專利名稱：生物還原性細(xì)胞毒試劑的制作方法
背景技術(shù)：
根據(jù)美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)提供的統(tǒng)計(jì)，自1990年以來(lái)已有近四百萬(wàn)人死于癌癥，癌癥已成為繼心臟病后美國(guó)第二大致死病因。癌癥治療通常包括化療、放療、激素治療、免疫治療、以及外科手術(shù)治療?；熞恢笔莾?yōu)選療法，特別是對(duì)于那些不能進(jìn)行手術(shù)的癌癥或轉(zhuǎn)移性的癌癥更是如此。
很多細(xì)胞毒試劑，包括抗代謝物、抗生素、烷基化試劑、以及有絲分裂抑制劑目前均應(yīng)用于化療。這些試劑通常對(duì)正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞均造成破壞。人們希望開(kāi)發(fā)一種對(duì)腫瘤細(xì)胞的破壞遠(yuǎn)甚于對(duì)正常細(xì)胞的破壞的抗腫瘤試劑。
腫瘤細(xì)胞由于它們的病理狀況，使它們的周邊血管分布的有序性比正常細(xì)胞大大降低，導(dǎo)致腫瘤部位的氧供應(yīng)不足?；蛘哒f(shuō)，腫瘤細(xì)胞的含氧量都很低(氧缺乏)。這種獨(dú)特的生理特點(diǎn)為特異性針對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒試劑的設(shè)計(jì)提供了依據(jù)。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明的一方面涉及由以下三種成分組成的細(xì)胞毒化合物(1)帶有吸電子基團(tuán)的活化前烷基化部分；(2)含有至少兩個(gè)雙鍵的生物還原性部分；以及(3)連接該活化前烷基化部分和該生物還原性部分的接頭。“活化前烷基化部分”指一種功能基團(tuán)，它一旦活化，將用它的烷基之一以共價(jià)形式取代另一種化合物如DNA的活性氫原子。“生物還原性部分”指能體內(nèi)實(shí)施還原作用(接受電子的反應(yīng))即生物還原作用的部分。生物還原性部分的雙鍵可通過(guò)其自身或與接頭的雙鍵一起形成共軛體系。該共軛體系可通過(guò)還原生物還原性部分而使電子從生物還原性部分流向活化前烷基化部分的吸電子基團(tuán)。這將使吸電子基團(tuán)與接頭之間的雙鍵打斷，并使活化前烷基化部分轉(zhuǎn)化成活性烷基化化合物。
活化前烷基化部分的一個(gè)實(shí)例是已由一吸電子基團(tuán)(如酯、氨基甲酸乙酯、或碳酸酯)和一雙(鹵乙基)氨基(如雙(氯乙基)氨基或氮芥)取代了的芳香基(如苯基或萘基)。當(dāng)所述芳香部分為苯基時(shí)，所述兩種取代基優(yōu)選互為間位或?qū)ξ弧１交系钠渌恢酶髯钥扇芜x地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、寡聚亞烷基二醇、酰氨基、酯、芳烷氧基羰氨基、脲基、硫代基、硫代烷基、硫代芳基、或硫代雜芳基取代。其中，優(yōu)選烷基、烷氧基、寡聚亞烷基二醇、芳氧基、雜芳氧基、和氨基。優(yōu)選以上每一個(gè)取代基位于雙(鹵乙基)氨基的鄰位。
生物還原性部分經(jīng)生物還原作用轉(zhuǎn)化成另一烷基化試劑。所述生物還原性部分的某些實(shí)例有1,4-苯醌(即醌)、硝基苯、或1,2-二氧環(huán)己-3,5-雙烯。當(dāng)所述生物還原性部分為醌時(shí)，該醌環(huán)上的每個(gè)非氧代位置各自可任選地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、羧酸酯、酰氧烷基、酯、酰氨基、酰氨烷基、硫代酰氨基、磺?；被?、硫代基、硫代烷基、硫代芳基、硫代芳烷基、硫代雜芳基、或硫代雜芳烷基。優(yōu)選取代基為烷基、氨基、氨烷基、烷氧基、羥烷基、和酰氧烷基。如果醌的2-C和3-C位或5-C和6-C位同時(shí)被取代，可由兩個(gè)取代基共同形成一個(gè)環(huán)。如果醌上所有非氧代位置均已被取代，且每對(duì)取代基均形成一個(gè)稠環(huán)，則可與醌環(huán)一起形成兩個(gè)稠環(huán)。該稠環(huán)既可以是脂肪環(huán)也可以是芳香環(huán)。還可以任選由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、羧酸酯、酰氧烷基、酯、酰氨基、酰氨烷基、硫代酰氨基、磺?；被⒘虼?、硫代烷基、硫代芳基、硫代芳烷基、硫代雜芳基、或硫代雜芳烷基取代。該稠環(huán)可任選含有1-3個(gè)雜原子，如氮原子、氧原子、或硫原子。
將活化前烷基化部分和生物還原性部分連接在一起的接頭可以是下述之一亞甲基、含有一個(gè)雙鍵的C3烴鏈、或含有兩個(gè)間隔雙鍵的C5烴鏈。該接頭可任選由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、或寡聚亞烷基二醇取代。如果該接頭含有不止兩個(gè)取代基，其中的兩個(gè)取代基可以連接在一起形成一個(gè)5-6元環(huán)。此環(huán)可以是脂肪環(huán)或芳香環(huán)，并可任選由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、或寡聚亞烷基二醇取代。三個(gè)如氮原子、氧原子、或硫原子這樣的雜原子中的一個(gè)可成為環(huán)的一部分。
本發(fā)明的范圍還包括細(xì)胞毒化合物的鹽。例如，可在細(xì)胞毒化合物的氨基取代基與帶負(fù)電的抗衡離子之間形成所述鹽。合適的抗衡離子包括，但不限于，氯化物、氫氯化物、溴化物、碘化物、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、或乙酸鹽。同樣地，本發(fā)明之化合物的帶負(fù)電取代基如羧酸酯也可與下述陽(yáng)離子形成鹽如鈉離子或鉀離子等堿金屬陽(yáng)離子；鎂離子或鈣離子等堿土金屬陽(yáng)離子；或可由一或多個(gè)有機(jī)基團(tuán)如四甲基銨離子或二異丙基-乙基銨離子取代的銨陽(yáng)離子。
術(shù)語(yǔ)“烷基”在本文中指含有1-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴鏈?；蚝?-8個(gè)碳原子的環(huán)烴鏈。所述環(huán)烴鏈可能含有1-3個(gè)雜原子如氮原子、氧原子、或硫原子并可能還含有稠環(huán)。稠環(huán)是含有同一個(gè)碳-碳鍵的多個(gè)環(huán)。烷基的實(shí)例包括，但不限于，甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、己基、異己基、庚基、辛基、環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、降冰片基(norbornyl)、異冰片基、環(huán)己甲基、1-或2-環(huán)己乙基、1-,2-,或3-環(huán)己丙基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、哌啶基、嗎啉基以及吡咯烷基。
術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”指含有2-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴鏈，或環(huán)烴鏈即含有3-8個(gè)碳原子的“環(huán)烯基”，其特征是具有一或多個(gè)雙鍵。環(huán)烯基可能含有1-3個(gè)如氮原子、氧原子、或硫原子這樣的雜原子，即“雜環(huán)烯基”并可能含有稠環(huán)。鏈烯基通常包括烯丙基、2-丁烯基、2-戊烯基、2-己烯基、環(huán)丙烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基、環(huán)辛烯基、和降冰片烯基。
“芳基”是含有3-8個(gè)碳原子的環(huán)狀芳香性部分并可能還含有稠環(huán)。稠環(huán)指與另一環(huán)狀部分具有同一碳-碳鍵的芳香環(huán)。該環(huán)狀部分可以是芳基、環(huán)烷基、或雜環(huán)烷基。芳基通常包括苯基、1-萘基、2-萘基、聯(lián)苯基、菲基、和蒽基?！半s芳基”指含有1-3個(gè)雜原子的芳基。通常雜環(huán)芳香環(huán)包括香豆素基(coumarinyl)、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、呋喃基、吡咯基、噻吩基、噻唑基、惡唑基、咪唑基、吲哚基、苯并呋喃基和苯并噻唑基。芳烷基的一個(gè)實(shí)例是2-苯乙基。
術(shù)語(yǔ)“寡聚亞烷基二醇”指2-5個(gè)烷氧基的鏈。其中的烷氧基之間可以相同也可以不同。寡聚亞烷基二醇的一個(gè)實(shí)例是乙氧甲氧基。
