本發(fā)明涉及一種改性瓜蔞皮多糖，具體涉及一種磷酸酯化瓜蔞皮多糖及其醫(yī)藥用途。

背景技術(shù)：
衰老是機(jī)體各組織、器官功能隨年齡增長(zhǎng)而發(fā)生退行性變化的過程。據(jù)《民族藥理學(xué)雜志》(JournalofEthnopharmacology,2010,132:512-517)介紹，活性自由基的增加會(huì)損害機(jī)體的組織或細(xì)胞，當(dāng)自由基引起的損傷積累超過了機(jī)體的修復(fù)能力，會(huì)加速機(jī)體衰老的進(jìn)程。隨著世界大多數(shù)國(guó)家人口老齡化趨勢(shì)的加快，越來越多的學(xué)者專注于研究機(jī)體抗氧化、抗衰老作用制劑的研究。因此，從天然產(chǎn)物中尋找無毒副作用的抗衰老藥物具有重要的意義。植物多糖是由多個(gè)單糖分子縮合而成的生物大分子物質(zhì)，普遍存在于植物體中，包括淀粉、纖維素、多聚糖、果膠等。植物多糖易溶于水，其生物活性廣泛，具有調(diào)節(jié)免疫功能，降血糖，抑制腫瘤，抗菌抗病毒等生物活性。栝蔞(TrichosantheskirilowiiMaxim)是葫蘆科栝蔞屬的一種多年生藤本植物，廣泛分布于我國(guó)長(zhǎng)江流域及其以北地區(qū)。栝蔞的成熟果實(shí)的外皮稱為瓜蔞皮。瓜蔞皮富含有豐富的氨基酸、礦物元素以及活性多糖等，具有較高的藥用價(jià)值。如中國(guó)《中國(guó)新藥雜志》(2010,20:1872-1874)、《山西醫(yī)藥雜志》(2009,38:67-68)及《中國(guó)藥房》(2009,20:648-651)介紹了瓜蔞皮注射液具有治療穩(wěn)定性心絞痛的作用，瓜蔞皮煎劑對(duì)痢疾桿菌、肺炎球菌、溶血性鏈球菌及白喉?xiàng)U菌等均有抑制作用，可以提高小鼠免疫功能；中國(guó)《中國(guó)藥師》(2004,7:562-563)介紹了采用水浴浸提法從瓜蔞皮中分離獲得一種水溶性多糖，該多糖是由鼠李糖、阿拉伯糖和葡萄糖組成，其摩爾比為：1.0:2.4:4.7；中國(guó)《合肥工業(yè)大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》(2014,03:359-363)介紹了微波輔助提取瓜蔞皮多糖具有較強(qiáng)的抗氧化活性。中國(guó)專利號(hào)201310133957.9公開了一種瓜蔞皮多糖復(fù)合膠囊及其制備方法，采用以瓜蔞多糖、知母生地復(fù)合粉為主要原料并輔以其他材料，在常溫下制備一種瓜蔞多糖復(fù)合膠囊，該多糖復(fù)合膠囊易被人體吸收，能充分地發(fā)揮瓜蔞、生地、知母的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)瓜蔞皮多糖進(jìn)行改性的研究較少。目前國(guó)內(nèi)外未見有公開文獻(xiàn)提及將瓜蔞皮多糖采取磷酸酯化修飾以改性為磷酸酯化多糖，以及將其作為制備抗衰老藥物的應(yīng)用方面的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種采取磷酸酯化修飾改性的瓜蔞皮多糖及其在制備抗衰老藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明解決技術(shù)問題，采用如下技術(shù)方案：本發(fā)明的磷酸酯化瓜蔞皮多糖，其特點(diǎn)在于：所述磷酸酯化瓜蔞皮多糖是通過以三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉對(duì)瓜蔞皮多糖進(jìn)行磷酸酯化修飾改性獲得。