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硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的一種半抗原、抗原及其制備方法與應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):3564186閱讀:265來(lái)源:國(guó)知局
專(zhuān)利名稱(chēng):硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的一種半抗原、抗原及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的一種半抗原、抗原及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)
硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)(NitrofUrans)是一類(lèi)人工合成的具有5-硝基呋喃環(huán)基本結(jié)構(gòu)的廣譜抗菌藥物,主要包括呋喃西林(Nitroflirazone)、呋喃妥因(Nitrofiirantion)、呋喃唑酮(Furazolidone)和呋喃它酮(Furaltadone)。硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)對(duì)大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、真菌和原蟲(chóng)等病原體均有殺滅作用,在畜禽養(yǎng)殖、水產(chǎn)養(yǎng)殖上應(yīng)用非常廣泛。但硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)對(duì)畜禽有一定的毒性,動(dòng)物大劑量或長(zhǎng)期連續(xù)服用硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)易引起中毒性反應(yīng),表現(xiàn)為厭食、腹瀉、胃腸出血、周?chē)窠?jīng)炎、興奮、驚厥或癱瘓等,中毒嚴(yán)重時(shí)甚至可以引起動(dòng)物死亡。同時(shí)硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)也是一類(lèi)具有潛在致癌性和誘導(dǎo)有機(jī)體產(chǎn)生突變的物質(zhì)。1990年7月歐盟頒布2377/90/EEC條例,將硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物列為A類(lèi)禁用藥物,規(guī)定其在動(dòng)物源性食品中的殘留檢測(cè)限為l.O pg/kg。由于對(duì)呋喃唑酮蛋白結(jié)合態(tài)殘留物的安全性產(chǎn)生懷疑,自1995年起,歐盟全面規(guī)定禁止使用呋喃類(lèi)抗菌物質(zhì),在動(dòng)物源性食品中呋喃類(lèi)殘留物的檢出限為不得檢出。歐盟從1997年開(kāi)始將所有的硝基呋喃類(lèi)抗生素全部列為違禁藥物。2004年美國(guó)FDA公布了禁止在進(jìn)口動(dòng)物源性食品中使用的ll種藥物名單,其中包括呋喃西林和呋喃唑酮。我國(guó)農(nóng)業(yè)部文件農(nóng)牧發(fā)[2002] l號(hào)也規(guī)定動(dòng)物源性食品中呋喃唑酮的檢出限為不得檢出。目前,國(guó)內(nèi)外都對(duì)呋喃類(lèi)物質(zhì)的控制相當(dāng)嚴(yán)格,各國(guó)對(duì)于呋喃類(lèi)物質(zhì)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)都有明確的規(guī)定。
