專利名稱：一種苜蓿素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，尤其是涉及一種采用超臨界(X)2萃取技術(shù)結(jié)合聚酰胺樹脂純化苜蓿素的方法。
背景技術(shù)：
紫花苜蓿Medicago sativa L.為多年生豆科(Leguminosa)草本植物，世界各地廣泛作為牧草使用，在我國主要分布于西北、華北、東北、西南地區(qū)。在我國民間用于治療消化不良、肺熱咳嗽、黃疸、膀胱結(jié)石等癥?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)苜蓿具有降低膽固醇、防治冠心病等活性，紫花苜蓿主要含有黃酮、皂苷、香豆素、留醇、單萜和有機酸等化學(xué)成分，其中黃酮類化合物是主要功效成分類群。苜蓿素(tricin)，又名小麥黃素、麥黃酮，為紫花苜蓿中主要有效成分之一，屬黃酮類物質(zhì)，能抑制小腸蠕動收縮，并有顯著的抗過敏、抗氧化、抗腫瘤等生物活性。翟愛華等研究表明苜蓿素還可作為添加劑加入至面包中提高面包中蛋白質(zhì)的含量，并且確定了苜蓿素的添加量。苜蓿素=C17H14O7,淡黃色針狀結(jié)晶體。mp. 291 292°C?，F(xiàn)有對苜蓿素的研究較少，市場上也還沒有苜蓿素對照品的出售，限制了苜蓿素的進(jìn)一步研究。目前對苜蓿素的提取研究，大多是采用柱層析或制備高液相的方法，該種方法制備量少、周期長。如張銳等公開的“制備高效液相色譜從竹根中制備苜蓿素的方法”，該文獻(xiàn)采用的方法是乙醇液提取，濃縮后加水分散再用乙酸乙酯萃取，萃取液回收乙酸乙酯至干，干法上硅膠柱層析，最后采用制備高效液相制得苜蓿素，該方法雖制得較高含量的苜蓿素，但制備周期長，溶劑使用量大且制備量少。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種高含量的苜蓿素的制備方法，該方法操作簡便，能耗相對小，且制得的苜蓿素純度高。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是這樣來實現(xiàn)的一種苜蓿素的制備方法，其特征在于包含以下步驟以紫花苜蓿為原料，粉碎，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，通入乙醇或甲醇作為夾帶劑參與萃取，收集苜蓿素萃取物，用乙醇溶解，加入聚酰胺樹脂拌樣，揮干溶劑，裝柱，先用水洗去雜質(zhì)，再用酸醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用乙酸乙酯重結(jié)晶即得苜蓿素產(chǎn)品。所述的超臨界CO2萃取參數(shù)條件為萃取溫度為40-55°C，萃取壓力為25_35MPa，0)2 流量為15-30L/h，萃取時間為1-2. 5h，分離釜I溫度為30_40°C，壓力為8-lOMPa，分離釜II 溫度為22-30°C，壓力為5-8MPa。所述的夾帶劑用量是藥材量的10 30%。所述的聚酰胺樹脂粒度為80 200目，用量是藥材的1/3 2/3 (w/w)。所述的酸醇為含鹽酸的70 90%乙醇溶液，用量為3 7BV。所述的乙酸乙酯重結(jié)晶步驟為將結(jié)晶物用乙酸乙酯加熱溶解，濾除不溶物，回收乙酸乙酯至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶即得產(chǎn)品。本方法積極效果是1)本方法采用超臨界CO2萃取，能耗低，萃取劑CO2清潔無污染；2)本方法采用聚酰胺樹脂純化苜蓿素，處理量大，洗脫溶劑簡單。3)本方法工藝步驟操作較簡單，易操作，所得產(chǎn)品純度高。下面將結(jié)合具體實施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 取紫花苜蓿1kg，粉碎，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，設(shè)定萃取釜條件為 萃取溫度為40°C，萃取壓力為25MPa，CO2流量為15L/h，萃取時間為2.釙，通入IOOml乙醇作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜條件為分離釜I溫度為30°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為22°C，壓力為5MPa，在分離釜II中收集苜蓿素萃取物，用適量乙醇溶解，加入350g聚酰胺樹脂(80目)拌樣，揮干溶劑，裝柱，先用2BV水洗去雜質(zhì)，再用3BV含鹽酸的90% 乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用乙酸乙酯重結(jié)晶1次即得苜蓿素產(chǎn)品0. 23g，HPLC檢測含量98. 1%.