專利名稱：乳糖基?；拾贝嫉闹圃旆椒?br>
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及對神經(jīng)節(jié)苷脂(gangli0side)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂 (ganglioside)GM3進(jìn)行加熱處理而轉(zhuǎn)化為乳糖基?；拾贝?(lactosylceramide)的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的制造方法、還涉 及將來源于乳的原料中的神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂 (ganglioside)GM3轉(zhuǎn)化為乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的高濃縮乳糖 基?；拾贝?lactosylcemmide)的制造方法以及得到的高濃縮乳糖基?；?鞘氨醇(lactosylceramide)。
通過本發(fā)明的制造方法得到的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)、 高濃縮乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)在醫(yī)學(xué)、藥學(xué)以及生物化學(xué)等 領(lǐng)域作為試劑有用，而且作為醫(yī)藥品、化妝品、飲食品以及詞料等的材料 有用。
背景技術(shù)：
已知乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)是在神經(jīng)酰胺上具有乳糖的 還原末端的神經(jīng)鞘糖脂，存在于動物組織中，特別是在神經(jīng)系統(tǒng)器官中其 含量高，而且已知該乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)是紅細(xì)胞糖苷脂 類、神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)類、血型活性糖脂類的共同前體。
并且報道了乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的各種生理功能，報 道其為對幽門螺旋菌特異性結(jié)合、破骨細(xì)胞分化、嗜中性粒細(xì)胞成熟所必 需的成分(非專利文獻(xiàn)1 3)。
另一方面，神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3具有神經(jīng)酰胺上連接乳糖的 還原末端、且在乳糖的非還原末端上唾液酸以cx2-3鍵連接的結(jié)構(gòu)，神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3具有在神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3的非還原末端 上唾液酸進(jìn)一步以a2-8鍵連接的結(jié)構(gòu)，分子整體含有2分子唾液酸。
以往用來制造乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的代表性的方法， 通常為使用乙酸或三氯乙酸等酸將與蛋白質(zhì)形成復(fù)合物的糖脂沉淀，在 該沉淀物中加入氯仿一甲醇混合液等含醇有機(jī)溶劑，將糖脂從與蛋白質(zhì)的 復(fù)合物中分離、提取的方法，但這種方法存在不能得到含量較高的組合物、 無法高效精制、且不能經(jīng)濟(jì)地得到乳糖基?；拾贝?lactosylcemmide:)這 樣的問題。
此外，作為制造乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的其它方法，提
出了使蛋白質(zhì)水解酶與含有來源于牛乳等的中性神經(jīng)鞘糖脂的物質(zhì)進(jìn)行 作用、進(jìn)行精制的方法，但因為精制工序復(fù)雜，必然存在制造成本高的問 題(專利文獻(xiàn)1)。
如上所述，以往的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的制造方法花 費時間和勞力，并且仍未開發(fā)出制造高濃縮乳糖基?；拾贝?(lactosylceramide)的經(jīng)濟(jì)方法。
專利文獻(xiàn)1日本特開平2-169596號公報
非專利文獻(xiàn)1 J.Phar.Macol.Sci.2006 Vol.l00，No3,pl95-200
非專利文獻(xiàn)2 生物化學(xué) Vol.77，N0.8，p872
非專利文獻(xiàn)3 Glycobiology. 1998 Apr;8(4):297-309
發(fā)明內(nèi)容
如上所述，在以往的方法中，用來獲得高濃縮乳糖基?；拾贝?(lactosylceramide)的精制工序復(fù)雜，仍未確立高效精制的方法。
因此，本發(fā)明以提供解決上述以往技術(shù)中的問題、使用簡便的方法、 比較廉價且高效制造高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的方法作 為課題。而且以提供含有通過這種制造方法得到的高濃縮乳糖基酰基鞘氨 醇(lactosylcemmide)的組合物作為課題。
4本發(fā)明者對于比較廉價且簡便、高效經(jīng)濟(jì)地制造高濃縮乳糖基?；?br>
氨醇(lactosylceramide)的方法進(jìn)行了精心研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)通過在酸性條件 下進(jìn)行加熱處理，使原料中的神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷 脂(ganglioside)GM3轉(zhuǎn)化為乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylcemmide)，從而可得 到高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。
因此，本發(fā)明包括以下組成
(1) 乳糖基?；拾贝?lactosykeramide)的制造方法，其特征在于， 在酸性條件下對神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂 (ganglioside)GM3進(jìn)行加熱處理，轉(zhuǎn)化為乳糖基?；拾贝?(lactosylceramide)。
(2) 上述(1)中所述的乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylcemmide)的制造 方法，其特征在于，在pH為3 5，溫度為7(TC 10(TC的范圍，進(jìn)行加熱 處理30分鐘 180分鐘。
(3) 高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的制造方法，其特征 在于，將來源于乳的原料中的神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷 脂(ganglioside)GM3轉(zhuǎn)化為乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)。