國(guó)內(nèi)外已發(fā)表的有關(guān)硝基呋喃類(lèi)抗生素殘留檢測(cè)方法的文獻(xiàn)中,早期的文獻(xiàn)報(bào)道多數(shù)是檢測(cè)原藥化合物。但研究表明,硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)原藥的半衰期通常只有幾小時(shí),而其代謝產(chǎn)物則可以長(zhǎng)達(dá)數(shù)周仍能在動(dòng)物組織中殘留。目前,國(guó)內(nèi)外報(bào)道多見(jiàn)于檢測(cè)硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的代謝物,儀器檢測(cè)方法主要有高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜法(LC-MS)、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)。其中,LC-UV、LC-MS及LC-MS/MS是目前用來(lái)檢測(cè)硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)代謝物最常用的方法,但在實(shí)際操作中需要有LC-UV、 LC-MS及LC-MS/MS等高檔儀器,且前處理復(fù)雜、繁瑣、操作時(shí)間長(zhǎng)、操作技術(shù)要求高。而免疫分析方法采用針對(duì)硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)代謝物的特異性抗體,可以有很高的精確度、靈敏性和特異性,且對(duì)技術(shù)要求不高,具有檢 測(cè)時(shí)間短,適用于大批量測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。免疫分析檢測(cè)技術(shù)是近年來(lái)在環(huán)境、食品安 全監(jiān)測(cè)領(lǐng)域逐漸廣泛應(yīng)用的一種快速、高通量、低成本的檢測(cè)技術(shù),已逐漸成為世 界各國(guó)對(duì)有毒有害殘留物快速篩選監(jiān)測(cè)的主要方法之一,這為硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)代謝 物的檢測(cè)提供了一種新的途徑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種化合物及其制備方法與應(yīng)用。
本發(fā)明所提供的化合物,其化學(xué)名稱(chēng)為4- (4- (5-硝基呋喃-2-甲酰胺基)苯基) 丁酸,其結(jié)構(gòu)式如式I所示
O N^_^ ^T^C—NH~~^ ~~CH2—CH2—CH2—COOH式I。
上述式I結(jié)構(gòu)的化合物的制備方法包括以下步驟
將5-硝基呋喃-2-甲醛的乙醇溶液和對(duì)氨基苯丁酸的乙醇溶液混合,離心,取沉 淀得到式I結(jié)構(gòu)的化合物。
上述方法中,所述5-硝基呋喃-2-甲醛和所述對(duì)氨基苯丁酸的摩爾比為1: (1-2),具體可為1: 1;
所述5-硝基呋喃-2-甲醛的乙醇溶液是將所述5-硝基呋喃-2-甲醛溶于乙醇的水 溶液中得到的,所述乙醇的水溶液中,所述乙醇和水的體積比為1:(1-2),具體 可為1: 1;
所述對(duì)氨基苯丁酸的乙醇溶液是將所述對(duì)氨基苯丁酸溶于無(wú)水乙醇中得到的。 上述方法還包括將所述式I結(jié)構(gòu)的化合物進(jìn)行干燥的步驟,所述干燥的溫度為
50-60°C,具體可為60。C。
上述式I結(jié)構(gòu)的化合物可用于制備硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的抗體。
上述式I結(jié)構(gòu)的化合物還可用于檢測(cè)硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種硝基呋喃化合物及其制備方法與應(yīng)用。
本發(fā)明所提供的硝基呋喃化合物,是將上述式I結(jié)構(gòu)的化合物與載體蛋白偶聯(lián)
得到的偶聯(lián)物。
上述硝基呋喃化合物中,所述載體蛋白為卵清蛋白(OVA)或牛血清白蛋白(BSA)。
上述硝基呋喃化合物的制備方法包括以下步驟
1) 將N,N,-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC) 、 N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和式I 結(jié)構(gòu)的化合物混合,將混合物溶于N,N-二甲基甲酰胺中,得到溶液A;
將載體蛋白溶解于碳酸鈉溶液中,得到溶液B;
2) 將溶液B滴加到溶液A中,得到硝基呋喃化合物。
上述方法中,所述步驟l)中,所述式I結(jié)構(gòu)的化合物、所述N,N,-二環(huán)己基碳 化二亞胺和所述N-羥基琥珀酰亞胺的質(zhì)量比為1: (0.6-1): (0.4-1),具體可為 1: 1: 1。
