專利名稱：三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及天然藥物中間體的分離提純方法，尤其是一種利用三帶模擬移動床色譜分離芍藥苷的方法。
背景技術：
芍藥苷具有鎮(zhèn)靜、擴張血管、抗血栓形成及解痙的藥理作用，它是白芍總苷提取物中的主要成分，是從中藥白芍中提取得到的。但是，由于在白芍總苷提取物中，除了有芍藥苷以外，還有芍藥內酯苷、羥基芍藥苷、苯甲酰芍藥苷等多種苷類組分，以及如苯甲酸、兒茶素等其他多種組分，因此在芍藥苷的制備過程中，關鍵的步驟就是對其分離提純，目前對芍藥苷的分離提純方法主要是大孔吸附樹脂法、硅膠柱層析法及凝膠柱層析等方法，以上這些方法不但生產效率低、成本高、產量低，而且都無法進行高純度的規(guī)模化分離，無法滿足實際生產的需求。采用模擬移動床色譜分離藥物中間體的方法，近年來已有很多報道。查閱專利文獻，與本發(fā)明相關的是寧波立華植物提取技術有限公司申請的中國專利，名稱為“模擬移動床色譜法分離制備芍藥內酯苷的方法”，公開(公告)號CN101607975。該申請采用白芍總苷為原料，應用模擬移動床色譜法分離制備芍藥內酯苷，流動相采用甲醇或乙腈與水、甲酸、異丙醇的混合溶液。芍藥內酯苷產品的純度達到90%以上。采用的是四帶的模擬移動床色譜，為了調整峰型，流動相中加入了甲酸和異丙醇。萃余液出口可獲得較高純度得芍藥苷。該申請由于添加了甲酸和異丙醇，造成了溶劑回收利用較難，浪費了溶劑，并且沒有具體指出得到的芍藥苷的純度。另外，四帶模擬移動床色譜各流量之間的牽引作用較大，流量不易控制，同時四帶模擬移動床色譜沖洗液和流動相一致，沖洗液流量無法根據吸附組分的情況而變化，靈活性較差。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供了一種三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法，解決芍藥苷的分離提取純度低，無法規(guī)?；a的問題。本發(fā)明采用的技術方案如下三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法，該方法采用白芍總苷提取物為原料，應用三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)分離提純，三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)由4 8根色譜柱組成，色譜柱分為三個帶解吸帶；精制帶；吸附帶，每個帶由1 4根相同的色譜柱串聯(lián)構成，系統(tǒng)工作條件是進樣液流速Uf為0. 1 2. 5mL/min ；洗脫液流速Ud為5 40mL/min ； 萃取液流速Ue為2 20mL/min ；萃余液流速Uk為2 20mL/min ；固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，流動相為甲醇與水的混合溶液；切換時間Ts為15 30min ；操作溫度為15 40 "C。上述流動相甲醇與水的混合溶液體積比比例為25 75。上述的白芍總苷提取物采用純化手段從白芍藥材中提取得到，白芍總苷提取物中的芍藥苷和芍藥內酯苷的總含量的質量百分比大于95%，其中芍藥苷的含量的質量百分比大于45%。上述進入三帶模擬移動床色譜分離提純的白芍總苷提取物原料采用純甲醇溶解， 溶解后白芍總苷提取物的濃度為30 300mg/mL。本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比，其顯著的有益效果體現(xiàn)在采用三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)分離提純的芍藥苷產品的質量百分比純度達到 95%以上，同時獲得的芍藥內酯苷的質量百分比純度達到90%以上。由于三帶模擬移動床系統(tǒng)分離過程是連續(xù)分離過程，生產的自動化程度高，生產效率高，且溶劑只使用了甲醇和水，可以回收利用，節(jié)約資源，分離過程中不接觸有毒溶劑，真正實現(xiàn)了清潔生產。


圖1為本發(fā)明三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)的流路圖；圖2為本發(fā)明芍藥苷產品的HPLC圖譜。
