本發(fā)明涉及一種抗腫瘤化合物，具體涉及一種新型胞苷衍生物二聚體及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：惡性腫瘤是威脅人類健康的常見疾病之一，腫瘤死亡率居于各種疾病之首。目前臨床使用的抗腫瘤藥物，其毒性是困擾腫瘤化療的突出問題。提高腫瘤治療效果同時(shí)降低藥物毒性，是當(dāng)前治療腫瘤藥物的重要研究課題?，F(xiàn)有的胞苷化合物主要用于治療血液腫瘤，也有用于實(shí)體腫瘤的胞苷化合物，但是存在毒性大、適用范圍窄、效果差的問題。另外，對于現(xiàn)有的胞苷化合物人體易產(chǎn)生抗藥性，治療失敗，導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種高效能、高活性同時(shí)毒副作用低的新型胞苷衍生物二聚體及其應(yīng)用。實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的的技術(shù)方案是一種新型胞苷衍生物二聚體，具有下述通式(Ⅰ)：其中，R1是C1至C10的烷基、C1至C10的取代烷基、-(CH2)n-Ph、或取代-(CH2)n-Ph；所述的-(CH2)n-Ph，其中n＝0、1、2、3～10，Ph為苯環(huán)；所述的取代烷基，其碳鏈上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代；所述的取代-(CH2)n-Ph，其中n＝0、1、2、3～10，其碳鏈上或苯環(huán)上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代。優(yōu)選為C1至C10的烷基或者-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3～10；進(jìn)一步優(yōu)選為C1至C4的烷基或者-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3；更進(jìn)一步優(yōu)選為正丁基或者芐基。R2是C1至C10的烷基、C1至C10的取代烷基、-(CH2)n-Ph、或取代-(CH2)n-Ph；所述的-(CH2)n-Ph，其中n＝0、1、2、3～10；所述的取代烷基，其碳鏈上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代；所述的取代-(CH2)n-Ph，其中n＝0、1、2、3～10，其碳鏈上或苯環(huán)上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代。優(yōu)選為C1至C10的烷基或者-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3～10；進(jìn)一步優(yōu)選為C1至C4的烷基或者-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3；更進(jìn)一步優(yōu)選為正丁基或者芐基。作為再進(jìn)一步的優(yōu)選，R1與R2相同。R3是H、烷氧羰基、取代烷氧羰基，所述的取代烷氧羰基的取代基為鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基；優(yōu)選為H或者烷氧羰基；進(jìn)一步優(yōu)選為H或者正丁氧羰基。R4是H、烷氧羰基、或取代烷氧羰基，所述的取代烷氧羰基的取代基為鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基；優(yōu)選為H或者烷氧羰基；進(jìn)一步優(yōu)選為H或者正丁氧羰基。作為再進(jìn)一步的優(yōu)選，R3和R4均為H。R5是-(CH2)n-，其中n＝1至15，或者是碳鏈上有取代基的-(CH2)n-，所述的取代基是苯基、取代苯基、鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、羧基，或者是-(CH2)n-X1-X2-；所述的-(CH2)n-X1-X2-，其中n＝0、1、2或3，X1是O、S，X2是-(CH2)n–Ph，其中n＝0、1、2或3，或者X2是嘧啶基、吡喃基、咪唑基、吡嗪基或吡啶基；優(yōu)選為-(CH2)n-，n＝1至15或者-(CH2)n-X1-X2-，n＝0、1、2或3，X1為O、S，X2為Ph；進(jìn)一步優(yōu)選為-(CH2)n-，n＝1至5或者-(CH2)-O-Ph-；更進(jìn)一步優(yōu)選為-(CH2)2-或者-(CH2)3-。上述的新型胞苷衍生物二聚體或其鹽在制備抑制腫瘤的藥物中的應(yīng)用。所述腫瘤為血液腫瘤或惡性實(shí)體性腫瘤。一種藥物組合物，其中含有作為活性成分的通式(Ⅰ)所示的胞苷衍生物二聚體或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及一種或多種藥用載體或賦形劑。所述組合物的劑型是注射劑，或者是口服劑型，其中口服劑型包括片劑、散劑、顆粒劑、膠囊劑、微丸制劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、糖漿劑或酏劑；注射劑包括溶液型注射劑、混懸型注射劑、乳劑型注射劑、或注射用無菌粉末。一種如上所述的新型胞苷衍生物二聚體的制備方法，包括以下步驟：①制備通式(Ⅱ)的化合物，②制備通式(Ⅲ)的化合物，③將通式(Ⅱ)的化合物與碳酸鈉混合加入到1,4-二氧六環(huán)和水的體系中，然后加入(Boc)2O，TLC檢測，待反應(yīng)結(jié)束后萃取洗滌，干燥后減壓濃縮至干；將得到的化合物加入到三氯甲烷中，加入吡啶和二酸酐R5(CO)2O，反應(yīng)過夜，濃縮得黏稠油，柱層析得到通式(Ⅳ)化合物待用；④將得到的通式(Ⅳ)化合物與通式(Ⅲ)化合物、DCC混合后加入到二氯甲烷中，加入DMAP，TLC檢測，待反應(yīng)結(jié)束后洗滌干燥，濃縮至干，再加入TFA和DCM，室溫?cái)嚢?，冰浴冷卻后濾去白色固體，濃縮得黏稠油，柱層析得到產(chǎn)物。本發(fā)明還涉及癌癥的治療，具體地說，本發(fā)明針對治療患有腫瘤的受試者，包括哺乳動(dòng)物，尤其是人類，通過在一段時(shí)間內(nèi)對受試者施用達(dá)到有效治療劑量的新型化合物(I)，產(chǎn)生抗腫瘤的效果。