所述載體蛋白為卵清蛋白(OVA)或牛血清白蛋白(BSA); 所述碳酸鈉溶液為pH 9.6的0.1mol/L的碳酸鈉的水溶液; 所述式I結(jié)構(gòu)的化合物與所述載體蛋白的摩爾比為(5-15): 1,具體可為13:1。
上述方法還包括將所述硝基呋喃化合物進(jìn)行透析的步驟,所述透析的條件為
4-20°C用生理鹽水溶液透析48-84小時(shí),具體可為4°C用生理鹽水溶液透析72小 時(shí)。
上述方法還包括將透析后的硝基呋喃化合物進(jìn)行過(guò)濾的步驟,所述過(guò)濾過(guò)程 中,濾膜的濾徑為0.05-0.2nm,具體可為0.2阿。
將制備好的硝基呋喃化合物分裝于安培瓶中,-20°C保存。 上述硝基呋喃化合物可用于制備硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的抗體。 上述硝基呋喃化合物還可用于檢測(cè)硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)。 用上述硝基呋喃化合物制備的抗體也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。 所述抗體為單克隆抗體。
由于上述硝基呋喃化合物含有硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)共有的5-硝基呋喃環(huán)結(jié)構(gòu),因此 以該硝基呋喃化合物作為免疫原免疫動(dòng)物,可以獲得硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的抗體,該抗 體可以同時(shí)識(shí)別四種硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)(呋喃西林、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃妥因)。 因此,本發(fā)明的硝基呋喃化合物可以用于硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的免疫分析和篩選,提高 檢測(cè)效率,縮短檢測(cè)時(shí)間,降低檢測(cè)成本。


圖1為硝基呋喃化合物的制備流程圖。圖2為式I結(jié)構(gòu)化合物的質(zhì)譜圖。 圖3為硝基呋喃化合物的紫外鑒定圖譜。
具體實(shí)施例方式
下述實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)方法,如無(wú)特殊說(shuō)明,均為常規(guī)方法;所述試劑和生物 材料,如無(wú)特殊說(shuō)明,均可從商業(yè)途徑獲得。
硝基呋喃化合物的制備過(guò)程如圖l所示。下面結(jié)合具體的實(shí)施例闡述硝基呋喃 化合物的制備過(guò)程。
實(shí)施例l、式I結(jié)構(gòu)化合物的合成與鑒定
1、 式I結(jié)構(gòu)化合物的合成
1) 將139mg (lmmol) 5-硝基呋喃-2-甲醛溶于由lmL純水和lmL無(wú)水乙醇組 成的乙醇的水溶液中,磁力攪拌使其完全溶解;
2) 將179mg (lmmol)對(duì)氨基苯丁酸溶于lmL無(wú)水乙醇中;
3) 將上述步驟l)和步驟2)的溶液混合,混合液顏色逐漸變?yōu)辄S色,攪拌l 分鐘之后,出現(xiàn)黃色沉淀,繼續(xù)室溫?cái)嚢琛⑦^(guò)夜、離心,獲得黃色沉淀;將該沉淀 60。C干燥,稱(chēng)量獲得223mg產(chǎn)物,產(chǎn)率為71%。
2、 式I結(jié)構(gòu)化合物的鑒定
上述步驟1獲得的化合物經(jīng)ESI測(cè)定其分子結(jié)構(gòu)。結(jié)果如圖2所示。結(jié)果表明, 該化合物的ESI分子離子標(biāo)準(zhǔn)峰為317 (M+l);元素分析結(jié)果表明,該化合物中, C元素的百分含量為60.75, H元素的百分含量為5.10, N元素的百分含量為8.86, O元素的百分含量為25.29。表明該化合物的分子式為C16H16N205,其結(jié)構(gòu)式如式I 所示
式I,
該化合物的化學(xué)名稱(chēng)為4- (4- (5-硝基呋喃-2-甲酰胺基)苯基)丁酸。 實(shí)施例2、硝基呋喃化合物的合成與鑒定 1、硝基呋喃化合物的合成
