一種抗氧化天然植物多糖及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種抗氧化天然植物多糖。本發(fā)明以天然中草藥白花蛇舌草、半枝蓮和淫羊藿為核心，對其藥效成分多糖提取進行了提取，并經(jīng)過科學(xué)合理的配伍獲得了最大抗氧化能力的配方，所發(fā)明的配方起到了對三味源藥物多糖互補協(xié)同的增效作用。配方中的多糖成分來源于天然植物，無化學(xué)合成成分，無激素，重金屬或任何西藥成分，具有較強的抗氧化、抗衰老和免疫力提升等藥效功能，極具產(chǎn)業(yè)化開發(fā)潛力。
【專利說明】一種抗氧化天然植物多糖及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及一種抗氧化天然植物多糖。

【背景技術(shù)】
[0002] 近年來，隨著社會、生活、工作、環(huán)境的變化，人類疾病譜發(fā)生了巨大的變化。 發(fā)生率高和危害最大的疾病已由傳統(tǒng)的感染性單因素性疾病轉(zhuǎn)向新發(fā)型變異性病毒、機體 衰老性或是機體自身代謝和調(diào)控失常為主要譜群的復(fù)雜多因素性疾病。在此趨勢下，眾多 以單一疾病靶點為目標的傳統(tǒng)藥物已越來越不能夠滿足人類治病防病的需要。因此，從增 強機體抗氧化性和自身免疫力出發(fā)，利用中草藥物特有的多成分、多環(huán)節(jié)、多靶點的整合調(diào) 節(jié)能力對人體抗衰老抗氧化和免疫系統(tǒng)進行改善，從而達到提高人體健康水平的目的，已 成為醫(yī)療或是保健活動中的一個熱點。
[0003] 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究成果表明，很多中草藥含有多糖類、有機酸類、生物堿類、甙類和揮 發(fā)油類等，這些物質(zhì)在人體內(nèi)通過促進機體的抗氧化能力，增強免疫細胞功能，提高細胞因 子分泌等作用，可實現(xiàn)對機體各器官功能的鞏固和提升，對疾病的防治有著重要的意義。
[0004] 半枝蓮，白花蛇舌草和淫羊藿是河南伏牛山區(qū)的原生藥用植物。據(jù)傳統(tǒng)醫(yī)書記載， 這三味藥物有補中益氣，活血化瘀，清熱解毒的功效，如合理配伍使用，當(dāng)可在抗氧化及免 疫提升方面起重要作用。通過現(xiàn)代科學(xué)文獻報道，半枝蓮多糖在體外可促進ConA誘導(dǎo)的小 鼠脾細胞淋巴細胞轉(zhuǎn)化，其最適濃度為400ii g/ml。皮下注射給藥一周后可明顯提高小鼠 外周血淋巴細胞中酯酶陽性細胞的百分率，腹腔給藥后促進DNCB誘發(fā)的小鼠遲發(fā)型變態(tài) 反應(yīng)。半枝蓮水提多糖對H 2O2有較強的清除作用，且呈量效關(guān)系。經(jīng)小鼠實驗表明，其 抗氧化衰老作用是通過提高SOD活力和對負氧自由基的清除作用及抗脂質(zhì)過氧化作用來 抵抗衰老延長壽命。白花蛇舌草多糖提取物可以增強免疫吞噬細胞活性，對小鼠脾細胞的 增殖活性有很強的促進作用，增強B細胞抗體的產(chǎn)生以及單核細胞的細胞因子產(chǎn)生，加強 單核細胞對腫瘤細胞的吞噬功能，并促進小鼠骨髓細胞增殖反應(yīng)和IL2的分泌。另外，白 花蛇舌草多糖具有增強機體特異性免疫功能和非特異性免疫功能的作用。淫羊藿可以提高 小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能并能使受環(huán)磷酰胺損傷的小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬功能恢 復(fù)至正常水平。淫羊藿對大劑量氫化可的松和羥基脲所致免疫功能低下模型小鼠巨噬細 胞的吞噬功能有明顯增強作用。淫羊藿多糖對巨噬細胞分泌IL-I和腫瘤壞死因子具有雙 向調(diào)節(jié)作用，并促進T/B淋巴細胞的增殖分化以及自然殺傷細胞活性，提高機體細胞免疫 功能。另外，淫羊藿可促進多種免疫細胞因子的分泌，如干擾素和IL-2等。
[0005] 綜上所述，傳統(tǒng)藥用植物半枝蓮，白花蛇舌草以及淫羊藿無論基于傳統(tǒng)中醫(yī)理論， 還是現(xiàn)代藥理學(xué)研究基礎(chǔ)，都顯示了極強的抗氧化活性和增強機體免疫功能的潛力，其主 要活性部位為多糖。因此，靶向優(yōu)化分離半枝蓮，白花蛇舌草以及淫羊藿多糖，并在藥效指 導(dǎo)下進行復(fù)配，將可實現(xiàn)一種有效的抗氧化天然植物多糖的復(fù)合配方。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種抗氧化天然植物多糖，在不添加任何人工合成化學(xué)成分 的前提下，開發(fā)具有抗氧化、防衰老和提升免疫力的天然植物多糖。
[0007] 本發(fā)明為解決上述問題，所采取的的技術(shù)方案是：一種抗氧化天然植物多糖，所述 植物多糖由白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖制成，且制備植物多糖所需各組分 的重量比為1:1:1 ; 所述白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖是將白花蛇舌草、半枝蓮和淫羊藿分 別通過超聲波處理制得白花蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液，再分別將白花 蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液進一步蒸干制得。
