專利名稱：一種丹參酮ⅱa的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物領(lǐng)域，涉及一種丹參酮IIA的制備方法，特別是涉及一種從 黑骨藤中制備丹參酮IIA的方法。
背景技術(shù)：
黑骨藤學(xué)名為西南杠柳(Periploca forrestii Schltr.)，是蘿蘑科 (Asclepiadaceae)杠柳屬(Periploca L.)植物，在我國西南地區(qū)稱之為黑骨藤。黑骨藤主 要產(chǎn)于貴州、云南、四川、廣西等省區(qū)，是千百年來苗族人用來治療風(fēng)濕、類風(fēng)濕疾病及頸肩 臂腰腿疼痛的佳品。根據(jù)《中國植物志》(中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會編，中國植物 志，北京科學(xué)出版社，1977，63 272)中的記載，黑骨藤為藤狀灌木，長達(dá)10米，具乳汁，多 分枝，全株無毛。該藥味苦、辛，性涼，小毒，其全株供藥用，可舒筋活絡(luò)、祛風(fēng)除濕，用于治療 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷、胃痛、消化不良、閉經(jīng)、痢疾等。近年來，有關(guān)于黑骨藤化學(xué)成分的研究不斷涌現(xiàn)，從中分離了多種不同類型的 化合物，主要以強心苷元、強心苷、C21留體苷和三萜為主，還包括一些酚酸、黃酮、寡糖等 類型的化合物(張援虎等，杠柳屬植物化學(xué)成分研究進展，天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2003， 15(2) :157-161 ；張援虎等，黑龍骨化學(xué)成分的研究，中草藥，2006,37 (3) :345-347;張援 虎等，黑龍骨中兩個新強心苷的結(jié)構(gòu)鑒定，有機化學(xué)，2006J6(3) =329-332 ；Feng JQ et al. Immunosuppressive pregnane glycosides fromPeriploca sepium and Periploca forrestii. Phytochemistry,2008,69 :2716-2723 ；Feng JQ, Zhao WM.Complete IH and 13C NMRassignments of four new oligosaccharides and two new glycosides fromPeriploca forrestii. Magn Reson Chem, 2009,47 (8) :701-705 ；甘秀海等，黑骨藤中 極性部位化學(xué)成分研究，中國中藥雜志，2009，3M24) =3225-3228 ；甘秀海等，黑骨藤化學(xué) 成分的研究，中草藥，2009，40 (5) =708-710)。丹參酮IIA(Tanshinone IIA)是從植物丹參(Salvia miltiorrhizaBunge.) 中分離得到的二萜醌類化合物，其化學(xué)式如下面的式1所示。將丹參酮IIA磺化后制成 的水溶性丹參酮IIA磺酸鈉，臨床用于心血管疾病，尤其是冠心病的治療，具有很好的療 效(張玉方等，丹參酮IIA及其鈉鹽的藥理研究進展，藥學(xué)專論，2008，17(1) 1~2 ；張玉 靜等，丹參酮IIA對心血管影響研究的進展，臨床薈萃，2009二4(18) :1653-1654) 0根 據(jù)文獻(xiàn)報道，除心血管藥理作用外，丹參酮IIA還具有抗炎、抗感染、抗腫瘤、保護肝肺 損傷等多方面的藥理活性(Ren ZHet al. Tanshinone IIA attenuates inflammatory responses of rats withmyocardial infarction by reducing MCP-I expression. Phytomedicine,2009, Article in press ；Park EJ et al. Preventive effects of a purifiedextract isolated from Salvia miltiorrhiza enriched with tanshinone I，tanshinone IIA and cryptοtanshinone on hepatocyte injury in vitroand in vivo.Food Chem Toxicol,2009,47(11) :2742-2748 ；Xu M et al.Corrigendum to "Tanshinone IIA reduces lethality and acute lunginjury in LPS-treated miceby inhibition of PLA2 activity" . Eur JPharmacol，2009，607 (1-3) :194-200 ；Fan Gff et al.Theanti-inflammatory activities of Tanshinone IIA, an active componentof TCM, are mediated by estrogen receptor activation and inhibitionof iNOS. J Steroid Biochem Mol Biol,2009,113(3-5) :275-280 ；Tang Cet al.Tanshinone IIA inhibits constitutive STAT3 activation, suppresses proliferation, and induces apoptosis in rat C6 glioma cells. Neurosci Lett, 2010, Article in press;朱嘉蓉，羅 厚蔚.