專利名稱：一種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗腫瘤蛋白的制備方法，特別涉及一種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備方法，屬于小麥精深加工技術(shù)。
背景技術(shù)：
小麥胚芽是面粉加工的副產(chǎn)物，我國的小麥粉生產(chǎn)量巨大，因此小麥胚芽的產(chǎn)量也很可觀。小麥胚芽除了含有較高的優(yōu)質(zhì)蛋白外，還含有維生素E、鎂、泛酸、磷、硫胺素等，是一種難得的天然健康食品資源。人們從植物中發(fā)現(xiàn)了很多種抗腫瘤活性蛋白，國外有研究者從小麥胚芽發(fā)酵提取物中分離得到多肽類成分，并證明其具有抗腫瘤效果。小麥胚芽蛋白和多肽的抗氧化、抗衰老、抗疲勞等生理活性得到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注，其抗腫瘤活性報道很少。有報道認為小麥胚芽水溶性提取物能明顯抑制S-180肉瘤的生長，同時提高荷瘤小鼠免疫器官的重量，并可使荷瘤小鼠的腹腔巨噬細胞活性得到恢復(fù)，提高小鼠巨噬細的吞噬能力，且水提取物對MDA-MB231細胞生長有明顯的抑制效應(yīng)，但是究竟是何種成分起作用，并不清楚。由于脂溶性提取物、鹽溶性提取物及發(fā)酵提取物中不可避免的溶劑殘留和活性成分不明確，給以小麥胚芽為原料開發(fā)抗腫瘤保健食品或藥物帶來一定的不確定性，并且不能高效地實現(xiàn)小麥胚芽資源的增值轉(zhuǎn)化。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的主要在于提供一種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其以水作為提取液，天然健康，不僅不會導(dǎo)致所獲小麥胚芽蛋白中留存有毒有害物質(zhì)，還有利于提升所獲小麥胚芽蛋白的多種生理活性， 使其對人乳腺癌細胞株MDA-MB231的生長表現(xiàn)出顯著增殖抑制活性以及對正常細胞細胞的低毒性，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)中的不足。為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:—種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，包括:(I)取新鮮小麥胚芽進行低溫脫脂、粉碎處理，而后以水作為溶劑進行提取操作；(2)去除步驟(I)所獲混合提取液中的不溶物，并以硫酸銨對所獲上清液進行分級沉淀，其后分離出沉淀物，再將沉淀物復(fù)溶于水中進行透析處理，之后依次進行濃縮、冷凍干燥處理，獲得小麥胚芽水溶性蛋白；(3)將所述小麥胚芽水溶性蛋白溶于緩沖液中，并依次進行離子交換層析和凝膠過濾層析處理，獲得目標產(chǎn)物。作為較為優(yōu)選的實施方案之一，步驟(I)包括:以低溫萃取方式對小麥胚芽進行脫脂處理至小麥胚芽柏中的殘油值在2.0wt %以下；所述低溫萃取包括超臨界二氧化碳萃取、四號溶劑加壓萃取或有機溶劑低溫萃取。所述有機溶劑可選自但不限于正己烷、石油醚或丙酮。
