TLR3結(jié)合劑相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求2012年5月31日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/653,652、2012年7月11日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/670,289和2012年8月6日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?1/679,923的權(quán)益；它們都通過引用整體并入本文；包括所有附圖。對(duì)序列表的引用本申請(qǐng)與電子格式的序列表一起提交。所述序列表作為標(biāo)題為“PCTSeqlistTLR3-4_ST25”的文件提供，該文件創(chuàng)建于2013年5月29日，大小為46KB。電子格式的序列表中的信息通過引用整體并入本文。技術(shù)領(lǐng)域本發(fā)明涉及結(jié)合TLR3并抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗體(例如單克隆抗體)、抗體片段、及其衍生物。本發(fā)明還涉及產(chǎn)生這樣的抗體的細(xì)胞；制備這樣的抗體的方法；所述抗體的片段、變體和衍生物；包含它們的藥物組合物；使用所述抗體來診斷、治療或預(yù)防疾病例如自身免疫疾病、炎性疾病等的方法。

背景技術(shù)：
果蠅toll蛋白控制著背腹模式形成，并且被認(rèn)為代表一種古老的宿主防御機(jī)制。在人類中，TLR被認(rèn)為是先天性免疫的一種重要組分。人和果蠅Toll蛋白序列顯示出在蛋白鏈的整個(gè)長(zhǎng)度上的同源性。人Toll-樣受體的家族包括10種高度保守的受體蛋白TLR1-TLR10。與果蠅toll類似，人TLR是具有細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的I型跨膜蛋白，所述細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域由富亮氨酸重復(fù)序列(LRR)結(jié)構(gòu)域組成并識(shí)別病原體相關(guān)的分子模式(PAMP)，所述細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域與人白介素-1(IL-1)受體的細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域同源。類似于果蠅toll和IL-1受體二者的信號(hào)傳遞途徑，人Toll-樣受體通過NF-κB途徑傳送信號(hào)。盡管不同哺乳動(dòng)物的TLR共有許多特征和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制，但是它們的生物學(xué)功能是非常不同的。這部分地歸因于以下事實(shí)：四種不同銜接分子(MyD88、TIRAP、TRIF和TRAF)以不同的組合與TLR相結(jié)合并且介導(dǎo)不同的信號(hào)傳遞途徑。另外，同一個(gè)TLR的不同配體可能優(yōu)選地活化不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。此外，TLR在不同的造血細(xì)胞和非造血細(xì)胞中差異性地表達(dá)。因此，對(duì)TLR配體的應(yīng)答不僅取決于被TLR活化的信號(hào)途徑，而且取決于在其中表達(dá)單獨(dú)TLR的細(xì)胞的性質(zhì)。由于Toll-樣受體3(TLR3)信號(hào)傳遞已經(jīng)涉入炎性以及自身免疫性病癥，所以TLR3作為治療靶標(biāo)已經(jīng)受到顯著關(guān)注。專利申請(qǐng)WO98/50547提供了hTLR3蛋白的核酸和氨基酸序列。DeBouteiller等人(2005)J.Biol.Chem.280(46):38133-38145)公開了抗-TLR3抗體結(jié)合細(xì)胞表面TLR3的用途。抗體C1130據(jù)稱對(duì)TLR3具有活化性，并且已經(jīng)在WO2007/051164中進(jìn)行了描述。在Cavassani等人(2008)J.Exp.Med.205:2609-2621中描述了抑制TLR3的多克隆抗體。WO03/106499和Matsumoto等人(2003)J.Immunol.171:3154-3162描述了與抗體克隆TLR3.7(eBioScienceInc.,SanDiego)對(duì)應(yīng)的抗體，據(jù)報(bào)道該抗體結(jié)合并且抑制細(xì)胞表面TLR3，而不結(jié)合細(xì)胞間隔TLR3或髓系DC中的TLR3。WO06/060513描述了抗體C1068，該抗體據(jù)報(bào)道抑制上皮細(xì)胞中的細(xì)胞因子產(chǎn)生，所述上皮細(xì)胞據(jù)報(bào)道在細(xì)胞表面上表達(dá)TLR3。PCT專利申請(qǐng)WO2010/051470提供了抗-TLR3抗體。用于研究用途的其它抗-TLR3抗體包括得自R&DSystemsCorp.的多克隆抗-TLR3抗體、得自Abcam的抗體40C1285、以及都得自ImgenexCorp.的抗體619F7、713E4、716G10、IMG-5631和-IMG-5348。但是，在目前可得到的抗-TLR3抗體中，它們并非最佳地適合用作治療劑，例如用于在體內(nèi)調(diào)節(jié)TLR3。例如，許多遭受效力或?qū)λ鼈兊谋砦坏挠H和力的缺乏。因此需要提供改進(jìn)的針對(duì)TLR3的抗體。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明源自包含特異性地結(jié)合人TLR3并抑制人TLR3的功能的單克隆抗體的新組合物和使用所述單克隆抗體的方法的發(fā)現(xiàn)，所述單克隆抗體包括、但不限于抗體片段和衍生物。本發(fā)明提供了具有新性能的抗體，所述新性能可用于在體內(nèi)靶向TLR3。由于TLR3結(jié)合它的天然配體(dsRNA)并排它地在巨噬細(xì)胞和樹突細(xì)胞(DC)內(nèi)的胞內(nèi)體中傳遞信號(hào)(在酸性pH)，以前已經(jīng)基于在發(fā)生信號(hào)傳遞時(shí)的胞內(nèi)體pH處的高親和力而選擇抗體。但是，關(guān)于抗-TLR3抗體進(jìn)入細(xì)胞中的機(jī)制知之甚少。本發(fā)明提供了這樣的抗體：其在pH中性環(huán)境中對(duì)暴露于細(xì)胞表面的TLR3具有強(qiáng)結(jié)合，并且其表現(xiàn)出改善的TLR3抑制效能。因此，優(yōu)化細(xì)胞表面表達(dá)的TLR3的結(jié)合，可以成為可能調(diào)節(jié)下游(或總)生物活性的細(xì)胞的細(xì)胞(胞內(nèi)體)攝入的重要標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的抗體表現(xiàn)出對(duì)人細(xì)胞表面TLR3的強(qiáng)結(jié)合，如在這樣的測(cè)定中所觀察到的：在所述測(cè)定中，在中性pH條件下排它地在細(xì)胞表面處表達(dá)TLR3。以此方式，選擇具有改善的細(xì)胞表面結(jié)合的抗體。因此，通過受體從它們的配體分離以后在胞吞作用中涉及的胞內(nèi)體TLR3多肽向細(xì)胞表面的回循環(huán)，可以控制抗-TLR3抗體的抑制活性。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體，其抑制表達(dá)TLR3的細(xì)胞中TLR3介導(dǎo)的信號(hào)傳遞，其中所述抗體特異性地結(jié)合僅在細(xì)胞表面處表達(dá)的人TLR3多肽，任選地在中性pH。就結(jié)合僅在細(xì)胞表面處表達(dá)TLR3的細(xì)胞而言，所述抗體任選地具有不超過0.3μg/ml的EC50，任選地不超過0.2μg/ml，任選地不超過0.1μg/ml。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了這樣的抗體：其結(jié)合TLR3蛋白的N-端部分，該部分至少部分地(或主要地或排它地)在TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面(被dsRNA結(jié)合的面)上，且任選地此外至少部分地在人TLR3多肽的N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)。任選地，所述抗體至少部分地在TLR3多肽的N-端部分的主鏈內(nèi)進(jìn)一步結(jié)合TLR3。盡管已經(jīng)證實(shí)TLR3上的一些先前表位可用于TLR3的有效抑制，表位不一定保持存在于非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物中。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了這樣的抗體：其通過結(jié)合人TLR3蛋白的N-端部分而抑制TLR3多肽活性，并且其也結(jié)合非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物TLR3。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了這樣的抗體：其結(jié)合TLR3蛋白的N-端部分，并且其不與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3的結(jié)合，其中所述抗體也結(jié)合非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物TLR3多肽(在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物-TLR3-表達(dá)細(xì)胞中)。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了這樣的抗體：其結(jié)合TLR3蛋白的N-端部分，并且其與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3多肽的N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合，其中所述抗體也結(jié)合非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物TLR3多肽(在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物-TLR3-表達(dá)細(xì)胞中)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體至少部分地(或主要地或排它地)在TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面(被dsRNA結(jié)合的面)上。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體至少部分地在人TLR3多肽的N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)結(jié)合TLR3。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物是食蟹猴。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物TLR3多肽包含在NCBI登錄號(hào)BAG55033中所示的氨基酸序列(SEQIDNO:2)。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了這樣的抗體：其結(jié)合人TLR3蛋白的N-端部分，特別是在SEQIDNO:1的人TLR3的殘基41-251內(nèi)，任選地至少部分地在殘基41-139、41-120或殘基41-89內(nèi)。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了結(jié)合人TLR3蛋白的N-端部分的抗體，其中與所述抗體和SEQIDNO:1的野生型TLR3多肽之間的結(jié)合相比，所述抗體具有減小的與在它的N-端部分中具有突變的TLR3多肽的結(jié)合，所述N-端部分在與SEQIDNO:1的殘基41-139對(duì)應(yīng)的段中。任選地，本發(fā)明的抗體干擾dsRNA與人TLR3多肽的N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合。任選地，所述抗體結(jié)合在TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面內(nèi)的涉入TLR3多肽與dsRNA的結(jié)合的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基和/或與其鄰近的殘基。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基64和/或殘基65，和/或具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基64和/或殘基65處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基86和/或殘基89，和/或具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基86和/或殘基89處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120，和/或具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139，和/或具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基112、113和/或115，和/或具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基112、113和/或115處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，且不具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基64和/或殘基65處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基86和/或殘基89處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體不具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體不具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基112、113和/或115處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體具有減小的對(duì)以下TLR3多肽的結(jié)合：含有在SEQIDNO:1的殘基64和/或殘基65處的突變的TLR3多肽，含有在SEQIDNO:1的殘基86和/或殘基89處的突變的TLR3多肽，和含有在SEQIDNO:1的殘基137和殘基139處的突變的TLR3多肽。如通過與TLR3突變體的結(jié)合所證實(shí)的，所述抗體與以前描述的抗體的差別在于它們的表位。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基112、113和/或115處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基112、113和/或115處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基112、113和/或115處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基112和/或113處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體不具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基86和/或殘基89處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，所述抗體不具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基64和/或殘基65處的突變的TLR3多肽的結(jié)合。任選地，在本文中的任意實(shí)施方案中，所述抗體維持與含有在SEQIDNO:1的殘基116、145、182、196和/或殘基171處的突變的TLR3多肽的結(jié)合(不具有減小的與其結(jié)合)。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了這樣的抗體：其干擾dsRNA與人TLR3多肽的結(jié)合。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了這樣的抗體：其干擾dsRNA與人TLR3多肽的N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合。任選地，所述抗體與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3多肽的結(jié)合，例如，對(duì)人TLR3多肽的N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合?？梢匀缦略u(píng)估競(jìng)爭(zhēng)：使用標(biāo)準(zhǔn)方法，例如Biacore測(cè)定，評(píng)估在有dsRNA存在下抗體是否結(jié)合固定化的TLR3，和/或在酸性條件下在有抗體存在下dsRNA是否結(jié)合固定化的TLR3。任選地，所述抗體在體外測(cè)定中與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3多肽的結(jié)合，所述體外測(cè)定包括下述步驟：(i)使抗-TLR3抗體與TLR3多肽接觸，從而得到與TLR3多肽結(jié)合的抗體，和(ii)使步驟(i)的與TLR3多肽結(jié)合的抗體與dsRNA接觸，并評(píng)估dsRNA是否減少TLR3多肽與所述抗體的結(jié)合，其中結(jié)合的減少指示與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)人TLR3多肽。任選地，所述抗體在體外測(cè)定中與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3多肽的結(jié)合，所述體外測(cè)定包括下述步驟:(i)使TLR3多肽與dsRNA接觸，從而得到與TLR3多肽結(jié)合的dsRNA，和(ii)使步驟(i)的與TLR3多肽結(jié)合的dsRNA與抗-TLR3抗體接觸，并評(píng)估所述TLR3多肽是否結(jié)合dsRNA-TLR3多肽復(fù)合物，其中實(shí)質(zhì)結(jié)合的缺乏指示與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)人TLR3多肽。任選地，所述抗體在體外測(cè)定中與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3多肽的結(jié)合，所述體外測(cè)定包括下述步驟:(i)將抗-TLR3抗體連接至固體支持物(例如，經(jīng)由恒定結(jié)構(gòu)域)，(ii)使所述抗體與TLR3多肽接觸，從而得到與TLR3多肽結(jié)合的抗體，和(iii)使步驟(ii)的與TLR3多肽結(jié)合的抗體與dsRNA接觸，并評(píng)估dsRNA是否減少TLR3多肽與所述抗體的結(jié)合，其中結(jié)合的減少指示與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)人TLR3多肽。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗體結(jié)合在細(xì)胞表面處表達(dá)的人TLR3多肽(任選地如在中性pH下在細(xì)胞表面處排它地表達(dá)TLR3的細(xì)胞中所評(píng)估的)，內(nèi)化進(jìn)表達(dá)TLR3的細(xì)胞中，和抑制細(xì)胞(例如表達(dá)TLR3的人樹突細(xì)胞)中的TLR3信號(hào)傳遞。在一個(gè)方面，在中性條件下和具體地在細(xì)胞胞質(zhì)溶膠中遇到的代表性條件下，所述抗體結(jié)合人TLR3多肽。這樣的中性條件通常特征在于6.6-7.4的pH，例如在細(xì)胞胞質(zhì)溶膠中發(fā)現(xiàn)的7.2的弱堿性pH。就在中性pH結(jié)合TLR3多肽而言，所述抗體任選地具有不超過10-9M的KD，任選地小于10-10M，任選地小于10-11M。任選地，在中性條件的結(jié)合具有比在酸性條件下更好的親和力，例如在中性條件下與TLR3結(jié)合的KD比酸性條件降低了至少0.5-、1.0-、1.5-或2.0-log10。本發(fā)明進(jìn)一步提供了特異性抗體，其具有比以前報(bào)道的抗體增加的活性。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，任選地在酸性條件和/或中性條件下，所述抗體與單克隆抗體11E1、7G11、31F6、32C4和37B7中的任一種或任意組合競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽(例如包含SEQIDNO:1的氨基酸序列的人TLR3多肽)的結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，任選地在酸性條件和/或中性條件下，本發(fā)明的抗體與特定抗體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽的結(jié)合，所述特定抗體分別具有SEQIDNO:3和4的VH和VL區(qū)域(11E1)、SEQIDNO:14和15的VH和VL區(qū)域(31F6)、SEQIDNO:25和26的VH和VL區(qū)域(32C4)、SEQIDNO:36和37的VH和VL區(qū)域(37B7)、或SEQIDNO:47和48的VH和VL區(qū)域(7G11)。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗體可以具有含有抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)CDR的重鏈和/或輕鏈。在一個(gè)方面，特異性地結(jié)合TLR3的抗體具有下述性能中的一種或多種(包括它們的任意組合或全部)：a.結(jié)合包含SEQIDNO:1和/或2的氨基酸序列的TLR3多肽；b.特異性地結(jié)合僅在細(xì)胞表面處表達(dá)的人TLR3多肽，其中就結(jié)合僅在細(xì)胞表面處表達(dá)TLR3的細(xì)胞而言，所述抗體具有不超過0.3μg/ml的EC50，任選地不超過0.2μg/ml，任選地不超過0.1μg/ml；c.內(nèi)化進(jìn)在它的表面上表達(dá)TLR3的細(xì)胞中；d.在中性pH，例如約pH7.2的pH，對(duì)TLR3多肽具有亞納摩爾親和力；e.在酸性pH，例如小于約6.5的pH，或約4.5-6.5的pH或約pH5.6，對(duì)TLR3多肽具有亞納摩爾親和力；f.在有TLR3配體存在下抑制TLR3信號(hào)傳遞；g.在炎性背景中，例如在有炎性細(xì)胞因子諸如IFNα存在下，抑制TLR3信號(hào)傳遞；h.與抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽的結(jié)合；i.與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽的N-端部分的結(jié)合；j.具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基64和/或殘基65處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和/或減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基86和/或殘基89處的突變的TLR3多肽的結(jié)合；k.具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基117和/或殘基120處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和/或具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基137和/或殘基139處的突變的TLR3多肽的結(jié)合，和/或具有減小的對(duì)含有在SEQIDNO:1的殘基112、113和/或115處的突變的TLR3多肽的結(jié)合；和/或l.結(jié)合與SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基41-251、41-89、41-120或41-139對(duì)應(yīng)的區(qū)段中的至少1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)殘基。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種單克隆抗體，其特異性地結(jié)合與SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基1-251、任選地殘基41-251、41-89、41-120或41-139對(duì)應(yīng)的區(qū)段中的至少1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)殘基。任選地，所述抗體抑制通過TLR3多肽的信號(hào)傳遞。任選地，所述抗體不會(huì)結(jié)合SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基116、殘基145和/或殘基182。任選地，所述抗體不會(huì)結(jié)合SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基171和/或殘基196。任選地，與對(duì)SEQIDNO:1的野生型TLR3多肽的結(jié)合相比，維持(即，基本上不減小)所述抗體與含有在SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基116、145、182196和/或殘基171處的突變的TLR3多肽的結(jié)合；優(yōu)選地，所述突變是K145E、D116R、K182E、N196A和/或E171A突變。這樣的抗體可以任選地進(jìn)一步具有本文描述的任何性能，例如在酸性pH對(duì)TLR3多肽的亞納摩爾親和力，在有TLR3配體存在下或在炎性背景中(例如在有炎性細(xì)胞因子諸如IFNα存在下)抑制TLR3信號(hào)傳遞，與11E1、7G11、31F6、32C4或37B7競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽的結(jié)合；不會(huì)與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽的C-端部分的結(jié)合；或抑制DC上的IP-10分泌(例如在人髓樣DC中)。此外，這樣的抗體可以用在本發(fā)明的任意方法中。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種結(jié)合TLR3多肽的抗體，其中所述抗體分別包含(i)如在SEQIDNO:5、6或7(HCDR1)、8或9(HCDR2)和10(HCDR3)中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，和(ii)如在SEQIDNO:11、12和13中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列；其中所述序列中的任一個(gè)的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體分別包含(i)如在SEQIDNO:16、17或18(HCDR1)、19或20(HCDR2)和21(HCDR3)中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，和(ii)如在SEQIDNO:22、23和24中所示的的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列；其中所述序列中的任一個(gè)的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體分別包含(i)如在SEQIDNO:27、28或29(HCDR1)、30或31(HCDR2)和32(HCDR3)中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，和(ii)如在SEQIDNO:33、34和35中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列；其中所述序列中的任一個(gè)的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體分別包含(i)如在SEQIDNO:38、39或40(HCDR1)、41或42(HCDR2)和43(HCDR3)中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，和(ii)如在SEQIDNO:44、45和46中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列；其中所述序列中的任一個(gè)的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體分別包含(i)如在SEQIDNO:49、50或51(HCDR1)、52或53(HCDR2)和54(HCDR3)中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，和(ii)如在SEQIDNO:55、56和57中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列；其中所述序列中的任一個(gè)的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文中任意實(shí)施方案的抗體能夠被在它的表面上表達(dá)TLR3多肽的細(xì)胞內(nèi)化。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體是嵌合抗體，例如含有非鼠的、任選地人類的恒定區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體是人的或人源化的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體是小鼠或大鼠抗體(例如，包含從大鼠或大鼠基因或大鼠Ig基因座基因段衍生出的CDR)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體基本上不結(jié)合其它人TLR(例如TLR4)。