專利名稱：：吡啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及具有神經(jīng)營養(yǎng)因子作用的吡啶衍生物和它的鹽。近年來不斷增加的阿爾茨海默型早老性癡呆癥顯示出作為大腦基底核神經(jīng)細(xì)胞的乙酰膽堿能的神經(jīng)原的變性、脫落與記憶障礙、智力活動低下有密切的關(guān)系[“WitehorseScience”、第215卷、第1237頁(1982)]。有報(bào)告說NGF不僅抑制因纖維中斷引起的中樞性乙酰膽堿能的神經(jīng)原的變性、脫落[Korsing等人著、“NeccroscienceLett”、第66卷、第175頁(1986年)]和改善老齡大鼠迷路學(xué)習(xí)障礙，而且抑制乙酰膽堿能的神經(jīng)細(xì)胞的萎縮[茂野卓等人著、“醫(yī)學(xué)進(jìn)展”、第145卷、第579頁(1986)]。這些工作表明NGF有可能成為阿爾茨海默型早老性癡呆的治療藥。同時(shí)已證實(shí)NGF也可防止腦缺血大鼠的海馬神經(jīng)細(xì)胞的死亡，所以可認(rèn)為NGF作為腦中風(fēng)后遺癥治療藥也是很有用的。另外NGF具有加速末梢神經(jīng)損傷恢復(fù)的作用，很清楚它也可用作末稍神經(jīng)損傷的治療藥。除了NGF之外還發(fā)現(xiàn)了很多顯示出維持細(xì)胞生存和功能作用或變性修復(fù)活性的生物體成分，稱之為神經(jīng)營養(yǎng)因子。人們認(rèn)為，這些神經(jīng)營養(yǎng)因子作為伴隨細(xì)胞變性而引起的中樞性神經(jīng)損傷和末稍神經(jīng)損傷的治療藥是很有用的。蛋白質(zhì)用作中樞神經(jīng)損傷治療藥時(shí)，從其物理特性判斷，必需直接向腦室內(nèi)給藥，在實(shí)用中問題很多。因此，人們期待著更簡單的給藥方法以及具有神經(jīng)營養(yǎng)因子作用的低分子化合物的治療藥。本發(fā)明的目的就在于提供具有神經(jīng)營養(yǎng)因子作用的新的化合物。本發(fā)明人為達(dá)到上述目的，對很多化合物進(jìn)行了各種研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了某種吡啶衍生物是具有神經(jīng)營養(yǎng)因子作用的化合物，完成了本發(fā)明。即，本發(fā)明是式(I)表示的吡啶衍生物或它的鹽，-CONHCH2CH2N(CH3)2(II)-1-CONHCH2CH2CH2N(CH3)2(II)-2-COOCH2CH2N(CH3)2(II)-3-COOCH2CH2N(CH2CH3)2(II)-4-NHCOCH2N(CH3)2(II)-5-NHCOCH2N(CH2CH3)2(II)-6以及式(III)表示的吡啶衍生物或它的鹽，(式中R2代表氨基或式(IV)-1～(IV)-5中任一個(gè)表示的官能團(tuán)]。-CONHCH2CH2N(CH3)2(IV)-1-COOCH2CH2N(CH3)2(IV)-3-NHCOCH2N(CH3)2(IV)-4-NHCOCH2N(CH2CH3)2(IV)-5本發(fā)明中，所說的吡啶衍生物的鹽是指藥理學(xué)上容許的吡啶衍生物，例如是與鹽酸、硫酸、磷酸、硝酸等無機(jī)酸形成的鹽，或是與檸檬酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸等有機(jī)酸形成的鹽。本發(fā)明的化合物例如可以按以下所示方法制造。即，首先通過使式(V)所示的化合物與式(VI)表示的化合物于堿存在條件下縮合可得到式[VII]表示的化合物?？s合反應(yīng)中使用的堿有氫氧化鉀、氫氧化鈉、甲醇鈉、叔丁醇鉀、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀等，反應(yīng)溶劑可單獨(dú)使用甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、叔丁醇，或加水后再用。反應(yīng)溫度可在0℃至使用的溶劑的沸點(diǎn)之間選擇合適的溫度。接下來通過使式(VII)化合物與式(VIII)代表的化合物于乙酸銨存在下進(jìn)行反應(yīng)可得到式(IX)代表的化合物。這里使用的乙酸銨是式(VII)化合物的1-10倍的摩爾量，反應(yīng)溶劑可使用甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、叔丁醇、乙酸等。