堿性嫩黃o標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法
【專利摘要】堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，涉及一種標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，所述方法包括：堿性嫩黃O的合成與純化：在三口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入乙二醇作溶劑，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨氣進(jìn)行攪拌反應(yīng)，反應(yīng)后，加入氯化氨，繼續(xù)通氨氣反應(yīng)后，冷卻、結(jié)晶、過濾、然后加鹽水進(jìn)行重結(jié)晶、過濾、干燥得成品，經(jīng)過硅膠柱凈化，淋洗液為二氯甲烷和甲醇，洗脫液經(jīng)過避光、低溫干燥后得到粗品；該方法制得純度高、含量準(zhǔn)確、均勻性和穩(wěn)定性均符合要求的標(biāo)準(zhǔn)樣品，解決我國檢測(cè)用標(biāo)準(zhǔn)品依賴進(jìn)口，為我國食品安全檢驗(yàn)檢測(cè)提供全面實(shí)物標(biāo)準(zhǔn)保障，為我國各級(jí)政府食品安全監(jiān)控提供了技術(shù)支撐。
【專利說明】堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，特別是涉及一種堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]標(biāo)準(zhǔn)樣品是具足夠均勻的一種或多種化學(xué)的、物理的、生物學(xué)的、工程技術(shù)的或感官的等性能特征，經(jīng)技術(shù)鑒定，并附有說明有關(guān)性能數(shù)據(jù)證書的一批樣品。是以其性質(zhì)與供試樣品進(jìn)行比較的質(zhì)量均一的實(shí)物樣品，并且有適合使用目的的純度。
[0003]堿性嫩黃O是一種工業(yè)染料，主要用主要用于麻、紙、皮革、草編織品、人造絲等的染色，也用于印染棉織品。其色淀用于制墻紙、色紙、油墨和油漆等。也可用于皮革、紙、麻和粘膠的染色。由于能起染色作用，一些不法商販把堿性嫩黃加入到腐竹中，這對(duì)皮膚黏膜有輕度刺激，可引起結(jié)膜炎、皮炎和上呼吸道刺激癥狀，人接觸或者吸入堿性嫩黃都會(huì)引起中毒。
[0004]因此，及時(shí)準(zhǔn)確判斷食品中是否存在這三種非食用色素，建立快速、準(zhǔn)確的食品中非食用色素堿性嫩黃O的測(cè)定方法是非常必要的。而進(jìn)行定量方法的開發(fā)就需要高純度的標(biāo)準(zhǔn)品，采用標(biāo)準(zhǔn)樣品， 才能保證檢測(cè)結(jié)果在國際交往中的準(zhǔn)確性、可比性、可溯源性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，該方法制得純度高、含量準(zhǔn)確、均勻性和穩(wěn)定性均符合要求的標(biāo)準(zhǔn)樣品，解決我國檢測(cè)用標(biāo)準(zhǔn)品依賴進(jìn)口，為我國食品安全檢驗(yàn)檢測(cè)提供全面實(shí)物標(biāo)準(zhǔn)保障，為我國各級(jí)政府食品安全監(jiān)控提供了技術(shù)支撐。
[0006]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:
堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，所述方法包括:堿性嫩黃O的合成與純化:在三口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入乙二醇作溶劑，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨氣進(jìn)行攪拌反應(yīng),反應(yīng)后，加入氯化氨，繼續(xù)通氨氣反應(yīng)后，冷卻、結(jié)晶、過濾、然后加鹽水進(jìn)行重結(jié)晶、過濾、干燥得成品，經(jīng)過硅膠柱凈化，淋洗液為二氯甲烷和甲醇，洗脫液經(jīng)過避光、低溫干燥后得到粗品；粗品經(jīng)過重結(jié)晶分離后，采用薄層色譜進(jìn)行分離，甲醇與三氯甲烷比列為I:13時(shí)，樣品進(jìn)行硅膠柱凈化，甲醇與三氯甲烷混合液梯度洗脫，洗脫液氮吹后干燥的純品；取粗品與硅膠攪拌均勻后，裝柱后依次用石油醚潤(rùn)洗、二氯甲烷洗滌后，用二氯甲烷/甲醇洗脫目的物，洗脫液在避光條件下?lián)]干待測(cè)；堿性嫩黃O的合成與純化:在三口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入30 