物在蒸發(fā)后通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil100g，40-63μm，50mL/min，梯度0％至4％MeOH的DCM溶液])純化，得到呈無(wú)色油狀物的中間體2，2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(2.47g，83％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體3，2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯的程序?qū)?-Boc-2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷(5.00g，22.2mmol)分批加至氯化氫(4M二噁烷溶液，45mL，180mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)。注意：泡騰。2h后，真空濃縮反應(yīng)物，并將1.29g殘余固體溶解于三乙胺(2.23ml，16.0mmol)和二氯甲烷(10mL)的混合物。完成溶解后，立即將溶液冷卻至0℃，然后滴加氯甲酸甲酯(0.68mL，8.83mmol)。3h后，將混合物傾入二氯甲烷(50mL)，用NaHCO3(水溶液)(2×50mL)洗滌并用DCM(50mL)萃取。合并有機(jī)層，用鹽水(50mL)洗滌，通過(guò)Biotage相分離器，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil50g，40-63μm，40mL/min，梯度0％至10％MeOH的DCM溶液])純化，得到呈橙色油狀物的中間體3，2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯(0.93g，66％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體4，2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸2-氟乙酯的程序?qū)?-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(5g，22.19mmol)在HCl的1，4-二噁烷(25mL)溶液中、在室溫下攪拌10h。將反應(yīng)混合物真空濃縮并用丙酮(3x50mL)研磨，得到呈棕色膠狀物的6-氮雜螺[3.4]辛-2-酮(2.77g，55.4％)。將殘余物溶解于無(wú)水DCM(20mL)中，并加入Et3N(0.7mL，4.8mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并加入氯甲酸2-氟乙酯(0.45g、3.6mmol)。將反應(yīng)混合物在30℃下攪拌5h，然后用水(50mL)稀釋?zhuān)肈CM(2x100mL)萃取，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜純化(正相，60-120目硅膠，0至10％EtOAc的己烷溶液)，得到呈棕色膠狀物的中間體4，2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸2-氟乙酯(0.2g，38.8％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。分別用于制備中間體20和21，4-(5-氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶三氟乙酸鹽和4-(4，5-二氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶三氟乙酸鹽的程序?qū)?-(1-甲基咪唑-2-基)哌啶鹽酸鹽(1g，4.96mmol)懸浮于無(wú)水DCM(20mL)和Et3N(2.1mL，15.1mmol)的混合物中，并在冰水浴中冷卻。經(jīng)5min分批加入(BOC)2O(1.19g，5.45mmol)，將混合物升溫至室溫并攪拌48h。將混合物用DCM稀釋?zhuān)蔑柡蚇aHCO3水溶液(x2)和鹽水(x1)洗滌，然后通過(guò)相分離器并真空濃縮，得到呈固體的4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.34g，定量)。LCMS(方法C)：m/z266(M+H)+(ES+)，在1.43min時(shí)，UV活性。將4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.250g，0.942mmol)溶解于MeCN(7.5mL)中，用NCS(0.314g，2.35mmol)處理，并在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物在快速硅膠(～15mL)上真空濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil50g，40-63μm，40mL/min，梯度2％至10％溶劑A的DCM溶液，經(jīng)15個(gè)柱體積，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液])純化，得到含有4-(5-氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-(4，5-二氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯和琥珀酰亞胺的混合物(0.495g)。LCMS(方法C)：?jiǎn)温龋簃/z300/302(M+H)+(ES+)，在1.68min時(shí)，UV活性；二氯：m/z334/336/338(M+H)+(ES+)，在1.87min時(shí)，UV活性。單氯；二氯的比率～16∶1，通過(guò)LC-UV。將含有4-(5-氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯和4-(4，5-二氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯和琥珀酰亞胺的混合物(0.495g)溶解于DCM(5mL)，用TFA(5mL)處理，并在室溫下攪拌6h。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并將殘余物與甲苯(x2)共沸，得到以下兩者的粗品混合物：中間體20，4-(5-氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶三氟乙酸鹽，以及與琥珀酰亞胺混合的中間體21，4-(4，5-二氯-1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶三氟乙酸鹽。假定定量產(chǎn)率。不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化即使用。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。分別用于制備中間體22和25，4-(5-氯-1H-咪唑-2-基)哌啶二氫溴酸鹽和4-(4，5-二氯-1H-咪唑-2-基)哌啶二氫溴酸鹽的程序?qū)?-(1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸乙酯(0.40g，1.79mmol)溶解于MeCN(12mL)中，用NCS(0.360g，2.70mmol)處理，并在室溫下攪拌5.5h。將反應(yīng)混合物在快速硅膠(～10mL)上真空濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil50g，40-63μm，40mL/min，梯度0％至5％溶劑A的DCM溶液，經(jīng)15個(gè)柱體積，然后5％溶劑A的DCM溶液，經(jīng)5個(gè)柱體積，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液])純化，得到分離的4-(5-氯-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸乙酯和4-(4，5-二氯-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸乙酯，將兩者與琥珀酰亞胺混合。分別溶解于DCM中，用H2O(x3)洗滌，通過(guò)相分離器并真空濃縮以去除琥珀酰亞胺。4-(5-氯-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸乙酯(0.12g，26％)，LCMS(方法C)：m/z258/260(M+H)+(ES+)，在1.34min時(shí)，UV活性。4-(4，5-二氯-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸乙酯(0.24g，45％)，LCMS(方法C)：m/z292/294/296(M+H)+(ES+)，在1.24min時(shí)，UV活性。將4-(5-氯-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸乙酯(0.12g，0.47mmol)溶解于AcOH(2mL)中，用48％水性HBr(2mL)處理，并在～120°下加熱回流2h。將反應(yīng)混合物真空濃縮，將殘余物與甲苯(x1)共沸并真空濃縮，得到固體。假定為定量產(chǎn)率的中間體22，4-(5-氯-1H-咪唑-2-基)哌啶二氫溴酸鹽。立即使用。將4-(4，5-二氯-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸乙酯(0.24g，0.82mmol)溶解于AcOH(2mL)中，用48％水性HBr(2mL)處理并～120℃加熱2h。將反應(yīng)混合物真空濃縮，將殘余物與甲苯(x1)共沸并真空濃縮，得到固體。假定為定量產(chǎn)率的中間體25，4-(4，5-二氯-1H-咪唑-2-基)哌啶二氫溴酸鹽。立即使用。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體46，4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯以及中間體33，4-[4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]哌啶的程序?qū)?-甲?；哙?1-羧酸叔丁酯(2.0g，9.4mmol)溶解于MeOH(10mL)中，隨后加入在0℃下冷卻30min的7M甲醇氨，隨后分批加入3，3-二溴-1，1，1-三氟丙-2-酮(5.07g，18.5mmol)。將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌2h，真空去除溶劑，并將殘余物分配于H2O(80mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2×50mL)萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(活化的堿性氧化鋁，0.5％MeOH的DCM溶液)純化，得到呈白色固體的中間體46，4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.80g，60％)。副標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。將4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1g、3.13mmol)溶解于1，4-二噁烷(5mL)中，隨后滴加HCl的1，4-二噁烷溶液(20mL，3M溶液)。將所得到的反應(yīng)混合物在30℃下攪拌16h，真空去除溶劑并將殘余物通過(guò)用二乙醚(3x5mL)研磨純化，得到呈白色固體的中間體33，4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶鹽酸鹽(650mg，95％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體37，4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]哌啶鹽酸鹽的程序?qū)?-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.63mmol)溶解于THF(5mL)中，并在0℃下加入60％氫化鈉(74mg，1.88mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌10min，然后加入甲基碘(0.06mL，0.96mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌2h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(60mL)和EtOAc(45mL)之間，用EtOAc(2x45mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相硅膠，目數(shù)：60-120，0％至2.0％至3.5％MeOH的DCM溶液)純化，得到呈黃色膠狀物的4-(1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(190mg，91％)。LCMS(方法F)：m/z334(M+H)+(ES+)，在2.31min時(shí)，UV活性將4-(1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg，0.6mmol)溶解于1，4-二噁烷(5mL)中，隨后滴加HCl的1，4-二噁烷溶液(20mL，4M溶液)。所得到的反應(yīng)混合物在30℃下攪拌16h，真空去除溶劑并將殘余物通過(guò)用二乙醚(3x5mL)研磨純化，得到呈白色固體的中間體37，4-[1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基]哌啶鹽酸鹽(140mg，86.8％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中用于制備中間體43，4-(1，3，4-噁二唑-2-基)哌啶的程序?qū)⑦哙?4-羧酸乙酯(3.0g，19.1mmol)溶解于THF(15mL)中，并在0℃下加入Cs2CO3(7.4g，22.9mmol)。將所得到的反應(yīng)混合物在0-5℃下攪拌10min，然后滴加氯甲酸芐酯(3.2g，19.1mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(100mL)和EtOAc(200mL)之間，用EtOAc(2×200mL)萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相硅膠，目數(shù)：60-120，0％至10％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈黃色固體的哌啶-1，4-二羧酸1-芐基4-乙酯(4.2g，76.4％)。LCMS(方法F)：m/z292(M+H)+(ES+)，在2.35min時(shí)，UV活性將哌啶-1，4-二羧酸1-芐基4-乙酯(4.2g，14.43mmol)溶解于EtOH(10mL)中，加入一水合肼(10mL，5.41mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在90℃下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，并將粗產(chǎn)物用戊烷和己烷研磨，得到呈白色固體的4-(肼基羰基)哌啶-1-羧酸芐酯(3.8g，95％)。LCMS(方法H)：m/z278(M+H)+(ES+)，在1.76min時(shí)，UV活性將4-(肼基羰基)哌啶-1-羧酸芐酯(0.5g，1.79mmol)溶解于原甲酸三乙酯(8mL)中，然后加入TFA(0.1mL)。將所得到的反應(yīng)混合物在80℃下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物分配于H2O(50mL)和EtOAc(100mL)之間，用EtOAc(2×100mL)萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相硅膠，目數(shù)：60-120，50％至60％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈黃色固體的4-(1，3，4-二唑-2-基)哌啶-1-羧酸芐酯(0.19g，38％)。LCMS(方法H)：m/z288(M+H)+(ES+)，在2.03min時(shí)，UV活性將4-(1，3，4-二唑-2-基)哌啶-1-羧酸芐酯(0.15g，0.52mmol)溶解于MeOH(10mL)中。加入無(wú)水10％Pd/碳催化劑(20mg)，并在室溫下用H2氣體吹掃反應(yīng)混合物。將反應(yīng)混合物在室溫下、在H2氣氛下攪拌12h。將反應(yīng)物經(jīng)硅藻土過(guò)濾并真空去除溶劑，得到呈無(wú)色膠狀物的中間體43，4-(1，3，4-二唑-2-基)哌啶(0.078g，99％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體44，4-(3-甲基-1，2，4-二唑-5-基)哌啶的程序?qū)⒁译?40.0mL)和50％羥基胺的水溶液(4.20mL)在90℃下回流加熱24h。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃并過(guò)濾。將殘余物干燥，得到呈白色結(jié)晶固體的(Z)-N-羥基乙脒(2.1g，＞100％)。LCMS(方法H)：m/z74(M+H)+(ES+)，在1.86min時(shí)，UV非活性將(Z)-N-羥基乙脒(0.50g，6.75mmol)和哌啶-4-羧酸甲酯(1.17g，7.42mmol)溶解于乙醇(20mL)中。滴加將21％乙醇鈉的乙醇溶液(0.92mL，13.4mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30min，然后在100℃下攪拌16h。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相硅膠，0至12％甲醇的DCM溶液)純化，得到呈黃色膠狀物的中間體44，4-(3-甲基-1，2，4-二唑-5-基)哌啶(380mg，34％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體47，4-(1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇鹽酸鹽的程序?qū)?H-咪唑(8.0g，117.5mmol)溶解于DMF(100mL)中，在室溫下加入氫化鈉(4.7g，117.5mmol，60％于油中)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h。在室溫下，向反應(yīng)混合物中滴加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯(20.5g，123.38mmol)，加入后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h。將反應(yīng)混合物傾于冰冷的水(1000mL)中，并用EtOAc(500mL)萃取，用EtOAc(2x500mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相硅膠，0至1％甲醇的DCM溶液)純化，得到呈淺綠色膠狀物的1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑(16.2g，68.6％)。LCMS(方法F)：m/z199(M+H)+(ES+)，在1.73min時(shí)，UV活性將1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑(5.0g，25.0mmol)溶解于THF(50mL)中并冷卻至-78℃。在-78℃下滴加n-BuLi(19.0mL，30mmol，1.6M的己烷溶液)，然后將反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1h。在-78℃下滴加4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.53g，27mmol)的THF溶液(10mL)至反應(yīng)混合物。使反應(yīng)混合物經(jīng)2h升溫至室溫。將反應(yīng)混合物用飽和NH4Cl溶液(100mL)猝滅，用EtOAc(50mL)萃取，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相硅膠，0至20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈淡黃色膠狀物的4-羥基-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(8g，80.0％)。LCMS(方法F)：m/z398(M+H)+(ES+)，在2.16min時(shí)，UV活性將4-羥基-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.0g，5.0mmol)溶解于4MHCl的1，4-二烷溶液(20mL)中，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌10h。真空去除溶劑，并將殘余物用丙酮(3x20mL)研磨，得到呈棕色膠狀物的中間體47，4-(1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇(0.5g，60.2％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體48，4-(1H-咪唑-2-基)-4-甲氧基哌啶鹽酸鹽的程序?qū)?-羥基-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.0g，5.0mmol)溶解于DMF(20mL)中。將溶液在N2下冷卻至0℃，并加入NaH(0.24g，10.0mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30min，然后加入甲基碘(1.07g，7.5mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h。將反應(yīng)混合物分配于水(50mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(3x100mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，60-120目硅膠，0至10％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈黃色膠狀物的4-甲氧基-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.5g，75.0％)。將4-甲氧基-4-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.5g，3.6mmol)溶解于4MHCl在1，4-二烷(20mL)中的溶液中，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌10h。真空去除溶劑，并將殘余物用丙酮(3x20mL)研磨，得到呈棕色固體的中間體48，4-(1H-咪唑-2-基)-4-甲氧基哌啶(0.5g，76.0％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體49，4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇鹽酸鹽的程序?qū)?-甲基咪唑(6.0g，73.0mmol)在室溫下溶解于THF(100mL)中，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀吕鋮s至-78℃，緩慢加入n-BuLi的己烷溶液(45.4mL，73.0mmol)。將反應(yīng)混合物逐漸升溫至40℃并攪拌4h，然后冷卻至-78℃。加入4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(14.56g，73.0mmol)的THF溶液(100mL)。將反應(yīng)混合物逐漸升溫至40℃并攪拌10h，然后用水(50mL)猝滅。將反應(yīng)混合物分配于EtOAc(200mL)和水(150mL)之間，用EtOAc(2x200mL)萃取水層，合并有機(jī)層并干燥(Na2SO4)。真空去除溶劑，并將殘余物用甲醇洗滌，得到呈固體的4-羥基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(14.0g，68.1％)，將其粗品用于后續(xù)反應(yīng)。LCMS(方法F)：m/z282(M+H)+(ES+)，在2.05min時(shí)，UV活性將4-羥基-4-(1-甲基-1H-吡咯-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.5g，1.7mmol)在室溫下溶解于1，4二烷(30mL)中，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀吕鋮s至0℃，緩慢加入HCl的二烷溶液(15mL，4M溶液)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6h，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)由戊烷(10mL)和二乙醚(10mL)研磨純化，得到呈棕色固體的中間體49，4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-4-醇(0.2g，62.5％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體50，4-甲氧基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶鹽酸鹽的程序?qū)?-羥基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.0g，10.6mmol)在室溫下溶解于DMF(50mL)中，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀吕鋮s至0℃，加入NaH(0.64g，16.0mmol，60％在油中的分散體)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，然后滴加甲基碘(1.8g，128mmol)。將反應(yīng)混合物升溫室溫并攪拌10h，然后用水(50mL)猝滅。將反應(yīng)混合物用EtOAc(3x200mL)萃取，并合并有機(jī)層并干燥(Na2SO4)。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，硅膠，60-120目，梯度0％至50％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈淡黃色固體的4-甲氧基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.3g，41.3％)。LCMS(方法F)：m/z296(M+H)+(ES+)，在2.36min時(shí)，UV活性將4-甲氧基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.3g，3.3mmol)在室溫下溶解于1，4二烷(30mL)中，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀吕鋮s至0℃，緩慢加入HCl的二烷溶液(15mL，4M溶液)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6h，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)由戊烷(10mL)和二乙醚(10mL)研磨純化，得到呈灰白色固體的中間體50，4-甲氧基-4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶(0.80g，94.1％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體111，4-[(2S，4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-羥基吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯的程序?qū)?2S，4R)-1-Boc-4-羥基吡咯烷-2-羧酸甲酯(25g，101.93mmol)和咪唑(34.687g，509.5mmol)溶解于DMF(100mL)中，并將反應(yīng)物冷卻至0℃。然后加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(36.86g，244.56mmol)，將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌18h。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除揮發(fā)物，并將反應(yīng)混合物用DCM(250mL)稀釋。將混合物用H2O(2x250mL)洗滌，將合并的水層用DCM(250mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用飽和NH4Cl(水溶液)(250mL)和鹽水(250mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到(2S，4R)-1-Boc-4-叔丁基二甲基甲硅烷基醚-吡咯烷-2-羧酸甲酯(35.812g，99％)。LCMS(方法D)：m/z260(M+H-Boc)+(ES+)，在2.64min時(shí)，UV非活性將(2S，4R)-1-Boc-4-叔丁基二甲基甲硅烷基醚-吡咯烷-2-羧酸甲酯(42.7g，118.76mmol)溶解于THF(100mL)中，并將反應(yīng)物冷卻至0℃。然后加入氫化鋁鋰(120mL的1.0M的THF溶液，120.0mmol)，并將反應(yīng)物在0℃下攪拌1h。將反應(yīng)物用H2O(4.5mL)、15％NaOH溶液(4.5mL)和H2O(13.5mL)猝滅，并通過(guò)硅藻土塞過(guò)濾。真空去除揮發(fā)物，得到(2S，4R)-1-Boc-4-叔丁基二甲基甲硅烷基醚-吡咯烷-2-羥甲基(30.320g，77％)。LCMS(方法D)：m/z232(M+H-Boc)+(ES+)，在2.00min時(shí)，UV非活性將(2S，4R)-1-Boc-4-叔丁基二甲基甲硅烷基醚-吡咯烷-2-羥甲基(10.050g，30.362mmol)溶解于DCM(100mL)中，并加入戴斯-馬丁氧化劑(15.371g，36.253mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除揮發(fā)物，并將粗產(chǎn)物直接加載于BiotageSNAP柱(100g)上進(jìn)行純化(10％至50％EtOAc的正己烷溶液梯度)，得到(2S，4R)-1-Boc-4-叔丁基二甲基甲硅烷基醚-吡咯烷-2-甲醛(2.150g，22％)。在0℃下，向氫化鈉(135mg60％在油中的分散體，3.338mmol)在THF中的懸浮液(8mL)中加入膦酰基乙酸三乙酯(0.665mL，3.338mmol)。10min后，加入(2S，4R)-1-Boc-4-叔丁基二甲基甲硅烷基醚-吡咯烷-2-甲醛(1.002g、3.034mmol)的THF溶液(2mL)，并將反應(yīng)物在0℃下攪拌30min。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除揮發(fā)物，并將反應(yīng)混合物用DCM(20mL)稀釋。用H2O(2x20mL)洗滌混合物，將合并的水層用DCM(20mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌(20mL)并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，粗品混合物加載于BiotageSNAP柱(100g)上，并通過(guò)柱色譜(0至30％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈無(wú)色油狀物的(2S，4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-[(1E)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(545mg，45％)。LCMS(方法D)：m/z300(M+H-Boc)+(ES+)，在2.85min時(shí)，UV非活性。向叔丁醇鉀(421mg、3.753mmol)和氰基乙酸乙酯(0.399mL，3.753mmol)在EtOH(5mL)中的溶液中加入(2S，4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-[(1E)-3-乙氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.251mmol)，并將反應(yīng)物在78℃下攪拌18h。加入AcOH(0.200mL)，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除揮發(fā)物。將反應(yīng)混合物用DCM(50mL)稀釋并用H2O(2x50mL)洗滌，將合并的水層用DCM(50mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(50mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，將粗品混合物加載于BiotageSNAP柱(100g)上，并通過(guò)柱色譜(0至30％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈黃色油狀物的3-[(4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}吡咯烷-2-基]-2-氰基戊烷二酸二乙酯(567mg，89％)。向氯化鈉(71mg，1.212mmol)和DMSO(0.040mL，2.204mmol)的H2O溶液(3mL)中加入3-[(4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}吡咯烷-2-基]-2-氰基戊烷二酸二乙酯(565mg，1.102mmol)，并將反應(yīng)物在145℃下攪拌2h。加入冰水(50mL)，隨后加入EtOAc(50mL)，并用H2O(2x50mL)洗滌有機(jī)層。