反應(yīng)溫度可在室溫至使用溶劑沸點(diǎn)之間選擇合適的溫度。1)式(I)中R1是式(II)-1～(II)-4中任一式表示的官能團(tuán)的化合物以及式(III)中R2為式(IV)-1～(IV)-3中任一式表示的官能團(tuán)的化合物可如下制造。即首先使鹵化劑作用于用上述方法得到的式(X)表示的吡啶衍生物，形成?；u化物，再使相應(yīng)的胺或醇與該鹵化物反應(yīng)，就可得到上述化合物。這里提到的鹵化劑例如可以用亞硫酰二氯、五氯化磷、磷酰氯、草酰氯、亞硫酰二溴、三溴化磷等。2)式(I)中R1為式(II)-5和(III)-6中任一式表示的官能團(tuán)的化合物以及式(III)中R2為氨基或式(IV)-4或(IV)-5任一個(gè)表示的官能團(tuán)的化合物可如下制造。即，首先將用上述方法得到的式(XI)表示的吡啶衍生物的乙酰胺基在酸或堿存在下水解，得到帶有胺基的化合物，然后使它與氯代乙酰氯反應(yīng)，進(jìn)行酰胺化，再與相應(yīng)的胺反應(yīng)就可得到本發(fā)明化合物。附圖的簡單說明。圖1表示化合物14和對照檢測樣品1對大鼠中大腦動脈閉塞模型的腦梗塞病灶面積的作用。實(shí)施本發(fā)明的最好狀態(tài)本發(fā)明的吡啶衍生物可經(jīng)口或不經(jīng)過口給藥。給藥量因藥物不同而各有不同，對成人來說，每天1～1000mg比較合適。經(jīng)口給藥時(shí)，首先使藥物與賦形劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、抗氧化劑、包衣劑、著色劑、矯味矯臭劑、表面活性劑、增塑劑等混合，以顆粒、散劑、膠囊、片劑形式給藥，非經(jīng)口給藥時(shí)以注射液、輸液劑或栓劑形式給藥。制備上述制劑時(shí)，可使用通常的制劑方法。實(shí)施例以下，舉些實(shí)施例、參考例更詳細(xì)地說明本發(fā)明。表1，2給出了本實(shí)施例的吡啶衍生物的結(jié)構(gòu)式。表1表2參考例1(E)-3-(4-羧苯基)-1-苯基-2-丙烯-1-酮向乙酰苯8.00g、對苯二甲醛10.00g和40ml乙醇的混合物中于0℃攪拌下滴加4.10g氫氧化鉀溶于50ml水的溶液，然后再在0～10℃下攪拌6小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后加入3N的鹽酸，使溶液成酸性，過濾生成物。用乙醇重結(jié)晶，得到11.93g標(biāo)題化合物。用與乙酰苯相當(dāng)?shù)娜?，通過與上述實(shí)質(zhì)上同樣的操作，可得到以下化合物。(E)-3-(3-羧苯基)-1-苯基-2-丙烯-1-酮(E)-1-(3-羧苯基)-3-(4-甲基苯基)-2-丙烯-1-酮(E)-1-(4-羧苯基)-3-(4-甲基苯基)-2-丙烯-1-酮(E)-3-(4-乙酰胺基苯基)-1-苯基-2-丙烯-1-酮(E)-1-(3-乙酰胺基苯基)-3-(4-甲基苯基)-2-丙烯-1-酮(E)-1-(4-乙酰胺基苯基)-3-(4-甲基苯基)-2-丙烯-1-酮參考例24-(4-羧苯基)-2，6-二苯基吡啶向參考例1得到的5.00g(E)-3-(4-羧苯基)-1-苯基-2-丙烯-1-酮、5.51g苯酰溴化吡啶鎓和7.63g乙酸銨中加入40ml甲醇，回流12小時(shí)。冷卻后，過濾生成物，通過乙醇重結(jié)晶可得到標(biāo)題化合物3.90g。使用相當(dāng)?shù)摩粒?不飽和酮替代(E)-3-(4-羧苯基)-1-苯基-2-丙烯-1-酮進(jìn)行實(shí)質(zhì)上與上述同樣的操作，得到如下化合物。4-(3-羧苯基)-2，6-二苯基吡啶2-(3-羧苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶2-(4-羧苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶4-(4-乙酰胺基苯基)-2，6-二苯基吡啶2-(3-乙酰胺基苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶2-(4-乙酰胺基苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶參考例34-(4-氨基苯基)-2，6-二苯基吡啶參照參考例2，向得到的4-(4-乙酰胺苯基)-2，6-二苯基吡啶1.50g中加入1.50g氫氧化鈉、100ml乙醇和10ml水，回流46小時(shí)。冷卻后，加100ml水，過濾生成物，用乙醇重結(jié)晶，得到1.17g標(biāo)題化合物。