專利名稱：一種肝素鈉的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥物制備領(lǐng)域，特別是涉及一種環(huán)保型高收率和高效價的肝素鈉的生
產(chǎn)工藝。
背景技術(shù)：
肝素鈉，拉丁名！feparin Sodium，肝素鈉是粘多糖硫酸酯類抗凝血藥。近年來研 究證明肝素鈉還有降血脂作用。目前國內(nèi)生產(chǎn)肝素鈉的方法，主要是鹽解法和酸解法，比 如公開號為CN101735340A、CN101649008A、CN101519459A等等的中國發(fā)明申請，這兩種方 法都是采用豬小腸粘膜為原料，在堿性條件下通過鹽解酶解，出去部分蛋白質(zhì)后，通過三甲 胺季銨性強堿性陽離子交換樹脂吸附劑洗脫，在洗脫液中加以乙醇沉淀既得肝素鈉初級原 料出售，其缺點是生產(chǎn)周期長達48h，反應(yīng)溫度為95-100°C，能源消耗大，水解不完全，收率 低，生產(chǎn)一億國際單位肝素鈉粗品需2800-3000根豬小腸粘膜，所得產(chǎn)品純度低，粗品含肝 素鈉至多為80效價/毫克；并產(chǎn)生大量的肥腸渣和廢水，污染環(huán)境；且生產(chǎn)過程中樹脂再 生困難。

發(fā)明內(nèi)容
為克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺點，本發(fā)明另辟蹊徑，以現(xiàn)有技術(shù)棄之不用的去除 粘膜后的豬腸皮為原料，旨在提供一種新的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，以解決大量浪費的肥腸渣 (主要是腸皮)存在的污染環(huán)境等問題，進一步提高豬小腸的附加值。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是
以去除豬小腸粘膜的腸皮為原料，依次經(jīng)過預(yù)處理、吸附、洗滌、洗脫、沉淀和干燥幾個 工序后得到肝素鈉產(chǎn)品。本發(fā)明獲得的肝素鈉粗品其效價可到120以上。具體來說，本發(fā)明提供的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，包括以下工序
(1)腸皮預(yù)處理
將去除粘膜的豬小腸腸皮粉碎至糊狀物，然后加入腸衣專用鹽進行腌漬處理，得到腸 皮料漿，
(2)吸附
步驟(1)得到的腸皮料漿進入反應(yīng)罐前用60-80目的樹脂袋過濾，然后用水稀釋至鹽 度為4-5度，并用片堿調(diào)整pH值至中性，然后按每1000L腸皮料漿加入至少4kg樹脂的量， 加入羅門哈斯FPA98型樹脂，進行攪拌吸附6-8個小時后，收集樹脂，
(3)洗滌
步驟(2)收集到的樹脂用水洗滌至pH值為中性，濾干，再將樹脂放入鹽度為4士 1度的 氯化鈉水溶液中，攪拌至少1個小時進行洗滌，其中，樹脂氯化鈉水溶液=1:1. 5-2. 0 (w/ v)，洗滌結(jié)束進入下一步，
(4)洗脫
洗滌處理后的樹脂進行兩次洗脫，其中，第一次洗脫為按樹脂氯化鈉水溶液=1:1.2-1.5 (w/v)的比例將樹脂加入到鹽度為21 士 1°的氯化鈉水溶液中，攪拌至少3個 小時作洗脫處理，收集洗脫液；第二次洗脫為按樹脂氯化鈉水溶液=1:0. 9-1. 1 (w/v)的 比例將樹脂加入到鹽度為21 士 Γ的氯化鈉水溶液中，攪拌3個小時以上作二次洗脫處理， 收集洗脫液，合并兩次收集的洗脫液進入下一步，