1)將15mg上述實(shí)施例1制備的式I結(jié)構(gòu)的化合物溶解于lmLN N-二甲基甲 酰胺中,磁力攪拌使其完全溶解;2) 將15mgDCC和15mgNHS分別加入到上述步驟1)的溶液中,室溫反應(yīng)過(guò) 夜,離心去除沉淀;
3) 將50mg牛血清白蛋白(BSA)溶解于5mL pH 9.6的O.lmol/L的碳酸鈉溶 液中;
4) 將上述步驟3)的溶液逐滴加入到上述步驟2)的溶液中,攪拌反應(yīng)4小時(shí);
5) 將上述步驟4)的反應(yīng)液裝入透析袋中,4X:條件下用生理鹽水溶液透析72 小時(shí),期間更換透析液6次;倒掉透析液,將透析袋中的溶液在無(wú)菌條件下用濾徑 為0.2pm的濾膜過(guò)濾,得到硝基呋喃化合物,將硝基呋喃化合物分裝于安培瓶中, -20。C保存。
2、硝基呋喃化合物的鑒定
釆用紫外光譜法對(duì)上述步驟l獲得的硝基呋喃化合物進(jìn)行鑒定,只要上述步驟l 制備的硝基呋喃化合物的紫外圖譜與載體蛋白和式I結(jié)構(gòu)化合物的紫外圖譜相比發(fā) 生了變化,則可以判斷式I結(jié)構(gòu)的化合物與載體蛋白偶聯(lián)成功。上述步驟l制備的硝 基呋喃化合物的紫外鑒定圖譜如圖3所示。通過(guò)比較三者260nm和280nm的吸收值計(jì) 算式I結(jié)構(gòu)化合物和BSA的結(jié)合比。
實(shí)施例3、抗體的制備
1、 免疫動(dòng)物制備抗血清
采用5只新西蘭大白兔作為免疫動(dòng)物,以上述實(shí)施例2制備的硝基呋喃化合物作 為免疫原,免疫劑量為lmg/kg。免疫方法如下首免時(shí)將免疫原用等體積的弗氏完 全佐劑充分乳化,頸背部皮下多點(diǎn)注射,間隔3-4周,將免疫原與等體積的弗氏不完 全佐劑混合制成乳化劑,加強(qiáng)免疫一次,共免疫8次(包括加強(qiáng)免疫共8次),最后 一次不加佐劑。
最后一次免疫后7-10d將兔子處死,采用心臟采血法采血,每只兔子可采血80 mL左右,將采集的血液樣本在4。C冰箱中放置5-6小時(shí),然后5000 rpm離心10 min, 分離血清,血清經(jīng)適當(dāng)稀釋后用間接ELISA方法測(cè)定效價(jià)。第五次免疫時(shí),兔子獲 得了高效價(jià)的抗體,抗血清的滴度為l: 51200。
2、 抗體的純化
采用辛酸-硫酸銨鹽析法對(duì)上述步驟l獲得的抗血清進(jìn)行純化。辛酸在偏酸性的 條件下能將血清中除IgG以外的蛋白質(zhì)都沉淀下來(lái),上清中只有IgG。辛酸加入因抗 體來(lái)源的不同而不同,人血清為70 pl/mL,兔血清為75 pl/mL,小鼠血清為40 nl/mL。實(shí)驗(yàn)設(shè)三次重復(fù),結(jié)果表明,采用上述方法IgG的回收率達(dá)90Q/。以上。
3、 抗血清最低檢測(cè)限(LOD值)和半數(shù)抑制量(IC50)的檢測(cè) 用方陣滴定法確定上述實(shí)施例2制備的硝基呋喃化合物和上述步驟1制備的抗
血清的工作濃度,上述實(shí)施例2制備的硝基呋喃化合物的工作濃度為500 ng/ml,抗 血清的工作濃度為1/8000。
用不同濃度的5-硝基呋喃-2-甲醛的標(biāo)準(zhǔn)品溶液做實(shí)驗(yàn)溶液,其濃度如下(單位 mg/L): 0、 0.5、 1、 2、 4、 8、 16、 32、 64、 128、 256 (請(qǐng)指明標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度)。 采用8組平行試驗(yàn)(『8)。
間接競(jìng)爭(zhēng)性ELISA方法用上述工作濃度的上述實(shí)施例2制備的硝基呋喃化合物 包被酶標(biāo)板,將實(shí)驗(yàn)溶液與抗體溶液同時(shí)加入酶標(biāo)板小孔中,同時(shí)設(shè)置空白孔(將 添加的抗體溶液換成高純水,其它一致)和陰性對(duì)照孔(將添加的實(shí)驗(yàn)溶液用高純 水代替,其它一致),37。C溫育0.5h,倒出孔內(nèi)液體,用洗滌液(10XPBST)洗滌2-5 次,將酶標(biāo)板倒置在吸水紙上拍打;加入酶標(biāo)二抗溶液于酶標(biāo)板小孔中,37"C溫 育0.5h,用洗滌液重復(fù)洗3-5次,吸干;加入底物顯色溶液到酶標(biāo)板小孔中,室溫 下反應(yīng)10-15min,用酶標(biāo)儀在波長(zhǎng)450nm處測(cè)定吸光度值A(chǔ)。