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗體的同種型是IgG，任選地是IgG1或IgG3。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體包含F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域或是被FcγR結(jié)合的同種型。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗體是選自以下的抗體片段：Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、Fv、雙體、單鏈抗體片段、或包含多個(gè)不同抗體片段的多特異性抗體。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗體不包含F(xiàn)c結(jié)構(gòu)域或是基本上不被FcγR結(jié)合的同種型(例如人CD16)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體屬于人IgG4或IgG2同種型。經(jīng)修飾以減小它們的FcγR結(jié)合的人IgG4同種型或其它IgG同種型可以利用其有利的藥理學(xué)性能，例如血清半衰期，同時(shí)調(diào)節(jié)TLR3信號(hào)傳遞(在例如DC中)，而不誘導(dǎo)細(xì)胞的死亡。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗-TLR3抗體抑制TLR3信號(hào)傳遞，并且包含人IgG4或IgG2同種型的恒定區(qū)。在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗-TLR3抗體抑制TLR3信號(hào)傳遞并且包含基本上不結(jié)合FcγRIIIa的恒定區(qū)(重鏈恒定區(qū))。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗-TLR3抗體包含人IgG4同種型的重鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗-TLR3抗體包含人IgG4重鏈恒定區(qū)，并且包含在殘基241中的絲氨酸至脯氨酸突變，所述殘基241對(duì)應(yīng)于根據(jù)EU-索引(Kabat等人,“Sequencesofproteinsofimmunologicalinterest”,第5版,NIH,Bethesda,ML,1991)的位置228。包含這樣的抗體的組合物可以表征為，具有小于約15％、諸如小于約10％(例如，約5％或更少、約4％或更少、約3％或更少或甚至約1％或更少)的IgG4“半抗體”(包含單個(gè)重鏈/輕鏈對(duì))。這樣的IgG4“半抗體”副產(chǎn)物由于一部分分泌型人IgG4的鉸鏈區(qū)中的重鏈間二硫鍵的異質(zhì)性而形成(參見Angal等人,MolecularImmunology,30(1):105-108,1993中關(guān)于IgG4“半抗體”、S241P突變和有關(guān)原理的描述)。該效應(yīng)通常僅在變性、非還原條件下是可檢測(cè)的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體與可檢測(cè)的或毒性的部分綴合或共價(jià)結(jié)合。在一個(gè)方面，所述抗體任選地抑制TLR3信號(hào)傳遞，而不阻斷dsRNTLR3配體與TLR3多肽的主要(即C-端)dsRNA結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合。在一個(gè)方面，在酸性條件下，且特別是在細(xì)胞的酸化亞細(xì)胞隔室(例如胞吞途徑胞內(nèi)體、溶酶體的隔室)中所遇到的代表性條件下，所述抗體也結(jié)合人TLR3。這樣的酸性條件通常特征在于低于約pH6.5、或在約pH4.5-6.5之間、或約pH5.6的pH。在本文中任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗體調(diào)節(jié)、任選地抑制細(xì)胞的酸化亞細(xì)胞隔室(例如胞吞途徑胞內(nèi)體、溶酶體的隔室)中的TLR3信號(hào)傳遞。在本文中任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述抗體調(diào)節(jié)、任選地抑制樹突細(xì)胞(DC)(例如髓樣DC、單核細(xì)胞衍生出的DC)中的TLR3信號(hào)傳遞。在本文中任意實(shí)施方案的其它方面，所述抗體在中性和/或酸性條件下對(duì)TLR3的二價(jià)結(jié)合親和力可以任選地以不超過約100、50、10、5或1納摩爾、優(yōu)選地亞納摩爾或任選地不超過約500、200、100或10皮摩爾的平均KD(即更好親和力)為特征。在本文中任意實(shí)施方案的其它方面，所述抗體通過至少部分地(或完全地)阻斷TLR3配體與TLR3多肽的結(jié)合而抑制TLR3信號(hào)傳遞。所述TLR3配體通常是除了抗-TLR3抗體以外的配體，并且可以是天然存在的或非天然存在的TLR3配體，任選地是基于dsRNA的配體諸如聚AU(聚腺苷酸:聚尿苷酸)或聚IC(聚肌苷酸:聚胞苷酸)。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種鑒別、篩選和/或生產(chǎn)抗體的方法，所述抗體特異性地結(jié)合并抑制哺乳動(dòng)物受試者中的TLR3多肽，所述方法包括下述步驟：a)提供多個(gè)結(jié)合人TLR3多肽的抗體，任選地通過包括用包含TLR3多肽的免疫原免疫非人哺乳動(dòng)物的方法，和(b)在僅在細(xì)胞表面處表達(dá)人TLR3的細(xì)胞中評(píng)估所述抗體對(duì)TLR3多肽的結(jié)合親和力。任選地，所述方法進(jìn)一步包括：從所述多個(gè)抗體中選擇就對(duì)僅在細(xì)胞表面處表達(dá)人TLR3的細(xì)胞的結(jié)合而言具有不超過0.3μg/ml、任選地不超過0.2μg/ml、任選地不超過0.1μg/ml的EC50的抗體。本發(fā)明的任意方法可以進(jìn)一步表征為包括在本申請(qǐng)中(特別包括在“具體實(shí)施方式”中)描述的任意步驟。本發(fā)明進(jìn)一步涉及可通過任何本發(fā)明的方法得到的抗體。本發(fā)明進(jìn)一步涉及本發(fā)明的抗體的藥用或診斷制劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及在治療或診斷方法中使用抗體的方法，任選地與第二種治療劑(例如腎上腺皮質(zhì)激素、DMARD、抗-細(xì)胞因子或抗-細(xì)胞因子受體劑、抗-TNFα劑等)聯(lián)用?？梢栽诒疚膭e處進(jìn)一步描述本發(fā)明的這些和其它有利的方面和特征。附圖說明圖1A、1B、1C和1D顯示了抗體11E1、7G11、32C4和31F6分別結(jié)合HEK293T細(xì)胞的體外劑量效應(yīng)，所述HEK293T細(xì)胞用TLR3ECD構(gòu)建體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染且僅在它們的表面處表達(dá)TLR3。將每種抗體與參比抗體31C3進(jìn)行對(duì)比；就抗體11E1、7G11、32C4和31F6而言，改善了對(duì)細(xì)胞表面TLR3的結(jié)合。圖2A、2B、2C、2D和2E顯示了使用293T-人TLR3螢光素酶測(cè)定(用人抗-TLR3抗體)的TLR3信號(hào)傳遞的劑量依賴性抑制。將每種抗體與參比抗體31C3進(jìn)行對(duì)比；就抗體11E1、7G11、32C4、31F6和37B7而言，改善了dsRNA誘導(dǎo)的TLR3信號(hào)傳遞的抑制。圖2F、2G和2H顯示了TLR3多肽的N-端末端的視圖，用黑色顯示突變的氨基酸殘基，用灰色顯示在形成基本表位的一部分的殘基附近的殘基。圖2F顯示了TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面的視圖，其中TLR3多肽的N-端末端是在圖像的右側(cè)；圖2G顯示了TLR3多肽的含有聚糖的側(cè)表面和主鏈的視圖，其中TLR3多肽的N-端末端是在前景中(在圖像的左側(cè))。圖2H顯示了TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面和主鏈的視圖，其中TLR3多肽的N-端末端是在前景中(在圖像的右側(cè))。圖3顯示了類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎小鼠模型的結(jié)果。圖3A顯示了預(yù)防的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎小鼠模型的結(jié)果。圖3B顯示了治愈的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎小鼠模型的結(jié)果。圖3C顯示了當(dāng)用PBS、對(duì)照抗體、28G7和抗-TNFα抗體(HumiraTM)治療小鼠時(shí)，治愈的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎小鼠模型的結(jié)果。圖4顯示了小鼠結(jié)腸炎模型的結(jié)果。圖4A顯示了用鹽水(黑色點(diǎn))、僅用TNBS(黑色正方形)、用抗-TNFα抗體和TNBS(黑色三角形)、用28G7和TNBS(空心點(diǎn))、以及用對(duì)照Ab和TNBS(空心正方形)治療的小鼠的壁厚度測(cè)量結(jié)果。圖4B顯示了用鹽水(黑色點(diǎn))、僅用TNBS(黑色正方形)用抗-TNFα抗體和TNBS(黑色三角形)、用28G7和TNBS(空心點(diǎn))、以及用對(duì)照Ab和TNBS(空心正方形)治療的小鼠的肉眼可見損傷評(píng)分。根據(jù)本發(fā)明的抗-TLR3抗體在嚴(yán)謹(jǐn)條件下改善了疾病的發(fā)展(*p<0.05,**p<0.01，相對(duì)于鹽水)。圖5顯示了COPD小鼠模型的結(jié)果。圖5A顯示了巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的BAL分類性細(xì)胞計(jì)數(shù)。抗-TLR3抗體強(qiáng)烈地減少了嗜中性粒細(xì)胞在氣道中的滲入，而沒有顯著影響巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞或淋巴細(xì)胞。圖5B顯示了單獨(dú)的LPS/彈性蛋白酶以及與抗-TLR3抗體或羅氟司特組合的LPS/彈性蛋白酶各自的靜脈血飽和氧(以百分比計(jì))。圖5C顯示了BAL流體(BALF)中的IL17A，其中抗-TLR3抗體顯著減少了IL17A(pg/ml)，并且像羅氟司特一樣多。圖5D顯示了BALF中的IP-10，其中抗-TLR3抗體顯著減少了IP-10(pg/ml)。圖5E顯示了第二個(gè)研究的巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的BAL分類性細(xì)胞計(jì)數(shù)，所述第二個(gè)研究對(duì)比了抗-TLR3抗體(28G7)、羅氟司特(Roflu)、以及羅氟司特和抗-TLR3抗體的組合(combo)。圖6顯示了CLP(盲腸結(jié)扎和穿刺-膿毒癥)小鼠模型的結(jié)果。在該急性模型中，小鼠經(jīng)歷模仿膿毒性休克的急性感染。圖7A和7B顯示了分別與地塞米松或組合的抗-人TLR3mAb(標(biāo)記的IPH33.1)的藥物組合的結(jié)果。每種抗體當(dāng)與地塞米松或組合時(shí)響應(yīng)于聚IC進(jìn)一步大幅減少PBMC的體外IP-10產(chǎn)生。具體實(shí)施方式前言本發(fā)明至少部分地基于特異性地且有效地抑制TLR3信號(hào)傳遞途徑的高親和力單克隆抗體的發(fā)現(xiàn)。發(fā)明人還提供了存在于人TLR3上的新表位，包括被抗體11E1、7G11、31F6、32C4和/或37B7識(shí)別的表位，所述抗體特別有效地抑制TLR3信號(hào)傳遞，并響應(yīng)于TLR3配體刺激而抑制細(xì)胞因子釋放。所述抗體可以用于治療有此需要的受試者中的自身免疫疾病或炎性疾病。本發(fā)明也提供了使用抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗-TLR3抗體在有此需要的受試者中治療在炎性疾病或自身免疫疾病的過程中發(fā)生的復(fù)發(fā)、發(fā)作或急性期的方法。本發(fā)明也提供了使用抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗-TLR3抗體在有此需要的受試者中治療確定的炎性的或自身免疫疾病的新方法。本發(fā)明還提供了使用抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗-TLR3抗體的治療方案和治療組合，其可以用于治療有此需要的受試者中的炎性疾病或自身免疫疾病。本發(fā)明的在酸性和中性條件下結(jié)合TLR3的抗體通常以高親和性結(jié)合細(xì)胞表面TLR3和胞內(nèi)體TLR3，使得所述抗體在其中靶向TLR3(例如調(diào)節(jié))為有用的任何情況下(例如，疾病的治療或預(yù)防)將是有用的。在一些炎癥病例中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)TLR3位于巨噬細(xì)胞表面，并且在氯喹中和胞內(nèi)體酸化后阻斷TLR3，盡管如此TLR3仍然表現(xiàn)出一些抗炎活性(Cavassani等人.2008,出處同上)。但是，本發(fā)明的抗體在疾病的治療或預(yù)防中與其它抗體相比將具有最大的優(yōu)點(diǎn)，在所述疾病中，在細(xì)胞溶質(zhì)(例如胞內(nèi)體)隔室中調(diào)節(jié)(例如，抑制)TLR3的信號(hào)傳遞是有用的或需要的，并且調(diào)節(jié)這樣的隔室TLR3的信號(hào)傳遞的相對(duì)重要程度可以取決于疾病。這樣的疾病的一個(gè)例子是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；據(jù)信胞內(nèi)體隔室表達(dá)的TLR3在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中起重要作用，因?yàn)槭褂寐揉?一種胞內(nèi)體酸化的抑制劑)的治療會(huì)抑制TLR3信號(hào)傳遞并且抑制從得自患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者的滑液培養(yǎng)物中生成炎性細(xì)胞因子(Sacre等人(2008)J.Immunol.181:8002-8009)。據(jù)信胞內(nèi)體隔室表達(dá)的TLR3在多種其它疾病中起重要作用，在所述疾病中，DC(例如髓樣DC)涉入疾病惡化，因?yàn)閙DC具有確定記載的從細(xì)胞凋亡的或壞死的細(xì)胞中吸收抗原的能力(包括在急性炎癥中的組織壞死期間)。因?yàn)楸景l(fā)明的抗體對(duì)于TLR3是特異性的，它們還可以用于其它目的，包括純化TLR3或表達(dá)TLR3的細(xì)胞，在體外、離體或在體內(nèi)調(diào)節(jié)(例如，活化或抑制)TLR3受體，靶向表達(dá)TLR3的細(xì)胞以進(jìn)行體內(nèi)破壞，或在體內(nèi)、離體或在體外地特異性地標(biāo)記/結(jié)合TLR3，包括用于多種方法諸如免疫印跡法、IHC分析(即在冰凍活組織檢查上)、FACS分析和免疫沉淀。定義本文中使用的“TLR3配體”表示可以在體外、離體或在體內(nèi)特異性地結(jié)合TLR3并且改變TLR3的活性的任何化合物。所述化合物可以是天然存在的配體(例如通常是dsRNA或病毒dsRNA)或合成的配體(例如聚IC或聚AU)。所述化合物可以是任何類型的分子，包括無機(jī)或有機(jī)的化合物或元素，包括蛋白(諸如抗體)、核酸、碳水化合物、脂質(zhì)、或任何其它分子實(shí)體。另外，這樣的化合物可以以任何方式(包括活化或抑制)并且通過任何機(jī)制(包括通過以類似于天然存在的配體的方式結(jié)合受體并且觸發(fā)或關(guān)閉活性，或通過結(jié)合受體并且阻斷對(duì)其它配體的接近)來調(diào)節(jié)TLR3受體。優(yōu)選地，所述配體活化所述受體，并且如此可以用于誘導(dǎo)表達(dá)TLR3的細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子。本文中使用的術(shù)語“抗體”表示多克隆抗體和單克隆抗體。取決于重鏈中恒定結(jié)構(gòu)域的類型，可以將抗體指定為以下五個(gè)大類之一：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。這些中的幾個(gè)被進(jìn)一步分成亞類或同種型，諸如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4等。一種示例性的免疫球蛋白(抗體)結(jié)構(gòu)單元包含四聚體。每個(gè)四聚體由兩個(gè)相同的多肽鏈對(duì)組成，每一對(duì)具有一個(gè)“輕”鏈(約25kDa)和一個(gè)“重”鏈(約50-70kDa)。每個(gè)鏈的N端限定約100-110個(gè)或更多個(gè)氨基酸的可變區(qū)，所述可變區(qū)主要負(fù)責(zé)抗原識(shí)別。術(shù)語可變輕鏈(VL)和可變重鏈(VH)分別表示這些輕鏈和重鏈。對(duì)應(yīng)于不同類別的免疫球蛋白的重鏈恒定結(jié)構(gòu)域分別被稱為“α”、“δ”、“ε”、“γ”和“μ”。不同類別的免疫球蛋白的亞基結(jié)構(gòu)和三維構(gòu)型是眾所周知的。IgG和/或IgM是在本發(fā)明中所采用的優(yōu)選抗體類別，其中IgG是特別優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈兪窃谏頎顩r下最常見的抗體，并且因?yàn)樗鼈冊(cè)趯?shí)驗(yàn)室條件下最易于制備。優(yōu)選地，本發(fā)明的抗體是單克隆抗體。特別優(yōu)選地是人源化的、嵌合的、人類的、或在其它方面人類合適的抗體。“抗體”還包括本文中描述的任何抗體的任何片段或衍生物。術(shù)語“特異地結(jié)合”是指，抗體在競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合測(cè)定中可以優(yōu)選地與結(jié)合配偶體(例如TLR3)結(jié)合，如使用重組體形式的蛋白、其中的表位、或存在于分離的靶細(xì)胞的表面上的天然蛋白所評(píng)估的。用于確定特異性結(jié)合的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合測(cè)定和其它方法在下面進(jìn)一步描述，并且是本領(lǐng)域眾所周知的。當(dāng)抗體被描述成與特定單克隆抗體(例如11E1、7G11、31F6、32C4或37B7)或其它TLR3配體(例如，dsRNA)“競(jìng)爭(zhēng)”時(shí)，是指在使用重組TLR3分子或表面表達(dá)的TLR3分子的結(jié)合測(cè)定中，所述抗體與所述單克隆抗體(或其它TLR3配體)競(jìng)爭(zhēng)。例如，如果試驗(yàn)抗體在結(jié)合測(cè)定中減少了11E1、7G11、31F6、32C4或37B7與TLR3多肽或表達(dá)TLR3的細(xì)胞的結(jié)合，則所述抗體被描述成分別與11E1、7G11、31F6、32C4或37B7“競(jìng)爭(zhēng)”。本文中使用的術(shù)語“親和力”是指抗體與表位的結(jié)合的強(qiáng)度。抗體的親和力由解離常數(shù)KD給出，所述解離常數(shù)KD被定義為[Ab]x[Ag]/[Ab-Ag]，其中[Ab-Ag]是抗體-抗原復(fù)合物的摩爾濃度，[Ab]是未結(jié)合的抗體的摩爾濃度，并且[Ag]是未結(jié)合的抗原的摩爾濃度。親和常數(shù)Ka被定義為1/Kd。用于確定mAb的親和力的優(yōu)選方法可以在以下參考文獻(xiàn)中找到：Harlow,等人,Antibodies:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.,1988),Coligan等人,編,CurrentProtocolsinImmunology,GreenePublishingAssoc.andWileyInterscience,N.Y.,(1992,1993),和Muller,Meth.Enzymol.92:589-601(1983)，所述參考文獻(xiàn)通過引用整體并入本文。本領(lǐng)域眾所周知的用于確定mAb的親和力的一種優(yōu)選的并且標(biāo)準(zhǔn)的方法是使用Biacore儀器。在本發(fā)明的上下文中，“決定簇”表示多肽上的相互作用或結(jié)合的位點(diǎn)。術(shù)語“表位”被定義為抗原決定簇，并且是抗原上的抗體所結(jié)合的地方或區(qū)域。蛋白表位可以包含直接涉入結(jié)合的氨基酸殘基以及被特異性抗原結(jié)合抗體或肽有效地阻斷的氨基酸殘基(即在抗體“足跡”內(nèi)的氨基酸殘基)。復(fù)雜抗原分子上的最簡(jiǎn)單形式或最小結(jié)構(gòu)區(qū)域可以與例如抗體或受體結(jié)合。表位可以是直鏈的或構(gòu)象性的/結(jié)構(gòu)性的。術(shù)語“直鏈表位”被定義為由多個(gè)氨基酸殘基組成的表位，所述氨基酸殘基在氨基酸的直鏈序列(一級(jí)結(jié)構(gòu))上是鄰接的。術(shù)語“構(gòu)象表位或結(jié)構(gòu)表位”被定義為由氨基酸殘基構(gòu)成的表位，所述氨基酸殘基不全是鄰接的，并且因此代表通過分子折疊(二級(jí)、三級(jí)和/或四級(jí)結(jié)構(gòu))而彼此鄰近的氨基酸的線性序列的分離的部分。構(gòu)象表位依賴于三維結(jié)構(gòu)。因此，術(shù)語“構(gòu)象性的”經(jīng)常與“結(jié)構(gòu)性的”互換使用。“免疫原性片段”在本文中是指能夠引起例如以下免疫應(yīng)答的任何多肽片段或肽片段：(i)結(jié)合所述片段的抗體和/或結(jié)合任何形式的包含所述片段的分子(包括膜結(jié)合的受體以及從其衍生出的突變體)的抗體的產(chǎn)生，(ii)T細(xì)胞應(yīng)答的刺激，所述T細(xì)胞應(yīng)答涉及與包含任何MHC分子以及從所述片段衍生出的肽的雙分子復(fù)合物反應(yīng)的T細(xì)胞，(iii)轉(zhuǎn)染的媒介物(諸如噬菌體或表達(dá)編碼哺乳動(dòng)物免疫球蛋白的基因的細(xì)菌)的結(jié)合。可替換地，免疫原性片段還表示能夠引起如上定義的免疫應(yīng)答的任何結(jié)構(gòu)，例如通過共價(jià)偶聯(lián)而與載體蛋白連接的肽片段，在它的氨基酸序列中包含所述肽片段的嵌合重組多肽構(gòu)建體，并且特別包括用cDNA轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，所述cDNA的序列包含編碼所述片段的部分?！叭祟惡线m的”抗體表示可以安全地用在人類中例如用于本文中描述的治療方法的任何抗體、衍生化抗體或抗體片段。人類合適的抗體包括所有類型的人源化抗體、嵌合抗體或全人抗體，或以下任何抗體：其中所述抗體的至少一部分衍生自人類或通過其它方式進(jìn)行了修飾，從而避免當(dāng)使用天然非人抗體時(shí)通常引起的免疫應(yīng)答。為了本發(fā)明的目的，“人源化”或“人”抗體表示這樣的抗體：其中將一種或多種人免疫球蛋白的恒定和可變框架區(qū)與動(dòng)物免疫球蛋白的結(jié)合區(qū)(例如CDR)融合。這樣的抗體被設(shè)計(jì)成保持衍生出所述結(jié)合區(qū)的非人抗體的結(jié)合特異性，但是卻避免針對(duì)非人抗體的免疫反應(yīng)。這樣的抗體可以從轉(zhuǎn)基因小鼠或其它動(dòng)物得到，所述轉(zhuǎn)基因小鼠或其它動(dòng)物已經(jīng)被“工程化”以產(chǎn)生響應(yīng)于抗原激發(fā)的特異性人抗體(參見，例如，Green等人(1994)NatureGenet7:13；Lonberg等人(1994)Nature368:856；Taylor等人(1994)IntImmun6:579，其全部教導(dǎo)通過引用并入本文)。還可以通過遺傳學(xué)方法或染色體轉(zhuǎn)染方法以及噬菌體展示技術(shù)來構(gòu)建全人抗體，所有這些技術(shù)是本領(lǐng)域已知的(參見，例如，McCafferty等人(1990)Nature348:552-553)。還可以通過體外活化的B細(xì)胞來產(chǎn)生人抗體(參見，例如，美國(guó)專利號(hào)5,567,610和5,229,275，它們通過引用整體并入)?！扒逗峡贵w”是這樣的抗體分子：其中(a)恒定區(qū)或其部分被改變、替換或交換，使得抗原結(jié)合位點(diǎn)(可變區(qū))連接到不同或改變類別的效應(yīng)子功能和/或物質(zhì)的恒定區(qū)、或給嵌合抗體提供新特性的完全不同的分子，例如，酶、毒素、激素、生長(zhǎng)因子、藥物等；或(b)可變區(qū)或其部分用具有不同或改變的抗原特異性的可變區(qū)來改變、替換或交換。術(shù)語“Fc結(jié)構(gòu)域”、“Fc部分”和“Fc區(qū)”表示抗體重鏈的C-端片段，例如，人γ(γ)重鏈或它在其它類型的抗體重鏈中的相應(yīng)物序列(例如，對(duì)于人抗體而言，α、δ、ε和μ)的約氨基酸(aa)230至約氨基酸450，或它的天然存在的同種異型。除非另外指出，否則貫穿本公開內(nèi)容使用通常接受的針對(duì)免疫球蛋白的Kabat氨基酸編號(hào)(參見Kabat等人(1991)SequencesofProteinofImmunologicalInterest,第5版,UnitedStatesPublicHealthService,NationalInstituteofHealth,Bethesda,MD)。術(shù)語“分離的”、“純化的”或“生物純的”表示實(shí)質(zhì)上或基本上不含有如在其天然狀態(tài)中所發(fā)現(xiàn)的通常伴隨它的組分的物質(zhì)。通常使用分析化學(xué)技術(shù)(諸如聚丙烯酰胺凝膠電泳或高效液相色譜法)來確定純度和同質(zhì)性。作為在制劑中存在的優(yōu)勢(shì)物質(zhì)的蛋白是基本上純化的。術(shù)語“多肽”、“肽”和“蛋白”在本文中可互換使用，以表示氨基酸殘基的聚合物。該術(shù)語適用于這樣的氨基酸聚合物：其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基是對(duì)應(yīng)的天然存在的氨基酸的人工化學(xué)模擬物，以及適用于天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。當(dāng)涉及例如細(xì)胞、或核酸、蛋白、或載體使用時(shí)，術(shù)語“重組體”指示，所述細(xì)胞、核酸、蛋白或載體已經(jīng)通過引入異源核酸或蛋白，或改變天然核酸或蛋白而進(jìn)行了修飾，或所述細(xì)胞從這樣修飾的細(xì)胞衍生出。因而，例如，重組細(xì)胞表達(dá)在細(xì)胞的天然(非重組)形式中未發(fā)現(xiàn)的基因，或表達(dá)否則異常地表達(dá)的、低表達(dá)的或根本不表達(dá)的天然基因。在本發(fā)明的上下文中，術(shù)語“結(jié)合”共同決定簇的抗體表示這樣的抗體：其以特異性和/或親和力結(jié)合所述決定簇。生產(chǎn)抗-TLR3抗體適合用于本發(fā)明的方法的抗體特異性地結(jié)合TLR3。此外，在對(duì)應(yīng)于在細(xì)胞表面處遇到的條件的條件下，本發(fā)明的抗體以親和力結(jié)合TLR3。此外，本發(fā)明的抗體能夠抑制TLR3信號(hào)傳遞途徑。抑制性抗體特異性地抑制TLR3信號(hào)傳遞途徑的能力使它們可用于多種用途，尤其是用于治療或預(yù)防疾病，在所述疾病中，需要抑制TLR3信號(hào)傳遞途徑，即避免如本文中描述的進(jìn)一步細(xì)胞因子和趨化因子分泌以及細(xì)胞活化。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了使用抗體的方法，所述抗體結(jié)合人TLR3，并與單克隆抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3的結(jié)合?！癟LR3”、“TLR3多肽”和“TLR3受體”可互換使用，在本文中用于表示Toll-樣受體3，即Toll樣受體(TLR)家族的一個(gè)成員。人TLR3的氨基酸序列顯示在SEQIDNO:1(NCBI登錄號(hào)NP_003256，其公開內(nèi)容通過引用并入本文)中。在NCBI登錄號(hào)NM_003265中描述了人TLR3mRNA序列。還在PCT專利公開號(hào)WO98/50547(其公開內(nèi)容通過引用并入本文)中描述了人TLR3序列。非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物(食蟹猴)TLR3氨基酸序列顯示在NCBI登錄號(hào)BAG55033(SEQIDNO:2)中。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體，所述抗體與單克隆抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7競(jìng)爭(zhēng)，并且識(shí)別與單克隆抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7實(shí)質(zhì)上或基本上相同的或相同的TLR3分子上的表位或“表位位點(diǎn)”，結(jié)合它們，或?qū)λ鼈兙哂忻庖咛禺愋?。在其它?shí)施方案中，所述單克隆抗體由抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7組成或是其衍生物或片段。TLR3的任意片段(優(yōu)選地但并非排它地是人TLR3，或TLR3片段的任何組合)可以用作抗原來產(chǎn)生抗體，并且本發(fā)明的抗體可以識(shí)別在TLR3多肽內(nèi)的任意位置處的表位，只要它們可以在表達(dá)TLR3的細(xì)胞(諸如如本文中所述的MdDC或MoDC)上這樣起作用即可。在一個(gè)實(shí)施方案中，所識(shí)別的表位存在于細(xì)胞表面上，即它們可接近存在于細(xì)胞之外的抗體。最優(yōu)選地，所述表位是被抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7特異性地識(shí)別的表位。另外，識(shí)別TLR3內(nèi)的獨(dú)特表位的抗體可以聯(lián)合用于例如以不同個(gè)體之間的最大效能和寬度結(jié)合TLR3多肽。可以通過本領(lǐng)域已知的多種技術(shù)來生產(chǎn)本發(fā)明的抗體。通常如下生產(chǎn)它們：用包含TLR3多肽(優(yōu)選人TLR3多肽)的免疫原，免疫接種非人動(dòng)物，優(yōu)選小鼠。