(5)沉淀
攪拌條件下在步驟(4)收集的洗脫液中加入酒精度為85士5°的酒精，酒精用量以實 測混合液的酒精度為55士5度為準(一般酒精的用量為洗脫液的1. 5倍左右)，得到的混合 液靜置沉淀，收集沉淀物(可采用抽出或吸出上清液的方式收集沉淀物)，
(6)干燥:
步驟(5)得到的沉淀物加入酒精度90°以上的酒精進行脫水，濾干后做烘干處理既得 肝素鈉產(chǎn)品。發(fā)明人經(jīng)過大量研究實驗后發(fā)現(xiàn)，豬小腸經(jīng)過刮腸處理，去除粘膜后的腸皮，經(jīng)過 適當?shù)奶幚砗?，可以像豬小腸粘膜一樣制取肝素鈉。將去除粘膜后的腸皮經(jīng)適宜的處理后像豬小腸粘膜一樣作為肝素鈉生產(chǎn)原料，不 但可以降低生產(chǎn)成本，而且一般1800副左右的豬小腸就可生產(chǎn)出1億國際單位的肝素鈉 (而現(xiàn)有技術(shù)生產(chǎn)每億單位的肝素鈉需要2100-2400副豬小腸)，計算得知腸皮生產(chǎn)的肝素 鈉與三四百副豬小腸粘膜生產(chǎn)的肝素鈉相當。此外，本發(fā)明提供的肝素鈉產(chǎn)品其純度可達 120效價/mg以上。作為優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其中，所述的步驟(1)腸皮預(yù)處 理中腸衣專用鹽的用量為腸皮重量的1倍以上；腌漬時間為一天以上。一般來說在腸皮中 加入適量的水后再粉碎會更好，加水的量以獲得腸皮糊狀物為宜。作為優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其中，所述的步驟(2)吸附中 樹脂活化處理后再使用，活化處理為樹脂用55士5°C的溫水浸泡20士4個小時以上后用清 水沖洗干凈并浙干，再放入濃度為10wt%的NaOH溶液中攪拌1個小時以上，最后用清水沖 洗至洗液PH值為中性，其中，樹脂NaOH溶液=1:1 (w/v)0對樹脂活化處理有利于獲得好 的吸附效果，而研究表明，對于本發(fā)明選用的羅門哈斯FPA98型樹脂，其屬于丙烯酸類強堿 性陰離子交換樹脂，采用本發(fā)明的活化方法更益于獲得好的吸附效果，同時對于使用后的 樹脂再生處理也比較容易。作為優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其中，所述的步驟(2)吸附中 樹脂吸附使用2-3次后需做再生處理，再生處理為用濃度為10wt%的NaOH溶液浸泡并攪 拌1個小時以上，然后清水沖洗至洗液pH值為中性，浙干備用，其中，樹脂NaOH溶液=1:1 (w/v)。更為好的是，再生處理后的樹脂可以暫時浸泡在鹽度為5°的氯化鈉鹽水中備用(樹 脂保養(yǎng)，使其在工作狀態(tài)中有最佳的吸附效果)。作為優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其中，所述的步驟(5)沉淀中 得到的混合液靜置沉淀15個小時以上。一般來說，靜置沉淀15個小時以上即可獲得產(chǎn)物 的理想收率。作為優(yōu)選，根據(jù)本發(fā)明所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其中，所述的步驟(6)干燥中 脫水進行1個小時以上；烘干處理的溫度為45-70°C。按照這些工藝參數(shù)做干燥處理即可 獲得理想的產(chǎn)物收率和效價。