所述低溫是指溫度在40°C以下。作為較為優(yōu)選的實施方案之一，步驟(I)包括:將脫脂后的小麥胚芽柏粉碎后過80-100目篩獲得脫脂麥胚粉，其后按照10: I (v/w)的液料比將水與脫脂麥胚粉混合，并攪拌提取，形成混合提取液。作為較為優(yōu)選的實施方案之一，步驟(2)包括:對步驟(I)所獲混合提取液進行離心處理，分離出其中的不溶物，同時收集上清液，并分步緩慢加入硫酸銨至上清液中停止析出沉淀物，而后離心分離出所述沉淀物，再將沉淀物復(fù)溶于水中，之后依次進行透析、濃縮和冷凍干燥處理。前述的“分步”是指先緩慢添加硫酸銨至相對較低的飽和度狀態(tài)，將鹽析出的蛋白分離除去，然后再添加硫酸銨達到相對較高的飽和度狀態(tài)，再離心分離出鹽析蛋白，藉此得到比較純的目標蛋白，剔除雜蛋白，這也是分步階梯鹽析。尤為優(yōu)選的，步驟(2)還包括:將所述不溶物再次以水進行提取操作，其后再次離心分離出不溶物，并再次收集上清液，之后加入硫酸銨進行分步分級沉淀，所述分步分級沉淀的過程包括:室溫條件下，加入硫酸銨到上清液至15-20%飽和度，析出蛋白，離心棄之，收集上清液再加入硫酸銨至20-40 %飽和度，收集所得析出蛋白組分。
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尤為優(yōu)選的，步驟(2)中的離心操作均采用低溫離心操作，所述低溫離心操作的條件包括:轉(zhuǎn)速為8000r/min以上，溫度在O 4°C，時間為20min以上。作為較為優(yōu)選的實施方案之一，步驟(3)包括:將所述小麥胚芽水溶性蛋白溶于Tris-HCl緩沖液中，并依次過DEAE-Sepharose FF離子交換層析柱和Superdex20010/300_GL凝膠過濾層析柱，獲得目標產(chǎn)物。作為較為優(yōu)選的實施方案之一，步驟(3)中所述離子交換層析處理及凝膠過濾層析處理的條件包括:以緩沖液作為洗脫液，并且所述洗脫液的流速分別為1.0 2.0mL/min、0.2 0.5mL/min。作為較為優(yōu)選的實施方案之一，所述小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝具體包括:(I)取除雜后的新鮮小麥胚芽進行低溫脫脂，再將脫脂后的小麥胚芽柏風(fēng)干后過60 80目篩，除去附著的細粉，而后粉碎過80 100目篩，獲得脫脂麥胚粉；(2)按8: I 12: I (v/w)的液料比將水與脫脂麥胚粉混合，以180 220r/min的速度振蕩提取3h以上，其后低溫離心，收集上清液，并將分離出的固形物與水按照4:1 6:1的液料比提取Ih以上，之后再次低溫離心，合并上清液，并分步緩慢加入硫酸銨至達到飽和狀態(tài)，而后靜置3h以上，低溫離心出沉淀，加水復(fù)溶后裝入透析袋中，置于4°C以下的水中透析24h以上，濃縮后冷凍干燥，制得小麥胚芽水溶性蛋白；(3)將小麥胚芽水溶性蛋白溶解于pH值7.4 8.0、10 20mmol/LTris-HCl緩沖液中，且使形成的小麥胚芽水溶性蛋白溶液的濃度為5 10mg/mL，再上樣于經(jīng)過上樣緩沖液平衡的DEAE-Sepharose FF陰離子交換柱，并以含O 0.8mol/LNaCl的pH值7.4
8.0、10 20mmol/LTris-HCl緩沖液為洗脫劑按照1.0 2.0mL/min的流速進行洗脫，收集洗脫物置于4°C以下的水中透析24h以上，冷凍干燥，分離得到抗腫瘤活性組分；(4)將抗腫瘤活性組分溶解于？!1值7.4、含有50 150臟01/1似(:1，30 60臟01/L磷酸鹽緩沖液，且使形成的抗腫瘤活性組分溶液的濃度為以2 4mg/mL上樣于經(jīng)過平衡的superdex20010/300GL凝膠柱,用緩沖液按照0.4mL/min的流速洗脫,獲得目標產(chǎn)物。作為較為優(yōu)選的實施方案之一，步驟⑵中0°C下硫酸銨的飽和度為20wt% 40wt %。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明至少具有如下有益效果:(1)本發(fā)明以水作為溶劑，天然健康，不僅不會導(dǎo)致所獲小麥胚芽蛋白中留存毒有害物質(zhì)，還有利于提升所獲小麥胚芽蛋白的多種生理活性，并且 本發(fā)明工藝簡單，成本低廉，易于規(guī)?；瘧?yīng)用；(2)采用本發(fā)明制備得到的產(chǎn)品為白色絮狀，單一組分，對人乳腺癌細胞株MDA-MB231的生長具有顯著的增值抑制活性，IC50值為22.33 μ g/mL,而且對正常細胞的毒性很小。(3)本發(fā)明為小麥胚芽的深度開發(fā)和利用提供了有效途徑。