[0008] 所述抗氧化天然植物多糖的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、白花蛇舌草多糖的制備 將粉碎后的白花蛇舌草和蒸餾水按1 :14的重量比混合，之后用頻率為40kHz的超聲波 提取30-40min，提取液用孔徑為20 y m的濾紙過濾，收集濾液，重復(fù)上述提取過程2-3次，合 并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分之一，制得混合物I，向混合物I加 入體積濃度為95%的乙醇,使混合后乙醇的體積濃度為60%,靜置24 h后,用孔徑為20 ii m 的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得白花蛇舌草多糖； 步驟二、半枝蓮多糖的制備 將粉碎后的半枝蓮和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克半枝蓮對應(yīng)的蒸餾水體積為14ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 ii m的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程5-6次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物II，向混合物II加入體積百分比濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積 濃度為80%，靜置24 h后，用孔徑為20 的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得半枝蓮多糖； 步驟三、淫羊藿多糖的制備 將粉碎后的淫羊藿和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克淫羊藿對應(yīng)的蒸餾水體積為10ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 ii m的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程4-5次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物III，向混合物III加入體積濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度為 70%，靜置24 h后，用孔徑為20 y m的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得淫羊藿多糖； 步驟四、配制 將制得的白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖按1:1:1的重量比混合并攪拌均 勻后即制得植物多糖。
[0009] 有益效果 本發(fā)明以天然中草藥白花蛇舌草、半枝蓮和淫羊藿為核心，對其藥效成分多糖提取進 行了提取，并經(jīng)過科學(xué)合理的配伍獲得了最大抗氧化能力的配方，所發(fā)明的配方起到了對 三味源藥物多糖互補協(xié)同的增效作用。配方中的多糖成分來源于天然植物，無化學(xué)合成成 分，無激素，重金屬或任何西藥成分，具有較強的抗氧化、抗衰老和免疫力提升等藥效功能， 極具產(chǎn)業(yè)化開發(fā)潛力。

【具體實施方式】
[0010] 一種抗氧化天然植物多糖，所述植物多糖由白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊 藿多糖制成，且制備植物多糖所需各組分的重量比為1:1:1; 所述白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖是將白花蛇舌草、半枝蓮和淫羊藿分 別通過超聲波處理制得白花蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液，再分別將白花 蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液進一步蒸干制得。
[0011] 所述抗氧化天然植物多糖的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、白花蛇舌草多糖的制備 將粉碎后的白花蛇舌草和蒸餾水按1 :14的重量比混合，之后用頻率為40kHz的超聲波 提取30-40min，提取液用孔徑為20 y m的濾紙過濾，收集濾液，重復(fù)上述提取過程2-3次，合 并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分之一，制得混合物I，向混合物I加 入體積濃度為95%的乙醇,使混合后乙醇的體積濃度為60%,靜置24 h后,用孔徑為20 ii m 的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得白花蛇舌草多糖； 步驟二、半枝蓮多糖的制備 將粉碎后的半枝蓮和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克半枝蓮對應(yīng)的蒸餾水體積為14ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 ii m的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程5-6次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物II，向混合物II加入體積百分比濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積 濃度為80%，靜置24 h后，用孔徑為20 的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得半枝蓮多糖； 步驟三、淫羊藿多糖的制備 將粉碎后的淫羊藿和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克淫羊藿對應(yīng)的蒸餾水體積為10ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 iim的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程4-5次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物III，向混合物III加入體積濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度為 70%，靜置24 h后，用孔徑為20 的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得淫羊藿多糖； 步驟四、配制 將制得的白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖按1:1:1的重量比混合并攪拌均 勻后即制得植物多糖。
