一種高純度磷脂酰膽堿的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高純度磷脂酰膽堿的制備方法，含以下步驟：以低級(jí)醇醇溶性粗磷脂為原料，配成醇溶性粗磷脂乙醇溶液，將醇溶性粗磷脂乙醇溶液上樣到葡聚糖凝膠SephadexLH-20層析柱中，采用高濃度乙醇洗脫后，收集洗脫液，蒸發(fā)掉溶劑，即得到高純度磷脂酰膽堿。本發(fā)明中使用的葡聚糖凝膠SephadexLH-20不易形成死吸附，易于再生套用，洗脫溶劑單一無毒；本發(fā)明采用的溶劑種類較少，生產(chǎn)中套用程度高；本發(fā)明整體工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)周期短，獲得產(chǎn)品純度在85%以上，易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種高純度磷脂酰膽堿的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于磷脂【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種高純度磷脂酰膽堿的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]磷脂(Phospholipid)，也稱磷脂類、磷脂質(zhì)，是含有磷酸的脂類，屬于復(fù)合脂。磷脂組成生物膜的主要成分，分為甘油磷脂與鞘磷脂兩大類，分別由甘油和鞘氨醇構(gòu)成。磷脂為兩性分子，一端為親水的含氮或磷的尾，另一端為疏水(親油)的長烴基鏈。磷脂根據(jù)骨架的不同可以分為磷酸甘油脂(glycerolphospholid)和鞘磷脂(sphingolipid)。它們都是極性脂。極性脂由極性部分(叫做極性頭)和非極性部分(叫做非極性尾)組成。其中，甘油磷脂又可以根據(jù)極性頭部集團(tuán)的不同分為磷脂酰膽堿(Phosphatidylcholines，PC)、磷脂酸乙醇氨(Phosphatidylethanolamine, PE)> 憐脂酸絲氨酸(Phosphatidylserines, PS)、磷脂酰肌醇(Phosphatidylinositols, PI)、磷脂酰甘油(PG)、甘油磷脂酸(phosphatidicacid，PA)等。在磷脂當(dāng)中，PC的極性最強(qiáng)，在pH等于7時(shí)，PC分子的N帶一個(gè)正電荷，硝酸上的O帶一個(gè)負(fù)電荷，整個(gè)分子呈現(xiàn)電中性不帶電荷，PC的結(jié)構(gòu)式如下:
【權(quán)利要求】
1.一種高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是含以下步驟:以低級(jí)醇醇溶性粗磷脂為原料，配成醇溶性粗磷脂乙醇溶液，將醇溶性粗磷脂乙醇溶液上樣到葡聚糖凝膠Sephadex LH-20層析柱中，采用高濃度乙醇洗脫后，收集洗脫液，蒸發(fā)掉溶劑，即得到高純度磷脂酰膽堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:所述低級(jí)醇為乙醇、甲醇或異丙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:所述低級(jí)醇醇溶性粗磷脂為葵花籽來源醇溶性粗磷脂或大豆來源醇溶性粗磷脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:配成醇溶性粗磷脂乙醇溶液的濃度為20-25mg/mL，其中乙醇的體積百分含量為95%以上。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:所述葡聚糖凝膠Sephadex LH-20層析柱在使用前須進(jìn)行預(yù)處理，預(yù)處理方法為:在室溫下，將葡聚糖凝膠干粉浸泡于體積百分含量為50%-60%的乙醇中24-28小時(shí)，并不斷攪拌以保證凝膠溶脹，用無鹽水洗去殘存的乙醇濾干，隨后將凝膠用體積百分含量為97%-100%的乙醇置換并溶漿，將溶脹好的凝膠脫氣后，根據(jù)裝柱要求一次性置入柱內(nèi)，并保持濕態(tài)裝柱，且避免柱內(nèi)產(chǎn)生氣泡或斷層。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:所述高濃度乙醇的體積百分含量為95%以上。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:醇溶性粗磷脂乙醇溶液的上樣量為裝柱 葡聚糖凝膠總重量的20%-25%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:醇溶性粗磷脂乙醇溶液以恒定流速上樣，上樣流速為3-4mL/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:采用高濃度乙醇洗脫時(shí)以3-5mL/min的流速洗脫。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度磷脂酰膽堿的制備方法，其特征是:高純度磷脂酰膽堿的純度為85%-90%。
【文檔編號(hào)】C07F9/10GK103613612SQ201310620800
【公開日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月29日
【發(fā)明者】杜陽吉, 梁麗敏, 劉春鳳 申請(qǐng)人:廣東省食品工業(yè)研究所