本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黑莓渣粗多糖的制備方法。

背景技術(shù)：

黑莓(Cinnamomum cassia Presl)又名玉桂，為天然中藥材，至古并用于中藥、香料，黑莓皮和葉可提黑莓油，黑莓油芳香氣味獨(dú)特的，能殺菌、除臭。 已廣泛應(yīng)用于日化、醫(yī)藥 香料、 食品、農(nóng)藥化學(xué)品等領(lǐng)域； 用作調(diào)味品、 食品添加劑， 有健脾胃與促進(jìn)食欲的作用。

我國(guó)黑莓資源非常豐富，年產(chǎn)桂油約2000 t以上， 所產(chǎn)生黑莓殘余枝葉 (黑莓渣)約20萬(wàn)t， 基本廢棄或用于燃燒， 造成資源浪費(fèi)， 而目前對(duì)黑莓殘余枝葉的研究還非常少見。

黑莓皮和葉提取物化學(xué)成分非常復(fù)雜， 其中包含有很多生物活性物質(zhì)如萜類、 多糖類、 酚類、 皂苷、 黃酮等， 具有抗氧化、 抗糖尿病、 抗腫瘤、 抗菌抗炎、 抗高尿酸、 抗哮喘等功效。

黑莓葉渣中依然含有多種活性物質(zhì)且具有一定的藥物作用。 以黑莓渣為原料開發(fā)富含多種活性物質(zhì)、 健胃消食、 促進(jìn)食欲、 提高免疫力的特色飼料添加劑， 開創(chuàng)飼料資源的新途徑， 具有重要的現(xiàn)實(shí)性和緊迫性。研究表明，黑莓渣含多糖達(dá)24.2%， 體內(nèi)抗腫瘤試驗(yàn)結(jié)果表明對(duì)腫瘤有一定的抑制作用。

現(xiàn)有多糖的制備方法，有水提法、堿提法及酶解法等，各有優(yōu)缺點(diǎn)，雖然工藝條件溫和，低能耗、無(wú)污染，但提取率不夠理想，多糖易損失，影響產(chǎn)物產(chǎn)量，導(dǎo)致總體經(jīng)濟(jì)效益并不高。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是彌補(bǔ)現(xiàn)有黑莓渣多糖制備方法的不足，提供一種黑莓渣多糖粗制備方法，該工藝在結(jié)合現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步科學(xué)合理地進(jìn)行改良，提高最終產(chǎn)物的產(chǎn)量及純度。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn) ：

一種黑莓渣粗多糖的制備方法，其具體步驟如下所述 ：

⑴準(zhǔn)備原料 ：提取黑莓香料后干凈的黑莓渣，低溫干燥，粉碎過 50 ～ 80 目篩后，作為原料 ；

⑵熱水處理 ：將原料直接投入多功能浸提器中，加入 15 倍量的蒸餾水，攪拌均勻，于 85℃的條件下浸提 1.5 ～ 2.0h，過濾分離，得第一次浸提濾液，殘?jiān)尤?10 倍量的蒸餾水，攪拌均勻，于 95℃的條件下浸提 1 ～ 1.5h, 過濾分離，得第二次浸提濾液 ；合并兩次浸提濾液 ；

⑶酶解處理 ：殘?jiān)尤?15 倍量的蒸餾水中，攪拌均勻，加入黑莓渣量 3% ～ 5% 的復(fù)合酶 （ 復(fù)合酶包括 1.5% ～ 2.5% 的沙雷肽酶和 1.5% ～ 3% 的木瓜蛋白酶），于溫度為 45 ～55℃，pH為 6.5～ 7的條件下，酶解 1～ 1.5h，然后迅速升溫至 98℃滅酶，并保溫浸提 0.5～1h，離心分離，得浸提液，回收殘?jiān)硇刑幚?；

⑷濃縮處理 ：將⑵和⑶所得浸提液合并后，低溫減壓濃縮至原料液體積的 1/6 ～1/4，得濃縮液 ；

⑸脫色處理 ：將濃縮液加入脫色釜中，在 40℃、pH 為 3 ～ 4 的條件下，加入 1.5% ～2.5% 的糖用脫色活性炭，攪拌均勻，脫色 15 ～ 20min，趁熱過濾，得脫色液，回收活性炭 ；

⑹醇析處理 ：將脫色液加入醇析釜中，邊攪拌邊緩緩加入 3 ～ 4 倍量的無(wú)水乙醇，靜置過夜，抽濾得沉析物為大黑莓粗多糖，再用丙酮、無(wú)水乙醚依次洗滌，收集液相及洗液 ；

⑺冷干處理 ：將洗滌后的大黑莓多糖沉析物于低溫減壓條件下，冷凍干燥，得到大黑莓粗多糖。

本發(fā)明的有益效果為 ：

本發(fā)明適當(dāng)結(jié)合傳統(tǒng)水提法及新技術(shù)復(fù)合酶解法，合理改進(jìn)，既減少了多糖損失，相應(yīng)的提高了提取率，又提高了多糖純度，方便了后續(xù)多糖純化過程，還具有工藝條件溫和、低能耗、高效率的特點(diǎn)。

具體實(shí)施方式

結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明進(jìn)行闡述，對(duì)本發(fā)明不構(gòu)成限制。

實(shí)施例 1

⑴準(zhǔn)備原料 ：提取黑莓香料后干凈的黑莓渣，低溫干燥，粉碎過 50 目篩后，作為原料 ；

⑵熱水處理 ：將原料直接投入多功能浸提器中，加入 15 倍量的蒸餾水，攪拌均勻，于 85℃的條件下浸提 2.0h，過濾分離，得第一次浸提濾液，殘?jiān)尤?10 倍量的蒸餾水，攪拌