圖1是本發(fā)明一較佳實施方案中一種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝流程圖；圖2是本發(fā)明一較佳實施方案中WGWSP的DEAE-S印harose FF層析圖譜，其中:WGWSPl 是 Omol/L NaCl 洗脫峰，WGWSP2 是 0.3mol/L NaCl 洗脫峰，WGWSP3 是 0.8mol/L NaCl洗脫峰；圖3是本發(fā)明一較佳實施方案中Superdex20010/300GL凝膠過濾層析圖譜。圖4是本發(fā)明一較佳實施方案中WGWSP11高效液相圖譜；圖5是本發(fā)明一較佳實施方案中所獲WGWSP11的SDS-PAGE考馬斯亮藍染色圖，其中I為加疏基乙醇，M為標準蛋白，2為不加疏基乙醇。
具體實施例方式本發(fā)明的一個方面旨在提供一種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其可以包括:以新鮮小麥胚芽為原料，通過低溫萃取(如，超臨界二氧化碳萃取，四號溶劑加壓萃取，有機溶劑低溫萃取)脫脂，粉碎，震蕩水提取，離心分離，收集上清液，加硫酸銨分級沉淀，離心分離，收集沉淀，復(fù)溶，透析，冷凍干燥得到小麥胚芽水溶性蛋白質(zhì)(WGWSP)，WGffSP溶解于緩沖液中上DEAE-S印harose FF離子交換層析住，分離得到抗腫瘤活性組分(WGWSPl)，(WGffSPl)溶解于緩沖液中上Superdex20010/300GL凝膠過濾層析柱，得到目標產(chǎn)物(抗腫瘤活性組分，WGffSP11)。作為較佳的具體應(yīng)用方案之一，參閱圖1-圖5，該制備工藝可以包括:(I)小麥胚芽水溶性蛋白質(zhì)WGWSP的制備:除雜后的新鮮小麥胚芽加入正己烷浸泡脫脂，間隔2小時更換一次正己烷，直至滴在濾紙上的上清液風(fēng)干后無油印為止。將脫脂后的麥胚風(fēng)干后過篩除去附著的細粉，經(jīng)搖擺式高速中藥粉碎機粉碎過篩得到細粉即為脫脂麥胚粉。(2)以水為提取溶劑，料液比1: 10，在氣浴振蕩器上以180 220r/min的速度提取3h，然后低溫離心，殘渣用一半的水提取lh，相同條件離心，合并上清液，緩緩向其中加入硫酸銨固體進行分步分級沉淀，然后低溫離心，沉淀加水復(fù)溶，然后將其裝入透析袋中，置于4°C水中透析24h，濃縮后冷凍干燥，制得WGWSP ；
(3) DEAE-SepharoseFF離子交換層析及各層析組分的抗腫瘤活性檢測小麥胚芽水溶性蛋白冷凍干燥樣品WGWSP溶解于pH8.0, 20mmol/LTris-HCl緩沖液中，WGffSP濃度為5 10mg/mL，通過0.22 μ m的微孔濾膜后，上樣于經(jīng)過上樣緩沖液平衡的 DEAE-Sepharose FF 陰離子交換柱，依次用 0、0.3、0.8mol/LNaCl 的 pH8.0、20mmol/LTris-HCl緩沖液為洗脫劑進行洗脫，流速為1.6mL/min, HD-5檢測器檢測，檢測波長280nm,自動收集器5min收集一管。得到3個組分WGWSPl、WGWSP2、WGWSP3，置于4°C水中透析24h脫鹽，冷凍干燥，分離得到抗腫瘤活性組分WGWSPl ；抗腫瘤活性檢測:采用人乳腺癌細胞株MDA-MB231作為受試細胞株，MTT法測定WGffSPU WGffSP2, WGffSP3的抗腫瘤活性，經(jīng)檢測可知，WGffSPl對人乳腺癌細胞株MDA-MB231有較強的增殖抑制活性。