將合并的有機(jī)層用鹽水(50mL)洗滌，并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，將粗品混合物加載于BiotageSNAP柱(50g)上，并通過(guò)柱色譜(0至30％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈黃色油狀物的(4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-(1-氰基-4-乙氧基-4-氧代丁烷-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(351mg，72％)。LCMS(方法D)：m/z341(M+H-Boc)+(ES+)，在2.77min時(shí)，UV非活性向含有NiEnCatTM(65g濕珠粒，～0.25當(dāng)量)的燒瓶中加入(4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-(1-氰基-4-乙氧基-4-氧代丁烷-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8.700g，19.7mmol)的EtOH溶液(75mL)，并將反應(yīng)物在78℃下、在氫氣球氣氛下攪拌96h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土塞過(guò)濾，并真空去除揮發(fā)物，將粗品混合物加載于BiotageSNAP柱(340g)上，并通過(guò)柱色譜(2.5至10％MeOH的DCM溶液)純化，得到呈黃色油狀物的(4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-(2-氧代哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.665g，59％)。LCMS(方法D)：m/z399(M+H)+(ES+)，在1.90min時(shí)，UV非活性在0℃下，向(4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-(2-氧代哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.850g，4.648mmol)的THF溶液(30mL)中加入硼烷：四氫呋喃(9.3mL1.0M的THF溶液，9.300mmol)，并將反應(yīng)物在60℃下攪拌30min。將反應(yīng)物冷卻至室溫，用MeOH(10mL)猝滅，并在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上去除揮發(fā)物。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋并用1MNaOH(水溶液)(2x100mL)洗滌，將合并的水層用DCM(100mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(250mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到呈黃色油狀物的(2S，4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-(哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.830g，＞99％)。LCMS(方法D)：m/z285(M+H-Boc)+(ES+)，在3.00min時(shí)，UV非活性在0℃下，向(2S，4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-2-(哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.830g，4.766mmol)的DCM溶液(20mL)中加入二異丙基乙胺(1.814mL，10.484mmol)和氯甲酸芐酯(0.816mL，5.719mmol)。將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌18h。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋并用1MNaOH(水溶液)(2x100mL)洗滌，將合并的水層用DCM(100mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(250mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，將粗品混合物加載于BiotageSNAP柱(100g)上，并通過(guò)柱色譜(10至40％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈無(wú)色油狀物的4-[(2S，4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(700mg，28％)。向4-[(2S，4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(0.780g，1.504mmol)的THF溶液(5mL)中加入四丁基氟化銨(1.800mL的1.0MTHF溶液，1.800mmol)，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌1h。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋并用H2O(2x100mL)洗滌，將合并的水層用DCM(100mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(250mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到呈無(wú)色油狀物的中間體111，4-[(2S，4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-羥基吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(500mg，82％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體112，(2S，4S)-4-氟-2-(哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的程序?qū)?-[(2S，4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-羥基吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(100mg，0.247mmol)在-40℃下溶解于DCM(1mL)中，并加入DAST(0.049mL，0.371mmol)。將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌2h。將反應(yīng)混合物用DCM(25mL)稀釋并用飽和NaHCO3(水溶液)(2x25mL)洗滌，將合并的水層用DCM(25mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(25mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到4-[(2S，4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(0.090g，90％)。LCMS(方法D)：m/z307(M+H-Boc)+(ES+)，在2.31min時(shí)，UV非活性向4-[(2S，4S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氟吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(0.090g，0.221mmol)溶解于EtOH(2mL)中的溶液中加入10％Pd/C(10mg)和1，4環(huán)己二烯(0.147mL，1.530mmol)，并將反應(yīng)物在70℃下攪拌1h。將反應(yīng)物經(jīng)硅藻土塞過(guò)濾，并真空去除揮發(fā)物，得到中間體112，(2S，4S)-4-氟-2-(哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55mg，92％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體113，(2S)-4，4-二氟-2-(哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的程序?qū)⒉蒗Ｂ?0.065mL，0.741mmol)在-78℃下溶解于DCM(1mL)中，并加入DMSO(0.100mL)。在-78℃下5分鐘后，加入4-[(2S，4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-羥基吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(200mg，0.494mmol)的DCM溶液(2mL)，隨后在-78℃下再過(guò)5min后加入三乙胺(0.345mL，2.47mmol)。將反應(yīng)物升溫至室溫，并攪拌30min。將反應(yīng)混合物用DCM(25mL)稀釋并用飽和NaHCO3(水溶液)(2x25mL)洗滌，將合并的水層用DCM(25mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(25mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到4-[(2S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氧代吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(0.170g，85％)。LCMS(方法D)：m/z303(M+H-Boc)+(ES+)，在2.15min時(shí)，UV非活性在-78℃下，將4-[(2S)-1-(叔丁氧基羰基)-4-氧代吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(170mg，0.422mmol)溶解于DCM(1mL)中，并加入DAST(0.167mL，1.267mmol)。將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌18h。將反應(yīng)混合物用DCM(25mL)稀釋并用飽和NaHCO3(水溶液)(2x25mL)洗滌，將合并的水層用DCM(25mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(25mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到4-[(2S)-1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(0.070g，39％)。LCMS(方法D)：m/z325(M+H-Boc)+(ES+)，在2.41min時(shí)，UV非活性向4-[(2S)-1-(叔丁氧基羰基)-4，4-二氟吡咯烷-2-基]哌啶-1-羧酸芐酯(0.067g，0.158mmol)溶解于EtOH(2mL)中的溶液中加入10％Pd/C(10mg)和1，4環(huán)己二烯(0.105mL，1.105mmol)，并將反應(yīng)物在70℃下攪拌1h。將反應(yīng)物經(jīng)硅藻土塞過(guò)濾，并真空去除揮發(fā)物，得到中間體113，(2S)-4，4-二氟-2-(哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(30mg，65％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體125，(2S)-4，4-二氟-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的程序在0℃下，向(2R)-4，4-二氟吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁基2-甲酯(2g，7.5mmol)的THF溶液(20mL)中加入硼氫化鋰的THF溶液(2.0M，7.5mL，15mmol)，將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌2h。分批加入飽和NaHCO3水溶液猝滅反應(yīng)物，一旦泡騰停止，即將混合物濃縮以去除THF。將含水混合物分配于飽和NaHCO3水溶液和DCM(x2)之間，將有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈油狀物的粗品(2R)-4，4-二氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.98g，＞100％)。LCMS(方法C)：m/z260(M+Na)+(ES+)，在1.09min時(shí)，UV非活性。在0℃下，向(2R)-4，4-二氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1g，4.2mmol)在DCM(10mL)和三乙胺(1.5mL，11mmol)中的溶液中分批加入MsCl(0.42mL，5.4mmol)。將混合物在0℃下攪拌100min，然后分配于冰冷的飽和NaHCO3水溶液和冰冷的DCM(x2)之間，將有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈油狀物的粗品(2R)-4，4-二氟-2-{[(甲基磺?；?氧基]甲基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.55g，＞100％)。LCMS(方法C)：m/z338(M+Na)+(ES+)，在1.28min時(shí)，UV非活性。在0℃下，向(2R)-4，4-二氟-2-{[(甲基磺酰基)氧基]甲基}吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.55g，4.9mmol)的THF溶液(15mL)中經(jīng)10min分批加入LiBHEt3的THF溶液(1.0M，9.8mL，9.8mmol)。然后，將混合物攪拌3天，使冷卻浴失效。將混合物冷卻回0℃，加入H2O猝滅，然后濃縮以去除THF。將含水混合物分配于飽和NaHCO3水溶液和DCM(x2)之間，將有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈油狀物的粗品中間體125，(2S)-4，4-二氟-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.89g，82％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體126，(2R)-4，4-二氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的程序?qū)?R)-4-氧代吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁基2-甲酯(1.00g，4.111mmol)在-78℃下溶解于DCM(10mL)中，并加入DAST(1.629mL，12.332mmol)。將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌2h。將反應(yīng)混合物用DCM(100mL)稀釋并用飽和NaHCO3(水溶液)(2x100mL)洗滌，將合并的水層用DCM(100mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(25mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除溶劑，得到橙色油狀物(0.957g，90％)。在0℃下，向(R)-4，4-二氟吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁基2-甲酯(500mg，1.885mmol)的THF溶液(5mL)中加入硼氫化鋰的2.0MTHF溶液(1.90mL，3.80mmol)，并將反應(yīng)物升溫至室溫并攪拌1h。真空去除溶劑，并將反應(yīng)混合物用DCM(50mL)稀釋并用飽和NaHCO3(水溶液)(2x50mL)洗滌，將合并的水層用DCM(50mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(50mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到中間體126，(2R)-4，4-二氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(452mg，92％)。用于制備中間體132，3-(哌啶-4-基)-1，3-嗪烷-2-酮鹽酸鹽的程序?qū)?-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.796g，4.00mmol)和3-氨基丙-1-醇(0.330g，4.4mmol)在室溫下在CH2Cl2(20mL)中混合，加入AcOH(0.68mL，12.0mmol)并攪拌3h。加入STAB(2.34g，10.0mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀隆⒃谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(40mL)猝滅，用CH2Cl2(4x45mL)萃取，并將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥并過(guò)濾。真空去除溶劑，得到粗品4-[(3-羥基丙基)氨基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.03g，4.00mmol)，將其使用而不經(jīng)過(guò)純化。LCMS(方法B)：m/z259(M+H)+(ES+)，在0.24min時(shí)，UV非活性。將4-[(3-羥基丙基)氨基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.03g，4.00mmol)，CDI(1.36g，8.4mmol)和DBU(0.24mL，1.60mmol)溶解于THF(40mL)，將混合物加熱至回流并保持72h。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，50mL/min，梯度0％至10％MeOH的DCM溶液])純化，得到呈無(wú)色油狀物的4-(2-氧代-1，3-嗪烷-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.60g，53％)。LCMS(方法B)：m/z307(M+Na)+(ES+)，在0.16min時(shí)，UV非活性。將4-(2-氧代-1，3-嗪烷-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.60g，2.11mmol)溶解于CH2Cl2(21mL)中，加入4M氯化氫的二烷溶液(2.64mL，10.5mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾收集沉淀，用CH2Cl2(2x20mL)洗滌并干燥，得到中間體132，3-(哌啶-4-基)-1，3-嗪烷-2-酮鹽酸鹽(0.352g，76％)，為無(wú)色固體。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體151，2-(4-氧代哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯鹽酸鹽的程序?qū)?-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.985g，5.00mmol)和1，4-二氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷(0.715g，5.00mmol)在CH2Cl2(50mL)中、在室溫下混合，加入AcOH(0.31mL，5.50mmol)并攪拌3h。加入STAB(2.65g，12.5mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀隆⒃谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(40mL)猝滅，用CH2Cl2(4x45mL)萃取，并將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥并過(guò)濾。真空去除溶劑，得到呈非對(duì)映體的混合物的粗品2-(1，4-二氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，將其不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化而使用。LCMS(方法D)：m/z325(M+H)+(ES+)，在1.11min和1.16min時(shí)，UV非活性。將粗品2-(1，4-二氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸-8-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(1.62g，5.00mmol)溶解于THF(10mL)中，加入水(10mL)和濃鹽酸(10mL)，并將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，并殘余物由Et2O研磨，得到呈無(wú)色固體的中間體151，2-(4-氧代哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯鹽酸鹽(1.30g，82％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體164，4-(1，3-噻唑-4-基)哌啶氫溴酸鹽的程序通過(guò)將氮?dú)饬鞔┻^(guò)燒結(jié)玻璃管進(jìn)入液體中，將碳酸鈉水溶液(2M)和1，4-二噁烷脫氣15min。將4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸芐酯(250mg，0.73mmol)、4-溴-1，3-噻唑(119mg，0.73mmol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(32mg，0.044mmol)、脫氣的碳酸鈉水溶液(2M，1.1mL，2.2mmol)和脫氣的1，4-二噁烷(3mL)置于氮?dú)鉀_洗的管中，密封并在壓力下、在90℃下加熱2.5h。將冷卻的反應(yīng)混合物用H2O稀釋?zhuān)⒂肊tOAc萃取。將有機(jī)相通過(guò)相分離器并在快速硅膠(15mL)上濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil50g，40-63μm，]，40mL/min，65％Et2O的異己烷溶液等度)純化，得到4-(1，3-噻唑-4-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸芐酯(173mg，79％)。LCMS(方法C)：m/z301(M+H)+(ES+)，在1.46min時(shí)，UV活性。使用H-Cube裝置，通過(guò)10％鈀/碳催化劑在100巴壓力和50℃下、在1mL/min流速下，將4-(1，3-噻唑-4-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸芐酯(150mg，0.50mmol)的EtOAc溶液(10mL)氫化。將溶液濃縮，得到4-(1，3-噻唑-4-基)哌啶-1-羧酸芐酯(143mg，95％)。LCMS(方法A)：m/z303(M+H)+(ES+)，在1.92min時(shí)，UV活性。將4-(1，3-噻唑-4-基)哌啶-1-羧酸芐酯(127mg，0.42mmol)在AcOH(1mL)和48％HBr水溶液(1mL)中的溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。然后，濃縮混合物并將殘余物與甲苯共沸，得到中間體164，4-(1，3-噻唑-4-基)哌啶氫溴酸鹽(160mg，＞100％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體172，(1R，5S)-3-苯基-2，4-二氧雜-3-硼二環(huán)[3.3.1]壬-7-酮的程序?qū)?1S，3S，5S)-環(huán)己烷-1，3，5-三醇(1.0g，6.0mmol)和苯基硼酸(0.72g，6.0mmol)溶解于甲苯(35mL)中，并在120℃下在回流下加熱16h。將反應(yīng)混合物濃縮，得到呈固體的粗品(1R，5S，7R)-3-苯基-2，4-二氧雜-3-硼二環(huán)[3.3.1]壬-7-醇(1.43g，87％)，將其立即使用。將(1R，5S，7R)-3-苯基-2，4-二氧雜-3-硼二環(huán)[3.3.1]壬-7-醇(1.4g，6.4mmol)溶解于DCM(50mL)中。加入乙酸鈉(1.31g，16mmol)和氯鉻酸吡啶鎓(12.9g，11mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌16h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，并濃縮濾液，得到粗產(chǎn)物，將所述粗產(chǎn)物由DCM∶己烷(1∶4)重結(jié)晶，得到呈固體的中間體172，(1R，5S)-3-苯基-2，4-二氧雜-3-硼二環(huán)[3.3.1]壬-7-酮(0.65g，38％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體174，4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]哌啶三氟乙酸鹽的程序?qū)?2R)-4，4-二氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.63mmol)的THF溶液(5mL)在冰水中冷卻，并用60％氫化鈉在礦物油中的懸浮液(30mg，0.75mmol)處理。將混合物在冰中攪拌30min，然后在室溫下攪拌1.5h，然后加入甲基碘(0.118mL，1.9mmol)，并在室溫下攪拌過(guò)夜。將混合物用一滴H2O猝滅，然后濃縮以去除THF。將殘余物分配于飽和NaHCO3水溶液和DCM(x2)之間，將有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈油狀物的粗品(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(110mg，69％)。LCMS(方法C)：m/z274(M+Na)+(ES+)，在1.35min時(shí)，UV非活性。將粗品(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(110mg，0.44mmol)在DCM(2mL)和TFA(2mL)中的溶液在室溫下攪拌40min然后用甲苯稀釋并濃縮。將殘余物與甲苯(x2)共沸，得到呈油狀物的粗品(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷三氟乙酸鹽(172mg，＞100％)。LCMS(方法C)：m/z152(M+H)+(ES+)，在0.73min時(shí)，UV非活性。將粗品(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷三氟乙酸鹽(172mg，假定0.44mmol)溶解于DMF(5mL)中。向溶液中依次加入DIPEA(0.38mL，2.2mmol)、AcOH(0.038mL，0.66mmol)、4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.087g，0.44mmol)和STAB(0.278g，1.3mmol)。將混合物在室溫下攪拌2天，然后濃縮以去除DMF。將殘余物分配于飽和NaHCO3水溶液和DCM(x2)之間，并將有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈油狀物的粗品4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.241g，＞100％)。LCMS(方法C)：m/z335(M+H)+(ES+)，在1.43min時(shí)，UV非活性。將粗品4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.241g，假設(shè)0.44mmol)在DCM(2mL)和TFA(2mL)中的溶液在室溫下攪拌45min，然后用用甲苯稀釋并濃縮。將殘余物與甲苯(x2)共沸，得到呈油狀物的粗品中間體174，4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]哌啶三氟乙酸鹽。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體179，1-[(2R)-4，4-二氟-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-基]乙醇三氟乙酸鹽的程序?qū)?2R)-4，4-二氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.63mmol)的DCM溶液(5mL)在冰水中冷卻，并用戴斯-馬丁氧化劑(402mg，0.95mmol)處理。移除冷卻浴，并將混合物在室溫下攪拌3h。加入飽和水溶液NaHCO3(5mL)、飽和硫代硫酸鈉水溶液(5mL)和EtOAc(10mL)，并將混合物劇烈攪拌30min。將相分離并且用EtOAc重新萃取水溶液。合并的有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到粗品醛，將其立即溶解于THF(5mL)中，冷卻至-78℃，并用甲基溴化鎂的乙醚溶液(3M，0.42mL，1.3mmol)處理。從冷卻浴移除混合物，攪拌2.75h，然后加入飽和NH4Cl水溶液猝滅。將混合物濃縮以去除THF，然后分配于NH4Cl和DCM(x2)之間。將有機(jī)相通過(guò)相分離器并在快速硅膠(10mL)上濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，20至50％EtOAc的異己烷溶液純化，得到呈油狀物的(2R)-4，4-二氟-2-(1-羥基乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.106g，67％)。LCMS(方法C)：m/z152(M-BOC+H)+，196(M-tBu+H)+(ES+)，在1.24min時(shí)，UV非活性。將(2R)-4，4-二氟-2-(1-羥基乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(102mg，0.41mmol)在DCM(2mL)和TFA(2mL)中的溶液在室溫下攪拌30min，然后用甲苯稀釋并濃縮。將殘余物與甲苯共沸，得到呈膠狀物的粗品1-[(2R)-4，4-二氟吡咯烷-2-基]乙醇三氟乙酸鹽。立即使用。LCMS(方法C)：m/z152(M+H)+(ES+)，在0.27min時(shí)，UV非活性。將上述粗品1-[(2R)-4，4-二氟吡咯烷-2-基]乙醇三氟乙酸鹽(假定0.41mmol)溶解于DMF(5mL)中。向溶液中依次加入DIPEA(0.38mLm，2.0mmol)、AcOH(0.035mL，0.61mmol)、4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.081g，0.41mmol)和STAB(0.258g，1.2mmol)。將混合物在室溫下攪拌3天，然后濃縮以去除DMF。將殘余物與甲苯共沸，溶解于MeOH中，并濃縮于快速硅膠(5mL)上。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，0至15％溶劑A的DCM溶液，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液)純化，得到呈油狀物的4-[(2R)-4，4-二氟-2-(1-羥基乙基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.301g，＞100％)。LCMS(方法C)：m/z335(M+H)+(ES+)，在1.41min時(shí)，UV非活性。將4-[(2R)-4，4-二氟-2-(1-羥基乙基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.301g，假設(shè)0.41mmol)在DCM(2mL)和TFA(2mL)中的溶液在室溫下攪拌30min，然后用甲苯稀釋并濃縮。將殘余物與甲苯共沸，得到呈油狀物的粗品中間體179，1-[(2R)-4，4-二氟-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-基]乙醇三氟乙酸鹽(0.553g，＞100％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體215，4-(1H-四唑-1-基)哌啶鹽酸鹽的程序?qū)⒃姿崛阴?3.5g，23mmol)、4-氨基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.80g、3.9mmol)和疊氮化鈉(1.52g，23mmol)溶解于醋酸(50mL)中。將所得到的反應(yīng)混合物在100℃下攪拌6h，然后冷卻至室溫。濃縮去除揮發(fā)物，并將殘余物分配于H2O(100mL)和乙酸乙酯(150mL)之間。用乙酸乙酯(2x100mL)進(jìn)一步萃取水層，將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，并濃縮去除溶劑，得到粗產(chǎn)物，用二乙醚研磨所述粗產(chǎn)物，得到呈固體的4-(1H-四唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.51g，9％)。LCMS(方法F)：m/z254(M+H)+(ES+)，在1.92min時(shí)，弱UV活性。將4-(1H-四唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.51g，2.0mmol)溶解于1，4-二噁烷(10mL)中。滴加HCl在1，4-二噁烷中的溶液(4M，5mL，20mmol)，并將所得到的混合物在室溫下攪拌16h。濃縮去除溶劑，并將殘余物通過(guò)用二乙醚(3x10mL)研磨純化，得到呈固體的中間體215，4-(1H-四唑-1-基)哌啶鹽酸鹽(0.30g，97％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體218，4-(1-環(huán)丙基-1H-四唑-5-基)哌啶鹽酸鹽的程序?qū)?-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(2.0g，8.7mmol)和環(huán)丙基胺(0.6mL，8.7mL)溶解于DMF(45mL)中。在室溫下加入HATU(3.3g，8.7mmol)，隨后加入DIPEA(3.1mL，17mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。