1.一種用于藥物級(jí)核酸pDNA疫苗規(guī)?；苽涞馁|(zhì)粒純化方法，其特征是聯(lián)合應(yīng)用了顆粒介質(zhì)液相分離系統(tǒng)與的整體柱液相層析分離系統(tǒng)，所述方法包括以下步驟：1)對(duì)宿主大腸桿菌的堿裂解液進(jìn)行超濾濃縮；2)在中壓液相層析分離裝置中，將濃縮裂解液加載到顆粒介質(zhì)凝膠過濾柱進(jìn)行層析分離，收集第一峰質(zhì)粒組分，去除后續(xù)的RNA大峰；3)將所得質(zhì)粒組分加載到CIM C4疏水整體柱或氨基酸-DNA親和整體柱進(jìn)行層析分離，洗滌去除主要雜質(zhì)，洗脫收集超螺旋質(zhì)粒組分；4)將所得超螺旋質(zhì)粒組分加載到CIM DEAE離子交換整體柱進(jìn)行層析分離，洗滌去除殘留雜質(zhì)，洗脫收集得到純化的超螺旋質(zhì)粒組分。
2.如權(quán)利要求1所述的聯(lián)合液相層析質(zhì)粒純化方法，其中第1)步所述超濾濃縮采用截留分子量100kD-500kD的常規(guī)超濾裝置，將細(xì)菌堿裂解液濃縮5-10倍。
3.如權(quán)利要求2所述的質(zhì)粒純化方法，其中所述常規(guī)超濾裝置選自PES或改性PES材質(zhì)制成的切向流中空纖維超濾裝置。
4.如權(quán)利要求2所述的質(zhì)粒純化方法，其中所述超濾濃縮過程中通過滲濾洗濾將細(xì)菌裂解液濃縮8-10倍。
5.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)粒純化方法，其中第2)步采用的顆粒介質(zhì)凝膠是高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠介質(zhì)，凝膠過濾柱的平衡和洗滌液為TE液，加載的濃縮裂解液體積為柱體積的10-35％。
6.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)粒純化方法，其中第3)步和第4)步先分別測(cè)定所加載質(zhì)粒組分液體中的質(zhì)粒含量，根據(jù)第3)步CIM C4疏水整體柱或氨基酸-DNA親和整體柱和第4)步CIM DEAE離子交換整體柱的核酸總載量，分別計(jì)算出所加載的上一步質(zhì)粒組分液的體積，再將該體積的質(zhì)粒組分液加載相對(duì)應(yīng)整體柱進(jìn)行層析分離去除雜質(zhì)。
7.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)粒純化方法，其中第3)步先在所得質(zhì)粒組分中加入固體或高濃度硫酸銨溶解至硫酸銨終濃度2.5-3.0M，再加載到2.5-3.0M硫酸銨-TE液平衡的CIM C4疏水整體柱或氨基酸-DNA親和整體柱，采用相對(duì)中濃度的硫酸銨-TE液洗滌去除雜質(zhì)，采用相對(duì)低濃度的硫酸銨-TE液洗脫收集超螺旋質(zhì)粒組分。
8.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)粒純化方法，其中第4)步先用純凈水或TE液稀釋所得超螺旋質(zhì)粒組分，再加載到TE液平衡的CIM DEAE離子交換整體柱，采用低濃度NaCl-TE液洗滌去除所有殘留雜質(zhì)，采用中濃度NaCl-TE液洗脫收集得到純化的超螺旋質(zhì)粒組分。
9.如權(quán)利要求1所述的質(zhì)粒純化方法，其中所述超濾濃縮裝置、顆粒介質(zhì)凝膠過濾柱、CIM C4疏水整體柱、氨基酸-DNA親和整體柱和CIM DEAE離子交換整體柱分別連續(xù)使用2-3次，然后經(jīng)“清潔”和“再生”處理后重新使用。