本發(fā)明的磷酸酯化瓜蔞皮多糖按如下步驟進(jìn)行制備：將三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉按質(zhì)量比4.5-5.5：1混合構(gòu)成磷酸化試劑；將12-13g磷酸化試劑溶于雙蒸水中，加入1.0-1.2g硫酸鈉并加雙蒸水定容至100mL，再加入1.00g瓜蔞皮多糖，然后以濃度為0.1mol·L-1的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至7.5-8，獲得反應(yīng)體系；將反應(yīng)體系在65-70℃恒溫水浴中反應(yīng)6.5-8.0h，然后加入4-4.5倍體積的無水乙醇，醇沉24h并離心獲得醇沉多糖；將醇沉多糖經(jīng)過真空冷凍干燥后復(fù)溶于60℃水中，再于截留分子量為13000Da透析袋中先用自來水逆向流動(dòng)透析24-48h，再用蒸餾水透析24-48h，收集透析袋內(nèi)保留液并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，冷凍干燥后，獲得磷酸酯化瓜蔞皮多糖。本發(fā)明進(jìn)一步公開了上述磷酸酯化瓜蔞皮多糖的醫(yī)藥用途，其特點(diǎn)在于：磷酸酯化瓜蔞皮多糖在制備抗衰老藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明通過對(duì)衰老模型小鼠抗衰老的作用藥理實(shí)驗(yàn)，確立了磷酸酯化瓜蔞皮多糖的抗衰老作用。本發(fā)明的磷酸酯化瓜蔞皮多糖在制備抗衰老藥物時(shí)可以按藥劑學(xué)的常規(guī)制備方法，將有效量的該磷酸酯化瓜蔞皮多糖與藥用輔料混合加工，制備成口服片劑或膠囊。與已有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：本發(fā)明的磷酸酯化瓜蔞皮多糖具有顯著的抗衰老功能，且無毒副作用，不會(huì)對(duì)體內(nèi)器官造成損壞。本發(fā)明方法簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)，可將該磷酸酯化瓜蔞皮多糖應(yīng)用于制備片劑或膠囊劑型的抗衰老藥物。附圖說明圖1為磷酸酯化修飾改性前的瓜蔞皮多糖(TPP-1)的紅外光譜圖；圖2為采用三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉對(duì)瓜蔞皮多糖進(jìn)行修飾改性后的磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)的紅外光譜圖；圖3為改性前的瓜蔞皮多糖TPP-1(圖3中A)和磷酸酯化瓜蔞皮多糖PTPP-1(圖3中B)的13CNMR光譜圖；圖4為磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)的31PNMR光譜圖。具體實(shí)施方式下面通過實(shí)施例并結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步具體詳細(xì)的說明。實(shí)施例1一、瓜蔞皮多糖(TPP-1)的制備：本實(shí)施例首先按如下步驟制備TPP-1：將瓜蔞皮清洗干凈、烘干并粉碎獲得瓜蔞皮粉；在瓜蔞皮粉中依次加入石油醚和無水乙醇，分別回流8h進(jìn)行初步脫脂和脫色，然后自然晾干獲得瓜蔞皮干粉；按瓜蔞皮干粉的質(zhì)量與蒸餾水的體積比為1：35mg/mL，在瓜蔞皮干粉中加入蒸餾水，采用超聲溫度60℃、超聲時(shí)間30min、超聲功率300W的超聲輔助水浴浸提法提取3次，過濾除去濾渣，合并濾液獲得瓜蔞皮提取液；應(yīng)用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮)將瓜蔞皮提取液濃縮，離心后，加入4倍體積的95％乙醇，4℃醇沉12-24h，然后4000r·min-1離心10min，獲得醇沉多糖；使用蒸餾水溶解醇沉多糖得到瓜蔞皮粗多糖溶液，冷凍干燥得瓜蔞皮多糖粗品。再將該瓜蔞皮多糖粗品用蒸餾水復(fù)溶，采用賽沃杰法(Sevag)脫除蛋白(劇烈振搖20min后置于分液漏斗中靜止20min，分離水層與溶劑層交界處的變性蛋白，重復(fù)至水相與溶劑相的交界面無膠狀變性蛋白質(zhì))，加入30％雙氧水恒溫脫色。