專利名稱：一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，尤其是涉及一種應(yīng)用微濾膜和納濾膜精制三七總氨酸的方法。
背景技術(shù)：
三七，Panax notoginseng(Burk. )F. H. Chen，又名參三七、田七、山漆、金不換，五
加科人參屬植物，性溫，味甘、微苦。功能主治散瘀止血，消腫定痛。用于各種內(nèi)、外出血， 胸腹刺痛，跌撲腫痛。《本草綱目》記載三七“頗似人參之味”，“止血散血定痛”能治一切血癥，歷版中國藥典中也將三七的功能主治界定為止血?，F(xiàn)代藥理研究表明，三七中的非蛋白氨基酸具有非常好的止血效果，是三七的主要止血成分。三七總氨酸，主要成分為三七素(田七氨酸)分子式，C5H8N2O5 ；分子量，176. 13 ； 其半水合物為無色結(jié)晶(50%乙醇)，易溶于水，不溶于甲醇、乙醇、丙醇、丙酮等有機溶劑。 張勇等研究發(fā)現(xiàn)三七靜脈注射具有明顯的預(yù)防性和治療性的止血作用，其主要止血機理是縮短全血凝血時間、促進血液凝固、減少血漿TAP水平并降低纖維蛋白溶解活性。三七作為強效止血藥物現(xiàn)已受到廣泛重視，有著廣闊的研究前景?，F(xiàn)有三七素主要通過合成和提取兩個方面制得。三七素的提取主要是通過先醇提，殘渣水提，提取液濃縮后再經(jīng)正丁醇萃取，萃余層上kphadex LH-20和CM Sephadex C-25樹脂制得，該方法制得三七素含量高，但是制備量小，且用到的kphadex LH_2和CM Sephadex C_25價格較為昂貴，成本較高，不適宜大量制備?，F(xiàn)有專利“從三七中提取三七素的方法”(專利號200610027962. 1)，該專利采用的方法是先醇提，殘渣接著用水浸提，提取液醇沉后用正丁醇萃取，萃余液上陽離子樹脂，洗脫液用丙酮沉淀，最后重結(jié)晶得到純度較高的三七素，該方法溶劑用量大。

發(fā)明內(nèi)容
1、發(fā)明目的本發(fā)明的目的在于提供一種適用于工業(yè)化提取三七總氨酸的方法。2、技術(shù)方案—種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，其特征在于包括以下步驟1)提取將三七葉粉碎，加5 12倍量水提取1 3次，合并提取液；2)除雜攪拌上述提取液，在快速攪拌下緩慢加入絮凝劑溶液，混合均勻后慢速攪拌，靜置2 8h，離心或過濾將沉淀分離，得澄清液；3)膜分離將上述澄清液加入微濾裝置中微濾，微濾液再加入納濾裝置中納濾， 收集透過液；4)重結(jié)晶上述透過液回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用50 70%乙醇溶解結(jié)晶2 4次，干燥即得產(chǎn)品。步驟1)中的提取方式可選用回流、冷浸、超聲提取中的一種。步驟2)中的絮凝劑為CTS中藥絮凝劑，用量是藥液的0. 1 0. 8%o ；絮凝劑溶液的制備方法為，先將絮凝劑加水溶解，稀釋為1 2%絮凝劑溶液。步驟幻中的微濾膜選用無機陶瓷膜，材質(zhì)為氧化鋁、氧化鋯、氧化銻或氧化鈦，截留粒子范圍100 200nm，濾過壓力為200 500kPa。步驟3)中的納濾膜選用有機復(fù)合膜，材質(zhì)為聚酯類、聚乙烯類或聚酰胺類，截留分子量為200 400，濾過壓力為500 800kPa。步驟4)中的結(jié)晶條件為50 70%乙醇回流溶解，溶液回收至原體積的1/3 1/10，靜置結(jié)晶。本發(fā)明優(yōu)勢在于以下幾個方面1.本工藝采用膜-膜分離，操作簡單，提取率高，去除了大部分雜質(zhì)；2.采用無機陶瓷膜分離效率高，可低溫操作，氨基酸無損失，制得產(chǎn)品質(zhì)量好；3.采用納濾膜截留雜質(zhì)，截留三七皂苷類、黃酮類雜質(zhì)，納濾透過液中得到小分子的氨基酸，操作簡單，無損耗。 綜上所述，本發(fā)明具有條件溫和、氨基酸損失少、工序少，制備量大、節(jié)約能源等優(yōu)點，適于工業(yè)化放大。下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例1 將三七葉粉碎，稱取lKg，加入12L水冷浸提取2次，過濾，合并提取液，取2. 5gCTS 中藥絮凝劑，加250ml水稀釋，提取液在快速攪拌作用下加入CTS稀釋液，混合均勻后慢速攪拌，靜置池，過濾除去沉淀，濾液加入氧化鋁陶瓷膜中微濾，截留量為200nm，濾過壓力為 200kPa，收集微濾液加入分子截留量400的聚酯類復(fù)合納濾膜中納濾，濾過壓力為500kPa， 收集透過液，回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用50%的乙醇溶液加熱溶解， 濃縮至1/3體積，靜置結(jié)晶2次，干燥得到白色固體8. lg，含三七素72. 2%。實施例2 將三七葉粉碎，稱取lKg，加入5L水回流提取2次，過濾，合并提取液，取6gCTS中藥絮凝劑，加300ml水稀釋，提取液在快速攪拌作用下加入CTS稀釋液，混合均勻后慢速攪拌，靜置5h，離心除去沉淀，離心液加入氧化鈦陶瓷膜中微濾，截留量為lOOnm，濾過壓力為500kPa，收集微濾液加入分子截留量300的聚乙烯類復(fù)合納濾膜中納濾，濾過壓力為 600kPa，收集透過液，回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用60%的乙醇溶液加熱溶解，濃縮至1/4體積，靜置結(jié)晶3次，干燥得到白色固體7. 3g，含三七素74. 9%。實施例3 將三七葉粉碎，稱取lKg，加入6L水超聲提取2次，過濾，合并提取液，取4gCTS 中藥絮凝劑，加300ml水稀釋，提取液在快速攪拌作用下加入CTS稀釋液，混合均勻后慢速攪拌，靜置6h，過濾除去沉淀，濾液加入氧化鋯陶瓷膜中微濾，截留量為200nm，濾過壓力為300kPa，收集微濾液加入分子截留量200的聚酰胺類復(fù)合納濾膜中納濾，濾過壓力為 800kPa，收集透過液，回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用65%的乙醇溶液加熱溶解，濃縮至1/5體積，靜置結(jié)晶2次，干燥得到白色固體8. 7g，含三七素68. 4%。