如本文所用，諸如氨基、酰氨基、酯、硫代酰氨基、磺?；被⒁约半寤热〈梢允俏慈〈?，也可以由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、或雜芳烷基取代。此外，諸如酰氨基或酯這樣的二價(jià)取代基可從不同方向連接至它的兩個(gè)相鄰部分。環(huán)狀基團(tuán)如苯基的取代基可以在任何有效部位接受連接。
本發(fā)明的另一方面涉及包含一種上述細(xì)胞毒化合物(或它們的鹽)以及一種可藥用載體的組合物。所述化合物使用可有效治療腫瘤的量。本發(fā)明還有一方面涉及治療腫瘤的方法，其包括將有效量的上述細(xì)胞毒化合物或它們的鹽施予有相應(yīng)需要的患者?？捎么朔椒ㄖ委煹哪[瘤的某些實(shí)例包括白血病、肺癌、結(jié)腸癌、CNS癌、黑色素瘤、卵巢癌、腎癌、前列腺癌、和乳腺癌。這類細(xì)胞毒化合物在用于治療上述腫瘤的藥物的生產(chǎn)中的應(yīng)用也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明的其它特征和優(yōu)點(diǎn)在以下對(duì)優(yōu)選實(shí)施方案的描述、以及從所附權(quán)利要求中均較明顯。
發(fā)明詳述本發(fā)明涉及細(xì)胞毒化合物，其有(1)帶吸電子基團(tuán)的活化前烷基化部分和(2)生物還原性部分。
生物還原性部分的實(shí)例包括 活化前烷基化部分的實(shí)例包括 注意，在上兩類實(shí)例中，活化前烷基化部分的酯基團(tuán)是吸電子基團(tuán)。
如上述，本發(fā)明所公開(kāi)的細(xì)胞毒化合物能通過(guò)生物還原作用轉(zhuǎn)化成兩種烷基化試劑。這一轉(zhuǎn)變的機(jī)制通常分為兩個(gè)階段。以醌作為生物還原性部分、以亞甲基作為接頭、并以雙(氯乙基)-氨基-苯基酯作為活化前烷基化部分的細(xì)胞毒化合物在以下描述中作為實(shí)例使用。
第一階段涉及生物還原性部分的還原。這通常由細(xì)胞的酶如細(xì)胞色素P450還原酶實(shí)現(xiàn)。醌可在兩個(gè)單電子步驟中實(shí)施生物還原作用，其中第一次還原產(chǎn)生一個(gè)半醌自由基負(fù)離子，第二次還原產(chǎn)生一個(gè)氫醌。該半醌自由基負(fù)離子與氧進(jìn)行反應(yīng)的能力很強(qiáng)。事實(shí)上，在富含氧的正常組織中，大部分這類自由基負(fù)離子都已重新氧化為醌。 如背景部分所述，腫瘤部位的特征是其血管系統(tǒng)分布的有序性很低，這會(huì)造成比正常組織的環(huán)境氧含量更低(氧缺乏)?；蛘哒f(shuō)，還原的化合物更不太可能遇到分子氧而被重新氧化。因此半醌自由基負(fù)離子半衰期加長(zhǎng)，并可進(jìn)一步還原以產(chǎn)生氫醌。
在第二個(gè)階段，一對(duì)電子從氫醌的氧原子傳遞至醌環(huán)(見(jiàn)下圖，其中吸電子基團(tuán)為-O-(C=O)-(酯)，而接頭為-CH2-(亞甲基))，最后通過(guò)連接生物還原性部分和活化前烷基化部分的接頭傳遞至活化前烷基化部分之吸電子基團(tuán)的氧原子上。這一電子傳遞活性因此導(dǎo)致吸電子基團(tuán)與接頭之間的鍵被打斷，從而將醌部分轉(zhuǎn)變成甲基醌。甲基醌是已知能攻擊親核物質(zhì)如DNA的烷基化試劑(見(jiàn)Lin等，醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志1972,15,127；醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志1973,16,1268；醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志1974,17,688；醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志1975,18,917；醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志1976,19,1336)。 此鍵斷裂的后果是，該吸電子基團(tuán)變成一種吸電子能力更弱的基團(tuán)。這種轉(zhuǎn)變進(jìn)而可增加雙(鹵乙基)氨基的電子密度并使所述活化前烷基化部分變成烷基化試劑。實(shí)例為酯基團(tuán)時(shí)，它的強(qiáng)吸電子特點(diǎn)(Hammet取代常數(shù)為σp=0.45和σm=0.37)使雙(鹵乙基)氨基的烷基化部分在去活化階段保持穩(wěn)定。當(dāng)該酯基團(tuán)變成羧酸酯(其吸電子能力更弱，σp=0和σm=-0.1)時(shí)，該雙(鹵乙基)氨基中氨基氮的電子密度加強(qiáng)，因此而導(dǎo)致其烷基化活性的增強(qiáng)。
一類本發(fā)明的細(xì)胞毒化合物如下式(Ⅰ)所表示 其中A、B、C、和D各自為-R1、-R-NR1R2、-O-R1、-R-OH、-C(=P)O-R1、-R-O-C(=O)R1、-C(=O)-NR1R2、-R-NR1-C(=O)R2、-SO2-NR1R2、-N-SO2、-S-R1、或-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。任選地，如果A和B均不是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2，那么A和B一起可與所述醌環(huán)形成一個(gè)5-6元稠環(huán)。類似地，如果C和D均不是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2，那么C和D可任選地連接在一起，與醌環(huán)形成一個(gè)5-6元稠環(huán)。所述稠環(huán)可任選地包含1-3個(gè)雜原子如氮原子、氧原子、或硫原子，并可任選地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-R-NR1R2、-O-R1、-R-OH、-C(=O)O-R1、-R-O-C(=O)R1、-C(=0)-NR1R2、-R-NR1-C(=O)R2、-SO2-NR1R2、-N-SO2、或-S-R1取代。每個(gè)R可分別為烷基或?yàn)槿笔?。每個(gè)R1和R2各自為氫、烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、或雜芳烷基。L為-(CR3=CR4)n-CR5R6-，其中R3、R4、R5、和R6各自為氫、烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、或-(O-烷基)1-5；n為0、1、或2?！?(O-烷基)1-5”指烷氧基(“-(O-烷基)1”)或寡聚亞烷基二醇基(“-(O-烷基)2-5”)。R3和R4當(dāng)n不為0時(shí)可任選地共同形成一個(gè)5元或6元環(huán)。此環(huán)可以是脂肪環(huán)或芳香環(huán)，并可任選地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、或-(O-烷基)1-5取代。1-3雜原子如氮原子、氧原子、或硫原子也可成為此環(huán)的一部分。W為-O-C(=O)-、-O-C(=O)-NR1-、或-O-C(=O)O-。pH為苯基，可任選地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-R-NR1R2、-OH、-(O-烷基)1-5、-O-芳基、-O-芳烷基、-O-雜芳基、-O-雜芳烷基、-R-OH、-C(=O)O-R1、-O-C(=O)O-R1、-C(=O)-NR1R2、-NR1-C(=O)-R2、-NR1-C(=O)O-R2、-NR1-C(=O)NR1R2、或S-R1取代。X為鹵素，如氟、氯、溴、或碘。
注意如果A和B，或C和D，均不與醌形成稠環(huán)，那么A、B、C、和D中至少一個(gè)是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。而且，如果A、B、C、和D無(wú)一為-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2，那么A和B，或C和D(包括A和B以及C和D)一起與醌環(huán)形成稠環(huán)。該稠環(huán)(或有兩個(gè)稠環(huán)時(shí)至少其中一個(gè)稠環(huán))在環(huán)上兩個(gè)環(huán)原子之間包含一個(gè)雙鍵，并在環(huán)上所述兩個(gè)原子之一處由-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2取代。此雙鍵與醌上的雙鍵一起形成一共軛體系，使電子可從一個(gè)雙鍵流向另一個(gè)雙鍵。