將反應(yīng)混合物用冷水(250mL)稀釋?zhuān)⒂肊tOAc(3x100mL)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過(guò)柱色譜(正相，中性硅膠，60-120目，0至35％EtOAC的己烷溶液)純化所述粗產(chǎn)物，得到呈固體的4-(環(huán)丙基氨甲?；?哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.5g，64％)。LCMS(方法F)：m/z269(M+H)+(ES+)，在1.80min時(shí)，弱UV活性。將4-(環(huán)丙基氨甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.5g，5.6mmol)和三苯基膦(2.9g，11mmol)溶解于THF(160mL)中。在室溫下經(jīng)15min加入DIAD(2.26g，11mmol)。加入三甲代甲硅烷基疊氮化物(1.3g，11mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24h。將反應(yīng)混合物用水(250mL)稀釋?zhuān)⒂肊tOAc(3x100mL)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過(guò)柱色譜(正相，中性硅膠，60-120目，0至30％EtOAC的己烷溶液)純化所述粗產(chǎn)物，得到呈固體的4-(1-環(huán)丙基-1H-四唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(400mg，24％)。LCMS(方法F)：m/z294(M+H)+(ES+)，在1.96min時(shí)，弱UV活性。將4-(1-環(huán)丙基-1H-四唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(400mg，1.4mmol)溶解于二噁烷(5mL)中。在0℃下加入HCl的二噁烷溶液(4M，5mL，20mmol)，并將混合物在室溫下攪拌5h。濃縮去除溶劑，并將殘余物用二乙醚(10mL)研磨，得到呈固體的中間體2184-(1-環(huán)丙基-1H-四唑-5-基)哌啶鹽酸鹽(260mg，98％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體193，1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2，5-二酮三氟乙酸鹽的程序?qū)㈢牾啺?0.099g，1.0mmol)、4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.221g，1.10mmol和三苯基膦(0.314g，1.20mmol)溶解于THF(5mL)中，然后用偶氮二甲酸二異丙酯(0.236mL，1.20mmol)處理，并在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物在快速硅膠(5mL)上濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，20％至100％EtOAc的異己烷溶液)純化，得到呈固體的4-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.253g，90％)。LCMS(方法C)：m/z305(M+Na)+(ES+)，在1.11min時(shí)，UV非活性將4-(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.141g，0.50mmol)在DCM(3mL)和TFA(3mL)中的溶液在室溫下攪拌30min，然后用甲苯稀釋并濃縮。將殘余物與甲苯共沸，得到呈膠狀物的中間體193，1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2，5-二酮三氟乙酸鹽。立即使用。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體229，2-([2，4′-雙哌啶]-1′-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的程序向2-溴吡啶(10.0g，63.3mmol)在無(wú)水THF(60mL)中的溶液中，在-78℃下緩慢加入n-BuLi(79.1mL，2.5M的己烷溶液，126mmol)。在該溫度下攪拌30min后，緩慢加入4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(13.8g，69.6mmol)的THF溶液(40mL)。將反應(yīng)溫度逐漸升至室溫，并攪拌2h。冷卻至0℃后，將反應(yīng)混合物小心地用冰冷的水(50mL)猝滅。去除揮發(fā)物后，用乙酸乙酯(3x50mL)萃取水層。合并有機(jī)層，并用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度0％至30％乙酸乙酯的己烷溶液]純化，得到呈黃色油狀物的4-羥基-4-(吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(11.4g，65％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.48(s，9H)，1.56-1.63(m，2H)，1.90-2.0(m，2H)，3.25-3.46(m，2H)，4.05-4.22(m，2H)，5.29(br.s.，1H)，7.20-7.25(m，1H)，7.32(d，J＝8.0，Hz，1H)，7.73(dt，J＝1.6，8.4Hz，1H)，8.53(d，J＝4.8Hz，1H)。向4-羥基-4-(吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(11.4g，41.0mmol)在吡啶中的溶液(100mL)中，加入POCl3(5.7mL，61.5mmol)，并在室溫下攪拌20h。真空去除吡啶后，將反應(yīng)混合物用NaOH水溶液(10％，30mL)猝滅，并用氯仿(2x30mL)萃取。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度0％至30％乙酸乙酯的己烷溶液]純化，得到呈黃色油狀物的3′，6′-二氫-[2，4′-雙吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯(2.3g，21％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.48(s，9H)，2.61-2.70(m，2H)，3.60-3.70(m，2H)，4.10-4.19(m，2H)，6.58-6.62(m，1H)，7.11-7.19(m，1H)，7.36(d，J＝7.88Hz，1H)，7.62-7.66(m，1H)，8.55(d，J＝4.4Hz，1H)。向3′，6′-二氫-[2，4′-雙吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯(2.3g，8.84mmol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液中，加入PtO2(200mg，0.88mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下、在H2氣氛下攪拌2d。將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾，用MeOH洗滌并真空濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度0％至15％MeOH的DCM溶液，含0.1％氨水]純化，得到呈無(wú)色油狀物的[2，4′-雙哌啶]-1′-羧酸叔丁酯(1.05g，44％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.30-1.40(m，1H)，1.48(s，9H)，1.60-1.91(m，8H)，2.45-2.55(m，2H)，2.58-2.75(m，4H)，3.24-3.31(m，1H)，4.14-4.24(m，2H)。向[2，4′-雙哌啶]-1′-羧酸叔丁酯(1.05g，3.91mmol)的THF溶液(5mL)中，加入Cbz-OSu(975mg，3.91mmol)的THF溶液(5mL)，并在室溫下攪拌2h。將反應(yīng)混合物用水(20mL)猝滅，并用乙酸乙酯(2x20mL)萃取水層。合并有機(jī)層，并用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度0％至20％乙酸乙酯的己烷溶液]純化，得到呈無(wú)色油狀物的[2，4′-雙哌啶]-1，1′-二羧酸1-芐基1′-(叔丁)酯(840mg，53％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.44(s，9H)，1.50-1.63(m，2H)，1.68-1.92(m，4H)，1.95-2.14(m，2H)，2.55-2.80(m，2H)，2.81-2.95(m，4H)，2.98-3.10(m，1H)，3.75-4.24(m，3H)，5.11(s，2H)，7.34-7.37(m，5H)。]在0℃下，向[2，4′-雙哌啶]-1，1′-二羧酸1-芐基1′-(叔丁)酯(840mg，2.1mmol)在CH2Cl2(10mL)中的溶液中緩慢加入HCl在二噁烷中的溶液(10mL，4M)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(20mL)猝滅，并用CH2Cl2(2x20mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度0％至15％MeOH的DCM溶液，含0.1％氨水]純化，得到呈無(wú)色粘性固體的[2，4′-雙哌啶]-1-羧酸芐酯(570mg，90％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.35-1.70(m，6H)，1.71-1.98(m，4H)，2.46-2.63(m，2H)，2.68-2.73(m，1H)，3.03-3.18(m，1H)，3.65-3.80(m，2H)，3.86-4.16(m，2H)，5.11(s，2H)，7.34-7.37(m，5H)。向[2，4′-雙哌啶]-1-羧酸芐酯(520mg，1.72mmol)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(305mg，1.55mmol)在CH2Cl2中的溶液(15mL)中，加入Ti(OiPr)4(1.6mL，5.16mmol)，并在0℃下攪拌40min。向該反應(yīng)混合物中加入NaBH4(1.1g，5.16mmol)，并在該溫度下持續(xù)攪拌2h。將反應(yīng)混合物用水(20mL)猝滅，并用CH2Cl2(2x20mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將殘余物通過(guò)制備型HPLC純化(反相，XBRIDGE，C-18，19x250mm，5μ，梯度68％至90％ACN的水溶液，含有0.1％NH4OH，214nm，室溫：異構(gòu)體-1為7.45min，且異構(gòu)體-2為8.37min，得到呈無(wú)色粘性固體的2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯異構(gòu)體1，(120mg，15％)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯異構(gòu)體-2，(160mg，19％)。異構(gòu)體-1：LCMS(方法L)：m/z484(M+H)+(ES+)，在5.70min時(shí)，UV活性。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.10-1.32(m，6H)，1.36-1.95(m，14H)，2.00-2.18(m，2H)，2.52-3.05(m，4H)，3.20-3.45(m，4H)，3.87-4.18(m，4H)，5.11(s，2H)，7.30-7.35(m，5H)。異構(gòu)體-2：LCMS(方法L)：m/z484(M+H)+(ES+)，在5.81min時(shí)，UV活性。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.10-1.32(m，6H)，1.35-1.53(m，5H)，1.62-1.80(m，5H)，1.81-1.97(m，4H)，2.00-2.18(m，2H)，2.52-3.00(m，4H)，3.18-3.52(m，4H)，3.88-4.20(m，4H)，5.11(s，2H)，7.32-7.37(m，5H)。向2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的異構(gòu)體的混合物(1.0g，2.06mmol)的MeOH溶液(20mL)中，加入10％Pd/木炭(320mg，50％潤(rùn)濕)，并將反應(yīng)混合物在室溫下、在H2氣氛下攪拌16h。將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾，用MeOH洗滌并真空濃縮，并用戊烷研磨，得到呈無(wú)色液體的中間體229，2-([2，4′-雙哌啶]-1′-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(445mg，92％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體243，1-(哌啶-4-基)-1，3-二氫-2H-異吲哚-2-羧酸叔丁酯的程序向異吲哚啉-1-羧酸鹽酸鹽(5.0g，25.0mmol)的甲醇溶液(60mL)中，在0℃下緩慢加入SOCl2(2.7mL，37.5mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h。完成后，真空濃縮反應(yīng)混合物。將殘余物用二乙醚研磨，得到呈灰白色固體的異吲哚啉-1-羧酸甲酯鹽酸鹽(4.9g，92％)。將殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。1H-NMR(400MHz；DMSO-d6)δ：3.81(s，3H)，4.52-4.63(m，2H)，5.70(s，1H)，7.44-7.50(m，4H)，9.77(br.s.，2H)。在0℃下，向異吲哚啉-1-羧酸甲酯鹽酸鹽(4.9g，23.0mmol)的DCM溶液(50mL)中依次加入Et3N(9.9mL，69.0mmol)和(Boc)2O(8.0mL，34.0mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌12h。將反應(yīng)混合物用水(20mL)猝滅。分離有機(jī)層后，用CH2Cl2(3x15mL)萃取水層。合并有機(jī)層，并用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將粗品殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度10％至30％乙酸乙酯的己烷溶液]純化，得到呈無(wú)色液體的異吲哚啉-1，2-二羧酸2-(叔丁基)1-甲酯(6.5g，90％)。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.52(s，9H)，3.75(s，3H)，4.65-4.85(m，2H)，5.45(s，1H)，7.25-7.43(m，4H)。在0℃下，向溶液異吲哚啉-1，2-二羧酸2-(叔丁基)1-甲酯(6.5g，23.0mmol)在THF中的溶液(60mL)中，緩慢加入LAH(2M，11.5mL，23.0mmol)，并攪拌30min。完成后，將反應(yīng)混合物用飽和Na2SO4水溶液(20mL)猝滅。將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾并用乙酸乙酯(100mL)洗滌，干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到呈灰白色固體的1-(羥甲基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(5.2g，91％)。將粗品殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.52(s，9H)，3.70-3.78(m，1H)，3.98-4.03(m，1H)，4.60-4.69(m，1H)，4.70-4.85(m，2H)，5.22(br.s.，1H)，7.25-7.40(m，4H)。在0℃下，向1-(羥甲基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(5.2g，20.0mmol)的DCM溶液(100mL)中分批加入戴斯-馬丁氧化劑(27g，62.0mmol)，并在室溫下攪拌48h。完成后，將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾并用二乙醚(3x20mL)洗滌。將濾液用飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到呈棕色液體的1-甲?；愡胚徇?2-羧酸叔丁酯(4.5g，88％)。將粗品殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.48(s，9H)，4.65-4.90(m，2H)，5.29-5.35(s，1H)，7.25-7.35(m，4H)，9.51(s，1H)。向NaH(874mg，18.2mmol)在THF中的溶液中，在-78℃下加入膦?；宜崛柞?3.3mL，18.2mmol)。在-78℃下攪拌1h后，緩慢加入1-甲?；愡胚徇?2-羧酸叔丁酯(4.5g，18.2mmol)，并將反應(yīng)混合物升溫至0℃。完成后，將反應(yīng)混合物用飽和NH4Cl水溶液(10mL)猝滅，并用乙酸乙酯(3x20mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到呈棕色液體的(E)-1-(3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(5.2g，92％)。將殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。MS(ESI+ve)：304在室溫下，向(E)-1-(3-甲氧基-3-氧代丙-1-烯-1-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(5.2g，17.2mmol)的MeCN溶液(20mL)中分批加入Cs2CO3(11.1g，34.4mmol)。攪拌20min后，緩慢加入氰基乙酸甲酯(3.0mL，34.4mmol)，并將反應(yīng)混合物在70℃下攪拌16h。完成后，將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾，并用己烷(3x20mL)充分洗滌。將濾液真空濃縮，得到呈棕色粘性固體的二甲基3-(2-(叔丁氧基羰基)異吲哚啉-1-基)-2-氰基戊烷二酸酯)(5.5g，粗品)。將粗品殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。MS(ESI+ve)：403向3-(2-(叔丁氧基羰基)異吲哚啉-1-基)-2-氰基戊烷二酸二甲酯)(1.6g，粗品)的DMSO溶液(15mL)中，加入LiCl(500mg，11.7mmol)，隨后加入水(0.1mL，cat.)，并將反應(yīng)混合物在135℃下攪拌16h。完成后，將反應(yīng)混合物用水(20mL)猝滅，并用二乙醚(3x20mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到呈棕色半固體的1-(1-氰基-4-甲氧基-4-氧代丁烷-2-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(1.5g，粗品)。將粗品殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。MS(ESI+ve)：345向1-(1-氰基-4-甲氧基-4-氧代丁烷-2-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(300mg，0.8mmol)的MeOH溶液(30mL)中，加入雷尼鎳(0.30g，濕)，并將反應(yīng)混合物在50psiH2氣氛下加熱至50℃持續(xù)2h。然后將反應(yīng)溫度升至70℃，并攪拌3h。完成后，將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾，用MeOH(25mL)洗滌并真空濃縮。將殘余物用二乙醚(30mL)研磨，得到呈棕色固體的1-(2-氧代哌啶-4-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(0.21g，76％)。MS(ESI+ve)：317在0℃下，向1-(2-氧代哌啶-4-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(210mg，0.60mmol)的THF溶液(5mL)中緩慢加入BH3-DMS(0.5mL，6.60mmol)，并將反應(yīng)混合物在78℃下攪拌8h。在0℃下冷卻后，將反應(yīng)物用甲醇(0.5mL)猝滅，隨后用水(1mL)猝滅。向粗品反應(yīng)物中加入5％MeOH/DCM(30mL)，并過(guò)濾。真空濃縮濾液。將殘余物用二乙醚(20mL)研磨，得到呈棕色固體的1-(哌啶-4-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯，中間體243(200mg，99％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體247，4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)哌啶的程序?qū)?-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.500g，2.4mmol)溶解于CH2Cl2中，然后在0℃下滴加DMAP(0.302g，2.4mmol)和甲烷磺酰氯(0.284g，2.48mmol)。所得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6h，然后分配于H2O(70mL)和CH2Cl2(70mL)之間，用CH2Cl2(2x70mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑，得到呈白色固體的粗品4-((甲基磺?；?氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.520g，75.0％)，將其直接使用而不經(jīng)過(guò)任何進(jìn)一步純化。1H-NMR(400MHz；DMSO)δ：1.23(d，J＝9.38Hz，2H)1.54-1.69(m，4H)1.86-1.96(m，2H)2.35(s，1H)2.85-3.00(m，2H)3.18(d，J＝5.42Hz，5H)3.54-3.67(m，4H)4.83(s，1H)。將1H-1，2，3-三唑(0.098g，1.4mmol)溶解于DMF(5mL)中，加入NaH(0.037g，1.5mmol)，并在0℃下攪拌30min。加入4-((甲基磺酰基)氧基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.400g，1.4mmol)，并在150℃下攪拌1h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(50mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑，得到呈無(wú)色膠狀物的粗品4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.350g，97.0％)，將其直接使用而不經(jīng)過(guò)任何進(jìn)一步純化。LCMS(方法F)：m/z253(M+H)+(ES+)，在1.95min時(shí)，UV活性。將4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.500g，1.9mmol)溶解于1，4-二噁烷(10mL)中，隨后滴加HCl的1，4-二噁烷溶液(5mL，4M)。將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16h，真空去除溶劑并將殘余物通過(guò)用二乙醚(3x10mL)研磨純化，得到呈淺白色固體的4-(2H-1，2，3-三唑-2-基)哌啶鹽酸鹽，中間體247(0.290g，96.3％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體255，4-(5-甲基-1H-四唑-1-基)哌啶鹽酸鹽的程序?qū)?-甲基-2H-四唑(0.500g，5.9mmol)和4-溴哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.29g，4.8mmol)溶解于DMF中。加入K2CO3(1.64g，11.8mmol)，將所得到的反應(yīng)混合物在100℃下攪拌6h，然后分配于H2O(100mL)和乙酸乙酯(150mL)之間。將水層用乙酸乙酯(2x100mL)進(jìn)一步萃取，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)combi-flash柱色譜(正相，中性硅膠，60-120目，10至20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈白色固體的4-(5-甲基-1H-四唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.280g，34.6％)。1H-NMR(400MHz，DMSO)δ：1.43(s，9H)，1.73-1.88(m，2H)，2.01(br.s.，2H)，2.68-2.75(m，3H)，2.88-2.91(m，2H)，4.03-4.10(m，2H)，4.60-4.70(m，1H)。將4-(5-甲基-1H-四唑-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.280g，1.04mmol)溶解于1，4-二噁烷(10mL)中，隨后滴加HCl的1，4-二噁烷溶液(5mL，4M)。將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16h，真空去除溶劑并將殘余物通過(guò)用二乙醚(3x10mL)研磨純化，得到呈白色固體的4-(5-甲基-1H-四唑-1-基)哌啶鹽酸鹽，中間體255(0.170g，97.6％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體258，得到(R)-2-(4，4-二氟-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-基)丙-2-醇鹽酸鹽的程序向(R)-4，4-二氟吡咯烷-1，2-二羧酸1-(叔丁基)2-甲酯(500mg，1.89mmol)在二噁烷(15mL)中的溶液中，在0℃下緩慢加入HCl的二噁烷溶液(4M，15mL)，并在室溫下攪拌3h。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并將殘余物用己烷(10mL)研磨。將該殘余物用飽和NaHCO3水溶液(10mL)堿化，并濃縮。向粗品反應(yīng)物中加入CDM(30mL)，并過(guò)濾。將濾液真空濃縮，得到呈棕色液體的(R)-4，4-二氟吡咯烷-2-羧酸甲酯(2，320mg，84％)。將該粗品殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ：1.40-1.51(m，1H)，2.58-2.84(m，3H)，3.52-3.62(m，1H)，3.84(s，3H)，4.40-4.52(m，1H)。向(R)-4，4-二氟吡咯烷-2-羧酸甲酯(200mg，1.21mmol)和4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(240mg，1.21mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中，加入10％鈀/碳(300mg，50％潤(rùn)濕)，并將反應(yīng)混合物在H2(1個(gè)大氣壓)下、在室溫下攪拌24h。完成后，將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾，用甲醇充分洗滌并真空濃縮，得到呈無(wú)色液體的(R)-4-(4，4-二氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(400mg，95％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ：1.32-1.45(m，1H)，1.45(s，9H)，1.61-1.80(m，4H)，2.39-2.49(m，1H)，2.50-2.83(m，2H)，3.19(s，3H)，3.35-3.49(m，2H)，3.61-3.82(m，3H)，3.94-4.05(m，1H)。向(R)-4-(4，4-二氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(375mg，1.07mmol)的THF溶液(10mL)中，在0℃下緩慢加入MeMgBr(3M，1.07mL，3.21mmol)，并在室溫下攪拌4h。完成后，將反應(yīng)混合物用飽和NH4Cl水溶液(10mL)猝滅，并用乙酸乙酯(3x10mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將粗品殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度10％至30％乙酸乙酯的己烷溶液]純化，得到呈無(wú)色液體的(R)-4-(4，4-二氟-2-(2-羥基丙烷-2-基)吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(240mg，64％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ：1.1l(s，3H)，1.21(s，3H)，1.21-1.40(m，2H)，1.46(s，9H)，1.61-1.80(m，2H)，2.15-2.30(m，3H)，2.50-2.83(m，3H)，3.02-3.23(m，2H)，4.09-4.30(m，2H)。未觀察到O-H。向(R)-4-(4，4-二氟-2-(2-羥基丙烷-2-基)吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸酯(240mg，0.69mmol)在二噁烷(10mL)中的溶液中，在0℃下緩慢加入HCl的二噁烷溶液(4M，10mL)，并在室溫下攪拌2h。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并將殘余物用己烷(10mL)研磨。向粗品反應(yīng)物中加入CH2Cl2(30mL)，并過(guò)濾。將濾液真空濃縮，得到呈棕色液體的(R)-2-(4，4-二氟-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-基)丙-2-醇鹽酸鹽，中間體258(150mg，87％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。用于制備中間體282，(2R)-2-(二甲基氨甲?；?哌啶-1-羧酸叔丁酯的程序?qū)?R)-(叔丁氧基羰基)哌啶-2-羧酸(0.500g，2.18mmol)溶解于無(wú)水DCM(8mL)中，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀吕鋮s至0℃。加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳二亞胺HCl(0.628g，3.275mmol)、羥基苯并三唑(0.334g，2.183mmol)、N-甲基嗎啉(1.104g，10.915mmol)和二甲胺鹽酸鹽(0.356g，4.36mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)混合物用DCM(20mL)稀釋?zhuān)⒂蔑柡蚇aHCO3(水溶液)(20mL)以及飽和NaCl(水溶液)(20mL)洗滌。將有機(jī)層通過(guò)Biotage相分離器柱體，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g40-63μm，25mL/min，梯度0％至10％MeOH/DCM])純化，得到呈琥珀色油狀物的(2R)-2-(二甲基氨甲?；?哌啶-1-羧酸叔丁酯，中間體282，(0.241g，43％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中用于制備中間體295，(2R)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的程序?qū)?2R)-(+)-1-Boc-2-吡咯烷甲醇(0.300g，1.49mmol)溶解于DCM(8mL)中，并在氮?dú)庀吕鋮s至-78℃。向反應(yīng)混合物中滴加N，N-二乙基氨基三氟化硫(0.360g2.24mmol)，將反應(yīng)混合物在-78℃下、在氮?dú)庀聰嚢?h，然后升溫至室溫過(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入飽和NaHCO3(水溶液)(20mL)猝滅，并用DCM(2x15mL)萃取，合并有機(jī)層并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度0％至4％MeOH/DCM])純化，得到呈琥珀色油狀物的(2R)-2-(氟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，中間體295，(0.104g，34％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中用于制備中間體285，(4S)-1，3-噻唑烷-4-羧酸甲酯鹽酸鹽的程序?qū)?S)-3-Boc-噻唑烷-4-羧酸(1.00g，4.29mmol)溶解于無(wú)水DMF(4mL)中，加入碳酸鉀(2.372g，17.16mmol)和碘甲烷(0.730g，5.14mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。真空去除溶劑，并將殘余物溶解于EtOAc(40mL)中，并用水(3x20mL)以及飽和NaCl(水溶液)(20mL)洗滌，干燥(MgSO4)。真空去除溶劑，得到呈淡黃色油狀物的(4S)-1，3-噻唑烷-3，4-二羧酸3-叔丁基-4-甲酯，中間體285，(0.812g，77％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中用于制備中間體297，(2R)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的程序在-78℃下、在氮?dú)庀?