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蠶蛹北冬蟲夏草工廠化栽培技術的制作方法與工藝

文檔序號:12796194閱讀:558來源:國知局
蠶蛹北冬蟲夏草工廠化栽培技術的制作方法與工藝
:本發(fā)明涉及一種兼具食用和藥用價值的優(yōu)質珍貴大型真菌的人工栽培方法,即蠶蛹北冬蟲夏草高產菌株工廠化栽培技術,屬于食藥用真菌的人工栽培領域。

背景技術:
:北冬蟲夏草[Cordycepsmilitaris(L.Fr)Link]也叫蛹蟲草或蛹草,俗名不老草,是蟲,菌結合的一種大型食藥用真菌,屬子囊菌亞門麥角菌科蟲草屬真菌,與冬蟲夏草同屬異種,寄生于鱗翅目、鞘翅目等昆蟲的蛹和幼蟲中,主要分布在排水良好的褐色或黑褐色的森林土壤中,生活在土中或樹葉、草叢及地上的樹皮縫里。多數子座叢生,少數單生,子座長2-5cm,粗0.5-0.9mm,子座頂端有許多乳頭狀突起的子囊殼,每個鮮重0.8-1.3g,干重0.28-3.2g。北冬蟲夏草為全草入藥,含蛹體、子座、菌絲體等,其有效成分包括:蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖、SOD等。性平,味甘,具有抗疲勞、抗衰老,增強免疫和性功能等作用,可殺滅喉癌細胞,能補肺益胃,壯陽,有扶虛損、益精氣、止血、化痰、鎮(zhèn)靜等多種功能。1988年,由人民衛(wèi)生出版社出版的《全國中草藥匯編》中記載了北冬蟲夏草的子實體及蟲體可做冬蟲夏草入藥。經中國醫(yī)學科學院,中科院藥物研究所等權威部門檢測表明,北冬蟲夏草的一些主要營養(yǎng)成分及活性成分(蟲草素、蟲草酸、蟲草多糖、SOD酶活等)都要高于冬蟲夏草,因此,北冬蟲夏草已發(fā)展成為冬蟲夏草的理想替代品。野生的北冬蟲夏草為國家采集收購品種,但資源極為短缺,市場價格又甚為昂貴,隨著其珍貴的食藥用價值被越來越多的人所接受、了解,市場需求逐漸增大,但是在其生產過程中常出現菌絲不轉色、徒長,子實體產量減少或根本不產生子實體等現象,大規(guī)模生產時,尚存在技術不成熟、不配套,勞動強度大、工作效率低、污染嚴重等問題,這都成為了限制其進行大規(guī)模生產的因素,此時,大規(guī)模的生產藥用成分及性狀穩(wěn)定的北冬蟲夏草勢在必行。目前,國內外對北冬蟲夏草有效成分及藥理藥效方面的研究比較深入,人工栽培方面的研究也從未間斷過,近年來,使用大米、小麥等對北冬蟲夏草進行栽培都取得了成功,并已有一部分開始了規(guī)?;a。1987年開始,陸續(xù)有大量的北冬蟲夏草方面研究的專利被公開,其中不乏關于對其進行工廠化生產的內容,專利號93111121.8的“蛹蟲草子實體與菌絲體工廠化生產技術”主要通過發(fā)酵罐對菌絲體進行擴繁,滿足人們對其的需求;專利號00130381.3的“蠶蛹蟲草工廠化生產方法”選擇柞蠶繭,剝繭選蛹,對蛹進行消毒然后向蛹體內注射菌液,培養(yǎng)僵菌;專利號為200910305635.1的“一種蛹蟲草工廠化培養(yǎng)方法”采用先進的自動洗瓶機、自動灌注機以及自動液體接種機設備,并優(yōu)化了堆疊次序,但是對生產材料及具體生產方法及環(huán)境調控等未做進一步的介紹;專利號為201210121382.4的“一種蛹蟲草子實體的規(guī)?;耘喾椒ê唾|量檢測方法”使用大米培養(yǎng)基進行栽培蛹蟲草,并且詳細說明了整個過程中環(huán)境因子的調控。申鴻等(蠶體和蛹粉代料培養(yǎng)基上的蛹蟲草生長狀況和品質檢測.蠶業(yè)科學,2012,38(1):0130-0134)研究表明,同一菌株在不同的培養(yǎng)基質中培育蛹蟲草,蠶體培養(yǎng)基中所培育的蛹蟲草品質性狀及蟲草素含量高于蛹粉與粳米及糯米培養(yǎng)基。而目前,使用蠶蛹作為基質進行大規(guī)模生產北冬蟲夏草尚未實現。