實(shí)施例1N-[2-(二甲胺基)乙基]-4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺(化合物5)。將參考例2得到的4-(4-羧苯基)-2，6-二苯基吡啶1.00g溶解于50ml甲苯，加入0.62ml亞硫酰氯，回流2小時(shí)。減壓蒸餾除去甲苯和過量的亞硫酰氯，得到酰氯，然后再加入50ml氯仿，冰冷攪拌下，滴入含有0.34mlN，N-二甲基乙二胺的10ml氯仿溶液，然后再于室溫下攪拌30分鐘。依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、水、飽和食鹽水洗滌該反應(yīng)液，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸餾除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯-己烷重結(jié)晶。得到標(biāo)題化合物0.65g。m.p.143.5～144.0℃用相當(dāng)?shù)膸в恤然倪拎ぱ苌锖桶诽娲?-(4-羧苯基)-2，6-二苯基吡啶和N，N-二甲基乙二胺，進(jìn)行實(shí)質(zhì)上與上述同樣的操作，得到以下化合物。N-[2-(二甲胺基)乙基]-3-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺(化合物1)m.p.162.5～164.5℃N-[3-(二甲胺基)丙基]-3-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺(化合物3)m.p.143.0～145.0℃N-[3-(二甲胺基)丙基]-4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺(化合物7)m.p.100.0～102.0℃N-[2-(二甲胺基)乙基]-4-[4-甲基苯基]-6-苯基-2-吡啶基)苯甲酰胺(化合物17)m.p.149.7～150.6℃4-(4-甲基苯基)-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)苯基]-6-苯基吡啶(化合物19)m.p.133.0～134.5℃實(shí)施例24-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酸2-(二甲胺基)乙酯(化合物9)將參考例2得到的4-(4-羧苯基)-2，6-二苯基吡啶0.60g溶解于50ml甲苯，加入亞硫酰氯0.37ml回流5小時(shí)。減壓蒸餾除去甲苯和過量的亞硫酰氯得到酰氯。向其中加入20ml氯仿，冰冷攪拌下滴入含有0.19mlN，N-二甲基乙醇胺的氯仿5ml，然后于室溫下攪拌17小時(shí)，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、水、飽和食鹽水洗滌該反應(yīng)液，最后用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸餾除去溶劑，殘余物用柱色譜法(展開溶劑；二氯甲烷∶甲醇＝20∶1)純化，得到標(biāo)題化合物0.41g。m.p.104.7～105.7℃用帶有相應(yīng)羧基的吡啶衍生物和N，N-二烷基乙醇胺代替4-(4-羧苯基)-2，6-二苯基吡啶和N，N-二甲基乙醇胺進(jìn)行實(shí)質(zhì)上與上述同樣的操作，得到以下化合物。4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酸2-(二乙胺基)乙酯(化合物11)m.p.207.00～209.0℃(分解)4-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯甲酸2-(二甲胺基)乙酯(化合物21)m.p.117.2～118.8℃實(shí)施例32-(4-氨基苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶(化合物28)參照參考例2，向得到的2-(4-乙酰胺基苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶3.05g中加入3N鹽酸70ml，回流2小時(shí)。冷卻后加入10％氫氧化鈉水溶液使其成堿性，用乙酸乙酯萃取，再依次用水、飽和食鹽水洗滌后，用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸餾除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯-正己烷重結(jié)晶，得到2.26g標(biāo)題化合物。