式(Ⅰ)的化合物的一些具體實(shí)例如下
式(Ⅰ)的化合物的制備一般分為三個(gè)部分(1)生物還原性醌部分的制備；(2)雙(鹵乙基)氨基-苯基部分的制備；和(3)使該生物還原性醌部分與該雙(鹵乙基)氨基-苯基部分偶聯(lián)。(1)-(3)分部的一般合成過(guò)程如下述(1)含醌環(huán)的生物還原性部分的制備連接于受到適當(dāng)保護(hù)的生物還原性部分上的接頭的離去基團(tuán)如鹵化物必須與分部(3)中含雙(鹵乙基)氨基的目的苯基部分偶聯(lián)?？赏ㄟ^(guò)如親電取代反應(yīng)將該離去基團(tuán)和該接頭導(dǎo)入醌環(huán)的非氧位。如實(shí)施例1中分部(1)所述，當(dāng)氫醌與低聚甲醛反應(yīng)后，一個(gè)羥甲基出現(xiàn)在3,5,6-三甲基-氫醌二甲酯的C2碳原子上。由于上述反應(yīng)是在鹽酸中發(fā)生的，因此該羥甲基還能進(jìn)一步發(fā)生反應(yīng)并致使羥基被氯離子取代。故這一反應(yīng)產(chǎn)生一個(gè)氯甲基取代的醌。然后兩個(gè)甲基酯保護(hù)基團(tuán)以后可能通過(guò)水解去保護(hù)。
(2)含雙(鹵乙基)氨基的苯基部分的制備(在以下描述中氯即為所述鹵素)雙(鹵乙基)氨苯基部分可從例如硝基苯甲酸制備。羧酸酯可以以酯形式保護(hù)。苯環(huán)的合適取代基可偶聯(lián)至或轉(zhuǎn)換至此位點(diǎn)，如參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(2)。然后可還原硝基以形成氨基。此氨基可隨后與環(huán)氧乙烷反應(yīng)，形成雙取代的羥乙基氨基。在這一含有雙(羥乙基)氨基的中間產(chǎn)物中加入氯化劑如亞硫酰氯，便可最終形成所述烷基化部分即雙(氯乙基)氨基部分。與分部(1)中的去保護(hù)反應(yīng)類似，這里的酯基團(tuán)也通過(guò)水解除去。
(3)含醌環(huán)的生物還原性部分與含雙(氯乙基)氨基的苯基部分的偶聯(lián)反應(yīng)在一典型實(shí)例中，一種含醌環(huán)部分如實(shí)施例1的2-氯甲基-3,5,6-三甲基苯醌，可與一種含雙(氯乙基)氨基的苯基部分如3-[雙-(2-氯-乙基)氨基-4-甲氧基苯甲酸，通過(guò)親核取代反應(yīng)偶聯(lián)。用作親核物的羧酸酯代替了鹵化物離子并導(dǎo)致一酯鍵的形成。
如上述，本發(fā)明的含有效量細(xì)胞毒化合物的藥用組合物可用于治療腫瘤。本發(fā)明的范圍還包括通過(guò)將這類組合物施予病人而治療腫瘤的方法。將細(xì)胞毒化合物(或該細(xì)胞毒化合物的鹽)的有效量定義為通過(guò)施予有需要的病人而對(duì)接受治療的病人產(chǎn)生療效的化合物的量。施予病人的有效量一般取決于年齡、表面積、體重、和病人的狀況。對(duì)動(dòng)物和對(duì)人的劑量相互關(guān)系(基于每平方米體表面積的毫克數(shù))如Freireich等，癌癥化療報(bào)道(CancerChemother.Rep.)1966,50,219所述。體表面積可從病人的身高和體重近似地測(cè)定。見(jiàn)如科學(xué)列表(Scientific Tables),Geigy Pharmaceuticals,Ardley,NewYork,1970,537。用于實(shí)施本發(fā)明的細(xì)胞毒化合物的有效量可為約0.1mg/kg-約250mg/kg。有效量也可根據(jù)給藥途徑、所用賦形劑、以及與其它治療包括使用抗腫瘤制劑和放療同時(shí)用藥的可能性而變化，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所認(rèn)知。
所述藥用組合物可通過(guò)非胃腸道途徑給藥，包括口服、局部用藥、皮下用藥、腹膜內(nèi)用藥、肌肉內(nèi)用藥、以及靜脈用藥。胃腸道用藥劑型的實(shí)例包括活性試劑的水溶液，溶于等滲的生理鹽水，5％葡萄糖或其它眾所周知的可藥用的賦形劑。增溶劑如環(huán)糊精，或本領(lǐng)域熟知的其它增溶劑可作為能運(yùn)輸所述藥用化合物的藥物賦形劑。
本發(fā)明的細(xì)胞毒化合物還可配制成適用于其它已知方法的給藥途徑的劑型。例如可將所述藥用組合物配制成適于口服的膠囊、凝膠密封(gelseal)或片劑。膠囊可能包含任何已知的可藥用物質(zhì)如明膠或纖維素衍生物。片劑可按常規(guī)方法通過(guò)壓縮本發(fā)明活性化合物與固體賦形劑、以及潤(rùn)滑劑的混合物而配制。固體賦形劑的實(shí)例包括淀粉和糖膨潤(rùn)土。所述細(xì)胞毒化合物還能以含有如乳糖或甘露糖醇作為黏合劑并含有常規(guī)填料以及壓片劑的硬殼片劑或膠囊形式給藥。
本發(fā)明化合物的抗腫瘤活性可用腫瘤生長(zhǎng)消退試驗(yàn)作初步評(píng)估，該試驗(yàn)分析了所測(cè)化合物對(duì)已知小鼠體內(nèi)已有實(shí)體瘤生長(zhǎng)的抑制能力。該試驗(yàn)可如下進(jìn)行將腫瘤細(xì)胞植入裸鼠的脂肪足墊中，然后使腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，長(zhǎng)至一定大小再給予所述細(xì)胞毒化合物。隨后在數(shù)周如三周內(nèi)監(jiān)控腫瘤的體積。在試驗(yàn)期間同時(shí)還監(jiān)控受試動(dòng)物的總體健康水平。
我們相信，本領(lǐng)域技術(shù)人員無(wú)需進(jìn)一步解釋就能根據(jù)本文的描述全面并深入地實(shí)施本發(fā)明。故以下描述了本發(fā)明各種化合物的合成和生物學(xué)檢驗(yàn)的具體實(shí)施例應(yīng)被看成僅為舉例說(shuō)明，而非對(duì)本公開(kāi)的任何意義上的限制。本文所引用的所有出版物包括專利均全文引入作為參考。
實(shí)施例1-7分別詳細(xì)描述了七種本發(fā)明的細(xì)胞毒化合物的合成。每個(gè)實(shí)施例均分為三個(gè)分部(1)生物還原性醌部分的制備，(2)雙(氯乙基)氨基-苯基部分的制備，和(3)以上兩個(gè)部分的偶聯(lián)反應(yīng)。
實(shí)施例1
化合物1的合成(1)2-氯甲基-3,5,6-三甲基苯醌的合成將氯化氫氣體引入3,5,6-三甲基氫醌二甲醚(1g,5.5mmol)與低聚甲醛(lg)在含1NHCl的乙酸(30ml)中的混合物中。然后于60℃將反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)。將混合物傾入400ml水中，過(guò)濾。殘留物溶于100ml乙酸乙酯，用飽和NaCl溶液(100ml)洗滌。抽提物在硫酸鎂上干燥，減壓除去溶劑。獲得甲基4-2-氯甲基-3,5,6-三甲基氫醌二甲醚的白色固體(0.8g,6％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):4.47(s,2H),3.79(s,3H),3.66(s,3H),2.3(s,2H),2.20(s,3H),2.18(s,3H).Cl2H19ClO2的ESMS計(jì)算值為230.73；實(shí)際值為231.7(M+H)+。
將2-氯甲基-3,5,6-三甲基氫醌二甲酯溶于20ml乙腈。該溶液中加入含9.6g硝酸銨鈰(Ⅳ)的200ml水后，用乙酸乙酯(100ml和50ml)抽提該混合物。合并的抽提物在硫酸鎂上干燥，溶劑經(jīng)減壓除去。殘留物中加50ml水，然后用乙酸乙酯(50ml)抽提該混合物。抽提物用飽和NaCl溶液(100ml)洗滌。使抽提物在硫酸鎂上干燥，溶劑經(jīng)減壓除去，得2-氯甲基-3,5,6-三甲基氫醌黃色結(jié)晶。1H NMR(300MHz,CDCl3):4.47(s,2H),2.16(s,3H),2.06(s,3H),2.05(s,3H)C10H11ClO2的ESMS計(jì)算值為198.65；實(shí)際值為199.6(M+H)+。
(2)3-雙(2’-氯乙基)氨基-4-甲氧基苯甲酸的合成將甲基3-氨基-4-甲氧基苯甲酸酯(10.94g,0.06mol)與環(huán)氧乙烷(12.5g,0.28mol)在乙酸(150ml)中的反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?4小時(shí)。然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至約80ml，用H2O(300ml)稀釋，用二氯甲烷/乙酸乙酯(1∶1,6×300ml)抽提。濃縮該有機(jī)溶液，得到一種灰白色的油(8.6g,54％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.85(m,2H),6.94(d,J=8.1Hz,1H),3.90(s,3H),3.84(s,3H),3.52(m,4H),3.24(m,4H).