將脫蛋白、脫色后的瓜蔞皮多糖粗品水溶液置于截留分子量為13000Da的透析袋中，自來水逆向流動(dòng)透析48h，蒸餾水透析24h。經(jīng)冷凍干燥得瓜蔞皮多糖(TPP-1)。所得瓜蔞皮多糖由摩爾比為1.0：3.3：4.3：6.0的L-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖組成。二、磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)的制備本實(shí)施例以上述方法所獲得的瓜蔞皮多糖為原料，按如下方法制備磷酸酯化瓜蔞皮多糖：將9.82g三聚磷酸鈉和2.18g三偏磷酸鈉溶于雙蒸水中，加入1.2g硫酸鈉并加雙蒸水定容至100mL，再加入1.00gTPP-1，然后以濃度為0.1mol·L-1的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至8，獲得反應(yīng)體系；將反應(yīng)體系在70℃恒溫水浴中反應(yīng)6.5h，然后加入4倍體積的95％乙醇，醇沉24h并離心獲得醇沉多糖；將醇沉多糖經(jīng)過真空冷凍干燥后復(fù)溶于60℃水中，再于截留分子量為13000Da透析袋中先用自來水逆向流動(dòng)透析36h，再用蒸餾水透析(采用蒸餾水浸泡并每隔4h更換蒸餾水)24h，收集透析袋內(nèi)保留液并旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，冷凍干燥后，即得磷酸酯化瓜蔞皮多糖PTPP-1。按如下方法測(cè)試產(chǎn)物磷酸酯化瓜蔞皮多糖中磷酸根含量：磷酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制及磷酸根測(cè)定參照中國(guó)《食品科學(xué)》(2011,32(24):73-77)所報(bào)道的方法。磷酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：分別吸取0mL、0.5mL、1mL、1.5mL、2mL、2.5mL、3mL、3.5mL、4mL、4.5mL及5mL濃度為0.1mg/mL的KH2PO4標(biāo)準(zhǔn)溶液于試管中，補(bǔ)充蒸餾水至5mL，再加入3mLtris緩沖溶液，分別取1mL質(zhì)量濃度為20％的VC水溶液、1mL濃度為3mol·L-1的H2SO4溶液和1mL質(zhì)量濃度為3％的鉬酸銨水溶液混合均勻后加入到KH2PO4標(biāo)準(zhǔn)溶液和tris緩沖溶液的混合溶液中，45℃下反應(yīng)30min后，于580nm(752分 光光度計(jì))處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，磷酸根濃度為橫坐標(biāo)，繪制磷酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線。磷酸根測(cè)定：取0.1g樣品加入盛有1mL濃硫酸和1mL濃硝酸的試管中加熱，冷卻后再加入1mLH2O2溶液(30％)，緩慢加熱，并重復(fù)以上步驟至反應(yīng)樣液呈淡黃色或無色透明。加入1mL濃度為6mol/L鹽酸加熱使酸徹底反應(yīng)后，定容于50mL容量瓶中。再按照上述磷酸根標(biāo)準(zhǔn)曲線方法測(cè)定吸光度，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算磷酸根含量。經(jīng)上述測(cè)試可知本實(shí)施例所得磷酸酯化瓜蔞皮多糖中磷酸根質(zhì)量分?jǐn)?shù)為14.36％。