按照最廣泛的定義，癌癥一般指惡性贅生物(neoplasm)，是一種異常的組織，其生長速度與正常組織不同，并在誘發(fā)刺激停止后，持續(xù)以相同的方式過度生長。另 外，這種異常組織沒有目的，吸取宿主的營養(yǎng)，并且?guī)缀跏亲灾蔚摹０┌Y也可以指惡性腫瘤(neoplasm)，關(guān)于neoplasm的進(jìn)一步討論可以參照羅賓斯病理學(xué)基礎(chǔ)RobbinsPathologicBasisofDisease一書第六版第八章，作者是R.S.Cotran,V.Kumar,和T.CollinsRSCotran(由W.B.SaundersCompany出版)。該書第8章的信息在此被引用作為參考。通過施用本發(fā)明的化合物可治療的癌癥，例如惡性腫瘤或贅生物的類型的示例。本發(fā)明的新型化合物可以有效治療贅生物，包括白血病和實(shí)體瘤等。實(shí)體腫瘤包括結(jié)腸，結(jié)腸，直腸，卵巢，乳腺，前列腺，肺，腎和黑素瘤腫瘤。藥物劑量范圍取決于給藥途徑和患者的年齡，體重和病人的狀況?；衔锏慕o藥方式可通過腸胃外途徑，包括肌內(nèi)注射，靜脈內(nèi)注射或靜脈推注。本文所指的患者或受試者是患有癌癥或其它疾病的脊椎動(dòng)物。優(yōu)選地，受試者是溫血?jiǎng)游?，特別是哺乳動(dòng)物，包括人類和非人類哺乳動(dòng)物。非人哺乳動(dòng)物的實(shí)例包括但不限于農(nóng)場動(dòng)物，如牛，綿羊，豬，山羊，馬，和美洲駝，和寵物，如狗和貓。更優(yōu)選地，受試者是人。本發(fā)明通過在一段時(shí)間內(nèi)對受試者施用達(dá)到有效治療劑量的化合物，產(chǎn)生抗腫瘤的效果。對于哺乳動(dòng)物，包括人來說，有效量可以根據(jù)體表面積確定。E.J.Freireich等人在CancerChemother.Rep.,50(4):219(1966)中說明了劑量大小根據(jù)不同尺寸或種類的動(dòng)物和人類(在體表面積mg/m2的基礎(chǔ)上)而改變的關(guān)系。體表面積可根據(jù)個(gè)體的身高和體重大致確定(例如參考ScientificTables,Geigyharmaceuticals,Ardsley,N.Y.pp.537-538(1970))。合適的劑量范圍可以是平均每平方米的體表面積使用本發(fā)明化合物1至1000毫克。也就是說，劑量為50-500mg/m2。本發(fā)明具有積極的效果：(1)本發(fā)明通過對胞苷化合物進(jìn)行分子優(yōu)化設(shè)計(jì)，制備的新型的胞苷衍生物二聚體對人結(jié)腸癌HCT-116腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用，同時(shí)對荷瘤裸小鼠人結(jié)腸癌HCT-116移植瘤具有強(qiáng)烈的生長抑制作用；本發(fā)明的新型胞苷衍生物二聚體化合物的抗腫瘤活性非常高，同時(shí)化合物的毒性很低。附圖說明圖1為實(shí)施例1的胞苷衍生物二聚體的合成路線圖，圖中TBSCl為叔丁基二甲基氯硅烷，pyr為吡啶，DCM為二氯甲烷，rt為室溫，butylcarbonochloridate為氯甲酸丁酯，HF.Et3N為三乙胺三氫氟酸鹽，overnight為過夜，DCC為N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺，DMAP為4-二甲氨基吡啶；圖2為實(shí)施例2的胞苷衍生物二聚體的合成路線圖，圖中HMDS為六甲基二硅 氮烷，reflux為回流，chloridate為氯化物，TEA為三乙胺，(Boc)2O為二碳酸二叔丁酯，dioxane為1,4-二氧六環(huán)，succinicanhydride為丁二酸酐，pyr為吡啶，DCC為N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺，DMAP為4-二甲氨基吡啶，TFA為三氟乙酸，DCM為二氯甲烷；圖3為實(shí)施例3的胞苷衍生物二聚體的合成路線圖，圖中HMDS為六甲基二硅氮烷，reflux為回流，chloridate為氯化物，TEA為三乙胺，(Boc)2O為二碳酸二叔丁酯，dioxane為1,4-二氧六環(huán)，Glutaricanhydride為戊二酸酐，pyr為吡啶，DCC為N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺，DMAP為4-二甲氨基吡啶，TFA為三氟乙酸，DCM為二氯甲烷；圖4為實(shí)施例4的胞苷衍生物二聚體的合成路線圖，圖中DCC為N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺，DMAP為4-二甲氨基吡啶，TFA為三氟乙酸，DCM為二氯甲烷；圖5為應(yīng)用例1的4種化合物在作用濃度為50nM,150nM和450nM對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞的克隆形成抑制率柱形圖；圖6為應(yīng)用例1的4種化合物對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞的抑制率與化合物濃度的關(guān)系曲線圖。具體實(shí)施方式本發(fā)明的胞苷衍生物二聚體的結(jié)構(gòu)式如式(Ⅰ)：其中R1為C1至C10的烷基、C1至C10的取代烷基、-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3～10或取代-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3～10，Ph為苯；取代烷基的碳鏈上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代；取代-(CH2)n-Ph的碳鏈上或苯環(huán)上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代。