，向草酰?0.566g，2.93mmol)的無(wú)水DCM(12mL)溶液中滴加DMSO(0.698g，8.94mmol)。將反應(yīng)混合物在-78℃下、在氮?dú)庀聰嚢?5min，然后滴加(2R)-(+)-1-Boc-2-吡咯烷甲醇(0.600g，2.98mmol)的無(wú)水DCM溶液(4mL)。將反應(yīng)混合物在-78℃下、在氮?dú)庀聰嚢?5min，然后加入Et3N(1.06g，11.92mmol)，并將反應(yīng)混合物在0℃下、在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(水溶液)(20mL)猝滅，并用DCM(2x20mL)萃取，合并有機(jī)層并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度0％至4％MeOH/DCM])純化，得到(2R)-2-甲?；量┩?1-羧酸叔丁酯(0.435g，73％)。將(2R)-2-甲?；量┩?1-羧酸叔丁酯(0.435g，2.19mmol)溶解于無(wú)水DCM(8mL)中，并在氮?dú)庀吕鋮s至-78℃。向反應(yīng)混合物中滴加N，N-二乙基氨基三氟化硫(0.528g，3.28mmol)，將反應(yīng)混合物在-78℃下、在氮?dú)庀聰嚢?h，然后升溫至室溫過(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入飽和NaHCO3(水溶液)(20mL)猝滅，并用DCM(2x15mL)萃取，合并有機(jī)層并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥，真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度0％至4％MeOH/DCM])純化，得到呈琥珀色油狀物的(2R)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯，中間體297，(0.217g，45％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中中間體的一般合成程序：途徑1用于經(jīng)由Suzuki反應(yīng)、氫化和Boc-脫保護(hù)制備哌啶的典型程序，如由中間體30，5-(哌啶-4-基)-1，2，4-噻二唑的制備所例證將2-5-溴-1，2，4-噻二唑(108mg，0.65mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.65mmol)和Cs2CO3(632mg，1.94mmol)溶解于二噁烷∶水(10∶2mL)。將反應(yīng)混合物脫氣30min，隨后添加PdCl2dppf(24mg，0.03mmol)，然后在90℃下攪拌16h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(80mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜純化(正相硅膠，目數(shù)：60-120，16％至20％EtOAc的己烷溶液)，得到4-(1，2，4-噻二唑-5-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(158mg，92.0％)，為灰白色固體。LCMS(方法F)：m/z212(M+H-56)+(ES+)，在2.37min時(shí)，UV活性將4-(1，2，4-噻二唑-5-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.74mmol)溶解于MeOH(15mL)，并加入10％Pd/C(20mg)。將反應(yīng)混合物用H2氣體吹掃，并在25℃下、在H2壓力下攪拌8h。將反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾，將殘余物用MeOH洗滌，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜純化(正相硅膠，目數(shù)：60-120，20％至24％EtOAc的己烷溶液)，得到4-(1，2，4-噻二唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(150mg，74.6％)，為深綠色膠狀物。LCMS(方法F)：m/z214(M+H)+(ES+)，在2.14min時(shí)，UV活性將4-(1，2，4-噻二唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.56mmol)溶解于1，4-二噁烷(5mL)，滴加HCl的二噁烷溶液(10mL，3.0M溶液)，并將反應(yīng)在30℃下攪拌16h。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)用乙醚(3x3mL)研磨純化，得到中間體30，5-(哌啶-4-基)-1，2，4-噻二唑(102mg，89.5％)，為深綠色膠狀物。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑2用于制備中間體34，4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)-1，2，3，6-四氫吡啶的程序?qū)?-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(2.0g，6.55mmol)、2-溴-1，5-二甲基-1H-咪唑(1.13g，6.45mmol)和CsF(2.9g，1.85mmol)溶解于DME∶MeOH(2∶1，30mL)。將反應(yīng)混合物脫氣5min，然后加入Pd(PPh3)4(73mg，0.064mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在100℃下攪拌5h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(100mL)和EtOAc(100mL)之間，用EtOAc(2x100mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜純化(正相硅膠，目數(shù)：60-120，13％至17％乙酸乙酯的己烷溶液)，得到4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(1g，55％)，為黃色膠狀物。LCMS(方法F)：m/z278(M+H)+(ES+)，在1.70min時(shí)，UV活性將4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(1.0g、3.61mmol)溶解于1，4-二噁烷(20mL)，隨后滴加HCl的1，4-二噁烷溶液(20mL，3M溶液)。將所得到的反應(yīng)混合物在30℃下攪拌16h，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)用乙醚(3x5mL)研磨純化，得到中間體34，4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)-1，2，3，6-四氫吡啶鹽酸鹽(0.5g，65％)，為白色固體。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑3用于經(jīng)由Suzuki反應(yīng)、氫化和Boc-脫保護(hù)制備哌啶的典型程序，如由中間體65，3-(哌啶-4-基)吡啶-2(1H)-酮鹽酸鹽的制備所例證將4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(2.5g，10.0mmol)、3-碘-2-甲氧基吡啶(8.21g，26.0mmol)和K2CO3(4.3g，31.8mmol)溶解于1-4二噁烷(10mL)和水(5mL)。將反應(yīng)混合物使用N2脫氣15min；加入Pd-132(0.376g，0.53mmol)，并將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌2h。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋?zhuān)肊tOAc(2x100mL)萃取，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，真空去除溶劑，并將粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化(正相，60-120目硅膠，0至20％EtOAc的己烷溶液)，得到2-甲氧基-3′，6′-二氫-[3，4′-雙吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯(2.0g，69.0％)，為灰白色固體。LCMS(方法F)：m/z291(M+H)+(ES+)，在2.39min時(shí)，UV活性將2-甲氧基-3′，6′-二氫-[3，4′-雙吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯(1.89g，6.51mmol)溶解于MeOH(10mL)，并加入10％Pd/C(0.2g)。將反應(yīng)混合物用H2氣體吹掃，并在室溫下在H2下攪拌12h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，并真空去除溶劑，得到4-(2-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.91g，47.9％)，為無(wú)色膠狀物。LCMS(方法F)：m/z293(M+H)+(ES+)，在2.50min時(shí)，UV活性將4-(2-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.200g，0.6mmol)溶解于1，4-二噁烷(4.0mL)，加入水(2.0mL)和濃HCl，將反應(yīng)混合物在100℃下攪拌10h。真空去除溶劑，并將殘余物用丙酮(3x10mL)研磨，得到中間體65，3-(哌啶-4-基)吡啶-2(1H)-酮鹽酸鹽(0.100g，82.6％)，為棕色固體。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑4用于經(jīng)由Suzuki反應(yīng)、氫化和Boc-脫保護(hù)制備哌啶的典型程序，如由中間體66，2-甲氧基-3-(哌啶-4-基)吡啶鹽酸鹽的制備所例證將4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜環(huán)戊硼烷-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(2.5g，10.0mmol)、3-碘-2-甲氧基吡啶(8.21g，26.0mmol)和K2CO3(4.3g，31.8mmol)溶解于1-4二噁烷(10mL)和水(5mL)。將反應(yīng)混合物使用N2脫氣15min；加入Pd-132(0.376g，0.53mmol)，并將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌2h。將反應(yīng)混合物用水(50mL)稀釋?zhuān)肊tOAc(2x100mL)萃取，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，真空去除溶劑，并將粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜純化(正相，60-120目硅膠，0至20％EtOAc的己烷溶液)，得到2-甲氧基-3′，6′-二氫-[3，4′-雙吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯(2.0g，69.0％)，為灰白色固體。LCMS(方法F)：m/z291(M+H)+(ES+)，在2.39min時(shí)，UV活性將2-甲氧基-3′，6′-二氫-[3，4′-雙吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯(1.89g，6.51mmol)溶解于MeOH(10mL)，并加入10％Pd/C(0.2g)。將反應(yīng)混合物用H2氣體吹掃，并在室溫下在H2下攪拌12h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，并真空去除溶劑，得到4-(2-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.91g，47.9％)，為無(wú)色膠狀物。LCMS(方法F)：m/z293(M+H)+(ES+)，在2.50min時(shí)，UV活性將4-(2-甲氧基吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.8g，2.7mmol)在HCl的1，4-二噁烷溶液(4.0mL，4.0M溶液)中、在室溫下攪拌10h。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)丙酮(3x10mL)研磨，得到中間體66，2-甲氧基-3-(哌啶-4-基)吡啶鹽酸鹽(0.135g，25.7％)，為白色固體。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑5用于經(jīng)由氫化制備哌啶的典型程序，如由中間體69，3，4′-雙哌啶-2-酮的制備所例證將3-(哌啶-4-基)-1，6-二氫吡啶-2-醇(0.5g，2.8mmol)溶解于MeOH(10mL)，并加入PtO2(0.2g)。將反應(yīng)混合物用H2氣體吹掃，并在室溫下在H2氣體下攪拌12h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，并真空去除溶劑，得到中間體69，3，4′-雙哌啶-2-酮(0.4g，78.3％)，為棕色膠狀物。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑6用于經(jīng)由還原胺化和Boc-脫保護(hù)制備吡咯烷的典型程序，如由中間體127，2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體混合物的制備所例證將(S)-2-(哌啶-4-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.24g，6.29mmol)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(1.60g，6.29mmol)在室溫下溶解于DMF(15mL)中，并加入醋酸(0.54mL，9.44mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。然后加入STAB(2.67g，12.6mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀?、在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil340g，40-63μm，80mL/min，梯度0％至10％7NNH3的MeOH溶液在DCM中的溶液])純化，得到呈黃色固體的2-{4-[(2S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的異構(gòu)體的不可分離的混合物(2.46g，90％)。LCMS(方法D)：m/z436(M+H)+(ES+)，在2.36min時(shí)，UV非活性。將2-{4-[(2S)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(0.6g，1.4mmol)溶解于1，4-二噁烷(10mL)中，并用HCl的1，4-二噁烷溶液(4M，15mL，60mmol)逐滴處理。將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16h，去除溶劑，并將殘余物通過(guò)用二乙醚研磨純化(3x10mL)，得到呈固體的2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物，中間體127(0.45g，97％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑7用于經(jīng)由還原胺化、Boc-脫保護(hù)、脲形成和氫解制備哌啶的典型程序，如由中間體137，1-(哌啶-4-基)四氫嘧啶-2(1H)-酮的制備所例證將4-氧代哌啶-1-羧酸芐酯(0.932g，4.00mmol)和(3-氨基丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.766g，4.4mmol)在CH2Cl2(20mL)中、在室溫下混合，加入AcOH(0.68mL，12.0mmol)并攪拌3h。加入STAB(2.59g，12.0mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀隆⒃谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(40mL)猝滅，用CH2Cl2(4x45mL)萃取，并將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥并過(guò)濾。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，50mL/min，梯度0％至10％MeOH的DCM溶液])純化，得到呈無(wú)色油狀物的4-({3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}氨基)哌啶-1-羧酸芐酯(1.54g，98％)。LCMS(方法B)：m/z392(M+H)+(ES+)，在1.73min時(shí)，UV活性。將4-({3-[(叔丁氧基羰基)氨基]丙基}氨基)哌啶-1-羧酸芐酯(1.54g，3.92mmol)溶解于CH2Cl2(19.5mL)中，加入4M氯化氫的二噁烷溶液(4.90mL，19.6mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，將殘余物用CH2Cl2(2x20mL)洗滌并干燥，得到呈灰白色固體的粗品4-[(3-氨基丙基)氨基]哌啶-1-羧酸芐酯二鹽酸鹽(1.41g，99％)。LCMS(方法B)：m/z292(M+H)+(ES+)，在1.46min時(shí)，UV活性。將粗品4-[(3-氨基丙基)氨基]哌啶-1-羧酸芐酯二鹽酸鹽(1.41g，3.88mmol)，CDI(0.778g，4.80mmol)和吡啶(0.24mL，12.0mmol)溶解于THF(39mL)中，將混合物加熱至回流并保持18h。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜純化[BiotageSNAP柱體KP-sil50g，40-63μm，50mL/min，梯度0％至10％MeOH的DCM溶液])，得到呈無(wú)色固體的4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)哌啶-1-羧酸芐酯(0.82g，65％)。LCMS(方法B)：m/z318(M+H)+(ES+)，在2.62min時(shí)，UV活性。將4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)哌啶-1-羧酸芐酯(0.82g，2.59mmol)溶解于EtOH(100mL)中，并使用H-Cube裝置，在50℃、40巴H2下、在1mL/min下通過(guò)10％Pd/C柱體。將洗脫的溶液真空濃縮，得到呈無(wú)色固體的中間體137，1-(哌啶-4-基)四氫嘧啶-2(1H)-酮(0.470g，99％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑8用于經(jīng)由還原胺化和Boc-脫保護(hù)制備哌啶的典型程序，如由中間體139，(2S)-N-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-甲酰胺的制備所例證將(S)-N-甲基吡咯烷-2-甲酰胺(0.5g、3.8mmol)、NEt3(1.5mL，11.0mmol)、4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.38g、3.9mmol)和ZnCl2(0.15g，4.5mmol)在氮?dú)庀氯芙庥贛eOH(15mL)中，并在50-60℃下攪拌1h。在0-10℃下分批加入NaCNBH3(0.16g，0.67mmol)，并將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物分配于EtOAc(2x100mL)和水(50mL)之間，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾，真空去除溶劑，并將粗產(chǎn)物通過(guò)柱色譜(正相硅膠，0至20％EtOAc的己烷溶液)純化，得到呈淡棕色液體的(S)-4-(2-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.3g，25.0％)。TLC觀察：RF值：0.5(EA∶Hex，5∶5)。LCMS(方法G)：m/z312(M+H)+(ES+)，在1.61min時(shí)，UV非活性。將(S)-4-(2-(甲基氨甲?；?吡咯烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.3g，0.96mmol)在HCl的1，4-二噁烷(5.00mL)溶液中、在室溫下攪拌10小時(shí)。將反應(yīng)混合物在高真空下濃縮，并通過(guò)丙酮(3x10mL)研磨，得到呈無(wú)色固體的中間體139，(S)-N-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-甲酰胺二鹽酸鹽(0.135g，67.16％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑9用于經(jīng)由還原烷基化和脫保護(hù)制備在4-位具有N-連接的環(huán)胺的哌啶的一般程序，如由中間體181，4-[2-(1H-吡唑-5-基)吡咯烷-1-基]哌啶三氟乙酸鹽的制備所例證將5-(吡咯烷-2-基)-1H-吡唑二鹽酸鹽(0.105g，0.50mmol)溶解于DMF(5mL)中。向溶液中依次加入DIPEA(0.435mL，2.5mmol)、AcOH(0.043mL，0.75mmol)、4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.100g，0.50mmol)和STAB(0.318g，1.50mmol)。將混合物在室溫下攪拌2天，然后濃縮以去除DMF。將殘余物分配于飽和NaHCO3水溶液和DCM(x2)之間，并將有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈油狀物的粗品4-[2-(1H-吡唑-5-基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.271g，＞100％)。LCMS(方法C)：m/z321(M+H)+(ES+)，在1.18min時(shí)，UV活性將粗品4-[2-(1H-吡唑-5-基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.271g，假設(shè)0.50mmol)在DCM(3mL)和TFA(3mL)中的溶液在室溫下攪拌110min，然后用甲苯稀釋并濃縮。將殘余物與甲苯共沸，得到呈油狀物的粗品中間體181，4-[2-(1H-吡唑-5-基)吡咯烷-1-基]哌啶三氟乙酸鹽(0.598g，＞100％)。立即使用。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑10用于經(jīng)由銅催化偶合到吡啶隨后氫化制備含有吡咯烷酮或噁二唑酮的哌啶的一般程序，如由中間體184，5-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽的制備所例證將5-甲基吡咯烷-2-酮(0.050g，0.50mmol)、4-碘吡啶(0.103g，0.50mmol)、(反式)-N，N′-二甲基環(huán)己烷-1，2-二胺(0.016mL，0.10mmol)、CuI(0.019g，0.10mmol)和K2CO3(0.209g，1.5mmol)在二噁烷(2mL)中的混合物密封于氮?dú)鉀_洗的玻璃管中，并在150℃下加熱攪拌過(guò)夜。將冷卻的反應(yīng)混合物在快速硅膠(5mL)上濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，0至5％溶劑A的DCM溶液，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液)純化，得到呈油狀物的5-甲基-1-(吡啶-4-基)吡咯烷-2-酮(0.088g，99％)。LCMS(方法C)：m/z177(M+H)+(ES+)，在0.69min時(shí)，UV活性將5-甲基-1-(吡啶-4-基)吡咯烷-2-酮(0.080g，0.45mmol)溶解于AcOH(8mL)中，并使用H-Cube，通過(guò)10％Pt/C催化劑在80巴壓力和100℃下、在1mL/min流速下氫化。然后將溶液濃縮，并將殘余物與甲苯(x2)共沸，得到呈油狀物的粗品中間體184，5-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽(0.166g，＞100％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑11用于經(jīng)由銅催化偶合到吡啶隨后氫化制備哌啶的典型程序，如由中間體199，(5R)-5-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽和中間體200，(5R)-5-乙基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽的制備所例證中間體199，(5R)-5-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽：向(5S)-5-(羥甲基)吡咯烷-2-酮(2.0g，17mmol)和4-甲基苯磺酰氯(5.3g，28mmol)在DCM(24mL)中的溶液中加入三乙胺(12mL，86mmol)。將所得到的混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后濃縮。將殘余物溶解于DCM中并用1MHCl水溶液(x3)和鹽水(x1)洗滌，然后通過(guò)相分離器并濃縮，得到棕色固體。將固體由DCM/異己烷重結(jié)晶，得到棕褐色固體，過(guò)濾去除所述固體，用DCM/異己烷混合物洗滌并在空氣中干燥，得到4-甲基苯磺酸[(2S)-5-氧代吡咯烷-2-基]甲酯(3.13g，67％)。LCMS(方法C)：m/z270(M+H)+(ES+)，在0.97min時(shí)，UV活性將4-甲基苯磺酸[(2S)-5-氧代吡咯烷-2-基]甲酯(0.50g，1.9mmol)和溴化鋰(0.484g，5.6mmol)在丙酮(5mL)中的混合物在N2下回流加熱過(guò)夜，然后使其冷卻。濃縮去除溶劑，將殘余物分配在DCM和H2O之間，并分離各相。用DCM(x3)萃取水相，然后將有機(jī)相通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈膠狀物的(5S)-5-(溴甲基)吡咯烷-2-酮(0.284g，86％)。LCMS(方法C)：m/z178/180(M+H)+(ES+)，在0.37min時(shí)，弱UV活性使用H-Cube，通過(guò)10％Pd/C催化劑在50巴壓力下和室溫下、在1mL/min流速下，將(5S)-5-(溴甲基)吡咯烷-2-酮(0.284g，1.6mmol)在三乙胺(0.267mL，1.9mmol)和乙醇(32mL)中的溶液氫化。將溶液濃縮，得到呈粘性固體的粗品(5R)-5-甲基吡咯烷-2-酮(0.445g，＞100％)。LCMS(方法C)：m/z100(M+H)+(ES+)，在0.34min時(shí)，弱UV活性將粗品(5R)-5-甲基吡咯烷-2-酮(0.445g，假定1.5mmol)根據(jù)途徑10反應(yīng)(與中間體183偶合)，得到呈油狀物的粗品中間體199，(5R)-5-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽(0.125g，46％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。中間體200，(5R)-5-乙基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽：向在冰水中、在N2下預(yù)冷卻的碘化亞銅(1.06g，5.6mmol)在THF中的懸浮液(6mL)中，在攪拌下迅速加入甲基鋰(1.5M的醚溶液，7.4mL，11mmol)。將淺褐色溶液在冰水中攪拌45min，然后冷卻至-20℃。經(jīng)2min分批加入4-甲基苯磺酸[(2S)-5-氧代吡咯烷-2-基]甲酯(0.50g，1.9mmol)的THF溶液(6mL)，并將所得到的溶液在-20℃下攪拌45min，然后在冰水中過(guò)夜，使冷卻浴緩慢失效。將混合物用飽和NH4Cl水溶液(15mL)猝滅，并攪拌幾小時(shí)。將兩相混合物用醚(x3)萃取，將有機(jī)相用鹽水洗滌，通過(guò)相分離器并濃縮，得到呈油狀物的粗品(5R)-5-乙基吡咯烷-2-酮(0.124g，59％)。LCMS(方法C)：m/z114(M+H)+(ES+)，在0.50min時(shí)，弱UV活性將粗品(5R)-5-乙基吡咯烷-2-酮(0.124g，1.10mmol)根據(jù)途徑10反應(yīng)(與中間體183偶合)，得到呈膠狀物的粗品中間體200，(5R)-5-乙基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-酮乙酸鹽(0.156g，72％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑12用于經(jīng)由氨基甲酸酯形成、銅催化偶合到吡啶隨后氫化制備哌啶的典型程序，如由中間體205，(4R)-4-甲基-3-(哌啶-4-基)-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸鹽的制備所例證向在冰水中預(yù)冷卻的(2R)-2-氨基丙-1-醇(0.156mL，2.0mmol)和三乙胺(0.56mL，4.0mmol)的DCM溶液(5mL)中，經(jīng)1h分批加入三光氣(0.297g，1.0mmol)的DCM溶液(5mL)。將混合物在冰水中再攪拌2h，然后加入醚(6mL)。將粘稠懸浮液通過(guò)燒結(jié)物(sinter)過(guò)濾，用更多醚(6mL)洗滌固體。將濾液在快速硅膠(5mL)上濃縮，并將所得到的粉末通過(guò)柱色譜純化(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，100％EtOAc)，得到呈固體的(4R)-4-甲基-1，3-噁唑烷-2-酮(192mg，95％)。LCMS(方法C)：m/z102(M+H)+(ES+)，在0.14min時(shí)，UV非活性將(4R)-4-甲基-1，3-噁唑烷-2-酮(0.188g，1.9mmol)根據(jù)途徑10反應(yīng)(與中間體183偶合)，得到呈固體的粗品中間體205，(4R)-4-甲基-3-(哌啶-4-基)-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸鹽(0.343g，100％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑13用于經(jīng)由還原胺化制備哌啶的典型程序，如由中間體159，4-[(2R)-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯的制備所例證將D-脯氨酸甲酯鹽酸鹽(0.200g，1.208mmol)和1-Boc-4-哌啶酮(0.24g，1.208mmol)在室溫下溶解于DMF(2mL)中，并加入二異丙基乙胺(0.209mL，1.208mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。然后加入STAB(0.512g，2.416mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀?、在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，并將殘余物分配于H2O(15mL)和EtOAc(25mL)之間，用EtOAc(2×25mL)萃取水層，合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥并真空去除溶劑，得到呈白色固體的4-[(2R)-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯，中間體159(393mg，＞99％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中途徑14用于經(jīng)由還原胺化制備哌啶的典型程序，如由中間體271，3，3-二氟-1，4′-雙哌啶-1′-羧酸叔丁酯的制備所例證將3，3-二氟哌啶.HCl(0.30g，1.90mmol)和1-Boc-4-哌啶酮(0.379g，1.90mmol)在室溫下溶解于DMF(8mL)中，并加入二異丙基乙胺(0.246g，1.90mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃下、在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后加入冰醋酸(0.114g，1.90mmol)，然后加入STAB(1.01g，4.76mmol)，并將反應(yīng)混合物在50℃下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。向冷卻的反應(yīng)混合物中加入水(2mL)，并真空去除溶劑。將殘余物用飽和NaHCO3(水溶液)(10mL)稀釋?zhuān)⒂肈CM(2x10mL)萃取。將合并的有機(jī)層通過(guò)Biotage相分離器柱體以干燥，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜純化(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g40-63μm，25mL/min，梯度0％至10％MeOH/DCM])，得到呈琥珀色油狀物的3，3-二氟-1，4′-雙哌啶-1′-羧酸叔丁酯，中間體271，(0.347g，60％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中途徑15用于經(jīng)由四唑形成、隨后烷基化制備哌啶的典型程序，如由中間體195，4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)哌啶鹽酸鹽的制備所例證將4-氰基哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.1g，10mmol)、疊氮化鈉(1.95g，30mmol)和氯化銨(1.6g，30mmol)溶解于DMF(20mL)中。