向室溫?cái)嚢璧募谆?-(2’-雙(羥基-乙基)氨基)-4-甲氧基苯甲酸酯(2.80g,10.40mmol)之苯溶液(40ml)中緩慢加入亞硫酰氯(1.2ml)。之后將反應(yīng)漿回流加熱0.5小時(shí)。再用冰/H2O(100ml)處理反應(yīng)混合物，并用乙酸乙酯(100ml)抽提。此乙酸乙酯溶液用碳酸氫鈉(100ml)洗滌，在硫酸鎂上干燥，并經(jīng)濃縮得到灰白色固體產(chǎn)物(2.50g,79％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.76(dd,J=8.4,2.4Hz,1H),7.69(d,J=2.4Hz,1H),6.90(d,J=8.4Hz,1H),3.90(s,3H),3.85(s,3H),3.52(s,8H).C13H17Cl2NO3的ESMS計(jì)算值為305.1；實(shí)際值為328.0(M+Na)+。
將甲基3-雙(2’-氯乙基)氨基-4-甲氧基苯甲酸酯(2.70g,8.823mmol)的濃鹽酸(37％重量比的水溶液，40ml)懸浮液在氮?dú)庀禄亓骷訜?小時(shí)。反應(yīng)混合物用冰/H2O(200ml)處理，乙酸乙酯抽提(4×150ml)。濃縮有機(jī)溶液，得到白色固體(2.05g,80％)。C12H15Cl2NO3的ESMS計(jì)算值為291.0；實(shí)際值為292.0(M+H)+。
(3)使(1)和(2)所得的中間產(chǎn)物偶聯(lián)將3-雙(2’-氯乙基)氨基-4-甲氧基苯甲酸(0.51g,1.750mmol)和2-氯甲基-3,5,6-三甲基苯醌(0.56g,2.819mmol)的丙酮溶液(25ml)在氮?dú)庀?、有碳酸?2.0g)和碘化鈉(1.2g)存在的情況下回流加熱2小時(shí)。分離有機(jī)層，用乙酸乙酯(50ml)稀釋，含水碳酸鉀洗滌(2×50ml)，硫酸鎂干燥，濃縮成油。在硅膠上經(jīng)急驟層析純化得到粘性油(0.61g,77％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.70(dd,J=8.4,1.8Hz,1H),7.65(d,J=1.8Hz,1H),6.86(d,J=8.4Hz,1H),5.25(s,3H),3.90(s,3H),3.50(s,8H),2.18(s,3H),2.06(s,3H),2.05(s,3H).C22H25Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為453.1；實(shí)際值為454.1(M+H)+。
實(shí)施例2化合物2的合成(1)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(1)(2)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(2)，不同的是起始物質(zhì)為3-氨基-4-甲基苯甲酸酯，而不是3-氨基-4-甲氧基苯甲酸酯。
(3)使(1)和(2)所得的中間產(chǎn)物偶聯(lián)將3-甲基-4-雙(2’-氯乙基)氨基苯甲酸(830mg,3.02mmol)與2-氯甲基-3,5,6-三甲基苯醌(500mg,2.51mmol)溶于丙酮(20ml)并在有碳酸鉀(1g)和碘化鈉(80mg)存在的情況下加熱1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾入300ml水中并用乙酸乙酯抽提(100ml,4次)。抽提物在硫酸鎂上干燥，然后減壓濃縮。獲得醌-芥A的油形式(800mg,72％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.75(dd,J=2.19,2.19Hz,1H),7.63(m,1H),6.65(d,J=8.52,1H),5.22(s,2H),3.48(m,8H), 2.31(s,3H),2.15(s,3H),2.14(s,3H),2.04(s,3H).C22H25Cl2NO4的ESMS計(jì)算值為438.31；實(shí)際值為439.0(M+H)+。
實(shí)施例3化合物3的合成(1)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(1)(2)4-雙(2’-氯乙基)氨基-3-辛氧基苯甲酸的合成將甲基3-羥基-4-硝基苯甲酸酯(5.5g,0.028mol)、碘辛烷(10.0g,0.042mol)和碳酸鉀(20g)的DMF(100ml)漿液于100℃攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加H2O(500ml)稀釋，再用乙醚/乙酸乙酯(9/1,2×200ml)抽提。收集的有機(jī)溶液加H2O(400ml)洗滌，硫酸鎂干燥，濃縮，得灰白色油(8.7g,100％)。
甲基4-硝基-3-辛氧基苯甲酸酯(8.7g,0.028mol)的甲醇溶液(150ml)于室溫有10％Pd-C存在的情況下在氮?dú)庀聰嚢?9h。反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，濃縮，得灰白色固體(7.6g,96％)。1H NMR(300Mhz,CDCl3):7.25(d,J=2.1Hz,1H),C16H25NO3的MS計(jì)算值為279.2；實(shí)際值為279。
將甲基4-氨基-3-辛氧基苯甲酸酯(3.47g,12.4mmol)與環(huán)氧乙烷(4.5g,198mol)在乙酸(100ml)中的反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?2小時(shí)。加H2O(500ml)稀釋，用氯仿/甲醇(95/5,4×100ml)抽提。將有機(jī)溶液濃縮為棕色油。急驟層析純化(硅膠，含5％-10％甲醇的氯仿溶液)，所得產(chǎn)物為灰白色油(2.25g,42％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.62(dd,J=8.1,2.1Hz,1H),7.55(d,J=2.1Hz,1H),7.12(d,J=8.4Hz,1H),4.06(t,J=6.9Hz,2H),3.90(s,3H),3.64(t,J=5.1Hz,4H),3.38(t,J=5.1Hz,4H),1.86(J=5.1Hz,2H),1.30(m,10H),0.89(t,J=6.9Hz,3H).C20H13NO5的ESMS計(jì)算值為367.2；實(shí)際值為390.3(M+Na)+。
向室溫?cái)嚢璧募谆?-雙(2’-羥乙基)氨基-3-辛氧基苯甲酸酯(2.20g,6.0mol)之苯溶液(50ml)中緩慢加入亞硫酰氯(1.2ml,l6mmol)。之后將反應(yīng)回流加熱1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用冰/H2O(100ml)處理，并用乙酸乙酯(50ml)抽提。有機(jī)溶液用碳酸氫鈉(20ml)、H2O(50ml)洗滌，在硫酸鎂上干燥，并經(jīng)濃縮得到灰白色固體產(chǎn)物(2.1g,87％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.58(dd,J=8.1,1.8Hz,lH),7.51(d,J=l.8Hz,1H),6.92(d,J=8.1Hz,1H),4.03(t,J=6.9Hz,1H),3.89(s,3H),3.60(m,8H),1.85(J=7.2Hz,2H),1.30(m,10H),0.89(t,J=6.9Hz,3H).C20H31Cl2NO3的ESMS計(jì)算值為403.2；實(shí)際值為404.2(M+H)+。
將甲基4-雙(2’-氯乙基)氨基-3-辛氧基苯甲酸酯(1.8g,4.5mmol)的濃鹽酸(37％重量比的H2O溶液，50ml)懸浮液在氮?dú)庀禄亓骷訜?.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用冰/H2O(100ml)處理，氯仿抽提(3×50ml)。濃縮有機(jī)溶液，得到棕色油。急驟層析純化(硅膠，含2％甲醇的氯仿溶液)得灰白色固體產(chǎn)物(1.58g,88％)1H NMR(300MHz,CDCl3):7.67(dd,J=8.1,1.5Hz,1H),7.56(d,J=1.5Hz,1H),6.93(d,J=8.4Hz,1H),4.40(t,J=6.6Hz,2H),3.65(m,8H),1.85(J=7.8Hz,2H),1.35(m,10H),0.90(t,J=6.6Hz,3H).C29H29Cl2NO3的ESMS計(jì)算值為389.2；實(shí)際值為390.2(M+H)+。
(3)使(1)和(2)所得的中間產(chǎn)物偶聯(lián)相同方法如實(shí)施例1和2的分部(3)中所述。1H NMR:δ7.76(dd,J=8.and1.8Hz,1H),7.68(d,J=1.8Hz,1H),6.98(d,J=8.Hz,1H),5.25(s,2H),3.53(brs,8H),3.6(t,J=5.0Hz,2H),2.13(s,3H),2.0(s,3H),2.02(s,3H),1.86(J=5.0Hz,3H),1.30(m,10H),0.89(t,J=6.9Hz,3H).C29H39Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為552.2；實(shí)際值為553.1(M+H)+。
實(shí)施例4化合物4的合成(1)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(1)(2)2-雙(2’-氯乙基)氨基-3,5-二甲基苯甲酸的合成將甲基2-氨基-3,5-二甲基苯甲酸酯(7.0g,0.039mol)與環(huán)氧乙烷(10g,0.23mol)在乙酸(150ml)中的反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?9小時(shí)。然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上將其濃縮至約100ml，加H2O(300ml)稀釋，用氯仿(5×200ml)抽提。將有機(jī)溶液濃縮為灰白色油(10.0g,96％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.31(br,s,1H),7.16(brs,1H),3.91(s,3H),3.73(m,2H),3.63(m,2H),3.26(brm,4H),2.32(s,3H),2.30(s,3H).