丹參酮II A的抑菌活性研究.中國藥科大學(xué)學(xué)報，2004，35 ) :368-370 ；李琦等， 丹參酮II A及其納米粒誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡及對p38MAPK、TGF^ 1信號蛋白表達(dá)的影響，腫 瘤，2008二8(1) :8-12)，因此是一個極具開發(fā)價值的活性單體。
權(quán)利要求
1.一種丹參酮IIA的制備方法，其特征在于，所述方法選用黑骨藤作為制備原料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，包括如下步驟1)將黑骨藤進行一次或多次粗提，并除去固體雜質(zhì)，得到粗提物；2)將粗提物進行柱色譜分離，并用與該柱色譜相適宜的洗脫劑進行梯度洗脫；3)通過薄層色譜法檢查得到的洗脫流份，然后合并含有丹參酮IIA的洗脫流份，濃縮 后放置，得到沉淀或紅色片狀晶體；4)收集沉淀或紅色片狀晶體，進行重結(jié)晶，得到桔紅色針狀結(jié)晶，即為丹參酮IIA。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，包括如下步驟1)將黑骨藤進行一次或多次粗提，并除去固體雜質(zhì)，得到粗提物；2)將粗提物濃縮至干，然后用有機溶劑進行一次或多次萃取，揮干或濃縮萃取液得到 萃取物；3)將萃取物重新溶解，攪拌后進行柱色譜分離，并用與該柱色譜相適宜的洗脫劑進行 梯度洗脫；4)通過薄層色譜法檢查得到的洗脫流份，然后合并含有丹參酮IIA的洗脫流份，濃縮 后放置，得到沉淀或紅色片狀晶體；5)收集沉淀或紅色片狀晶體，進行重結(jié)晶，得到桔紅色針狀結(jié)晶，即為丹參酮IIA。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其中，步驟1)中的所述粗提可以采用有機溶劑提 取法、水提取法、微乳提取法、超臨界流體萃取法或水蒸氣蒸餾法進行。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述粗提為有機溶劑提取法或超臨界流體萃取法。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述有機溶劑提取法或水提取法包括如下方法 中的至少一種加熱回流、超聲、微波、浸漬、滲漉、酶解、超微粉碎或組織破碎。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述超臨界流體萃取法的溶劑選自如下物質(zhì) 二氧化碳、烷烴、烯烴、甲苯、甲醇、氨、水、或丙酮。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，所述步驟幻中所述有機溶劑為乙酸乙酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其中，所述柱色譜的填料選自如下物質(zhì) 硅膠、氧化鋁、硅藻土、大孔樹脂、微孔樹脂、活性炭、C18或聚酰胺。
10.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的方法，其中，還包括在所述重結(jié)晶之前，將紅色片狀晶體 進行洗滌的步驟。
全文摘要
本發(fā)明涉及丹參酮IIA的制備方法，特別是涉及一種從黑骨藤中制備丹參酮IIA的方法，所述方法包括粗提、柱色譜分離、重結(jié)晶等步驟，具體地，如下步驟1)將黑骨藤進行一次或多次粗提，并除去固體雜質(zhì)，得到粗提物；2)將粗提物進行柱色譜分離，并用與該柱色譜相適宜的洗脫劑進行梯度洗脫；3)通過薄層色譜法檢查得到的洗脫流份，然后合并含有丹參酮IIA的洗脫流份，濃縮后放置，得到沉淀或紅色片狀晶體；4)收集沉淀或紅色片狀晶體，進行重結(jié)晶，得到桔紅色針狀結(jié)晶，即為丹參酮IIA。本發(fā)明為首次從植物黑骨藤中制備得到丹參酮IIA。
文檔編號C07J73/00GK102146114SQ201010110579
公開日2011年8月10日 申請日期2010年2月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年2月10日
發(fā)明者喬善義, 于孟琦, 劉萬倉, 孫磊, 楊楠, 王燕 申請人:中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院毒物藥物研究所