m.p.137.0～139.0℃用相應(yīng)的帶有乙酰胺基的吡啶衍生物替代2-(4-乙酰胺基苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶進(jìn)行實(shí)質(zhì)上與上述同樣的操作，得到以下的化合物。2-(3-氨基苯基)-4-(4-甲基苯基)-6-苯基吡啶(化合物23)m.p.132.5～134.0℃實(shí)施例42-二甲胺基-N-[4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯基]乙酰胺(化合物13)(1)向參考例3中得到的4-(4-氨基苯基)-2，6-二苯基吡啶1.30g中加入氯仿50ml，冰冷攪拌下滴入含有0.32ml的氯代乙酰氯的10ml氯仿，于室溫下攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)液依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、水、飽和食鹽水洗滌，然后用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸餾除去溶劑，剩余物用乙酸乙酯-正-己烷重結(jié)晶，得到1.33g2-氯-N-[4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯基]乙酰胺。m.p.214.5～215.2℃(2)將上述得到的2-氯-N-[4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯基]乙酰胺0.87g溶解于50ml甲醇中，加入2.24ml50％二甲胺水溶液，回流7小時(shí)。減壓蒸餾除去溶劑，殘余物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取。依次用水、飽和食鹽水洗滌后，再用無水硫酸鈉干燥。減壓蒸餾除去溶劑，殘余物用乙酸乙酯-正-己烷重結(jié)晶，得到0.81g標(biāo)題化合物。m.p.173.5～174.9℃用帶有相應(yīng)氨基的吡啶衍生物和胺替代4-(4-氨基苯基)-2，6-二苯基吡啶和二甲胺，進(jìn)行實(shí)質(zhì)上與上述同樣的操作，得到以下化合物。2-二甲胺基-N-[[3-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯基]乙酰胺(化合物24)m.p.118.0～120.0℃2-二甲胺基-N-[[4-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯基]乙酰胺(化合物29)m.p.130.8～132.82-二乙胺基-N-[4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯基]乙酰胺(化合物15)1HNMR(CDCl3)δ(ppm)；1.13(6H，t，J＝7.1Hz)、2.69(4H，quart.，J＝7.2Hz)、3.20(2H，s)、7.41～7.57(6H，m)、7.76(4H，s)、7.88(2H，s)、8.17～8.23(4H，m)、9.57(1H，br.s)。MS(EI)435(M+)2-二乙胺基-N-[[3-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯基]乙酰胺(化合物26)1HNMR(CDCl3)δ(ppm)；1.13(6H，t，J＝7.1Hz)、2.45(3H，s)、2.69(4H，quart.，J＝7.2Hz)、3.20(2H，s)、7.32～8.30(15H，m)、9.53(1H，br.s)MS(CI)450(M+1)實(shí)施例5N-[2-(二甲胺基)乙基]-4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺二鹽酸鹽(化合物6)向?qū)嵤├?得到的N-[2-(二甲胺基)乙基]-4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺0.50g、乙酸乙酯30ml的混合物中攪拌下加入4N鹽酸-乙酸乙酯溶液1.50ml，室溫下攪拌10分鐘，經(jīng)過濾得到結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物0.46g。