技術實現要素:
:本發(fā)明所要解決的技術問題是客服現有技術的不足,提供一種新型的北冬蟲夏草工廠化栽培技術,該技術以蠶蛹為唯一原料,使用液體菌種直接向蛹體噴灑接種,蟲草成品使用凍干機冷凍干燥,具有生產效率高,菌絲及子座生長速度快,性狀穩(wěn)定,無外來污染,藥用成分高,生物學效率高,保存效果好,保存時間長等優(yōu)點。本發(fā)明所要解決的技術問題是通過以下技術方案來實現的:北冬蟲夏草母種在PDA培養(yǎng)基上進行擴大培養(yǎng)后接種于液體培養(yǎng)基中獲得液體菌種,將液體菌種經自動接種機接種于已經過高壓滅菌的蠶蛹中,培養(yǎng)直至菌種吃透蛹體。在蛹體表面出現淺黃色點狀突起即子座原基時,開蓋等待出草,此時溫度控制在18℃,空氣相對濕度80%以上,光照強度200-300Lux。本發(fā)明選用的是一次成型的聚丙烯菌種瓶,根據不同生長階段,通過調整瓶蓋內的過濾網及適時摘除瓶蓋來調節(jié)通氣狀況。我院購進的20000L超大型高壓滅菌柜,每次可完成對4500瓶以上的培養(yǎng)基質進行高壓滅菌,同時我院引進的自動接種設備具備四口接種的功能,每小時可接種3800瓶,這都大大的提高了北冬蟲夏草的生產效率。本發(fā)明中,所使用的菌種為經過發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)的液體菌種,生產周期短,菌球密度均一,接種后,發(fā)菌速度均勻,菌絲吃料速度快,覆蓋料面時間短,接種后保持室溫25℃,不進行通風處理,靜置5天后,菌絲布滿料面,此時逐漸加光,并保證室內空氣濕度80%以上;當培養(yǎng)料表面有蟲草原基產生時,調整光照強度至200-300Lux,此時打開瓶蓋,使用專業(yè)噴霧設備向料面噴水,設置溫度為19-20℃,空氣相對濕度85-90%,直至蟲草收獲;待蟲草長至4cm以上時,準備開始采收,將聚丙烯菌種瓶從瓶底部環(huán)切,將蟲草子座與蛹體部分完整取出,冷凍干燥30小時后,采用真空密封盒包裝備用。本發(fā)明中所選用的各級菌種培養(yǎng)料配方為:母種培養(yǎng)基:PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂20g,KH2PO41g,MgSO40.5g,加水至1000ml,pH自然。液體發(fā)酵罐培養(yǎng)基:馬鈴薯200g,白砂糖180g,蛋白胨12g,酵母粉8g,MgSO42g,KH2PO41g,加水至1000ml,pH自然。北冬蟲夏草栽培培養(yǎng)料:選用速凍蠶蛹,每瓶150g,121℃高壓滅菌50min,冷卻后使用全自動接種設備,每瓶接種5ml。本發(fā)明整體考察了北冬蟲夏草栽培過程中各級培養(yǎng)基的組成、接種后至出草之前各種環(huán)境因子(溫度、濕度、光照強度等)對蟲草長勢及產量的影響程度,在此基礎上,優(yōu)化和篩選出了最適宜蟲草生長的因子,形成了一套完整、系統(tǒng)的北冬蟲夏草人工栽培方法。本發(fā)明方法可有效提高北冬蟲夏草生產效率,接種后發(fā)菌速度快,菌絲整齊致密,滿瓶時間短,現原基時間早,蟲草子座質量好,數量多,生物學效率可達100%以上。附圖說明:圖1利用蠶蛹進行工廠化栽培北冬蟲夏草的工藝流程;圖2野生北冬蟲夏草圖片;圖3北冬蟲夏草母種及液體菌種培養(yǎng);圖4北冬蟲夏草鮮品圖片;圖5北冬蟲夏草采收過程;圖6北冬蟲夏草干品;圖7北冬蟲夏草工廠化生產過程中所使用的自動接種機、自動洗瓶機、全自動高壓滅菌柜及培養(yǎng)室內一角。