向室溫?cái)嚢璧募谆?-雙(2’-羥乙基)氨基-3,5-二甲基苯甲酸酯(7.0g,0.026mol)之苯溶液(200ml)中緩慢加入亞硫酰氯(12ml,0.16mmol)。之后將反應(yīng)漿室溫?cái)嚢?2小時(shí)。再將反應(yīng)混合物用冰/H2O(500ml)處理，并用乙酸乙酯(2×300ml)抽提。該乙酸乙酯溶液用H2O(300ml)、碳酸氫鈉(200ml)洗滌，在硫酸鎂上干燥，并經(jīng)濃縮得到清亮的油(5.6g,71％)。1H NMR(300MHz,CDC13):7.31(d,J=2.1Hz,1H),7.17(d,J=2.1Hz,1H),3.88(s,3H),3.53(m,4H),3.37(brm,4H),2.35(s,3H),2.30(s,3H).C14H19Cl2NO2的ESMS計(jì)算值為303.1；實(shí)際值為304.1(M+H)+。
將甲基2-雙(2’-氯乙基)氨基-3,5-二甲基苯甲酸酯(5.6g,0.018mol)的濃鹽酸(37％重量比的H2O溶液，150ml)懸浮液在氮?dú)庀禄亓骷訜?小時(shí)。反應(yīng)混合物用冰/H2O(200ml)處理，氯仿抽提(3×150ml)。濃縮有機(jī)溶液，得到白色固體(5.1g,96％)1H NMR(300MHz,CDC13):8.01(d,J=1.5Hz,1H),7.23(dd,J=1.5,0.6Hz,1H),3.6(m,8H),2.43(s,3H),2.35(s,3H).C13H17Cl2NO2的ESMS計(jì)算值為289.1。
(3)使(1)和(2)所得的中間產(chǎn)物偶聯(lián)將2-雙(2’-氯乙基)氨基-3,5-二甲基苯甲酸(0.45g,1.551mmol)的丙酮(15ml)溶液在有碳酸鉀(1.5g)和碘化鈉(1.0g)存在的情況下在氮?dú)庀禄亓骷訜?。向其中緩慢加?-氯甲基-3,5,6-三甲基苯醌(0.45g,2.413mmol)的丙酮溶液(5ml)?；亓骷訜?0分鐘后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加H2O(50ml)稀釋，并用乙酸乙酯抽提(50ml)。有機(jī)層加H2O(50ml)洗滌，在硫酸鎂上干燥，濃縮得油。在硅膠上急驟層析獲得粘性油(0.52g,76％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.25(d,J=2.1Hz,1H),7.17(d,J=2.1Hz,1H),5.24(s,2H),3.49(m,4H),3.38(brm,4H),2.33(s,3H),2.28(s,3H),2.20(s,3H),2.07(s,3H),2.06(s,H).C23H27Cl2NO4的ESMS計(jì)算值為451.1；實(shí)際值為452.2(M+H)+。
實(shí)施例5化合物5的合成(1)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(1)，用2-(2-乙酰氧乙基)-苯醌作為起始物質(zhì)。
(2)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(2)，用4-硝基苯甲酸作為起始物質(zhì)。
(3)將2-氯甲基-5-(2’-乙酰氧乙基)苯醌(110mg,0.453mmol)與4-雙(2’-氯乙基)氨基苯甲酸(80mg,0.305mmol)的二噁烷(6ml)溶液在有碳酸鉀存在的情況下室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)混合物用己烷(15ml)稀釋，經(jīng)硅藻土墊過(guò)濾。有機(jī)相經(jīng)濃縮成油。在硅膠上急驟層析純化得黃色固體(18mg,12％)。1H NMR(300MHz,CDCL3):7.97(d,J=9.0Hz,2H),6.80(m,4H),5.20(d,J=1.8Hz,2H),4.26(t,J=6.3Hz,2H),3.83(t,J=6.6Hz,4H),3.68(t,J=6.6Hz,2H),2.76(dt,J=6.0,1.2Hz,2H),2.03(s,3H).C22H23Cl2NO6的ESMS計(jì)算值為467.1；實(shí)際值為490.0(M+Na)+。
實(shí)施例6化合物6的合成(1)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(1)關(guān)于2,3-二甲基苯醌之合成的類似方法。
(2)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(2)。
(3)將3-雙(2’-氯乙基)氨基-4-甲氧基苯甲酸(180mg,0.618mmol)溶于丙酮(10ml)并在有碳酸鉀(0.58g)的情況下回流加熱。向其中滴加2,3-二氯甲基-5,6-二甲基苯醌(75mg,0.323mmol)的丙酮溶液(5ml)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加乙酸乙酯(15ml)稀釋，并含水碳酸鉀洗滌(2×50ml)，在硫酸鎂上干燥，濃縮得油。在硅膠上急驟層析獲得粘石油(85mg,37％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.59(m,4H),6.75(d,J=9.0Hz,2H),5.39(s,4H),3.86(s,6H),3.48(m,16H),2.08(s,6H).C34H38Cl4N2O8的ESMS計(jì)算值為742.1；實(shí)際值為789.1(M+2Na-H)+。
實(shí)施例7化合物7的合成(1)參見(jiàn)實(shí)施例1的分部(1)。
(2)甲基4-雙(2’-氯乙基)氨基-3-(2’-(2”-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯甲酸的合成甲基3-羥基-4-硝基苯甲酸酯(5.5g,0.028mol)、1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷(10.0g,0.055mol)和碳酸鉀(20g)在DMF(100ml)中的漿液于90-100℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用H2O(100ml)稀釋。所得固體經(jīng)過(guò)濾收集，用H2O(100ml)洗，并干燥，得到白色固體狀的產(chǎn)物(6.2g,74％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.82(d,J=8.1Hz,1H),7.78(d,J=1.2Hz,1H),7.69(dd,J=8.1,1.2Hz,1H),4.33(t,J=4.5Hz,2H),3.95(s,3H),3.92(t,d,J=4.8Hz,2H),3.73(m,2H),3.55(m,2H),3.38(s,3H).C13H17NO7的ESMS計(jì)算值為299.1；實(shí)際值為300.1(M+H)+。
于室溫下有10％Pd-C和乙酸(10ml)存在時(shí)將甲基3-(2’-(2”-甲氧基乙氧基)乙氧基)-4-硝基苯甲酸酯(6.0g,0.020mol)的甲醇溶液于H2氣中攪拌20h。反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過(guò)濾，濃縮，得到灰白色固體(5.0g,93％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.55(d,J=8.7,2.4Hz,1H),7.47(d,J=1.8Hz,1H),6.67(d,J=8.7Hz,1H),4.22(t,J=4.8Hz,2H),3.87(m,2H),3.85(s,3H),3.70(t,J=4.8Hz,2H),3.58(t,J=4.8Hz,2H),3.39(s,3H).C13H19NO5的MS計(jì)算值為269.1；實(shí)際值為270.1(M+H)+。
將4-氨基-3-(2’-(2”-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯甲酸酯(5.0g,18.6mmol)和環(huán)氧乙烷(8.8g,200mol)在乙酸(150ml)中的反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?2小時(shí)。用H2O(300ml)稀釋，氯仿/甲醇(95/5,4×200ml)抽提。有機(jī)溶液經(jīng)濃縮得灰白色油(6.1g,92％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.62(dd,J=8.l,2.1Hz,1H),7.52(d,J=2.1Hz,1H),7.05(d,J=7.2Hz,1H),4.22(m,4H),3.89(s,3H),3.9-3.8(m,4H),3.68(m,6H),3.58(m,2H),3.38(m,2H),3.37(s,1H).C17H27NO7的ESMS計(jì)算值為357.2；實(shí)際值為358.3(M+H)+。
