專利名稱：用于巖藻糖的結(jié)晶的方法
用于巖藻糖的結(jié)晶的方法發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及單糖的分離，S卩，巖藻糖從有關(guān)的單糖，特別是從它的一個(gè)或多個(gè)差向異構(gòu)體中結(jié)晶和分離。
發(fā)明背景
巖藻糖(6-脫氧-半乳糖)是通常所說的稀有單糖的實(shí)例中的一種。在來自許多不同來源的許多種類的天然產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)了 D-型和L-型兩種形式的巖藻糖。巖藻糖出現(xiàn)在多種人乳低聚糖、海膽卵和蛙卵中。L-巖藻糖存在于來自植物的多糖中，所述植物例如為海藻(以巖藻依聚糖、硫酸化巖藻糖聚合物的形式)、黃芪膠、馬鈴薯、獼猴桃、大豆、翼豆各變種、卡諾拉油菜(canola)等。在植物物質(zhì)中，巖藻糖典型地與植物多糖有關(guān)，所述植物多糖通常是具有位于多糖鏈端部或鏈內(nèi)的L-吡喃巖藻糖基單元的高度分支結(jié)構(gòu)。人類或動(dòng)物糖蛋白的N-和O-糖基鏈兩者均可以含有結(jié)合在碳水化合物鏈末端的L-巖藻糖。此外，來自各種細(xì)菌、真菌和微藻類的胞外多糖也含有L-巖藻糖。
最近，因?yàn)槠湓卺t(yī)學(xué)領(lǐng)域中處理各種病癥如腫瘤、炎癥和與人類免疫系統(tǒng)有關(guān)的失調(diào)，對(duì)于L-巖藻糖的興趣增加了。L-巖藻糖也已被應(yīng)用于化妝品領(lǐng)域，例如用于皮膚增濕、皮膚再生和抗衰老劑或用于防止表皮(皮膚)發(fā)炎。
盡管由本領(lǐng)域用酶輔助或微生物輔助制備巖藻糖是已知的，但是L-巖藻糖通常由自然來源或者經(jīng)由普通單糖的化學(xué)改性得到(見關(guān)于L-巖藻糖的回顧P. T. Vanhooren 等，J. Chem. Technol. Biotechnol. 74,479(1999)以及文中引用的參考文件)。
關(guān)于由自然來源制備巖藻糖，將含有巖藻糖的低聚糖水解以提供含有巖藻糖以及相關(guān)的糖類和/或其衍生物的復(fù)雜混合物，所述含有巖藻糖的低聚糖可以被從生物質(zhì)、優(yōu)選從藻類中例如通過萃取而分離。從所述混合物中回收巖藻糖典型地需要復(fù)雜的分離技術(shù)，例如用 陰離子或陽離子交換樹脂處理或?qū)游?、滲析、分步結(jié)晶等，這取決于共存的糖類或與糖有關(guān)的化合物的性質(zhì)。例如，P. Saari等人的論文(J. Liquid Chrom. Rel. Tech. 32, 2050(2009))和國際申請(qǐng)WO 2005/040430公開了，通過陽離子和/或陰離子交換樹脂或它們的組合的方式，對(duì)由制漿工藝所得的廢液進(jìn)行層析分離。隨后將富含巖藻糖(至少72% ) 并且也含有鼠李糖、甲基a -D-吡喃木糖苷、木糖、阿拉伯糖和半乳糖的所得到的糖漿從無水乙醇中分步結(jié)晶，以獲得巖藻糖。
關(guān)于L-巖藻糖的化學(xué)合成，已經(jīng)公布了對(duì)普通單糖例如L-半乳糖、D-半乳糖、 L-阿拉伯糖、D-葡萄糖、D-甘露糖和L-鼠李糖的化學(xué)改性。最好的方法之一(J. Defaye 等人，Carbohydr. Res. 126，165 (1984)，方案1. ,R = Me)由L-鼠李糖起始，首先將其轉(zhuǎn)化為甲基鼠李糖酐(A)，隨后作為2，3-0-異亞丙基縮醛⑶受到保護(hù)。
權(quán)利要求