所述TLR3多肽可以包含人TLR3多肽的全長(zhǎng)序列，或其片段或衍生物，通常是免疫原性片段，即包含暴露于表達(dá)TLR3多肽的細(xì)胞的表面上的表位(優(yōu)選被11E1、7G11、31F6、32C4或37B7抗體識(shí)別的表位)的多肽的一部分。這樣的片段通常含有成熟多肽序列的至少約7個(gè)連續(xù)氨基酸，甚至更優(yōu)選其至少約10個(gè)連續(xù)氨基酸。片段通?；旧蠌氖荏w的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域衍生出。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述免疫原包含在脂質(zhì)膜中(通常在細(xì)胞表面處)的野生型人TLR3多肽。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，所述免疫原包含完整的細(xì)胞，特別是完整的人細(xì)胞(任選經(jīng)過處理或裂解)。在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述多肽是重組TLR3多肽。用抗原來免疫非人哺乳動(dòng)物的步驟可以以本領(lǐng)域眾所周知的、用于在小鼠中刺激抗體產(chǎn)生的任何方式來實(shí)現(xiàn)(參見，例如，E.Harlow和D.Lane,Antibodies:ALaboratoryManual.,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,NY(1988)，其整個(gè)公開內(nèi)容通過引用并入本文)。將所述免疫原懸浮或溶解于緩沖液中，所述緩沖液任選地含有佐劑，諸如完全或不完全弗氏佐劑。用于確定免疫原的量、緩沖液的類型以及佐劑量的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，并且不以任何方式限制本發(fā)明。這些參數(shù)對(duì)于不同的免疫原而言可能是不同的，但是易于闡明。類似地，足以刺激抗體產(chǎn)生的免疫接種的位置和頻率也是本領(lǐng)域眾所周知的。在一個(gè)典型的免疫接種方案中，在第1天用抗原腹膜內(nèi)注射非人動(dòng)物，并且在約1周之后再次注射。隨后在約第20天進(jìn)行所述抗原的記憶注射，任選地與佐劑諸如不完全弗氏佐劑一起。記憶注射靜脈內(nèi)地進(jìn)行，并且可以重復(fù)連續(xù)幾天。隨后在第40天靜脈內(nèi)地或腹膜內(nèi)地進(jìn)行加強(qiáng)注射，通常不使用佐劑。該方案會(huì)導(dǎo)致在約40天后產(chǎn)生抗原特異性抗體的B細(xì)胞的產(chǎn)生。還可以使用其它方案，只要它們會(huì)導(dǎo)致生成表達(dá)抗體的B細(xì)胞的產(chǎn)生即可，所述抗體針對(duì)在免疫接種中使用的抗原。對(duì)于多克隆抗體制備而言，從經(jīng)免疫的非人動(dòng)物得到血清，并且通過眾所周知的技術(shù)分離存在于其中的抗體。使用與固體支持物連接的上述免疫原中的任一種，可以親和純化血清，從而得到與TLR3多肽反應(yīng)的抗體。在一個(gè)替代實(shí)施方案中，從未免疫的非人哺乳動(dòng)物分離出淋巴細(xì)胞，在體外培養(yǎng)，然后暴露于細(xì)胞培養(yǎng)物中的免疫原。然后收獲所述淋巴細(xì)胞，并且執(zhí)行以下描述的融合步驟。對(duì)于優(yōu)選的單克隆抗體而言，下一步是從經(jīng)免疫的非人哺乳動(dòng)物分離脾細(xì)胞，并且隨后將那些脾細(xì)胞與永生化細(xì)胞融合，從而形成產(chǎn)生抗體的雜交瘤。從非人哺乳動(dòng)物分離脾細(xì)胞是本領(lǐng)域眾所周知的，并且通常包括：從經(jīng)麻醉的非人哺乳動(dòng)物取出脾，將它切成小塊，并將脾被膜中的脾細(xì)胞擠壓穿過細(xì)胞過濾網(wǎng)的尼龍孔擠入適當(dāng)?shù)木彌_液中，從而產(chǎn)生單細(xì)胞懸浮液。將這些細(xì)胞洗滌、離心并且再懸浮于裂解任何紅細(xì)胞的緩沖液中。將所述溶液再次離心，并且將沉淀物中的剩余淋巴細(xì)胞最終再懸浮于新鮮的緩沖液中。一旦分離并且存在于單細(xì)胞懸浮液中，所述淋巴細(xì)胞可以與永生細(xì)胞系融合。這通常是小鼠骨髓瘤細(xì)胞系，盡管可用于制備雜交瘤的許多其它永生細(xì)胞系是本領(lǐng)域已知的。優(yōu)選的鼠骨髓瘤系包括、但不限于：從MOPC-21和MPC-11小鼠腫瘤(可得自SalkInstituteCellDistributionCenter,SanDiego,U.S.A.)、X63Ag8653和SP-2細(xì)胞(可得自AmericanTypeCultureCollection,Rockville,MarylandU.S.A.)衍生出的那些。使用聚乙二醇等進(jìn)行所述融合。然后將得到的雜交瘤在選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)，所述選擇性培養(yǎng)基含有一種或多種抑制未融合的親代骨髓瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)或存活的物質(zhì)。例如，如果親代骨髓瘤細(xì)胞缺少酶次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶(HGPRT或HPRT)，那么用于雜交瘤的培養(yǎng)基通常將包括次黃嘌呤、氨基蝶呤和胸苷(HAT培養(yǎng)基)，所述物質(zhì)會(huì)阻止HGPRT-缺陷型細(xì)胞的生長(zhǎng)。通常在巨噬細(xì)胞的飼養(yǎng)層上培養(yǎng)雜交瘤。所述巨噬細(xì)胞優(yōu)選地得自用于分離脾細(xì)胞的非人哺乳動(dòng)物的同胞仔，并且通常在將雜交瘤鋪板之前用不完全弗氏佐劑等預(yù)處理數(shù)天。在Goding,“MonoclonalAntibodies:PrinciplesandPractice,”第59-103頁(AcademicPress,1986)中描述了融合方法，其公開內(nèi)容通過引用并入本文。允許所述細(xì)胞在選擇性培養(yǎng)基中生長(zhǎng)足以形成集落和產(chǎn)生抗體的時(shí)間。這通常是在約7天至約14天之間。然后針對(duì)抗體的產(chǎn)生來測(cè)定雜交瘤集落，所述抗體特異性地結(jié)合TLR3多肽基因產(chǎn)物，任選被抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7特異性地識(shí)別的表位。所述測(cè)定通常是比色測(cè)量ELISA-型測(cè)定，盡管可以使用可適用于雜交瘤在其中生長(zhǎng)的孔的任何測(cè)定。其它測(cè)定包括放射免疫測(cè)定或熒光活化細(xì)胞分選。檢查期望的抗體產(chǎn)生為陽性的孔，以確定是否存在一個(gè)或多個(gè)獨(dú)特集落。如果存在超過一個(gè)集落，可以將所述細(xì)胞再克隆并且培養(yǎng)，以確保僅單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生生成期望抗體的集落。通常，還可以如以下所述針對(duì)結(jié)合TLR3多肽(例如，在石蠟包埋的組織切片中的表達(dá)TLR3的細(xì)胞)的能力試驗(yàn)所述抗體。被證實(shí)產(chǎn)生本發(fā)明的單克隆抗體的雜交瘤可以在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中(諸如DMEM或RPMI-1640)較大量地生長(zhǎng)?？商鎿Q地，所述雜交瘤細(xì)胞可以作為動(dòng)物中的腹水腫瘤在體內(nèi)生長(zhǎng)。在充分生長(zhǎng)以產(chǎn)生期望的單克隆抗體之后，將含有單克隆抗體的生長(zhǎng)培養(yǎng)基(或腹水液)與細(xì)胞分開，并且對(duì)其中存在的單克隆抗體進(jìn)行純化。通常通過凝膠電泳、透析、使用蛋白A或蛋白G-Sepharose的色譜法、或連接到固體支持物(諸如瓊脂糖或Sepharose珠子)上的抗-小鼠Ig(都描述在例如AntibodyPurificationHandbook,Biosciences,公開號(hào)18-1037-46,EditionAC，其公開內(nèi)容特此通過引用并入)，進(jìn)行純化。通常通過使用低pH緩沖液(pH3.0或更低的甘氨酸或乙酸鹽緩沖液)從蛋白A/蛋白G柱洗脫結(jié)合的抗體，其中含抗體的級(jí)分被立即中和。根據(jù)需要將這些級(jí)分收集、透析和濃縮。通常將具有單個(gè)清楚集落的陽性孔再克隆并且再測(cè)定，以確保僅檢測(cè)并且產(chǎn)生一個(gè)單克隆抗體。如例如在Ward等人.Nature,341(1989)第544頁(其整個(gè)公開內(nèi)容通過引用并入本文)中公開的，還可以通過選擇免疫球蛋白的組合文庫來產(chǎn)生抗體。使用多種可以在其中評(píng)估抗體競(jìng)爭(zhēng)的免疫篩選測(cè)定中的任一種，可以容易地確定結(jié)合TLR3、特別是與單克隆抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7實(shí)質(zhì)上或基本上相同的表位的一種或多種抗體的身份。許多這樣的測(cè)定被常規(guī)地實(shí)踐，并且是本領(lǐng)域眾所周知的(參見，例如，于1997年8月26日授權(quán)的美國(guó)專利號(hào)5,660,827，其特別地通過引用并入本文)。應(yīng)該理解，實(shí)際上不再以任何方式要求確定本文中描述的抗體所結(jié)合的表位，即可鑒別結(jié)合與本文中描述的單克隆抗體相同的或基本上相同的表位的抗體。例如，在待檢查的試驗(yàn)抗體得自不同來源動(dòng)物或甚至具有不同Ig同種型的情況下，可以采用簡(jiǎn)單競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定，其中將對(duì)照(例如，11E1、7G11、31F6、32C4或37B7)和試驗(yàn)抗體混合(或預(yù)吸附)，并且施加于含有TLR3多肽的樣品。基于蛋白質(zhì)印跡法和使用BIACORE分析的方案適合用在這樣的競(jìng)爭(zhēng)研究中。在某些實(shí)施方案中，在施加于TLR3抗原樣品之前，將對(duì)照抗體(11E1、7G11、31F6、32C4或37B7，例如)與不同量的試驗(yàn)抗體預(yù)混合(例如，約1:10或約1:100)一段時(shí)間。在其它實(shí)施方案中，可以在暴露于TLR3抗原樣品過程中將對(duì)照與不同量的試驗(yàn)抗體簡(jiǎn)單地混合。只要可以將結(jié)合的抗體與游離的抗體區(qū)別開(例如，通過使用分離技術(shù)或洗滌技術(shù)來消除未結(jié)合的抗體)，并且將11E1、7G11、31F6、32C4或37B7與試驗(yàn)抗體區(qū)別開(例如，通過使用物種-特異性的或同種型-特異性的第二抗體，或通過用可檢測(cè)標(biāo)記物來特異性地標(biāo)記11E1、7G11、31F6、32C4或37B7)，可以確定所述試驗(yàn)抗體是否減小了11E1、7G11、31F6、32C4或37B7與抗原的結(jié)合，從而指示所述試驗(yàn)抗體識(shí)別與11E1、7G11、31F6、32C4或37B7基本上相同的表位。在沒有完全不相關(guān)的抗體存在下(標(biāo)記的)對(duì)照抗體的結(jié)合可以充當(dāng)對(duì)照高值。通過將標(biāo)記的(11E1、7G11、31F6、32C4或37B7)抗體與完全相同類型(11E1、7G11、31F6、32C4或37B7)的未標(biāo)記的抗體一起溫育，可以得到對(duì)照低值，其中競(jìng)爭(zhēng)會(huì)發(fā)生并且減小經(jīng)標(biāo)記的抗體的結(jié)合。在一個(gè)試驗(yàn)測(cè)定中，在有試驗(yàn)抗體存在下經(jīng)標(biāo)記的抗體反應(yīng)性的顯著減小指示識(shí)別基本上相同的表位的試驗(yàn)抗體，即所述抗體與(11E1、7G11、31F6、32C4或37B7)抗體“交叉反應(yīng)”或與其競(jìng)爭(zhēng)。在約1:10至約1:100之間的11E1、7G11、31F6、32C4或37B7:試驗(yàn)抗體的任何比率，使11E1、7G11、31F6、32C4或37B7與TLR3抗原的結(jié)合減小至少約50％、諸如至少約60％或更優(yōu)選地至少約80％或90％(例如、約65-100％)的任何試驗(yàn)抗體，被認(rèn)為是結(jié)合與11E1、7G11、31F6、32C4或37B7基本上相同的表位或決定簇的抗體。優(yōu)選地，這樣的試驗(yàn)抗體將11E1、7G11、31F6、32C4或37B7與TLR3抗原的結(jié)合減小了至少約90％(例如，約95％)。還可以通過例如流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)試驗(yàn)來評(píng)估競(jìng)爭(zhēng)。在這樣的試驗(yàn)中，例如，可以將帶有給定TLR3多肽的細(xì)胞首先與11E1一起溫育，然后與用熒光染料或生物素標(biāo)記的試驗(yàn)抗體一起溫育。如果在與飽和量的11E1預(yù)溫育以后得到的結(jié)合是不與11E1一起預(yù)溫育抗體所得到的結(jié)合(如通過熒光所測(cè)量的值)的約80％、優(yōu)選約50％、約40％或更少(例如，約30％、20％或10％)，則說所述抗體與11E1競(jìng)爭(zhēng)?？商鎿Q地，如果用經(jīng)標(biāo)記的11E1抗體(通過熒光染料或生物素)在與飽和量的試驗(yàn)抗體預(yù)溫育的細(xì)胞上得到的結(jié)合是未與所述試驗(yàn)抗體預(yù)溫育所得到的結(jié)合的約80％、優(yōu)選約50％、約40％或less(例如，約30％、20％或10％)，則說所述抗體與11E1競(jìng)爭(zhēng)。還可以采用簡(jiǎn)單競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定，其中將試驗(yàn)抗體預(yù)吸附并且以飽和濃度施用到固定有TLR3抗原的表面上。在所述簡(jiǎn)單競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中，所述表面優(yōu)選地是BIACORE芯片(或適合用于表面等離子體共振分析的其它介質(zhì))。然后在TLR3飽和濃度下使對(duì)照抗體(例如，11E1)與所述表面接觸，并且測(cè)量對(duì)照抗體的TLR3和表面結(jié)合。將對(duì)照抗體的這種結(jié)合與在沒有試驗(yàn)抗體存在下對(duì)照抗體與含有TLR3的表面的結(jié)合進(jìn)行對(duì)比。在一個(gè)試驗(yàn)測(cè)定中，在有試驗(yàn)抗體存在下對(duì)照抗體與含有TLR3的表面的結(jié)合的顯著減小指示所述試驗(yàn)抗體識(shí)別與對(duì)照抗體基本上相同的表位，使得所述試驗(yàn)抗體與所述對(duì)照抗體“交叉反應(yīng)”。將對(duì)照(諸如11E1)抗體與TLR3抗原的結(jié)合減小了至少約30％或更多、優(yōu)選約40％的任何試驗(yàn)抗體可以被認(rèn)為是結(jié)合與對(duì)照(例如，11E1)基本上相同表位或決定簇的抗體。優(yōu)選地，這樣的試驗(yàn)抗體會(huì)將對(duì)照抗體(例如，11E1)與TLR3抗原的結(jié)合減小至少約50％(例如，至少約60％、至少約70％或或更多)。應(yīng)當(dāng)理解，對(duì)照和試驗(yàn)抗體的順序可以顛倒：也就是說，在一個(gè)競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中，可以首先使對(duì)照抗體與表面結(jié)合，并且此后使試驗(yàn)抗體與所述表面接觸。優(yōu)選地，首先使對(duì)TLR3抗原具有較高親和力的抗體與表面結(jié)合，正如所預(yù)期的，觀察到的第二抗體(假設(shè)所述抗體是交叉反應(yīng)的)的結(jié)合的減小將具有較大量級(jí)。這樣的測(cè)定的其它例子提供在例如Saunal(1995)J.Immunol.Methods183:33-41(其公開內(nèi)容通過引用并入本文)中。以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式，可以確定抗體是否結(jié)合在表位區(qū)域內(nèi)。作為這樣的作圖/表征方法的一個(gè)例子，使用TLR3蛋白中暴露的胺/羧基的化學(xué)修飾，通過表位“足跡法”，可以確定抗-TLR3抗體的表位區(qū)。這種足跡法技術(shù)的一個(gè)具體例子是使用HXMS(通過質(zhì)譜法檢測(cè)氫-氘交換)，其中發(fā)生受體和配體蛋白酰胺質(zhì)子的氫/氘交換、結(jié)合、以及反向交換，其中保護(hù)參與蛋白結(jié)合的主鏈酰胺基團(tuán)免于反向交換并且因此將保持被氘化。在此時(shí)可以通過胃蛋白酶解、快速微孔高效液相色譜分離、和/或電噴射電離質(zhì)譜法來鑒別相關(guān)區(qū)域。參見，例如，EhringH,AnalyticalBiochemistry,第267卷(2)第252-259頁(1999)Engen,J.R.和Smith,D.L.(2001)Anal.Chem.73,256A-265A。合適的表位鑒別技術(shù)的另一個(gè)例子是核磁共振表位作圖(NMR)，其中通常將游離抗原和與抗原結(jié)合肽(諸如抗體)形成復(fù)合物的抗原的二維NMR譜圖中信號(hào)的位置進(jìn)行對(duì)比。通常用15N對(duì)所述抗原進(jìn)行選擇性同位素標(biāo)記，使得在NMR譜圖中僅可以看到與抗原對(duì)應(yīng)的信號(hào)，且沒有來自所述抗原結(jié)合肽的信號(hào)。與游離抗原的譜圖相比較，在復(fù)合物譜圖中由涉入與抗原結(jié)合肽相互作用的氨基酸所產(chǎn)生的抗原信號(hào)通常會(huì)移動(dòng)位置，并且以此方式可以鑒別涉入所述結(jié)合的氨基酸。參見，例如，ErnstScheringResFoundWorkshop.2004；(44):149-67；Huang等人,JournalofMolecularBiology,第281(1)卷第61-67頁(1998)；以及Saito和Patterson,Methods.1996年6月；9(3):516-24。還可以使用質(zhì)譜法進(jìn)行表位作圖/表征。參見，例如，Downard,JMassSpectrom.(2000)35(4):493-503和Kiselar和Downard,AnalChem.(1999)71(9):1792-801。在表位作圖和鑒別的上下文中，蛋白酶消化技術(shù)也可以是有用的。通過蛋白酶消化(例如通過以相對(duì)于TLR3為約1:50的比率使用胰蛋白酶或在pH7-8消化過夜)，隨后進(jìn)行質(zhì)譜法(MS)分析以鑒別肽，可以確定抗原決定簇相關(guān)的區(qū)域/序列。隨后可以如下被抗-TLR3結(jié)合劑保護(hù)而免于胰蛋白酶切割的肽：將經(jīng)歷胰蛋白酶消化的樣品與用抗體溫育的、并且然后經(jīng)歷例如胰蛋白酶消化的樣品進(jìn)行對(duì)比(由此揭示結(jié)合劑的足跡)。在類似的表位表征方法中也可以或可替換地使用其它酶如糜蛋白酶、胃蛋白酶等。此外，酶消化可以提供快速方法，其用于分析潛在抗原決定簇序列是否在TLR3多肽的特定區(qū)域內(nèi)，所述區(qū)域不是表面暴露的，并且因此就免疫原性/抗原性而言最可能的是不相關(guān)的。關(guān)于類似技術(shù)的討論，參見，例如，Manca,Ann1stSuperSanita.1991；27:15-9。定位誘變是可用于闡明結(jié)合表位的另一種技術(shù)。例如，在“丙氨酸掃描”中，蛋白片段內(nèi)的每個(gè)殘基都用丙氨酸殘基替換，并且測(cè)量結(jié)合親和力的后果。如果所述突變導(dǎo)致結(jié)合親和力的顯著降低，它最可能涉入結(jié)合?？梢允褂脤?duì)結(jié)構(gòu)表位具有特異性的單克隆抗體(即不結(jié)合未折疊蛋白的抗體)來證實(shí)所述丙氨酸替換沒有影響蛋白的整體折疊。參見，例如，Clackson和Wells,Science1995；267:383-386；和Wells,ProcNatlAcadSciUSA1996；93:1-6。還可以將電子顯微術(shù)用于表位“足跡法”。例如，Wang等人,Nature1992；355:275-278使用冷凍電子顯微鏡術(shù)、三維圖像重建、以及X-射線晶體學(xué)的協(xié)同應(yīng)用來確定天然豇豆花葉病毒的衣殼表面上的Fab片段的物理足跡。用于表位評(píng)價(jià)的其它形式的“無標(biāo)記”測(cè)定包括表面等離子體共振(SPR、BIACORE)和反射干涉光譜法(RifS)。參見，例如，等人,JournalOfMolecularRecognition1990；3:208-14；Nice等人,J.Chroma-togr.1993；646:159-168；Leipert等人,Angew.Chem.Int.Ed.1998；37:3308-3311；等人,BiosensorsandBioelectronics2002；17:937-944。還應(yīng)當(dāng)指出，可以在本文中描述的一個(gè)或多個(gè)示例性競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中鑒別出結(jié)合與本發(fā)明的抗體相同或基本上相同的表位的抗體。一旦鑒別出能夠結(jié)合TLR3和/或具有其它期望性能的抗體，通常還使用標(biāo)準(zhǔn)方法(包括本文描述的那些)評(píng)估它們的結(jié)合其它多肽(包括不相關(guān)的多肽以及其它TLR家族成員(例如，人TLR1、2或4-10))的能力。理想地，所述抗體僅以顯著的親和力結(jié)合TLR3(例如，人TLR3)，不以顯著水平結(jié)合不相關(guān)的多肽或其它TLR家族成員(例如，TLR2或TLR4；在NCBI登錄號(hào)NP_612564中發(fā)現(xiàn)包括在氨基酸殘基1-23處的信號(hào)肽的人前體TLR4的氨基酸序列，其公開內(nèi)容通過引用并入本文)。但是，應(yīng)當(dāng)理解，只要與針對(duì)其它TLR家族成員(或其它不相關(guān)多肽)的親和力相比，對(duì)TLR3的親和力顯著地更大(例如，5倍、10倍、50倍、100倍、500倍、1000倍、10,000倍或更多)，則所述抗體適合用于本發(fā)明的方法中。還可以在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如恒河猴或食蟹猴，或其它哺乳動(dòng)物諸如小鼠)中評(píng)估抗體對(duì)表達(dá)TLR3的細(xì)胞的結(jié)合。因此，本發(fā)明提供了一種抗體以及它們的片段和衍生物，其中所述抗體、片段或衍生物特異性地結(jié)合TLR3，并且此外它們結(jié)合得自非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物(例如，恒河猴或食蟹猴)的TLR3、SEQIDNO:2的TLR3多肽。任選地，評(píng)估細(xì)胞攝入或定位，任選地定位在亞細(xì)胞隔室(諸如胞吞途徑)中，以便選擇易于攝入細(xì)胞中和/或細(xì)胞隔室(在其中表達(dá)TLR3)中的抗體。通常在細(xì)胞中測(cè)量細(xì)胞攝入或定位，在所述細(xì)胞中尋找抗體或認(rèn)為抗體例如在DC中發(fā)揮其活性。通過標(biāo)準(zhǔn)方法(諸如通過使用用可檢測(cè)部分(例如熒光部分)標(biāo)記的抗體進(jìn)行共聚焦染色)，可以評(píng)估細(xì)胞攝入或定位。在給脊椎動(dòng)物或細(xì)胞免疫接種并在其中生產(chǎn)抗體以后，可以執(zhí)行特定選擇步驟來分離所要求保護(hù)的抗體。在這點(diǎn)上，在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明還涉及生產(chǎn)抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗體的方法，所述方法包括：(a)提供多個(gè)抗體；和(b)從步驟(a)中選擇能夠以高親和力結(jié)合僅在細(xì)胞表面處表達(dá)的TLR3多肽的抗體。可以試驗(yàn)所述抗體在中性條件下對(duì)TLR3的結(jié)合。在一個(gè)實(shí)施方案中，步驟(a)包括：(i)用包含TLR3多肽的免疫原免疫非人哺乳動(dòng)物；和(ii)從所述免疫的動(dòng)物制備抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，步驟(a)包括制備抗體序列文庫(例如使用噬菌體展示)?？梢源_定所述抗體在酸性條件下對(duì)人TLR3的二價(jià)結(jié)合親和力。例如，所述抗體可以以不超過約100、60、10、5或1納摩爾、優(yōu)選地亞納摩爾或任選地不超過約300、200、100或10皮摩爾的平均KD(即更好親和力)為特征。例如，通過將重組生產(chǎn)的人TLR3蛋白固定在芯片表面上，隨后施加在溶液中的待試驗(yàn)的抗體，可以確定KD，例如如在本發(fā)明的實(shí)施例中所示。為了選擇在酸性和中性條件下保持類似結(jié)合的抗體，可以需求使在中性pH(例如7.2)和酸性pH(例如在4.5-6.5范圍內(nèi)的pH)下觀察到的結(jié)合之間的差異最小化，例如其中在酸性pH下的結(jié)合親和力沒有顯著低于在非酸性pH下觀察到的值，例如，其中結(jié)合TLR3的KD降低了不超過0.2-、0.3-、0.5-、1.0-、或1.5-log10。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括步驟(d)，從(b)中選擇這樣的抗體：其能夠與抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合，或其能夠(或不能)與dsRNA(例如聚AU)競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合。在任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，根據(jù)本發(fā)明的方法制備的抗體是單克隆抗體。在另一個(gè)方面，根據(jù)本發(fā)明的方法用于生產(chǎn)抗體的非人動(dòng)物是哺乳動(dòng)物，諸如嚙齒動(dòng)物(例如大鼠)、牛、豬、家禽、馬、兔、山羊或綿羊。本發(fā)明的抗體包括11E1、7G11、31F6、32C4和37B7。但是，應(yīng)當(dāng)理解，使用本文所述的方法可以得到其它抗體，并且因而本發(fā)明的抗體可以是除了11E1、7G11、31F6、32C4和37B7以外的抗體。另外，可以任選地將本發(fā)明的抗體指定為除了以下抗體以外的抗體：在WO2011/004028中公開的抗體31C3、29H3、23C8、28F11或34A3中的任一種，或于2009年7月3日在編號(hào)CNCMI-4187(29H3.7)和CNCMI-4186(31C3.1)下保藏于CollectionNationaledeCulturedeMicroorganismes(CNCM),InstitutPasteur,25ruedeDocteurRoux,F-75724的抗體，抗體TLR3.7(eBioScienceInc.,SanDiego)，WO06/060513的抗體C1068，WO2007/051164的抗體C1130，WO2010/051470公開的任意抗體，例如，抗體1-19和F17-F19和它們的變體諸如15EVQ和12QVQ/QSV，抗體40C1285(Abcam)，或抗體619F7、713E4、716G10、IMG-5631、IMG-315或IMG-5348(都得自Imgenex.Corp.)或前述抗體的衍生物，例如完全地或部分地包含抗原結(jié)合區(qū)的衍生物。以上出版物中的每一篇通過引用并入本文。根據(jù)一個(gè)替代實(shí)施方案，從本發(fā)明的雜交瘤中分離出編碼結(jié)合TLR3多肽上存在的表位的抗體的DNA，并且將其置于適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)載體中用于轉(zhuǎn)染進(jìn)適當(dāng)?shù)乃拗髦?。然后將所述宿主用于重組生產(chǎn)所述抗體或其變體，諸如該單克隆抗體的人源化形式、所述抗體的活性片段，包含所述抗體的抗原識(shí)別部分的嵌合抗體、或包含可檢測(cè)部分的形式。使用使用常規(guī)規(guī)程(例如，通過使用寡核苷酸探針，所述探針能夠特異性地結(jié)合編碼鼠抗體的重鏈和輕鏈的基因)，可以容易地將編碼本發(fā)明的單克隆抗體的DNA進(jìn)行分離和測(cè)序。分離后，可以將所述DNA置于表達(dá)載體中，然后將所述載體轉(zhuǎn)染進(jìn)否則會(huì)產(chǎn)生免疫球蛋白蛋白的宿主細(xì)胞(諸如大腸桿菌細(xì)胞、猿猴COS細(xì)胞、中國(guó)倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞或骨髓瘤細(xì)胞)中，以在重組宿主細(xì)胞中合成單克隆抗體。如在本說明書的其它地方所描述的，可以出于多個(gè)目的中任何一個(gè)(例如，用于人源化抗體、生產(chǎn)片段或衍生物、或用于修飾抗體的序列)而修飾這樣的DNA序列(例如在抗原結(jié)合位點(diǎn)中)，以便優(yōu)化所述抗體的結(jié)合特異性。在細(xì)菌中重組表達(dá)編碼所述抗體的DNA，是本領(lǐng)域眾所周知的(參見，例如，Skerra等人,Curr.OpinioninImmunol.,5,第256頁(1993)；和Pluckthun,Immunol.130,第151頁(1992)。評(píng)估抗體的調(diào)節(jié)TLR3信號(hào)傳遞的能力在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體能夠調(diào)節(jié)(例如抑制)通過TLR3多肽的信號(hào)傳遞，并且因而調(diào)節(jié)表達(dá)TLR3的細(xì)胞的活性或行為。例如，所述抗體可以抑制表達(dá)TLR3的細(xì)胞的活化(例如，它們可以抑制TLR3信號(hào)傳遞途徑)，任選地通過阻斷天然的或內(nèi)源性的配體(諸如dsRNA)對(duì)TLR3的結(jié)合；任選地，它們可以在有TLR3配體存在下阻斷TLR3蛋白的形成同源二聚體的能力，因此阻斷信號(hào)傳遞級(jí)聯(lián)的開始。因此，這些抗體被稱作“中和性的”或“抑制性的”或“阻斷性的”抗體。這樣的抗體尤其可用于降低表達(dá)TLR3的免疫細(xì)胞的活性，例如用于治療或預(yù)防這樣的病癥：其涉及過度表達(dá)TLR3的細(xì)胞活性或數(shù)量，或在所述病癥中，降低表達(dá)TLR3的細(xì)胞活性可以改善、預(yù)防、消除、或以任何方式改善所述病癥或其任何征狀?？梢允褂靡幌盗屑?xì)胞測(cè)定來評(píng)估抗體的調(diào)節(jié)TLR3信號(hào)傳遞的能力。可以使用大量測(cè)定中的任一種(包括分子的、基于細(xì)胞的、以及基于動(dòng)物的模型)來評(píng)估抗-TLR3抗體的調(diào)節(jié)表達(dá)TLR3的細(xì)胞活性的能力。