(4) 上述(3)中所述的高濃縮乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide) 的制造方法，其特征在于，來源于乳的原料為選自乳清蛋白質(zhì)濃縮物、 酪乳、奶油乳清、脫脂乳或用有機(jī)溶劑處理這些來源于乳的原料使脂質(zhì)組 分大量含有的材料中的1種或2種以上。
(5) 上述(3) (4)中所述的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide) 的制造方法，其特征在于，在pH為3 5，溫度為70。C 10(TC的范圍，進(jìn) 行加熱處理30分鐘 180分鐘，然后調(diào)節(jié)pH為4.5 5.0，采用選自超濾膜、 微濾膜的方法進(jìn)行濃縮。
(6) 高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)，其為采用上述(3) ~ (5)中任一項所述的方法制造的高濃縮乳糖基酰基鞘氨醇 (lactosylceramide)。
本發(fā)明的制造方法，可用神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3比較廉價且簡便地制造乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。特別是因為將含有比較大量的蛋白質(zhì)的乳、乳制品作為原料，可制造乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)，所以本發(fā)明的方法，作為工業(yè)上極為有用的高濃縮乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)的制造
方法是有用的。
通過本發(fā)明的制造方法制造的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)、高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)，因為其具有感染防御能力等生理功能，所以作為醫(yī)藥品、化妝品、飲食品及飼料等的材料有用，期望通過組合物中的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的高濃縮而擴(kuò)大應(yīng)用范圍。
具體實施例方式
本發(fā)明的制造方法的特征在于，加熱處理，優(yōu)選在酸性條件下將神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3轉(zhuǎn)化為乳糖基酉先基鞘氨醇(lactosylceramide)。
艮P:在本發(fā)明中，通過在酸性條件下對神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3進(jìn)行加熱處理，使神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的唾液酸部分的非還原末端上連接的1分子唾液酸脫唾液酸，進(jìn)而使神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3的乳糖的非還原末端上的1分子唾液酸脫唾液酸，可將神經(jīng)節(jié)苷脂(gangli0Side)GD3或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3有效地轉(zhuǎn)化為乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)。
在上述制造方法中，作為使用的原料，除神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3、神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3以外，還大量含有全乳、脫脂乳等蛋白質(zhì)，也可使用不是大量含有神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3的材料，但來源于乳的原料，特別優(yōu)選為乳清蛋白質(zhì)濃縮物、酪乳、奶油乳清、脫脂乳等比較大量地含有神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3的來源于乳的原料。
此外，采用將含有神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3的材料用乙醇等有機(jī)溶劑提取的方法(日本特開平2-207090號公報)而制備的化合物，也可作為原料使用。
在本發(fā)明的制造方法中，加熱處理時的pH及溫度的設(shè)定非常重要。pH越低，而且溫度越高，乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的生成速度變得越大，但乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的分解速度也變得越大。因此，為了高收率制造乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)，在酸性條件下，例如在pH為3 5的范圍、優(yōu)選調(diào)節(jié)至3 4的范圍，優(yōu)選將溫度調(diào)節(jié)至70。C 10(TC的范圍。
而且，考慮生成速度及分解速度，可適當(dāng)設(shè)定與該加熱處理條件相對應(yīng)的30分鐘 180分鐘的處理時間。
此外，如果是來源于乳的原料，在低pH的條件下，例如在pH小于3的狀態(tài)下進(jìn)行加熱處理時，使作為主要蛋白質(zhì)的酪蛋白沉淀而除去時，沉淀包合上清，因為不能充分分離沉淀和上清，所以含有乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)的組分的收率有時會降低。這是因為酪蛋白在pH小于3時，粒徑變小，并且因為作為蛋白質(zhì)是穩(wěn)定的，所以難于發(fā)生沉淀，形成包合了上清的不完全沉淀。
為了提高作為目標(biāo)的組合物中的乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)的濃度，如果是來源于乳的原料，優(yōu)選在加熱處理結(jié)束后，通過將pH調(diào)節(jié)至酪蛋白的等電點的pH4.5 5.0，使酪蛋白的粒徑增大，并且作為蛋白質(zhì)使其變得不穩(wěn)定，使其發(fā)生凝集、容易形成沉淀后除去。此外，為了進(jìn)一步提高酪蛋白的凝集性，更優(yōu)選加入0.01~0.1%氯化鈣等。
上述沉淀后的酪蛋白沉淀物，可通過離心分離機(jī)、夸克分離機(jī)(Quarkseparator)、噴嘴式分離機(jī)(Nozzle separator)、壓濾機(jī)、靜置或過濾布等通常的除去方法來除去。
進(jìn)而，為了提高含有目標(biāo)乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)的組分的濃度，進(jìn)行超濾膜、微濾膜、透析膜或電透析等的膜處理有效。作為此時的膜處理，可使用孔徑為0.1~2.0^im的微濾(MF)膜或截留分子量為5 500kDa的超濾(UF)膜。
7此外，也可用氫氧化鉀、氯化鉀等通常的中和劑中和濃縮液。