將反應(yīng)混合物在100℃下攪拌24h，然后用水(250mL)稀釋并用EtOAc(3x100mL)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過(guò)柱色譜(正相，中性硅膠，60-120目，0至5％MeoH的DCM溶液)純化所述粗產(chǎn)物，得到呈固體的4-(1H-四唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.25g，50％)。LCMS(方法F)：m/z198(M-tBu+H)+(ES+)，在1.69min時(shí)，UV非活性將4-(1H-四唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.2g，4.7mmol)、碘甲烷(2.0g，14mmol)和Cs2CO3(9.6g，28mmol)溶解于無(wú)水DMF(36mL)中。將反應(yīng)混合物在100℃下攪拌2h，然后用水(250mL)稀釋并用EtOAc(3x100mL)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)并濃縮，得到粗產(chǎn)物，通過(guò)柱色譜(正相，中性硅膠，60-120目，0至35％EtOAc的己烷溶液，然后45至60％EtOAc的己烷溶液純化所述粗產(chǎn)物，以分離兩種區(qū)域異構(gòu)體。所需的區(qū)域異構(gòu)體，4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.160g，13％)第二個(gè)從柱上洗脫，并獲得其固體形式。LCMS(方法F)：m/z212(M-tBu+H)+(ES+)，在1.79min時(shí)，UV非活性將4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.160g，0.60mmol)溶解于二噁烷(3mL)中。在0℃下加入HCl的二噁烷溶液(4M，3mL，12mmol)，并將混合物在室溫下攪拌5h。去除溶劑，并將混合物用二乙醚(5mL)研磨，得到呈固體的4-(1-甲基-1H-四唑-5-基)哌啶鹽酸鹽，中間體195(0.130g，＞100％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑16用于經(jīng)由還原胺化、酰胺形成和Boc-脫保護(hù)制備哌啶的典型程序，如由中間體223，(2R)-N-甲基-1，4′-雙哌啶-2-甲酰胺的制備所例證向R-哌啶酸(1g，7.75mmol)和4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(2.31g，11.6mmol)的MeOH溶液(40mL)中，加入10％Pd/炭(1g，50％潤(rùn)濕)，并將反應(yīng)混合物在室溫下、在H2(1個(gè)大氣壓)下攪拌48h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土床層過(guò)濾，并真空蒸發(fā)濾液。將該粗品殘余物在DCM(50mL)中研磨，得到呈白色固體的(R)-1′-(叔丁氧基羰基)-[1，4′-雙哌啶]-2-羧酸(1.2g，50％)。將該粗品殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。1H-NMR(400MHz；CDCl3)δ：1.46(s，9H)，1.50-1.59(m，1H)，1.75-1.91(m，4H)，1.93-2.05(m，2H)，2.10-2.19(m，2H)，2.35-2.41(m，1H)，2.51-2.69(m，3H)，3.41-3.49(m，1H)，3.55-3.61(m，1H)，3.70-3.79(m，1H)，4.25-4.36(m，2H)。向(R)-1′-(叔丁氧基羰基)-[1，4′-雙哌啶]-2-羧酸(1.0g，3.20mmol)和MeNH2(2M的THF溶液，3.2mL，6.41mmol)在DCM(20mL)中的溶液中，在0℃下加入DIPEA(1.75mL，9.60mmol)。攪拌10min后，加入1-丙烷膦酸酐[50％的乙酸乙酯溶液(4.07mL，6.41mmol)]，并在室溫下攪拌3h。完成后，將反應(yīng)混合物用NaHCO3飽和水溶液猝滅，并用DCM(3x30mL)萃取。合并有機(jī)層并用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并真空濃縮，得到呈無(wú)色膠狀液體的(R)-2-(甲基氨甲?；?-[1，4′-雙哌啶]-1′-羧酸叔丁酯(4，1g，97％)。將該粗品殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。1H-NMR(400MHz，DMSO)δ：1.46(s，9H)，1.61-1.80(m，4H)，1.91-2.08(m，4H)，2.25-2.33(m，2H)，2.61-2.71(m，4H)，2.82(d，J＝4.8Hz，3H)，3.32-3.45(m，2H)，4.25-4.36(m，2H)，6.85(br.s.，1H)。向(R)-2-(甲基氨甲?；?-[1，4′-雙哌啶]-1′-羧酸叔丁酯(700mg，2.15mmol)在二噁烷(10mL)中的溶液中，在0℃下緩慢加入HCl的二噁烷溶液(4M，10mL)，并在室溫下攪拌3h。真空濃縮反應(yīng)混合物。將該反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3水溶液(10mL)堿化，并濃縮。向粗品反應(yīng)物中加入5％MeOH/DCM(30mL)，攪拌10min，并過(guò)濾。將濾液真空濃縮，得到呈棕色粘性液體的中間體223，(R)-N-甲基-[1，4′-雙哌啶]-2-甲酰胺(400mg，83％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑17用于經(jīng)由桑德邁爾反應(yīng)(sandmeyerreaction)制備碘吡唑的典型程序，如由中間體250，4-乙基-5-碘-1-甲基-1H-吡唑的制備所例證將1-乙基4-甲基-1H吡唑胺(0.5g，3.932mmol)在0-5℃下、在氮?dú)鈿夥障氯芙庥诙饧淄?9.0mL)中，隨后滴加亞硝酸異戊酯，并將混合物在80℃下攪拌2h，然后在室溫下攪拌2h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(100mL)和EtOAc(250mL)之間，用EtOAc(2x250mL)進(jìn)一步萃取水層，將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，中性硅膠，60-120目，30至50％乙酸乙酯的己烷溶液)純化，得到呈淡黃色膠狀物的4-乙基-5-碘-1-甲基-1H-吡唑中間體250(0.5g，53.23％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中。途徑18用于經(jīng)由脫保護(hù)、氨基甲酸酯形成隨后還原胺化制備活化的氨基甲酸酯的典型程序，如由中間體中間體302，(2R)-2-(二氟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的制備所例證將6-Boc-2-氧代-6-氮雜-螺[3.4]辛烷(4.00g，0.017mol)溶解于4MHCl的二噁烷溶液(25mL)中，并在室溫下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。真空去除溶劑，得到灰白色固體，將所述固體懸浮于DCM(40mL)中，將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀吕鋮s至0℃。加入Et3N(3.60g，0.036mol)和氯甲酸4-硝基苯酯(3.767g，0.0187mol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(水溶液)(30mL)猝滅，并用DCM(3x20mL)萃取。合并有機(jī)層，并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil50g40-63μm，50mL/min，梯度0％至6％MeOH/DCM])純化，得到呈黃色固體的2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸4-硝基苯酯(1.40g，27％)。LCMS(方法C)：m/z291(M+H)+(ES+)在1.167min時(shí)將2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸4-硝基苯酯(0.700g，2.41mmol)溶解于DMF(15mL)中。加入4-(1H-吡唑-1-基)哌啶(0.365g，2.41mmol)、冰醋酸(0.144g，2.41mmol)和STAB(1.535g，7.24mmol)，將反應(yīng)混合物在50℃下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。將反應(yīng)混合物用水(2mL)猝滅，并真空去除溶劑。將殘余物分配于DCM(20mL)以及飽和NaHCO3(水溶液)(20mL)之間，用DCM(2x20mL)萃取水層，合并有機(jī)層并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g40-63μm，25mL/min，梯度0％至10％MeOH/DCM])純化，得到2-[4-(1H-吡唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸4-硝基苯酯，中間體302，(0.738g，72％)。標(biāo)題化合物的數(shù)據(jù)在表2中實(shí)施例的一般合成程序：途徑a用于經(jīng)由三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例1-1，2-[4-(1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將4-(1H-咪唑-2-基)哌啶二鹽酸鹽(1.43g，7.1mmol)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(1.60g，7.1mmol)在室溫下溶解于DCM(60mL)中，并加入異丙醇鈦(2.31mL，7.81mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至-5℃，然后加入STAB(3.01g，14.2mmol)和醋酸(350μL，4.26mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜，同時(shí)升溫至室溫。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(10mL)猝滅，用DCM稀釋?zhuān)缓笸ㄟ^(guò)硅藻土墊過(guò)濾。分離各層，并用DCM萃取水層。將合并的DCM層用鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil50g，40-63μm，50mL/min，梯度1％至10％MeOH的DCM溶液，含0.5％NEt3])純化，得到呈白色固體的2-[4-(1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的不可分離的混合物(2.645g，98.3％)。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NC18柱，150x21mm，用28至38％MeCN/H2O在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在218nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色固體的異構(gòu)體12-[4-(1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.338g，14％)和呈無(wú)色固體的異構(gòu)體22-[4-(1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.369g，16％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑b用于經(jīng)由氰基硼氫化鈉和氯化鋅還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例1-3，2-(4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶(100mg，0.46mmol)、2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(89mg，0.46mmol)、ZnCl2(2mg，0.01mmol)和三乙胺(0.3mL，2.28mmol)溶解于MeOH(5mL)中，并將反應(yīng)混合物在50℃下攪拌2h。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并分批加入NaBH3CN(114mg，1.83mmol)。將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌7h，并真空去除溶劑。將殘余物分配于H2O(50mL)和EtOAc(35mL)之間，用EtOAc(2×35mL)萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相(X-BRIDGE，C-18，250×19mm，5um，18mL/min，梯度28.0％(經(jīng)40.0min)，100％(經(jīng)3.0min)然后28.0％(經(jīng)5.0min)，0.1％NH3的MeCN/水溶液]純化，得到呈黃色固體的2-(4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例1-3異構(gòu)體1，(15mg，8.24％)，以及呈黃色固體的2-(4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例1-3異構(gòu)體2，(12mg，6.6％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑c用于三氟甲基取代的咪唑轉(zhuǎn)化為氰基取代的咪唑的典型程序，如由實(shí)施例1-4，2-[4-(4-氰基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-(4-(4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(200mg，0.50mmol)溶解于NH3溶液(20mL)中，并在60℃下攪拌8h。真空去除溶劑，并將殘余物分配于H2O(60mL)和EtOAc(40mL)之間，用EtOAc(2×40mL)萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)。真空去除溶劑，并將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相(DURASHELL，C-18，250×21.2mm，5um，22mL/min，梯度25.0％(經(jīng)30.0min)，100％(經(jīng)3.0min)然后25.0％(經(jīng)7.0min)，0.1％NH3的MeCN/水溶液]純化，得到呈黃色固體的2-(4-(4-氰基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-4異構(gòu)體1，(26mg，14.6％)，以及呈黃色固體的2-[4-(4-氰基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-4異構(gòu)體2，(25mg，14.06％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑d用于經(jīng)由三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化、Boc-脫保護(hù)和乙基氨基甲酸酯形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例1-7，2-[4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將4-(1-甲基咪唑-2-基)哌啶鹽酸鹽(0.244g，1.21mmol)和6-Boc-2-氧代-6-氮雜螺[3，4]辛烷(0.273g，1.21mmol)在室溫下溶解于DCM(10mL)中，并加入異丙醇鈦(0.4mL，2.42mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至-5℃，然后加入STAB(0.513g，2.42mmol)和醋酸(27μL，480μmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜，同時(shí)升溫至室溫。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(10mL)猝滅，用DCM稀釋?zhuān)缓笸ㄟ^(guò)硅藻土墊過(guò)濾。分離各層，并用DCM萃取水層。將合并的DCM層用鹽水洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，50mL/min，梯度1％至10％MeOH的DCM溶液])純化，得到呈黃色膠狀物的2-[4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯的異構(gòu)體的不可分離的混合物(0.330g，72％)。LCMS(方法A)：m/z374(M+H)+(ES+)，在1.68min時(shí)，UV非活性。將2-[4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(0.326g，0.87mmol)溶解于4M氯化氫的二噁烷溶液(1.2mL，5.2mmol)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18h。然后真空去除揮發(fā)物，并將殘余物溶解于DCM(17mL)和三乙胺(0.49mL，3.49mmol)中。滴加氯甲酸乙酯(125μL，1.31mmol)，并將溶液在室溫下攪拌18h。然后將混合物傾入NaHCO3(水溶液)(75mL)和DCM(75mL)，萃取(2x75mL)，并將合并的DCM萃取物用鹽水(20mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。濃縮后，將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，50mL/min，梯度1％至10％MeOH的DCM溶液])純化，得到呈棕色油物呈非對(duì)映體的混合物的2-[4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.25g，83％)。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NC18柱，150x21mm，用38至48％MeCN/H2O在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在218nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色油狀物的2-[4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-7異構(gòu)體1，(0.044g，15％)，以及呈無(wú)色油狀物的2-[4-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-7異構(gòu)體2(0.031g，10％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑e用于含有3，6-二氫吡啶-1(2H)-基的化合物的氫化得到含有哌啶基的化合物的典型程序，如由實(shí)施例1-9，2-[4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯的制備所例證，將2-(4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)-3，6-二氫吡啶-1(2H)-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯(102mg，0.29mmol)[經(jīng)由途徑d以及中間體3和34合成]溶解于MeOH(10mL)中，并加入10％Pd/C(25mg)。將反應(yīng)混合物用H2氣體吹掃，然后在25℃下、在H2氣球下攪拌20h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾并用MeOH洗滌，真空去除濾液中的溶劑，并將殘余物通過(guò)制備型HPLC(XBridge，C-18，150×30mm，5um，40mL/min，梯度30％(經(jīng)12.00min)，100％(經(jīng)14.00min)，然后30％(經(jīng)14.01min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈無(wú)色膠狀物的2-[4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯，實(shí)施例1-9異構(gòu)體1，(5.6mg，5.8％)，以及呈無(wú)色膠狀物的2-[4-(1，5-二甲基-1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯，實(shí)施例1-9異構(gòu)體2，(11.6mg，11.7％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑f用于經(jīng)由三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化、Boc-脫保護(hù)和乙基氨基甲酸酯形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例1-36，2-[4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶(0.152g，1.0mmol)和6-Boc-2-氧代-6-氮雜螺[3，4]辛烷(0.222g，1.05mmol)在N2下、在室溫下溶解于DCM(10mL)中，并加入醋酸(0.13mL，2.22mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h，加入STAB(0.53g，2.50mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(30mL)猝滅，用DCM(4x25mL)萃取，并將合并的DCM層通過(guò)Biotage相分離器。真空去除溶劑，得到2-[4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯的非對(duì)映體的粗品混合物，將其使用而不經(jīng)過(guò)純化。LCMS(方法C)：m/z362(M+H)+(ES+)，在1.58min和1.61min時(shí)，UV非活性。將粗品2-[4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸叔丁酯(假設(shè)1.0mmol)溶解于4M氯化氫的二噁烷溶液(1.2mL，5.2mmol)中，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除揮發(fā)物，將殘余物溶解于DCM(10mL)中，并加入NEt3(0.70mL，5.0mmol)。滴加氯甲酸乙酯(0.14mL，1.5mmol)，并將溶液在室溫下攪拌過(guò)夜。將混合物傾入NaHCO3(水溶液)(40mL)，用DCM(4x40mL)萃取，并將合并的DCM層通過(guò)Biotage相分離器。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，40mL/min，梯度0％至10％MeOH的DCM溶液)純化，得到2-[4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的不可分離的混合物。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用25至55％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色固體的2-[4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-36異構(gòu)體1，(0.026g，8％)，以及呈無(wú)色固體的2-[4-(1H-1，2，4-三唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-36異構(gòu)體2，(0.026g，8％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑g用于使用氫化鈉的DMF溶液進(jìn)行的含咪唑化合物的烷基化的典型程序，如由實(shí)施例1-51，2-{4-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-[4-(1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(150mg，0.45mmol)溶解于無(wú)水DMF(3mL)中，用氫化鈉在礦物油中的60％懸浮液(27mg，0.68mmol)處理，并在室溫下攪拌2h。加入2-溴乙基甲醚(0.051mL，0.54mmol)，并將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將混合物濃縮以去除DMF。將殘余物溶解于MeOH中，并在快速硅膠(5mL)上濃縮。所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，0至20％溶劑A的DCM溶液，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液)純化，得到2-{4-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(159mg，90％)。將該混合物溶解于MeOH中，并將溶液通過(guò)制備型反相HPLC純化，使用PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用15至45％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到2-{4-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-51異構(gòu)體1，(54mg，31％)，以及2-{4-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-51異構(gòu)體2，(27mg，15％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑h用于使用碳酸鉀的DMF溶液進(jìn)行的含咪唑化合物的烷基化的典型程序，如由實(shí)施例1-52，2-{4-[1-(氰甲基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-[4-(1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(150mg，0.45mmol)溶解于無(wú)水DMF(3mL)中。加入碳酸鉀(187mg，1.4mmol)和溴乙腈(0.114mL，1.6mmol)，并將混合物在室溫下攪拌過(guò)兩夜。將混合物濃縮以去除DMF。將殘余物溶解于MeOH中，并在快速硅膠(5mL)上濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，0至20％溶劑A的DCM溶液，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液)純化，得到2-{4-[1-(氰甲基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(91mg，54％)。將該混合物溶解于MeOH中，并將溶液通過(guò)制備型反相HPLC純化，使用PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用15至45％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到2-{4-[1-(氰甲基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-52異構(gòu)體1，(8mg，5％)，以及2-{4-[1-(氰甲基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-52異構(gòu)體2，(5mg，3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑i用于制備實(shí)施例1-53，(2-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-1H-咪唑-1-基)乙酸和實(shí)施例1-54，2-(4-{1-[2-(甲氨基)-2-氧代乙基]-1H-咪唑-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的程序使用途徑g的方法，將2-[4-(1H-咪唑-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(500mg，1.5mmol)與60％氫化鈉在礦物油中的分散體(90mg，2.3mmol)以及溴乙酸甲酯(0.171mL，1.8mmol)的DMF溶液(10mL)反應(yīng)，得到2-{4-[1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(393mg，65％)。LCMS(方法C)：m/z405(M+H)+(ES+)，在1.12和1.17min時(shí)，弱UV活性。在室溫下，將2-{4-[1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)-1H-咪唑-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(180mg，0.45mmol)與氫氧化鋰一水合物(75mg，1.8mmol)在THF(4mL)和H2O(1mL)中攪拌5天。將混合物濃縮以去除THF，用1MHCl水溶液酸化并濃縮，得到(2-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-1H-咪唑-1-基)乙酸的非對(duì)映體的粗品混合物(0.4g，＞100％)。將約0.2g該混合物溶解于MeOH中，并將溶液通過(guò)制備型反相HPLC純化，使用PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用5至15％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到(2-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-1H-咪唑-1-基)乙酸，實(shí)施例1-53異構(gòu)體1，(30mg，17％)和(2-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-1H-咪唑-1-基)乙酸，實(shí)施例1-53異構(gòu)體2，(22mg，13％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。將(2-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-1H-咪唑-1-基)乙酸的非對(duì)映體的剩余粗品混合物，實(shí)施例1-53，(0.2g，假定0.22mmol)溶解于DMF(3mL)中，并用二異丙基乙胺(0.155mL，0.89mmol)和甲胺的甲醇溶液(2M，0.33mL，0.66mmol)處理。然后加入HATU(0.127g，0.33mmol)，并將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將混合物濃縮以去除DMF，將殘余物溶解于DCM和MeOH的混合物中，并在快速硅膠(10mL)上濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，]，30mL/min，0至20％溶劑A的DCM溶液，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液)純化，得到2-(4-{1-[2-(甲氨基)-2-氧代乙基]-1H-咪唑-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物。該混合物溶解于MeOH中，并將溶液通過(guò)制備型反相HPLC純化，使用PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用15至45％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到2-(4-{1-[2-(甲氨基)-2-氧代乙基]-1H-咪唑-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-54異構(gòu)體1，(9mg，4％)，以及2-(4-{1-[2-(甲氨基)-2-氧代乙基]-1H-咪唑-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例1-54異構(gòu)體2，(6mg，3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑j(luò)用于經(jīng)由氨基甲酸酯形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例1-70，2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲基氨甲?；?吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-[4-(1H-吡唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸4-硝基苯酯(0.125g，0.294mmol)懸浮于無(wú)水THF(4mL)中，并超聲處理使其溶解。加入60％氫化鈉在礦物油中的分散體(0.026g，0.647mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下、在氮?dú)庀聰嚢?0min。加入乙醇-1，1-2，2，2-d5(0.150g，2.94mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。向反應(yīng)混合物加入水(1mL)，并真空去除溶劑。