R2為C1至C10的烷基、C1至C10的取代烷基、-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3～10或取代-(CH2)n-Ph，n＝0、1、2、3～10，Ph為苯；取代烷基的碳鏈上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代；取代-(CH2)n-Ph的碳鏈上或苯環(huán)上獨(dú)立地由一個(gè)或兩個(gè)或三個(gè)鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基取代。R3為H、烷氧羰基、取代烷氧羰基，取代烷氧羰基的取代基為鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基。R4為H、烷氧羰基、取代烷氧羰基，取代烷氧羰基的取代基為鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基。R5為-(CH2)n-，n＝1至15?；蛘呤翘兼溕嫌腥〈?(CH2)n-，取代基為鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基或羧基?；蛘呤?(CH2)n-X1-X2-，n＝0、1、2或3；X1為O、S；X2為-(CH2)n–Ph，n＝0、1、2或3，或者X2為嘧啶基、吡喃基、吡啶基。對于本發(fā)明的胞苷衍生物二聚體，在表1中給出如下化合物，但本發(fā)明的胞苷衍生物二聚體不限于這些化合物。表1對上表中的化合物進(jìn)行制備，合成過程中所用到的固體試劑沒有經(jīng)過進(jìn)一步處理直接使用，液體試劑經(jīng)過重蒸干燥后使用。(實(shí)施例1)本實(shí)施例的胞苷衍生物二聚體為1.5–二–[4–N–正丁氧羰基–3’–O–正丁氧羰基-2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷]戊二酸酯(代號D1，表1中編號101)，結(jié)構(gòu)式如下：D1的合成路線見圖1，具體制備過程如下：將2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷鹽酸鹽(3g，10mmol)、咪唑(0.875g，12.8mmol)加入到10mL的無水吡啶中，冰浴降溫，在0℃下加入叔丁基二甲基氯硅烷(3.3g，21mmol，叔丁基二甲基氯硅烷以下簡稱TBSCl)，攪拌0.5h，升至室溫，繼續(xù)反應(yīng)12h，用甲醇(8.0mL)處理，攪拌60min后，減壓除去溶劑，得到化合物2。反應(yīng)體系繼續(xù)加入50mL二氯甲烷(DCM)和10ml吡啶，在冰浴和氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下加入氯甲酸丁酯(5.46g，40mmol)，室溫下攪拌反應(yīng)12h，旋干，殘留物溶于乙酸乙酯(100mL)，用冷飽和碳酸氫鈉溶液(30mLX2)、濃鹽水(30mL)洗滌；溶液使用無水硫酸鈉干燥3h并過濾，濾液經(jīng)柱層析(二氯甲烷/甲醇，40∶1)得到中間體3(3.6g，兩步產(chǎn)率62％)。將化合物3(3.6g,6.23mmol)加入到40mL四氫呋喃(THF)，冰浴降溫至0℃，慢慢加入三乙胺三氫氟酸鹽(HF.Et3N)4mL，反應(yīng)24h，將溶劑真空旋干得到橙色固體，直接過柱(二氯甲烷/甲醇，20∶1)得到化合物4(1.68g，產(chǎn)率58％)。將得到的中間體4(1.68g，3.62mmol)加入到30mL的三氯甲烷中，加入吡啶30mL，再加入戊二酸酐(620mg，5.44mmol)，將反應(yīng)攪拌過夜，再加入4-二甲氨基吡啶(DMAP，7mg,0.057mmol)后，攪拌3h，然后濃縮得黏稠油狀物，柱層析得到 化合物5(1.11g，產(chǎn)率53％)。將化合物5(58mg，0.1mmol)與化合物4(92mg，0.2mmol)、N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，42mg，0.2mmol)混合后加入到15mL二氯甲烷中，加入DMAP(6mg,0.049mmol)，反應(yīng)在24℃攪拌24h。TLC檢測，待反應(yīng)結(jié)束后加入50mL二氯甲烷，使用10mL水和20mL飽和食鹽水洗滌，使用無水硫酸鈉干燥，濃縮至干。柱層析(二氯甲烷/甲醇，20∶1)得到化合物6(49mg，產(chǎn)率48％)。1H-NMR(MeOD-d4,400MHz)δ：7.97(d,2H,J＝7.68Hz,H6-1,H6-2),7.40(d,2H,J＝7.68Hz,H5-1,H5-2),6.35(t,2H,J＝7.24Hz,H1'-1,H1'-2),4.47(m,6H,H5a'-1,H5a'-2,H5b'-1,H5b'-2,H4'-1,H4'-2),4.21(m,8H,O-CH2×4),2.53(t,4H,J＝7.16Hz,CH2-CH2-CH2),1.97(m,2H,CH2-CH2-CH2),1.64(m,8H,O-CH2-CH2×4),1.42(m,8H,O-CH2-CH2-CH2×4),0.98(m,12H,CH2-CH3×4)。13CNMR(MeOD-d4,100MHz)δ：172.83,164.51,153.87,144.53,96.26,77.52,69.13,65.89,61.94,32.42,30.66,30.47,18.83,18.67,12.79,12.74,8.48。ESIMS：calcdforC43H58F4N6O18m/z1023.37(M+H)+,found1023.66。按照上述合成路線，將戊二酸酐改為其他對應(yīng)的二酸酐，即可制備獲得表1中的化合物102至105。將氯甲酸叔丁酯替代氯甲酸丁酯，即可制得表1中化合物106。(實(shí)施例2)本實(shí)施例的胞苷衍生物二聚體為1.5-二-[4-N-正丁氧羰基-2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷]戊二酸酯(代號D2，表1中編號107)，結(jié)構(gòu)式如下：首先制備中間體8，反應(yīng)過程見圖2，制備過程如下：將300mg(1mmol)2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷鹽酸鹽(結(jié)構(gòu)式1)、5mL(0.023mmol)六甲基二硅氮烷HMDS，催化量硫酸銨5mg溶于5mL1,4-二氧六環(huán)中，加熱回流反應(yīng)2h，反應(yīng)產(chǎn)物化學(xué)結(jié)構(gòu)式為19。