一種純化假單孢菌素的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種假單孢菌素的純化方法，采用假單孢菌素發(fā)酵液為原料，優(yōu)化條件得到合適的柱分離條件，進(jìn)一步放大到動態(tài)軸向壓縮工業(yè)制備色譜系統(tǒng)上分離，得到高純度的假單孢菌素。本發(fā)明的優(yōu)點是，提取后粗品直接使用動態(tài)軸向壓縮工業(yè)制備色譜分離即可達(dá)到較好的分離提純效果，操作簡單，周期短，效率高，純度可達(dá)98.5%以上。
【專利說明】一種純化假單孢菌素的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種假單孢菌素的純化方法。
技術(shù)背景
[0002]假單孢菌素，藥物名莫匹羅星，是氨酰-找嫩合成酶(仏…)的抑制劑，適應(yīng)于革蘭氏陽性球菌引起的皮膚軟組織的感染，如膿皰瘡、癤、毛囊炎等原發(fā)性感染以及濕疹、皮炎、潰瘍、外傷等皮膚病的繼發(fā)感染。傳統(tǒng)色譜法純化假單孢菌素產(chǎn)品，工藝技術(shù)耗時長，同時純度不高，本發(fā)明針對這些問題采用高壓制備色譜法，達(dá)到了滿意的分離效果，因此此方法可成為天然產(chǎn)物、合成醫(yī)藥研究的有效手段。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于針對目前在純化假單孢菌素的過程中所存在的時間長以及純度不高的問題，提供一種采用制備液相色譜系統(tǒng)純化高純度假單孢菌素的新方法，該方法包括以下步驟:
將假單孢菌素粗品溶于水后進(jìn)行過濾，一般將假單孢菌素粗品配制成飽和溶液，具體實施時，可根據(jù)實際溶解效果進(jìn)行調(diào)整；
匕取配制好的假單孢菌素溶液，用填充好固定相填料的動態(tài)軸向壓縮柱進(jìn)行分離，收集假單孢菌素對應(yīng)譜帶的餾分；
0.將步驟6中收集的對應(yīng)譜帶洗脫液中的溶劑蒸干，即可得到色譜純?yōu)?8%的假單孢菌素單體。
[0004]本發(fā)明的有益效果是可直接采用發(fā)酵后的假單孢菌素粗品來制備，不需要大量的前處理過程，簡單、易控制，工藝技術(shù)簡化，適用于大規(guī)模制備。高效液相色譜測定中，純度高于98%，完全可用于藥物的開發(fā)。

【具體實施方式】
[0005]實施例1
1.取假單孢菌素發(fā)酵液處理后粗品溶于水，配制成飽和溶液，置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；
2.將假單孢菌素溶液泵入動態(tài)軸向壓縮柱制備色譜系統(tǒng)，柱填充尺寸為0 50X250111111，填料為十八烷基硅膠，粒徑為10?3011111，上樣量18。流動相的體積比為30:70，當(dāng)假單孢菌素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質(zhì)沖出，一個分離周期結(jié)束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為240=%收集保留時間在3519-=的餾分，經(jīng)
分析純度彡98.8%。
[0006]實施例2
1.取1.58假單孢菌素發(fā)酵液處理后粗品溶于水，配制成飽和溶液，置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒； 2.將假單孢菌素溶液泵入動態(tài)軸向壓縮柱制備色譜系統(tǒng)，柱填充尺寸為0 50X250111111，填料為十八烷基硅膠，粒徑為10?15皿，上樣量1.5。流動相的體積比為26:74，當(dāng)假單孢菌素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質(zhì)沖出，一個分離周期結(jié)束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為240=%收集保留時間在3117-=的餾分，經(jīng)冊!^分析純度? 98.5%。
[0007]實施例3
1.取假單孢菌素發(fā)酵液處理后粗品溶于水，配制成飽和溶液，置于過濾裝置中，過濾除去固體顆粒；
2.將假單孢菌素溶液泵入動態(tài)軸向壓縮柱制備色譜系統(tǒng)，柱填充尺寸為0150\250臟，填料為十八烷基硅膠，粒徑為10皿，上樣量18。流動相的體積比為22:78，當(dāng)假單孢菌素洗脫完畢后，流動相切換成高比例乙腈，將后端雜質(zhì)沖出，一個分離周期結(jié)束。采用的紫外可見光度檢測器的檢測波長為240=%收集保留時間在421301=的餾分，經(jīng)
分析純度彡98.1%。
【權(quán)利要求】
1.一種假單孢菌素的純化方法，其特征在于包括以下步驟: (1)將假單孢菌素發(fā)酵液前處理，濃縮，干燥作為分離粗品； (2)將粗品溶解后通過進(jìn)樣泵或者進(jìn)樣閥注入制備色譜系統(tǒng)； (3)采用乙腈/緩沖液做流動相，洗脫得到假單孢菌素單體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是:所述的假單孢菌素粗品為發(fā)酵所得。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征是:所述色譜系統(tǒng)采用動態(tài)軸向壓縮柱，且所填充固定相為十八烷基硅膠填料。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是:流動相中乙腈與緩沖液的體積比(V/V)范圍為 20:80^35:65ο
【文檔編號】C07D407/06GK104370896SQ201310619968
【公開日】2015年2月25日 申請日期:2013年11月29日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月29日
【發(fā)明者】張宇, 張大兵, 劉根水 申請人:江蘇漢邦科技有限公司