將殘余物分配于DCM(20mL)以及飽和NaHCO3(水溶液)(10mL)之間，用DCM(2x10mL)萃取水層。合并有機(jī)層，并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度0％至10％MeOH/DCM])純化。將殘余物通過(guò)制備型反相HPLC(PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用20至50％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分)進(jìn)一步純化，得到呈白色固體的2-[4-(1H-吡唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸(2H5)乙酯，實(shí)施例1-70異構(gòu)體1，(0.017g，17％)，以及呈白色固體的2-[4-(1H-吡唑-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸(2H5)乙酯，實(shí)施例1-70異構(gòu)體2，(0.013g，13％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑k用于經(jīng)由甲酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-2，2-[4-(1-甲酰基吡咯烷-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證甲酸(2mL)和乙酸酐(0.1mL，1.43mmol)的混合物在60℃下攪拌1h，然后將反應(yīng)物冷卻至0℃，并滴加2-(4-(吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.30mmol)的THF溶液(2mL)。將所得到的反應(yīng)混合物在60℃下攪拌8h，調(diào)節(jié)至堿性pH，然后將反應(yīng)混合物分配于H2O(40mL)和EtOAc(25mL)之間。用EtOAc(2x25mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層并經(jīng)Na2SO4干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)制備型HPLC(XBridge，C-18，150×30mm，5um，40mL/min，梯度30％(經(jīng)12.00min)，100％(經(jīng)14.00min)，然后30％(經(jīng)14.01min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈黃色膠狀物的2-[4-(1-甲?；量┩?2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-2異構(gòu)體1(14.6mg，13.0％)，以及呈黃色膠狀物的2-[4-(1-甲?；量┩?2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-2異構(gòu)體2(12.5mg，11.1％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑L用于經(jīng)由酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-4，2-{4-[1-(三氟乙?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-(4-(吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(50mg，0.15mmol)和NEt3(0.06mL，0.45mmol)在室溫下溶解于THF(3mL)中。滴加2，2，2-三氟乙酸乙酯(0.03mg，0.22mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌8h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(40mL)和EtOAc(25mL)之間，用EtOAc(2x25mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，且經(jīng)Na2SO4干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)制備型HPLC(XBridge，C-18，150×30mm，5um，40mL/min，梯度30％(經(jīng)12.00min)，100％(經(jīng)14.00min)，然后30％(經(jīng)14.01min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈黃色膠狀物的2-{4-[1-(三氟乙?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-4異構(gòu)體-1(5.5mg，8.0％)，以及呈黃色膠狀物的2-{4-[1-(三氟乙?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-4異構(gòu)體-2(6.2mg、9.7％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑m用于經(jīng)由酰胺/氨基甲酸酯/脲形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-17，2-{4-[(2S)-1-(甲基氨甲?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(2.10g，5.65mmol)溶解于DCM(20mL)和三乙胺(1.54mL，11.1mmol)中。加入甲基氨基甲酰氯(620mg，6.63mmol)，并將溶液在室溫下攪拌2h。然后將混合物傾入1MNaOH(水溶液)(50mL)，用DCM(2x50mL)萃取，然后將用鹽水(50mL)洗滌的合并的DCM萃取物通過(guò)Biotage相分離器并真空濃縮，得到呈黃色固體且呈非對(duì)映體的混合物的2-{4-[(2S)-1-(甲基氨甲酰基}吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(1.79g，82％)。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NXC18柱，100x30mm，用25至35％MeCN/0.2％氨的H2O溶液(v/v)在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-17異構(gòu)體1，2-{4-[(2S)-1-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.78g，36％)，以及呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-17異構(gòu)體2，2-{4-[(2S)-1-(甲基氨甲?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.67g，31％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑n用于經(jīng)由脲/氨基甲酸酯形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-19，2-{4-[1-(乙基氨甲?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-(4-(吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.30mmol)、二乙胺(0.3mL，0.60mmol)和NEt3(0.1mL，0.90mmol)在室溫下溶解于DCE(5mL)中。加入CDI(145mg，0.60mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌15h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(40mL)和EtOAc(25mL)之間，用EtOAc(2x25mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，真空去除溶劑，并將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(X-BRIDGE，C-18，250×19mm，5um，15mL/min，梯度30.0％至38.0％(經(jīng)25.0min)，100.0％(經(jīng)3.0min)然后30.0％(經(jīng)2.0min)，0.1％NH3的MeCN/水溶液]純化，得到呈黃色膠狀物的2-(4-(1-(乙基氨甲?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例219異構(gòu)體-1，(7.5mg，6.20％)，以及呈黃色膠狀物的2-(4-(1-(乙基氨甲?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-19異構(gòu)體2，(8.1mg，6.60％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑o用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-22，2-[4-(1-甲基吡咯烷-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-(4-(吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(200mg，0.60mmol)和甲醛(40％溶液，1.01mL，3.60mmol)在25℃下溶解于H2O(2mL)中。滴加甲酸(0.303mL，0.90mmol)，并將所得到的混合物在70℃下攪拌14h。將反應(yīng)混合物用NaHCO3溶液(5mL)猝滅，然后將反應(yīng)混合物分配于H2O(50mL)和EtOAc(35mL)之間。將水層用EtOAc(2x35mL)進(jìn)一步萃取，合并有機(jī)層，并經(jīng)Na2SO4干燥。真空去除溶劑，并將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(X-Bridge，C-18，250×19.0mm，5um，14mL/min，梯度37％(經(jīng)28.0min)，100％(經(jīng)4.0min)，然后37％(經(jīng)3.0min)，0.1％NH3的MeCN/水溶液]純化，得到呈黃色膠狀物的2-(4-(1-甲基吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-22異構(gòu)體1(12mg，5.80％)，以及呈黃色膠狀物的2-(4-(1-甲基吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-22異構(gòu)體2(11mg，5.30％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑p用于經(jīng)由酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-23，2-{4-[1-(N-甲基甘氨酰)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將N-[(芐氧基)羰基]-N-甲基甘氨酸(73mg，0.33mmol)溶解于乙腈(5mL)中，隨后加入HATU(170mg，0.45mmol)和DIPEA(0.2mL，0.90mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌10分鐘，隨后加入2-(4-(吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.30mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌3h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(50mL)和EtOAc(35mL)之間，用EtOAc(2x35mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥并真空去除溶劑。最后，將殘余物通過(guò)柱色譜(正相堿性氧化鋁，活化，0.5％至1.0％MeOH的DCM溶液)純化，得到呈棕色膠狀物的2-(4-(1-(N-((芐氧基)羰基)-N-甲基甘氨酰)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(130mg，80.74％)。將2-(4-(1-(N-((芐氧基)羰基)-N-甲基甘氨酰)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(130mg，0.24mmol)溶解于MeOH(10mL)中，隨后加入Pd/C(按干物質(zhì)計(jì)，13mg)。然后用H2氣體吹掃反應(yīng)物，并將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌10h。將反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土塞過(guò)濾并用甲醇洗滌，然后將濾液經(jīng)Na2SO4干燥并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(X-BRIDGE，C-18，250×19mm，5um，15mL/min，梯度20.0％至35.0％(經(jīng)30.0min)，100.0％(經(jīng)3.0min)，然后20.0％(經(jīng)2.0min)，0.1％NH3的MeCN/水溶液]純化，得到呈黃色膠狀物的2-(4-(1-(甲基甘氨酰)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-23異構(gòu)體1，(9.0mg、9.27％)，以及呈黃色膠狀物的2-(4-(1-(乙基氨甲?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-23異構(gòu)體2，(8.0mg，8.50％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑q用于經(jīng)由脲形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-27，2-{4-[(2S)-1-(氮雜環(huán)丁烷-1-基羰基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.291mmol)溶解于DCM(5mL)和二異丙基乙胺(0.099mL，0.58mmol)中。在0℃下加入三光氣(88mg，0.291mmol)，并將溶液升溫至室溫并攪拌1h。然后用DCM(50mL)稀釋混合物，并用H2O(70mL)洗滌。用DCM(2x50mL)萃取水層，將合并的DCM萃取物用Na2SO4干燥并真空濃縮。將殘余物溶解于DCM(5mL)中，并加入氮雜環(huán)丁烷(0.020mL，0.291mmol)和二異丙基乙胺(0.256mL，1.48mmol)。將反應(yīng)物在室溫下攪拌1h。然后用DCM(50mL)稀釋混合物，并用H2O(70mL)洗滌。用DCM(2x50mL)萃取水層，并將合并的DCM萃取物用Na2SO4干燥并真空濃縮，得到呈黃色固體且呈非對(duì)映體的混合物的2-{4-[(2S)-1-(氮雜環(huán)丁烷-1-基羰基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯。將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×20mm，5um，18.0mL/min，梯度0％至50％(經(jīng)15.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的H2O溶液純化，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(氮雜環(huán)丁烷-1-羰基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-27異構(gòu)體1(20mg，16.12％)，，以及呈無(wú)色膠狀物的實(shí)施例2-27異構(gòu)體2(20mg，16.12％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑r用于經(jīng)由脲形成和脫水制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-42，2-(4-{(2S)-1-[乙基(丙烷-2-基)氨甲?；鵠吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯和實(shí)施例2-138，2-{4-[(2S)-1-(5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(164mg，0.403mmol)溶解于DCM(2mL)和二異丙基乙胺(0.209mL，1.21mmol)中。在0℃下加入三光氣(43mg，0.145mmol)，并將溶液升溫至室溫并攪拌18h。向該混合物中加入肼基甲酸叔丁酯(108mg，0.82mmol)和二異丙基乙胺(0.142mL，0.82mmol)，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌18h。然后用DCM(20mL)稀釋混合物，并用飽和NaHCO3(水溶液)(2x20mL)洗滌。用DCM(20mL)萃取水層，將合并的DCM萃取物用鹽水(50mL)洗滌，然后通過(guò)Biotage相分離器并真空濃縮，得到呈黃色油狀物且呈非對(duì)映體的混合物的2-{4-[(2S)-1-(叔丁基咔唑基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(192mg，97％)。LCMS(方法D)：m/z494(M+H)+(ES+)，在1.83和1.87min時(shí)，UV非活性。將粗產(chǎn)物溶解于4M氯化氫在二噁烷(2.0mL，8.0mmol)和DCM(1mL)中的溶液內(nèi)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后真空去除揮發(fā)物，然后將反應(yīng)混合物重新溶解于DCM(2mL)和二異丙基乙胺(0.142mL，0.82mmol)中。在0℃下加入乙酰氯(0.031mL，0.428mmol)，并將溶液升溫至室溫并攪拌2h。真空去除揮發(fā)物，并進(jìn)行下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。將殘余物溶解于甲苯(2mL)和二異丙基乙胺(0.135mL，0.78mmol)中，并冷卻至0℃。加入磷酰氯(0.182mL，1.945mmol)，將反應(yīng)物在110℃下攪拌30分鐘，然后將反應(yīng)物冷卻至室溫并用冰水(20mL)猝滅。然后用DCM(20mL)稀釋混合物，并用1MNaOH(水溶液)(2x20mL)洗滌。用DCM(3x20mL)萃取水層，并將合并的DCM萃取物用鹽水(50mL)洗滌，然后通過(guò)Biotage相分離器并真空濃縮。將殘余物通過(guò)制備型HPLC純化，使用PhenomenexGemini-NXC18柱，100x30mm，用25至45％MeCN/0.2％氨的H2O溶液(v/v)在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-42異構(gòu)體1，2-(4-{(2S)-1-[乙基(丙烷-2-基)氨甲?；鵠吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(1.7mg，1％)，，呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-42異構(gòu)體2，2-(4-{(2S)-1-[乙基(丙烷-2-基)氨甲?；鵠吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(1.6mg，1％)，呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-138異構(gòu)體1，2-{4-[(2S)-1-(5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(3.9mg，2.5％)，以及呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-138異構(gòu)體2，2-{4-[(2S)-1-(5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(3.0mg，2％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑s用于經(jīng)由氨基甲酸酯形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-47，2-(4-{(2S)-1-[(2-氟乙氧基)羰基]吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.15g，0.44mmol)和二異丙基乙胺(0.152mL，0.89mmol)溶解于DCM(5mL)中，然后將反應(yīng)混合物冷卻至0℃。加入氯甲酸2-氟乙酯(0.062g，0.492mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌16h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和DCM(50mL)之間，用DCM(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×20mm，5um，18.0mL/min，梯度0％至35％(經(jīng)52min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液純化，得到呈黃色膠狀物的2-(4-{(2S)-1-[(2-氟乙氧基)羰基]吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-47異構(gòu)體-1(17mg，8.9％)，以及呈黃色膠狀物的2-(4-{(2S)-1-[(2-氟乙氧基)羰基]吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-47異構(gòu)體-2(19mg，10％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑t用于經(jīng)由酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-52，2-{4-[(2S)-1-(羥基乙?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.2g，0.541mmol)和三乙胺(0.152mL，1.1mmol)溶解于DCM(5mL)中，然后將反應(yīng)混合物冷卻至0℃并加入乙酰氧基乙酰氯(0.080g，0.591mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h。真空去除揮發(fā)物，然后將殘余物溶解于乙腈(25mL)和20％NaOH的水溶液(10mL)中，并將其在室溫下攪拌1h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和DCM(50mL)之間，用DCM(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，真空去除溶劑，并將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×20mm，5um，18.0mL/min，梯度0％至30％(經(jīng)35.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液純化，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-羥基乙?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-52異構(gòu)體1(8mg，8.3％)，以及呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-羥基乙?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-52異構(gòu)體2(12mg，12.24％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑u用于經(jīng)由酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-53，2-{4-[(2S)-1-(3，3，3-三氟丙?；?吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將(2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.12g，0.36mmol)和二異丙基乙胺(0.123mL，0.71mmol)溶解于DCM(10mL)，隨后加入三氟丙酸(0.045g，0.394mmol)。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，加入丙基膦酸酐(0.140g，0.462mmol50％EtOAc溶液)，并將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌2h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(20mL)和DCM(50mL)之間，用DCM(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×20mm，5um，18.0mL/min，梯度0％至30％(經(jīng)27.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液純化，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(3，3，3-三氟丙?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-53異構(gòu)體1(9mg，6.0％)，以及呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(3，3，3-三氟丙?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-53異構(gòu)體2(9mg，6.0％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑v用于經(jīng)由勞森試劑制備硫代酰胺的典型程序，如由實(shí)施例2-58，2-{4-[(2S)-1-丙烷硫代基吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-1-丙?；量┩?2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.341g，0.87mmol)溶解于THF(4mL)中，隨后加入勞森試劑(0.265g，0.65mmol)。將反應(yīng)混合物在70℃下攪拌24小時(shí)。真空去除揮發(fā)物，并將反應(yīng)混合物分配于1MNaOH(水溶液)(50mL)和DCM(30mL)之間，用DCM(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，用5％焦亞硫酸鈉(水溶液)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，并真空去除溶劑。將殘余物通過(guò)制備型HPLC純化，使用PhenomenexGemini-NXC18柱，100x30mm，用25至45％MeCN/0.2％氨的H2O溶液(v/v)在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈黃色油狀物的實(shí)施例2-58異構(gòu)體12-{4-[(2S)-1-丙烷硫代基吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(14.1mg，4％)以及呈黃色油狀物的實(shí)施例2-58異構(gòu)體2，2-{4-[(2S)-1-丙烷硫代基吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(7.6mg，2％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑w用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-61，2-{4-[(2S)-1-乙基吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.100g，0.29mmol)和碳酸鉀(0.123mg，0.89mmol)溶解于DMF(5mL)中，并將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌2小時(shí)。然后加入碘乙烷(0.049g，0.31mmol，并將反應(yīng)混合物在100℃下攪拌62小時(shí)。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥，并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC(XBridge，C-18，150×19mm，5um，20mL/min，梯度35％(經(jīng)0.01min)，100％(經(jīng)25.01min)，然后35％(經(jīng)30.00min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-乙基吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-61異構(gòu)體1(43mg，38.8％)，以及呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-乙基吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-61異構(gòu)體2(26mg，23.1％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑x用于經(jīng)由酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-62，2-(4-{(2S)-1-[3-(吡啶-2-基)丙?；鵠吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證在0℃下，向草酰氯(0.065mL，0.768mmol)的DCM(2mL)中的溶液中加入2-吡啶丙酸(106mg，0.704mmol)和DMF(1滴)。將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(262mg，0.640mmol)溶解于DCM(1mL)和二異丙基乙胺(0.355mL，2.049mmol)中，并加入溶液，將其在室溫下攪拌2h。然后將混合物傾入1MNaOH(水溶液)(50mL)，用DCM(2x50mL)萃取，用鹽水(50mL)洗滌的合并的DCM萃取物，然后通過(guò)Biotage相分離器并真空濃縮，得到呈黑色油狀物且呈非對(duì)映體的混合物的2-(4-{(2S)-1-[3-(吡啶-2-基)丙酰基]吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.245g，82％)。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NXC18柱，100x30mm，用25至45％MeCN/0.2％氨的H2O溶液(v/v)在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-62異構(gòu)體1，2-(4-{(2S)-1-[3-(吡啶-2-基)丙?；鵠吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.042g，14％)，以及呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-62異構(gòu)體2，2-(4-{(2S)-1-[3-(吡啶-2-基)丙酰基]吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.030g，10％)。2的數(shù)據(jù)在表3中途徑y(tǒng)用于經(jīng)由酰胺形成和CBZ-脫保護(hù)制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-65，2-{4-[(2S)-1-{N-[(芐氧基)羰基]-β-丙氨?；鶀吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯和實(shí)施例2-66，2-{4-[(2S)-1-(β-丙氨酰基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.298mmol)和DIPEA(0.102mL，0.597mmol)溶解于CH2Cl2(5mL)中，冷卻至0℃并加入Z-β-ala-OH(0.066g，0.298mmol)，隨后加入丙烷膦酸酐(0.123g，0.388mmol，50％的乙酸乙酯溶液)。將所得到的反應(yīng)混合物在25℃下攪拌3h，分配于H2O(70mL)和CH2Cl2(50mL)之間，并用CH2Cl2(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層。將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑，得到呈無(wú)色膠狀物的2-{4-[(2S)-1-{N-[(芐氧基)羰基]-β-丙氨酰基}吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(100mg，71.4％)，將其直接用于實(shí)施例2-66的合成而不經(jīng)過(guò)純化。LCMS(方法I)：m/z541(M+H)+(ES+)在4.38and4.51min時(shí)，UV非活性。殘余物可通過(guò)制備型HPLC純化[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×20mm，5um，18.0mL/min，梯度0％至50％(經(jīng)15.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液，得到呈無(wú)色膠狀物的2-{4-[(2S)-1-{N-[(芐氧基)羰基]-β-丙氨?