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新的抗DR5抗體的制作方法與工藝

文檔序號:12556621閱讀:來源:國知局
新的抗DR5抗體的制作方法與工藝

技術特征:
1.一種抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于:重鏈序列含有具有CDRH1、CDRH2和CDRH3的可變區(qū),且CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;和輕鏈序列含有具有CDRL1、CDRL2和CDRL3的可變區(qū),且CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示。2.權(quán)利要求1的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:20所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的重鏈可變區(qū)序列和包含SEQIDNO:16所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的輕鏈可變區(qū)序列。3.權(quán)利要求1的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于所述抗體是嵌合抗體。4.權(quán)利要求3的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:20所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-471的重鏈序列和包含SEQIDNO:16所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-239的輕鏈序列。5.權(quán)利要求2的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于所述抗體是嵌合抗體。6.權(quán)利要求5的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:20所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-471的重鏈序列和包含SEQIDNO:16所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-239的輕鏈序列。7.權(quán)利要求1的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于所述抗體是人源化的。8.權(quán)利要求7的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有:(a)選自以下氨基酸序列的重鏈可變區(qū)序列:a1)包含SEQIDNO:42所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的氨基酸序列;a2)包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的氨基酸序列;a3)與選自a1)和a2)的氨基酸序列具有至少95%同源性的氨基酸序列,其中CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;a4)與選自a1)和a2)的氨基酸序列具有至少99%同源性的氨基酸序列,其中CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;和a5)在選自a1)和a2)的氨基酸序列的任一個中包括一個至幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添加的氨基酸序列,其中CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;和(b)選自以下氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)序列:b1)包含SEQIDNO:28所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的氨基酸序列;b2)包含SEQIDNO:52所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的氨基酸序列;b3)包含SEQIDNO:58所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的氨基酸序列;b4)包含SEQIDNO:62所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的氨基酸序列;b5)包含SEQIDNO:66所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的氨基酸序列;b6)與選自b1)-b5)的氨基酸序列的任一個具有至少95%同源性的氨基酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;b7)與選自b1)-b5)的氨基酸序列的任一個具有至少99%同源性的氨基酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;和b8)在選自b1)-5)的氨基酸序列的任一個中包括一個至幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添加的氨基酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示。9.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:42所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的重鏈可變區(qū)序列和包含SEQIDNO:28所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的輕鏈可變區(qū)序列。10.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的重鏈可變區(qū)序列和包含SEQIDNO:52所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的輕鏈可變區(qū)序列。11.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的重鏈可變區(qū)序列和包含SEQIDNO:58所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的輕鏈可變區(qū)序列。12.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的重鏈可變區(qū)序列和包含SEQIDNO:62所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的輕鏈可變區(qū)序列。13.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-141的重鏈可變區(qū)序列和包含SEQIDNO:66所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-134的輕鏈可變區(qū)序列。14.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:42所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-471的重鏈序列和包含SEQIDNO:28所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-239的輕鏈序列。15.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-471的重鏈序列和包含SEQIDNO:52所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-239的輕鏈序列。16.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-471的重鏈序列和包含SEQIDNO:58所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-239的輕鏈序列。17.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-471的重鏈序列和包含SEQIDNO:62所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-239的輕鏈序列。18.