實施例4 將三七葉粉碎，稱取^(g，加入40L水回流提取2次，過濾，合并提取液，取15gCTS 中藥絮凝劑，加IL水稀釋，提取液在快速攪拌作用下加入CTS稀釋液，混合均勻后慢速攪拌，靜置4h，離心除去沉淀，離心液加入氧化鋁陶瓷膜中微濾，截留量為300nm，濾過壓力為 250kPa，收集微濾液加入分子截留量300的聚酯類復(fù)合納濾膜中納濾，濾過壓力為650kPa， 收集透過液，回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用70%的乙醇溶液加熱溶解， 濃縮至1/10體積，靜置結(jié)晶4次，干燥得到白色固體38. 2g，含三七素69. 2%。實施例5:將三七葉粉碎，稱取^(g，加入30L水超聲提取3次，過濾，合并提取液，取20gCTS 中藥絮凝劑，加3L水稀釋，提取液在快速攪拌作用下加入CTS稀釋液，混合均勻后慢速攪拌，靜置5h，過濾除去沉淀，濾液加入氧化銻陶瓷膜中微濾，截留量為400nm，濾過壓力為 350kPa，收集微濾液加入分子截留量400的聚酯類復(fù)合納濾膜中納濾，濾過壓力為700kPa， 收集透過液，回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用55%的乙醇溶液加熱溶解， 濃縮至1/8體積，靜置結(jié)晶2次，干燥得到白色固體42. lg，含三七素73. 8%。實施例6 將三七葉粉碎，稱取10Kg，加入50L水回流提取2次，過濾，合并提取液，取45gCTS 中藥絮凝劑，加8L水稀釋，提取液在快速攪拌作用下加入CTS稀釋液，混合均勻后慢速攪拌，靜置6h，離心除去沉淀，離心液加入氧化鈦陶瓷膜中微濾，截留量為300nm，濾過壓力為 400kPa，收集微濾液加入分子截留量300的聚酯類復(fù)合納濾膜中納濾，濾過壓力為650kPa， 收集透過液，回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用70%的乙醇溶液加熱溶解， 濃縮至1/7體積，靜置結(jié)晶3次，干燥得到白色固體71. 7g，含三七素75. 3%。
權(quán)利要求
1.一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，其特征在于包含以下步驟1)提取將三七葉粉碎，加5 12倍量水提取1 3次，合并提取液；2)除雜攪拌上述提取液，在快速攪拌下緩慢加入絮凝劑溶液，混合均勻后慢速攪拌， 靜置2 8h，離心或過濾將沉淀分離，得澄清液；3)膜分離將上述澄清液加入微濾裝置中微濾，微濾液再加入納濾裝置中納濾，收集透過液；4)重結(jié)晶上述透過液回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，濾出沉淀物用50 70%乙醇溶解結(jié)晶2 4次，干燥即得產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，其特征在于所述步驟1)中的提取方式可選用回流、冷浸、超聲提取中的一種。
3.如權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，其特征在于所述步驟2)中的絮凝劑為CTS中藥絮凝劑，用量是藥液的0. 1 0. 8%o ；絮凝劑溶液的制備方法為先將絮凝劑加水溶解，稀釋為1 2%絮凝劑溶液。
4.如權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，其特征在于所述步驟幻中的微濾膜選用無機陶瓷膜，材質(zhì)為氧化鋁、氧化鋯、氧化銻或氧化鈦，截留粒子范圍100 200nm，濾過壓力為200 500kPa。
5.如權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，其特征在于所述步驟幻中的納濾膜選用有機復(fù)合膜，材質(zhì)為聚酯類、聚乙烯類或聚酰胺類，截留分子量為 200 400，濾過壓力為500 800kPa。
6.如權(quán)利要求1所述的一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，其特征在于所述步驟4)中的結(jié)晶條件為50 70%乙醇回流溶解，溶液回收至原體積的1/3 1/10，靜置結(jié)晶。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種應(yīng)用膜分離技術(shù)精制三七總氨酸的方法，尤其是涉及一種用微濾膜和納濾膜精制三七總氨酸的方法；方法步驟包括將三七葉粉碎，加水提取1～3次，合并提取液，在攪拌作用下加入絮凝劑，除去沉淀，澄清液加入至微濾裝置中微濾，微濾液再加入納濾裝置中納濾，透過液回收溶劑至小體積，加入乙醇沉淀，沉淀物再用50～70％乙醇回流溶解結(jié)晶2～4次，干燥即得產(chǎn)品，本發(fā)明操作簡單、氨基酸無損失，工藝易放大。
文檔編號C07C233/56GK102180808SQ201110029149
公開日2011年9月14日 申請日期2011年1月24日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月24日
發(fā)明者劉東鋒, 吳艷波, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司