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本發(fā)明具有以下優(yōu)點
本發(fā)明有效解決了大量浪費的肥腸渣(主要是腸皮)存在的污染環(huán)境等問題，進一步提 高了豬小腸的附加值，計算得知1800副左右去除粘膜的豬腸皮生產(chǎn)的肝素鈉與三四百副 豬小腸粘膜生產(chǎn)的肝素鈉相當，即生產(chǎn)一億國際單位的肝素鈉需要約12000副到14500副 豬小腸腸皮，且經(jīng)檢測，本發(fā)明生產(chǎn)的肝素鈉粗品其純度可達120效價/mg以上。本發(fā)明采用了丙烯酸類強堿性陰離子交換樹脂，樹脂再生比較簡單。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例，更具體地說明本發(fā)明的內(nèi)容。應(yīng)當理解，本發(fā)明的實施并不局 限于下面的實施例，對本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發(fā)明保護范圍。在本發(fā)明中，若非特指，所有的份、百分比均為重量單位，所有的設(shè)備和原料等均 可從市場購得或是本行業(yè)常用的。下述實施例中的方法，如無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī) 方法。試劑和原料說明
腸衣專用鹽，江蘇井神鹽業(yè)生產(chǎn)， 樹脂活化處理
將新的羅門哈斯FPA98型樹脂(市售進口樹脂，經(jīng)銷商是北京博賽斯生物技術(shù)有限公 司)用50°C溫水浸泡20個小時后用清水沖洗干凈并浙干，再放入濃度為10wt%的NaOH溶 液(按Ikg樹脂加入到IL的NaOH溶液中的量)中攪拌1個小時，最后用清水沖洗至洗液pH 值為中性。研究表明，樹脂活化處理中采用的溫水其溫度在55士5°C之間，浸泡時間控制在 20士4個小時之間，對樹脂活化處理的效果是等同的，此處不再一一贅述。實施例1
本實施的肝素鈉的生產(chǎn)工藝如下
(1)腸皮預(yù)處理工序生產(chǎn)過程
取去除粘膜的豬小腸腸皮，加水后粉碎制成糊狀物，然后加入腸皮1倍重量的腸衣專 用鹽進行腌漬處理，腌漬一天時間后得到腸皮料漿，
(2)吸附工序生產(chǎn)過程
腸皮料漿進入反應(yīng)罐前用60目的樹脂袋過濾，然后用水稀釋至鹽度約為4度，并用片 堿調(diào)整PH值至中性，然后按每1000L腸皮料漿加入4kg樹脂的量，加入羅門哈斯FPA98型 樹脂，進行攪拌吸附6個小時后，收集樹脂，
(3)洗滌、洗脫工序生產(chǎn)過程
把收集好的樹脂用自來水反復(fù)沖洗，然后漂洗到PH值7左右。浙干。然后把樹脂放入 洗脫桶中，按樹脂與氯化鈉水溶液的量約為Ikg :2L的比例加入鹽度為4士 Γ氯化鈉水溶 液，打開攪拌機進行洗滌。攪拌1個小時后，停止攪拌機，排干洗滌液。洗脫根據(jù)工藝要求進行兩次洗脫，第一次按樹脂與氯化鈉溶液的量約為Ikg: 1. 2L的比例加入鹽度為21 士 Γ氯化鈉水溶液，打開攪拌機，攪拌3個小時進行洗脫，抽出 洗脫液。第二次按樹脂與氯化鈉溶液的量約為Ikg :1L的比例加入鹽度為21 士 Γ氯化鈉
5水溶液，攪拌3個小時進行洗脫，抽出洗脫液。合并第一次和第二次的洗脫液，并將洗脫液 送至沉淀間。樹脂使用3次后，做再生處理用濃度為10Wt%&Na0H溶液(按Ikg樹脂加入到IL 的NaOH溶液中的量)浸泡并攪拌1個小時，然后清水沖洗至洗液pH值為中性，浙干，再生處 理后的樹脂可以暫時浸泡在鹽度為5°的氯化鈉鹽水中備用。(4)沉淀工序生產(chǎn)過程