三、磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)的結(jié)構(gòu)驗(yàn)證紅外光譜測(cè)定：分別取上述改性前的瓜蔞皮多糖2mg，與采用三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉修飾改性制備的磷酸酯化瓜蔞皮多糖2mg，以多糖的質(zhì)量(mg)與KBr的質(zhì)量(mg)比為1︰30，將TPP-1或PTPP-1與KBr混合均勻，研磨后壓片，采用傅里葉變換紅外光譜儀(Nexus670)進(jìn)行IR光譜分析，掃描范圍是4000-400cm-1。圖1為改性前的瓜蔞皮多糖(TPP-1)的紅外光譜圖；圖2為采用三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉對(duì)瓜蔞皮多糖進(jìn)行修飾改性后的磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)的紅外光譜圖。對(duì)比分析這兩個(gè)紅外光譜圖的結(jié)果表明，改性前后的瓜蔞皮多糖均具有瓜蔞皮多糖的特征吸收峰，從圖2中在PTPP-1在1140cm-1處的伸縮振動(dòng)峰表明，PTPP-1含有吡喃型糖苷鍵。此外，2920cm-1處的-CH2的伸縮振動(dòng)吸收峰、1640cm-1處的C＝O的伸縮振動(dòng)吸收峰及1410cm-1處的C-O的伸縮振動(dòng)吸收峰，在修飾前后均沒有發(fā)生明顯變化，說明磷酸酯化修飾沒有破壞TPP-1的結(jié)構(gòu)；圖2中PTPP-1的紅外光譜顯示，在1232cm-1處是由P＝O伸縮振動(dòng)引起的特征吸收峰，另一個(gè)在976cm-1處是由P-O-C伸縮振動(dòng)引起的特征吸收峰，該結(jié)果表明三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉對(duì)瓜蔞皮多糖改性成功。核磁共振光譜測(cè)定：分別取50mgTPP-1及PTPP-1溶于1.0mLD2O中，采用BrukerAV-500核磁共振光譜儀進(jìn)行13CNMR分析。取50mgPTPP-1溶于1.0mLD2O中，采用BrukerAV-500核磁共振光譜儀進(jìn)行31PNMR分析。圖3為改性前的瓜蔞皮多糖TPP-1(A)和磷酸酯化瓜蔞皮多糖PTPP-1(B)的13CNMR光譜圖。圖3(A)與(B)相比C1、C2、C3、C5的化學(xué)位移均未發(fā)生顯著變化，而磷酸酯化瓜蔞皮多糖在C4、C6的化學(xué)位移處的信號(hào)峰顯著減弱，此結(jié)果是由于-H2PO3基團(tuán)與C4和C6的羥基的結(jié)合所致致。圖4為磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)的31PNMR光譜圖。由圖4可知，在0.946～1.727ppm間，磷酸鹽化的衍生物表現(xiàn)出強(qiáng)烈的多重信號(hào)共振峰，結(jié)果表明，磷酸化修飾成功，且磷酸基團(tuán)位于幾個(gè)不同的磁場(chǎng)環(huán)境中，因而取代了多糖分子鏈中的不同位置。上述紅外吸收光譜和核磁共振結(jié)果表明：瓜蔞皮多糖的磷酸化修飾成功，而且修飾的磷 酸基團(tuán)連接在C4和C6上。四、瓜蔞皮多糖(TPP-1)及磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)的抗衰老作用藥理實(shí)驗(yàn)：(1)實(shí)驗(yàn)原料：制備TPP-1及PTPP-1的生理鹽水溶液：將TPP-1用質(zhì)量百分濃度為0.9％的生理鹽水配制成10mg/mL及40mg/mL的多糖溶液，作為低濃度TPP-1生理鹽水溶液和高濃度TPP-1生理鹽水溶液；將PTPP-1用質(zhì)量百分濃度為0.9％的生理鹽水配制成10mg/mL及40mg/mL的多糖溶液，作為低濃度PTPP-1生理鹽水溶液和高濃度PTPP-1生理鹽水溶液；(2)實(shí)驗(yàn)所用動(dòng)物：昆明小鼠70只，雄性，體重20±2g，SPF級(jí)，隨機(jī)分為7組。