以吸光度值A(chǔ)為縱坐標(biāo), 以標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)溶液濃度的loglO值為橫坐標(biāo),繪制半對(duì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。標(biāo)準(zhǔn)曲線具 有完整的反S形狀,并具有上平臺(tái)和下平臺(tái),標(biāo)準(zhǔn)曲線的平行測(cè)定次數(shù)8次,實(shí)驗(yàn)重 復(fù)性良好,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(變異系數(shù))均在15%以?xún)?nèi)。
根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出10%抑制量和半數(shù)抑制量(IC5。),比較檢測(cè)靈敏度。
抑制率用以下式計(jì)算
抑制率(%)= ^-^-^ x 100%
(OD隨國(guó)ODmin)
式中ODmax為不加標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)的吸光值(即陰性對(duì)照),ODx為標(biāo)準(zhǔn)品濃度為x 時(shí)的吸光值,ODmin為空白對(duì)照孔的吸光值。
結(jié)果表明,半數(shù)抑制量(IC5())為1.0 1.5ng/mL,最低檢測(cè)限(LOD)為 0.18~0.24ng/mL,在0.18 ng/mL~10.9 ng/mL范圍內(nèi),抑制率與藥物濃度的對(duì)數(shù)值呈 顯著的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)為產(chǎn)0.9865。
4、 抗體的特異性檢測(cè)
抗血清的特異性就是指它同特異性抗原結(jié)合的能力與同該抗原類(lèi)似物結(jié)合能 力的比較。常用交叉反應(yīng)率作為評(píng)價(jià)的重要標(biāo)準(zhǔn)。交叉反應(yīng)越小,抗血清的特異性越好。
將標(biāo)準(zhǔn)品5-硝基呋喃-2-甲醛及其類(lèi)似物(5-硝基呋喃-2-丙烯酸、呋喃西林、呋 喃妥因、呋喃唑酮和呋喃它酮)進(jìn)行系列稀釋?zhuān)缓蠓謩e與上述步驟l制備的抗血 清反應(yīng),制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,在曲線上分別找出上述實(shí)施例2制備的硝基呋喃化合物抑 制率50%的劑量和其類(lèi)似物(5-硝基呋喃-2-丙烯酸、呋喃西林、呋喃妥因、呋喃唑 酮和呋喃它酮)抑制率50%時(shí)的劑量,計(jì)算出硝基呋喃化合物及其類(lèi)似物(5-硝基 呋喃-2-丙烯酸、呋喃西林、呋喃妥因、呋喃唑酮、呋喃它酮)的交叉反應(yīng)率。
交叉反應(yīng)率(%)=(引起50%抑制的5-硝基呋喃-2-甲醛的濃度/引起50%抑制的 其它物質(zhì)的濃度)X100%。
實(shí)驗(yàn)設(shè)三次重復(fù),取三次重復(fù)的平均值作為實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由ELISA方法建立的標(biāo) 準(zhǔn)曲線可以看出,上述實(shí)施例2制備的硝基呋喃化合物的特異性較好,上述實(shí)施例2 制備的硝基呋喃化合物的特異性抗體對(duì)呋喃西林、5-硝基呋喃-2-丙烯酸、呋喃妥因、 呋喃唑酮和呋喃它酮的交叉反應(yīng)率為89%、 85%、 82%、 78%和64%,由此可知, 上述實(shí)施例2制備的硝基呋喃化合物的特異性抗體可以作為同時(shí)識(shí)別這四類(lèi)藥物的 通用抗體,滿(mǎn)足硝基呋喃類(lèi)藥物的廣泛、高效篩選。
權(quán)利要求
1、式I結(jié)構(gòu)的化合物,式I。
2、 權(quán)利要求1所述式I結(jié)構(gòu)化合物的制備方法,包括以下步驟將5-硝基呋喃-2-甲醛的乙醇溶液和對(duì)氨基苯丁酸的乙醇溶液混合,離心取沉淀,得到式I結(jié)構(gòu)的化合物。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法,其特征在于所述5-硝基呋喃-2-甲醛和所述 對(duì)氨基苯丁酸的摩爾比為1:(1-2),優(yōu)選為l: 1;所述5-硝基呋喃-2-甲醛的乙醇溶液是將所述5-硝基呋喃-2-甲醛溶于乙醇的水 溶液中得到的;所述乙醇的水溶液中,所述乙醇和水的體積比為1: (1-2),優(yōu)選 為h 1;所述對(duì)氨基苯丁酸的乙醇溶液是將所述對(duì)氨基苯丁酸溶于無(wú)水乙醇中得到的。