向室溫?cái)嚢璧募谆?-雙(2’-羥乙基)氨基-3-(2’-(2”-甲氧基乙氧基)乙氧基)笨甲酸酯(5.0g,13.3mol)之苯溶液(100ml)中緩慢加入亞硫酰氯(5.1ml,68mmol)。之后將反應(yīng)室溫?cái)嚢?6小時(shí)。再將反應(yīng)混合物用冰/H2O(500ml)處理，并用乙酸乙酯(2×300ml)抽提。合并的乙酸乙酯溶液用碳酸氫鈉(20ml)、H2O(50ml)洗滌，在硫酸鎂上干燥，并經(jīng)濃縮得到灰白色油(3.9g,74％)。1H NMR(300MHz,CDCl3)7.58(dd,J=8.7,2.1Hz,1H),7.49(d,J=2.1Hz,1H),6.88(d,J=8.1Hz,1H),4.18(m,2H),3.87(m,2H),3.86(s,3H),3.69(m,2H),3.63(m,8H),3.56(m,2H),3.37(s,1H).C17H25Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為393.1；實(shí)際值為395.2(M+H)+。
甲基4-雙(2’-氯乙基)氨基-3-(2’-(2”-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯甲酸酯(3.0g,7.64mmol)在濃鹽酸(37％重量比的H2O溶液，50ml)中的懸浮液于氮?dú)庀禄亓骷訜?小時(shí)。。反應(yīng)混合物用冰/H2O(100ml)處理，氯仿抽提(2×100ml)。濃縮有機(jī)溶液，得到白色固體(2.8g,97％)。1H NMR(300MHz,CDCl3):7.68(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.55(d,J=2.1Hz,1H),6.92(d,J=8.7Hz,1H),4.22(m,1H),3.89(m,2H),3.67(m,10H),3.62(m,2H),3.39(s,3H).C16H23Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為379.1；實(shí)際值為408.2(M+H)+。
(3)將分部(1)和(2)的中間產(chǎn)物偶聯(lián)利用如實(shí)施例1分部(3)中所述的相同方法。1H NMR:δ7.58(dd,J=8.7,2.1Hz,1H),7.9(d,J=2.1Hz,1H),6.88(d,J=8.1Hz,1H),5.26(s,2H),1.8(m,2H),3.87(m,2H),3.69(m,2H),3.63(m,8H),3.56(m,2H),3.37(s,3H),2.12(s,3H),2.05(s,3H),2.02(s,3H).C26H33Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為52.2；實(shí)際值為53.1(M+H)+。
以下化合物用類似于上述這些實(shí)施例的方法合成。
實(shí)施例8化合物8的合成1H NMR:δ7.59(dd,J=8.,2.1Hz,1H),7.1(d,J=2.1Hz,1H),6.88(d,J=8.Hz,1H),5.23(s,3H),3.87(d,J=6.6Hz,2H),2.63(q,J=7.2Hz,H),3.65(s,8H),1.30(m,1H),1.10(t,J=7.2Hz,6H),0.68(m,2H),0.38(m,2H).C28H36Cl2N2O5的ESMS計(jì)算值為551.2；實(shí)際值為552.1(M+H)+。
實(shí)施例9化合物9的合成1H NMR:δ7.58(dd,J=8.7,2.1Hz,1H),7.49(d,J=2.1Hz,1H),6.88(d,J=8.1Hz,1H),5.06(q,J=7Hz,1H),3.92(t,7Hz,1H),3.63(m,8H),3.56(m,2H),2.12(s,2H),2.05(s,2H),2.02(s,3H),1.80(m,2H),1.45(s,2H),1.00(d,J=7Hz,3H).C26H33Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為510.1；實(shí)際值為511.2(M+H)+。
實(shí)施例10化合物10的合成1H NMR:δ7.62(dd,J=8.,2.1Hz,1H),7.5(d,J=2.1Hz,1H),37.30(d,J=Hz,1H),6.85(d,J=8.Hz,1H),6.0(d,J=Hz,1H),625(d,J=Hz,1H),5.23(s,2H),.50(S,2H),3.85(s,6H),3.65(s,8H),2.05(s,3H),2.00(s,3H).C27H30Cl2N2O6的ESMS計(jì)算值為59.2；實(shí)際值為550.1(M+H)+。
實(shí)施例11化合物11的合成1H NMR:δ7.58(dd,J=8.7,2.1Hz,1H),7.9(d,J=2.1Hz,1H),6.88(d,J=8.1Hz,1H),5.26(s,2H),.13(m,2H),3.92(s,3H),3.87(m,2H),3.69(m,2H),3.63(m,8H),3.56(m,2H),3.37(s,3H),2.05(s,3H),2.02(s,3H)C26H33Cl2NO8的ESMS計(jì)算值為558.2；實(shí)際值為559.1(M+H)+。
實(shí)施例12化合物12的合成1H NMR:δ7.52(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.7(d,J=2.1Hz,1H),7.7(d,J=2.1Hz,1H),6.86(d,J=8.1Hz,1H),5.25(s,2H),3.98(d,J=6.9Hz,2H),3.60(m,8H),2.82(m,1H),2.25-2.1(m,2H),2.18(s,3H),2.05(s,3H),2.0(s,3H),2.0-1.7(m,H).C26H33Cl2NO8的ESMS計(jì)算值為558.2；實(shí)際值為559.1(M+H)+。
實(shí)施例13化合物13的合成1H NMR:δ7.59(dd,J=8.4,2.1Hz,1H),7.1(d,J=2.1Hz,1H),6.88(d,J=8.4Hz,1H)5.23(s,3H),3.87(d,J=6.6Hz,2H),2.63(q,J=7.2Hz,H),3.65(s,8H),2.15(s,3H),2.08(s,3H),2.0(s,3H),1.30(m,1H),1.10(t,J=7.2Hz 6H),0.68(m,2H),0.38(m,2H).C28H36Cl2N2O5的ESMS計(jì)算值為551.2；實(shí)際值為552.1(M+H)+。
實(shí)施例14化合物14的合成1H NMR:δ7.4(dd,J=8.7,1.8Hz,1H),7.0(d,J=1.8Hz,1H),6.75(d,J=8.7Hz,1H)5.38(s,2H),3.96(t,J=6.6Hz,2H),3.56(m,8H),2.08(s,3H),2.0(s,3H),1.80(m,2H),1.8(m,2H),0.99(t,J=7.2Hz,3H).C25H29Cl2N3O5的ESMS計(jì)算值為522.2；實(shí)際值為523.1(M+H)+。
實(shí)施例15化合物15的合成1H NMR:δ7.4(dd,J=8.7,1.8Hz,1H),7.0(d,J=1.8Hz,1H),6.75(d,J=8.7Hz,1H),5.38(s,2H),.67(m,2H),3.96(t,J=6.6Hz,2H),3.91(s,3H),3.56(m,8H),2.23(s,3H),2.08(s,3H),1.80(m,2H),1.8(m,2H),0.99(t,J=7.2Hz,3H),C28H3Cl2N2O6的ESMS計(jì)算值為565.2；實(shí)際值為566.1(M+H)+。
實(shí)施例16化合物16的合成1H NMR:δ7.4(dd,J=2.19,2.19Hz,1H),7.63(m,1H),6.65(d,J=8.52,1H),5.22(s,2H),3.8(m,8H),2.31(s,3H),2.15(s,3H)2.(s,3H),2.0(s,3H).C22H25Cl2NO的ESMS計(jì)算值為38.31；實(shí)際值為39.0(M+H)+。
實(shí)施例17化合物17的合成1H NMR:δ7.76(dd,J=8.and1.8Hz,1H),7.68(d,J=1.8Hz,1H),6.98(d,J=8.Hz,1H),5.30(s,2H),3.53(brs,8H),2.35(s,3H),2.18(s,3H),2.0(s,3H),2.02(s,3H).C22H25Cl2NO的ESMS計(jì)算值為22.1；實(shí)際值為823.1(M+H)+。
實(shí)施例18化合物18的合成1H NMR:δ7.70(dd,J=8.,1.8Hz,1H),7.65(d,J=1.8Hz.1H),6.86(d,J=8Hz,1H),5.25(s,3H),3.90(s,3H),3.50(s,8H),2.18(s,3H),2.06(s,3H),2.05(s,3H).C22H25Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為53.l；實(shí)際值為5.1(M+H)+。
實(shí)施例19化合物19的合成1H NMR:δ7.76(dd,J=8.and1.8Hz,1H),7.68(d,J=1.8Hz,1H),6.98(d,J=8.Hz,1H),5.22(s,2H),3.68-3.80(brm,H),3.53(brs,8H),3.6(t,J=5.0Hz,2H),2.58-2.6(bm,H),2.0(s,3H),2.02(s,3H),1.86(J=5.0Hz,2H),1.30(m,10H),0.89(t,J=6.9Hz,3H).C31HCl2N2O6的ESMS計(jì)算值為611.2；實(shí)際值為612.1(M+H)+。
實(shí)施例20化合物20的合成1H NMR:δ7.4(dd,J=2.19,2.19Hz,1H),7.63(m,1H),6.65(d,J=8.52,1H),5.22(s,2H),3.90(s,3H),3.8(m,8H),2.0(t,J=7Hz),2.15(s,3H),2.0(s.3H),2.0(s,3H),1.65(m,2H),1.3(m,2H),0.92(t,J=8Hz).C26H32Cl2N2O6的ESS計(jì)算值為539.2；實(shí)際值為50.1(M+H)+。