m.p.250.0～251.5℃(分解)用相應(yīng)的吡啶衍生物代替N-[2-(二甲胺基)乙基]-4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺，進(jìn)行實(shí)質(zhì)上與上述同樣操作，獲得如下化合物。N-[2-(二甲胺基)乙基]-3-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺二鹽酸鹽(化合物2)m.p.135.0～137.0℃N-[3-(二甲胺基)丙基]-3-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺二鹽酸鹽(化合物4)m.p.119.0～121.0℃N-[3-(二甲胺基)丙基]-4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酰胺二鹽酸鹽(化合物8)m.p.242.0～244.0℃4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酸2-(二甲胺基)乙酯二鹽酸鹽(化合物10)m.p.203.0～205.0℃4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯甲酸2-(二乙胺基)乙酯二鹽酸鹽(化合物12)m.p.204.0～206.0℃2-二甲胺基-N-[4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯基]乙酰胺二鹽酸鹽(化合物14)m.p.232.0～234.0℃MS(EI)；407(M+-2HCl)1HNMR(DMSO-d6)δ(ppm)；2.91(6H，d，J＝3.5Hz)、4.25(2H，d，J＝3.9Hz)、7.45～7.62(6H，m)、7.86(2H，d，J＝8.8Hz)、8.12(2H，d，J＝8.6Hz)、8.21(2H，s)、8.33(4H，dd，J＝8.0，1.5Hz)1013(1H，brs)、11.25(1H，s)2-二乙胺基-N-[4-(2，6-二苯基-4-吡啶基)苯基]乙酰胺二鹽酸鹽(化合物16)m.p.236.0～238.0℃N-[2-(二甲胺基)乙基]-4-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯甲酰胺二鹽酸鹽(化合物18)m.p.221.0～223.0℃4-(4-甲基苯基)-2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)苯基]-6-苯基吡啶二鹽酸鹽(化合物20)m.p.167.0～169.0℃4-[4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯甲酸2-(二甲胺基)-乙酯鹽酸鹽(化合物22)m.p.106.0～108.0℃2-二甲胺基-N-[[3-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯基]乙酰胺二鹽酸鹽(化合物25)m.p.143.0～145.0℃2-二乙胺基-N-[[3-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯基]乙酰胺二鹽酸鹽(化合物27)m.p.123.0～125.0℃2-二甲胺基-N-[[4-[4-(4-甲基苯基)-6-苯基-2-吡啶基]苯基]乙酰胺二鹽酸鹽(化合物30)m.p.257.0～259.0℃產(chǎn)業(yè)上利用的可能性NGF擔(dān)負(fù)著某種神經(jīng)細(xì)胞的生存和功能維持，具有變性修復(fù)和保護(hù)作用。本發(fā)明的吡啶衍生物顯示出培養(yǎng)的大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的生存延長活性。因此，本發(fā)明的吡啶衍生物在體內(nèi)直接或間接地作用于神經(jīng)細(xì)胞，人們期待它表現(xiàn)出由于神經(jīng)變性而引起的神經(jīng)損傷的改善和治療效果。例如，它可用作外傷性的、醇或抗癌劑等的藥劑性的、炎癥性的、糖尿病中出現(xiàn)的代謝性的以及因特發(fā)性末稍神經(jīng)變性而引起的病癥的改善和治療劑。另外也可用作因中樞神經(jīng)變性引起的病癥，例如阿爾茨海默型早老性和腦血管性癡呆、唐氏綜合癥、帕金森病、亨廷頓氏舞蹈病、腦缺血和腦梗塞以及腦出血和頭部外傷等的后遺癥、健忘癥、脊髓性神經(jīng)麻痹癥等病的改善和治療劑。