例如，可以使用基于細(xì)胞的測(cè)定，其中將表達(dá)TLR3的細(xì)胞暴露于dsRNA、病毒dsRNA、聚IC、或聚AU、或另一種TLR3配體，并且評(píng)估所述抗體的破壞配體的結(jié)合或受體的刺激的能力(正如例如通過檢查本文中提出的TLR3細(xì)胞活性中的任一項(xiàng)所確定的，諸如干擾素表達(dá)、NFkB活性、NK細(xì)胞活化等)。在所述測(cè)定中使用的TLR3配體可以呈任意適合形式，包括、但不限于作為純化的配體組合物、在與非TLR3配體一起的混合物中、在天然存在的組合物中、在細(xì)胞中或在細(xì)胞表面上、或由細(xì)胞(例如，在所述測(cè)定中使用產(chǎn)生配體的細(xì)胞)分泌、在溶液中或在固體支持物上。還可以在沒有配體存在下如下評(píng)估表達(dá)TLR3的細(xì)胞的活性：將細(xì)胞暴露于抗體本身，并且評(píng)估它對(duì)細(xì)胞的活性或行為的任意方面的影響。在這樣的測(cè)定中，在沒有配體存在下得到表達(dá)TLR3的細(xì)胞的活性的基線水平(例如，細(xì)胞因子生產(chǎn)、增殖，參見下文)，并且檢測(cè)抗體或化合物的改變基線活性水平的能力。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，使用高通量篩選方案來鑒別能夠影響受體活化的化合物。可以使用反映TLR3活性的任何適當(dāng)?shù)纳韺W(xué)改變來評(píng)價(jià)試驗(yàn)抗體或抗體衍生物。例如，可以測(cè)量多種作用，例如基因表達(dá)(例如，NFkB應(yīng)答基因)的改變、蛋白質(zhì)分泌(例如，干擾素)、細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞增殖、pH、細(xì)胞內(nèi)第二信使(例如，Ca2+、IP3、cGMP或cAMP)或活性(諸如活化NK細(xì)胞的能力)。在一個(gè)實(shí)施方案中，通過檢測(cè)細(xì)胞因子(例如TLR3-響應(yīng)性的細(xì)胞因子、促炎性細(xì)胞因子)的產(chǎn)生來評(píng)估受體的活性?？梢允褂枚喾N可能的讀出系統(tǒng)中的任一種進(jìn)行TLR3調(diào)節(jié)，所述讀出系統(tǒng)大部分基于TLR/IL-1R信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，涉及例如MyD88非依賴性的/TRIF依賴性的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，涉及例如IRF3、IRF7、IKKε和/或TBK1(Akira和Takeda(2004)NatureReviewImmunol.4:499-511)。這些途徑活化激酶，包括KB激酶復(fù)合物。通過檢查TLR信號(hào)傳遞的任意方面，可以可以TLR3活化。例如，TLR信號(hào)傳遞的活化會(huì)觸發(fā)以下方面的改變：蛋白-蛋白結(jié)合(例如，TRIF與TBK和/或IKKε)、蛋白的細(xì)胞內(nèi)定位(例如NK-kB向細(xì)胞核中的移動(dòng))、以及基因表達(dá)(例如NK-kB敏感基因的表達(dá))、以及細(xì)胞因子產(chǎn)生(例如，IFN-γ、IL-6、IP10、MCP-1的產(chǎn)生和分泌)。任何這樣的改變可以被檢測(cè)并且用于檢測(cè)TLR3活化。在一個(gè)實(shí)施方案中，如下檢測(cè)TLR3刺激：在培養(yǎng)18-20小時(shí)之后收集上清液，并且通過夾心ELISA測(cè)量IFN-γ、IL-6、IP-10和/或MCP-1的水平。在另一個(gè)實(shí)施方案中，如下檢測(cè)TLR3刺激：在培養(yǎng)18-20小時(shí)之后收集上清液，并且通過夾心ELISA測(cè)量IFN-γ、IL-6、IP-10和/或MCP-1的水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，使用天然地表達(dá)TLR3的細(xì)胞，諸如DC(例如髓樣DC或單核細(xì)胞衍生出的DC)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使用包含報(bào)道基因構(gòu)建體的細(xì)胞，在TLR3刺激后，所述構(gòu)建體造成可檢測(cè)的基因產(chǎn)物的表達(dá)以及隨后的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的活化。對(duì)于所述測(cè)定而言特別有用的報(bào)道基因和報(bào)道基因構(gòu)建體包括：例如，可操作地連接到啟動(dòng)子的報(bào)道基因，所述啟動(dòng)子對(duì)NF-kB敏感或?qū)唧w地由TRIF、IRF3、IRF7、IKKε、TBK1介導(dǎo)的信號(hào)傳遞敏感。這樣的啟動(dòng)子的例子包括、但不限于IL-1α、IL-6、IL-8、IL-12p40、IP-10、CD80、CD86和TNF-α的那些啟動(dòng)子。可操作地連接到TLR敏感的啟動(dòng)子的報(bào)道基因可以包括、但不限于酶(例如，螢光素酶、堿性磷酸酶、β-半乳糖苷酶、氯霉素乙?；D(zhuǎn)移酶(CAT)等)、生物發(fā)光標(biāo)志物(例如，綠色熒光蛋白(GFP，例如，美國(guó)專利號(hào)5,491,084)、藍(lán)色熒光蛋白(BFP，例如，美國(guó)專利號(hào)6,486,382)等)、表面表達(dá)的分子(例如，CD25、CD80、CD86)、以及分泌的分子(例如，IL-1、IL-6、IL-8、IL-12p40、TNF-α)。參見，例如，HckerH等人(1999)EMBOJ.18:6973-82；MurphyTL等人(1995)MolCellBiol15:5258-67，其公開內(nèi)容通過引用并入本文。適合使用的報(bào)道質(zhì)粒是商購可得的(InvivoGen,SanDiego,CA)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述測(cè)定包括：在制備用來表達(dá)人TLR3多肽的宿主細(xì)胞中，確定試驗(yàn)組合物是否誘導(dǎo)在對(duì)TLR3信號(hào)傳遞(例如ISRE，即IFN-刺激的應(yīng)答元件)做出應(yīng)答的啟動(dòng)子的控制下的螢光素酶表達(dá)(或其它報(bào)道基因)。在依賴于酶活性讀出的測(cè)定中，底物可以作為所述測(cè)定的一部分來供應(yīng)，并且檢測(cè)可以涉及以下方面的測(cè)量：化學(xué)發(fā)光、熒光、顯色、放射性標(biāo)記的摻入、抗藥性、光密度或酶活性的其它標(biāo)志物。對(duì)于依賴于分子的表面表達(dá)的測(cè)定而言，可以使用流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)(FACS)分析或功能測(cè)定來實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。使用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)或生物測(cè)定，可以測(cè)定分泌的分子。這些和其它適當(dāng)?shù)淖x出系統(tǒng)中的許多是本領(lǐng)域眾所周知的并且是商購可得的。優(yōu)選地，所述報(bào)道系統(tǒng)(無論使用哪個(gè))是可計(jì)量的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物體內(nèi)評(píng)估所述抗體對(duì)表達(dá)TLR3的細(xì)胞的影響。例如，將包含本發(fā)明的抗-TLR3抗體的藥物組合物施用給非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物，所述動(dòng)物是健康的或患有病癥，例如自身免疫病或炎癥，并且評(píng)估所述施用對(duì)例如以下方面的影響：所述靈長(zhǎng)類動(dòng)物中表達(dá)TLR3的細(xì)胞的數(shù)量或活性、細(xì)胞因子的存在和/或水平、或病癥的進(jìn)展。實(shí)現(xiàn)這些TLR3相關(guān)的參數(shù)中任一項(xiàng)的可檢測(cè)變化的任何抗體或抗體衍生物或片段，是用于本文中描述的方法中的候選物。在本文描述的任意測(cè)定中，細(xì)胞中TLR3刺激的活性的任何可檢測(cè)的量度的5％、10％、20％、優(yōu)選地30％、40％、50％、最優(yōu)選地60％、70％、80％、90％、95％或更大的增加或降低指示，所述試驗(yàn)抗體適合用在本發(fā)明的方法中。當(dāng)評(píng)估抑制性的抗-TLR3抗體時(shí)，可以有利地選擇抗體，以改變與炎癥或自身免疫相關(guān)的任何參數(shù)。例如，可以選擇抗體來降低細(xì)胞中的活化，特別是促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生。例如，所述細(xì)胞可以是得自患有炎性障礙或自身免疫性障礙的個(gè)體的細(xì)胞?？贵w本發(fā)明的抗體結(jié)合人TLR3多肽。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體是拮抗TLR3抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體阻斷通過人TLR3誘導(dǎo)的信號(hào)傳遞。所述抗體任選地在酸性pH(即約5.6的pH)具有小于10-9M、優(yōu)選地小于10-10M的親和力(KD)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體在中性pH(即約7.2的pH)具有小于10-9M、優(yōu)選地小于10-10M的親和力(KD)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體在酸性pH(即約5.6的pH)和在中性pH(即約7.2的pH)具有小于10-9M、優(yōu)選地小于10-10M的親和力(KD)。親和力可以是例如與TLR3的單價(jià)或二價(jià)結(jié)合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在有TLR3配體即dsRNA(聚AU、聚IC)存在下，所述抗體能夠抑制TLR3信號(hào)傳遞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)在TLR3配體以后施用時(shí)，所述抗體能夠抑制TLR3信號(hào)傳遞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)在TLR3配體以前施用時(shí)，所述抗體能夠抑制TLR3信號(hào)傳遞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)與TLR3配體同時(shí)施用時(shí)，所述抗體能夠抑制TLR3信號(hào)傳遞。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽的N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體不與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3多肽的C-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)的結(jié)合。抗體表位在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體結(jié)合與抗體11E1、7G11、31F6、32C4或37B7基本上相同的表位。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述表位的所有關(guān)鍵殘基是在與SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基1-251對(duì)應(yīng)的區(qū)段中。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含與SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基1-251(或41-139、41-115、41-120或41-251)對(duì)應(yīng)的區(qū)段的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)殘基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體結(jié)合存在于TLR3多肽的表面上的一個(gè)或多個(gè)氨基酸，所述氨基酸是在本發(fā)明的抗-TLR3抗體所結(jié)合的表位內(nèi)，任選地，所述抗體結(jié)合1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)選自以下的殘基：SEQIDNO:1的殘基41、43、60、61、62、64、65、66、67、68、86、88、89、91、92、93、96、97、108、110、112、113、114、115、117、120、121、132、134、137和殘基139。任選地，所述抗體至少部分地(或主要地)結(jié)合在人TLR3多肽的N-端部分的無聚糖側(cè)表面上。任選地，所述抗體至少部分地(或主要地)結(jié)合在人TLR3多肽的N-端部分的主鏈上。任選地，所述抗體至少部分地(或主要地)結(jié)合在人TLR3多肽的N-端部分的無聚糖側(cè)表面上，并部分地結(jié)合在人TLR3多肽的N-端部分的主鏈上。任選地，所述抗體結(jié)合TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面(其涉入TLR3多肽與dsRNA的結(jié)合)內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基和/或與其鄰近的殘基。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基41和/或殘基43。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基60、61、62、64、65、67和/或殘基68中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)或7個(gè)。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基86、88和/或殘基89中的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基91、92、93、96、97和/或殘基121中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基108、110、112、113、114、115、116、117、120中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)、6個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基132、134、137和/或殘基139中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基112、113、115、117、120、137和139中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基117和殘基137和/或139。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基120和殘基137和/或139。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基117和/或120，但是不包含殘基137和/或139。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基R64、R65、T86和K89、K137和K139中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或6個(gè)。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基64和殘基137和/或139。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基65和殘基137和/或139。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基86和殘基137和/或139。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含殘基89和殘基137和/或139。在一個(gè)實(shí)施方案中，在TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面(其涉入TLR3多肽與dsRNA的結(jié)合)內(nèi)的氨基酸殘基和/或與其鄰近的殘基選自SEQIDNO:1的殘基41、43、60、61、62、64、65、67、68、86、88、89、108、110、112、113、114、132、134、137和殘基139。任選地，所述抗體結(jié)合這樣的表位：其包含SEQIDNO:1的殘基112、113和137中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或4個(gè)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在人TLR3多肽的N-端部分的主鏈內(nèi)的氨基酸殘基選自：SEQIDNO:1的殘基91、92、93、96、97、117、120和121。任選地，所述抗體不結(jié)合、或基本上不結(jié)合人TLR3多肽的N-端部分的含有聚糖的側(cè)表面。任選地，在任意實(shí)施方案中，所述抗體可以任選地進(jìn)一步特征在于，基本上不結(jié)合與SEQIDNO:1的成熟TLR3多肽的殘基174-191、殘基465-619或殘基116、145和/或182對(duì)應(yīng)的區(qū)段中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)殘基。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體結(jié)合、或任選地不結(jié)合這樣的表位：其包含與SEQIDNO:1的TLR3多肽的殘基177-191、224-243、280-286、295-374、379-391、428-459、461-487、524-529、533-542、546-569、575-581、583-605、607-623、641-657和/或670-705對(duì)應(yīng)的區(qū)段中的一個(gè)或多個(gè)殘基。本文中的實(shí)施例部分描述了一系列突變體人TLR3多肽的構(gòu)建。測(cè)量抗-TLR3抗體與用TLR3突變體轉(zhuǎn)染的細(xì)胞的結(jié)合，并與抗-TLR3抗體的結(jié)合野生型TLR3多肽(SEQIDNO:1)的能力進(jìn)行對(duì)比。本文中使用的抗-TLR3抗體和突變體TLR3多肽之間的結(jié)合的減小是指，存在結(jié)合親和力的減小(例如，通過已知方法測(cè)量，諸如表達(dá)特定突變體的細(xì)胞的FACS試驗(yàn)，或通過與突變體多肽的結(jié)合的Biacore試驗(yàn))，和/或抗-TLR3抗體的總結(jié)合能力的減小(例如，通過抗-TLR3抗體濃度相對(duì)于多肽濃度的圖中的Bmax的下降來證實(shí))。結(jié)合的顯著減小指示，突變的殘基直接涉入與抗-TLR3抗體的結(jié)合，或當(dāng)抗-TLR3抗體與TLR3結(jié)合時(shí)，突變的殘基與結(jié)合蛋白緊密靠近。抗體表位因而優(yōu)選地包括這樣的殘基，并且可以包括鄰近這樣的殘基的額外殘基。在某些實(shí)施方案中，結(jié)合的顯著減小是指，與抗體和野生型TLR3多肽(例如，SEQIDNO:1中所示的多肽)之間的結(jié)合相比，抗-TLR3抗體和突變體TLR3多肽之間的結(jié)合親和力和/或能力減小了大于40％、大于50％、大于55％、大于60％、大于65％、大于70％、大于75％、大于80％、大于85％、大于90％或大于95％。在某些實(shí)施方案中，結(jié)合減小至檢出限度以下。在某些實(shí)施方案中，當(dāng)抗-TLR3抗體與突變體TLR3多肽的結(jié)合小于在抗-TLR3抗體和野生型TLR3多肽(例如，SEQIDNO:1所示的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域)之間觀察到的結(jié)合的50％(例如，小于45％、40％、35％、30％、25％、20％、15％或10％)時(shí)，證實(shí)結(jié)合的顯著減小。這樣的結(jié)合測(cè)量可以使用本領(lǐng)域已知的多種結(jié)合測(cè)定來進(jìn)行。在實(shí)施例部分中描述了一種這樣的測(cè)定的具體例子。在某些實(shí)施方案中，提供了表現(xiàn)出對(duì)突變體TLR3多肽顯著更低的結(jié)合的抗-TLR3抗體，其中野生型TLR3多肽(例如，SEQIDNO:1)中的殘基被置換。在這里使用的速記符號(hào)中，格式是：野生型殘基:在多肽中的位置:突變體殘基，具有如在SEQIDNO:1中指示的殘基的編號(hào)。任選地，所述抗體具有減小的對(duì)TLR3多肽的結(jié)合，所述TLR3多肽具有在SEQIDNO:1的殘基41、43、60、61、62、64、65、67、68、86、88、89、91、92、93、96、97、108、110、112、113、114、115、117、120、121、132、134、137和/或殘基139處的置換。在某些實(shí)施方案中，抗-TLR3抗體結(jié)合具有SEQIDNO:1的序列的野生型TLR3多肽，但是具有減小的對(duì)突變體TLR3多肽的結(jié)合，所述突變體TLR3多肽具有下述突變中的任意一個(gè)或多個(gè)(例如，1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或4個(gè))：R64Q、R65Q、T86S、K89Q、K117Q、A120V、K137S和/或K139A(參考SEQIDNO:1)。優(yōu)選地，與對(duì)野生型TLR3的結(jié)合相比，對(duì)突變體TLR3的結(jié)合顯著減小。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體能夠抑制髓樣樹突細(xì)胞(MdDC)中的細(xì)胞因子(例如IP-10)分泌。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體能夠快速地且有效地內(nèi)化進(jìn)表達(dá)TLR3的細(xì)胞中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體能夠在不誘導(dǎo)或需要hTLR3減量調(diào)節(jié)的情況下內(nèi)化?？贵wCDR序列在本發(fā)明的任意實(shí)施方案的一個(gè)方面，抗體可以包含具有根據(jù)選自式(I)至(VII)的各個(gè)式的CDR1、2和/或3序列的重鏈和/或輕鏈。在本文的任意實(shí)施方案中，可以將特定LCDR1或-2或HCDR-1或2指定為具有式(I)至(VII)的序列。在本文的任意實(shí)施方案中,可以將特定HCDR1-3或LCDR-1-3指定為具有式(I)至(VII)的序列。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗體包含：含有3個(gè)LCDR的輕鏈，和含有3個(gè)HCDR的重鏈。任選地，提供了一種抗體，其中將輕鏈和/或重鏈可變區(qū)中的任一個(gè)與IgG類型的免疫球蛋白恒定區(qū)(任選地人恒定區(qū)，任選地IgG1或IgG4同種型)融合。在一個(gè)實(shí)施方案中，LCDR1包含式(I)的序列：Xaa1-A-S-E-Xaa2-I-Xaa3-Xaa4-Xaa5-L-A(I)(SEQIDNO:58),其中Xaa1至Xaa5可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa1可以是Leu或Gln，和/或Xaa2可以是Asp或Gly，和/或Xaa3可以是Ser或Tyr，和/或Xaa4可以是Asn或Ser，和/或Xaa5可以是Asp、Tyr或Gly。在一個(gè)實(shí)施方案中，LCDR2包含式(II)的序列：A-A-Xaa6-R-L-Xaa7-D(II)(SEQIDNO:59)，其中Xaa6至Xaa7可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa6可以是Ser或Asn，和/或Xaa7可以是Glu或Gln。在一個(gè)實(shí)施方案中，LCDR3包含式(III)的序列：Xaa8-Q-Xaa9-Xaa10-Xaa11-Xaa12-P-Xaa13-T(III)(SEQIDNO:60)，其中Xaa8至Xaa13可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa8可以是Leu或Gln，和/或Xaa9可以是Ser、Asn或Gly，和/或Xaa10可以是Tyr、Ser或Val，和/或Xaa11可以是Lys或Glu，和/或Xaa12可以是Phe或Tyr，和/或Xaa13可以是Asn、Tyr、Leu或Val。在一個(gè)實(shí)施方案中，HCDR1包含式(IV)的序列：Xaa14-Xaa15-Y-Xaa16-Xaa17(IV)(SEQIDNO:61)，其中Xaa14至Xaa17可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa14可以是Tyr或Ser，和/或Xaa15可以是Thr或Asn，和/或Xaa16可以是Met或Ile，和/或Xaa17可以是Tyr或His。在一個(gè)實(shí)施方案中，HCDR1包含式(V)的序列：G-Y-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Xaa21(V)(SEQIDNO:62)，其中Xaa18至Xaa21可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa18可以是Thr或Asn，和/或Xaa19可以是Phe或Ile，和/或Xaa20可以是Arg、Trp或Thr；和/或Xaa21可以是Tyr或Ser。在一個(gè)實(shí)施方案中，HCDR2包含式(VI)的序列：Xaa22-I-Xaa23-P-Xaa24-Xaa25-G(VI)(SEQIDNO:63)，其中Xaa22至Xaa25可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa22可以是Arg或Trp，和/或Xaa23可以是Asp或Phe，和/或Xaa24可以是Ala或Gly，和/或Xaa25可以是Asn或Asp。任選地HCDRof式VI進(jìn)一步包含a序列-Xaa26-Xaa27-Xaa28，其中Xaa26至Xaa28可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa26可以是Asp或Asn，和/或Xaa27可以是Thr或Ser，和/或Xaa28可以是Asn或Ile。在一個(gè)實(shí)施方案中，HCDR3包含SEQIDNO:21、32、43或54的序列，或式(VII)的序列：G-Xaa29-Xaa30-Xaa31-Y-F-D(VII)(SEQIDNO:64)，其中Xaa29至Xaa31可以是保守的或非保守的置換或缺失或插入，優(yōu)選地，其中Xaa29可以是缺失或Glu，和/或Xaa30可以是Phe或Asp，和/或Xaa31可以是Asp或Trp。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體可以包含這樣的輕鏈，所述輕鏈包含：a選自SEQIDNO:22、33、44、55和58的輕鏈CDR1(LCDR1)氨基酸序列；和/或b選自SEQIDNO:23、34、45、56和59的輕鏈CDR2(LCDR2)氨基酸序列；和/或c選自SEQIDNO:24、35、46、57和60的輕鏈CDR3(LCDR3)氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體可以包含這樣的重鏈，所述重鏈包含：a.選自SEQIDNO:16-18、27-29、38-40、49-51和61-62的重鏈CDR1(HCDR1)氨基酸序列；和/或b.選自SEQIDNO:19、20、31、31、41、42、52、53和63的重鏈CDR2(HCDR2)氨基酸序列；和/或c.選自SEQIDNO:21、32、43、54和64的重鏈CDR3(HCDR3)氨基酸序列。抗體11E111E1的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:3，輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:4。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種抗體，所述抗體結(jié)合與單克隆抗體11E1基本上相同的表位或決定簇；任選地，所述抗體包含抗體11E1的抗原結(jié)合區(qū)。在本文中的任意實(shí)施方案中,抗體11E1可以通過它的氨基酸序列和/或編碼它的核酸序列來表征。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述單克隆抗體包含11E1的Fab或F(ab′)2部分。還提供了一種單克隆抗體，其包含11E1的重鏈可變區(qū)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，所述單克隆抗體包含11E1的重鏈可變區(qū)的3個(gè)CDR。還提供了一種單克隆抗體，其進(jìn)一步包含11E1的可變輕鏈可變區(qū)或11E1的輕鏈可變區(qū)的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)CDR。任選地，所述輕鏈或重鏈CDR中的任意一個(gè)或多個(gè)可以含有1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)氨基酸修飾(例如，置換、插入或缺失)。任選地，提供了一種抗體，其中包含抗體11E1的抗原結(jié)合區(qū)的一部分或全部的任意輕鏈和/或重鏈可變區(qū)與IgG型的免疫球蛋白恒定區(qū)(任選地人恒定區(qū)，任選地人IgG1或IgG4同種型)融合。在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述抗體是11E1。