回流反應(yīng)結(jié)束后反應(yīng)液濃縮，向其中加入甲苯，濃縮至干2次，濃縮所得產(chǎn)物溶于10mL二氯甲烷中。向上述二氯甲烷溶液中加入0.24mL(3mmol)N-甲基咪唑、0.32mL(3mmol)氯甲酸丁酯，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4h，反應(yīng)液濃縮得粘稠油狀物。將上述粘稠油狀物溶于3mL三乙胺和20mL甲醇組成的混合溶液中，室溫?cái)嚢?h。減壓蒸餾除去溶劑，粗產(chǎn)品用硅膠層析柱純化，用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脫得到230mg的化合物7，三步反應(yīng)產(chǎn)率55.5％。化合物7核磁共振表征：1H-NMR(MeOD-d4，400MHz)δ：8.30(d，1H，J＝7.68Hz，H6)，7.34(d，1H，J＝7.68Hz，H5)，6.28(t，1H，J＝7.08Hz，H1')，4.33(m，1H，H5a')，4.0(m，2H，O-CH2-CH2-)，3.81(m，1H，H5b')，3.79(m，1H，H4')，1.68(m，2H，O-CH2-CH2-)，1.45(m，2H，O-CH2-CH2-CH2)，0.98(t，3H，J＝7.4Hz，-CH2-CH3)。13C-NMR(MeOD-d4，100MHz)δ：164.28，156.27，153.50，144.39，128.33，122.72，95.81，84.90，81.71，74.87，68.88，63.69，59.15，30.66，32.40，18.81，11.23，8.06。取60mg(0.16mmol)化合物7和106mg(1mmol)碳酸鈉，混合后加入到5mL1,4-二氧六環(huán)和水(體積比4∶1)的混合溶液中。向溶液中加入44mg(0.2mmol)二碳酸二叔丁酯(Boc)2O，然后在24℃下攪拌反應(yīng)，反應(yīng)過程中TLC檢測化合物7是否完全反應(yīng)完畢。待反應(yīng)結(jié)束后向反應(yīng)后的體系中加入2mL水稀釋，然后用乙酸乙酯萃取2次，每次用量30mL。萃取得到的有機(jī)相用5mL水和5mL飽和食鹽水依次洗滌，洗滌完畢無水硫酸鈉干燥，接著減壓濃縮至干；濃縮后用硅膠層析柱純化，用二氯甲烷/丙酮/甲醇(1∶1∶0.02)洗脫得到51mg的化合物8，上述反應(yīng)產(chǎn)率76％。D2的合成路線見圖2，制備過程如下：將得到的化合物8(223mg，0.25mmol)溶解到6mL的三氯甲烷中，加入吡啶5mL，再加入丁二酸酐(100mg，1mmol)，在45℃下反應(yīng)過夜，濃縮得黏稠油，柱層析(DCM-MeOH20∶1至10∶1)得到化合物9(211mg，產(chǎn)率75％)。將化合物9(56mg，0.1mmol)與化合物8(92mg，0.2mmol)、DCC(42mg，0.2mmol)混合后加入到15mL二氯甲烷中，加入DMAP(6mg,0.049mmol)，反應(yīng)在24℃攪拌24h。TLC檢測，待反應(yīng)結(jié)束后加入50mL二氯甲烷，使用10mL水和20mL飽和食鹽水洗滌，使用無水硫酸鈉干燥，濃縮至干。再加入三氟乙酸(TFA，5mL)和二氯甲烷(DCM，10mL)，室溫?cái)嚢?.5h；冰浴冷卻后濾去白色固體。濃縮得黏稠油，柱層析(DCM-MeOH20∶1至10∶1)得到產(chǎn)物D2(30mg，產(chǎn)率35％)。1H-NMR(MeOD-d4,400MHz)δ7.85(d,2H,J＝7.68Hz,H6-1,H6-2),7.37(d,2H,J＝7.68Hz,H5-1,H5-2),6.26(t,2H,J＝7.24Hz,H1'-1,H1'-2),4.53(m,2H,H5a'-1,H5a'-2), 4.40(m,4H,H5b'-1,H5b'-2,H4'-1,H4'-2),4.20(m,2H,H3-1,H3-2),2.73(m,4H,-CH2-CH2-),1.64(m,4H,O-CH2-CH2),1.37(m,4H,O-CH2-CH2-CH2),0.93(m,6H,CH2-CH3).13C-NMR(MeOD-d4,100MHz)δ172.41,164.01,155.95,153.52,144.36,96.56,70.53,66.29,62.49,30.74,28.76,19.01,13.49.ESIMS：calcdforC32H40F4N6O14m/z809.25(M+H)+,found809.34。按照上述制備方法，將化合物8與其他二酸酐反應(yīng)，如戊二酸酐等反應(yīng)即可制得表1中的化合物108至110。將氯甲酸叔丁酯替代氯甲酸丁酯，即可制得表1中化合物111。(實(shí)施例3)本實(shí)施例的胞苷衍生物二聚體為1.5-二-[4-N-(芐氧羰基)-2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷]戊二酸酯(代號D3)，D3的合成路線見圖3，制備過程如下：首先制備化合物13：將300mg(1mmol)2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷鹽酸鹽、5mL(0.023mmol)六甲基二硅氮烷，催化量硫酸銨5mg溶于5mL1,4-二氧六環(huán)中，加熱回流反應(yīng)2h；回流反應(yīng)結(jié)束后反應(yīng)液濃縮，向其中加入甲苯，濃縮至干2次，濃縮所得產(chǎn)物溶于10mL二氯甲烷中。向上述二氯甲烷溶液中加入0.24mL(3mmol)N-甲基咪唑、340mg(3mmol)氯甲酸芐酯，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)4h，反應(yīng)產(chǎn)物化學(xué)結(jié)構(gòu)式20，反應(yīng)液濃縮得粘稠油狀物。將上述粘稠油狀物溶于3mL三乙胺和20mL甲醇組成的混合溶液中，室溫?cái)嚢柘逻^夜。然后減壓蒸餾除去溶劑，粗產(chǎn)品用硅膠層析柱純化，用二氯甲烷/甲醇(20∶1)洗脫得到162mg的化合物12，三步反應(yīng)產(chǎn)率41％?