(3)實(shí)驗(yàn)所用試劑盒：超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒，過氧化氫酶(CAT)試劑盒，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)試劑盒和丙二醛(MDA)試劑盒，為南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的產(chǎn)品。(4)實(shí)驗(yàn)方法：首先對(duì)70只健康昆明小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，稱重。取60只健康昆明小鼠，腹腔注射濃度為2％的D-半乳糖(美國(guó)Sigma公司)水溶液(劑量100mg/kg)，每日一次，連續(xù)注射6周后，小鼠精神萎靡不振，形體瘦小，且呈現(xiàn)明顯的衰老特征，表明D-gal衰老模型小鼠建模成功；同時(shí)對(duì)剩余10只正常昆明小鼠腹腔注射0.9％生理鹽水(劑量100mg/kg)，1次/d，連續(xù)注射6周。然后，將60只D-gal衰老模型小鼠均分為以下六組：D-gal模型組：每日灌胃10mL·kg-1劑量的生理鹽水；陽性對(duì)照組：每日灌胃100mg·kg-1劑量的VC；TPP-1低劑量組：每日灌胃100mg·kg-1劑量的TPP-1(即每日灌胃低濃度TPP-1生理鹽水溶液的劑量為10mL·kg-1)；TPP-1高劑量組：每日灌胃400mg·kg-1劑量的TPP-1(即每日灌胃高濃度TPP-1生理鹽水溶液的劑量為10mL·kg-1)；PTPP-1低劑量組：每日灌胃100mg·kg-1劑量的PTPP-1(即每日灌胃低濃度PTPP-1生理鹽水溶液的劑量為10mL·kg-1)；PTPP-1高劑量組：每日灌胃400mg·kg-1劑量的PTPP-1(即每日灌胃高濃度PTPP-1生理鹽水溶液的劑量為10mL·kg-1)；此外，將10只正常昆明小鼠作為正常對(duì)照組，每日灌胃10mL·kg-1劑量的生理鹽水)；將以上七組小鼠每日定時(shí)按劑量灌胃，1次/d，連續(xù)30天，各組每日均自由飲水并進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)飼料。灌胃期間，每日觀察小鼠精神狀態(tài)、形體等情況；于末次灌胃后禁食不禁水12h， 稱體重后，摘眼球取血置于經(jīng)抗凝處理的離心管中，以5000rpm的轉(zhuǎn)速離心3min得血清放于-20℃?zhèn)溆?；脫頸椎處死小鼠，取出小鼠脾臟、胸腺、肝臟、腦，凍存?zhèn)溆谩?4)相關(guān)指標(biāo)測(cè)定：小鼠脾臟、胸腺指數(shù)的測(cè)定；小鼠肝臟、腦、血清中SOD酶活力、GSH-PX酶活、CAT酶活及MDA酶活的測(cè)定：小鼠眼球取血，5000r/min離心3min，取血清放于-20℃?zhèn)溆?。肝臟、腦、血清臨用前恢復(fù)至室溫，按照試劑盒說明書步驟進(jìn)行操作，測(cè)定SOD酶活力、GSH-PX酶活力、CAT酶活及MDA含量。(5)藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果：表1給出了上述瓜蔞皮多糖及其磷酸酯化瓜蔞皮多糖對(duì)抗衰老小鼠體重和臟器指數(shù)的影響。表1TPP-1及PTPP-1對(duì)抗衰老小鼠體重和臟器指數(shù)的影響注：與D-gal模型組相比，ap<0.05，bp<0.01。對(duì)表1中的各組指標(biāo)參數(shù)進(jìn)行比較分析，可以看出TPP-1及PTPP-1對(duì)各處理組小鼠相關(guān)指標(biāo)的影響。