試驗(yàn)例1[神經(jīng)營養(yǎng)因子作用試驗(yàn)]神經(jīng)營養(yǎng)因子作用用以下方法評價(jià)。(檢測樣品)將表1、2中給出的各個(gè)化合物溶解于DMSO，濃度配成2mg/ml～10mg/ml。(試驗(yàn)細(xì)胞)來自于胎生18天的大鼠皮質(zhì)的神經(jīng)細(xì)胞(試驗(yàn)方法)將含有20％胎牛血清的ダルベツコ的最小必需量的培養(yǎng)基(ギグコ社制)和HamF-12培養(yǎng)基(ギグコ社制)等量混合配成DF培養(yǎng)基，然后將試驗(yàn)細(xì)胞用該DF培養(yǎng)基調(diào)成3.2×106細(xì)胞/ml，再以0.5ml/每孔的量加到涂布了聚乙烯亞胺的24孔板中(每個(gè)培養(yǎng)孔的面積為2cm2，コ-ニング社制)，于37℃，5％CO2中培養(yǎng)。24小時(shí)后，除去培養(yǎng)基，再向每孔中加入含有各種濃度的檢測樣品、5μg/ml鐵轉(zhuǎn)移蛋白、5μg/ml胰島素20pmole/ml孕酮的無血清的上述DF培養(yǎng)基0.5ml。其中，本發(fā)明化合物溶解于DMSO，添加后其終濃度如下述表3所示的各種濃度。另外，作為對照，也制備了只添加DMSO的培養(yǎng)基。這一實(shí)驗(yàn)過程作了2塊相同培養(yǎng)板實(shí)驗(yàn)，上述細(xì)胞于各種培養(yǎng)基培養(yǎng)72小時(shí)后，對其中一塊板通過N2-O2-CO2培養(yǎng)箱(クバィ社制，BNP-100型)，將氧濃度降至最低設(shè)定濃度的1％，實(shí)施4小時(shí)低氧負(fù)荷培養(yǎng)。而另一塊板不加負(fù)荷，仍于5％CO2、95％空氣的條件下直接培養(yǎng)。再培養(yǎng)48小時(shí)后定量測定活細(xì)胞數(shù)目。除去培養(yǎng)基，使FluorescienDiacetate(FDA)試劑作用，然后用磷酸緩沖液(pH7.4)洗滌后，測定熒光強(qiáng)度(Ex485/Em530)(ミリポァ社制，CytoFlourTM2300)。本發(fā)明化合物的神經(jīng)營養(yǎng)因子活性以對照(添加DMSO)的熒光強(qiáng)度為1.0時(shí)的比值表示。結(jié)果如表3所示。表3<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="632">檢測樣品濃度神經(jīng)營養(yǎng)因子活性低氧負(fù)荷無負(fù)荷對照(DMSO)1.01.0化合物22μg/ml3.33.510μg/ml1.21.2化合物42μg/ml1.72.1化合物62μg/ml3.33.510μg/ml1.11.2化合物82μg/ml2.72.410μg/ml1.21.2化合物102μg/ml3.64.6化合物122μg/ml3.23.3化合物142μg/ml4.34.0化合物162μg/ml3.73.5化合物182μg/ml3.93.9化合物202μg/ml3.94.3化合物222μg/ml4.24.2化合物232μg/ml8.18.010μg/ml9.79.4化合物252μg/ml6.05.5化合物272μg/ml3.23.410μg/ml2.82.5化合物282μg/ml6.66.010μg/ml2.92.9化合物302μg/ml4.64.7</table></tables>試驗(yàn)例2[對大鼠腦缺血引起的遲發(fā)性神經(jīng)細(xì)胞壞死的作用試驗(yàn)]利用閉塞大鼠兩側(cè)總頸動脈模型來評價(jià)對腦缺血引起的神經(jīng)細(xì)胞障礙的抑制作用。(實(shí)驗(yàn)動物)使用體重60-90g雄性大鼠(新日本動物、琦玉、日本)(試驗(yàn)方法)大鼠用乙醚輕度麻醉，固定。用刮多卡因局部浸潤麻醉后，切開頸部正中線，露出兩側(cè)總頸動脈，加倍小心將它與旁邊的迷走神經(jīng)剝離開。用小的動脈瘤夾使動脈阻斷3分鐘，然后卸掉夾子，將皮膚縫好。假性手術(shù)組除了不閉塞兩側(cè)總頸動脈之外其它處置都一樣。3分鐘腦缺血7天后，用乙醚麻醉動物，然后再用10％福爾馬林緩沖液從左心室灌流腦。從海馬區(qū)切出3-4mm厚的冠狀切片，石蠟包埋后作成切片，切片用蘇木精和曙紅染色。缺血性細(xì)胞損傷分為0～3的4個(gè)階段評價(jià)。0(-)正常神經(jīng)細(xì)胞、1(+)數(shù)個(gè)神經(jīng)細(xì)胞損傷(1個(gè)或數(shù)個(gè)神經(jīng)細(xì)胞的損傷)、2(+，+)多個(gè)神經(jīng)細(xì)胞損傷、3(+++)幾乎所有神經(jīng)細(xì)胞損傷。