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體或純化的編碼抗體的多核苷酸，其中所述抗體包含：VHCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:5、6或7中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:8或9中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:10中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:11中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:12中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:13中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種結(jié)合人TLR3的抗體，所述抗體包含：a.SEQIDNO:3的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或b.SEQIDNO:4的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或c.SEQIDNO:3的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和SEQIDNO:4的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或d.如在SEQIDNO:5-10中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或e.如在SEQIDNO:11-13中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或f.如在SEQIDNO:5-10中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和如在SEQIDNO:11-13中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或g.具有CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或h.具有CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在本文中任意實(shí)施方案的另一個(gè)方面，可以將重鏈和輕鏈的CDR1、2和3中的任一個(gè)表征為具有這樣的氨基酸序列：其與在對(duì)應(yīng)的SEQIDNO中列出的特定CDR或CDR集合具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％或95％序列同一性。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體，其與上面的(a)至(h)的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合。抗體31F631F6的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:14，輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:15。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種抗體，其結(jié)合與單克隆抗體31F6基本上相同的表位或決定簇；任選地，所述抗體包含抗體31F6的抗原結(jié)合區(qū)。在本文中的任意實(shí)施方案中,抗體31F6可以通過它的氨基酸序列和/或編碼它的核酸序列來表征。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述單克隆抗體包含31F6的Fab或F(ab')2部分。還提供了一種單克隆抗體，其包含31F6的重鏈可變區(qū)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，所述單克隆抗體包含31F6的重鏈可變區(qū)的3個(gè)CDR。還提供了一種單克隆抗體，其進(jìn)一步包含31F6的可變輕鏈可變區(qū)或31F6的輕鏈可變區(qū)的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)CDR。任選地，所述輕鏈或重鏈CDR中的任意一個(gè)或多個(gè)可以含有1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)氨基酸修飾(例如置換、插入或缺失)。任選地，提供了一種抗體，其中包含抗體31F6的抗原結(jié)合區(qū)的一部分或全部的任意輕鏈和/或重鏈可變區(qū)與IgG型的免疫球蛋白恒定區(qū)(任選地人恒定區(qū)，任選地人IgG1或IgG4同種型)融合。在另一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述抗體是31F6。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體或純化的編碼抗體的多核苷酸，其中所述抗體包含：VHCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:16、17或18中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:19或20中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:21中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:22中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:23中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:24中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種結(jié)合人TLR3的抗體，所述抗體包含：a.SEQIDNO:14的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或b.SEQIDNO:15的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或c.SEQIDNO:14的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和SEQIDNO:15的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或d.如在SEQIDNO:16-21中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或e.如在SEQIDNO:22-24中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或f.如在SEQIDNO:16-21中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和如在SEQIDNO:22-24中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或g.具有CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:14的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或h.具有CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:15的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中這些氨基酸中的1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)可以被不同的氨基酸置換。在本文中任意實(shí)施方案的另一個(gè)方面，可以將重鏈和輕鏈的CDR1、2和3中的任一個(gè)表征為具有這樣的氨基酸序列：其與在對(duì)應(yīng)的SEQIDNO中列出的特定CDR或CDR集合具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％或95％序列同一性。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體，其與上面的(a)至(h)的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合?？贵w32C432C4的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:25，輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:26。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種抗體，其結(jié)合與單克隆抗體32C4基本上相同的表位或決定簇；任選地，所述抗體包含抗體32C4的抗原結(jié)合區(qū)。在本文中的任意實(shí)施方案中,抗體32C4可以通過它的氨基酸序列和/或編碼它的核酸序列來表征。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述單克隆抗體包含32C4的Fab或F(ab')2部分。還提供了一種單克隆抗體，其包含32C4的重鏈可變區(qū)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，所述單克隆抗體包含32C4的重鏈可變區(qū)的3個(gè)CDR。還提供了一種單克隆抗體，其進(jìn)一步包含32C4的可變輕鏈可變區(qū)或32C4的輕鏈可變區(qū)的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)CDR。任選地，所述輕鏈或重鏈CDR中的任意一個(gè)或多個(gè)可以含有1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)氨基酸修飾(例如置換、插入或缺失)。任選地，提供了一種抗體，其中包含抗體32C4的抗原結(jié)合區(qū)的一部分或全部的任意輕鏈和/或重鏈可變區(qū)與IgG型的免疫球蛋白恒定區(qū)(任選地人恒定區(qū)，任選地人IgG1或IgG4同種型)融合。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗體是32C4。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體或純化的編碼抗體的多核苷酸，其中所述抗體包含：VHCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:27、28或29中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:30或31中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:32中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:33中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:34中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:35中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種結(jié)合人TLR3的抗體，所述抗體包含：a.SEQIDNO:25的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或b.SEQIDNO:26的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或c.SEQIDNO:25的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和SEQIDNO:26的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或d.如在SEQIDNO:27-32中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或e.如在SEQIDNO:33-35中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或f.如在SEQIDNO:27-32中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和如在SEQIDNO:33-35中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或g.具有CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:25的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或h.具有CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:26的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在本文中任意實(shí)施方案的另一個(gè)方面，可以將重鏈和輕鏈的CDR1、2和3中的任一個(gè)表征為具有這樣的氨基酸序列：其與在對(duì)應(yīng)的SEQIDNO中列出的特定CDR或CDR集合具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％或95％序列同一性。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體，其與上面的(a)至(h)的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合?？贵w37B737B7的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:36，輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:37。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種抗體，其結(jié)合與單克隆抗體37B7基本上相同的表位或決定簇；任選地，所述抗體包含抗體37B7的抗原結(jié)合區(qū)。在本文中的任意實(shí)施方案中,抗體37B7可以通過它的氨基酸序列和/或編碼它的核酸序列來表征。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述單克隆抗體包含37B7的Fab或F(ab')2部分。還提供了一種單克隆抗體，其包含37B7的重鏈可變區(qū)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，所述單克隆抗體包含37B7的重鏈可變區(qū)的3個(gè)CDR。還提供了一種單克隆抗體，其進(jìn)一步包含37B7的可變輕鏈可變區(qū)或37B7的輕鏈可變區(qū)的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)CDR。任選地，所述輕鏈或重鏈CDR中的任意一個(gè)或多個(gè)可以含有1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)氨基酸修飾(例如置換、插入或缺失)。任選地，提供了一種抗體，其中包含抗體37B7的抗原結(jié)合區(qū)的一部分或全部的任意輕鏈和/或重鏈可變區(qū)與IgG型的免疫球蛋白恒定區(qū)(任選地人恒定區(qū)，任選地人IgG1或IgG4同種型)融合。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗體是37B7。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體或純化的編碼抗體的多核苷酸，其中所述抗體包含：VHCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:38、39或40中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:41或42中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:43中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:44中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:45中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:46中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種結(jié)合人TLR3的抗體，所述抗體包含：a.SEQIDNO:36的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或b.SEQIDNO:37的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或c.SEQIDNO:36的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和SEQIDNO:37的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或d.如在SEQIDNO:38-43中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或e.如在SEQIDNO:44-46中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或f.如在SEQIDNO:38-43中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和如在SEQIDNO:44-46中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或g.具有CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:36的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或h.具有CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:37的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在本文中任意實(shí)施方案的另一個(gè)方面，可以將重鏈和輕鏈的CDR1、2和3中的任一個(gè)表征為具有這樣的氨基酸序列：其與在對(duì)應(yīng)的SEQIDNO中列出的特定CDR或CDR集合具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％或95％序列同一性。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體，其與上面的(a)至(h)的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合?？贵w7G117G11的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:47，輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列被列出為SEQIDNO:48。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了一種抗體，其結(jié)合與單克隆抗體7G11基本上相同的表位或決定簇；任選地，所述抗體包含抗體7G11的抗原結(jié)合區(qū)。在本文中的任意實(shí)施方案中,抗體7G11可以通過它的氨基酸序列和/或編碼它的核酸序列來表征。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述單克隆抗體包含7G11的Fab或F(ab')2部分。還提供了一種單克隆抗體，其包含7G11的重鏈可變區(qū)。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，所述單克隆抗體包含7G11的重鏈可變區(qū)的3個(gè)CDR。還提供了一種單克隆抗體，其進(jìn)一步包含7G11的可變輕鏈可變區(qū)或7G11的輕鏈可變區(qū)的1個(gè)、2個(gè)或3個(gè)CDR。任選地，所述輕鏈或重鏈CDR中的任意一個(gè)或多個(gè)可以含有1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或5個(gè)氨基酸修飾(例如置換、插入或缺失)。任選地，提供了一種抗體，其中包含抗體7G11的抗原結(jié)合區(qū)的一部分或全部的任意輕鏈和/或重鏈可變區(qū)與IgG型的免疫球蛋白恒定區(qū)(任選地人恒定區(qū)，任選地人IgG1或IgG4同種型)融合。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抗體是7G11。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體或純化的編碼抗體的多核苷酸，其中所述抗體包含：VHCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:49、50或51中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:52或53中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VHCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:54中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR1區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:55中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR2區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:56中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；VLCDR3區(qū)域，其包含如在SEQIDNO:57中所示的氨基酸序列，其中一個(gè)或多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種結(jié)合人TLR3的抗體，所述抗體包含：a.SEQIDNO:47的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或b.SEQIDNO:48的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或c.SEQIDNO:47的重鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和SEQIDNO:48的輕鏈可變區(qū)，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或d.如在SEQIDNO:49-54中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或e.如在SEQIDNO:55-57中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或f.如在SEQIDNO:49-54中所示的重鏈CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；和如在SEQIDNO:55-57中所示的輕鏈CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或g.具有CDR1、2和3(HCDR1、HCDR2、HCDR3)氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:47的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換；或h.具有CDR1、2和3(LCDR1、LCDR2、LCDR3)氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，所述氨基酸序列各自與具有SEQIDNO:48的氨基酸序列的可變區(qū)的CDR1、2和3具有至少60％、70％、80％、85％、90％或95％同一性，其中1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)氨基酸可以被不同的氨基酸置換。在本文中任意實(shí)施方案的另一個(gè)方面，可以將重鏈和輕鏈的CDR1、2和3中的任一個(gè)表征為具有這樣的氨基酸序列：其與在對(duì)應(yīng)的SEQIDNO中列出的特定CDR或CDR集合具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％或95％序列同一性。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種抗體，其與上面的(a)至(h)的單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合。抗體7G11和32C4的CDR序列源自大鼠IGKV12s30*01和IGHV1s6*01基因分別就輕鏈和重鏈而言的VL和VH基因重排?？贵w31F6的重鏈的CDR序列也源自大鼠IGHV1s6*01基因的VH基因重排，而輕鏈CDR序列源自大鼠IGKV12s8*0基因的VL基因重排。在本發(fā)明的一個(gè)方面，根據(jù)本發(fā)明的一種抗體的輕鏈得自特定核酸序列或由其編碼，所述特定核酸序列源自選自IGKV12s30*01和IGKV12s8*0關(guān)于V基因的VL基因重排。在本發(fā)明的一個(gè)方面，根據(jù)本發(fā)明的一種抗體的重鏈得自特定核酸序列或由其編碼，所述特定核酸序列源自選自IGHV1s6*01關(guān)于V基因的VH基因重排。在本發(fā)明的任意抗體(例如，11E1、7G11、31F6、32C4或37B7)中，所指定的可變區(qū)和CDR序列可以包含保守的序列修飾。保守的序列修飾表示不會(huì)顯著地影響或改變含有所述氨基酸序列的抗體的結(jié)合特征的氨基酸修飾。這樣的保守修飾包括氨基酸置換、添加和缺失。通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)(諸如定位誘變和PCR介導(dǎo)的誘變)，可以將修飾引入本發(fā)明的抗體中。保守氨基酸置換通常是這樣的置換：其中用一個(gè)含有具有類似物理化學(xué)性能的側(cè)鏈的氨基酸殘基來替換某個(gè)氨基酸殘基。所指定的可變區(qū)和CDR序列可以包含1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)、4個(gè)或更多個(gè)氨基酸插入、缺失或置換。在進(jìn)行置換的情況下，優(yōu)選的置換應(yīng)當(dāng)是保守修飾。具有類似側(cè)鏈的氨基酸殘基家族已經(jīng)在本領(lǐng)域中定義。這些家族包括具有堿性側(cè)鏈的氨基酸(例如，賴氨酸、精氨酸、組氨酸)，具有酸性側(cè)鏈的氨基酸(例如，天冬氨酸、谷氨酸)，具有不帶電荷的極性側(cè)鏈的氨基酸(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、色氨酸)，具有非極性側(cè)鏈的氨基酸(例如，丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸)，具有β-分支側(cè)鏈的氨基酸(例如蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸)和具有芳族側(cè)鏈的氨基酸(例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)。因此，本發(fā)明抗體的CDR區(qū)域內(nèi)的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基可以用來自相同側(cè)鏈家族的其它氨基酸殘基替換，并且可以使用本文中描述的測(cè)定來試驗(yàn)經(jīng)改變的抗體所保留的功能(即，本文中闡述的性能)。術(shù)語“同一性”或“相同”當(dāng)用于兩種或更多種多肽的序列之間的關(guān)系中時(shí)，表示多肽之間的序列關(guān)聯(lián)性程度，正如通過兩個(gè)或更多個(gè)氨基酸殘基的鏈之間的匹配數(shù)量所確定的?！巴恍浴绷慷染哂虚g隙比對(duì)(如果存在的話)的2個(gè)或多個(gè)序列中較小者之間相同匹配的百分比，所述間隙比對(duì)通過特定數(shù)學(xué)模型或計(jì)算機(jī)程序(即“算法”)來解決。通過已知的方法，可以容易地計(jì)算相關(guān)多肽的同一性。這樣的方法包括、但不限于在以下文獻(xiàn)中描述的那些方法：ComputationalMolecularBiology,Lesk,A.M.,編,OxfordUniversityPress,NewYork,1988；Biocomputing:InformaticsandGenomeProjects,Smith,D.W.,編,AcademicPress,NewYork,1993；ComputerAnalysisofSequenceData,第1部分,Griffin,A.M.,和Griffin,H.G.,編,HumanaPress,NewJersey,1994；SequenceAnalysisinMolecularBiology,vonHeinje,G.,AcademicPress,1987；SequenceAnalysisPrimer,Gribskov,M.和Devereux,J.,編,M.StocktonPress,NewYork,1991；和Carillo等人,SIAMJ.AppliedMath.48,1073(1988)。用于確定同一性的優(yōu)選方法被設(shè)計(jì)成給出所試驗(yàn)的序列之間的最大匹配。在公眾可得到的計(jì)算機(jī)程序中描述了確定同一性的方法。用于確定兩個(gè)序列之間的同一性的優(yōu)選計(jì)算機(jī)程序方法包括GCG程序包，其包括GAP(Devereux等人,Nucl.Acid.Res.12,387(1984)；GeneticsComputerGroup,UniversityofWisconsin,Madison,Wis.)、BLASTP、BLASTN和FASTA(Altschul等人,J.Mol.Biol.215,403-410(1990))。BLASTX程序可以公開地從國(guó)家生物技術(shù)信息中心(NCBI)和其它來源(BLASTManual,Altschul等人.NCB/NLM/NIHBethesda,Md.20894；Altschul等人,出處同上)得到。眾所周知的SmithWaterman算法也可以用于確定同一性。根據(jù)AbM(OxfordMolecular的AbM抗體建模軟件定義)、Kabat和Chothia定義系統(tǒng)，已經(jīng)將根據(jù)本發(fā)明的抗體的CDR的序列總結(jié)在下面表1和2中。