D-gal模型組小鼠精神萎靡，皮毛無光澤，豎毛現(xiàn)象明顯，活動(dòng)明顯減少，PTPP-1、TPP-1對(duì)衰老模型小鼠體重和臟器指數(shù)的影響如表1：從表1中可以看出，與D-gal模型組小鼠相比，TPP-1、PTPP-1對(duì)衰老模型小鼠的體重均有不同程度的增加，且PTPP-1高劑量組體重增長(zhǎng)更顯著，說明PTPP-1對(duì)D-gal所導(dǎo)致的小鼠體重增長(zhǎng)緩慢有顯著的提高作用；與D-gal模型組相比，TPP-1、PTPP-1對(duì)衰老模型小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均有不同程度的升高，PTPP-1高劑量組小鼠與低劑量組小鼠的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均較TPP-1組高，表明PTPP-1能顯著延緩衰老模型小鼠免疫器官的衰老，增強(qiáng)其免疫功能。表2給出了TPP-1及PTPP-1對(duì)抗衰老小鼠肝臟、腦、血清中SOD、GSH-PX、CAT活性 及MDA含量的影響。表2TPP-1及PTPP-1對(duì)抗衰老小鼠肝臟、腦、血清中SOD、GSH-PX、CAT活性及MDA含量的影響注：與模型組相比，ap<0.05，bp<0.01。對(duì)表2中的各組指標(biāo)參數(shù)進(jìn)行比較分析，可以看出TPP-1及PTPP-1對(duì)各組小鼠相關(guān)指標(biāo)的影響。如表2中所示，與D-gal模型組小鼠相比，TPP-1、PTPP-1組及陽性對(duì)照組小鼠的肝臟、腦和血清中SOD、GSH-PX、CAT活性顯著升高，MDA含量顯著降，低D-gal在代謝過程中可使機(jī)體產(chǎn)生過量的自由基，形成脂質(zhì)過氧化物，破壞機(jī)體抗氧化防御系統(tǒng)。其中PTPP-1高劑量組肝勻漿、腦勻漿和血清SOD活性分別增加了49.55％、33.16％和31.23％，GSH-PX活性分別增加了21.68％、21.91％和12.97％，CAT活性分別增加了56.56％、46.45％和28.22％，MDA含量分別降低了26.50％、34.14％和33.63％。實(shí)驗(yàn)說明，瓜蔞皮多糖具有顯著的抗衰老活性，而相同劑量的經(jīng)三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉修飾改性后的磷酸酯化多糖的抗衰老能力更強(qiáng)，表明磷酸酯化修飾提高了該多糖的抗衰老能力。上述藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)分析測(cè)定了小鼠衰老最具代表性的指標(biāo)，從以上結(jié)果可以看出，在給藥劑量為100-400mg/kg時(shí)，瓜蔞皮多糖具有顯著的抗衰老作用，可顯著提高衰老模型小鼠的體重和臟器指數(shù)，有效增加SOD、GSH-PX、CAT酶活，降低MDA含量，具有明顯的抗衰老活性。而相同濃度的經(jīng)三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉修飾改性后的磷酸酯化瓜蔞皮多糖的抗衰老 活性明顯增強(qiáng)。五、磷酸酯化瓜蔞皮多糖制劑的加工1、口服片劑加工將200-350g的磷酸酯化瓜蔞皮多糖與藥用輔料稀釋劑200-300g、助流劑20-50g混勻后，與200-400mL乙醇混合均勻制得軟材，軟材過篩得到濕顆粒，干燥后整粒，最后加入潤(rùn)滑劑5-10g混勻后壓片，制成1000片片劑。所述藥用輔料稀釋劑選用糊精或干淀粉；所述助流劑采用滑石粉、微粉硅膠或微晶纖維素；所述潤(rùn)滑劑采用硬脂酸鎂或硬脂酸鋅。本實(shí)施例推薦的片劑加工的優(yōu)選例為：取過80-100目篩的上述磷酸酯化瓜蔞皮多糖300g、稀釋劑糊精200g、助流劑滑石粉40g，混合均勻后加400mL乙醇混合均勻制得軟材，軟材過篩得到濕顆粒，干燥后整粒，最后加入潤(rùn)滑劑硬脂酸鎂8g混勻后壓片，制成1000片，片重0.94g，多糖含量0.3g/片。