一種巨大戟醇單體的分離純化方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種巨大戟醇單體的分離純化方法，屬于中藥活性成分的分離純化【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明是以大戟科大戟屬傳統(tǒng)中藥千金子為原料，通過(guò)乙醇溶液提取、乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析、甲醇溶解過(guò)濾、高效制備液相色譜分離、產(chǎn)品回收得到巨大戟醇單體產(chǎn)品。本發(fā)明通過(guò)最適宜的工藝及參數(shù)條件，使產(chǎn)品中巨大戟醇的含量達(dá)到98%以上；整個(gè)工藝過(guò)程穩(wěn)定、操作簡(jiǎn)便、分離效率高，成本低廉，可高純度分離制備巨大戟醇單體。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種巨大戟醇單體的分離純化方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物化合物單體的制備方法，尤其是從千金子中提取巨大戟醇單體的分離純化方法，屬于中藥分離純化【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]千金子為大戟科植物續(xù)隨子EuphorbialathyrisL.的種子。又名千兩金、菩薩豆(《日華子》)，續(xù)隨子(《開(kāi)寶本草》)，拒冬實(shí)(《本草圖經(jīng)》)，聯(lián)步(《斗門(mén)方》)，拒冬子(《本草匯言》)，灘板救(《湖南藥物志》)，看園老(《貴州草藥》)，百藥解、干金藥解(《云南藥用植物志》)，小巴豆(《山西中草藥》)。原植物續(xù)隨子又名:拒冬(《開(kāi)寶本草》)，半枝蓮(《綱目拾遺》)，降龍草(《陜西中藥名錄》)。具有逐水退腫，破血消癥，解毒殺蟲(chóng)的功效。
[0003]
【權(quán)利要求】
1.一種巨大戟醇單體的分離純化方法，其特征在于:以大戟科植物續(xù)隨子的種子為原料，通過(guò)提取、萃取、硅膠柱層析、溶解過(guò)濾、高效制備液相色譜分離、產(chǎn)品回收得到巨大戟醇單體，具體包工藝步驟如下: 1)提取 將千金子藥材粉碎成I~4mm的粗粉，按體積/質(zhì)量加入6~10倍的乙醇溶液，提取3~4次，每次2~3小時(shí)，回收乙醇，合并過(guò)濾液，待下一步處理； 所述乙醇溶液的體積百分比濃度為80~95% ； 2)萃取 將步驟I)所得的過(guò)濾液，加入等體積的乙酸乙酯萃取3~4次，分取上層溶液，濃縮至干，得濃縮液，進(jìn)行下一步處理； 3)硅膠柱層析 將步驟2)所得的濃縮液加入10倍重量的硅膠拌樣，50°C干燥拌樣硅膠，石油醚:乙酸乙酯=1:1的體積比洗脫產(chǎn)品，柱層析產(chǎn)品液50°C濃縮至干，得固體物，待下一步處理； 4)溶解過(guò)濾 按照固體物質(zhì)量:溶劑體積=Ig:20~40ml，將步驟3)所得的固體物加甲醇溶解，過(guò)濾溶解液，過(guò)濾液即是制 備巨大戟醇單體的原料；
5)HPLC制備 色譜條件如下: 色譜柱填料為=C18填料； 流動(dòng)相為:乙腈-水V/V=32:68 ； 取步驟4)所得的過(guò)濾液進(jìn)樣，進(jìn)樣量以過(guò)濾液所含的干品重量計(jì)為0.5~1.0g/針，在線紫外監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，針對(duì)性收集目標(biāo)化合物制備溶液，得巨大戟醇單體的HPLC制備液； 6)產(chǎn)品回收 將步驟5)所得的HPLC制備液，回收乙腈，剩余水溶液用等體積的乙酸乙酯萃取2次，45~65°C濃縮至干即得巨大戟醇單體產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨大戟醇單體的分離純化方法，其特征在于:在步驟5)進(jìn)行高效液相色譜法HPLC制備前，通過(guò)液-質(zhì)聯(lián)用方法確定高效液相色譜中巨大戟醇單體的峰形，即取步驟4)所得過(guò)濾液進(jìn)樣，進(jìn)行巨大戟醇單體的制備分離，根據(jù)質(zhì)譜檢測(cè)結(jié)果，確定巨大戟醇單體在液相色譜中對(duì)應(yīng)的峰形。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種巨大戟醇單體的分離純化方法，其特征在于:所述液-質(zhì)聯(lián)用方法的色譜條件如下: 色譜柱填料為=C18填料； 流動(dòng)相為:乙腈-水V/V=32:68。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種巨大戟醇單體的分離純化方法，其特征在于:利用反相分析型液相色譜RP-HPLC復(fù)檢步驟6)所得產(chǎn)品純度，其色譜條件如下:填料為C18，流動(dòng)相為乙腈-水V/V=34:66，柱溫為30°C，流速為1.0ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm。
【文檔編號(hào)】C07C49/727GK103694096SQ201310715149
【公開(kāi)日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月23日
【發(fā)明者】陳沖, 文煥松, 夏柯, 劉丁 申請(qǐng)人:成都普思生物科技有限公司