實(shí)施例21化合物21的合成1H NMR:δ7.4(dd,J=2.19,2.19Hz,1H),7.63(m,1H),7.20(m,5H),6.65(d,J=8.52,1H),5.22(s,2H),5.18(s,2H),3.80(s,6H),3.8(m,8H),2.15(s,3H),2.(s,3H),2.0(s,3H).C30H33Cl2N3O6的ESMS計(jì)算值為502.2；實(shí)際值為603.1(M+H)+。
實(shí)施例22化合物22的合成1H NMR:δ8.20(d,J=7.0Hz,1H),8.11(d,J=7.0Hz,1H),7.70(dd,J=8.,1.8Hz),7.65(d,J=1.8Hz,1H),7.53(m,2H),6.86(d,J=8.Hz,1H),5.25(s,3H),3.90(s,3H),3.50(s,8H),2.18(s,3H).C2H23Cl2NO5的ESMS計(jì)算值為76.1；實(shí)際值為77.0(M+H)+。
實(shí)施例23化合物23的合成1H NMR:δ7.76(dd,J=8.4,1.8Hz,1H),7.55(d,J=1.8Hz,1H),7.02(s,1H),6.86(d,J=8.Hz,1H),5.23(s,2H),3.90(s,3H),3.50(s,8H),2.26(s,3H),2.03(s,3H).C23H23Cl2NO6的ESMS計(jì)算值為80.1；實(shí)際值為81.2(M+H)+。
實(shí)施例241H NMR:δ7.4(dd,J=8.7,1.8Hz,2H),7.0(d,J=1.8Hz,2H),6.75(d,J=8.7Hz,2H)5.38(s,H),3.96(t,J=6.6Hz,H),3.56(m,16H),1.80(sexet,J=7.5Hz,H),1.8(sexet,J=7.5Hz,H),0.99(t,J=7.2Hz,6H).C0H50ClN2O8的ESMS計(jì)算值為826.2；實(shí)際值為827.1(M+H)+。
實(shí)施例25化合物25的合成1H NMRδ7.80(dd,J=2.19and2.19Hz,1H),7.53(m,1H),6.6(d,J=8.52,1H),5.22(s,2H),3.80(s,3H),3.8(m,8H),2.3(s,3H),2.31(s,3H),2.15(s,3H),2.(s,3H).C2H28Cl2N2O的ESMS計(jì)算值為08.2；實(shí)際值為09.1(M+H)+。
實(shí)施例26生物學(xué)檢驗(yàn)將裸鼠體內(nèi)能生長(zhǎng)為實(shí)體瘤的人乳腺癌(MDA-35)腫瘤細(xì)胞通過(guò)注射一種腫瘤細(xì)胞在介質(zhì)中的懸浮液(3-5×106細(xì)胞)而植入雌性裸鼠(Taconic實(shí)驗(yàn)室)的脂肪足墊。每組5只小鼠。移植的兩至三周后，當(dāng)腫瘤長(zhǎng)至可觸及時(shí)，給動(dòng)物靜脈注射本發(fā)明的細(xì)胞毒化合物，每周三次，以MTD的劑量。期間以及停藥后兩周內(nèi)每周用卡尺測(cè)量腫瘤的體積。半橢圓形的腫瘤體積用以下等式計(jì)算體積=1/2(L/2×W/2×H)/3π其中L為腫瘤的長(zhǎng)度，W為腫瘤的寬度，H為腫瘤的高度。試驗(yàn)期間對(duì)動(dòng)物稱體重并監(jiān)控一般性健康狀況。當(dāng)腫瘤直徑達(dá)到約15mm(約800mm3)或腫瘤壞死或動(dòng)物瀕臨死亡時(shí)，將該動(dòng)物用CO2窒息法行安樂(lè)死。
計(jì)算用本發(fā)明的各種細(xì)胞毒化合物處理的動(dòng)物體內(nèi)的腫瘤體積，并與用chlorumbucil(一種含有芳香族氮芥的抗癌藥物)處理的動(dòng)物以及未處理的動(dòng)物的腫瘤體積進(jìn)行比較。所測(cè)的本發(fā)明細(xì)胞毒化合物經(jīng)證實(shí)在抑制腫瘤生長(zhǎng)方面有出乎意料的高效力。
其它實(shí)施方案本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)如上所述輕易地明了本發(fā)明的本質(zhì)特征，并且在不違背其宗旨或超出其范圍的前提下，可以對(duì)本發(fā)明作出各種改變和修飾以適應(yīng)各種應(yīng)用和具體情況。例如，含有雜原子的接頭如-CH=N-CH2-或-N=N-CH2-，盡管在上文中沒(méi)有描述，但也能作為本發(fā)明細(xì)胞毒化合物的共軛體系的一部分使用。因此，其它實(shí)施方案也均包括在權(quán)利要求范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1．一種化合物或其鹽，其由帶有吸電子基團(tuán)的活化前烷基化部分、含有至少兩個(gè)雙鍵的生物還原性部分、以及將該活化前烷基化部分與該生物還原性部分連接的接頭組成，其中所述接頭為亞甲基，含雙鍵的C3烴鏈，含有兩個(gè)可替換雙鍵的C5烴鏈；所述生物還原性部分的雙鍵，當(dāng)接頭為亞甲基時(shí)通過(guò)它們自己，或與C3接頭的雙鍵或C5接頭的雙鍵一起形成共軛體系，該體系可通過(guò)使該生物還原性部分還原而使電子從該生物還原性部分流向該活化前烷基化部分的吸電子基團(tuán)，從而打斷吸電子基團(tuán)與接頭之間的鍵并使該活化前烷基化部分轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚酝榛衔铩?br> 2．權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中所述活化前烷基化部分為取代有酯、氨基甲酸乙酯、或碳酸酯的芳基，和取代有雙(鹵以及)氨基的芳基；而該芳基的其它每一位置各自可任選地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、寡聚亞烷基二醇、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、酯、酰氨基、芳烷氧基羰基氨基、脲基、硫代基、硫代烷基、硫代芳基、硫代芳烷基、硫代雜芳基、或硫代雜芳烷基取代。
3．權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中所述生物還原性部分經(jīng)還原可成為烷基化化合物。
4．權(quán)利要求3的化合物或其鹽，其中所述生物還原性部分是醌，所述醌的每個(gè)非氧位置各自可任選地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、羧酸酯、酰氧基烷基、酯、酰氧基烷基、酰氨基、酰氨烷基、硫酰氨基、磺胺基、硫代基、硫代烷基、硫代芳基、硫代芳烷基、硫代雜芳基、或硫代雜芳烷基取代；如果2-C和3-C位置或5-C和6-C位置均有取代，那么可任選地將這兩個(gè)取代基連接在一起形成一個(gè)任選取代的環(huán)。
5．權(quán)利要求4的化合物或其鹽，其中所述醌的每個(gè)非氧位置各自任選地取代有烷基、氨基、氨烷基、烷氧基、酰氧基烷基、或羥基烷基。
6．權(quán)利要求5的化合物或其鹽，其中所述活化前烷基化部分為取代有互為間位或?qū)ξ坏孽セ碗p(氯乙基)氨基的苯基；該苯基上其它每一位置各自可任選地取代有烷基、烷氧基、寡聚亞烷基二醇、芳氧基、雜芳氧基、或氨基。
7．權(quán)利要求6的化合物或其鹽，其中所述苯基在所述雙(氯乙基)氨的鄰位取代有烷基、烷氧基、或寡聚亞烷基二醇。
8．權(quán)利要求4的化合物或其鹽，其中2-C和3-C位或5-C和6-C位均已取代，且這兩個(gè)取代基連接在一起形成一個(gè)可任選地取代的環(huán)。
9．權(quán)利要求8的化合物或其鹽，其中所述活化前烷基化部分是取代有互為間位或?qū)ξ坏孽セ碗p(氯乙基)氨基的苯基；而該苯基上其它每一位置各自可任選地取代有烷基、烷氧基、寡聚亞烷基二醇、芳氧基、雜芳氧基、或氨基。
10．權(quán)利要求9的化合物或其鹽，其中所述苯基在雙(氯乙基)氨的鄰位取代有烷基、烷氧基、或寡聚亞烷基二醇。
11．權(quán)利要求4的化合物或其鹽，其中所述活化前烷基化部分為取代有酯、氨基甲酸乙酯、或碳酸酯以及雙(鹵乙基)氨基的苯基；苯基上其它每一位置各自可任選地取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、寡聚亞烷基二醇、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、酯、酰氨基、芳烷氧基羰基氨基、脲基、硫代基、硫代烷基、硫代芳基、硫代芳烷基、硫代雜芳基、或硫代雜芳烷基。
12．權(quán)利要求11的化合物或其鹽，其中所述雙(鹵乙基)氨基為雙(氯乙基)氨基。
13．權(quán)利要求12的化合物或其鹽，其中所述苯基取代有酯。
14．權(quán)利要求13的化合物或其鹽，其中所述酯在雙(氯乙基)氨基的對(duì)位或間位。
15．權(quán)利要求14的化合物或其鹽，其中所述苯基在雙(氯乙基)氨基的鄰位取代有烷基、芳基、雜芳基、烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、或寡聚亞烷基二醇。