；衔?2核磁共振表征：1H-NMR(MeOD-d4,400MHz)δ：8.31(d,1H,J＝7.64Hz,H6),7.39(m,5H,J＝7.68Hz,Ph),6.25(t,1H,J＝7.12Hz,H1'),5.21(s,2H.CH2-Ph),4.31(m,1H,H5a'),3.82(m,2H,H5b,H4'),3.79(m,1H,H3')。13C-NMR(MeOD-d4,100MHz)δ：164.22,156.22,153.27,144.48,135.87,128.42, 128.10,125.31,122.74,120.16,95.89,85.35,84.91,81.7,81.66,68.87,67.54,58.31。將化合物12(80mg，0.2mmol)與碳酸鈉(106mg,1mmol)混合加入到1,4-二氧六環(huán)和水的體系中(體積比4∶1,5mL)。后加入(Boc)2O(44mg,0.2mmol)，反應(yīng)在24℃攪拌48h，TLC檢測，待反應(yīng)結(jié)束后加入2mL水稀釋，使用2*30mL乙酸乙酯萃取，有機(jī)相使用5mL水和5mL飽和食鹽水洗滌，使用無水硫酸鈉干燥后減壓濃縮至干，柱層析(二氯甲烷-丙酮-乙醇1∶1∶0.02)得到化合物13(64mg，產(chǎn)率64％)。將得到的化合物13(248mg，0.5mmol)加入到15mL三氯甲烷中，加入吡啶5mL，再加入戊二酸酐(100mg，1mmol)，在45℃下反應(yīng)過夜，濃縮得黏稠油，柱層析(二氯甲烷/甲醇，20∶1至10∶1)得到化合物14(223mg，產(chǎn)率73％)。將得到的化合物14(61mg，0.1mmol)與化合物13(99mg，0.2mmol)、DCC(42mg，0.2mmol)混合后加入到15mL二氯甲烷中，加入DMAP(6mg,0.049mmol)，反應(yīng)在24℃攪拌24h。TLC檢測，待反應(yīng)結(jié)束后加入50mL二氯甲烷，使用10mL水和20mL飽和食鹽水洗滌，使用無水硫酸鈉干燥，濃縮至干。再加入TFA(5mL)和DCM(10mL)，室溫?cái)嚢?.5h。冰浴冷卻后濾去白色固體。濃縮得黏稠油，柱層析(DCM-MeOH20∶1至10∶1)得到產(chǎn)物D3(30mg，產(chǎn)率35％)。1H-NMR(MeOD-d4,400MHz)δ：8.31(d,1H,J＝7.64Hz,H6),7.39(m,5H,J＝7.68Hz,Ph),6.27(t,2H,J＝7.8Hz,H1'-1,H1'-2),5.17(s,4H,CH2-Ph×2),4.46(m,4H,H5a'-1,H5a'-2,H5b'-1,H5b'-2),4.21(m,2H,H4'-1,H4'-2),4.10(m,2H,H3'-1,H3'-2),,2.53(t,4H,J＝7.16Hz,-CH2-CH2-CH2-),1.99(q,2H,J＝7.2Hz,-CH2-CH2-CH2-)。13CNMR(MeOD-d4,100MHz)δ172.90,164.21,155.90,153.31,144.25,141.03,135.86,128.41,128.28,128.10,124.85,123.25,122.26,96.14,79.17,74.97,67.59,62.06,33.19,32.51,19.96。ESIMS：calcdforC39H38F4N6O14m/z891.24(M+H)+,found891.31。按照上述制備方法，將化合物14與其他二酸酐反應(yīng)，如COOHCHBr(CH2)2COOH、COOHCHPh(CH2)2COOH、COOHCHCNCH2COOH等反應(yīng)即可制得表1中的化合物113至116。(實(shí)施例4)本實(shí)施例的胞苷衍生物二聚體為1-O-(4-N-(芐氧羰基)–2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷)-5-O-(4-N-正丁氧羰基-2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷)-琥珀酸酯(1-O-(4-N-(Benzyloxycarbonyl)–gemcitabine)-4-O-(4-N-(n-Butoxycarbonyl)-gemcitabine)-succinate，代號D4)，結(jié)構(gòu)式如下：D4的合成路線見圖4，具體制備過程如下：將化合物9(56mg，0.1mmol)與化合物13(99mg，0.2mmol)、N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC，42mg，0.2mmol)混合后加入到15mL二氯甲烷中，加入DMAP(6mg,0.049mmol)，反應(yīng)在24℃攪拌24h。TLC檢測，待反應(yīng)結(jié)束后加入50mL二氯甲烷，使用10mL水和20mL飽和食鹽水洗滌，使用無水硫酸鈉干燥，濃縮至干。再加入TFA(5ml)和DCM(10ml)，室溫?cái)嚢?.5h。冰浴冷卻后濾去白色固體。濃縮得黏稠油，柱層析(DCM-MeOH20∶1至10∶1)得到產(chǎn)物D4(30mg，產(chǎn)率36％)。1H-NMR(MeOD-d4,400MHz)δ7.98(m,2H,H6-1,H6-2),7.40(d,2H,J＝7.68Hz,H5-1,H5-2),7.38(m,6H,Ph),6.26(t,2H,J＝8Hz,H1'-1,H1'-2),5.21(s,2H,CH2-Ph),4.43(m,2H,H5a'-1,H5a'-2),4.29(m,2H,H5b'-1,H5b'-2),4.21(m,6H,H4'-1,H4'-2H3'-1,H3'-2),2.74(m,4H,-CH2-CH2-),1.43(m,2H,O-CH2-CH2-),1.28(m,2H,O-CH2-CH2-CH2-),0.97(t,3H,J＝7.4Hz,-CH2-CH3)。13CNMR(MeOD-d4,100MHz)δ172.56,164.19,155.89,153.52,144.61,135.86,128.09,122.22,96.21,79.38,78.91,70.83,67.60,65.92,62.11,56.72,30.64,28.66,28.51,25.93,18.82,14.26,12.77。