(控制樣品)檢測樣品溶于水后，于缺血結(jié)束后立刻按10mg/kg將樣品注入腹腔內(nèi)。(結(jié)果)假性手術(shù)組大鼠海馬CA1神經(jīng)細(xì)胞都未受到損傷，但3分鐘兩側(cè)總頸動脈模型中，通過光學(xué)顯微鏡觀察，清楚地看到海馬CA1神經(jīng)細(xì)胞受到了損傷。然而，通過將本發(fā)明化合物注入腹腔內(nèi)可以抑制海馬CA1神經(jīng)細(xì)胞的崩潰和消失。結(jié)果如表4所示。表4<p>試驗(yàn)例3[對大鼠中大腦動脈閉塞模型的腦梗塞病灶面積的作用](檢測樣品)使用化合物14和對照檢測樣品1[WO94/14440記載的化合物6，4′-(4-甲基苯基)-2，2′6′，2′-三聯(lián)吡啶＝三鹽酸鹽]對照檢測樣品1的結(jié)構(gòu)式(試驗(yàn)方法)使SHRSP大鼠(雄性、12-20周齡)吸入氟烷麻醉，將其體溫保持在37℃左右。側(cè)臥位固定，切開硬膜，于鼻裂(rhinalfissure)的0.7～1mm背側(cè)對中大腦動脈干進(jìn)行電凝固、切斷。同時(shí)連接灌注泵(infusionpump)，分別將被檢驗(yàn)化合物以10mg/kg/h由尾靜脈連續(xù)注入4小時(shí)。設(shè)定作為對照組的溶劑組。手術(shù)7天后于10％福爾馬林溶液中固定，摘出腦，縱行連續(xù)切片。腦切片用蘇木精和曙紅染色后，通過梗塞病灶的圖像解析裝置求出面積，算出相對于全腦面積的梗塞比率。(結(jié)果)就象圖1所示那樣，對照檢測樣品1中看不到梗塞病灶縮小作用，而化合物14相對于對照組表現(xiàn)出用量依賴性的明顯的梗塞縮小作用。試驗(yàn)例4[觀察給與被檢驗(yàn)化合物時(shí)的癥狀](試驗(yàn)方法)將對照檢測樣品1、化合物14分別以10，40mg/kg的量靜脈內(nèi)注射到與試驗(yàn)例3同系的大鼠體內(nèi)，觀察當(dāng)時(shí)表現(xiàn)出的癥狀。(結(jié)果)對照檢測樣品1的兩種用量都呈現(xiàn)出鎮(zhèn)靜癥狀，但對于化合物14沒看到什么癥狀變化。權(quán)利要求1.由式(I)表示的吡啶衍生物或它的鹽[式I中R1代表式(II)-1～(II)-6中任一個(gè)表示的官能團(tuán)]-CONHCH2CH2N(CH3)2(II)-1-CONHCH2CH2CH2N(CH3)2(II)-2-COOCH2CH2N(CH3)2(II)-3-COOCH2CH2N(CH2CH3)2(II)-4-NHCOCH2N(CH3)2(II)-5-NHCOCH2N(CH2CH3)2(II)-62.由式(III)表示的吡啶衍生物或它的鹽，[式III中R2代表氨基或式(IV)-1～(IV)-5中任一個(gè)表示的官能團(tuán)]-CONHCH2CH2N(CH3)2(IV)-1-COOCH2CH2N(CH3)2(IV)-3-NHCOCH2N(CH3)2(IV)-4-NHCOCH2N(CH2CH3)2(IV)-53.含有權(quán)利要求1記載的吡啶衍生物或它的鹽作為有效成分的醫(yī)藥組合物。4.含有權(quán)利要求2記載的吡啶衍生物或它的鹽作為有效成分的醫(yī)藥組合物。5.用于改善或治療神經(jīng)變性疾病的權(quán)利要求1記載的醫(yī)藥組合物。6.用于改善或治療神經(jīng)變性疾病的權(quán)利要求2記載的醫(yī)藥組合物。7.權(quán)利要求1記載的吡啶衍生物或它的鹽，作為醫(yī)藥組合物的有效成分使用。8.權(quán)利要求2記載的吡啶衍生物或它的鹽，作為醫(yī)藥組合物的有效成分使用。9.權(quán)利要求1記載的吡啶衍生物或它的鹽，用于制造改善或治療神經(jīng)變性疾病用的醫(yī)藥組合物。10.權(quán)利要求2記載的吡啶衍生物或它的鹽，用于制造改善或治療神經(jīng)變性疾病用的醫(yī)藥組合物。11.改善或治療神經(jīng)變性疾病的方法，即對人給以有效量的權(quán)利要求1記載的吡啶衍生物或它的鹽。12.改善或治療神經(jīng)變性疾病的方法，即對人給以有效量的權(quán)利要求2記載的吡啶衍生物或它的鹽。全文摘要右式所代表的吡啶衍生物或它的鹽[式中R文檔編號C07D213/38GK1169721SQ9519648公開日1998年1月7日申請日期1995年11月27日優(yōu)先權(quán)日1994年11月28日發(fā)明者白井汪芳,英謙二,高橋雄樹,溝部文夫,花田和紀(jì)申請人:大正制藥株式會社