；鶀吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-65異構(gòu)體1(20mg，12.5％)，以及呈無(wú)色膠狀物的2-{4-[(2S)-1-{N-[(芐氧基)羰基]-β-丙氨?；鶀吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-65異構(gòu)體2(20mg，12.5％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。將2-{4-[(2S)-1-{N-[(芐氧基)羰基]-β-丙氨?；鶀吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.185mmol)溶解于TFA(2.0mL)中。將所得到的溶液在80℃下攪拌3h，真空濃縮并將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×19mm，5um，13.0mL/min，梯度0％至30％(經(jīng)30.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液純化，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(3-氨基丙?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-66異構(gòu)體1(2mg，2.63％)，以及呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(3-氨基丙?；?吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-66異構(gòu)體2(3mg，4.0％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑z用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-68，2-{4-[(2S)-1-(2-氟乙基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.27mmol)溶解于MeCN(5mL)中，加入CS2CO3(290mg，0.89mmol)，隨后加入2-碘-1-氟乙烷(56mgg，0.32mmol)，并將反應(yīng)混合物在50℃下攪拌16h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和乙酸乙酯(50mL)之間，用乙酸乙酯(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×19mm，5um，15.0mL/min，梯度0％至40％(經(jīng)19.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液]純化，得到呈淺黃色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-氟乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-68異構(gòu)體1(25mg，25％)，以及呈淺黃色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-氟乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-68異構(gòu)體2(20mg，20.3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑aa用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-69，2-{4-[(2S)-1-(2，2，2-三氟乙基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.100g，0.29mmol)和DIPEA(0.112g，0.87mmol)溶解于THF(5mL)中，并在60℃下攪拌2小時(shí)。在0℃下滴加三氟甲烷磺酸2，2，2-三氟乙酯(0.067g，0.29mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌24h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將殘余物經(jīng)制備型HPLC(XBridge，C-18，250×19mm，5um，12mL/min，梯度45％(經(jīng)0.01min)，100％(經(jīng)30.00min)，然后45％(經(jīng)32.00min)，0.1％氨的乙腈/水溶液純化，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2，2，2-三氟乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-69異構(gòu)體1(0.003g，2.4％)，以及呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2，2，2-三氟乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-69異構(gòu)體2(0.002mg，1.6％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ab用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-70，2-{4-[(2S)-1-(3，3，3-三氟丙基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.100g，0.29mmol)和K2CO3(0.123g，0.89mmol)溶解于MeCN(5mL)中，并將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌2小時(shí)。在0℃下滴加1，1，1-三氟-3-碘丙烷(0.066g，0.29mmol)，并將所得到的混合物在室溫下攪拌8h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC(XBridge，C-18，250×19mm，5um，15mL/min，梯度60％(經(jīng)0.01min)，100％(經(jīng)14.01min)純化，然后60％(經(jīng)23.00min)，0.1％氨的乙腈/水溶液，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(3，3，3-三氟丙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-70異構(gòu)體1(0.005g、3.9％)，以及呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(3，3，3-三氟丙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-70異構(gòu)體2(0.005mg、3.9％)。異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ac用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-72，(S)-2-(4-(1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.100g，0.29mmol)和DIPEA(0.14mL，0.87mmol)溶解于MeCN(5mL)中，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h。滴加溴乙酸甲酯(0.044g，0.29mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在100℃下攪拌3h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑。將殘余物經(jīng)制備型HPLC(XBridge，C-18，250×19mm，5um，15mL/min，梯度48％(經(jīng)0.01min)，100％(經(jīng)11.1min)，48％(經(jīng)48.00min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-72異構(gòu)體1(0.012g、9.9％)，以及呈無(wú)色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-甲氧基-2-氧代乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-72異構(gòu)體2(0.013mg，10.7％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ad用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-72，2-(4-{(2S)-1-[2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基]吡咯烷-2-基}哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.100g，0.29mmol)和NEt3(0.087g，0.85mmol)溶解于二噁烷(5mL)中，并將反應(yīng)混合物在60℃下攪拌30min。在0℃下滴加2-氯-N，N-二甲基乙酰胺(0.036g，0.29mmol)，并將所得到的混合物在室溫下攪拌12h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和EtOAc(50mL)之間，用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮。將殘余物經(jīng)制備型HPLC(XBridge，C-18，250×19mm，5um，14mL/min，梯度20％(經(jīng)0.01min)，40％(經(jīng)36.00min)，100％(經(jīng)44.00min)，然后20％(經(jīng)52.00min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈黃色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-72異構(gòu)體1(0.002g，1.6％)，以及呈黃色膠狀物的(S)-2-(4-(1-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-2-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-72異構(gòu)體2(0.002mg，1.6％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ae用于經(jīng)由還原胺化、Boc-脫保護(hù)和脲/酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-76，2-{4-[2-(甲基氨甲酰基)-2，3-二氫-1H-異吲哚-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證在0℃下，向1-(哌啶-4-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(135mg，0.45mmol)和3-氧代-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-8-羧酸乙酯(88mg，0.890mmol)的DCM溶液(5mL)中加入Ti(OiPr)4(0.40mL，1.34mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌1h。向反應(yīng)混合物中分批加入Na(OAc)3BH(283mg，1.34mmol)，并在0℃下攪拌2h。完成后，將反應(yīng)混合物用NaHCO3飽和水溶液猝滅，并用DCM(3x30mL)萃取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并真空濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度5％至10％甲醇的DCM溶液]純化，得到呈無(wú)色液體的1-(1-(6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-2-基)哌啶-4-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(35mg，75％)。MS(ESI+ve)：484向1-(1-(6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-2-基)哌啶-4-基)異吲哚啉-2-羧酸叔丁酯(290mg，0.61mmol)的1，4-二噁烷溶液(10mL)中，在0℃下緩慢加入HCl的二噁烷溶液(4M，5mL)，并將混合物在室溫下攪拌5h。真空蒸發(fā)溶劑。將固體殘余物用二乙醚研磨，得到呈灰白色固體的2-(4-(異吲哚啉-1-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯鹽酸鹽(250mg，粗品)。MS(ESI+ve)：3841H-NMR(400MHz；DMSO-d6)δ：1.15(t，J＝6.9Hz，3H)，1.16-1.26(m，1H)，1.70-1.90(m，5H)，1.95-2.28(m，5H)，3.49-3.72(m，4H)，3.60-3.72(m，4H)，3.98-4.15(m，2H)，4.13(q，J＝6.9Hz，2H)，4.45-4.59(m，2H)，7.37-7.49(m，5H)，9.54，10.19(2br.s.，2H)。向2-(4-(異吲哚啉-1-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯鹽酸鹽(240mg，0.40mmol)于DCM中的溶液(5mL)，在0℃下加入DIPEA(0.43mL，2.38mmol)。向該反應(yīng)混合物中加入甲基氯甲酰胺(67mg，0.72mmol)，并在室溫下攪拌16h。將反應(yīng)混合物用水(10mL)猝滅，并用DCM(2x20mL)萃取水層。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)并真空濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜[正相，硅膠(100-200目)，梯度5％至10％甲醇的DCM溶液]純化，得到呈膠狀液體的2-(4-(2-(甲基氨甲?；?-異吲哚啉-1-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，為非對(duì)映體的混合物(130mg，48％)。LCMS(方法M)：m/z441(M+H)+(ES+)，在1.97和1.99min時(shí)，UV活性。1H-NMR(400MHz；DMSO-d6)：δ：1.15(t，J＝6.9Hz，3H)，1.16-1.26(m，4H)，1.49-1.90(m，5H)，1.91-2.01(m，2H)，2.62(d，J＝3.9Hz，3H)，2.70-2.90(m，2H)，3.09-3.25(m，4H)，3.97(q，J＝6.8Hz，2H)，4.45-4.59(m，2H)，5.01-5.09(m，1H)，6.27(br.s.，1H)，7.22-7.32(m，4H)。非對(duì)映體的分離，使用制備型HPLC(提交73.0mg，Gilson半制備型HPLC系統(tǒng)-包括雙活塞泵331和332，171二極管陣列檢測(cè)器和GX-271液體處理器，溶劑：水溶劑＝水+0.2％氨(28％氨溶液)，及有機(jī)物＝乙腈，梯度：20-50％有機(jī)物的水溶液，流速：30ml/min，柱：Gemini-NX，C18，5μ，100x30mm)，得到呈無(wú)色膠狀物的2-(4-(2-(甲基氨甲?；?-異吲哚啉-1-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-76異構(gòu)體1(8.99mg，12.3％)，以及呈無(wú)色膠狀物的2-(4-(2-(甲基氨甲?；?-異吲哚啉-1-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-76異構(gòu)體2(10.9mg，14.9％)。異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑af用于吡咯烷的芳基化的典型程序，如由實(shí)施例2-77，2-{4-[(2S)-1-苯基吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.100g，0.27mmol)溶解于DCM(5mL)中，加入三乙胺(54mg，0.54mmol)，隨后加入(1R，5S)-3-苯基-2，4-二氧雜-3-硼二環(huán)[3.3.1]壬-7-酮(參見(jiàn)J.Luo等人TetrahedronLetters54(2013)，4505-4508，58mg，0.53mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16h，然后分配于H2O(70mL)和DCM(100mL)之間。用DCM(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，并合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，去除溶劑并將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×19mm，5um，15.0mL/min，梯度0％至30％(經(jīng)21.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液純化，得到呈膠狀物的2-{4-[(2S)-1-苯基吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-77異構(gòu)體1(10mg，13％)，以及呈膠狀物的2-{4-[(2S)-1-苯基吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-77異構(gòu)體2(10mg，13％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ag用于使用碳酸銫和碘化亞銅的DMF溶液進(jìn)行的含吡咯烷的化合物與雜環(huán)的芳基化的典型程序，如由實(shí)施例2-78，2-{4-[(2S)-1-(吡啶-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.120g，0.37mmol)、Cs2CO3(0.361g，1.1mmol)和CuI(0.105g，0.50mmol)溶解于DMF(5mL)中，并在室溫下攪拌30min。然后加入2-溴吡啶(0.058g，0.37mmol)，并將所得到的混合物在100℃下攪拌18h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和EtOAc(50mL)之間。將水層用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，濃縮去除溶劑并將殘余物通過(guò)制備型HPLC(XBridge，C-18，150×19mm，5um，13mL/min，梯度40％至100％(經(jīng)20min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈膠狀物的2-{4-[(2S)-1-(吡啶-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯實(shí)施例2-78異構(gòu)體1(0.011g，2％)，以及呈膠狀物的2-{4-[(2S)-1-(吡啶-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸甲酯實(shí)施例2-78異構(gòu)體2(0.09mg，2％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ah用于使用碳酸鈉的乙醇溶液進(jìn)行的含吡咯烷的化合物與雜環(huán)的芳基化的典型程序，如由實(shí)施例2-81，2-{4-[(2S)-1-(嘧啶-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl的非對(duì)映體的混合物(0.100g，0.29mmol)和Na2CO3(0.092g，0.87mmol)溶解于乙醇(10mL)中，并在室溫下攪拌30min。然后在0℃下加入2-氯嘧啶(0.034g，0.29mmol)。將所得到的反應(yīng)混合物在80℃下攪拌6h。將反應(yīng)混合物濃縮，并加入二氯甲烷。將混合物過(guò)濾，濃縮濾液并通過(guò)制備型HPLC(XBridge，C-18，150×19mm，5um，15mL/min，梯度38％(經(jīng)0.01min)，42％(經(jīng)15.00min)，100％(經(jīng)19.00min)，然后38％(經(jīng)23.00min)，0.1％氨的乙腈/水溶液]純化，得到呈膠狀物的2-{4-[(2S)-1-(嘧啶-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-81異構(gòu)體1(0.031g，25％)，以及呈膠狀物的2-{4-[(2S)-1-(嘧啶-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-81異構(gòu)體2(0.017mg，14％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ai用于使用碳酸銫和碘化亞銅的DMF溶液進(jìn)行的含吡咯烷的化合物與雜環(huán)的芳基化的典型程序，如由實(shí)施例2-82，2-{4-[(2S)-1-(1，3-噻唑-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2S)-吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯.HCl中間體127的非對(duì)映體的混合物(100mg，0.27mmol)溶解于DMF(5mL)中，并向其中加入CS2CO3(260mg，0.81mmol)，隨后加入2-溴噻唑(58mg，0.29mmol)。將反應(yīng)混合物在90℃下攪拌16h。將反應(yīng)混合物分配于H2O(70mL)和EtOAc(50mL)之間。將水層用EtOAc(2x50mL)進(jìn)一步萃取。合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，濃縮去除溶劑并將殘余物經(jīng)制備型HPLC[反相HPLC(CHIRALPAKAD-H，C-18，250×19mm，5um，15.0mL/min，梯度0％至30％(經(jīng)21.0min)，0.1％氨的乙腈溶液和0.1％氨的水溶液純化，得到呈無(wú)色膠狀物的2-{4-[(2S)-1-(1，3-噻唑-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-82異構(gòu)體1(20mg，18％)，以及呈無(wú)色膠狀物的2-{4-[(2S)-1-(1，3-噻唑-2-基)吡咯烷-2-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-82異構(gòu)體2(6mg，6％)。異構(gòu)體1和異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ai用于經(jīng)由脫保護(hù)和還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-84，2-{4-[(2R)-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將4-[(2R)-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.396g，1.26mmol)溶解于DCM(1mL)中，隨后滴加HCl的二噁烷溶液(3mL，4.0M溶液)。將所得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h，真空去除溶劑，并將殘余物進(jìn)行下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。將1-哌啶-4-基-D-脯氨酸甲酯.HCl(0.358g，1.26mmol)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.266g，1.26mmol)在室溫下溶解于DMF(4mL)中，并加入DIPEA(0.435mL，2.510mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。然后加入STAB(0.533g，2.518mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀隆⒃谑覝叵聰嚢柽^(guò)夜。真空去除溶劑，并將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NXC18柱，100x30mm，用25至45％MeCN/0.2％氨的H2O溶液(v/v)在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-84異構(gòu)體12-{4-[(2R)-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(18.4mg，4％)，以及呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-84異構(gòu)體2，2-{4-[(2R)-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(13.9mg，3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑ak用于經(jīng)由還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-85，2-{4-[(2S)-2-(甲基氨甲?；?吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將(S)-N-甲基-1-(哌啶-4-基)吡咯烷-2-甲酰胺二鹽酸鹽(0.2g，0.94mmol)、NEt3(0.75mL，5.0mmol)、6-(乙氧基羰基)-2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛-8-基鎓(0.188g，0.93mmol)和ZnCl2(30mg，0.02mmol)在氮?dú)庀氯芙庥贛eOH(15.00mL)中，并在50-60℃下攪拌1h。在0-10℃下分批加入NaCNBH3(0.069g，1.0mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。將反應(yīng)混合物分配于EtOAc(2x50mL)和水(30mL)之間，合并有機(jī)層，干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空去除溶劑，并將粗產(chǎn)物通過(guò)制備型HPLC[反相HPLC(X-BridgePREPC18，250×19mm，5um，15mL/min，梯度30％至100％(經(jīng)22min)，然后100％(2min)，0.1％NH3的乙腈溶液純化，得到呈白色固體的實(shí)施例2-85異構(gòu)體1，(S)-2-(4-(2-(甲基氨甲?；?吡咯烷-1-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.09g，24.32％)，以及呈白色固體的實(shí)施例2-85異構(gòu)體2，(S)-2-(4-(2-(甲基氨甲?；?吡咯烷-1-基)哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.089g，24.10％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ap用于經(jīng)由脫保護(hù)和三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-87，2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.36g，1.03mmol)溶解于4.0MHCl的二噁烷溶液(10mL)中，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6h。真空去除溶劑，并將殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。將粗品反應(yīng)混合物和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.243g，1.233mmol)在室溫下溶解于DCE(10mL)中，并加入Et3N(0.249g，2.47mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃下、在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入冰醋酸(0.114g，1.90mmol)和STAB(0.784g，3.69mmol)，并將反應(yīng)混合物在50下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。向冷卻的反應(yīng)混合物中加入水(2mL)，并真空去除溶劑。將殘余物分配于DCM(15mL)和飽和NaHCO3(水溶液)(15mL)之間，用DCM(2x15mL)洗滌水層。合并有機(jī)層，并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度1％至10％MeOH/DCM])純化。將殘余物通過(guò)制備型反相HPLC(PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用20至50％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分)進(jìn)一步純化，得到2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-87異構(gòu)體1(0.020g，4.5％)，以及2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-87異構(gòu)體2(0.020g，4.5％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑am用于經(jīng)由脫保護(hù)和酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-88，2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲基氨甲?；?吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-87的非對(duì)映體的混合物(0.400g，0.932mmol)溶解于THF(8mL)中并加入1MLiOH(水溶液)(1.9mL)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。使用2.0MHCl溶液中和反應(yīng)混合物，并真空去除溶劑。將殘余物與甲苯共沸，得到呈黃色玻璃狀物的1-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-4，4-二氟-D-脯氨酸(0.440g，100％)。LCMS(方法C)：m/z416(M+H)+(ES+)在0.71min時(shí)，UV非活性將1-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-4，4-二氟-D-脯氨酸(0.193g，0.466mmol)溶解于無(wú)水DMF(5mL)中，并加入HATU(0.533g，1.398mmol)、2.0M甲胺的THF溶液(2.3mL，2.33mmol)和DIPEA(0.301g，2.33mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，并將殘余物分配于DCM(20mL)與飽和NaHCO3(水溶液)(20mL)水層之間，用DCM(2x15mL)萃取水層。合并有機(jī)層，用鹽水(20mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度0％至10％MeOH/DCM])純化。將殘余物通過(guò)制備型反相HPLC(PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用20至50％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分)進(jìn)一步純化，得到呈無(wú)色油狀物的2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲基氨甲?；?吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-88異構(gòu)體1，(0.038g，18％)，以及呈無(wú)色油狀物的2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲基氨甲酰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-88異構(gòu)體2，(0.037g，18％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑an用于經(jīng)由酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-90，2-{4-[(2R)-2-氨甲酰基-4，4-二氟吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2R)-2-甲氧基羰基-4，4-二氟吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(456mg，1.062mmol)在60℃下溶解于THF(1mL)和28％NH3溶液(9mL)中，并將反應(yīng)物攪拌18h。將反應(yīng)混合物用1MHCl(水溶液)中和，用DCM(25mL)稀釋并用H2O(2x25mL)洗滌，將合并的水層用DCM(25mL)洗滌，將合并的有機(jī)層用鹽水(25mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到橙色油狀物(0.290g，65％)。