具體實施例方式下面結合附圖用實施例對本發(fā)明作具體說明1.原料溶液的配制通過乙醇回流提取和大孔吸附樹脂層析分離，從白芍飲片中制得芍藥苷和芍藥內酯苷質量百分比總含量大于95%，其中芍藥苷的質量百分比含量大于45%的白芍總苷提取物。將得到的提取物溶解于純甲醇中，沉降，經0.45μπι濾膜過濾得到濃度為lOOmg/mL 的溶液，作為三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)的進樣溶液。此過程可以去除大部分雜質，減少了三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)設備中色譜柱的污染，延長了色譜柱的使用壽命。2.色譜柱的裝填與流動相的組成使用勻漿法填裝8根色譜柱，色譜柱規(guī)格50mmX 100mm，填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，粒徑為20 40 μ m。經過勻漿法裝填后的色譜柱對稱性要求一致，以萘和尿嘧啶為考察物柱效為800以上。流動相為甲醇和水的混合溶液，甲醇與水的體積比比例為25 75。3.模擬移動床色譜系統(tǒng)及操作參數模擬移動床系統(tǒng)包括洗脫泵、進樣泵、萃取泵、流量計、色譜柱、高壓力電磁閥、單向閥和單片機控制器及計算機組成。洗脫泵流量O SOmL/min，壓力O 30Mpa ；進樣泵流量O 10mL/min，壓力O 40Mpa ；萃取泵流量O 80mL/min，壓力O 30Mpa ；色譜柱工作溫度15 40°C。如圖1所示，三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)由8根色譜柱組成，分為三個帶 解吸帶有1根色譜柱；精制帶由4根色譜柱組成；吸附帶由3根色譜柱組成，通過三帶模擬移動床色譜控制系統(tǒng)，定時控制電磁閥的開閉，使進樣口，進流動相口，萃取液出口，萃余液出口沿流動相的方向定時變換，高純度的芍藥苷產品從萃余液出口獲得，高純度的芍藥內酯苷產品從萃取液出口獲得。三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)具體操作參數為進樣液流速Uf為2. OmL/min ；洗脫液流速Ud為40mL/min ；萃取液流速Ue為19mL/min ；萃余液流速Ur為23mL/min ；切換時間Ts 為 26min。
4.產品濃縮將萃取液(E)和萃余液(R)分別用薄膜旋轉蒸發(fā)器濃縮至近干，用乙醇洗出后在真空冷凍干燥箱凍干至恒重?？刂茲饪s溫度小于或等于40°C。5.產品檢驗采用日本島津LC-10AT高效液相色譜儀，SPD-10A紫外檢測器，Agilent色譜柱， 色譜柱規(guī)格4. 6 X 150mm, ODS填料，粒徑5 μ m,流動相為甲醇和水，體積比為30 70，流速 1. OmL/min，檢測波長230nm，產品檢測譜圖見圖2。通過外標法測定產品中芍藥苷的質量百分比純度為95%以上。
權利要求
1.一種三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法，其特征在于該方法的技術方案如下采用白芍總苷提取物為原料，應用三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)分離提純，三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)由4 8根色譜柱組成，色譜柱分為三個帶解吸帶；精制帶；吸附帶，每個帶由 1 4根相同的色譜柱串聯(lián)構成，系統(tǒng)工作條件是固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠，進樣液流速Uf為0. 1 2. 5mL/min ；洗脫液流速Ud為5 40mL/min ；萃取液流速Ue為2 20mL/min ；萃余液流速Ur為2 20mL/min ；切換時間Ts為15 30min ；流動相為甲醇與水的混合溶液；模擬移動床操作溫度為15 40°C。
2.根據權利要求1所述的三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法，其特征在于所說的流動相甲醇與水的混合溶液體積比比例為25 75。
3.根據權利要求1所述的三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法，其特征在于所說的白芍總苷提取物采用純化手段從白芍藥材中提取，白芍總苷提取物中的芍藥苷和芍藥內酯苷的總含量的質量百分比大于95%，其中芍藥苷的含量的質量百分比大于45%。
4.根據權利要求1所述的三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法，其特征在于所說的白芍總苷提取物原料采用純甲醇溶解，溶解后白芍總苷提取物的濃度為30 300mg/mLo
全文摘要
本發(fā)明公開了一種三帶模擬移動床色譜分離提純芍藥苷的方法，解決芍藥苷的分離提取純度低，無法規(guī)模化生產的問題。本發(fā)明采用白芍總苷提取物為原料，應用三帶模擬移動床色譜系統(tǒng)分離提純。本發(fā)明分離提純的芍藥苷產品的質量百分比純度達到95％以上，同時獲得的芍藥內酯苷的質量百分比純度達到90％以上。由于三帶模擬移動床系統(tǒng)分離過程是連續(xù)分離，生產的自動化程度高，生產效率高，且溶劑只使用了甲醇和水，可以回收利用，節(jié)約資源，分離過程中不接觸有毒溶劑，真正實現(xiàn)了清潔生產。
文檔編號C07H17/04GK102336792SQ20101023366
公開日2012年2月1日 申請日期2010年7月22日 優(yōu)先權日2010年7月22日
發(fā)明者叢景香, 唐曉丹, 張偉, 李芊, 王紹艷 申請人:遼寧科技大學