2、膠囊劑加工將藥用輔料稀釋劑200-300g、助流劑50-70g、潤(rùn)濕劑2-6g混勻后，再與300-600g的上述磷酸酯化瓜蔞皮多糖混合均勻，裝1#空心膠囊，制得膠囊劑1000粒。所述藥用輔料稀釋劑選用糊精或干淀粉；所述助流劑采用滑石粉或微粉硅膠或微晶纖維素；所述潤(rùn)濕劑采用十二烷基硫酸鈉或者磺基丁二酸二辛酯。本實(shí)施例推薦的膠囊劑加工優(yōu)選例為：取稀釋劑干淀粉200g，助流劑滑石粉40g，潤(rùn)濕劑十二烷基硫酸鈉5g混合均勻后，再與400g上述磷酸酯化瓜蔞皮多糖混合均勻后裝1#空心膠囊1000粒，多糖含量0.4g/粒。實(shí)施例2本實(shí)施例首先按如下步驟制備TPP-1：將瓜蔞皮清洗干凈、烘干、粉碎，分別加入石油醚和乙醇，分別回流10h進(jìn)行初步脫脂和脫色，60℃烘干獲得瓜蔞皮干粉；按以按瓜蔞皮干粉的質(zhì)量與蒸餾水的體積比為1︰30mg/mL，在瓜蔞皮干粉中加入蒸餾水，采用超聲溫度55℃，超聲時(shí)間40min，超聲功率350W的超聲輔助水浴浸提法提取3次；過濾除去濾渣獲得瓜蔞皮提取液；將瓜蔞皮提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，離心后，加入3倍體積的95％乙醇，4℃醇沉12h；然后4000r·min-1離心15min，傾去上清液，獲得醇沉多糖；使用蒸餾水溶解醇沉多糖得到瓜蔞皮粗多糖溶液，冷凍干燥得瓜蔞皮多糖粗品。再將該瓜蔞皮多糖粗品用蒸餾水復(fù)溶，采用賽沃杰法(Sevag)脫蛋白，加入30％雙氧水45℃恒溫脫色。將脫蛋白、脫色后的瓜蔞皮多糖粗品水溶液置于截留分子量為13000Da的透析袋中，自來水逆向流動(dòng)透析48h，再用蒸餾水透析24h。經(jīng)冷凍干燥得瓜蔞皮多糖 (TPP-1)。本實(shí)施例以上述方法所獲得的瓜蔞皮多糖為原料，按如下方法制備磷酸酯化瓜蔞皮多糖：將11.00g三聚磷酸鈉和2.00g三偏磷酸鈉混合構(gòu)成磷酸化試劑；將12-13g磷酸化試劑溶于雙蒸水中，加入1.0g硫酸鈉并加雙蒸水定容至100mL，再加入1.00g瓜蔞皮多糖，然后以濃度為0.1mol·L-1的NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至7.8，獲得反應(yīng)體系；將反應(yīng)體系在65℃恒溫水浴中反應(yīng)8h，加入4.5倍體積的95％乙醇，醇沉20h并離心獲得醇沉多糖。醇沉多糖經(jīng)真空冷凍干燥后復(fù)溶于60℃水中，再于截留分子量為13000Da透析袋中先用自來水逆向流動(dòng)透析24h再用蒸餾水透析24h，收集并濃縮溶液，冷凍干燥后，得到磷酸酯化瓜蔞皮多糖(PTPP-1)。按實(shí)施例1中的方法對(duì)磷酸酯化瓜蔞皮多糖進(jìn)行磷酸根含量測(cè)定，其磷酸根質(zhì)量分?jǐn)?shù)為13.59％。與實(shí)施例1中的磷酸根含量相似。然后將上述瓜蔞皮多糖及其磷酸酯化多糖用質(zhì)量百分濃度為0.9％的生理鹽水分別配制成5mg/mL和10mg/mL的水溶液，給藥體積為10mL·kg-1。將上述各劑量的瓜蔞皮多糖及其磷酸酯化多糖進(jìn)行衰老模型小鼠抗衰老作用藥理實(shí)驗(yàn)，所采用的方式步驟和其他條件均與實(shí)施例1中相同，也得到了與實(shí)施例1中類似的結(jié)果。上述實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)說明，瓜蔞皮多糖及經(jīng)三聚磷酸鈉和三偏磷酸鈉修飾改性后的磷酸酯化瓜蔞皮多糖均具有顯著的抗衰老功能，且無毒副作用，其制備方法簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)，故可將瓜蔞皮多糖及采用磷酸酯化修飾后的磷酸酯化瓜蔞皮多糖，按藥劑學(xué)的常規(guī)制備方法，將有效量的磷酸酯化瓜蔞皮多糖與適量的藥用輔料混合加工制備成口服片劑或膠囊劑型的抗衰老藥物。