[0012] 實施例1 一種抗氧化天然植物多糖，所述植物多糖由白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多 糖制成，且制備植物多糖所需各組分的重量比為1:1:1 ; 所述白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖是將白花蛇舌草、半枝蓮和淫羊藿分 別通過超聲波處理制得白花蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液，再分別將白花 蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液進一步蒸干制得。
[0013] 所述抗氧化天然植物多糖的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、白花蛇舌草多糖的制備 將粉碎后的白花蛇舌草和蒸餾水按1 :14的重量比混合，之后用頻率為40kHz的超聲波 提取30min，提取液用孔徑為20 y m的濾紙過濾，收集濾液，重復(fù)上述提取過程2次，合并濾 液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分之一，制得混合物I，向混合物I加入體 積濃度為95%的乙醇,使混合后乙醇的體積濃度為60%,靜置24 h后,用孔徑為20 ii m的濾 紙過濾，將濾液蒸干后即制得白花蛇舌草多糖； 步驟二、半枝蓮多糖的制備 將粉碎后的半枝蓮和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克半枝蓮對應(yīng)的蒸餾水體積為14ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 ii m的濾紙過濾，收集濾液， 重復(fù)上述提取過程5次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分之一， 制得混合物II，向混合物II加入體積百分比濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度 為80%，靜置24 h后，用孔徑為20 y m的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得半枝蓮多糖； 步驟三、淫羊藿多糖的制備 將粉碎后的淫羊藿和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克淫羊藿對應(yīng)的蒸餾水體積為10ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 iim的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程4-5次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物III，向混合物III加入體積濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度為 70%，靜置24 h后，用孔徑為20 y m的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得淫羊藿多糖； 步驟四、配制 將制得的白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖按1:1:1的重量比混合并攪拌均 勻后即制得植物多糖。
[0014] 實施例2 一種抗氧化天然植物多糖，所述植物多糖由白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多 糖制成，且制備植物多糖所需各組分的重量比為1:1:1 ; 所述白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖是將白花蛇舌草、半枝蓮和淫羊藿分 別通過超聲波處理制得白花蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液，再分別將白花 蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液進一步蒸干制得。
[0015] 所述抗氧化天然植物多糖的制備方法，包括以下步驟： 步驟一、白花蛇舌草多糖的制備 將粉碎后的白花蛇舌草和蒸餾水按1 :14的重量比混合，之后用頻率為40kHz的超聲波 提取40min，提取液用孔徑為20 y m的濾紙過濾，收集濾液，重復(fù)上述提取過程3次，合并濾 液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分之一，制得混合物I，向混合物I加入體 積濃度為95%的乙醇,使混合后乙醇的體積濃度為60%,靜置24 h后,用孔徑為20 iim的濾 紙過濾，將濾液蒸干后即制得白花蛇舌草多糖； 步驟二、半枝蓮多糖的制備 將粉碎后的半枝蓮和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克半枝蓮對應(yīng)的蒸餾水體積為14ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 ii m的濾紙過濾，收集濾液， 重復(fù)上述提取過程6次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分之一， 制得混合物II，向混合物II加入體積百分比濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度 為80%，靜置24 h后，用孔徑為20 y m的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得半枝蓮多糖； 步驟三、淫羊藿多糖的制備 將粉碎后的淫羊藿和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克淫羊藿對應(yīng)的蒸餾水體積為10ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 ii m的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程4-5次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物III，向混合物III加入體積濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度為 70%，靜置24 h后，用孔徑為20 y m的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得淫羊藿多糖； 步驟四、配制 將制得的白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖按1:1:1的重量比混合并攪拌均 勻后即制得植物多糖。