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NXC18柱，100x30mm，用20至45％MeCN/0.2％氨的H2O溶液(v/v)在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-90異構(gòu)體12-{4-[(2R)-2-氨甲?；?4，4-二氟吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(16.8mg，4％)，以及呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-90異構(gòu)體2，2-{4-[(2R)-2-氨甲?；?4，4-二氟吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(12.4mg，3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑ao用于經(jīng)由水解和酰胺形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-91，2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基氨甲?；?吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2R)-2-甲氧基羰基-4，4-二氟吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(230mg，0.536mmol)在室溫下溶解于THF(6.5mL)和1.0MLiOH溶液(1.1mL，1.1mmol)中，并將反應(yīng)物攪拌18h。真空去除揮發(fā)物，繼續(xù)使用化合物而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。將1-{1-[6-(乙氧基羰基)-6-氮雜螺[3.4]辛-2-基]哌啶-4-基}-4，4-二氟-D-脯氨酸(125mg，0.300mmol)溶解于DMF(1mL)中，隨后加入HATU(228mg，0.60mmol)和DIPEA(0.260mL，1.50mmol)。將反應(yīng)混合物在0℃下攪拌10分鐘，隨后加入甲氧胺鹽酸鹽(25mg，0.30mmol)，并將所得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18h。將反應(yīng)混合物真空濃縮，然后分配于飽和NaHCO3(水溶液)(50mL)和DCM(50mL)之間，用DCM(2x50mL)進(jìn)一步萃取水層，合并有機(jī)層，用鹽水(50mL)洗滌并通過(guò)Biotage相分離器。真空去除揮發(fā)物，得到橙色油狀物(0.102g，77％)。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NXC18柱，100x30mm，用20至50％MeCN/0.2％氨的H2O溶液(v/v)在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-91異構(gòu)體12-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基氨甲酰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(12.2mg，4％)，以及呈無(wú)色油狀物的實(shí)施例2-91異構(gòu)體2，2-{4-[(2R)-4，4-二氟-2-(甲氧基氨甲?；?吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(7.2mg，3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中途徑ap用于經(jīng)由脫保護(hù)和三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-111，2-[4-(2-氧代吡咯烷-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將1-哌啶-4-基吡咯烷-2-酮(0.200g，1.19mmol)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.212g，1.14mmol)在室溫下溶解于DMF(6mL)中，將反應(yīng)混合物在40℃下、在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入STAB(0.630g，2.97mmol)和冰醋酸(0.071g，1.189mmol)，并將反應(yīng)混合物在40℃下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。向冷卻的反應(yīng)混合物中加入水(2mL)，并真空去除溶劑。將殘余物分配于DCM(15mL)與飽和NaHCO3(水溶液)(15mL)之間，用DCM(2x15mL)洗滌水層。合并有機(jī)層，并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度1％至10％MeOH/DCM])純化。將殘余物通過(guò)制備型反相HPLC(PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用20至35％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分)進(jìn)一步純化，得到呈無(wú)色油狀物的2-[4-(2-氧代吡咯烷-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-111異構(gòu)體1(0.008g，2％)，以及呈無(wú)色油狀物的2-[4-(2-氧代吡咯烷-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-111異構(gòu)體2，(0.009g，2％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。如果還原胺化中使用的胺含有(用標(biāo)準(zhǔn)胺保護(hù)基例如BOC或Cbz)保護(hù)的仲胺基。然后用于脫保護(hù)的標(biāo)準(zhǔn)方法可用于在一旦實(shí)施還原胺化后即去除這些保護(hù)基，以使靶標(biāo)進(jìn)一步官能化。途徑aq用于經(jīng)由還原胺化、Boc脫保護(hù)和脲形成制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-124，2-[4-(2-氧代-1，2-二氫吡啶-4-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-(4-氧代哌啶-1-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯鹽酸鹽(0.316g，1.00mmol)和(2-氨基乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.320g，2.00mmol)在N2下、在室溫下溶解于DCM(10mL)中，加入NEt3(0.15mL，1.10mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌0.5h。加入醋酸(0.13mL，2.20mmol)，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h，加入STAB(0.530g，2.50mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(30mL)猝滅，用DCM(4x25mL)萃取，將合并的DCM層通過(guò)Biotage相分離器并真空濃縮，得到呈非對(duì)映體的混合物的粗品2-[4-({2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}氨基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，將其使用而不經(jīng)過(guò)任何進(jìn)一步純化。LCMS(方法D)：m/z425(M+H)+(ES+)，在1.30和1.35min時(shí)，UV非活性。將粗品2-[4-({2-[(叔丁氧基羰基)氨基]乙基}氨基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.424g，1.00mmol)溶解于CH2Cl2(10mL)中，加入4M氯化氫的二噁烷溶液(1.25mL，5.0mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除揮發(fā)物，將殘余物溶解于EtOH(10mL)中，加入NEt3(1.40mL，10.0mmol)和CDI(0.244g，1.50mmol)，將混合物加熱至回流并保持過(guò)夜。真空去除溶劑，將殘余物分配于CH2Cl2(20mL)和水(20mL)之間，并用CH2Cl2(4x20mL)萃取水層。將合并的有機(jī)層真空濃縮，得到呈非對(duì)映體的混合物的粗品2-[4-(2-氧代咪唑烷-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NC18柱，150x21mm，用25至45％MeCN在0.2％NH3/H2O中的溶液在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色固體的2-[4-(2-氧代-1，2-二氫吡啶-4-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-124異構(gòu)體1，(0.008g，2.3％)，以及呈無(wú)色固體的2-[4-(2-氧代-1，2-二氫吡啶-4-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例2-124異構(gòu)體2，(0.008g，2.3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ar用于經(jīng)由酯還原制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例2-136，2-{4-[(2R，4R)-4-氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-{4-[(2R，4R)-4-氟-2-(甲氧基羰基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的混合物(0.140g，0.341mmol)溶解于無(wú)水THF(10mL)中，并在氮?dú)庀吕鋮s至0℃。向反應(yīng)混合物中滴加2.0M硼氫化鋰的THF溶液(1.02mL，1.023mmol)，然后將反應(yīng)混合物升至室溫過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(水溶液)(15mL)猝滅，然后用EtOAc(2x15mL)萃取，合并有機(jī)層并干燥(MgSO4)。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度0％至10％MeOH/DCM])純化。將殘余物通過(guò)制備反相HPLC(PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用20至50％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分)進(jìn)一步純化，得到呈白色固體的2-{4-[(2R，4R)-4-氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-136異構(gòu)體1，(2.99mg，0.23％)，以及呈白色固體的2-{4-[(2R，4R)-4-氟-2-(羥甲基)吡咯烷-1-基]哌啶-1-基}-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例2-136異構(gòu)體2，(3.10mg，0.24％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑as用于經(jīng)由三乙酰氧基硼氫化鈉在DMF中還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例3-4，2-[4-(3-羥基吡啶-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-(哌啶-4-基)吡啶-3-醇二鹽酸鹽(0.20g，0.8mmol)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.157g，0.8mmol)在室溫下、在DMF(8mL)中混合。加入DIPEA(0.28mL，1.6mmol)和AcOH(0.07mL，1.2mmol)，隨后加入STAB(0.34g，1.6mmol)。將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀?、在室溫下攪拌過(guò)夜，然后加入少量MeOH猝滅，并真空濃縮以去除所有溶劑。將殘余物溶解于MeOH和DCM的混合物中，并在快速硅膠(～10mL)上真空濃縮。將所得到的粉末通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，30mL/min，梯度0％至15％溶劑A的DCM溶液，經(jīng)15個(gè)柱體積，其中溶劑A為10％的(7MNH3/MeOH)的MeOH溶液])純化，得到非對(duì)映體的粗品混合物(0.258g)。將該混合物溶解于MeOH中，加入少量28％NH3/H2O(～0.1mL)，并將溶液通過(guò)制備型反相HPLC純化，使用PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用15至25％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在230nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到2-[4-(3-羥基吡啶-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例3-4異構(gòu)體1，(0.034g，12％)，以及2-[4-(3-羥基吡啶-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例3-4異構(gòu)體2，(0.052g，18％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑at用于經(jīng)由三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例3-10，2-[4-氰基-(吡啶-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將4-(吡啶-2-基)哌啶-4-甲腈鹽酸鹽(0.187g，1.0mmol)，以及2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.197g，1.0mmol)在N2下、在室溫下溶解于DCM(10mL)中，并加入NEt3(0.15mL，1.1mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h，加入醋酸(0.13mL，2.2mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。加入STAB(0.636g，3.0mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(30mL)猝滅，用DCM(4x25mL)萃取，并將合并的DCM層通過(guò)Biotage相分離器。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，40mL/min，梯度0％至10％MeOH的DCM溶液)純化，得到2-[4-氰基-(吡啶-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的不可分離的混合物。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NC18柱，150x21mm，用25至65％MeOH/H2O在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色固體的2-[4-氰基-(吡啶-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例3-10異構(gòu)體1，(0.012g，3％)，以及呈無(wú)色固體的2-[4-氰基-(吡啶-2-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例3-10異構(gòu)體2，(0.014g，4％)。兩種異構(gòu)體的數(shù)據(jù)在表3中。途徑au用于經(jīng)由烷基化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例4-5，2-(1-乙基-2-氧代-3，4′-雙哌啶-1′-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將2-(2-氧代-[3，4′-雙哌啶]-1′-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例4-1，(0.2g，0.55mmol)，溶解于DMF(3mL)中，并冷卻至0-5℃。加入氫化鈉(0.080g，1.6mmol)和碘乙烷(0.139g，0.8mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。將反應(yīng)物用水(50mL)猝滅，用EtOAc(3x30mL)萃取，并將合并的有機(jī)層干燥(Na2SO4)，過(guò)濾并真空濃縮，得到呈非對(duì)映體的混合物的粗品2-(1-乙基-2-氧代-3，4′-雙哌啶-1′-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯。將粗產(chǎn)物通過(guò)制備型HPLC[X-BridgeC18(150X19mm，5um，17mL/min，梯度27％至100％(經(jīng)30min)，然后100％(4min)、0.1％NH3的乙腈溶液純化，得到呈無(wú)色膠狀物的2-(1-乙基-2-氧代-[3，4′-雙哌啶]-1′-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例4-5異構(gòu)體-1(0.011g，5.11％)，以及呈無(wú)色膠狀物的2-(1-乙基-2-氧代-[3，4′-雙哌啶]-1′-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例4-5異構(gòu)體-2(0.012g，5.80％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑av用于經(jīng)由三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例4-8，2-[4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將1-(哌啶-4-基)四氫嘧啶-2(1H)-酮(0.183g，1.0mmol)，以及2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.197g，1.0mmol)在N2下、在室溫下溶解于DCM(10mL)，加入醋酸(0.13mL，2.2mmol)并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。加入STAB(0.530g，2.5mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物加入NaHCO3(飽和水溶液)(30mL)猝滅，用DCM(4x25mL)萃取，并將合并的DCM層通過(guò)Biotage相分離器。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil25g，40-63μm，40mL/min，梯度0％至10％MeOH的DCM溶液)純化，得到2-[4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的非對(duì)映體的不可分離的混合物。將制備型HPLC用于分離非對(duì)映體，使用PhenomenexGemini-NC18柱，150x21mm，用15至30％MeCN在0.2％NH3/H2O中的溶液在18mL/min下洗脫，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分，得到呈無(wú)色固體的2-[4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例4-8異構(gòu)體1，(0.028g，7.7％)，以及呈無(wú)色固體的2-[4-(2-氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例4-8異構(gòu)體2，(0.025g，6.9％)。兩種異構(gòu)體的數(shù)據(jù)在表3中。途徑aw用于經(jīng)由脫保護(hù)和三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例4-13，2-(3，3-二氟-1，4’-雙哌啶-1’-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證將3，3-二氟-1，4′-雙哌啶-1′-羧酸叔丁酯(0.347g，1.14mmol)溶解于4.0MHCl的二噁烷溶液(5mL)中，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，并將殘余物用于下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。將粗品反應(yīng)混合物和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.212g，1.14mmol)在室溫下溶解于DMF(6mL)中，并加入DIPEA(0.295g，2.28mmol)。將反應(yīng)混合物在50℃下、在氮?dú)庀聰嚢?h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入冰醋酸(0.068g，1.14mmol)和STAB(0.604g，2.85mmol)，并將反應(yīng)混合物在50℃下、在氮?dú)庀聰嚢柽^(guò)夜。向冷卻的反應(yīng)混合物中加入水(2mL)，并真空去除溶劑。將殘余物分配于DCM(15mL)和飽和NaHCO3(水溶液)(15mL)之間，用DCM(2x15mL)洗滌水層。合并有機(jī)層，并通過(guò)Biotage相分離器柱體干燥。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g40-63μm，12mL/min，梯度1％至10％MeOH/DCM])純化。將殘余物通過(guò)制備型反相HPLC(PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用30至60％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分)進(jìn)一步純化，得到呈無(wú)色油狀物的2-(3，3-二氟-1，4’-雙哌啶-1’-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例4-13異構(gòu)體1，(0.011g，2.6％)，以及呈無(wú)色油狀物的2-(3，3-二氟-1，4’-雙哌啶-1’-基)-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例4-13異構(gòu)體2，(0.005g，1.3％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ax用于經(jīng)由還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例4-16，2-[(2R)-2-(甲基氨甲酰基)-1，4′-雙哌啶-1′-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證向(R)-N-甲基-[1，4′-雙哌啶]-2-甲酰胺(200mg，0.890mmol)和3-氧代-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛烷-8-羧酸乙酯(175mg，0.890mmol)的DCM溶液(7.5mL)中，在0℃下加入Ti(OiPr)4(0.80mL，2.67mmol)，并將反應(yīng)混合物攪拌1h。向反應(yīng)混合物中分批加入Na(OAc)3BH(562mg，2.67mmol)，并在0℃下攪拌2h。完成后，將反應(yīng)混合物用NaHCO3飽和水溶液猝滅，并用DCM(3x30mL)萃取。合并有機(jī)層，用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)并真空濃縮。將殘余物通過(guò)制備型HPLC(反相，XBRIDGE，C-18，19x250mm，5μ，梯度10％至90％ACN的水溶液，含有5mMNH4OAc純化，得到25mg(7％)的2-[(2R)-2-(甲基氨甲酰基)-1，4′-雙哌啶-1′-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例4-16異構(gòu)體-1和25mg(7％)的2-[(2R)-2-(甲基氨甲?；?-1，4′-雙哌啶-1′-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯實(shí)施例4-16異構(gòu)體-2，為無(wú)色半固體。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。途徑ay用于經(jīng)由烷基化、環(huán)化和三乙酰氧基硼氫化鈉還原胺化制備哌啶的典型程序，如由實(shí)施例5-1，2-[4-(2-氧代氮雜環(huán)庚烷-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯的制備所例證向4-氨基-1-Boc-哌啶(200mg，1.0mmol)的THF溶液(2mL)中加入三乙胺(0.153mL，1.1mmol)和6-澳己酰氯(0.168mL，1.098mmol)，并將混濁的懸浮液在室溫下攪拌2h。真空去除溶劑，并將殘余物分配于H2O(15mL)和EtOAc(25mL)之間，用EtOAc(2×25mL)萃取水層，合并有機(jī)層，經(jīng)Na2SO4干燥并真空去除溶劑，得到呈橙色油狀物的4-[(6-澳己?；?氨基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(378mg，＞99％)。將4-[(6-澳己?；?氨基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(378mg，1.0mmol)溶解于DMF(25mL)中，并加入氫化鈉(48mg，1.2mmol)。將反應(yīng)混合物在80℃下攪拌1h，真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)柱色譜(正相，[BiotageSNAP柱體KP-sil10g，40-63μm，25mL/min，1％至10％MeOH的DCM溶液])純化，得到4-(2-氧代氮雜環(huán)庚烷-1-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(178mg，60％)。將殘余物溶解于DCM(1mL)中，隨后滴加HCl的二噁烷溶液(3mL，4.0M溶液)。將所得到的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1h，真空去除溶劑，并將殘余物進(jìn)行下一步驟而不經(jīng)過(guò)進(jìn)一步純化。將1-(哌啶-4-基)氮雜環(huán)庚烷-2-酮.HCl(0.182g，0.738mmol)和2-氧代-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯(0.155g，0.785mmol)在室溫下溶解于DMF(2mL)中，并加入DIPEA(0.136mL，0.790mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3h。然后加入STAB(0.332g，1.569mmol)，并將反應(yīng)混合物在氮?dú)庀?、在室溫下攪拌過(guò)夜。真空去除溶劑，并將殘余物通過(guò)制備反相HPLC(PhenomenexGemini-NX5μmC18110AAxia柱，100x30mm，用25至45％MeCN/溶劑B在30mL/min下經(jīng)14.4min洗脫[其中溶劑B為0.2％的(28％NH3/H2O)的H2O溶液]，并通過(guò)在210nm下監(jiān)測(cè)收集級(jí)分)純化，得到呈無(wú)色油狀物的2-[4-(2-氧代氮雜環(huán)庚烷-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例5-1異構(gòu)體1(6.2mg，2％)，以及呈無(wú)色油狀物的2-[4-(2-氧代氮雜環(huán)庚烷-1-基)哌啶-1-基]-6-氮雜螺[3.4]辛烷-6-羧酸乙酯，實(shí)施例5-1異構(gòu)體2(3.9mg，1％)。異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)在表3中。表2原料和中間體的表征數(shù)據(jù)和商業(yè)來(lái)源生物活性實(shí)施例APhospho-ERK1/2測(cè)定使用AlphascreenSurefirephospho-ERK1/2測(cè)定實(shí)施功能測(cè)定(Crouch和Osmond，Comb.Chem.HighThroughputScreen，2008)。ERK1/2磷酸化是Gq/11和Gi/o蛋白偶聯(lián)受體活化兩者的下游后果，使得其非常適用于評(píng)估M1、M3(Gq/11偶聯(lián))和M2、M4受體(Gi/o偶聯(lián))，而不是對(duì)不同受體亞型使用不同測(cè)定形式。穩(wěn)定表達(dá)人毒蕈堿M1、M2、M3或M4受體的CHO細(xì)胞涂鋪(25K/孔)在96孔組織培養(yǎng)板上MEM-α+10％透析的FBS中。一旦附著，將細(xì)胞血清饑餓過(guò)夜。通過(guò)向細(xì)胞加入5μL激動(dòng)劑5min(37℃)，實(shí)施激動(dòng)劑刺激。去除培養(yǎng)基，并加入50μL裂解緩沖液。15min后，將4μL樣品轉(zhuǎn)移至384孔板，并加入7μL檢測(cè)混合物。將板在輕輕攪拌下在暗處溫育2h，然后在PHERAstar讀板器上讀數(shù)。由每個(gè)受體亞型所得到的數(shù)據(jù)計(jì)算pEC50和Emax數(shù)字。結(jié)果列于以下表4中。每個(gè)實(shí)例存在已分離的兩種非對(duì)映體，除非另外指出，并根據(jù)它們?cè)贚CMS分析蹤跡上的滯留時(shí)間進(jìn)行指定。在大多數(shù)實(shí)例中，異構(gòu)體1無(wú)活性?；钚援悩?gòu)體的分析數(shù)據(jù)報(bào)告于表3中。若干弱活性化合物的數(shù)據(jù)包括在表4中，以突出顯示絕對(duì)立體化學(xué)的傾向。*-變量結(jié)果，NT-未測(cè)試實(shí)施例B被動(dòng)回避按Foley等人，(2004)Neuropsychopharmacology之前描述進(jìn)行研究。在被動(dòng)回避任務(wù)中，在訓(xùn)練后6小時(shí)的莨菪堿施用(1mg/kg，i.p.)使動(dòng)物遺忘該范式。檢查在訓(xùn)練期之前90分鐘通過(guò)經(jīng)口灌胃施用的3、10和30mg/kg(po)游離堿的劑量范圍。發(fā)現(xiàn)實(shí)施例1-33異構(gòu)體2以劑量依賴性方式逆轉(zhuǎn)莨菪堿誘導(dǎo)的范式遺忘癥，其近似ED50為約10mg/kg(po)。30mg/kg的作用類(lèi)似于用作陽(yáng)性對(duì)照的膽堿酯酶抑制劑多奈哌齊(0.1mg/kg，ip)產(chǎn)生的作用(圖1)。實(shí)施例C新型測(cè)試化合物和呫諾美林對(duì)于大鼠中d-苯丙胺誘導(dǎo)的多動(dòng)的作用研究目的是檢查新型測(cè)試化合物對(duì)于大鼠中d-苯丙胺誘導(dǎo)的多動(dòng)的作用。精神分裂癥是一種復(fù)雜的多因素疾病，其無(wú)法由單一實(shí)驗(yàn)程序充分表示。通過(guò)d-苯丙胺引發(fā)的多動(dòng)(或快速移動(dòng))的抑制，評(píng)估了大鼠中的抗精神病樣行為。該程序?qū)εR床相關(guān)多巴胺受體拮抗劑敏感，因此被認(rèn)為適用于對(duì)比影響多巴胺能信號(hào)傳導(dǎo)的毒蕈堿激動(dòng)劑。采用之前觀察到顯著降低d-苯丙胺誘導(dǎo)的多動(dòng)的劑量的呫諾美林作為陽(yáng)性對(duì)照。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析通常涉及三方協(xié)方差分析或穩(wěn)健的回歸(以治療、日期和架子(rack)作為因素并以治療前30分鐘期間的活性作為協(xié)變量)，隨后進(jìn)行適合的多重比較檢驗(yàn)。＜0.05的P值被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性，因此在所有后續(xù)圖中均予以標(biāo)注。實(shí)施例1-21異構(gòu)體2、1-32異構(gòu)體2、1-33異構(gòu)體2、2-7異構(gòu)體2和2-17異構(gòu)體2的數(shù)據(jù)顯示于圖2中。實(shí)施例D藥物制劑(i)片劑制劑通過(guò)使50mg化合物與作為稀釋劑的197mg乳糖(BP)和作為潤(rùn)滑劑的3mg硬脂酸鎂混合并用已知的方式壓制成片來(lái)制備含有式(1)、(1a)或(1b)的化合物的片劑組合物。(ii)膠囊制劑通過(guò)使100mg式(1)、(1a)或(1b)的化合物與100mg乳糖和任選地1重量％的硬脂酸鎂混合并將所得混合物填充至標(biāo)準(zhǔn)不透明的硬明膠膠囊中來(lái)制備膠囊劑。等效內(nèi)容上述實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)被解釋為對(duì)本發(fā)明的范圍強(qiáng)加任何限制。在不脫離本發(fā)明的原理下，對(duì)上述的和實(shí)施例中說(shuō)明的本發(fā)明的具體實(shí)施方案做出各種修改和更改將是顯而易見(jiàn)的。所有此類(lèi)修改和更改均意圖由本申請(qǐng)所涵蓋。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3 當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3