g乙二醇作溶劑,加入4，4 一二甲氨基二苯甲燒(甲燒貝司)15 g、硫磺6 g,通氨氣進(jìn)行攪拌反應(yīng)，反應(yīng)溫度控制在140±5°C，反應(yīng)5 h后，加入氯化氨8 g，繼續(xù)通氨氣反應(yīng)16 h后，冷卻、結(jié)晶、過濾、然后加入30%鹽水進(jìn)行重結(jié)晶、過濾、干燥得成品約15 g,粗品含量在80%左右，經(jīng)過硅膠柱凈化，淋洗液為二氯甲烷和甲醇，洗脫液經(jīng)過避光、低溫干燥后得到粗品。[0007]所述的堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，所述堿性嫩黃O的合成與純化:粗品經(jīng)過重結(jié)晶分離后，采用薄層色譜進(jìn)行分離，甲醇與三氯甲烷比列為1:13時(shí)，在薄層上主產(chǎn)物與其他雜質(zhì)得到很好的分離；樣品進(jìn)行硅膠柱凈化，甲醇與三氯甲烷混合液梯度洗脫，洗脫液氮吹后干燥的純品，取1.2 g粗品與25 g硅膠100-140目攪拌均勻后，裝柱后依次用100 mL石油醚潤(rùn)洗、200 mL 二氯甲烷洗滌后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇13:1洗脫目的物，洗脫液在避光條件下?lián)]干待測(cè)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0008]圖1為本發(fā)明堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)樣品的液相色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0009]下面結(jié)合附圖所示實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳述。
[0010]實(shí)施例1:
堿性嫩黃O的合成與純化:在三口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入30 g乙二醇作溶劑，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷(甲烷貝司)15 g、硫磺6 g，通氨氣進(jìn)行攪拌反應(yīng)，反應(yīng)溫度控制在140±5°C，反應(yīng)5 h后，加入氯化氨8 g,繼續(xù)通氨氣反應(yīng)16 h后，冷卻、結(jié)晶、過濾、然后加入30%鹽水進(jìn)行重結(jié)晶、過濾、干燥得成品約15 g。粗品含量在80%左右，經(jīng)過硅膠柱凈化，淋洗液為二氯甲烷和甲醇，洗脫液經(jīng)過避光、低溫干燥后得到粗品。
[0011]粗品經(jīng)過重結(jié)晶分離后，采用薄層色譜進(jìn)行分離，甲醇與三氯甲烷比列為1:13時(shí)，在薄層上主產(chǎn) 物與其他雜質(zhì)得到很好的分離；樣品進(jìn)行硅膠柱凈化，甲醇與三氯甲烷混合液梯度洗脫，，洗脫液氮吹后干燥的純品。取1.2 g粗品與25 g硅膠(100-140目)攪拌均勻后，裝柱后依次用100 mL石油醚潤(rùn)洗、200 mL 二氯甲烷洗滌后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇(13:1)洗脫目的物，洗脫液在避光條件下?lián)]干待測(cè)。
[0012]將上述制得堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)品，用棕色瓶進(jìn)行分裝，編號(hào)后置于室溫、通風(fēng)密封保存。
[0013]進(jìn)行純度檢查及含量測(cè)定:薄層色譜純查，HPLC純度檢查:在堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備中，選擇HPLC峰面積歸一法進(jìn)行含量測(cè)定。
[0014]所用儀器及條件:高效液相色譜儀(島津LC-20A)，配二極管陣列檢測(cè)器或可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；色譜柱:C18 (250 mmX4.6mm, 5 μπι)或相當(dāng)者。