(4) Superdex20010/300GL凝膠過濾層析及各層析組分的抗腫瘤活性檢測將WGWSPl 以 2 4mg/mL 溶解于 ρΗ7.4，含有 150mmol/LNaCl，50mmol/L 磷酸鹽緩沖液，通過0.22 μ m的微孔濾膜后，上樣于經(jīng)過平衡的AKTApurifierlO蛋白純化系統(tǒng)上的superdex20010/300GL凝膠柱,用緩沖液洗脫,流速0.4mL/min,收集各峰檢測其抗腫瘤活性得到活性峰WGWSP12。抗腫瘤活性檢測:采用人乳腺癌細胞株MDA-MB231作為受試細胞株，MTT法測定WGffSP 11、WGffSP 12、WGffSP 13、WGffSP 14的抗腫瘤活性，經(jīng)檢測可知，WGWSP11對人乳腺癌細胞株MDA-MB231有較強的增殖抑制活性，通過對正常細胞人胚腎細胞HEK-293的增殖抑制活性測定，發(fā)現(xiàn)WGWSPlI對正常細胞IC5tl為191.719 μ g/mL,遠遠大于對MDA-MB231的IC5tl值22.33 μ g/mL。(5) WGWSPl I 純度鑒定采用SEC-HPLC進 行WGWSP12的純度鑒定，使用了 Hitachi高效液相系統(tǒng)和ShodexKW-804蛋白柱。柱子的洗脫極限為1，000, OOODa,分離柱效大于20，OOODa,流動相為50mmol / L的磷酸鹽緩沖液(pH7.0)，洗脫速率為lml/min，洗脫液在280nm處檢測，色譜柱溫為室溫。經(jīng)驗證得知，WGffSP12為一個對稱峰，其保留時間為11.84min。(6)WGWSP12的分子量分布情況采用還原和非還原的聚丙烯酰胺凝膠電泳對WGWSP11的分子量進行鑒定，證明WGffSP12為單一的條帶，為電泳純蛋白，分子量約為41kDa。以下結(jié)合若干較佳實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步說明。實施例1將400mL水加入盛有40g脫脂麥胚粉的500mL三角瓶中，在氣浴振蕩器上以200r/min的速度提取3h，然后10000r/min，4°C，20min離心得到上清液，將殘渣用200mL對應(yīng)溶劑提取lh，相同條件下離心，合并上清液，向其中加入固體硫酸銨63.6g，至飽和度20%，再攪拌40min,靜置3h,然后10000r/min, 4 , 20min離心,收集上清,繼續(xù)添加固體硫酸銨72g，至飽和度40%，攪拌40min，靜置3h，然后10000r/min，4°C，20min離心，棄去上清液收集沉淀，沉淀加少量水復(fù)溶，然后將其裝入透析袋中，置于4°C水中透析24h，濃縮后冷凍干燥，制的WGWSP。取220mg小麥胚芽水溶性蛋白冷凍干燥樣品(WGWSP)，溶解于IOmLTris-HCl緩沖液中，加入到DEAE-Sepharose FF離子交換柱中，依次用pH8.0、20mmol/LTris_HCl緩沖液、含0.3mol/LNaCl的Tris-HCl緩沖液和含0.8mol/LNaCl的Tris-HCl緩沖液為洗脫劑進行洗脫，流速為1.6mL/min，收集組分I (WGWSPl)雙蒸水透析脫鹽，冷凍干燥。取5mgWGffSPl溶解于2mL磷酸鹽緩沖液中,加入到Superdex_200凝膠過濾柱中,用磷酸鹽緩沖液進行洗脫，收集組分3，雙蒸水透析脫鹽，冷凍干燥，制備得到WGWSPlI。通過此方法制得的小麥胚芽抗腫瘤蛋白WGWSP11白色絮狀，相對分子質(zhì)量約為41kDa，對人乳腺癌細胞株MDA-MB231的生長有顯著的增殖抑制活性，IC50值為22.33 μ g/mL，對正常細胞人胚腎細胞毒性很小，人胚腎細胞的IC50值為191.72 μ g/mL。