1.一種用于巖藻糖的結(jié)晶的方法，其特征在于，由包含巖藻糖和選自6-脫氧-塔洛糖和6-脫氧-古洛糖中的至少一種6-脫氧糖的混合物進(jìn)行所述結(jié)晶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中巖藻糖是L-巖藻糖，6-脫氧-塔洛糖是6-脫氧-L-塔洛糖并且6-脫氧-古洛糖是6-脫氧-L-古洛糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)所述的方法，其中使用一種以上的C1-C6醇作為一種或多種溶劑進(jìn)行所述結(jié)晶。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的方法，其中使用C1-C4醇、優(yōu)選C3-醇或C4-醇、 優(yōu)選異丁醇作為溶劑進(jìn)行所述結(jié)晶。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的方法，其中就巖藻糖和選自6-脫氧-塔洛糖和6-脫氧-古洛糖中的至少一種6-脫氧糖的組合量而論,使用具有大于O. lmg/ml、優(yōu)選O.2-0. 3mg/ml的濃度的溶液進(jìn)行所述結(jié)晶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的方法，其中就巖藻糖和6-脫氧-塔洛糖的組合量而論，使用具有大于O. lmg/ml、優(yōu)選O. 2-0. 3mg/ml的濃度的溶液進(jìn)行所述結(jié)晶。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的方法，其中將所述混合物加熱至高于50°C的溫度、優(yōu)選加熱至回流，并且隨后將其冷卻至最高25°C的溫度。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的方法，其中使用異丁醇作為溶劑進(jìn)行所述結(jié)晶， 并且其中將所述溶液首先溫?zé)嶂粱亓鞑⑶译S后將其冷卻至25°C。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的方法，其中包含巖藻糖和選自6-脫氧-塔洛糖和6-脫氧-古洛糖中的至少一種6-脫氧糖的混合物是由在Mo(VI)的存在下的6-脫氧-塔洛糖的差向異構(gòu)反應(yīng)得到的。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中在以MoO3的形式的Mo(VI)的存在下對(duì)6-脫氧-L-塔洛糖進(jìn)行差向異構(gòu)。
11.根據(jù)權(quán)利要求9和10中任一項(xiàng)所述的方法，其中6-脫氧-L-塔洛糖是由L-鼠李糖得到的。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項(xiàng)所述的方法，其中將包含巖藻糖和6-脫氧-塔洛糖的所述結(jié)晶的母液再循環(huán)。
全文摘要
本申請(qǐng)公開了一種用于巖藻糖的結(jié)晶的方法，其特征在于，由包含巖藻糖和選自6-脫氧-塔洛糖和6-脫氧-古洛糖中的至少一種6-脫氧糖的混合物進(jìn)行所述結(jié)晶。在一個(gè)實(shí)施方案中，該混合物包含巖藻糖和6-脫氧-塔洛糖。
文檔編號(hào)C07H1/06GK103025748SQ201180023903
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2011年5月19日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月19日
發(fā)明者朱莉安·布泰, 久洛·戴卡尼, 昂內(nèi)斯·亞諾希, 蓋爾蓋伊·皮帕, 費(fèi)倫茨·霍瓦特, 克里斯蒂安·科瓦奇, 伊格納西奧·佩雷斯費(fèi)格羅拉, 馬庫斯·赫德羅斯, 安德烈亞斯·施羅溫, 揚(yáng)尼斯·弗拉斯達(dá)斯, 皮羅什卡·科瓦奇-彭澤什, 克里斯蒂安·里辛格, 尚多爾·德姆科, 拉斯·克羅杰, 克里斯托夫·勒里希 申請(qǐng)人:格禮卡姆股份公司