ESIMS：calcdforC35H38F4N6O14m/z843.24(M+H)+,found843.33。按照上述制備方法，將其他二酸酐代替丁二酸酐與化合物8反應(yīng)，得到的中間體與化合物13反應(yīng)即可制得表1中的化合物118至120。(實(shí)施例5、胞苷衍生物二聚體的鹽酸鹽)本實(shí)施例制備實(shí)施例1的胞苷衍生物二聚體的鹽酸鹽。取1.5–二–[4–N–正丁氧羰基–3’–O–正丁氧羰基-2’-脫氧-2’，2’-二氟代胞苷]戊二酸酯0.50g溶解于60mL乙酸乙酯中，冰浴下通入干燥的鹽酸氣，攪拌15分鐘后去除溶劑得到白色固體產(chǎn)物。其他胞苷衍生物二聚體的鹽酸鹽的制備方法同上。除了上述鹽酸鹽外，還可以制備胞苷衍生物二聚體的磷酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽、硝酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、琥珀酸鹽、磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、苯甲酸鹽或富馬酸鹽。(實(shí)施例6、胞苷衍生物二聚體的注射用凍干粉針劑)本實(shí)施例制備實(shí)施例3的化合物D3的凍干粉針劑。D3的凍干粉針劑包括30g的化合物D3、甘露醇(20％w/v)300g，緩沖劑二水合磷酸二氫鈉7克、表面活性劑泊洛沙姆188(F68)4.0g。將按照上述處方量準(zhǔn)確稱取的二水合磷酸二氫鈉、泊洛沙姆188(F68)(CAS號：9003-11-6)、甘露醇(20％w/v)加入300g預(yù)冷至10℃以下的注射用水中溶解后，用0.1mol/L的NaOH調(diào)節(jié)溶液pH值為7.3～7.5；再向上述溶液中加入處方量的D3混合均勻，用0.1mol/L的NaOH溶液或0.1mol/L的HCl調(diào)節(jié)pH值為7.3±0.2(本實(shí)施例為7.5)；加水至2000g，溶液用0.22μm微孔濾膜過濾除菌；按每瓶2.0g將濾液分裝于管制瓶中，半加塞后置于冷凍干燥機(jī)中凍干，待干燥后真空壓塞，軋蓋，貼標(biāo)簽，即得凍干粉針劑1000支，保存在2～8℃溫度下。除了上述凍干粉針劑即注射用無菌粉末外，本發(fā)明的胞苷衍生物二聚體還可制備成其他形式的注射劑，如溶液型注射劑、混懸型注射劑、乳劑型注射劑。(實(shí)施例7、胞苷衍生物二聚體的藥物組合物)本實(shí)施例的胞苷衍生物二聚體的藥物組合物由活性組分和輔料組成，其中的藥物活性組分為上述實(shí)施例制備的胞苷衍生物二聚體或其對應(yīng)的鹽。藥物活性組分的重量在組合物中所占比例為1％～95％(本實(shí)施例為30％)。輔料由水、乳糖、玉米淀粉、羥丙基甲基纖維素和硬脂酸鎂組成。本實(shí)施例的藥物組合物的劑型為片劑。藥物組合物的適用劑型除除上涉及的片劑形式外，藥物活性組分可以被制成口服的散劑、顆粒劑、膠囊劑、微丸制劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者是口服形式的緩釋及控釋制劑，或者是其他口服形式的藥物組合物，這些口服劑型含有常見的相應(yīng)的輔料(根據(jù)不同的作用分為添加劑、附加物等)，如添加劑有藥物等級的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鹽、纖維素或硫酸鎂等。在實(shí)現(xiàn)上述口服劑型中，可以選擇藥學(xué)上的附加物作為藥物活性組分的載體，包括已有技術(shù)成熟的物質(zhì)，例如：惰性固體稀釋液、水溶劑、脂質(zhì)體、微球體或/和無毒有機(jī)溶劑等；優(yōu)選的附加物有：加濕劑、乳化劑、pH緩沖液、人血清白蛋白、抗氧化劑、防腐劑、抑菌劑、葡萄糖、蔗糖、海藻糖、麥芽糖、卵磷脂、甘氨酸、山梨酸、丙烯醇、聚乙烯、魚精蛋白、硼酸、氯化鈉、或者氯化鉀、礦物油、植物油等；可從中選擇一種或幾種組合作為藥物載體。本發(fā)明的藥物組合物的靶腫瘤包括血液腫瘤或惡性實(shí)體性腫瘤；具體的，靶腫瘤包括肺癌、前列腺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、食道癌、腦腫瘤、卵巢癌、子宮癌、腎癌、頭頸癌、皮膚癌、膀胱癌、外陰癌、睪丸瘤、直腸癌、絨毛癌、 生殖細(xì)胞瘤、惡性淋巴瘤、白血病和多發(fā)性骨髓瘤，并且甚至更優(yōu)選的靶腫瘤可包括胰腺癌(一、二線治療)、非小細(xì)胞性肺癌、乳腺癌、卵巢癌和頭頸部鱗癌、結(jié)腸癌，但本發(fā)明不限于此。(應(yīng)用例1、系列化合物對HCT-116細(xì)胞集落形成的抑制實(shí)驗(yàn))1、通過細(xì)胞集落形成抑制試驗(yàn)評估4個(gè)候選化合物(D1,D2,D3,D4)在作用濃度為50nM,150nM和450nM對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞的增殖抑制作用。2、試驗(yàn)材料：細(xì)胞株：HCT-116人結(jié)腸癌細(xì)胞株訂購于中科院上海細(xì)胞資源中心，Cat#TCHu99。3、試劑配制HCT-116人結(jié)腸癌細(xì)胞培養(yǎng)基：DMEM+10％FBS?；衔锏臏?zhǔn)備：用DMSO稀釋化合物使終濃度為100μM。細(xì)胞染色液的配制：用無水乙醇配制0.5％結(jié)晶紫溶液避光保存；染色前與PBS按體積比1：4的比例配成細(xì)胞染色液。4、細(xì)胞培養(yǎng)：收集對數(shù)生長期細(xì)胞，計(jì)數(shù)，用完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞；調(diào)整細(xì)胞濃度至合適濃度，接種6孔板培養(yǎng)皿，每孔接種約300個(gè)細(xì)胞，1.8ml培養(yǎng)基；細(xì)胞在37℃，100％相對濕度，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育5小時(shí)。