[0016] 實驗一、整個配方搭配及制備可劃分為以下四個步驟 一、白花蛇舌草多糖制備工藝 白花蛇舌草多糖提取制備步驟如下，將白花蛇舌草粉碎成粉末，與蒸餾水以一定料液 比混合，以設(shè)定的時間進行超聲提取，過濾取上清液，重復(fù)提取一次，合并上清液。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 至原體積四分之一，加入乙醇，使乙醇濃度達到預(yù)設(shè)百分比，靜置過夜，過濾除去不溶物，蒸 干得多糖。為優(yōu)化多糖產(chǎn)量及純度，首先進行單因素實驗如下： 1、白花蛇舌草多糖提取單因素實驗 )不同料液比試驗 設(shè)定料液比（g/ml): 材料：白花蛇舌草粉末5 g，蒸餾水 1:6,1:10,1:14,1:18,1：24〇
[0017] 放入超聲波處理30min，過濾取上清液，重復(fù)提取一次，合并上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原 體積四分之一，加入乙醇，使乙醇濃度達到60%，過夜后過濾除去不溶物，蒸干得多糖，蒽酮 比色法測定多糖。
[0018] B)試驗 料液比 1:10 (g/ml) 材料：白花蛇舌草粉末5 g，蒸餾水 設(shè)定放入超聲的時間 l〇min，20min，30min，40min，50min。
[0019] 過濾取上清液，重復(fù)提取一次，合并上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至原體積四分之一，加入乙 醇，使乙醇濃度達到60%，過夜后過濾除去不溶物，蒸干得多糖，蒽酮比色法測定多糖。
[0020] )不同提取次數(shù) 料液比 1:10 (g/ml) 材料：白花蛇舌草粉末5 g，蒸餾水 設(shè)定放入超聲30 min，過濾取上清液，設(shè)定重復(fù)提取1，2, 3,4, 5,次，合并上清液，旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)至原體積四分之一，加入乙醇，使乙醇濃度達到60%，過夜后過濾除去不溶物，蒸干得多 糖，蒽酮比色法測定多糖。
[0021] D) 料液比 1:10 (g/ml) 材料：白花蛇舌草粉末5 g，蒸餾水 設(shè)定放入超聲的時間30 min，過濾取上清液，重復(fù)提取一次，合并上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至 原體積四分之一，加入乙醇，使乙醇濃度達到50%，60%，70%，80%，90%，過夜后過濾除去不溶 物，蒸干得多糖，蒽酮比色法測定多糖。
[0022] 單因素實驗中各個獲取樣品的吸光值(即多糖含量）

【權(quán)利要求】
1. 一種抗氧化天然植物多糖，其特征在于：所述植物多糖由白花蛇舌草多糖、半枝蓮 多糖和淫羊藿多糖制成，且制備植物多糖所需各組分的重量比為1:1:1 ; 所述白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖是將白花蛇舌草、半枝蓮和淫羊藿分 別通過超聲波處理制得白花蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液，再分別將白花 蛇舌草提取液、半枝蓮提取液和淫羊藿提取液進一步蒸干制得。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種抗氧化天然植物多糖的制備方法，其特征在于，包括以 下步驟： 步驟一、白花蛇舌草多糖的制備 將粉碎后的白花蛇舌草和蒸餾水按1 :14的重量比混合，之后用頻率為40kHz的超聲波 提取30-40min，提取液用孔徑為20 μ m的濾紙過濾，收集濾液，重復(fù)上述提取過程2-3次，合 并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分之一，制得混合物I，向混合物I加 入體積濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度為60%,靜置24 h后，用孔徑為20 μ m 的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得白花蛇舌草多糖； 步驟二、半枝蓮多糖的制備 將粉碎后的半枝蓮和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克半枝蓮對應(yīng)的蒸餾水體積為14ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 μ m的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程5-6次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物II，向混合物II加入體積百分比濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積 濃度為80%，靜置24 h后，用孔徑為20 μ m的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得半枝蓮多糖； 步驟三、淫羊藿多糖的制備 將粉碎后的淫羊藿和蒸餾水混合并攪拌均勻，每克淫羊藿對應(yīng)的蒸餾水體積為10ml， 之后用頻率為40kHz的超聲波提取lOmin，將提取液用孔徑為20 μ m的濾紙過濾，收集濾 液，重復(fù)上述提取過程4-5次后合并濾液，并將濾液放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至原體積四分 之一，制得混合物III，向混合物III加入體積濃度為95%的乙醇，使混合后乙醇的體積濃度為 70%，靜置24 h后，用孔徑為20 μ m的濾紙過濾，將濾液蒸干后即制得淫羊藿多糖； 步驟四、配制 將制得的白花蛇舌草多糖、半枝蓮多糖和淫羊藿多糖按1:1:1的重量比混合并攪拌均 勻后即制得植物多糖。
【文檔編號】C08B37/00GK104292353SQ201410517332
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月30日
【發(fā)明者】高嘉嶼, 尹衛(wèi)平, 楊櫹, 楊九霞, 劉普 申請人:河南科技大學(xué)