實施例2將2000mL水加入盛有200g脫脂麥胚粉的2500mL三角瓶中，在氣浴振蕩器上以200r/min的速度提取3h，然后10000r/min，4°C，20min離心得到上清液，將殘渣用IOOOmL對應(yīng)溶劑提取Ih,相同條件下離心,合并上清液，向其中加入固體硫酸銨318g,至飽和度20%，再攪拌40分鐘，靜置3h，然后10000r/min，4°C，20min離心，收集上清，繼續(xù)添加固體硫酸銨360g，至飽和度40%，再攪拌40分鐘，靜置3h，然后10000r/min，4°C，20min離心，棄去上清液收集沉淀，沉淀加少量水復(fù)溶，然后將其裝入透析袋中，置于4°C水中透析24h，濃縮后冷凍干燥，制的WGWSP。取180mg小麥胚芽水溶性蛋白冷凍干燥樣品(WGWSP)，溶解于5mLTris-HCl緩沖液中，加入到DEAE-Sepharose FF離子交換柱中，依次用pH8.0、20mmol/LTris-HCl 緩沖液、含 0.3mol/LNaCl 的 Tris-HCl 緩沖液和含 0.8mol/LNaCl 的 Tris-HCl 緩沖液為洗脫劑進行洗脫，流速為1.6mL/min，收集組分I (WGWSPl)雙蒸水透析脫鹽，冷凍干燥。取9mg WGffSPl溶解于3mL磷酸鹽緩沖液中，加入到Superdex_200凝膠過濾柱中，用磷酸鹽緩沖液進行洗脫，收集組分3，雙蒸水透析脫鹽，冷凍干燥，制備得到WGWSPlI。需要指出的是，以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例，并不用于限制本發(fā)明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、改進等，均應(yīng)包括在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。`
權(quán)利要求
1.一種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，包括: (1)取新鮮小麥胚芽進行低溫脫脂、粉碎處理，而后以水作為溶劑進行提取操作； (2)去除步驟(1)所獲混合提取液中的不溶物，并以硫酸銨對所獲上清液進行分級沉淀，其后分離出沉淀物，再將沉淀物復(fù)溶于水中進行透析處理，之后依次進行濃縮、冷凍干燥處理，獲得小麥胚芽水溶性蛋白； (3)將所述小麥胚芽水溶性蛋白溶于緩沖液中，并依次進行離子交換層析和凝膠過濾層析處理，獲得目標產(chǎn)物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(I)包括:以低溫萃取方式對小麥胚芽進行脫脂處理至小麥胚芽柏中的殘油值在2.0wt %以下； 所述低溫萃取包括超臨界二氧化碳萃取、四號溶劑加壓萃取或有機溶劑低溫萃取。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(I)包括:將脫脂后的小麥胚芽柏粉碎后過80-100目篩獲得脫脂麥胚粉，其后按照10: I (v/w)的液料比將水與脫脂麥胚粉混合，并攪拌提取，形成混合提取液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(2)包括:對步驟(1)所 獲混合提取液進行離心處理，分離出其中的不溶物，同時收集上清液，并分步緩慢加入硫酸銨至上清液中停止析出沉淀物，而后離心分離出所述沉淀物，再將沉淀物復(fù)溶于水中，之后依次進行透析、濃縮和冷凍干燥處理。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(2)還包括:將所述不溶物再次以水進行提取操作，其后再次離心分離出不溶物，并再次收集上清液，之后加入硫酸銨進行分步分級沉淀。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(2)中的離心操作均采用低溫離心操作，所述低溫離心操作的條件包括:轉(zhuǎn)速為8000r/min以上，溫度在O 4°C，時間為20min以上。