權(quán)利要求8的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段,其特征在于含有包含SEQIDNO:70所示氨基酸序列的氨基酸殘基20-471的重鏈序列和包含SEQIDNO:66所示氨基酸序列的氨基酸殘基21-239的輕鏈序列。19.權(quán)利要求1-18中任一項的抗體的抗原結(jié)合片段,其選自Fab、F(ab’)2、Fab’和Fv。20.一種藥物組合物,其特征在于包含權(quán)利要求1-19的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段的至少一種。21.權(quán)利要求20的藥物組合物,其特征在于是用于治療和/或預防表達DR5的癌癥的藥物組合物。22.一種用于治療和/或預防表達DR5的癌癥的藥物組合物,其特征在于包含權(quán)利要求1-19的抗體或所述抗體的抗原結(jié)合片段的至少一種和選自紫杉醇、卡鉑、CPT-11和長春堿的至少一個成員。23.權(quán)利要求21或22的藥物組合物,其中所述癌癥選自肺癌、前列腺癌、甲狀腺癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、胰腺癌、子宮癌、黑素瘤、成膠質(zhì)細胞瘤和血細胞癌。24.權(quán)利要求1-19中任一項的抗體或其抗原結(jié)合片段用于制備用于治療和/或預防表達DR5的癌癥的藥物的用途。25.權(quán)利要求1-19中任一項的抗體或其抗原結(jié)合片段用于制備用于治療和/或預防表達DR5的癌癥的藥物的用途,其特征在于同時或序貫給予所述藥物和選自紫杉醇、卡鉑、CPT-11、長春堿和5-FU的至少一個成員。26.一種多核苷酸,其編碼權(quán)利要求2、4、6和8-18中任一項的抗體。27.權(quán)利要求26的多核苷酸,其特征在于含有包含SEQIDNO:19所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列和包含SEQIDNO:15所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列。28.權(quán)利要求26的多核苷酸,其特征在于含有包含SEQIDNO:19所示核苷酸序列的核苷酸58-1413的核苷酸序列和包含SEQIDNO:15所示核苷酸序列的核苷酸61-717的核苷酸序列。29.權(quán)利要求26的多核苷酸,其特征在于含有:(a)選自以下核苷酸序列的多核苷酸:a1)包含SEQIDNO:41所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列,其中CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;a2)包含SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列,其中CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;a3)一種多核苷酸的核苷酸序列,其與包含與選自a1)和a2)的核苷酸序列互補的核苷酸序列的多核苷酸使用DNA固定在其上的濾器在0.7-1.0MNaCl存在下于68℃進行雜交,接著使用0.1-2xSSC溶液于68℃進行洗滌,其中CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;和a4)在選自a1)和a2)的核苷酸序列中包括一個至幾個核苷酸的取代、缺失或添加的核苷酸序列,其中CDRH1氨基酸序列由SEQIDNO:82所示,CDRH2氨基酸序列由SEQIDNO:83或89所示,CDRH3氨基酸序列由SEQIDNO:84所示;和(b)選自以下核苷酸序列的多核苷酸:b1)包含SEQIDNO:27所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;b2)包含SEQIDNO:51所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;b3)包含SEQIDNO:57所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;b4)包含SEQIDNO:61所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;b5)包含SEQIDNO:65所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;b6)一種多核苷酸的核苷酸序列,其與包含與選自b1)-b5)中任一個的核苷酸序列互補的核苷酸序列的多核苷酸使用DNA固定在其上的濾器在0.7-1.0MNaCl存在下于68℃進行雜交,接著使用0.1-2xSSC溶液于68℃進行洗滌,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示;和b7)在選自b1)-b5)的核苷酸序列的任一個中包括一個至幾個核苷酸的取代、缺失或添加的核苷酸序列,其中CDRL1氨基酸序列由SEQIDNO:79、85、86、87或88所示,CDRL2氨基酸序列由SEQIDNO:80所示,CDRL3氨基酸序列由SEQIDNO:81所示。30.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:41所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:27所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列的多核苷酸。31.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:51所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列的多核苷酸。32.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:57所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列的多核苷酸。33.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:61所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列的多核苷酸。34.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-423的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:65所示核苷酸序列的核苷酸61-402的核苷酸序列的多核苷酸。35.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:41所示核苷酸序列的核苷酸58-1413的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:27所示核苷酸序列的核苷酸61-717的核苷酸序列的多核苷酸。36.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-1413的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:51所示核苷酸序列的核苷酸61-717的核苷酸序列的多核苷酸。37.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-1413的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:57所示核苷酸序列的核苷酸61-717的核苷酸序列的多核苷酸。38.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-1413的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:61所示核苷酸序列的核苷酸61-717的核苷酸序列的多核苷酸。39.權(quán)利要求29的多核苷酸,其特征在于含有:包含含有SEQIDNO:69所示核苷酸序列的核苷酸58-1413的核苷酸序列的多核苷酸和包含含有SEQIDNO:65所示核苷酸序列的核苷酸61-717的核苷酸序列的多核苷酸。40.一種載體,其包含權(quán)利要求26-39的多核苷酸的任一種。41.一種轉(zhuǎn)化宿主細胞,其包含權(quán)利要求26-39的多核苷酸的任一種。42.一種轉(zhuǎn)化宿主細胞,其包含權(quán)利要求40的載體。43.一種產(chǎn)生權(quán)利要求2、4、6和8-18中任一項的抗體的方法,所述方法包括培養(yǎng)權(quán)利要求41或42的宿主細胞和從所得培養(yǎng)產(chǎn)物中純化抗體的步驟。
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