根據(jù)Abm、Kabat和Chothia編號(hào)系統(tǒng)，將本文中描述的氨基酸序列編號(hào)。盡管可以將任意合適的編號(hào)系統(tǒng)用于指定的CDR區(qū)域，但是在沒有任意其它指示存在下，可以使用Abm編號(hào)。已經(jīng)使用以下指示建立了這樣的編號(hào)：CDR-L1：起始：大約殘基24，殘基之前：總是Cys，殘基之后：總是Trp(通常是Trp-Tyr-Gln，但也可以是Trp-Leu-Gln、Trp-Phe-Gln、Trp-Tyr-Leu)，長(zhǎng)度：10至17個(gè)殘基；CDR-L2：起始：在L1的末端之后總是16個(gè)殘基，殘基之前：通常是Ile-Tyr(但也可以是Val-Tyr、Ile-Lys、Ile-Phe)，長(zhǎng)度：總是7個(gè)殘基；CDR-L3，起始：在L2末端之后總是33個(gè)殘基，殘基之前：總是Cys，殘基之后：總是Phe-Gly-Xaa-Gly，長(zhǎng)度：7至11個(gè)殘基；CDR-H1，起始：大約殘基26(在Cys之后總是4個(gè))(Chothia/AbM定義，Kabat定義在5個(gè)殘基之后起始)，殘基之前：總是Cys-Xaa-Xaa-Xaa，殘基之后：總是Trp(通常是Trp-Val，但也可以是Trp-Ile、Trp-Ala)，長(zhǎng)度：10至12個(gè)殘基(AbM定義，Chothia定義排除了最后4個(gè)殘基)；CDR-H2，起始：在CDR-H1的Kabat/AbM定義的末端之后總是15個(gè)殘基，殘基之前：通常是Leu-Glu-Trp-Ile-Gly(但有很多變化，殘基之后：Lys/Arg-Leu/Ile/Val/Phe/Thr/Ala-Thr/Ser/Ile/Ala)，長(zhǎng)度：Kabat定義16至19個(gè)殘基；AbM(和Chothia)定義在7個(gè)殘基之前結(jié)束；CDR-H3，起始：在CDR-H2末端之后總是33個(gè)殘基(在Cys之后總是2個(gè))，殘基之前：總是Cys-Xaa-Xaa(通常Cys-Ala-Arg)，殘基之后：總是Trp-Gly-Xaa-Gly，長(zhǎng)度：3-25個(gè)殘基。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體是人或小鼠IgG1同種型。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體是人IgG4同種型。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體是保留它們的結(jié)合和/或功能性能的抗體片段。本發(fā)明的單克隆抗體的片段和衍生物通過本領(lǐng)域已知的技術(shù)，可以生產(chǎn)本發(fā)明的抗體的片段和衍生物(它們被在本申請(qǐng)中使用的術(shù)語“抗體”包括，除非另有說明或與上下文明顯矛盾)，優(yōu)選11E1、7G11、31F6、32C4或37B7-樣抗體。“片段”包含完整抗體的一部分，通常是抗原結(jié)合位點(diǎn)或可變區(qū)?？贵w片段的例子包括Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2和Fv片段；雙體；任何抗體片段，其為具有由一個(gè)鄰接氨基酸殘基的連續(xù)序列組成的一級(jí)結(jié)構(gòu)的多肽(在本文中被稱作“單鏈抗體片段”或“單鏈多肽”)，包括、但不限于(1)單鏈Fv分子，(2)僅含有一個(gè)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的單鏈多肽、或其片段，所述片段含有所述輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的3個(gè)CDR，而沒有相關(guān)的重鏈部分，和(3)僅含有一個(gè)重鏈可變區(qū)的單鏈多肽、或其片段，所述片段含有重鏈可變區(qū)的3個(gè)CDR，而沒有相關(guān)的輕鏈部分；和由多個(gè)抗體片段形成的多特異性抗體。尤其包括納米體、結(jié)構(gòu)域抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體或“dAb”。可以使用標(biāo)準(zhǔn)方法得到本發(fā)明的抗體的片段。例如，根據(jù)常規(guī)技術(shù)，通過分離抗體的蛋白酶消化，可以產(chǎn)生Fab或F(ab′)2片段。應(yīng)當(dāng)理解，可以使用已知的方法來修飾免疫反應(yīng)片段，例如為了減慢體內(nèi)清除率和得到更合乎需要的藥代動(dòng)力學(xué)分布，可以用聚乙二醇(PEG)來修飾所述片段。在例如Leong等人,16(3):106-119(2001)和Delgado等人,Br.J.Cancer73(2):175-182(1996)(它們的公開內(nèi)容通過引用并入本文)中，描述了用于將PEG偶聯(lián)至Fab'片段并且位點(diǎn)特異性地綴合至Fab'片段的方法。可替換地，可以修飾生產(chǎn)本發(fā)明的抗體(優(yōu)選11E1、7G11、31F6、32C4或37B7-樣抗體)的雜交瘤的DNA，從而編碼本發(fā)明的片段。然后將經(jīng)修飾的DNA插入表達(dá)載體中，并且用于轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，所述細(xì)胞然后表達(dá)期望的片段。在某些實(shí)施方案中，在插入表達(dá)載體中之前，可以修飾生產(chǎn)本發(fā)明的抗體(優(yōu)選11E1、7G11、31F6、32C4或37B7-樣抗體)的雜交瘤的DNA，例如，通過用人重鏈和輕鏈恒定結(jié)構(gòu)域的編碼序列替代同源非人序列(例如，Morrison等人,PNAS第6851頁(1984))，或通過將非免疫球蛋白多肽的編碼序列的全部或部分共價(jià)連接至免疫球蛋白編碼序列。以此方式，制備“嵌合的”或“雜交的”抗體，所述抗體具有原始抗體的結(jié)合特異性。通常，這樣的非免疫球蛋白多肽替換了本發(fā)明的抗體的恒定結(jié)構(gòu)域。因而，根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的抗體，優(yōu)選11E1、7G11、31F6、32C4或37B7-樣抗體，是人源化的。根據(jù)本發(fā)明的抗體的“人源化”形式是特定的嵌合免疫球蛋白、免疫球蛋白鏈或其片段(諸如Fv、Fab、Fab'、F(ab')2或抗體的其它抗原結(jié)合子序列)，其含有從鼠或大鼠免疫球蛋白衍生出的最小序列。通常，人源化抗體是人免疫球蛋白(受體抗體)，其中來自所述受體的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)的殘基被來自原始抗體(供體抗體)的CDR的殘基替換，同時(shí)保持期望的原始抗體的特異性、親和力和能力。在某些情況下，人免疫球蛋白的Fv框架殘基可以被相應(yīng)的非人殘基替換。此外，人源化抗體可以包含在受體抗體中或在輸入的CDR或框架序列中未發(fā)現(xiàn)的殘基。進(jìn)行這些修飾以進(jìn)一步改進(jìn)和優(yōu)化抗體性能。一般而言，人源化抗體將包含基本上所有的至少一個(gè)、并且通常兩個(gè)可變結(jié)構(gòu)域，其中所有的或基本上所有的CDR區(qū)對(duì)應(yīng)于原始抗體的那些CDR區(qū)，并且所有的或基本上所有的FR區(qū)是人免疫球蛋白共有序列的FR區(qū)。人源化抗體還最佳地包含免疫球蛋白恒定區(qū)(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的至少一部分。關(guān)于其它細(xì)節(jié)，參見Jones等人,Nature,321,第522頁(1986)；Reichmann等人,Nature,332,第323頁(1988)；Presta,Curr.Op.Struct.Biol.,2,第593頁(1992)；VerhoeyenetScience,239,第1534頁；和美國(guó)專利號(hào)4,816,567，它們的整個(gè)公開內(nèi)容通過引用并入本文。用于將本發(fā)明的抗體人源化的方法是本領(lǐng)域眾所周知的。要用于制備人源化抗體的人可變結(jié)構(gòu)域(輕鏈和重鏈)的選擇，對(duì)于降低抗原性而言是非常重要的。根據(jù)所謂的“最佳擬合”方法，針對(duì)已知的人可變結(jié)構(gòu)域序列的整個(gè)庫，篩選本發(fā)明的抗體的可變結(jié)構(gòu)域的序列。然后，將最接近小鼠序列的人序列接受為人源化抗體的人框架(FR)(Sims等人,J.Immunol.151,第2296頁(1993)；Chothia和Lesk,J.Mol.196,1987,第901頁)。另一種方法使用來自所有人抗體的輕鏈或重鏈的特定亞組的共有序列的特定框架。相同的框架可以用于幾種不同的人源化抗體(Carter等人,PNAS89,第4285頁(1992)；Presta等人,J.Immunol.,151,第2623頁(1993))。進(jìn)一步重要的是，在保留對(duì)TLR3受體的高親和力和其它有利的生物學(xué)特性的情況下，將抗體人源化。為了實(shí)現(xiàn)該目的，根據(jù)一種優(yōu)選的方法，使用親本序列和人源化序列的三維模型，通過分析親本序列和不同概念的人源化產(chǎn)物的方法，制備人源化抗體。三維免疫球蛋白模型是通?？傻玫降模⑶沂潜绢I(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。可以得到闡明并且顯示所選候選免疫球蛋白序列的可能三維結(jié)構(gòu)的計(jì)算機(jī)程序。對(duì)這些顯示的檢查，允許分析殘基在候選免疫球蛋白序列的功能中的可能作用，即分析影響候選免疫球蛋白的結(jié)合其抗原的能力的殘基。以此方式，可以從共有序列和輸入序列中選擇并且組合FR殘基，從而實(shí)現(xiàn)期望的抗體特征，諸如增加的對(duì)靶抗原的親和力。一般而言，CDR殘基直接地并且最顯著地涉入影響抗原結(jié)合。制備“人”單克隆抗體的另一種方法是使用XenoMouse(Abgenix,Fremont,CA)作為用于免疫接種的小鼠。XenoMouse是根據(jù)本發(fā)明的鼠宿主，其免疫球蛋白基因被功能性的人免疫球蛋白基因替換。因此，由該小鼠產(chǎn)生的抗體或從該小鼠的B細(xì)胞制備的雜交瘤所產(chǎn)生的抗體是人抗體(或已經(jīng)人源化的抗體)。在美國(guó)專利號(hào)6,162,963中描述了XenoMouse，它通過引用整體并入本文中。還可以根據(jù)多種其它技術(shù)來生產(chǎn)人抗體，諸如通過使用其它轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)行免疫接種，所述轉(zhuǎn)基因動(dòng)物已經(jīng)經(jīng)過工程改造以表達(dá)人抗體所有組成成分(JakobovitzetNature362(1993)255)，或通過使用噬菌體展示方法選擇抗體所有組成成分。這樣的技術(shù)是技術(shù)人員已知的，并且可以從本申請(qǐng)中公開的單克隆抗體開始實(shí)施。本發(fā)明的抗體，優(yōu)選11E1、7G11、31F6、32C4或37B7-樣抗體，還可以被衍生成“嵌合”抗體(免疫球蛋白)，其中重鏈/輕鏈的一部分與原始抗體中的相應(yīng)序列相同或同源，而所述鏈的剩余部分與從另一個(gè)物種衍生出抗體或?qū)儆诹硪粋€(gè)抗體類別或亞類的抗體中的相應(yīng)序列、以及這樣的抗體的片段相同或同源，只要它們表現(xiàn)出期望的生物活性和結(jié)合特異性(Cabilly等人,出處同上；Morrison等人,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,第6851頁(1984))。定量施用方案基于使用抗-TLR3抗體在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中收集的效力數(shù)據(jù)，發(fā)明人已經(jīng)確定，低至100μg/小鼠的劑量會(huì)產(chǎn)生治療效果。這樣的劑量等同于在小鼠中的4mg/kg，并因此等同于在人受試者中的0.5mg/kg。因此，在本發(fā)明的方法中，可以以被包含在下述范圍內(nèi)的劑量施用抗TLR3-抗體：在人類中0.05-20mg/kg，優(yōu)選0.1-10mg/kg，進(jìn)一步優(yōu)選0.5-5mg/kg(例如約25mg至500mg的單位劑量)。一個(gè)示例性的治療方案需要如下施用：每周2次、每周1次、每2周1次、每3周1次、每4周1次、每個(gè)月1次、每2-3個(gè)月1次、或每3-6個(gè)月1次。抗-TLR3抗體的示例性劑量方案包括0.05-20mg/kg體重(優(yōu)選地0.1-10mg/kg體重，進(jìn)一步優(yōu)選地0.5-5mg/kg體重)，經(jīng)由靜脈內(nèi)施用或皮下注射，其中使用下述定量施用方案之一施用抗體：(i)約每1、2、3或4周1次(例如，共2-4劑)、然后每1-3個(gè)月1次的負(fù)荷劑量；(ii)每個(gè)月1次或每2個(gè)月1次的階段；(iii)每1-2周或任意其它最佳定量劑量。任選地以這樣的劑量施用抗-TLR3抗體：所述劑量適合于誘導(dǎo)基本上完全TLR3受體飽和(90％，任選地95％受體飽和)，例如在靶向的細(xì)胞中表達(dá)的TLR3多肽的飽和。由于認(rèn)為TLR3受體在信號(hào)傳遞之前二聚化，至少20％、30％、40％、50％受體飽和對(duì)小于完全飽和的抑制可用于治療疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，約每周2次至約每個(gè)月1次、或約每個(gè)月1次至約每2個(gè)月1次，施用導(dǎo)致至少約20％、30％、40％、50％、90％或95％受體飽和的抗-TLR3抗體的劑量。例如，可以將所述劑量施用至少3次、至少6次或更多次。例如，所述方法可以包括：以在靶向的細(xì)胞上達(dá)到至少約20％、30％、40％、50％、90％或95％TLR3受體飽和的劑量和施用頻率施用抗-TLR3抗體，持續(xù)至少約2周、1個(gè)月、6個(gè)月、9個(gè)月或12個(gè)月。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，方案會(huì)導(dǎo)致持續(xù)的基本上完全受體飽和。施用導(dǎo)致持續(xù)至少約1周、2周或1個(gè)月的時(shí)段的基本上完全受體飽和的抗-TLR3抗體的劑量?？梢栽谄渲写嬖诎屑?xì)胞的人樣品(例如全血、為炎癥部位的任何組織、滑液)上評(píng)價(jià)受體占據(jù)。使用本領(lǐng)域已知的方法，經(jīng)由細(xì)胞內(nèi)染色，通過FACS分析，可以測(cè)量TLR3受體的飽和百分比，因?yàn)門LR3受體存在于細(xì)胞中。可替換地，使用響應(yīng)于TLR3配體(諸如在得自患者的單核細(xì)胞(優(yōu)選PBMC)中的dsRNA(即聚AU))的細(xì)胞因子抑制分泌特性試驗(yàn)，可以確定飽和百分比。有效的細(xì)胞因子抑制與有效的治療效果相關(guān)聯(lián)，并且然后可以為每位患者改進(jìn)劑量。在該測(cè)定中可以測(cè)量的細(xì)胞因子是例如IP-10或IL-6。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將受體飽和評(píng)估為受體占據(jù)，例如通過進(jìn)行游離位點(diǎn)和結(jié)合位點(diǎn)測(cè)定。簡(jiǎn)而言之，在得自生物樣品的靶細(xì)胞上評(píng)估游離的和結(jié)合的TLR3受體水平，所述生物樣品得自用抗-TLR3抗體治療的個(gè)體，其中游離位點(diǎn)測(cè)定通過用施用給個(gè)體的PE-綴合形式的抗-TLR3抗體染色來評(píng)估未結(jié)合的TLR3。結(jié)合位點(diǎn)測(cè)定通過用PE-綴合的小鼠抗-人IgG4單克隆抗體(其識(shí)別與TLR3多肽結(jié)合的抗-TLR3抗體)(當(dāng)抗-TLR3抗體是人IgG4同種型時(shí))染色來評(píng)估被抗-TLR3抗體占據(jù)的TLR3多肽。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療個(gè)體的方法，所述方法包括：(a)給個(gè)體施用抗-TLR3抗體，和(b)確定所述個(gè)體中的TLR3受體飽和，任選地進(jìn)一步確定要施用給所述個(gè)體的抗-TLR3抗體的劑量。劑型通過以低壓凍干制劑或水溶液的形式將具有期望的純度程度的拮抗劑與任選的藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或穩(wěn)定劑混合，制備根據(jù)本發(fā)明使用的拮抗劑的治療制劑進(jìn)行貯存。關(guān)于制劑的一般信息，參見，例如，Gilman等人(編),ThePharmacologicalBasesofTherapeutics,第8版(PergamonPress,1990)；Gennaro(編),Remington’sPharmaceuticalSciences,第18版(MackPublishingCo.,Easton,Pa.,1990)；Avis等人(編),PharmaceuticalDosageForms:ParenteralMedications(Dekker,NewYork,1993)；Lieberman等人(編),PharmaceuticalDosageForms:Tablets(Dekker,NewYork,1990)；Lieberman等人(編)PharmaceuticalDosageForms:DisperseSystems(Dekker,NewYork,1990)；和Walters(編),DermatologicalandTransdermalFormulations(DrugsandthePharmaceuticalSciences),第119卷(Dekker,NewYork,2002)?？山邮艿妮d體、賦形劑或穩(wěn)定劑在采用的劑量和濃度是對(duì)受體無毒的，且包括緩沖劑諸如磷酸鹽、檸檬酸鹽和其它有機(jī)酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸和甲硫氨酸；防腐劑(諸如十八烷基二甲基芐基氯化銨；氯化六甲雙銨；苯扎氯銨、芐索氯銨；苯酚、丁醇或苯甲醇；對(duì)羥基苯甲酸烷基酯諸如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環(huán)己醇；3-戊醇；和間甲酚)；低分子量(小于約10個(gè)殘基)多肽；蛋白諸如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水聚合物諸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸諸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、組氨酸、精氨酸或賴氨酸；單糖類、二糖類和其它碳水化合物類，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑諸如乙二胺四乙酸(EDTA)；糖諸如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；形成鹽的抗衡離子諸如鈉；金屬絡(luò)合物(例如，鋅-蛋白復(fù)合物)；和/或非離子型表面活性劑，諸如TWEENTM、PLURONICSTM或PEG。示例性抗體制劑描述在例如WO1998/56418中，其描述了在pH5.0的抗-CD20抗體的液體多劑量制劑，該制劑包含40mg/mL利妥昔單抗、25mM乙酸鹽、150mM海藻糖、0.9％苯甲醇和0.02％聚山梨酯20TM，其具有在2-8℃貯存最少2年的貯存期限。另一種感興趣的抗-CD20制劑包含在9.0mg/mL氯化鈉、7.35mg/mL檸檬酸鈉二水合物、0.7mg/mL聚山梨酯80TM和無菌注射用水中的10mg/mL利妥昔單抗，pH6.5。適合用于皮下施用的低壓凍干制劑描述在例如美國(guó)專利號(hào)6,267,958(Andya等人)中。這樣的低壓凍干制劑可以用合適的稀釋劑重構(gòu)至高蛋白濃度，并且可以將重構(gòu)的制劑皮下地施用給本文中要治療的哺乳動(dòng)物。也預(yù)見到結(jié)晶形式的拮抗劑。參見，例如，US2002/0136719A1(Shenoy等人)。本文中的制劑還可以含有超過一種活性化合物(如上指出的第二種藥物)，優(yōu)選具有互補(bǔ)活性的那些，其不會(huì)不利地彼此影響。這樣的藥物的類型和有效量取決于例如在制劑中存在的B-細(xì)胞拮抗劑的量和類型以及受試者的臨床參數(shù)。上面指出了優(yōu)選的這樣的第二種藥物。還可以將活性成分封裝在微膠囊中，所述微膠囊例如通過凝聚技術(shù)或通過界面聚合來制備，例如，羥基甲基纖維素或明膠-微膠囊和聚-(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊，分別在膠體藥物遞送系統(tǒng)(例如，脂質(zhì)體、白蛋白微球、微乳劑、納米顆粒和納米囊)中或在大乳劑中。這樣的技術(shù)公開在例如Remington’sPharmaceuticalSciences,出處同上?？梢灾苽涑掷m(xù)釋放制劑。持續(xù)釋放制劑的合適例子包括含有拮抗劑的固體疏水聚合物的半透性基質(zhì)，所述基質(zhì)是呈成形物的形式，例如膜或微膠囊。持續(xù)釋放基質(zhì)的例子包括聚酯、水凝膠(例如，聚(2-羥基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚丙交酯(美國(guó)專利號(hào)3,773,919)、L-谷氨酸和L-谷氨酸γ-乙酯的共聚物、不可降解的乙烯乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-羥乙酸共聚物諸如醋酸亮丙瑞林DepotTM(由乳酸-羥乙酸共聚物和醋酸亮丙瑞林組成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羥基丁酸。要用于體內(nèi)施用的制劑必須是無菌的。這通過穿過無菌過濾膜過濾容易地實(shí)現(xiàn)。可以用在這些組合物中的藥學(xué)上可接受的載體包括、但不限于：離子交換劑，氧化鋁，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白(諸如人血清白蛋白)，緩沖物質(zhì)，諸如磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物，水，鹽或電解質(zhì)，諸如硫酸魚精蛋白，磷酸氫二鈉，磷酸氫鉀，氯化鈉，鋅鹽，膠態(tài)二氧化硅，三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，基于纖維素的物質(zhì)，聚乙二醇，羧甲纖維素鈉，聚丙烯酸酯，蠟類，聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段共聚物，聚乙二醇和羊毛脂。本發(fā)明的抗體可以用在調(diào)節(jié)、例如抑制患者中的表達(dá)TLR3的細(xì)胞的活性的方法中。該方法包括使患者與所述組合物接觸(例如將所述組合物施用給所述患者)的步驟。這樣的方法可用于預(yù)防和治療目的。制劑可以適合于鼻或吸入途徑。制劑可以包含藥學(xué)上可接受的鼻載體。對(duì)于鼻遞送，可以使用任意眾所周知的遞送方法諸如滴劑、鼻腔噴霧劑、鼻液體或粉末氣霧劑、膠囊劑或鼻插入物。對(duì)于氣霧劑遞送，可以使用任意眾所周知的遞送方法諸如噴霧器、吸入器、霧化器、氣霧器、輕霧器(mister)、干粉吸入器、計(jì)量劑量吸入器、計(jì)量劑量噴霧器、計(jì)量劑量輕霧器、計(jì)量劑量霧化器或其它合適的遞送裝置。將在下述實(shí)驗(yàn)部分中公開本發(fā)明的其它方面和優(yōu)點(diǎn)，其應(yīng)當(dāng)視作示例性的，且不是限制本申請(qǐng)的范圍。疾病的治療本發(fā)明提供了用于治療具有自身免疫疾病或炎性疾病的個(gè)體的方法，所述方法包括：給所述個(gè)體施用本發(fā)明的抗-TLR3抗體。所述抗體可以包含在進(jìn)一步包含藥學(xué)上可接受的載體的組合物中。這樣的組合物也被稱作本發(fā)明的“抗體組合物”。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體組合物包含在以上抗體實(shí)施方案中公開的抗體。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種在有此需要的患者中調(diào)節(jié)表達(dá)TLR3的細(xì)胞活性的方法，所述方法包括下述步驟：給所述患者施用根據(jù)本發(fā)明的組合物。所述方法更具體地涉及降低患者中的TLR3細(xì)胞活性，所述患者具有這樣的疾病：其中降低的TLR3細(xì)胞活性是有益的(例如，自身免疫疾病、炎性疾病、傳染性疾病、病毒感染)，或其由過度的TLR3細(xì)胞活性造成或以過度的TLR3細(xì)胞活性為特征。在一個(gè)實(shí)施方案中，抑制表達(dá)TLR3的細(xì)胞活性，其中所述患者具有這樣的疾病或障礙，其中這樣的抑制可以促進(jìn)、增強(qiáng)和/或誘導(dǎo)治療效果(或在至少高比例的具有所述疾病或障礙和與所述患者基本上類似的特征的患者中促進(jìn)、增強(qiáng)和/或誘導(dǎo)這樣的效果，如可以通過例如臨床試驗(yàn)所確定的)?？梢栽谄渲惺褂帽景l(fā)明的方法的疾病和病癥包括具有以下特征的所有疾病：其中調(diào)節(jié)TLR3可以是有益的，包括例如由TLR3信號(hào)傳遞或由所述TLR3信號(hào)傳遞以后產(chǎn)生的細(xì)胞因子部分地或完全地介導(dǎo)或加重的疾病。具體地，在使用抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗體的情況下，這樣的障礙包括由TLR3信號(hào)傳遞或由所述TLR3信號(hào)傳遞以后產(chǎn)生的細(xì)胞因子部分地或完全地介導(dǎo)或加重的任何障礙，尤其包括免疫障礙諸如炎性疾病和自身免疫疾病。更具體地，將本發(fā)明的方法用于治療多種免疫障礙和其它疾病，包括、但不限于自身免疫、炎癥、變態(tài)反應(yīng)、哮喘、感染(例如慢性感染、病毒感染)和膿毒癥。用抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗體可以治療的疾病的例子包括、但不限于：關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、膿毒癥、哮喘、骨質(zhì)疏松癥、針對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)抗原的自身免疫、自身免疫性糖尿病、炎性腸病、自身免疫性心炎和自身免疫性肝炎。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的抑制通過TLR3多肽進(jìn)行的信號(hào)傳遞的抗-TLR3抗體用于治療或預(yù)防移植物抗宿主病(GvHD)，例如在移植或輸血中。具體地，在骨髓移植以后，存在于移植物中的T細(xì)胞(作為污染物或有意地引入宿主中)在將宿主組織感知為抗原性外來物以后會(huì)攻擊移植受體的組織。所述T細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生過量的細(xì)胞因子，包括TNF-α和干擾素-γ(IFNγ)?？梢栽谝浦不蜉斞?例如同種異體骨髓移植)之前、過程中或之后施用抗-TLR3抗體，特別是在癌癥(例如白血病)的治療中。所述抗體可以是抑制TLR3多肽的信號(hào)傳遞的任何抗-TLR3抗體。由于認(rèn)為GvHD主要由抗原呈遞細(xì)胞驅(qū)動(dòng)，認(rèn)為抑制DC中的TLR3信號(hào)傳遞的抗-TLR3抗體是特別有用的。使用根據(jù)本發(fā)明的抑制TLR3信號(hào)傳遞的抗體可治療的其它免疫障礙尤其包括自身免疫性障礙和炎性障礙，包括、但不限于，克羅恩氏病、乳糜瀉、潰瘍性結(jié)腸炎、應(yīng)激性腸綜合征、急性彌散性腦脊髓炎(ADEM)、阿狄森氏病、抗磷脂抗體綜合征(APS)、再生障礙性貧血、自身免疫性肝炎、糖尿病、古德帕斯徹氏綜合征、格雷夫斯病、格-巴二氏綜合征(GBS)、橋本氏病、紅斑狼瘡、脫髓鞘病癥、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、眼球陣攣肌陣攣綜合征(OMS)、視神經(jīng)炎、Ord氏甲狀腺炎、天皰瘡、肝硬化、銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、萊特爾綜合癥、高安動(dòng)脈炎、顳動(dòng)脈炎、溫型自身免疫性溶血性貧血、韋格納氏肉芽腫病、闌尾炎、動(dòng)脈炎、關(guān)節(jié)炎、瞼緣炎、細(xì)支氣管炎、支氣管炎、滑囊炎、宮頸炎、膽管炎、膽囊炎、絨毛膜羊膜炎、結(jié)腸炎、結(jié)膜炎、膀胱炎、淚腺炎、皮炎、皮肌炎、腦炎、心內(nèi)膜炎、子宮內(nèi)膜炎、腸炎、小腸結(jié)腸炎、上髁炎、附睪炎、筋膜炎、纖維組織炎、胃炎、胃腸炎、牙齦炎、肝炎、化膿性汗腺炎、回腸炎、虹膜炎、喉炎、乳腺炎、腦膜炎、脊髓炎、心肌炎、肌炎、腎炎、臍炎、卵巢炎、睪丸炎、骨炎、耳炎、胰腺炎、腮腺炎、心包炎、腹膜炎、咽炎、肋膜炎、靜脈炎、肺炎、直腸炎、前列腺炎、腎盂腎炎、鼻炎、輸卵管炎、鼻竇炎、口炎、滑膜炎、腱炎、扁桃體炎、葡萄膜炎、陰道炎、血管炎和外陰炎。本發(fā)明的一個(gè)方面是，提供一種組合物，其能夠治療SIRS、膿毒癥、嚴(yán)重的膿毒癥或膿毒性休克。本發(fā)明的另一個(gè)方面是，提供一種用于預(yù)防性處理患者的方法，所述患者處于發(fā)展膿毒癥的風(fēng)險(xiǎn)中。例如，已經(jīng)通過外科手術(shù)切除了他們的脾的患者，具有受損的免疫系統(tǒng)(即化學(xué)療法治療、免疫抑制)的患者，但是也包括其它原因，諸如長(zhǎng)期類固醇藥物治療、糖尿病、AIDS或肝硬化、大燒傷或嚴(yán)重?fù)p傷、感染諸如肺炎、腦膜炎、腹膜炎、闌尾炎、蜂窩織炎、泌尿道感染或在重大外科手術(shù)操作以后發(fā)生的感染。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有已經(jīng)被宣告延長(zhǎng)的時(shí)間段(例如超過1年)的自身免疫疾病或炎性疾病，具有發(fā)生中的或活躍的炎癥的征象，具有疾病的物理征象(例如關(guān)節(jié)腫脹、病變、神經(jīng)學(xué)征狀等)，具有慢性疾病，具有嚴(yán)重疾病(如通過適用標(biāo)準(zhǔn)來評(píng)估的，例如在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中的DAS或ACR標(biāo)準(zhǔn))，或具有進(jìn)展中的疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療具有確定的自身免疫疾病或炎性疾病的個(gè)體的方法，所述方法包括：給所述個(gè)體施用抗-TLR3抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了使用TLR3抗體(或有關(guān)的組合物)治療自身免疫疾病或炎性疾病的急性期或發(fā)作、危機(jī)、惡化或爆發(fā)的方法，優(yōu)選地其中將所述抗體施用給處于自身免疫疾病或炎性疾病的急性期中或處于發(fā)作、危機(jī)、惡化或爆發(fā)中的個(gè)體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病選自：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、青少年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、克羅恩氏病或直腸結(jié)腸炎、紅斑狼瘡、肝炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)或哮喘、強(qiáng)直性脊柱炎和有關(guān)的疾病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病的特征在于TLR3配體(例如細(xì)胞外的dsRNA)的存在。