16．權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中所述活化前烷基化部分為取代有酯、氨基甲酸乙酯、或碳酸酯和雙(鹵乙基)氨基的苯基；苯基上其它每一位置各自可任選地取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、寡聚亞烷基二醇、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、酯、酰氨基、芳烷氧基羰基氨基、脲基、硫代基、硫代烷基、硫代芳基、硫代芳烷基、硫代雜芳基、或硫代雜芳烷基。
17．權(quán)利要求16的化合物或其鹽，其中所述苯基取代有酯和雙(氯乙基)氨基；且所述酯在所述雙(氯乙基)氨基的對(duì)位或間位。
18．權(quán)利要求17的化合物或其鹽，其中所述苯基在雙(氯乙基)氨基的鄰位取代有烷基、芳基、雜芳基、烷氧基、芳氧基、雜芳氧基、或寡聚亞烷基二醇。
19．權(quán)利要求18的化合物或其鹽，其中所述生物還原性部分為一種醌，該醌的每個(gè)非氧位置各自可任選地取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、氨基、氨烷基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、雜芳氧基、雜芳烷氧基、羧酸酯、酰氧基烷基、酯、酰氧基烷基、酰氨基、酰氨烷基、硫酰氨基、磺胺基、硫代基、硫代烷基、硫代芳基、硫代芳烷基、硫代雜芳基、或硫代雜芳烷基；而且如果2-C和3-C位或5-C和6-C位均有取代，那么這兩個(gè)取代基可任選地連接在一起形成一個(gè)可任選地取代的環(huán)。
20．權(quán)利要求19的化合物或其鹽，其中所述醌的每個(gè)非氧位置各自可任選地取代有烷基、氨基、氨烷基、烷氧基、酰氧基烷基、或羥烷基。
21．權(quán)利要求19的化合物或其鹽，其中2-C和3-C位或5-C和6-C位均有取代而且這兩個(gè)取代基連接在一起形成一個(gè)可任選地取代的環(huán)。
22．具有以下分子式的醌衍生物或其鹽 其中A、B、C、和D各自為-R1、-R-NR1R2、-O-R1、-R-OH、-C(=O)O-R1、-R-O-C(=O)R1、-C(=O)-NR1R2、-R-NR1-C(=O)R2、-SO2-NR1R2、-N=SO2、-S-R1、或-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2；任選地，如果A和B均不是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2，那么A和B一起可與所述醌環(huán)形成一個(gè)5-6元稠環(huán)；如果C和D均不是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2，那么C和D可一起與醌環(huán)形成一個(gè)5-6元稠環(huán)；其中每個(gè)R可各自為烷基或?yàn)槿笔В幻總€(gè)R1和R2各自為氫、烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、或雜芳烷基；L為-(CR3=CR4)n-CR5R6，其中R3、R4、R5、和R6各自為氫、烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、或-(O-烷基)1-5；n為0、1、或2；W為-O-C(=O)-、-O-C(=O)-NR1-、或-O-C(=O)O-；Ph為苯基，可任選地由烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-R-NR1R2、-OH、-(O-烷基)1-5、-O-芳基、-O-芳烷基、-O-雜芳基、-O-雜芳烷基、-R-OH、-C(=0)O-R1、-O-C(=O)-R1、-C(=O)-NR1R2、-NR1-C(=O)-R2、-NR1-C(=O)O-R2、-NR1-C(=O)-NR1R2、或S-R1取代；X為鹵素；條如果A和B，或C和D，均不與醌形成稠環(huán)，那么A、B、C、或D中至少一個(gè)是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2；而且，如果A、B、C、和D無(wú)一為-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2，那么A和B，或C和D與醌環(huán)形成稠環(huán)，其中該稠環(huán)在兩個(gè)環(huán)原子之間含有一個(gè)雙鍵并在這兩個(gè)環(huán)原子之一上取代有-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2，此雙鍵與醌上的雙鍵一起形成一共軛體系。
23．權(quán)利要求22的醌衍生物或其鹽，其中A、B、C、和D各自為-R1、-R-NR1R2、-O-R1、-R-O-C(=O)R1、或-R-OH。
24．權(quán)利要求23的醌衍生物或其鹽，其中W為-O-C(=O)-,X為氯，n為0。
25．權(quán)利要求24的醌衍生物或其鹽，其中W和N(CH2CH2X)2互為對(duì)位或間位。
26．權(quán)利要求25的醌衍生物或其鹽，其中Ph在N(CH2CH2X)2的鄰位取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-(O-烷基)1-5、-O-芳基、-O-芳烷基、-O-雜芳基、-O-雜芳烷基。
27．權(quán)利要求22的醌或其鹽，其中A、B、C、和D中至少一個(gè)是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。
28．權(quán)利要求27的醌衍生物或其鹽，其中A和B，或C和D均不與所述醌環(huán)形成稠環(huán)，而且A、B、C、和D中只有一個(gè)是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。
29．權(quán)利要求28的醌衍生物或其鹽，其中W為-O-C(=O)-，X為氯，n為O,W和N(CH2CH2X)2互為對(duì)位或間位，Ph在N(CH2CH2X)2的鄰位取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-(O-烷基)1-5、-O-芳基、-O-芳烷基、-O-雜芳基、-O-雜芳烷基。
30．權(quán)利要求22的醌衍生物或其鹽，其中A和B或C和D與所述醌環(huán)形成稠環(huán)。
31．權(quán)利要求30的醌衍生物或其鹽，其中W為-O-C(=O)-,X為氯，n為0。
32．權(quán)利要求31的醌衍生物或其鹽，其中W和N(CH2CH2X)2互為對(duì)位或間位。
33．權(quán)利要求32的醌衍生物或其鹽，其中Ph在N(CH2CH2X)2的鄰位取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-(O-烷基)1-5、-O-芳基、-O-芳烷基、-O-雜芳基、-O-雜芳烷基。
34．權(quán)利要求30的醌衍生物或其鹽，其中A、B、C、和D都不是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。
35．權(quán)利要求34的醌衍生物或其鹽，其中W為-O-C(=0)-,X為氯，n為0,W和N(CH2CH2X)2互為對(duì)位或間位，Ph在N(CH2CH2X)2的鄰位取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-(O-烷基)1-5、-O-芳基、-O-芳烷基、-O-雜芳基、-O-雜芳烷基。
36．權(quán)利要求35的醌衍生物或其鹽，其中W為-O-C(=O)-,X為氯，n為0。
37．權(quán)利要求36的醌衍生物或其鹽，其中W和N(CH2CH2X)2互為對(duì)位或間位。
38．權(quán)利要求37的醌衍生物或其鹽，其中Ph在N(CH2CH2X)2的鄰位取代有烷基、鏈烯基、芳基、芳烷基、雜芳基、雜芳烷基、-(O-烷基)1-5、-O-芳基、-O-芳烷基、-O-雜芳基、-O-雜芳烷基。
39．權(quán)利要求38的醌衍生物或其鹽，其中A、B、C、和D各自為-R1、-R-NR1R2、-O-R1、-R-O-C(=0)R1、或-R-OH。
40．權(quán)利要求39的醌或其鹽，其中A、B、C、和D中至少一個(gè)是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。
41．權(quán)利要求40的醌衍生物或其鹽，其中A和B，或C和D均不與所述醌環(huán)形成稠環(huán)，而且A、B、C、和D中只有一個(gè)是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。
42．權(quán)利要求38的醌衍生物或其鹽，其中A和B或C和D與所述醌環(huán)形成稠環(huán)。
43．權(quán)利要求42的醌衍生物或其鹽，其中A、B、C、和D中都不是-L-W-Ph-N(CH2CH2X)2。
44．權(quán)利要求22的醌衍生物，具有以下結(jié)構(gòu)
45．權(quán)利要求22的醌衍生物，具有以下結(jié)構(gòu)
全文摘要
一種化合物,其由帶有吸電子基團(tuán)的活化前烷基化部分、含有至少兩個(gè)雙鍵的生物還原性部分、以及將該活化前烷基化部分與該生物還原性部分連接的接頭組成。
文檔編號(hào)C07D235/00GK1302287SQ99806490
公開(kāi)日2001年7月4日 申請(qǐng)日期1999年5月20日 優(yōu)先權(quán)日1998年5月22日
發(fā)明者小野光則, 古屋圭三, 孫利軍, 和田裕美子, 沃杰西克·羅納, 納塔利·戴爾斯, 陶雪良, 西爾維亞·霍爾登 申請(qǐng)人:鹽野義生物研究公司