4、 權(quán)利要求1所述式I結(jié)構(gòu)的化合物在制備硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)抗體中的應(yīng)用。
5、 一種硝基呋喃化合物,是將權(quán)利要求1所述式I結(jié)構(gòu)的化合物與載體蛋白 偶聯(lián)得到的偶聯(lián)物;所述載體蛋白為牛血清白蛋白或卵清蛋白。
6、 權(quán)利要求5所述硝基呋喃化合物的制備方法,包括以下步驟1) 將N,N,-二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC) 、 N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和式I 結(jié)構(gòu)化合物混合,將混合物溶于N,N-二甲基甲酰胺中,得到溶液A;將載體蛋白溶解于碳酸鈉溶液中,得到溶液B;2) 將溶液B滴加到溶液A中,得到硝基呋喃化合物。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于所述步驟l)中,所述式I結(jié)構(gòu) 的化合物、所述N,N'-二環(huán)己基碳化二亞胺和所述N-羥基琥珀酰亞胺的質(zhì)量比為1:(0.6-1) :(0.4-1),優(yōu)選為1: 1: 1;所述載體蛋白為卵清蛋白或牛血清白蛋白;所述式I結(jié)構(gòu)的化合物與所述載體蛋白的摩爾比為(5-15) : 1,優(yōu)選為13: 1。
8、 根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的方法,其特征在于所述方法還包括將所述硝 基呋喃化合物進(jìn)行透析的步驟,所述透析的條件為4-20。C用生理鹽水溶液透析 48-84小時(shí),優(yōu)選為4°C用生理鹽水溶液透析72小時(shí);所述方法還包括將透析后的硝基呋喃化合物進(jìn)行過(guò)濾的步驟,所述過(guò)濾過(guò)程 中,濾膜的濾徑為0.05-0.2|xm,優(yōu)選為0.2pm。
9、 權(quán)利要求5所述硝基呋喃化合物在制備硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)抗體和檢測(cè)硝基呋 喃類(lèi)物質(zhì)中的應(yīng)用。
10、 以權(quán)利要求5所述硝基呋喃化合物為免疫原制備的抗體。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的一種半抗原、抗原及其制備方法與應(yīng)用。該抗原是一種硝基呋喃化合物,該硝基呋喃化合物是將式I結(jié)構(gòu)的化合物與載體蛋白偶聯(lián)得到的偶聯(lián)物。由于本發(fā)明的抗原共有5-硝基呋喃環(huán)結(jié)構(gòu),因此以該抗原作為免疫原免疫動(dòng)物,可以獲得硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的抗體,該抗體可以同時(shí)識(shí)別四種硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)(呋喃西林、呋喃唑酮、呋喃它酮和呋喃妥因)。因此,本發(fā)明制備的抗原可以用于硝基呋喃類(lèi)物質(zhì)的免疫分析和篩選,提高檢測(cè)效率,縮短檢測(cè)時(shí)間,降低檢測(cè)成本。
文檔編號(hào)C07D307/71GK101643462SQ200910085648
公開(kāi)日2010年2月10日 申請(qǐng)日期2009年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月27日
發(fā)明者吳小平, 飛 徐, 江海洋, 進(jìn) 王, 王亞輝, 王戰(zhàn)輝, 阮永磊 申請(qǐng)人:北京維德維康生物技術(shù)有限公司
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