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述疾病的特征在于可檢測(cè)水平的蛋白水解酶、炎性介質(zhì)、進(jìn)行中的炎癥的標(biāo)志物或促炎性細(xì)胞因子(例如TNF-α和/或白介素-1(IL-1))的存在。優(yōu)選地，所述抗體抑制通過TLR3多肽進(jìn)行的信號(hào)傳遞，任選地進(jìn)一步在酸性條件下，且具有高結(jié)合親和力，任選地在人樹突細(xì)胞中。治療通常包括：遞送有效量的包含抗-TLR3抗體的組合物，其目的是阻止任何征狀或疾病狀態(tài)發(fā)展或惡化，或其目的是預(yù)防(例如阻止或推遲進(jìn)展),緩解、改善或根除(治愈)已經(jīng)發(fā)展的這樣的征狀或疾病狀態(tài)。通過特定類型的疾病的標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，可以定義疾病診斷、演化和分級(jí)(或分期)，以便確定個(gè)體是否具有確定的疾病，是否處于急性期是否，是否在發(fā)展中，是否是慢性的，是否具有身體征狀，或是否具有某種水平的嚴(yán)重程度。同樣地，通過任意合適的醫(yī)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，可以鑒別發(fā)作、危機(jī)、惡化或爆發(fā)。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明將包括以下步驟：進(jìn)行評(píng)價(jià)或試驗(yàn)步驟，以評(píng)估疾病的存在、階段、演化或分級(jí)。因而，在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種治療患者的自身免疫疾病或炎性疾病的方法，所述方法包括：(a)進(jìn)行患者中的疾病的評(píng)價(jià)；和(b)如果所述患者具有適合用本發(fā)明的抗-TLR3抗體治療的疾病，那么給所述患者施用有效劑量的抗-TLR3抗體。任選地，這樣的評(píng)價(jià)步驟可以包括：從疑似具有自身免疫疾病或炎性疾病的患者得到生物樣品。通過本領(lǐng)域已知的任意合適的技術(shù)，例如通過執(zhí)行基于實(shí)驗(yàn)室的試驗(yàn)，可以實(shí)現(xiàn)評(píng)價(jià)疾病的方法(例如診斷、分期等)。合適的技術(shù)的例子包括：進(jìn)行基于PCR或RT-PCR的測(cè)定(例如，以檢測(cè)疾病有關(guān)的核酸或基因，經(jīng)常被稱作“標(biāo)志物”或“生物標(biāo)志物”)、活組織檢查、內(nèi)窺鏡檢查術(shù)、糞便研究、任何非侵襲性實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)(例如貧血和感染，用于篩查肝和膽管問題的肝功能試驗(yàn)，針對(duì)細(xì)菌、病毒和寄生蟲感染的試驗(yàn))、超聲、CT、MRE、MRI和其它成像技術(shù)、染色體分析、免疫測(cè)定/免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)技術(shù)(例如自身抗體的存在)、組織學(xué)和/或組織病理學(xué)測(cè)定、血清蛋白電泳、流式細(xì)胞計(jì)量術(shù)(例如免疫細(xì)胞、T細(xì)胞等的檢測(cè))、動(dòng)脈血?dú)怏w(ABG)分析(在哮喘或COPD中)和體格檢查技術(shù)(例如，針對(duì)身體征狀、具有滑膜炎的關(guān)節(jié)的數(shù)目等)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括檢測(cè)自身抗體的存在，例如檢測(cè)類風(fēng)濕因子(RhF)、抗-環(huán)瓜氨酸肽抗體、抗-ssRNA抗體、抗-dsRNA抗體、抗-Smith抗體、抗-磷脂抗體、抗-細(xì)胞核抗體和/或抗-肌動(dòng)蛋白抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括：評(píng)估蛋白水解酶、炎性介質(zhì)、進(jìn)行中的炎癥的標(biāo)志物或促炎性細(xì)胞因子的水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括：確定c-反應(yīng)蛋白(CRP)水平和/或紅細(xì)胞沉降率。個(gè)體具有異常結(jié)果(其指示疾病、惡化、進(jìn)行中的炎癥等，例如異常的ABG、自身抗體、CRP、任何蛋白水解酶、炎性介質(zhì)或進(jìn)行中的炎癥的標(biāo)志物的水平)的確定，指示所述個(gè)體適合于使用抗-TLR3抗體的治療。將抗-TLR3抗體遞送給受試者(通過從其中的核酸直接施用或表達(dá)，諸如從包含編碼抗-TLR3抗體的核酸序列的痘病毒基因轉(zhuǎn)移載體)和實(shí)踐本發(fā)明的其它方法，可以用于減輕、治療、預(yù)防或以其它方式改善疾病或疾病進(jìn)展的任意合適的方面。本發(fā)明的方法可以特別有用地減輕和/或改善炎癥和/或組織損傷以及與其有關(guān)的任意參數(shù)或征狀(例如炎癥的標(biāo)志物的存在、在循環(huán)中或在特定組織中的促炎癥細(xì)胞的數(shù)目)?？?TLR3抗體可以有利地用于治療確定的疾病?！按_定的疾病”表示已經(jīng)宣告延長(zhǎng)的時(shí)間段(例如超過1年)的自身免疫疾病或炎性疾病。取決于具體疾病，確定的疾病也是指這樣的疾?。浩錄]有得到控制，例如其仍然在進(jìn)展中，或在有或沒有治療存在下，患者沒有經(jīng)歷所述疾病的減輕。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種用于治療患者的自身免疫疾病或炎性疾病的方法，所述方法包括：(a)確定所述患者是否具有確定的疾?。缓?b)如果所述患者具有確定的疾病，那么給所述患者施用有效劑量的抗-TLR3抗體?？?TLR3抗體還可以有利地用于治療慢性疾病?！奥约膊　北硎境掷m(xù)延長(zhǎng)的時(shí)間段的疾病。例如，慢性疾病可以是持續(xù)3個(gè)月或更久的疾病，如美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)中心(U.S.NationalCenterforHealthStatistics)所定義的。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種用于治療患者的自身免疫疾病或炎性疾病的方法，所述方法包括：(a)確定所述患者是否具有慢性疾?。缓?b)如果所述患者具有慢性疾病，那么給所述患者施用有效劑量的抗-TLR3抗體?？?TLR3抗體還可以有利地用于治療具有發(fā)作、危機(jī)、惡化或爆發(fā)的個(gè)體。術(shù)語“發(fā)作”、“危機(jī)”、“惡化”和“爆發(fā)”是指新征狀的更快速發(fā)展、或與炎性疾病或自身免疫疾病有關(guān)的老征狀的惡化。這樣的階段會(huì)持續(xù)數(shù)小時(shí)或數(shù)天，不同于歷時(shí)數(shù)個(gè)月和數(shù)年發(fā)生的疾病的緩慢進(jìn)展。在這樣的發(fā)作過程中，患者經(jīng)歷發(fā)熱、疼痛、炎性綜合征(類流感綜合征)。在RA中，患者的關(guān)節(jié)是腫脹的和疼痛的?；颊呖梢越?jīng)歷類流感綜合征。危機(jī)可以持續(xù)數(shù)小時(shí)至許多周。在多發(fā)性硬化中，爆發(fā)可以表征新征狀或現(xiàn)有征狀的惡化，但是必須持續(xù)至少24小時(shí)才能視作真正的惡化，爆發(fā)表示在腦或脊髓中形成的破壞神經(jīng)傳遞的新病變。大多數(shù)爆發(fā)持續(xù)數(shù)天或數(shù)周，但是可以持續(xù)幾個(gè)月。效果可以是例如：運(yùn)動(dòng)困難或痙攣，平衡和協(xié)調(diào)問題；視力問題，不協(xié)調(diào)的眼球運(yùn)動(dòng)，視力模糊或復(fù)視，在爆發(fā)過程中的部分失明；膀胱和腸征狀；性問題，精神功能的變化；記憶喪失，注意力不集中和判斷較差或抑郁癥。在COPD中，可以將惡化定義為“在疾病的天然進(jìn)程中的事件，其特征在于患者的基線呼吸困難、咳嗽和/或痰的變化，其超過正常的天與天之間的變化，是急性發(fā)作的，并且可能需要改變具有基礎(chǔ)COPD的患者的用藥”。經(jīng)歷惡化的患者具有下述征狀之一：增加的咳嗽和痰產(chǎn)生，痰的顏色和/或厚度的變化，哮鳴，胸部緊迫感，發(fā)熱。在克羅恩氏病或直腸結(jié)腸炎中，爆發(fā)主要是通常克羅恩氏病征狀的惡化：腹瀉、痙攣性的腹部疼痛、發(fā)熱、食欲缺乏。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種用于治療患者中的自身免疫疾病或炎性疾病的方法，所述方法包括：(a)確定所述患者是否正在經(jīng)歷發(fā)作、危機(jī)、惡化或爆發(fā)；(b)如果所述患者經(jīng)歷發(fā)作、危機(jī)、惡化或爆發(fā)，那么給所述患者施用有效劑量的抗-TLR3抗體?？?TLR3抗體還可以有利地用于治療具有復(fù)發(fā)的個(gè)體。術(shù)語“復(fù)發(fā)”表示患者征狀的改善或穩(wěn)定。當(dāng)患者的健康或狀況改善時(shí)，疾病是復(fù)發(fā)的。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了一種用于治療患者中的自身免疫疾病或炎性疾病的方法，所述方法包括：(a)確定所述患者是否正在經(jīng)歷復(fù)發(fā)、危機(jī)、惡化或爆發(fā)；(b)如果所述患者經(jīng)歷復(fù)發(fā)，給所述患者施用有效劑量的抗-TLR3抗體。任選地，可以進(jìn)行評(píng)估步驟，包括在用抗-TLR3抗體治療之前評(píng)估得自患者的細(xì)胞(例如促炎癥細(xì)胞、樹突細(xì)胞、T細(xì)胞等)上的TLR3多肽的表達(dá)。通常，在該步驟中，從患者獲取細(xì)胞樣品，通常作為活組織檢查，并進(jìn)行試驗(yàn)(例如，使用免疫測(cè)定)以確定表達(dá)，和任選地確定TLR3多肽在細(xì)胞上的相對(duì)優(yōu)勢(shì)。在一個(gè)方面，患者具有優(yōu)勢(shì)地表達(dá)TLR3多肽的細(xì)胞的確定指示，抗-TLR3抗體(和任選地任意其它治療劑)適合用于所述患者。在另一個(gè)步驟中，然后可以用抗-TLR3抗體治療患者。任選地，在一個(gè)實(shí)施方案中，可以進(jìn)行TLR3配體檢測(cè)步驟，包括在用抗-TLR3抗體治療之前，檢測(cè)TLR3配體在患者中的存在。通常，在該步驟中，從患者獲取生物樣品，例如滑液樣品，例如在具有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者中。針對(duì)TLR3配體的存在，諸如細(xì)胞外dsRNA的存在，評(píng)估所述生物樣品。如果所述生物樣品就TLR3配體的存在而言是陽性的，那么可以有利地用抗-TLR3抗體治療患者，優(yōu)選地用在有dsRNTLR3配體存在下抑制表達(dá)TLR3的細(xì)胞的TLR3信號(hào)傳遞的抗體。施用給具有疾病的個(gè)體的抗-TLR3抗體可以是特異性地結(jié)合TLR3多肽的任意單克隆抗體，優(yōu)選如本文中所述的抑制通過TLR3多肽進(jìn)行的信號(hào)傳遞的任何抗體。例如，抗-TLR3抗體是特異性地結(jié)合TLR3的抗體，其中所述抗體就結(jié)合人TLR3多肽而言在酸性條件下具有小于10-9M的KD，且任選地進(jìn)一步還在中性條件下具有小于10-9M的KD。在一個(gè)實(shí)施方案中，將抗-TLR3抗體用作單一療法(單一治療劑)。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，本發(fā)明的治療方法可以進(jìn)一步包括用抗-TLR3抗體和第二種治療劑治療個(gè)體，所述第二種治療劑包括通常用于特定治療目的(為其施用所述抗體)的藥劑。抗-TLR3抗體和第二種治療劑可以分開地、一起或依次、或混合地施用。通常以第二種治療劑在單一療法中常用于待治療的特定疾病或病癥的量，施用所述第二種治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，以小于普遍接受的有效劑量的劑量，施用所述第二種治療劑；例如，在不同的實(shí)施方案中，所述組合物包含這樣的劑量：其小于施用的普遍接受的有效劑量的約10％至75％。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二種治療劑是皮質(zhì)類固醇，例如選自以下的皮質(zhì)類固醇：地塞米松、氫化可的松(皮質(zhì)醇)、醋酸可的松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼龍、地夫可特、倍他米松、曲安西龍、倍氯米松、帕拉米松、氟替卡松、醋酸氟氫可的松、醋酸脫氧皮質(zhì)酮(DOCA)、氟潑尼龍、丙酸氟替卡松、布地奈德、二丙酸倍氯米松、氟尼縮松和曲安奈德。優(yōu)選地，所述第二種治療劑是減少蛋白水解酶、炎性介質(zhì)或促炎性細(xì)胞因子諸如TNF-α和/或白介素-1(IL-1)的藥劑。優(yōu)選地，所述第二種治療劑是DMARD或DMD，任選地進(jìn)一步，其中所述第二種治療劑是甲氨蝶呤(RheumatrexTM、甲氨蝶呤(Trexall)TM)、羥氯喹(PlaquenilTM)、柳氮磺吡啶()、來氟米特(AravaTM)、腫瘤壞死因子抑制劑(例如依那西普(阿達(dá)木單抗(HumiraTM)和英夫利昔單抗(類克TM))、T-細(xì)胞共刺激的阻滯劑(例如阿巴他塞(OrenciaTM))、B細(xì)胞耗竭劑(例如利妥昔單抗(RituxanTM))、白介素-4(IL-4)拮抗劑療法(例如，抗-IL4抗體或抗-IL4受體抗體)、白介素-5(IL-5)拮抗劑療法(例如，抗-IL5抗體或抗-IL5受體抗體)、白介素-6(IL-6)拮抗劑療法(例如，抗-IL6抗體或抗-IL6受體抗體)、白介素-1(IL-1)受體拮抗劑療法(阿那白滯素(KineretTM))、抗-BlyS抗體(BenlystaTM)、肌肉內(nèi)金或另一種免疫調(diào)節(jié)性劑或細(xì)胞毒性劑(例如硫唑嘌呤(依木蘭TM)、環(huán)磷酰胺或環(huán)孢菌素A(NeoralTM、Sandimmune))。在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)治療呼吸系統(tǒng)疾病時(shí)，所述第二種治療劑是PDE-4抑制劑。在某些實(shí)施方案中，在施用第二種治療劑之前，施用抗-TLR3抗體。例如，可以在第二種治療劑施用之前大約0-30天施用抗-TLR3抗體。在某些實(shí)施方案中，在施用第二種治療劑之前約30分鐘至約2周、約30分鐘至約1周、約1小時(shí)至約2小時(shí)、約2小時(shí)至約4小時(shí)、約4小時(shí)至約6小時(shí)、約6小時(shí)至約8小時(shí)、約8小時(shí)-1天或約1-5天，施用抗-TLR3抗體。在某些實(shí)施方案中，與治療劑的施用并行地施用抗-TLR3抗體。在某些實(shí)施方案中，在施用第二種治療劑之后，施用抗-TLR3抗體。例如，可以在施用第二種治療劑之后大約0-30天施用抗-TLR3抗體。在某些實(shí)施方案中，在施用第二種治療劑之后約30分鐘至約2周、約30分鐘至約1周、約1小時(shí)至約2小時(shí)、約2小時(shí)至約4小時(shí)、約4小時(shí)至約6小時(shí)、約6小時(shí)至約8小時(shí)、約8小時(shí)至1天或約1-5天，施用抗-TLR3抗體。就用于施用給患者而言，配制用于施用給患者的組合物?？梢钥诜亍⑽改c外地、通過吸入噴霧、局部地、直腸地、鼻地、含服地、經(jīng)陰道或經(jīng)由植入的蓄池施用本發(fā)明的組合物。本文中使用的施用途徑包括皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、病灶內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。可以將本發(fā)明的抗體包含在試劑盒中。所述試劑盒可以任選地進(jìn)一步含有任意數(shù)目的抗體和/或其它化合物，例如，1種、2種、3種、4種或任意其它數(shù)目的治療性抗體和/或化合物(例如第二種治療劑)。應(yīng)當(dāng)理解，試劑盒的內(nèi)容物的該描述不是以任何方式進(jìn)行限制。例如，所述試劑盒可以含有其它類型的治療性化合物。優(yōu)選地，所述試劑盒也包括關(guān)于使用抗體的說明書，例如，其詳述了本文中描述的方法。將在下述實(shí)驗(yàn)部分中公開本發(fā)明的其它方面和優(yōu)點(diǎn)，其應(yīng)當(dāng)視作示例性的，且不是限制本申請(qǐng)的范圍。實(shí)施例材料和方法材料293T人胚胎腎細(xì)胞(#CRL-1573)購自ATCC。抗體(抗原,供應(yīng)商,索引)：AP偶聯(lián)的F(ab')2片段山羊抗-小鼠IgG(H+L),JacksonImmunoresearch,索引115-056-003，PE偶聯(lián)的山羊抗-小鼠IgGFc,BeckmanCoulter,IM0551Instrumentation:FACSCanto流式細(xì)胞計(jì)(BDBiosciences)。TLR3配體(名稱，供應(yīng)商，索引)：聚(IC)HMW,InvivoGen,索引tlrl-pic。PolyAU，也被稱作IPH3102，是由聚腺苷酸和聚尿苷酸制成的至少部分地雙鏈的分子，如在WO2009/130616(InnatePharma)(其公開內(nèi)容通過引用并入本文)中所述制備。聚AU是具有高于2000kD的Mn(也被稱作“數(shù)量平均分子量”或平均分子量”)、1.4-1.6的PI、和62.3-63.2℃的熱穩(wěn)定性、53-60％的增色性的高分子量聚AU。在PCT申請(qǐng)?zhí)朩O2011/004028(其公開內(nèi)容通過引用并入本文)中描述了抗體31C3。表面等離子體共振(SPR)一般BiacoreT100規(guī)程。在BiacoreT100設(shè)備(BiacoreGEHealthcare)上在25℃進(jìn)行SPR測(cè)量。在所有Biacore實(shí)驗(yàn)中，HBS-EP+或HBS-P緩沖液(BiacoreGEHealthcare)充當(dāng)運(yùn)行緩沖液，并用Biaevaluation4.1和BiacoreT100Evaluation分析傳感圖。就二價(jià)親和力測(cè)量而言，除非另外指出，否則通過胺偶聯(lián)將TLR3-His蛋白固定化在傳感器芯片CM5(羧甲基化的葡聚糖層)上。將抗-TLR3抗體在運(yùn)行緩沖液HBS-EP+(對(duì)于在中性pH的親和力)或10mM乙酸鹽pH5.6、150mMNaCl(對(duì)于在酸性pH的親和力)中稀釋至濃度系列(0.01-100nM)，以40μl/min的流速注射到固定化的抗原上保持2分鐘，并允許解離3分鐘，然后通過0.5MNaCl、10mMNaOH緩沖液的5-30s注射進(jìn)行再生。使用適當(dāng)?shù)哪Ｐ停ㄟ^總體擬合來分析得到的傳感圖。螢光素酶報(bào)道基因測(cè)定.建立了報(bào)道基因測(cè)定，其使用ISRE(IFN-刺激的應(yīng)答元件)作為啟動(dòng)子和使用蛋白螢光素酶作為報(bào)道基因。用pISRE-luc質(zhì)粒(#219089-Stratagene)穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞系(ATCC,#CRL-1573)，通過克隆進(jìn)一步選擇為誘導(dǎo)對(duì)IFN-α刺激的最佳應(yīng)答，并被稱作對(duì)照293T-ISRE。用pUNO-人TLR3質(zhì)粒(#puno-htlr3-InVivogen)進(jìn)一步穩(wěn)定轉(zhuǎn)染該細(xì)胞系，并被稱作293T-TLR3-ISRE。如下所述進(jìn)行效力測(cè)定：在第0天，將細(xì)胞以4x105個(gè)細(xì)胞/mL接種在96-孔培養(yǎng)板內(nèi)的完全培養(yǎng)基中(100μl/孔)。首先將細(xì)胞在37℃溫育20小時(shí)，然后將50μL培養(yǎng)基拋棄，并且用最終25μl/孔的固定量的聚AU連同遞增濃度的抗-TLR3抗體一起來活化細(xì)胞。將用新鮮培養(yǎng)基溫育的細(xì)胞用作背景螢光素酶活性(50μl/孔)。在37℃將細(xì)胞溫育6小時(shí)。將100μL新融化的SteadyGlo(Promega)加入每個(gè)孔中，將平板在室溫在暗處溫育10分鐘，并且在γ-計(jì)數(shù)器(TopCount)設(shè)備將每個(gè)孔中發(fā)出的光定量為每秒計(jì)數(shù)(CountPerSecond，CPS)。突變體TLR3構(gòu)建體K145E、D116R、K182E、N196A和E171A的制備根據(jù)生產(chǎn)商的說明書，使用Stratagene的定位誘變?cè)噭┖?Site-DirectedMutagenesisKit)，進(jìn)行TLR3突變體K145E、D116R、K182E、N196A和E171A的制備。使用的寡核苷酸列出在表4A中。對(duì)插入在pcDNA3.1載體中的野生型人TLR3進(jìn)行誘變。測(cè)序以后，使用PromegaPureYieldTMPlasmidMaxiprepSystem，將含有突變序列的載體制備為Maxiprep。然后根據(jù)生產(chǎn)商的說明書，使用Invitrogen的Lipofectamine2000，將載體用于HEK-293T細(xì)胞轉(zhuǎn)染。N-端突變體TLR3構(gòu)建體1-19的制備通過PCR(參見下面的表4B)，制備TLR3突變體(V5-TLR3-CD32構(gòu)建體)。將所有Mx-R引物與下述5’引物ACCCAAGCTGGCTAGCATGAGACAGACTTTGCCTTG(SEQIDNO:121)一起使用。將所有Mx-F引物與下述3’引物AGCACAGTGGCGGCCGCTTAGTTATTACTGTTGACATGG(SEQIDNO:122)一起使用。將擴(kuò)增的序列在瓊脂糖凝膠上泳動(dòng)，然后使用QiagenGelExtraction試劑盒進(jìn)行純化。然后根據(jù)生產(chǎn)商的說明書，用InFusion系統(tǒng)(Clontech)，將為每種突變體制備的2種PCR產(chǎn)物連接進(jìn)用限制性酶NheI和NotI消化的pcDNA3.1載體中。測(cè)序以后，使用PromegaPureYieldTMPlasmidMaxiprepSystem，將含有突變序列的載體制備為Maxiprep。然后根據(jù)生產(chǎn)商的說明書，使用Invitrogen的Lipofectamine2000，將載體用于HEK-293T細(xì)胞轉(zhuǎn)染。TLR3細(xì)胞表面構(gòu)建體的制備如DeBouteiller等人(2005)J.Biol.Chem.280(46):38133-38145所述，將成熟的野生型或突變體TLR3序列與CD32跨膜和細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合。進(jìn)行第一輪PCR，以將V5標(biāo)簽引入TLR3-CD32融合蛋白的N-末端位置，并進(jìn)行第二輪(使用第一輪PCR作為模板)以將TLR3前導(dǎo)肽引入構(gòu)建體中。用于這些步驟的引物總結(jié)在下表(表5)中。將PCR產(chǎn)物TA-克隆進(jìn)pGEMTeasy載體中用于測(cè)序，最后使用NheI和NotI限制位點(diǎn)克隆進(jìn)進(jìn)pcDNA3.1載體中。在它們的表面處表達(dá)TLR3+的細(xì)胞的滴定使用lipofectamine2000，用野生型或突變體TLR3ECD-CD32構(gòu)建體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞系，并用一定劑量范圍的11E1或31C3在4℃染色30min。通過加入PE偶聯(lián)的山羊抗-小鼠IgGFc抗體在4℃保持另外20min，顯示結(jié)合的mAb。在2個(gè)洗滌循環(huán)以后，在FACSCantoII細(xì)胞計(jì)數(shù)器上分析細(xì)胞MFI。為了研究pH對(duì)mAb親和力的影響，在染色緩沖液(0.2％BSA,2mMEDTA,0.02％SodiumAzoture)pH7.4中或在檸檬酸酸化的染色緩沖液pH5.6中進(jìn)行染色。實(shí)施例1-TLR3-特異性的單克隆小鼠和大鼠抗-人抗體的制備進(jìn)行一系列免疫接種，以制備與以前抗體相比具有提高的效力的阻斷人TLR3的不同抗體。第一次篩選和第二次篩選如下。免疫接種#1。初次篩選.為了得到抗-人TLR3抗體，用重組人His-標(biāo)記的TLR3細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域重組蛋白(R&Dsystems,#1487-TR-050)免疫Balb/c小鼠(3只動(dòng)物)。將小鼠免疫，在有受輻照的脾細(xì)胞存在下融合和培養(yǎng)脾細(xì)胞。小鼠腹膜內(nèi)地接受一次使用50μgTLR3蛋白和弗氏完全佐劑的乳劑的激發(fā)免疫，并腹膜內(nèi)地接受使用50μgTLR3蛋白和不完全弗氏佐劑的乳劑的第2次免疫接種，并靜脈內(nèi)地接受使用10μgTLR3蛋白的強(qiáng)化。將雜交瘤鋪板在培養(yǎng)板中，并使用為了檢測(cè)對(duì)TLR3的結(jié)合而開發(fā)的ELISA在第一次篩選中評(píng)價(jià)上清液(SN)的TLR3結(jié)合。簡(jiǎn)而言之，將His-標(biāo)記的重組TLR3蛋白(R&Dsystems,#1487-TR)包被在ELISA平板(Nunc)上。從雜交瘤培養(yǎng)板收獲上清液，并在在有抗-TLR3抗體(其抑制TLR3并結(jié)合在C-端部分內(nèi))存在下在ELISA平板上溫育，并用AP偶聯(lián)的F(ab')2片段山羊抗-小鼠IgG(H+L)顯示與Ig結(jié)合的TLR3的存在。選擇3840個(gè)雜交瘤中的358個(gè)用于第二次篩選。第二次篩選：目標(biāo)雜交瘤的選擇。通過使用瞬時(shí)表達(dá)293T細(xì)胞系的D116R-突變的TLR3的FACS染色，在另一個(gè)篩選中保留和試驗(yàn)358上清液，以鑒別沒有喪失在氨基酸位置116處與突變體TLR3的結(jié)合的抗體。358個(gè)雜交瘤中的151個(gè)沒有喪失與D116R的結(jié)合。還在293T-huTLR3細(xì)胞上在ISRE-螢光素酶基因報(bào)道基因測(cè)定中試驗(yàn)了雜交瘤的拮抗劑活性。選擇得自上清液的具有優(yōu)于60％的抑制作用的孔，用于進(jìn)一步克隆。28個(gè)雜交瘤具有拮抗劑活性，且25個(gè)克隆具有拮抗劑活性和D116R結(jié)合。具有潛在興趣的雜交瘤的克隆.通過在96-孔平板中的有限稀釋技術(shù)，克隆得自初次篩選的潛在感興趣的雜交瘤，并在相同系列的關(guān)于雜交瘤的第二次篩選中試驗(yàn)克隆。得自13個(gè)雜交瘤的克隆具有拮抗劑活性和D116R結(jié)合。為了將這13個(gè)雜交瘤與我們的參比抗-TLR3mAb(特別是31C3)進(jìn)行對(duì)比，將13個(gè)雜交瘤擴(kuò)增，并純化它們的上清液。在基因報(bào)道測(cè)定中試驗(yàn)純化的mAb。基于與參比抗-TLR3mAb相比TLR3信號(hào)傳遞的阻斷效率，選擇雜交瘤用于進(jìn)一步表征。進(jìn)一步評(píng)估了2個(gè)雜交瘤對(duì)突變體TLR3K145E和K182E的表位結(jié)合(也參見實(shí)施例6)。2種抗體沒有表現(xiàn)出與TLR3的K145E變體的結(jié)合的任何損失，但是它們之一表現(xiàn)出與突變體K182E的結(jié)合的損失。即使在有突變K145E或K182E存在下，克隆11E1結(jié)合TLR3。免疫接種#2。用重組His-標(biāo)記的人TLR3(無細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域重組蛋白的載體)(R&Dsystems,#1487-TR)免疫LOU/c大鼠。大鼠在第0天腹膜內(nèi)地接受使用50μg人TLR3(在PBS中稀釋)和弗氏完全佐劑的乳劑的一次激發(fā)免疫，在第14天腹膜內(nèi)地接受使用50μg人TLR3(在PBS中稀釋)和不完全弗氏佐劑的乳劑的第二次免疫接種，和靜脈內(nèi)地接受使用25μg人TLR3(在PBS中稀釋)的一次強(qiáng)化。將免疫脾細(xì)胞與X63.Ag8.653永生化的B細(xì)胞融合，并在有受輻照的脾細(xì)胞存在下進(jìn)行培養(yǎng)。如在上面免疫接種#1中那樣，進(jìn)行第二次篩選。通過在96-孔平板中的有限稀釋技術(shù)，克隆潛在感興趣的雜交瘤，并在相同系列的關(guān)于雜交瘤的第二次篩選中試驗(yàn)克隆。為了將雜交瘤與我們的參比抗-TLR3mAb進(jìn)行對(duì)比，將所述雜交瘤擴(kuò)增，并純化它們的上清液。在基因報(bào)道測(cè)定中試驗(yàn)純化的mAb?；谂c參比抗-TLR3mAb31C3相比TLR3信號(hào)傳遞的阻斷效率，選擇雜交瘤用于進(jìn)一步表征。進(jìn)一步評(píng)估雜交瘤對(duì)具有K145E和K182E的突變體TLR3多肽的表位結(jié)合。即使在有突變K145E或K182E存在下，克隆7G11、31F6、32C4和37B7結(jié)合TLR3。實(shí)施例2-TLR3-特異性的單克隆大鼠抗-小鼠抗體的制備初次篩選.為了得到抗-TLR3抗體，用重組His-標(biāo)記的小鼠TLR3(無細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域重組蛋白的載體)(R&Dsystems,#3005-TR)和重組His-標(biāo)記的人TLR3(無細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域重組蛋白的載體)(R&Dsystems,#1487-TR)免疫LOU/c大鼠。