實施例2 取紫花苜蓿10kg，粉碎，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，設(shè)定萃取釜條件為 萃取溫度為，萃取壓力為35MPa，CO2流量為30L/h，萃取時間為lh，通入2L甲醇作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜條件為分離釜I溫度為40°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為 30°C，壓力為8MPa，在分離釜II中收集苜蓿素萃取物，用適量乙醇溶解，加入6kg聚酰胺樹脂(120目)拌樣，揮干溶劑，裝柱，先用3BV水洗去雜質(zhì)，再用7BV含鹽酸的70%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用乙酸乙酯重結(jié)晶2次即得苜蓿素產(chǎn)品2. 74g，HPLC檢測含量98. 5%0實施例3 取紫花苜蓿20kg，粉碎，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，設(shè)定萃取釜條件為 萃取溫度為45°C，萃取壓力為30MPa，CO2流量為25L/h，萃取時間為池，通入3L乙醇作為夾帶劑參與萃取，設(shè)定分離釜條件為分離釜I溫度為35°C，壓力為9MPa，分離釜II溫度為 25°C，壓力為6MPa，在分離釜II中收集苜蓿素萃取物，用適量乙醇溶解，加入8kg聚酰胺樹脂(200目)拌樣，揮干溶劑，裝柱，先用4BV水洗去雜質(zhì)，再用6BV含鹽酸的85%乙醇溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積,放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用乙酸乙酯重結(jié)晶3次即得苜蓿素產(chǎn)品5. 5g，HPLC檢測含量98. 7%。
權(quán)利要求
1.一種苜蓿素的制備方法，其特征在于包含以下步驟以紫花苜蓿為原料，粉碎，加入萃取釜中，采用超臨界(X)2萃取，通入乙醇或甲醇作為夾帶劑參與萃取，收集苜蓿素萃取物， 用乙醇溶解，加入聚酰胺樹脂拌樣，揮干溶劑，裝柱，先用水洗去雜質(zhì)，再用酸醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用乙酸乙酯重結(jié)晶即得苜蓿素產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述苜蓿素的制備方法，其特征在于所述的超臨界CO2萃取參數(shù)條件為萃取溫度為40-55°C，萃取壓力為25-35MPa，萃取時間為1_2. 5h，分離釜I溫度為 30-40°C，壓力為8-10MPa，分離釜II溫度為22_30°C，壓力為5_8MPa。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述苜蓿素的制備方法，其特征在于所述的夾帶劑用量是藥材量的 10 30%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述苜蓿素的制備方法，其特征在于所述的聚酰胺樹脂粒度為80 200目，用量是藥材的1/3 2/3 (w/w)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述苜蓿素的制備方法，其特征在于所述的酸醇為含鹽酸的 70 90%乙醇溶液，用量為3 7BV。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述苜蓿素的制備方法，其特征在于所述的乙酸乙酯重結(jié)晶步驟為將結(jié)晶物用乙酸乙酯加熱溶解，濾除不溶物，回收乙酸乙酯至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶艮口得廣品。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種苜蓿素的制備方法，方法是以紫花苜蓿為原料，粉碎，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集苜蓿素萃取物，用乙醇溶解，加入聚酰胺樹脂拌樣，揮干溶劑，裝柱，先用水洗去雜質(zhì)，再用酸醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至小體積，放置結(jié)晶，濾出結(jié)晶物用乙酸乙酯重結(jié)晶即得苜蓿素產(chǎn)品。本方法具有能耗低，制備周期短，產(chǎn)品純度高的優(yōu)點。
文檔編號C07D311/30GK102241656SQ20111011795
公開日2011年11月16日 申請日期2011年5月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月6日
發(fā)明者蘇劉花 申請人:南京澤朗農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司