1.一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒,所述試劑盒包括的材料為:
①mev-1基因RNAi后的秀麗隱桿線蟲;
②NGM培養(yǎng)基;
③大腸桿菌OP50。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒,其特征在于,所述的mev-1基因RNAi后的秀麗隱桿線蟲是通過分子生物學(xué)手段將秀麗隱桿線蟲mev-1基因片段插入到質(zhì)粒載體上,并將其轉(zhuǎn)化到宿主細(xì)胞中,構(gòu)建克隆菌,誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化后的克隆菌表達(dá)mev-1的dsRNA,給秀麗隱桿線蟲飼喂克隆菌,即建立mev-1基因RNAi后的秀麗隱桿線蟲。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒,其特征在于,所述mev-1基因片段是用PCR的方法從秀麗隱桿線蟲基因組DNA中擴(kuò)增出來的。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒,其特征在于,所述質(zhì)粒載體為質(zhì)粒L4440,宿主細(xì)胞為大腸桿菌HT115(DE3)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒,其特征在于,將mev-1基因片段插入到質(zhì)粒L4440兩個反向T7啟動子之間的多克隆位點(diǎn)處構(gòu)建重組質(zhì)粒。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒,其特征在于,所述的誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化后的重組克隆菌時所用的誘導(dǎo)劑為異丙基硫代半乳糖苷。
7.如權(quán)利要求1-6所述體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒在篩選治療體內(nèi)活性氧水平失調(diào)疾病藥物中的應(yīng)用,所述活性氧水平失調(diào)是由活性氧上升引起的。
8.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒在篩選治療體內(nèi)代謝異常藥物中的應(yīng)用,其特征在于,所述代謝異常是活性氧上升所 致的氧化損傷造成的。
9.如權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒在研究體內(nèi)活性氧升高對機(jī)體各種生理生化代謝過程的影響中的應(yīng)用。
10.一種體內(nèi)活性氧水平失調(diào)動物模型試劑盒的使用方法,將mev-1基因RNAi后的秀麗隱桿線蟲用鎳鉻絲挑針分別轉(zhuǎn)移到含有待測化合物的NGM培養(yǎng)基平板和不含有待測化合物的NGM培養(yǎng)基平板上,不含有待測化合物的NGM培養(yǎng)基平板作為空白對照組,每塊平板上接種25條mev-1基因RNAi后的秀麗隱桿線蟲,待測化合物組與空白對照組均設(shè)置3個平行,上述平板均接種大腸桿菌OP50作為秀麗隱桿線蟲食物,每天計(jì)數(shù)待測化合物組與空白對照組的秀麗隱桿線蟲的存活條數(shù),直至平板上所有的秀麗隱桿線蟲全部死亡,計(jì)算待測化合物組與空白對照組中秀麗隱桿線蟲的壽命。