大鼠在第0天腹膜內(nèi)地接受使用50μg小鼠TLR3+50μg人TLR3(在PBS中稀釋)和弗氏完全佐劑的乳劑的一次激發(fā)免疫，在第14天腹膜內(nèi)地接受使用50μg小鼠TLR3+50μg人TLR3(在PBS中稀釋)和不完全弗氏佐劑的乳劑的第2次免疫接種，和靜脈內(nèi)地接受使用25μg小鼠TLR3+25μg人TLR3(在PBS中稀釋)的一次強(qiáng)化。將免疫脾細(xì)胞與X63.Ag8.653永生化的B細(xì)胞融合，并在有受輻照的脾細(xì)胞存在下進(jìn)行培養(yǎng)。得到40個(gè)培養(yǎng)板，并使用為檢測(cè)對(duì)TLR3的結(jié)合而開發(fā)的ELISA在第一次篩選中評(píng)價(jià)小鼠TLR3結(jié)合。簡(jiǎn)而言之，將His-標(biāo)記的重組小鼠TLR3蛋白(R&Dsystems,#1487-TR-050)包被在Ni-NTA96-孔平板(Qiagen)上。從雜交瘤培養(yǎng)板得到上清液(SN)，并在TLR3-平板中溫育，并用山羊抗-小鼠F(ab)IgG-HRP顯示與Ig結(jié)合的TLR3的存在。第二次篩選：目標(biāo)雜交瘤的選擇.在對(duì)293T-mTLR3細(xì)胞的抑制試驗(yàn)中，在另一個(gè)篩選中保留和試驗(yàn)181上清液。選擇得自具有優(yōu)于95％的抑制作用的上清液的孔，用于通過有限稀釋進(jìn)一步克隆。具有潛在興趣的雜交瘤的克隆.通過在96-孔平板中的有限稀釋技術(shù)，克隆27個(gè)選自初次篩選的潛在感興趣的雜交瘤，并使用如上所述的ELISA在針對(duì)小鼠TLR3結(jié)合的篩選中評(píng)價(jià)370個(gè)亞克隆。在如上所述的對(duì)293T-TLR3細(xì)胞的抑制試驗(yàn)中，在另一個(gè)篩選中試驗(yàn)178個(gè)陽性克隆。在它們中，包括得自平板28的孔G7(28G7)的上清液。實(shí)施例3-與細(xì)胞表面TLR3的結(jié)合為了研究TLR3循環(huán)至細(xì)胞表面和細(xì)胞表面TLR3促進(jìn)抑制性的抗-TLR3抗體的內(nèi)化和效力的可能性，與參比抗體31C3相比，試驗(yàn)了對(duì)細(xì)胞表面TLR3的結(jié)合。另外，在中性pH對(duì)細(xì)胞表面TLR3的結(jié)合(例如親和力)可能不同于在酸性pH對(duì)胞內(nèi)體表達(dá)的TLR3的結(jié)合。在中性pH條件下試驗(yàn)了抗體對(duì)僅在細(xì)胞表面處表達(dá)人TLR3的細(xì)胞(表達(dá)TLR3/CD32的293T細(xì)胞)的結(jié)合，因?yàn)閜H可以潛在地影響TLR3構(gòu)象。抗體11E1、7G11、32C4和31F6在中性pH的結(jié)果分別顯示在圖1A、1B、1C和1D中。EC50值顯示在表6中?？贵w11E1、7G11、31F6和32C4各自在中性pH具有對(duì)表面表達(dá)的人TLR3的強(qiáng)結(jié)合。在中性pH，所述抗體對(duì)TLR3的親和力強(qiáng)于參比抗體31C3。實(shí)施例4–在胞內(nèi)體和中性PH的二價(jià)親和力使用關(guān)于SPR、項(xiàng)目c)描述的方法，確定抗體11E1的結(jié)合性能。計(jì)算在中性(pH7.2)和酸性(pH5.6)條件下與TLR3的結(jié)合以及KD值。在中性pH，11E1表現(xiàn)出對(duì)重組人TLR3的強(qiáng)二價(jià)親和力(KD)(在pH7.2的平均KD(M)為8.75*10-11)?？贵w11E1在pH5.6的結(jié)合親和力稍微低于在pH7.2的親和力(在pH5.6的平均KD(M)為1*10-9)。類似地，在中性(pH7.2)和酸性(pH5.6)條件下確定抗-小鼠TLR3抗體對(duì)小鼠TLR3的結(jié)合，并計(jì)算KD值。在中性和酸性pH，mAb32D4、28G7和13D1都表現(xiàn)出對(duì)重組小鼠TLR3的優(yōu)于500皮摩爾的強(qiáng)烈且類似的二價(jià)親和力(KD)。mAb28G7的親和力(2或3個(gè)實(shí)驗(yàn)的平均值)在中性pH為7.05*10-13(在pH7.2的平均KD(M))，在酸性pH為1.26*10-13(在pH5.6的平均KD(M))。實(shí)施例5-人報(bào)道基因測(cè)定在基于螢光素酶的報(bào)道基因活性(293T-TLR3-ISRE)中，試驗(yàn)了抗體對(duì)TLR3信號(hào)傳遞的抑制。已經(jīng)報(bào)道，使用TLR3-激動(dòng)劑諸如聚(I:C)的TLR3受體嚙合會(huì)活化IFN型途徑，包括啟動(dòng)子ISRE(Wietek等人.J.Biol.Chem.,278(51),p50923,2003)。簡(jiǎn)而言之，在報(bào)道基因測(cè)定中在有抗-TLR3抗體存在下使用dsRNATLR3激動(dòng)劑誘導(dǎo)TLR3信號(hào)傳遞，并評(píng)估TLR3信號(hào)傳遞。在該測(cè)定中，抗體11E1、7G11、31F6、32C4和37B7都比抗體31C3更有效?？贵w11E1、7G11、32C4、31F6和37B7的結(jié)果分別顯示在圖2A、2B、2C、2D和2E中，顯示了使用293T-人TLR3螢光素酶測(cè)定用人抗-TLR3抗體對(duì)TLR3信號(hào)傳遞的劑量依賴性抑制。將每種抗體與參比抗體31C3進(jìn)行對(duì)比。類似地，在單獨(dú)實(shí)驗(yàn)中類似地評(píng)估了大鼠抗-小鼠TLR3抗體在基于鼠TLR3螢光素酶的報(bào)道基因活性(293T-mTLR3-ISRE)中抑制TLR3信號(hào)傳遞的能力?？贵w28G7表現(xiàn)出TLR3信號(hào)傳遞的劑量依賴性抑制，具有2.6μg/ml的IC50。實(shí)施例6-表位作圖在中性pH的表位作圖.通過FACS測(cè)定對(duì)HEK293T-WTTLR3ECD/CD32細(xì)胞進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定?？贵w11E1、7G11、31F6、32C4和37B7與以前得到的抗體31C3競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合，因?yàn)橐环N抗體的結(jié)合會(huì)損害其它抗體對(duì)TLR3的結(jié)合?？贵w31C3至少部分地結(jié)合TLR3的與成熟TLR3多肽的殘基102-204(特別是殘基174-191和殘基182)對(duì)應(yīng)的區(qū)域，并彼此競(jìng)爭(zhēng)對(duì)人TLR3的結(jié)合?？贵w11E1、7G11、31F6、32C4和37B7各自與31C3競(jìng)爭(zhēng)，但是競(jìng)爭(zhēng)的程度不同，從而提示，11E1、7G11、31F6、32C4和37B7的表位是在相同區(qū)域中，但是彼此之間具有差異?？贵w11E1與抗體7G11、31F6、32C4和37B7中的每一種競(jìng)爭(zhēng)?；诳贵w11E1、7G11、31F6、32C4和37B7和抗體31C3之間的競(jìng)爭(zhēng)特性，確定了至少3個(gè)不同的表位框，因?yàn)橹辽?1E1、37B7似乎彼此不同，且不同于7G11、31F6、32C4。實(shí)施例7-通過與TLR3突變體的結(jié)合進(jìn)行表位作圖抗體11E1、7G11、31F6、32C4和37B7與抗體31C3競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合。已經(jīng)確定31C3結(jié)合在人TLR3的N-端末端內(nèi)，所述末端具有所述抗體的包括殘基182、但是不包括殘基K145、D116、K182、E171或N196的主要表位。因此，試驗(yàn)了抗體11E1、7G11、31F6、32C4和37B7對(duì)TLR3突變體的結(jié)合。如本文材料和方法中所述，制備具有突變K145E、D116R、K182E、N196A和E171A(參考SEQIDNO:1)的TLR3突變體多肽，并通過FACS評(píng)估抗-TLR3抗體對(duì)表達(dá)TLR3突變體多肽的細(xì)胞的染色?？贵w11E1、7G11、31F6、32C4和37B7沒有表現(xiàn)出對(duì)未突變野生型(WT)TLR3的結(jié)合的任何損失，也沒有表現(xiàn)出對(duì)K145E、D116R、E171A、K182E或N196A中的任一種的結(jié)合的任何損失。抗體11E1、7G11、31F6、32C4和37B7的主要表位位于N-端區(qū)域中，因此不包括殘基K145、D116、K182、E171或N196。然后試驗(yàn)了抗體對(duì)TLR3的N-端部分中的另一組突變體的結(jié)合，以鑒別新表位。因此，試驗(yàn)了抗體對(duì)TLR3突變體的結(jié)合。如本文材料和方法中所述，制備了TLR3突變體多肽，其具有在位置Q44H和V45I、R64Q和R65Q、T86S和K89Q、K97I和M100L、K117Q和A120V、Q136H、N140S、V144K和K145N、K147A、K163A、Q167G、Q184L和K187R、Q184L和K187Q、D192E和A195G、Q208P和I209L、H218Q、A219T、G234N和S236H、L243W和A246S、S112A、Q113S和S115A、以及K137S和K139A(參考SEQIDNO:1)中的突變，并通過FACS評(píng)估抗-TLR3抗體對(duì)表達(dá)TLR3突變體多肽的細(xì)胞的染色。抗體11E1表現(xiàn)出對(duì)具有置換R64Q和R65Q的突變體的結(jié)合的損失，和在更低程度上對(duì)可能鄰近突變體T86S和K89Q的結(jié)合的損失?？贵w7G11、31F6、32C4和37B7表現(xiàn)出對(duì)具有置換K117Q和A120V的突變體的結(jié)合的損失，但是沒有表現(xiàn)出對(duì)任何其它突變體的結(jié)合的損失?？贵w11E1和37B7表現(xiàn)出對(duì)具有置換K137S和K139A的突變體的結(jié)合的完全損失，而抗體7G11、31F6和32C4表現(xiàn)出對(duì)具有置換K137S和K139A的突變體的結(jié)合的部分損失。此外，所有7G11、31F6、32C4和37B7抗體表現(xiàn)出對(duì)具有置換S112、Q113和S115的突變體的結(jié)合的完全損失?？贵w11E1和31C3沒有表現(xiàn)出對(duì)具有置換S112、Q113和S115的突變體的結(jié)合的損失。因此，抗體11E1的主要表位包括殘基R64和R65和可能(在更低程度上)鄰近的殘基T86和K89、以及殘基K137和K139。因此，抗體7G11、31F6、32C4和37B7的主要表位包括殘基K117和/或A120、以及S112、Q113和/或S115。另外，對(duì)于抗體37B7，所述主要表位進(jìn)一步包括殘基K137和K139，而對(duì)于抗體7G11、31F6和32C4，殘基K137和K139也可以是在表位內(nèi)。殘基R64Q和R65Q具體地是在TLR3的無聚糖側(cè)表面上的N-端dsRNA結(jié)合區(qū)內(nèi)，并且殘基K117和A120盡管部分地在TLR3分子的主鏈上，但是鄰近N-端dsRNA結(jié)合區(qū)。與這些突變殘基鄰近的表面暴露的殘基也可以促進(jìn)抗體的表位，包括例如位于N-端dsRNA結(jié)合區(qū)的區(qū)域中的TLR3表面處的殘基41、43、60、61、62、64、65、67、68、88、91、92、93、96、97、108、110、112、113、114、115、121、132、134、137和/或139(參考SEQIDNO:1)。抗體這樣可以與dsRNA競(jìng)爭(zhēng)對(duì)TLR3的結(jié)合。所述抗體可以結(jié)合在N-端dsRNA結(jié)合位點(diǎn)內(nèi)和/或附近，包括任選地進(jìn)一步跨TLR3蛋白的主鏈上的殘基。圖2F、2G和2H顯示了TLR3多肽的N-端末端的試圖，顯示了用黑色指示的突變的氨基酸殘基(Q44、V45、R64、R65、T86、K89、K97、M100、K117、A120、Q136、N140、V144、K145、K147、K163、Q167、Q184、K187、Q184、K187、D192、A195、Q208、I209、H218、A219、G234和S236、L243和A246)。還用灰色顯示了鄰近殘基86、89、117和120的殘基(殘基41、43、60、61、62、67、68、88、91、92、93、96、108、110、112、113、114、115、121、132、134、137和139)；這樣的鄰近殘基也可以被指定的抗體結(jié)合。圖2F顯示了TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面的視圖；圖2G顯示了TLR3多肽的含有聚糖的側(cè)表面和主鏈的視圖，其中TLR3多肽的N-端末端是在前景中(在圖像的左側(cè))。圖2H顯示了TLR3多肽的無聚糖側(cè)表面和主鏈的視圖，其中TLR3多肽的N-端末端是在前景中(在圖像的右側(cè))。實(shí)施例8–用于治療RA的體內(nèi)效力模型-預(yù)防場(chǎng)合簡(jiǎn)而言之，將20只小鼠在第0天用100μg膠原(在補(bǔ)充了結(jié)核分枝桿菌(2mg/ml)的CFA中乳化)免疫，并在尾巴根部真皮內(nèi)地(ID)注射。在第17天，對(duì)動(dòng)物評(píng)分(臨床征象經(jīng)常在強(qiáng)化之前出現(xiàn))，根據(jù)四肢臨床評(píng)分的總和隨機(jī)化到2個(gè)8或9只小鼠的組中，并治療。在第21天，通過單獨(dú)膠原(100μg，在50μl中)的ID施用，強(qiáng)化膠原免疫接種。構(gòu)成下述組：-組1(PBS,n＝9)：200μl2次/周IP治療-組2(28G7,n＝8)：500μg/小鼠2次/周IP治療每周3次地評(píng)價(jià)動(dòng)物四肢的評(píng)分，持續(xù)3-4周。根據(jù)表7評(píng)價(jià)評(píng)分。結(jié)果報(bào)告在圖3A中。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，與PBS相比，抗-TLR3抗體在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的治愈性治療中是統(tǒng)計(jì)上有效的(*p>0.05,**p>0.005，在Dunnett氏檢驗(yàn)中)。實(shí)施例9–用于治療RA的體內(nèi)效力模型-治愈場(chǎng)合實(shí)驗(yàn)#1:28G7,PBS,MTX簡(jiǎn)而言之，在第0天，給30只小鼠在尾部根部真皮內(nèi)注射100μg膠原(在補(bǔ)充了結(jié)核分枝桿菌(2mg/ml)的CFA中乳化)進(jìn)行免疫。21天后，通過單獨(dú)膠原(100μg，50μl/小鼠)的ID施用，強(qiáng)化膠原免疫接種。在第24天，根據(jù)四肢臨床評(píng)分的總和，將動(dòng)物隨機(jī)化到3個(gè)10只小鼠的組中，并開始治療。組1(PBS,n＝10)：200μl2次/周IP治療。組2(甲氨蝶呤-MTX,n＝10)：2.5mg/kg2次/周IP治療。組3(28G7,n＝10)：500μg/小鼠2次/周IP治療。每周3次地評(píng)價(jià)動(dòng)物四肢的評(píng)分，持續(xù)3-4周。根據(jù)表7評(píng)價(jià)評(píng)分。結(jié)果報(bào)告在圖3B中。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，與PBS和甲氨蝶呤相比，抗-TLR3抗體在確定的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的治愈性治療中是統(tǒng)計(jì)上有效的(*p>0.05，在Dunnett氏檢驗(yàn)中)。MTS具有不同于抗-TLR3抗體的作用機(jī)理，兩種藥物的組合可以是有益的。實(shí)驗(yàn)#2:28G7,PBS,抗-TNFαHumiraTM簡(jiǎn)而言之，在第0天，給35只小鼠在尾部根部真皮內(nèi)注射100μg膠原(在補(bǔ)充了結(jié)核分枝桿菌(2mg/ml)的CFA中乳化)進(jìn)行免疫。21天后，通過單獨(dú)膠原(100μg，50μl/小鼠)的ID施用，強(qiáng)化膠原免疫接種。在第24天，根據(jù)四肢臨床評(píng)分的總和，將動(dòng)物隨機(jī)化到4個(gè)組中，并開始治療。組1(PBS,n＝9)：200μl2次/周IP治療。組2(對(duì)照Ig抗體,n＝9)：500μl2次/周IP治療。組3(28G7,n＝9)：500μg/小鼠2次/周IP治療。組4(HumiraTM,n＝6)：100μl2次/周IP治療。每周3次地評(píng)價(jià)動(dòng)物四肢的評(píng)分，持續(xù)3-4周。根據(jù)表7評(píng)價(jià)評(píng)分。結(jié)果報(bào)告在圖3C中。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)，與PBS和抗-TNFα抗體HumiraTM相比，抗-TLR3抗體在確定的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)的治療中是有效的。MTS具有不同于抗-TLR3抗體的作用機(jī)理，兩種藥物的組合可以是有益的。實(shí)施例10–用于治療結(jié)腸炎的體內(nèi)效力模型將4組10只雄性小鼠(Balb/c)用于TNBS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎的模型，并將一個(gè)8只沒有結(jié)腸炎的小鼠的額外組用作對(duì)照(沒有劑量，結(jié)腸內(nèi)鹽水滴注)。如下分配治療組：組1:10只小鼠接受抗體28G7(ip,500μg/小鼠)。組2:10只小鼠接受非TLR3有關(guān)的抗體施用(ip,500μg/小鼠)。組3:10只小鼠接受大鼠抗-小鼠TNF抗體(ip,15mg/kg,HumiraTM)。組4:10只小鼠接受PBS(ip,200μg/小鼠)。注射以后1小時(shí)，通過2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)(2mg/小鼠，在40％的乙醇的TNBS溶液中)在雄性Balb/C小鼠(5-6周齡)中的結(jié)腸內(nèi)滴注，誘導(dǎo)結(jié)腸炎。在組1、2和3中，在第一次抗體注射以后72小時(shí)，重復(fù)28G7或非TLR3有關(guān)的抗體或抗-TNF抗體的另一次注射。對(duì)于所有組，每天評(píng)估疾病進(jìn)展的幾個(gè)參數(shù)：體重，血液在糞便中的存在，腹瀉的存在和嚴(yán)重程度。在結(jié)腸炎誘導(dǎo)以后7天，將所有動(dòng)物處死進(jìn)行組織收集。測(cè)量結(jié)腸組織中的肉眼可見的損傷評(píng)分、壁厚度和中性粒細(xì)胞髓過氧化物酶活性(粒細(xì)胞滲入的指標(biāo))。通過觀察便血、腹瀉、出血、粘著、粘液、紅斑、水腫、潰瘍和狹窄，評(píng)價(jià)肉眼可見的損傷評(píng)分。圖4顯示了實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。圖4A顯示了如下治療的小鼠的壁厚度測(cè)量結(jié)果：用鹽水(黑色點(diǎn))，僅用TNBS(黑色正方形)，用抗-TNFα抗體和TNBS(黑色三角形)，用28G7和TNBS(空心點(diǎn))，以及用對(duì)照Ab和TNBS(空心正方形)。圖4B顯示了如下治療的小鼠的肉眼可見的損傷評(píng)分：用鹽水(黑色點(diǎn))，僅用TNBS(黑色正方形)，用抗-TNFα抗體和TNBS(黑色三角形)，用28G7和TNBS(空心點(diǎn))，以及用對(duì)照Ab和TNBS(空心正方形)。實(shí)施例11–用于治療COPD(慢性阻塞性肺疾病)的體內(nèi)效力模型A.單一藥劑研究如下治療3個(gè)10只雄性小鼠的組：-用媒介物治療1個(gè)10只小鼠的組。-在第0、3、7、10、14、17、21和24天，用抗-小鼠TLR328G7抗體施用(腹膜內(nèi)，500μg/小鼠)治療1個(gè)10只小鼠的組。-用陽性對(duì)照羅氟司特(批準(zhǔn)為DaxasTM；PDE-4的拮抗劑)(口服，15mg/kg，每周4次)治療1個(gè)10只小鼠的組。在第0、7、14和21天用彈性蛋白和LPS(i.n.)處理所有小鼠以誘導(dǎo)COPD。在第28天，將小鼠處死進(jìn)行分析。在第28天通過分類性細(xì)胞計(jì)數(shù)來分析支氣管肺泡灌洗(BAL)流體，測(cè)量細(xì)胞向氣道中的浸潤(rùn)。在第28天，通過氣體分析法，測(cè)量靜脈血的氧合。通過多路測(cè)定，通過分析TNF-α、IL-6、IL-17A和IP-10的蛋白水平，確定BALF中的炎性介質(zhì)水平。結(jié)果顯示在圖5中。該圖表明，抗-TLR3抗體在治療COPD中是非常有效的，包括降低嗜中性粒細(xì)胞氣道滲入、靜脈血氧飽和和促炎細(xì)胞因子。使用Student氏t檢驗(yàn)，對(duì)所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析：‘*’p<0.05；‘**’p<0.005；‘***’p<0.0005。圖5A顯示了巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的BAL分類性細(xì)胞計(jì)數(shù)。抗-TLR3抗體強(qiáng)烈地減少了嗜中性粒細(xì)胞向氣道中的滲入，而沒有實(shí)質(zhì)上影響巨噬細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞或淋巴細(xì)胞。COPD主要由嗜中性粒細(xì)胞介導(dǎo)，而不是由巨噬細(xì)胞或嗜酸性粒細(xì)胞(也不是淋巴細(xì)胞，在這里用作對(duì)照)介導(dǎo)。圖5B顯示了單獨(dú)的LPS/彈性蛋白酶和與抗-TLR3抗體或羅氟司特組合的LPS/彈性蛋白酶各自的靜脈血飽和氧(以百分比計(jì))。COPD患者的動(dòng)脈血中的氧飽和百分比與健康個(gè)體相比減少，而COPD患者的靜脈血中的氧飽和百分比與健康個(gè)體相比增加。因此，靜脈血中O2百分比的下降是疾病治療中的有利應(yīng)答的重要指示(參見O’Connor等人.Respiration2011；81:18-25)。可以看出，抗-TLR3抗體會(huì)幾乎與羅氟司特一樣大幅降低靜脈血中O2百分比。因此，抗-TLR3抗體可有效地治療COPD。在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，將動(dòng)脈血?dú)怏w(ABG)分析用在急性場(chǎng)合中和用于在臨床穩(wěn)定性階段中評(píng)估患者的氣體交換狀態(tài)。因此，血?dú)夥治?包括ABG分析)可以是評(píng)估患者是否適合于抗-TLR3抗體治療、以及評(píng)估或監(jiān)測(cè)抗-TLR3抗體治療在急性期或臨床穩(wěn)定性階段中是否有效的特別有用的工具。圖5C顯示了BAL流體(BALF)中的IL17A?？?TLR3抗體大幅降低IL17A(pg/ml)，并且達(dá)到與羅氟司特一樣的程度。圖5D顯示了BALF中的IP-10。抗-TLR3抗體大幅降低IP-10(pg/ml)。B.藥物組合研究如下治療4個(gè)小鼠組：-用媒介物治療1個(gè)小鼠組(PBS,i.p.,每周2次)。-用抗-小鼠TLR328G7抗體施用治療1個(gè)小鼠組(腹膜內(nèi)，500μg/小鼠,每周2次)。-用陽性對(duì)照羅氟司特(批準(zhǔn)為DaxasTM；PDE-4的拮抗劑)治療1個(gè)小鼠組(3mg/kg,口服，每周5次)。-用羅氟司特和28G7抗體治療1個(gè)小鼠組，每種藥劑根據(jù)用作單一藥劑的計(jì)劃。如在研究A中一樣，用彈性蛋白和LPS(i.n.)處理所有小鼠以誘導(dǎo)COPD，并處死。如在研究A中一樣，通過分類性細(xì)胞計(jì)數(shù)來分析支氣管肺泡灌洗(BAL)流體，從而測(cè)量細(xì)胞在氣道中的浸潤(rùn)。圖5E顯示了巨噬細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的BAL分類性細(xì)胞計(jì)數(shù)?？?TLR3抗體強(qiáng)烈地減少了嗜中性粒細(xì)胞向氣道中的滲入，也觀察到巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的減少。COPD主要由嗜中性粒細(xì)胞介導(dǎo)，而不是由巨噬細(xì)胞或嗜酸性粒細(xì)胞(也不是淋巴細(xì)胞，在這里用作對(duì)照)介導(dǎo)。羅氟司特還造成減少的嗜中性粒細(xì)胞向氣道中的滲入，以及巨噬細(xì)胞的減少。令人感興趣的是，抗-TLR3抗體和羅氟司特的組合會(huì)造成減少的嗜中性粒細(xì)胞向氣道中的滲入，基本上達(dá)到與在野生型小鼠中觀察到的水平，該下降遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過用單獨(dú)任一種藥劑觀察到的下降。實(shí)施例12–用于治療膿毒癥的體內(nèi)效力模型-盲腸結(jié)扎和穿刺(CLP)-治愈場(chǎng)合簡(jiǎn)而言之，操作30只小鼠：外科手術(shù)由盲腸結(jié)扎和穿刺組成。通過該方式，將盲腸腔的內(nèi)容物引入腹腔中從而導(dǎo)致腹膜炎，并由此導(dǎo)致膿毒性休克。CLP是中級(jí)，例如大約在盲腸的中央進(jìn)行結(jié)扎。在手術(shù)后6小時(shí)和24小時(shí)，用28G7(100μg/小鼠，腹膜內(nèi))、沒有TLR3特異性的對(duì)照抗體(“對(duì)照”,100μg/小鼠，腹膜內(nèi))或PBS(300μl/小鼠，腹膜內(nèi))治療小鼠。在第24、28、32、48、52、56、72、76、80、96、100、104、120、124、128、144、148、152、168、172、176、192、196、200、216、220、224、240、244、248、264、270、274、288、292、296、312、316、320和336小時(shí)，評(píng)估存活。336小時(shí)以后，存活的小鼠已經(jīng)清除了急性期感染。停止實(shí)驗(yàn)，并將小鼠處死。圖6顯示了實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。28G7治療組具有80％存活，而未治療組經(jīng)歷40％存活。這些結(jié)果證實(shí)，在CLP小鼠模型中，TLR3抗體可有效地治療小鼠。在該急性模型中，小鼠經(jīng)歷類似于膿毒性休克的急性感染。存活的小鼠已經(jīng)有效地清除了急性感染。因此，抗-TLR3抗體是適合用于治療經(jīng)歷嚴(yán)重急性感染(諸如SIRS、膿毒癥、嚴(yán)重膿毒癥或膿毒性休克)的患者的藥劑。實(shí)施例13-供體PBMC響應(yīng)于DSRNA和藥物組合的體外IP-10生產(chǎn)在人供體中評(píng)估了響應(yīng)于pIC的IP-10生產(chǎn)。將新鮮PBMC從供體的全血分離出，并在有0、10或50μg/ml抗-人TLR3mAb和一定劑量范圍的地塞米松(0.2、2和20μg/ml)或(1、0.1、0.01μg/ml)存在下溫育。將細(xì)胞在37℃溫育30分鐘，然后加入30μg/ml聚(I:C)。將細(xì)胞在37℃溫育另外24小時(shí)。然后將上清液收獲，以通過ELISA定量IP10生產(chǎn)?？?人TLR3mAb與地塞米松或的藥物組合的結(jié)果分別顯示在圖7A和7B中。每種抗體大幅減少響應(yīng)于聚IC的IP-10生產(chǎn)，并且所述抗體當(dāng)與地塞米松或組合時(shí)進(jìn)一步減少IP-10。因此，抗-TLR3抗體當(dāng)與地塞米松或Humira組合使用時(shí)可以提供額外效應(yīng)。具體地，響應(yīng)于聚IC，所述抗體增強(qiáng)地塞米松(類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的參比治療)的作用。此外，在0.1和1μg/ml濃度的抗-TLR3抗體似乎會(huì)增強(qiáng)Humira的作用?？?TLR3抗體可以通過調(diào)節(jié)信號(hào)傳遞途徑(其與地塞米松或所調(diào)節(jié)的那些途徑互補(bǔ))而起作用，而沒有拮抗作用，并且因此可以有利地與這樣的藥物聯(lián)合使用。所有標(biāo)題和小標(biāo)題都在本文中僅僅為了方便而使用，不應(yīng)當(dāng)解釋為以任何方式限制本發(fā)明。在其所有可能的變體中上述要素的任意組合被包括在本發(fā)明中，除非在本文中另外指出或以其它方式與上下文明顯矛盾。除非在本文中另外指出，否則本文中數(shù)值范圍的列舉僅意圖充當(dāng)個(gè)別地提及落入該范圍內(nèi)的每個(gè)單獨(dú)值的速記方法，且每個(gè)單獨(dú)值如同在本文中個(gè)別地闡述一樣并入說明書中。除非另有說明，本文提供的所有精確值代表相應(yīng)的近似值(例如，關(guān)于特定因子或測(cè)量結(jié)果所提供的所有確切示例性數(shù)值可以被認(rèn)為還提供對(duì)應(yīng)的近似測(cè)量結(jié)果，在適當(dāng)時(shí)用“約”來修飾)?？梢砸匀我夂线m的次序執(zhí)行本文描述的所有方法，除非在本文中另外指出或以其它方式與上下文明顯矛盾。本文中提供的任意或全部實(shí)施例或示例性語言(例如，“諸如”)的應(yīng)用，僅僅意圖更好地闡述本發(fā)明，并且不對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限制，除非另外指出。在本說明書中的語言不應(yīng)當(dāng)被解釋為指示任何要素是本發(fā)明的實(shí)踐所必需的，除非明確地如此描述。在本文中對(duì)專利文獻(xiàn)的引用和并入僅僅為了方便而做出，并且不反映這樣的專利文獻(xiàn)的有效性、專利性和/或可執(zhí)行性的任何觀點(diǎn)。使用術(shù)語諸如“參考一個(gè)或多個(gè)要素”在本文中對(duì)本發(fā)明的任意方面或?qū)嵤┓桨傅拿枋?，意圖為本發(fā)明的類似方面或?qū)嵤┓桨柑峁┲С?，即“由所述特定一個(gè)或多個(gè)要素組成”，“基本上由所述特定一個(gè)或多個(gè)要素組成”或“基本上包含所述特定一個(gè)或多個(gè)要素”，除非另有說明或與上下文明顯矛盾(例如，本文描述為包括一種特定組分的組合物應(yīng)當(dāng)理解為也描述了由所述組分組成的組合物，除非另有說明或與上下文明顯矛盾)。本發(fā)明在適用法律允許的最大程度上包括本文提出的方面或權(quán)利要求中列出的主題的所有修改和等同方案。在本說明書中引用的所有出版物和專利申請(qǐng)都通過引用整體并入本文，如同明確地且單獨(dú)地指出每篇單獨(dú)的出版物或?qū)＠暾?qǐng)通過引用并入。盡管為了清楚理解的目的，已經(jīng)通過具體說明和實(shí)施例對(duì)前述發(fā)明進(jìn)行了比較詳細(xì)的描述，但是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在考慮本發(fā)明的教導(dǎo)后會(huì)容易地明白，可以對(duì)其做出某些變化和改進(jìn)，而不偏離所附權(quán)利要求書的精神或范圍。