具體實施方式:下面結合具體實例來進一步描述本發(fā)明,本發(fā)明的優(yōu)點和特點將會隨著描述更加清楚。但這些實例僅是范例性的,并不對本發(fā)明的范圍構成任何限制。本領域的技術人員應該理解的是,在不偏離本發(fā)明的精神和范圍下可以對本發(fā)明技術方案的細節(jié)和形式進行修改或替換,但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內。實驗材料:野生的蛹蟲草子座從長白山采集,主要生物學性狀如下:子座單生或散生,從寄主頭部或者節(jié)間長出,多為圓柱形,少數可見扁狀,橙黃色。子座高2-6cm,寬2-4mm;頂端稍寬,為3-6mm,子座頂端具有乳頭狀突起的子囊殼,一般為卵形,顏色稍深,半埋于子座中。北冬蟲夏草菌種的分離:采用組織分離法,在無菌室內,選用品質優(yōu)良的北冬蟲夏草子座,切取頂端子實體部分,大小0.2-0.4cm,將組織表面用清水洗凈,再用0.1-0.2%升汞水消毒處理1-2min,然后用無菌水沖洗2次,再接種于培養(yǎng)基(馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂20g,KH2PO41g,MgSO40.5g,加水至1000ml,pH自然)中央,整個過程都應遵循無菌操作,接種后置于25℃恒溫暗培養(yǎng),3-5天后可見由組織塊長出白色絨毛狀菌絲。北冬蟲夏草工廠化栽培技術:1、將從野生北冬蟲夏草子座上分離得到的北冬蟲夏草母種在PDA培養(yǎng)基上擴大培養(yǎng)后,接種于液體培養(yǎng)基上(PDB培養(yǎng)基:配方同PDA,不加瓊脂),靜置24h后,25℃震蕩培養(yǎng),獲得北冬蟲夏草液體菌種。2、將北冬蟲夏草液體菌種接種于液體發(fā)酵罐中(營養(yǎng)液配方:馬鈴薯200g,白砂糖180g,蛋白胨12g,酵母粉8g,MgSO42g,KH2PO41g,加水至1000ml,pH自然。),25℃光培養(yǎng)5天,既得可以進行大規(guī)模自動接種使用的菌種。3、將采購自山東省棲霞市的優(yōu)質速凍蠶蛹按照150g/瓶的標準進行裝瓶,121℃高壓滅菌50min,冷卻后使用自動接種設備進行接種,每瓶接種5ml,接種后轉至培養(yǎng)室內,25℃暗培養(yǎng)5天,菌絲即可覆蓋料面;此時轉至光培養(yǎng),調整室內溫度19-20℃,20-25天即可有蟲草子座原基產生,增加光照至200-300lux,打開瓶蓋,向料面均勻噴水,以噴霧狀落入瓶內而不積水為宜,保持空氣濕度在85-90%,子座原基開始伸長,顏色逐漸由淡黃色轉為深黃色,接種后45-50天,蟲草伸長可達4cm,此時即可采收。平均每瓶蟲草子座鮮重90-120g,生物學效率為163.7%。其中,北冬蟲夏草的生物學效率計算公式如下所示:生物學效率(%)=(北冬蟲夏草子座鮮重/蠶蛹干重)×100%4、采收的北冬蟲夏草按照需求可將子座與蛹體分離或整體由瓶內取出,使用大型凍干機,凍干30小時以后,可完成對其冷凍干燥過程,將凍干后的成品裝入真空密封盒,密封保存,這樣就可以保證其干燥后顏色、形狀均不發(fā)生改變,并且貯存時間長,藥效保存完整。北冬蟲夏草工廠化栽培產量分析:我工廠現每天可加工鮮蛹1400kg,生產北冬蟲夏草9300瓶,每瓶可產蟲草子座鮮重90-120g,干重26-32g,即每天可生產蟲草子座鮮品837-1116kg,干品241.8-297.6kg,生產周期45-60天。
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