得到的含有乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的濃縮液，可利用真空干燥或冷凍干燥等適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行濃縮、干燥固化。根據(jù)這種方法，可得到全部固體物中的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)為0.01~8重量％的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylcemmide)。此外，乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)用HPLC進(jìn)行測定。
以下表示實施例，對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。
此外，以下記載的實施例用來對本發(fā)明進(jìn)行說明，但并不限定于實施例中的記述。
實施例1
將神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3組合物及根據(jù)其制造法(日本特開平5-279379)制備的神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3組合物500mg溶解于2升水中，加入15。/。鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，在88r進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后，用10%氫氧化鉀中和上清，進(jìn)行冷凍干燥，得到白色粉末372mg。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，在該白色粉末中含有99重量％以上的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。
實施例2
在每1升含有230mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量°/。奶油乳清水溶液中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為4.5，同時添加氯化鈣使其為總量的0.03重量％，在88。C進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后，通過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotliebmethod)測定的結(jié)果，含有16重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有0.5重量％的乳糖基?；拾贝?lactosy lceramide)。實施例3
在每1升含有230mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量％奶油乳清水溶液中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為4.5，同時添加氯化鈣使其為總量的0.03重量％，在88'C進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后，通過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10。/。氫氧化鉀中禾n，進(jìn)行截留粒徑O.l(iM的微濾膜(Milipore
公司制)處理，得到濃縮液。
然后將該濃縮液進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotliebmethod)測定的結(jié)果，含有60重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有1重量％的乳糖基?；镄ぐ贝?lactosylceramide)。
實施例4
在每1升含有230mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量％奶油乳清水溶液中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.5，同時添加氯化鈣使其為總量的0.03重量％，在88"C進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后，調(diào)節(jié)pH為4.5-5.0，
使作為原料中的主要蛋白質(zhì)的酪蛋白凝集。通過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀進(jìn)行中和，進(jìn)行截留粒徑O.lpM的微濾膜(Milipore公司制)處理，得到濃縮液。
然后將該濃縮液進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotliebmethod)測定的結(jié)果，含有60重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有1.5重量％的乳糖基?；镄ぐ贝?lactosylceramide)。
9實施例5
在每1升含有230mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量％奶油乳清水溶液中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，同時添加氯化鈣使其為總量的0.03重量％，在88"C進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后，調(diào)節(jié)pH為4.5-5.0，
使作為原料中的主要蛋白質(zhì)的酪蛋白進(jìn)行凝集。通過用離心分離機(jī)(Beckman公司制)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行截留粒徑0.1pM的微濾膜(Milipore公司制)處理，得到濃縮液。
然后將該濃縮液進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotliebmethod)測定的結(jié)果，含有60重量％脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有3.6重量％乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。
實施例6
在每1升含有230mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量％奶油乳清水溶液中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，同時添加氯化鈣使其為總量的0.03重量％，在88'C進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后，調(diào)節(jié)pH為4.5~.5.0，
使作為原料中的主要蛋白質(zhì)的酪蛋白進(jìn)行凝集。通過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotliebmethod)測定的結(jié)果，含有16重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有0.9重量°/。的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。