均勻，于 95℃的條件下浸提 1.5h, 過濾分離，得第二次浸提濾液 ；合并兩次浸提濾液 ；

⑶酶解處理 ：殘?jiān)尤?15 倍量的蒸餾水中，攪拌均勻，加入黑莓渣量 3% 的復(fù)合酶（ 復(fù)合酶包括 1.5% 的沙雷肽酶和 1.5% 的木瓜蛋白酶），于溫度為 55℃，pH 為 7 的條件下，酶解 1.5h，然后迅速升溫至 98℃滅酶，并保溫浸提 0.5h，離心分離，得浸提液，回收殘?jiān)硇刑幚?；

⑷濃縮處理 ：將⑵和⑶所得浸提液合并后，低溫減壓濃縮至原料液體積的 1/4，得濃縮液 ；

⑸脫色處理 ：將濃縮液加入脫色釜中，在 40℃、pH 為 3 的條件下，加入 1.5% 的活性炭，攪拌均勻，脫色 20min，趁熱過濾，得脫色液，回收活性炭 ；

⑹醇析處理 ：將脫色液加入醇析釜中，邊攪拌邊緩緩加入 4 倍量的無(wú)水乙醇，靜置過夜，抽濾得沉析物為大黑莓粗多糖，再用丙酮、無(wú)水乙醚依次洗滌，收集液相及洗液 ；

⑺冷干處理 ：將洗滌后的大黑莓多糖沉析物于低溫減壓條件下，冷凍干燥，得到大黑莓粗多糖。

實(shí)施例 2

⑴準(zhǔn)備原料 ：提取黑莓香料后干凈的黑莓渣，低溫干燥，粉碎過 60 目篩后，作為原料 ；

⑵熱水處理 ：將原料直接投入多功能浸提器中，加入 15 倍量的蒸餾水，攪拌均勻，于 85℃的條件下浸提 1.5h，過濾分離，得第一次浸提濾液，殘?jiān)尤?10 倍量的蒸餾水，攪拌均勻，于 95℃的條件下浸提 1h, 過濾分離，得第二次浸提濾液 ；合并兩次浸提濾液 ；

⑶酶解處理 ：殘?jiān)尤?15 倍量的蒸餾水中，攪拌均勻，加入黑莓渣量 4% 的復(fù)合酶（ 復(fù)合酶包括 2% 的沙雷肽酶和 2% 的木瓜蛋白酶），于溫度為 50℃，pH 為 6.8 的條件下，酶解1.5h，然后迅速升溫至 98℃滅酶，并保溫浸提 0.5h，離心分離，得浸提液，回收殘?jiān)硇刑幚?；

⑷濃縮處理 ：將⑵和⑶所得浸提液合并后，低溫減壓濃縮至原料液體積的 1/5，得濃縮液 ；

⑸脫色處理 ：將濃縮液加入脫色釜中，在 40℃、pH 為 3.5 的條件下，加入 2% 的活性

炭，攪拌均勻，脫色 20min，趁熱過濾，得脫色液，回收活性炭 ；

⑹醇析處理 ：將脫色液加入醇析釜中，邊攪拌邊緩緩加入 3.5 倍量的無(wú)水乙醇，靜置過夜，抽濾得沉析物為大黑莓粗多糖，再用丙酮、無(wú)水乙醚依次洗滌，收集液相及洗液 ；

⑺冷干處理 ：將洗滌后的大黑莓多糖沉析物于低溫減壓條件下，冷凍干燥，得到大黑莓粗多糖。

實(shí)施例 3

一種黑莓渣粗多糖的制備方法，其具體步驟是：

⑴準(zhǔn)備原料 ：提取黑莓香料后干凈的黑莓渣，低溫干燥，粉碎過 80 目篩后，作為原料 ；

⑵熱水處理 ：將原料直接投入多功能浸提器中，加入 15 倍量的蒸餾水，攪拌均勻，于 85℃的條件下浸提 1.5h，過濾分離，得第一次浸提濾液，殘?jiān)尤?10 倍量的蒸餾水，攪拌

均勻，于 95℃的條件下浸提 1h, 過濾分離，得第二次浸提濾液 ；合并兩次浸提濾液 ；

⑶酶解處理 ：殘?jiān)尤?15 倍量的蒸餾水中，攪拌均勻，加入黑莓渣量 5% 的復(fù)合酶（ 復(fù)合酶包括 2.5% 的沙雷肽酶和 2.5% 的木瓜蛋白酶），于溫度為 55℃，pH 為 7 的條件下，酶解 1.5h，然后迅速升溫至 98℃滅酶，并保溫浸提 0.5h，離心分離，得浸提液，回收殘?jiān)硇刑幚?；

⑷濃縮處理 ：將⑵和⑶所得浸提液合并后，低溫減壓濃縮至原料液體積的 1/6，得濃縮液 ；

⑸脫色處理 ：將濃縮液加入脫色釜中，在 40℃、pH 為 4 的條件下，加入 2.5% 的活性炭，攪拌均勻，脫色 15min，趁熱過濾，得脫色液，回收活性炭 ；

⑹醇析處理 ：將脫色液加入醇析釜中，邊攪拌邊緩緩加入 4 倍量的無(wú)水乙醇，靜置過夜，抽濾得沉析物為大黑莓粗多糖，再用丙酮、無(wú)水乙醚依次洗滌，收集液相及洗液 ；

⑺冷干處理 ：將洗滌后的大黑莓多糖沉析物于低溫減壓條件下，冷凍干燥，得到大黑莓粗多糖。