5、細(xì)胞克隆形成抑制實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)處理①收集對數(shù)生長期細(xì)胞，計(jì)數(shù)，用含5％FBS的培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞，計(jì)數(shù)，按300個(gè)細(xì)胞/孔接種6孔板培養(yǎng)皿；細(xì)胞在37℃，100％相對濕度，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育5小時(shí)。②用培養(yǎng)基(含5％FBS)將化合物稀釋至0.5μM,1.5μM和4.5μM。按200μL/孔加入細(xì)胞，使化合物終濃度為50nM,150nM和450nM，每個(gè)濃度點(diǎn)進(jìn)行3次重復(fù)測試。③細(xì)胞在37℃，100％相對濕度，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育72小時(shí)。④吸棄皿中培養(yǎng)基(含化合物的培養(yǎng)基)，用Hank’sBalanceSaltSolution(HBSS)溶液潤洗兩遍，更換新鮮培養(yǎng)基(15％FBS的DMEM培養(yǎng)基)。⑤細(xì)胞在37℃，100％相對濕度，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育7至10天，直到形成肉眼可見的克隆斑。⑥吸棄皿中培養(yǎng)基，用PBS溶液潤洗兩遍。⑦吸凈殘余PBS，加入無水乙醇1ml/皿，固定30分鐘。⑧吸凈乙醇，加入細(xì)胞染色液，染色3分鐘。⑨吸棄染色液，用PBS潤洗三遍后計(jì)數(shù)。數(shù)據(jù)處理：克隆形成率＝[As/Ac]×100％；克隆形成抑制率＝1-克隆形成率。As：樣品處理的細(xì)胞克隆數(shù)目(細(xì)胞+待測化合物)。Ac：陰性對照(不加樣品處理)的細(xì)胞克隆數(shù)目(細(xì)胞+1％DMSO)。6、結(jié)果和討論四種化合物對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞的克隆數(shù)目見下表2。表2％inhibition：抑制率。4種化合物在作用濃度為50nM,150nM和450nM對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞的克隆形成抑制率見圖5。由表2及圖5可見本發(fā)明化合物對腫瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用。4種化合物對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HCT-116細(xì)胞的抑制率與抑制劑濃度的關(guān)系曲線見圖6，由圖6可看到，D1的IC50值為245.3nM，D2的IC50值為226.6nM，D3的IC50值為99.80nM，D4的IC50值為111.7nM。(應(yīng)用例2、系列化合物對腫瘤的生長抑制作用)本應(yīng)用例通過觀察接種部位腫瘤的形成情況和受試動(dòng)物的體重變化來評價(jià)單次腹腔注射化合物D1至D4對結(jié)腸癌HCT-116荷瘤裸小鼠移植瘤的生長抑制作用及其毒性。1、試驗(yàn)?zāi)康臏y定本發(fā)明的胞苷衍生物二聚體樣品對結(jié)腸癌HCT-116荷瘤裸小鼠移植瘤的生長抑制作用及其毒性。2、受試物的配制受試物溶解所用溶劑來源如下：溶劑批號廠商無水乙醇10009218國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司CremophorEL27963Sigma0.9％生理鹽水13083004華裕制藥有限公司稱取定量對應(yīng)的受試物于5mL玻璃試管中，在5mm的磁力攪拌子攪拌下溶解于乙醇中，全部溶解后加入CremophorEL，保持?jǐn)嚢瑁R用前加入標(biāo)示量的生理鹽水?dāng)嚢杈鶆?，配置時(shí)乙醇、CremophorEL、生理鹽水的體積比為5∶5∶90。3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種和品系：Balb/cNude小鼠；級別：SPF；性別：雌性。來源：上海西普爾-畢凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。動(dòng)物數(shù)量：訂購40只，選擇其中健康狀況良好的用于實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物合格證號：0123627。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)動(dòng)物年齡：7-9周齡。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)動(dòng)物體重：18-22克。適應(yīng)環(huán)境時(shí)間：5-7天。動(dòng)物編號方式：尾號。動(dòng)物房環(huán)境保持溫度23±2℃,濕度40-70％，12小時(shí)明暗交替。動(dòng)物飼料(SLAC-M01)購自北京科澳協(xié)力有限公司。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用水采用過濾滅菌水。實(shí)驗(yàn)過程中動(dòng)物自由飲食和飲水。4、實(shí)驗(yàn)方法4.1腫瘤細(xì)胞：結(jié)腸癌HCT-116細(xì)胞，購于中科院細(xì)胞生物研究所。用F-12培養(yǎng)基，(含10％的FBS)培養(yǎng)在37℃，飽和濕度，含體積分?jǐn)?shù)為5％CO2、95％空氣的二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)。接種前取對數(shù)生長期細(xì)胞，以0.25％胰蛋白酶消化后，PBS洗滌1次，PBS重新懸浮計(jì)數(shù)，用不含血清的培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度至約3x10^7cell/mL。4.2動(dòng)物接種及分組：每個(gè)裸鼠在無菌狀態(tài)下，右側(cè)后肢皮下接種0.1mL細(xì)胞懸液(3x10^6cell/mouse)。