將洗脫液移入沉淀車間。按600L沉淀桶小于240Kg洗脫液；150L沉淀桶小于60Kg洗 脫液，將洗脫液分成若干桶，待沉淀。在洗脫液中邊攪拌邊加入酒精度約為90度的酒精，酒 精用量為洗脫液的1. 5倍左右，以實測混合液的酒精度為55 士 5度為準。然后將得到的混合 液靜置沉淀15個小時。接著抽出(或吸出)上清液，取出桶底部的沉淀物(即肝素鈉濕品)， 再加入酒精度為90度的新酒精脫水約一小時，濾干后送入干燥室。( 5)干燥工序生產(chǎn)過程
將濾干的肝素鈉均勻分攤到不銹鋼盤中，送入烘箱內(nèi)，烘箱內(nèi)溫度控制在約45°C。待肝 素烘干后取樣化驗，稱重，用塑料袋包裝好，并封好封口，填好標簽，送入保管室。按本實施例的方法生產(chǎn)一億國際單位肝素鈉需要去除粘膜后的豬小腸腸皮約 13000根。經(jīng)檢測，得到的肝素鈉產(chǎn)品效價> 120/mg。實施例2
本實施的肝素鈉的生產(chǎn)工藝如下
(1)腸皮預(yù)處理工序生產(chǎn)過程
取去除粘膜的豬小腸腸皮，加水后粉碎制成糊狀物，然后加入腸皮1倍重量的腸衣專 用鹽進行腌漬處理，腌漬一天時間后得到腸皮料漿，
(2)吸附工序生產(chǎn)過程
腸皮料漿進入反應(yīng)罐前用80目的樹脂袋過濾，然后用水稀釋至鹽度約為5度，并用片 堿調(diào)整PH值至中性，按每1000L腸皮料漿加入4. 5kg樹脂的量，加入羅門哈斯FPA98型樹 脂，進行攪拌吸附6個小時后，收集樹脂，
(3)洗滌、洗脫工序生產(chǎn)過程
把收集好的樹脂用自來水反復(fù)沖洗，然后漂洗到PH值7左右。浙干。然后把樹脂放入 洗脫桶中，按樹脂與氯化鈉水溶液的量約為Ikg 1. 5L的比例加入鹽度為4士 Γ氯化鈉水 溶液，打開攪拌機進行洗滌。攪拌1. 5個小時后，停止攪拌機，排干洗滌液。洗脫根據(jù)工藝要求進行兩次洗脫，第一次按樹脂與氯化鈉溶液的量約為Ikg: 1. 5L的比例加入鹽度為21 士 Γ氯化鈉水溶液，打開攪拌機，攪拌3個小時進行洗脫，抽出 洗脫液。第二次按樹脂與氯化鈉溶液的量約為Ikg :1. IL的比例加入鹽度為21 士 Γ氯化 鈉水溶液，攪拌3個小時進行洗脫，抽出洗脫液。合并第一次和第二次的洗脫液，并將洗脫 液送至沉淀間。樹脂使用3次后，做再生處理用濃度為10Wt%&Na0H溶液(按Ikg樹脂加入到IL 的NaOH溶液中的量)浸泡并攪拌1個小時，然后清水沖洗至洗液pH值為中性，浙干，再生處 理后的樹脂可以暫時浸泡在鹽度為5°的氯化鈉鹽水中備用。(4)沉淀工序生產(chǎn)過程
將洗脫液移入沉淀車間。按600L沉淀桶小于240Kg洗脫液；150L沉淀桶小于60Kg洗脫液，將洗脫液分成若干桶，待沉淀。在洗脫液中邊攪拌邊加入酒精度約為80度的酒精，酒 精用量為洗脫液的1. 5倍左右，以實測混合液的酒精度為55士5為準。然后將得到的混合 液靜置沉淀18個小時。接著抽出(或吸出)上清液，取出桶底部的沉淀物(即肝素鈉濕品)， 再加入酒精度為90度的新酒精脫水約一小時，濾干后送入干燥室。( 5)干燥工序生產(chǎn)過程
將濾干的肝素鈉均勻分攤到不銹鋼盤中，送入烘箱內(nèi)，烘箱內(nèi)溫度控制在約60°C。待肝 素烘干后取樣化驗，稱重，用塑料袋包裝好，并封好封口，填好標簽，送入保管室。按本實施例的方法生產(chǎn)一億國際單位肝素鈉需要去除粘膜后的豬小腸腸皮約 12000根。經(jīng)檢測，得到的肝素鈉產(chǎn)品效價> 120/mg。實施例3
