本發(fā)明屬于生物能源技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及縮短制備生物柴油小球藻生長周期的方法。

背景技術(shù)：

生物質(zhì)能作為一種低碳燃料，是可再生能源中理想的清潔燃料之一。在眾多生物質(zhì)中，藻類具有光合作用效率高、生長周期短、生物產(chǎn)量高的特點，同時藻類在水中生長，不占用農(nóng)業(yè)用地，其養(yǎng)殖過程可以實現(xiàn)自動化控制是制備生物質(zhì)能源的良好材料。國際上微型藻類已進入商品性生產(chǎn)，東亞和東歐地區(qū)以及我國臺灣省以生產(chǎn)柵藻和小球藻為主；墨西哥等國則建立多條螺旋藻生產(chǎn)線。在此基礎(chǔ)上若能使微藻的生物周期在原有的周期上縮短，更利于工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

針對現(xiàn)有技術(shù)的需要，本發(fā)明的目的是提供一種縮短制備生物柴油小球藻生長周期的方法，采用本方法可使小球藻的有絲分裂周期及生長速度改變，增加單位時間內(nèi)單位面積的小球藻生物量。

為達到以上目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：縮短制備生物柴油小球藻生長周期的方法，包括以下步驟：(1)從不同水體中采集小球藻藻種；(2)在小球藻自然生長條件下培養(yǎng)藻種，直至小球藻的OD₆₀₀值達到最大值，此時的小球藻進入對數(shù)生長穩(wěn)定期，獲取培養(yǎng)基；(3)向培養(yǎng)基中加入用量為培養(yǎng)基總重量的5-8ppm的激動素，繼續(xù)培養(yǎng)4-6小時后，再加入用量為培養(yǎng)基總重量的0.5-0.7ppm的植物生長素A，繼續(xù)培養(yǎng)4-6小時后，再加入用量為培養(yǎng)基總重量的0.3-0.5ppm的植物生長素B，繼續(xù)培養(yǎng)，直至小球藻的OD₆₀₀值再次達到最大值，滿足培養(yǎng)要求。

進一步，步驟(3)中，激動素為6-呋喃氨基嘌呤(KT)。

進一步，步驟(3)中，植物生長素A為吲哚酸類物質(zhì)。

再進一步，所述吲哚酸類物質(zhì)選自吲哚乙酸、吲哚丙酸、吲哚-3-丁酸等所組成的組。

進一步，步驟(3)中，植物生長素B為赤霉素、赤霉素衍生物或其組合。

再進一步，所述赤霉素選自GA₁、GA₂、GA₃和GA₇等赤霉素的一種或多種所組成的組。

本發(fā)明通過在小球藻培養(yǎng)基中加入不同配比的激動素和植物生長素，改變了小球藻的有絲分裂周期及生長速度，使單位時間內(nèi)單位面積的小球藻生物量(以O(shè)D₆₀₀值計)增加，可用于提煉更多的生物柴油。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明作進一步描述。

實施例1

從不同的水體中采集小球藻藻種；在小球藻自然生長的條件不變前提下，將分離出的藻種培養(yǎng)，直至小球藻的生物量OD₆₀₀值達到最大值時，即小球藻進入對數(shù)生長期后，獲取2ml的培養(yǎng)基；向培養(yǎng)基中先加入約為培養(yǎng)基總含量5ppm的激動素6-呋喃氨基嘌呤(KT)，使小球藻培養(yǎng)時間約4小時后，再加入約為培養(yǎng)基總含量0.5ppm的吲哚乙酸(IAA)，培養(yǎng)約4小時，再加入約為培養(yǎng)基總含量0.3ppm的赤霉素GA₁，繼續(xù)培養(yǎng)，通過電鏡觀察，當(dāng)單個小球藻長到直徑約為5μm時，通過分光光度計測量小球藻的生物量OD₆₀₀值，且不再增高，即達到培養(yǎng)要求。

經(jīng)檢測，本實施例在相同的培養(yǎng)時間內(nèi)最終獲得的小球藻的生物量OD₆₀₀值比最初測定的OD₆₀₀值增大了4倍左右。收獲小球藻的時間比正常培養(yǎng)時縮短了2倍。

實施例2

從不同的水體中采集小球藻藻種；在小球藻自然生長的條件不變前提下，將采集的藻種培養(yǎng)8-10小時左右，至小球藻的生物量OD₆₀₀值達到最大值，即小球藻進入對數(shù)生長期后，獲取2ml的培養(yǎng)基進行測量；向培養(yǎng)基中先加入約為培養(yǎng)基總含量6pm的激動素6—呋喃氨基嘌呤(KT)，使小球藻培養(yǎng)時間約5小時后，再加入約為培養(yǎng)基總含量0.6ppm的吲哚丙酸，培養(yǎng)約5小時，再加入約為培養(yǎng)基總含量0.4ppm的赤霉素GA₂，繼續(xù)培養(yǎng)約5小時，通過電鏡觀察，當(dāng)單個小球藻長到約大小直徑約4-7μm時，通過分光光度計測量小球藻的生物量OD₆₀₀值，且不再增高，即達到培養(yǎng)要求。

經(jīng)檢測，本實施例最終獲得的小球藻的生物量OD₆₀₀值比最初測定的OD₆₀₀值增大了4倍。收獲小球藻的時間比正常培養(yǎng)時縮短了2倍。產(chǎn)油量增加了3倍左右。

實施例3

從不同的水體中采集小球藻藻種；在小球藻自然生長的條件不變前提下，將分離出的藻種再接著培養(yǎng)4小時左右，至小球藻的生物量OD₆₀₀值達到最大值，即小球藻進入對數(shù)生長期后，獲取2ml的培養(yǎng)基進行測量；向培養(yǎng)基中先加入約為培養(yǎng)基總含量8ppm的激動素6—呋喃氨基嘌呤(KT)，使小球藻培養(yǎng)時間約6小時后，再加入約為培養(yǎng)基總含量0.7ppm的吲哚-3-丁酸，培養(yǎng)約6小時，再加入約為培養(yǎng)基總含量0.5ppm的GA₃和GA₇(摩爾比1:1)等赤霉素及其衍生物中的一種或多種，繼續(xù)培養(yǎng)約6小時，通過電鏡觀察，當(dāng)單個小球藻長至直徑約4-7μm時，通過分光光度計測量小球藻的生物量OD₆₀₀值，且不再增高，即達到培養(yǎng)要求。

經(jīng)檢測，本實施例在相同時間內(nèi)最終獲得的小球藻的生物量OD₆₀₀值比最初測定的OD₆₀₀值增大了4倍左右。收獲小球藻的時間比正常培養(yǎng)縮短了2倍，產(chǎn)油量增加了3倍左右。

上述實施例只是對本發(fā)明的舉例說明，本發(fā)明也可以以其它的特定方式或其它的特定形式實施，而不偏離本發(fā)明的要旨或本質(zhì)特征。因此，描述的 實施方式從任何方面來看均應(yīng)視為說明性而非限定性的。本發(fā)明的范圍應(yīng)由附加的權(quán)利要求說明，任何與權(quán)利要求的意圖和范圍等效的變化也應(yīng)包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。