待腫瘤長至體積60-150mm3左右時(shí)，選出腫瘤體積相近、形狀較好的裸鼠(形狀盡量為單一圓球形，無不規(guī)則的形狀或多個(gè)腫瘤聚在一起)，分組，每組6只，分組情況如下：表3IP：腹腔注射；QD×1：注射一次。Control控制組即模型對照組的小鼠注射5:5:90的乙醇、CremophorEL、生理鹽水組成的混合溶液。4.3動(dòng)物給藥和觀察觀察各組裸鼠接種部位腫瘤的形成狀況，每周3次用圓洞尺測量腫瘤結(jié)節(jié)的直徑(D),并按如下公式計(jì)算腫瘤結(jié)節(jié)的體積(V)：V＝3/4π(D/2)3?？鼓[瘤活性的評價(jià)指標(biāo)為腫瘤生長抑制率TGI(％)，相對腫瘤增殖率T/C(％)。腫瘤生長抑制率TGI(％)的計(jì)算公式為：TGI(％)＝(Vcontrol-VTreatment)/Vcontrol)×100％。相對腫瘤體積(relativetumorvolume，RTV)計(jì)算公式為：RTV＝Vt/V0。其中V0為分組給藥時(shí)的腫瘤體積，Vt為測量時(shí)的腫瘤體積。相對腫瘤增殖率T/C(％)，計(jì)算公式為：T/C(％)＝TRTV/CRTV×100％。TRTV：治療組RTV；CRTV：陰性對照組RTV。每周3次稱量小鼠體重。4.4臨床癥狀在實(shí)驗(yàn)開始和實(shí)驗(yàn)過程中每個(gè)動(dòng)物所有的臨床癥狀都應(yīng)記錄。觀察應(yīng)在每天的同一時(shí)間進(jìn)行。給予受試物后如出現(xiàn)體重減低>20％，瀕死動(dòng)物或腫瘤體積超過2800mm^3，則CO2處死，分離腫瘤并稱重，尸檢，肉眼觀察是否有病變器官并記錄。4.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)除特別指出外，均以Mean±SEM表示；兩組間數(shù)據(jù)采用非配對T檢驗(yàn)，P<0.05認(rèn)為有顯著性差異。5試驗(yàn)結(jié)果(1)受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠體重的影響。各組動(dòng)物平均體重見表4。表4不同日期小鼠體重(g，Mean±SEM)表格中Day：天；*p﹤0.05，**p﹤0.01vs對照組。表5體重改變率表格中Day：天；*p﹤0.05，**p﹤0.01vs對照組由上表中數(shù)據(jù)可看到，對結(jié)腸癌HCT-116荷瘤裸小鼠腹腔注射各化合物之后，D1組400mg/kg在給藥第4天動(dòng)物體重顯著降低，其后體重穩(wěn)定增長，在第14-30天與模型對照組比較體重顯著升高。其他給藥組動(dòng)物體重與模型對照比較無顯著性差異。(2)受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠腫瘤體積的影響表6各組腫瘤體積具體數(shù)據(jù)(mm3，Mean±SEM)*p﹤0.05，**p﹤0.01vs體積對照組。由上述各組腫瘤體積的數(shù)據(jù)可見，本發(fā)明的胞苷衍生物對腫瘤生長具有明顯的抑制作用。(3)受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠腫瘤的生長抑制率(TGI％)受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠腫瘤的生長抑制率(TGI)見如下表7：表7D1-D4對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠腫瘤的生長抑制率化合物D1400mg/kg組腫瘤抑制率最大值在Day7，為91.49％，到16天為72.62％，到30天為43.36％；化合物D2400mg/kg組腫瘤抑制率最大值在Day9，為94.79％，到16天為90.63％，到30天為67.91％；化合物D3350mg/kg組腫瘤抑制率最大值在Day11，為98.54％，到16天為95.58％，到30天為82.93％；化合物D4300mg/kg組腫瘤抑制率最大值在Day11，為97.32％，到16天為92.12％，到30天為72.14％。(4)受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠的腫瘤相對體積(RTV)受試化合物D1-D4對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠的腫瘤相對體積見如下表8：表8受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠的腫瘤相對體積(Mean±SEM)*p﹤0.05，**p﹤0.01vs體積對照組。(5)受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠的相對腫瘤增殖率(T/C％)受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠的相對腫瘤增殖率數(shù)據(jù)見如下表9：表9受試化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤小鼠的相對腫瘤增殖率化合物D1400mg/kg組相對腫瘤增殖率在Day7達(dá)到最小值28.36％，至Day16天腫瘤增殖率為89.47％。化合物D2400mg/kg組相對腫瘤增殖率在Day9達(dá)到最小值14.41％，至Day16天腫瘤增殖率為21.64％?；衔顳3350mg/kg組相對腫瘤增殖率在Day11達(dá)到最小值3.41％，至Day16天腫瘤增殖率為10.49％?；衔顳4300mg/kg組相對腫瘤增殖率在Day11達(dá)到最小值25.94％，至Day16天腫瘤增殖率為37.96％。在系列化合物對人結(jié)腸癌HCT-116荷瘤裸小鼠移植瘤的生長抑制實(shí)驗(yàn)中，化合物D2、D3、D4對結(jié)腸癌HCT-116荷瘤裸小鼠移植瘤的腫瘤抑制率較好，一次性腹腔給藥后至16天有顯著的腫瘤抑制作用，對動(dòng)物體重?zé)o明顯影響，說明本發(fā)明的胞苷衍生物二聚體抗腫瘤活性高同時(shí)毒副作用小。當(dāng)前第1頁1 2 3