本實施的肝素鈉的生產(chǎn)工藝如下
(1)腸皮預(yù)處理工序生產(chǎn)過程
取去除粘膜的豬小腸腸皮，加水后粉碎制成糊狀物，然后加入腸皮1倍重量的腸衣專 用鹽進行腌漬處理，腌漬一天時間后得到腸皮料漿，
(2)吸附工序生產(chǎn)過程
腸皮料漿進入反應(yīng)罐前用60目的樹脂袋過濾，然后用水稀釋至鹽度約為5度，并用片 堿調(diào)整PH值至中性，按每1000L腸皮料漿加入4kg樹脂的量，加入羅門哈斯FPA98型樹脂， 進行攪拌吸附8個小時后，收集樹脂，
(3)洗滌、洗脫工序生產(chǎn)過程
把收集好的樹脂用自來水反復(fù)沖洗，然后漂洗到PH值7左右。浙干。然后把樹脂放入 洗脫桶中，按按樹脂與氯化鈉溶液的量約為Ikg :2L的比例加入鹽度為4士 Γ氯化鈉水溶 液，打開攪拌機進行洗滌。攪拌1個小時后，停止攪拌機，排干洗滌液。洗脫根據(jù)工藝要求進行兩次洗脫，第一次按按樹脂與氯化鈉溶液的量約為Ikg 1. 2L的比例加入鹽度為21 士 Γ氯化鈉水溶液，打開攪拌機，攪拌3個小時進行洗脫，抽出 洗脫液。第二次按按樹脂與氯化鈉溶液的量約為Ikg :0.9L的比例加入鹽度為21 士 1°氯 化鈉水溶液，攪拌3個小時進行洗脫，抽出洗脫液。合并第一次和第二次的洗脫液，并將洗 脫液送至沉淀間。樹脂使用2次后，做再生處理用濃度為10Wt%&Na0H溶液(按Ikg樹脂加入到IL 的NaOH溶液中的量)浸泡并攪拌1個小時，然后清水沖洗至洗液pH值為中性，浙干，再生處 理后的樹脂可以暫時浸泡在鹽度為5°的氯化鈉鹽水中備用。(4)沉淀工序生產(chǎn)過程
將洗脫液移入沉淀車間。按600L沉淀桶小于240Kg洗脫液；150L沉淀桶小于60Kg洗 脫液，將洗脫液分成若干桶，待沉淀。在洗脫液中邊攪拌邊加入酒精度約為85度的酒精，酒 精用量為洗脫液的1. 5倍左右，以實測混合液的酒精度為55士5為準。然后將得到的混合 液靜置沉淀15個小時。接著抽出(或吸出)上清液，取出桶底部的沉淀物(即肝素鈉濕品)， 再加入酒精度為90度的新酒精脫水約一小時，濾干后送入干燥室。( 5)干燥工序生產(chǎn)過程
將濾干的肝素鈉均勻分攤到不銹鋼盤中，送入烘箱內(nèi)，烘箱內(nèi)溫度控制在約70°C。待肝 素烘干后取樣化驗，稱重，用塑料袋包裝好，并封好封口，填好標簽，送入保管室。
按本實施例的方法生產(chǎn)一億國際單位肝素鈉需要去除粘膜后的豬小腸腸皮約 14500根。經(jīng)檢測，得到的肝素鈉產(chǎn)品效價> 120/mg。盡管發(fā)明人已經(jīng)對本發(fā)明的技術(shù)方案做了較為詳細的闡述和列舉，應(yīng)當理解，對 于本領(lǐng)域一個熟練的技術(shù)人員來說，對上述實施例作出修改或變通或者采用等同的替代方 案是顯然的，都不能脫離本發(fā)明精神的實質(zhì)，本發(fā)明中出現(xiàn)的術(shù)語用于對本發(fā)明技術(shù)方案 的闡述和理解，并不能構(gòu)成對本發(fā)明的限制。
權(quán)利要求