[0015]操作條件:堿性嫩黃O:流動(dòng)相:甲醇八20 mM)醋酸銨=70/30 ;流速:1.0 mL/min ；柱溫:25 V ;檢測(cè)波長(zhǎng):436 nm ;進(jìn)樣量:10 μ L。
[0016]定量測(cè)定:測(cè)試液配置:準(zhǔn)確稱取1.0 g的樣品，經(jīng)50 mL乙醇溶解，水稀釋定容后，配制成10 mg/L的樣液，在上述液相色譜法條件下進(jìn)行面積歸一法定量。色譜條件應(yīng)保證試樣中所有雜質(zhì)能夠與待測(cè)物分離，并且堿性嫩黃O的保留時(shí)間合適。進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算試樣中堿性嫩黃O的純度。在所選擇的色譜條件下，堿性嫩黃O的保留時(shí)間為4.77 min。
[0017]儀器與設(shè)備:高效液相色譜儀(日本島津公司LC-20A)，紫外-可見分光光度儀(日本島津公司)，液質(zhì)質(zhì)聯(lián)用儀(美國AB公司)，IN0VA-600核磁共振儀(Varian公司)。
[0018]材料與試劑:濃鹽酸、苯胺、亞硝酸鈉、尿素、間苯二胺、對(duì)氨基苯磺酸鈉、2-萘酚、氯化鈉、乙二醇、4，4 一二甲氨基二苯甲烷、硫磺、氯化氨、分析純95%乙醇、分析純甲醇(上海安譜科學(xué)儀器有限公司)。液相用甲醇(色譜純，TEDIA `COMPANY );水為去離子水。
【權(quán)利要求】
1.堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，其特征在于，所述方法包括:堿性嫩黃O的合成與純化:在三口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入乙二醇作溶劑，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨氣進(jìn)行攪拌反應(yīng)，反應(yīng)后，加入氯化氨，繼續(xù)通氨氣反應(yīng)后，冷卻、結(jié)晶、過濾、然后加鹽水進(jìn)行重結(jié)晶、過濾、干燥得成品，經(jīng)過硅膠柱凈化，淋洗液為二氯甲烷和甲醇，洗脫液經(jīng)過避光、低溫干燥后得到粗品；粗品經(jīng)過重結(jié)晶分離后，采用薄層色譜進(jìn)行分離，甲醇與三氯甲烷比列為1:13時(shí)，樣品進(jìn)行硅膠柱凈化，甲醇與三氯甲烷混合液梯度洗脫，洗脫液氮吹后干燥的純品；取粗品與硅膠攪拌均勻后，裝柱后依次用石油醚潤(rùn)洗、二氯甲烷洗滌后，用二氯甲烷/甲醇洗脫目的物，洗脫液在避光條件下?lián)]干待測(cè)；堿性嫩黃O的合成與純化:在三口反應(yīng)瓶?jī)?nèi)加入30 g乙二醇作溶劑，加入4，4 一二甲氨基二苯甲烷(甲烷貝司)15 g、硫磺6 g，通氨氣進(jìn)行攪拌反應(yīng)，反應(yīng)溫度控制在140±5°C，反應(yīng)5 h后，加入氯化氨8 g，繼續(xù)通氨氣反應(yīng)16 h后，冷卻、結(jié)晶、過濾、然后加入30%鹽水進(jìn)行重結(jié)晶、過濾、干燥得成品約15 g，粗品含量在80%左右，經(jīng)過硅膠柱凈化，淋洗液為二氯甲烷和甲醇，洗脫液經(jīng)過避光、低溫干燥后得到粗品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堿性嫩黃O標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)樣品的制備方法，其特征在于，所述堿性嫩黃O的合成與純化:粗品經(jīng)過重結(jié)晶分離后，采用薄層色譜進(jìn)行分離，甲醇與三氯甲烷比列為1:13時(shí)，在薄層上主產(chǎn)物與其他雜質(zhì)得到很好的分離；樣品進(jìn)行硅膠柱凈化，甲醇與三氯甲烷混合液梯度洗脫，洗脫液氮吹后干燥的純品，取1.2 g粗品與25 g硅膠100-140目攪拌均勻后，裝柱后依 次用100 mL石油醚潤(rùn)洗、200 mL 二氯甲烷洗滌后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇13:1洗脫目的物，洗脫液在避光條件下?lián)]干待測(cè)。
【文檔編號(hào)】C07C251/24GK103755591SQ201410032980
【公開日】2014年4月30日 申請(qǐng)日期:2014年1月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月23日
【發(fā)明者】蘇錫輝, 李乃潔, 張凱 申請(qǐng)人:沈陽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院