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(3)包括:將所述小麥胚芽水溶性蛋白溶于Tris-HCl緩沖液中，并依次過DEAE-S印harose FF離子交換層析柱和SuperdeX20010/300GL凝膠過濾層析柱，獲得目標產(chǎn)物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(3)中所述離子交換層析處理及凝膠過濾層析處理的條件包括:以緩沖液作為洗脫液，并且所述洗脫液的流速分別為1.0 2.0mL/min、0.2 0.5mL/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，具體包括: (1)取除雜后的新鮮小麥胚芽進行低溫脫脂，再將脫脂后的小麥胚芽柏風(fēng)干后過60 80目篩，除去附著的細粉，而后粉碎過80 100目篩，獲得脫脂麥胚粉； (2)按8: 1 12: 1 (v/w)的液料比將水與脫脂麥胚粉混合，以180 220r/min的速度振蕩提取3h以上，其后低溫離心，收集上清液，并將分離出的固形物與水按照4: I 6: I的液料比提取Ih以上，之后再次低溫離心，合并上清液，并分步緩慢加入硫酸銨至達到飽和狀態(tài)，而后靜置3h以上，低溫離心出沉淀，加水復(fù)溶后裝入透析袋中，置于4°C以下的水中透析24h以上，濃縮后冷凍干燥，制得小麥胚芽水溶性蛋白； (3)將小麥胚芽水溶性蛋白溶解于pH值7.4 8.0、10 20mmol/LTriS-HCl緩沖液中，且使形成的小麥胚芽水溶性蛋白溶液的濃度為5 10mg/mL，再上樣于經(jīng)過上樣緩沖液平衡的DEAE-Sepharose FF陰離子交換柱，并以含O 0.8mol/LNaCl的pH值7.4 8.0、10 20mmol/LTris-HCl緩沖液為洗脫劑按照1.0 2.0mL/min的流速進行洗脫，收集洗脫物置于4°C以下的水中透析24h以上，冷凍干燥，分離得到抗腫瘤活性組分； (4)將抗腫瘤活性組分溶解于pH值7.4、含有50 150mmol/LNaCl，30 60mmol/L磷酸鹽緩沖液，且使形成的抗腫瘤活性組分溶液的濃度為以2 4mg/mL上樣于經(jīng)過平衡的superdex20010/300GL凝膠柱,用緩沖液按照0.4mL/min的流速洗脫,獲得目標產(chǎn)物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，其特征在于，步驟(2)中O°C下硫酸銨的飽和度為20wt % 40wt%。
全文摘要
一種小麥胚芽抗腫瘤蛋白的制備工藝，包括(1)取新鮮小麥胚芽進行低溫脫脂、粉碎處理，而后以水作為溶劑進行提取操作；(2)去除步驟(1)所獲混合提取液中的不溶物，并以硫酸銨對所獲上清液進行分步分級沉淀，其后分離出沉淀物，再將沉淀物復(fù)溶于水中進行透析處理，之后依次進行濃縮、冷凍干燥處理，獲得小麥胚芽水溶性蛋白；(3)將小麥胚芽水溶性蛋白溶于緩沖液中，并依次進行離子交換層析和凝膠過濾層析處理，獲得目標產(chǎn)物。本發(fā)明以水作為提取液，天然健康，不會導(dǎo)致所獲產(chǎn)物中留存有毒物質(zhì)，利于提升所獲產(chǎn)物的生理活性，且工藝簡單，成本低廉，同時所獲產(chǎn)品對人乳腺癌細胞株的生長具有顯著的增值抑制活性，而對正常細胞的毒性很小。
文檔編號C07K1/30GK103087169SQ201310046768
公開日2013年5月8日 申請日期2013年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月5日
發(fā)明者朱科學(xué), 周會會, 郭曉娜, 周惠明, 彭偉 申請人:江南大學(xué)