一種肝素鈉的生產(chǎn)工藝，包括如下工序(1)腸皮預(yù)處理將去除粘膜的豬小腸腸皮粉碎至糊狀物，然后加入腸衣專用鹽進行腌漬處理，得到腸皮料漿，(2)吸附步驟(1)得到的腸皮料漿進入反應(yīng)罐前用60 80目的樹脂袋過濾，然后用水稀釋至鹽度為4 5度，并用片堿調(diào)整pH值至中性，然后按每1000L腸皮料漿加入至少4kg樹脂的量，加入羅門哈斯FPA98型樹脂，進行攪拌吸附6 8個小時后，收集樹脂，(3)洗滌步驟(2)收集到的樹脂用水洗滌至pH值為中性，濾干，再將樹脂放入鹽度為4±1度的氯化鈉水溶液中，攪拌至少1個小時進行洗滌，其中，樹脂氯化鈉水溶液=11.5 2(w/v)，洗滌結(jié)束進入下一步，(4)洗脫洗滌處理后的樹脂進行兩次洗脫，其中，第一次洗脫為按樹脂氯化鈉水溶液=1:1.2 1.5(w/v)的比例將樹脂加入到鹽度為21±1°的氯化鈉水溶液中，攪拌至少3個小時作洗脫處理，收集洗脫液；第二次洗脫為按樹脂氯化鈉水溶液=1:0.9 1.1(w/v)的比例將樹脂加入到鹽度為21±1°的氯化鈉水溶液中，攪拌3個小時以上作二次洗脫處理，收集洗脫液，合并兩次收集的洗脫液進入下一步，(5)沉淀攪拌條件下在步驟(4)收集的洗脫液中加入酒精度為85±5°的酒精，酒精用量以實測混合液的酒精度為55±5度為準，得到的混合液靜置沉淀，收集沉淀物，(6)干燥步驟(5)得到的沉淀物加入酒精度90°以上的酒精進行脫水，濾干后做烘干處理既得肝素鈉產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的步驟(1)腸皮預(yù)處 理中腸衣專用鹽的用量為腸皮重量的1倍以上；腌漬時間為一天以上。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的步驟(2)吸附中樹 脂活化處理后再使用，活化處理為樹脂用55士5°C的溫水浸泡20士4個小時以上后用清水 沖洗干凈并浙干，再放入濃度為10wt%的NaOH溶液中攪拌1個小時以上，最后用清水沖洗 至洗液PH值為中性，其中，樹脂:NaOH溶液=1:1 (w/v)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的步驟(2)吸附中樹 脂吸附使用2-3次后需做再生處理，再生處理為用濃度為10Wt%&Na0H溶液浸泡并攪拌1 個小時以上，然后清水沖洗至洗液PH值為中性，浙干備用，其中，樹脂NaOH溶液=1:1 (w/V)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的步驟(5)沉淀中得 到的混合液靜置沉淀15個小時以上。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述的步驟(6)干燥中脫 水進行1個小時以上；烘干處理的溫度為45-70°C。
全文摘要
本發(fā)明屬于藥物制備領(lǐng)域，特別是涉及一種肝素鈉的生產(chǎn)工藝，其是以去除粘膜的豬小腸腸皮為原料，依次經(jīng)預(yù)處理、吸附、洗滌、洗脫、沉淀和干燥幾個工序后得到肝素鈉產(chǎn)品，其中所述的預(yù)處理為腸皮粉碎成糊狀物后加入腸衣專用鹽腌漬；吸附工序中采用丙烯酸類強堿性陰離子交換樹脂羅門哈斯FPA98型樹脂。本發(fā)明的生產(chǎn)工藝可有效解決大量浪費的肥腸渣(主要是腸皮)存在的污染環(huán)境等問題，進一步提高豬小腸的附加值，降低生產(chǎn)成本，產(chǎn)品純度達120效價/mg以上。
文檔編號C08B37/10GK101891842SQ201010228578
公開日2010年11月24日 申請日期2010年7月16日 優(yōu)先權(quán)日2010年7月16日
發(fā)明者吳鵬飛, 潘為中, 潘為群, 潘紅蘇, 花瑞華 申請人:杭州龍揚生物科技有限公司