一種富勒烯環(huán)肽的合成方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種富勒烯環(huán)肽及其合成方法，將帶有保護(hù)基的環(huán)肽溶解在DMF中，加入丁二酸酐和N-甲基嗎啡林常溫反應(yīng)0.2~5小時(shí)，然后進(jìn)行萃??；萃取得到的產(chǎn)物與富勒烯單加成吡咯烷溶解在DCM和DMF混合液中，然后加入DCC、HOBT和DMAP常溫反應(yīng)20~100小時(shí)，進(jìn)行柱層析；柱層析得到的產(chǎn)物溶解在TFA/DCM混合液中，常溫反應(yīng)1~6小時(shí)，然后加入冰乙醚，-4℃過夜，淡黃色物質(zhì)析出，干燥后得到目標(biāo)產(chǎn)物。本發(fā)明得到的富勒烯環(huán)肽可提升多肽在生物體內(nèi)的穩(wěn)定性，并具有良好的抗癌活性；環(huán)狀肽比相應(yīng)的線性肽有著更強(qiáng)的受體結(jié)合力和受體特異性，具有對癌細(xì)胞的高效靶向性和高效清除自由基的特性，是很好的抗氧化劑。
【專利說明】一種富勒烯環(huán)肽的合成方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種富勒烯環(huán)肽的合成方法，該化合物同時(shí)具有 對癌細(xì)胞的高效靶向性和高效清除自由基的兩種特性。

【背景技術(shù)】
[0002] 研究表明，C6tl衍生物在抗艾滋病毒、抗菌、神經(jīng)保護(hù)、DNA切割等方面具有良好的 應(yīng)用前景。目前，羧酸、氨基酸與多肽、寡聚核苷酸、環(huán)糊精、嚇啉等生物分子的富勒烯衍生 物已經(jīng)被合成。因富勒烯在可見光照射下可以產(chǎn)生活性氧R0S，包括單線態(tài)氧、超氧負(fù)離子 等，所以利用富勒烯作為光敏劑來開展光動力學(xué)治療法，即利用光照產(chǎn)生的活性氧來選擇 性的破壞腫瘤組織。
[0003] 整合素在多種癌細(xì)胞中有高度表達(dá)，對腫瘤血管生成起著重要作用，其中ανβ 3 的作用尤為重要。因此，整合素 ανβ3成為許多癌細(xì)胞藥物的祀點(diǎn)，帶有精氨酸-甘氨 酸-天冬氨酸序列的多肽可為整合素 ανβ3受體識別。
[0004] 很多實(shí)驗(yàn)在單加成富勒烯上引入線肽，提高富勒烯衍生物的靶向性，但是多數(shù)線 性RGD肽在體內(nèi)循環(huán)過程中半衰期較短，對α ν β 3受體親和力較低，且易被蛋白酶降解，體 內(nèi)穩(wěn)定性差，其生物活性亦不夠理想，而環(huán)肽對降解酶耐受性較好，環(huán)狀R⑶肽比相應(yīng)的線 性肽有著更強(qiáng)的受體結(jié)合力和受體特異性。為此，迫切需要設(shè)計(jì)并合成出同時(shí)具有高穩(wěn)定 性及對腫瘤細(xì)胞的高效靶向性的富勒烯衍生物。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是線性RGD肽在體內(nèi)循環(huán)過程中半衰期較短，對 α ν β 3受體親和力較低，且易被蛋白酶降解，體內(nèi)穩(wěn)定性差，其生物活性亦不夠理想，提供一 種富勒烯環(huán)肽及其合成方法，得到的富勒烯環(huán)肽具有對癌細(xì)胞的高效靶向性和高效清除自 由基的兩種特性。
[0006] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案： 一種富勒烯環(huán)肽，結(jié)構(gòu)式如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種富勒烯環(huán)肽，其特征在于結(jié)構(gòu)式如下：
H為RGDyK環(huán)肽、RGDfK環(huán)肽、RGDfV環(huán)肽或RGDyV環(huán)肽。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的富勒烯環(huán)肽的合成方法，其特征在于步驟如下： (1) 將帶有保護(hù)基的環(huán)肽溶解在DMF中，加入丁二酸酐和N-甲基嗎啡林常溫反應(yīng)0. 2~5 小時(shí)，然后進(jìn)行萃??； (2) 將步驟（1)萃取得到的產(chǎn)物與富勒烯單加成吡咯烷溶解在DCM和DMF混合液中，然 后加入DCC、HOBT和DMAP常溫反應(yīng)20~100小時(shí)，進(jìn)行柱層析； (3) 將步驟（2)柱層析得到的產(chǎn)物溶解在TFA/DCM混合液中，常溫反應(yīng)1~6小時(shí)，然后 加入冰乙醚，-4°C過夜，淡黃色物質(zhì)析出，干燥后得到目標(biāo)產(chǎn)物； 以上各個步驟均在無水無氧的條件下進(jìn)行。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的富勒烯環(huán)肽的合成方法，其特征在于：所述步驟（1)中帶有保 護(hù)基的環(huán)肽、丁二酸酐和N-甲基嗎啡林的物質(zhì)的量之比為1:0. 1~5:1~10。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的富勒烯環(huán)肽的合成方法，其特征在于：所述步驟（2)中 步驟（1)萃取得到的產(chǎn)物、富勒烯單加成吡咯烷、DCC、HOBT和DMAP的物質(zhì)的量之比為 1:0. 1-5:0. 1-5:0. 1-5:0. 1~1〇
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的富勒烯環(huán)肽的合成方法，其特征在于：所述步驟（2)中DCM和 DMF的混合液中DCM與DMF的體積比為1~10 :1。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的富勒烯環(huán)肽的合成方法，其特征在于：所述步驟（3)中TFA和 DCM的混合液中TFA與DCM的體積比為1~10 :1。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2~6中任意一項(xiàng)所述的富勒烯環(huán)肽的合成方法，其特征在于：所述的 帶有保護(hù)基的環(huán)肽為RGDyK環(huán)肽、RGDfK環(huán)肽、RGDfV環(huán)肽或RGDyV環(huán)肽。
【文檔編號】C07K1/107GK104478997SQ201410838962
【公開日】2015年4月1日 申請日期:2014年12月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月30日
【發(fā)明者】張靜, 何婷, 張曉磊 申請人:鄭州大學(xué)