專利名稱：慢性乙型肝炎肝纖維化的血清多肽標(biāo)記物及其檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及生物醫(yī)學(xué)中診斷肝纖維化血清分子標(biāo)記物，具體涉及一類非創(chuàng)傷性診斷慢性乙型肝炎肝纖維化的血清多肽分子標(biāo)記物。
背景技術(shù)：
長期以來，肝穿刺活檢一直是明確肝病病因、評價肝臟炎癥壞死及纖維化程度的金標(biāo)準(zhǔn)，對預(yù)后判斷、治療選擇及療效評估等具有重要臨床意義，但創(chuàng)傷性、取樣誤差、觀察者自身及觀察者間偏倚等不足給臨床應(yīng)用造成許多不便，目前臨床診療中迫切需要尋找便捷的非創(chuàng)傷性替代指標(biāo)。近年來，以血清指標(biāo)組合建立肝纖維化診斷模型成為世界性的研究熱點。在一系列肝纖維化非創(chuàng)傷性診斷模型中，較具代表性的包括采用慢性丙型肝炎病毒(HCV)感染患者建模的Fibrotest、Forns指數(shù)、APRI指數(shù)和HepascoreL等。而針對慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染的肝纖維化診斷模型仍研究較少，主要有上海市肝纖維化課題協(xié)作組(SLFG)所提出的Zeng模型M和我國香港的Hui模型。不過這些研究成果在我國慢性HBV感染患者中尚未得到有效驗證和臨床應(yīng)用。肝纖維化分期診斷的金標(biāo)準(zhǔn)目前國內(nèi)外采用肝活組織檢查+病理學(xué)診斷，屬于有創(chuàng)傷性的診斷方法，因此臨床應(yīng)用受局限。血清學(xué)檢測是臨床非創(chuàng)傷性肝纖維化診斷的有效方法，具有很好的應(yīng)用前景。目前創(chuàng)新性的血清肝纖維化診斷分子標(biāo)記物研究方法包括蛋白和多肽組學(xué)、糖組學(xué)、microRNA芯片等技術(shù)；多肽組學(xué)研究的優(yōu)點包括技術(shù)新穎，血清檢測方便易行，國內(nèi)開展具備一定可行性。多肽組學(xué)檢測人慢性乙型肝炎肝纖維化程度診斷尚未有國內(nèi)外文獻(xiàn)報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一類非創(chuàng)傷性診斷慢性乙型肝炎肝纖維化的血清多肽分子標(biāo)記物。本發(fā)明的血清多肽分子標(biāo)記物，作為一種非創(chuàng)傷性替代指標(biāo)，能高效預(yù)測慢性乙型肝炎肝纖維化的程度，對預(yù)后判斷、治療選擇及療效評估等具有現(xiàn)實的臨床意義。本發(fā)明提供了一組慢性乙型肝炎肝纖維化的血清多肽標(biāo)記物，所述的多肽標(biāo)記物是序列為SEQ ID NO 1-21的多肽中的一種或者幾種。按照表達(dá)量改變程度的不同，這組血清多肽標(biāo)記物，可以分為兩組SEQ ID NO 1-15的多肽中的一種或者幾種(表達(dá)量增加，上調(diào))，或者是SEQ ID NO 16-21的多肽中的一種或者幾種(表達(dá)量降低，下調(diào))。本發(fā)明的血清多肽分子標(biāo)記物，它含有以下21種表達(dá)差異標(biāo)志物15種升高(SEQID NO 1-15)和 6 種降低(SEQ ID NO 16-21)。
表I血清多肽分子標(biāo)記物
權(quán)利要求
1.一組慢性乙型肝炎肝纖維化的血清多肽標(biāo)記物，其特征在于，所述的多肽標(biāo)記物是序列為SEQ ID NO 1-21的多肽中的一種或者幾種。
2.如權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物，其特征在于，所述的多肽標(biāo)記物是SEQID NO1-15的多肽中的一種或者幾種。
3.如權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物，其特征在于，所述的多肽標(biāo)記物是SEQID NO16-21的多肽中的一種或者幾種。
4.權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物的檢測方法，其特征在于，取血清樣本，分離提純其中的多肽，檢測權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物的含量。
5.如權(quán)利要求4所述的檢測方法，其特征在于，使用質(zhì)譜、ELISA、HPLC或者小分子量電泳檢測權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物的含量。
6.權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物的應(yīng)用，其特征在于，根據(jù)權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物的含量判斷慢性乙型肝炎肝纖維化程度。
7.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，血清樣本中，序列為SEQID NO 1_15的多肽的含量為早期纖維化樣品含量的I. 5倍及以上的，相應(yīng)多肽的表達(dá)量異常。
8.如權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，血清樣本中，序列為SEQID NO 16-21的多肽的含量為早期纖維化樣品含量的66%及以下的，相應(yīng)多肽的表達(dá)量異常。
9.慢性乙型肝炎肝纖維化的診斷試劑盒，其特征在于，該診斷試劑盒中含有權(quán)利要求I所述的血清多肽標(biāo)記物。
全文摘要
本發(fā)明屬生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及生物醫(yī)學(xué)中肝纖維化血清分子標(biāo)記物，具體涉及一類非創(chuàng)傷性診斷慢性乙型肝炎肝纖維化的血清多肽分子標(biāo)記物。本發(fā)明提供了一組慢性乙型肝炎肝纖維化的血清多肽標(biāo)記物，是序列為SEQIDNO1-21的多肽中的一種或者幾種。本發(fā)明還提供了上述血清多肽標(biāo)記物的檢測方法和應(yīng)用，還提供了根據(jù)上述血清多肽標(biāo)記物制成的試劑盒。本發(fā)明中血清多肽分子標(biāo)記物及相關(guān)mRNA、MircoRNA等指標(biāo)可預(yù)測慢性乙型肝炎肝纖維化的程度，對預(yù)后判斷、治療選擇及療效評估。同時可以制備成不同的檢驗檢測用品，如制成診斷試劑盒、診斷試紙、診斷試劑；治療及預(yù)后評估相關(guān)試劑盒、試紙、試劑等。
文檔編號C07K7/06GK102653552SQ20111005013
公開日2012年9月5日 申請日期2011年3月2日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月2日
發(fā)明者徐銘益, 曲穎, 王燕, 董育瑋, 蔡曉波, 陸倫根 申請人:上海交通大學(xué)附屬第一人民醫(yī)院