1.Ca2+在促進(jìn)CELI酶活性中的應(yīng)用;
或Ca2+在制備CELI酶酶切緩沖液或CELI酶酶切緩沖體系中的應(yīng)用。
2.含有Ca2+的CELI酶酶切緩沖液,其特征在于:所述Ca2+在所述CELI酶酶切緩沖液中的濃度為0.5-50mM。
3.一種酶切反應(yīng)體系,包括權(quán)利要求2所述的含有Ca2+的CELI酶酶切緩沖液和CELI酶。
4.一種CELI酶試劑盒,為如下(1)或(2):
(1)權(quán)利要求2所述的酶切緩沖液;
(2)權(quán)利要求2所述的酶切緩沖液和CELI酶。
5.權(quán)利要求2所述的酶切緩沖液或權(quán)利要求3所述的酶切反應(yīng)體系或權(quán)利要求4所述的試劑盒在促進(jìn)CELI酶切割含有錯(cuò)配位點(diǎn)DNA中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求2所述的酶切緩沖液或權(quán)利要求3所述的酶切反應(yīng)體系或權(quán)利要求4所述的試劑盒在檢測(cè)待測(cè)DNA分子是否含有錯(cuò)配位點(diǎn)中的應(yīng)用。
7.一種用CELI酶酶切含有錯(cuò)配位點(diǎn)DNA的方法,包括如下步驟:將含有錯(cuò)配位點(diǎn)DNA和野生型DNA在權(quán)利要求3所述的酶切反應(yīng)體系中進(jìn)行酶切反應(yīng),實(shí)現(xiàn)酶切;
所述含有錯(cuò)配位點(diǎn)DNA和野生型DNA的質(zhì)量比為1:(1-24)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于:所述含有錯(cuò)配位點(diǎn)DNA和野生型DNA的質(zhì)量比為1:(12-24)。
9.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的應(yīng)用或權(quán)利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述錯(cuò)配位點(diǎn)的錯(cuò)配形式為AA、AG、AC、GG、GT、CC、CT和/或TT。
10.權(quán)利要求2所述的酶切緩沖液或權(quán)利要求3所述的酶切反應(yīng)體系或權(quán)利要求4所述的試劑盒或權(quán)利要求7-9中任一所述的方法在低豐度突變體檢測(cè)中的應(yīng)用。