實施例7在每1升含有200mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量°/。奶油乳清水溶液中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，同時添加氯化韓使其為總量的0.03重量％，在8(TC進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后調(diào)節(jié)pH為4.5~5.0，使作為原料中的主要蛋白質(zhì)的酪蛋白進(jìn)行凝集。通過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行截留粒徑0.1pM的微濾膜(Milipore公司制)處理，得到濃縮液。然后將該濃縮液進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotliebmethod)測定的結(jié)果，含有60重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有3重量％的乳糖基?；拾庇舷?lactosylceramide)。
實施例8
根據(jù)將神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3進(jìn)行酸水解制造神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3的方法(日本特開平5-279379號公報)，用奶油乳清制備每1升含有360mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3的神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)
材料。然后，使作為原料中的主要蛋白質(zhì)的酪蛋白進(jìn)行凝集，通過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行截留粒徑0.1iiM的微濾膜(Mmpore公司制)處理，得到濃縮液。然后將該濃縮液進(jìn)行冷凍干燥制成粉末。將得到的神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)材料粉末制成10重量％水溶液，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，在88"C進(jìn)行加熱處理180分鐘。
然后用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotliebmethod)測定的結(jié)果，含有60重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有4.8重量％的乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)。
實施例9
在每1升含有3.8mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3和O.lmg神經(jīng)節(jié)苷脂 (ganglioside)GM3的5升脫脂乳中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，同時添 加氯化鈣使其為總量的0.03重量％，在88t:進(jìn)行加熱處理180分鐘。然 后調(diào)節(jié)pH為4.5 5.0，使作為原料中的主要蛋白質(zhì)的酪蛋白進(jìn)行凝集。通 過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳 糖基?；拾贝?lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotlieb method)測定的結(jié)果，含有0.1重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有0.01重量％的乳糖基酰 基革肖氨醇(lactosylceramide)。
實施例10
在每1升含有卯mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量％酪乳溶 液中，加入15%鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，同時添加氯化鈣使其為總量的0.03 重量％，在88t:進(jìn)行加熱處理180分鐘。然后調(diào)節(jié)pH為4.5-5.0，使作為
原料中的主要蛋白質(zhì)的酪蛋白進(jìn)行凝集。通過用離心分離機(jī)進(jìn)行處理完全 除去生成的酪蛋白沉淀，得到上清。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳 糖基?；拾贝?lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotlieb method)測定的結(jié)果，含有7重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有0.2重量％的乳糖基酰 基鞘氨醇(lactosylceramide)。
實施例11
在每1升含有130mg神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3的10重量％乳清蛋白質(zhì)濃縮溶液(WPC溶液)中，加入15。/。鹽酸調(diào)節(jié)pH為3.0，在88"C進(jìn) 行加熱處理180分鐘。
該上清用10%氫氧化鉀中和，進(jìn)行冷凍干燥，得到本發(fā)明的高濃縮乳 糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)粉末。
得到的粉末中含有的脂質(zhì)含量利用羅茲-哥特里法(Rhese Gotlieb method:)測定的結(jié)果，含有10重量％的脂質(zhì)。
根據(jù)使用HPLC的定量分析，該組合物中含有0.3重量％乳糖基?；?革肖氨酉享(lactosylceramide)。
權(quán)利要求
1.乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)的制造方法，其特征在于，在酸性條件下，對神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM3進(jìn)行加熱處理，轉(zhuǎn)化為乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的制造 方法，其特征在于，在pH為3 5，溫度為7(TC 100。C的范圍，進(jìn)行加熱 處理30分鐘 180分鐘。
3. 高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的制造方法，其特征在 于，將來源于乳的原料中的神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD3及/或神經(jīng)節(jié)苷脂 (ganglioside)GM3轉(zhuǎn)化為乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)的制造方法，其特征在于，來源于乳的原料為選自乳清蛋白質(zhì)濃縮物、酪 乳、奶油乳清、脫脂乳或用有機(jī)溶劑處理這些來源于乳的原料使脂質(zhì)組分 大量含有的材料中的1種或2種以上。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的高濃縮乳糖基?；拾贝?(lactosylceramide)的制造方法，其特征在于，在pH為3~5 ，溫度為 7(TC 10(TC的范圍，進(jìn)行加熱處理30分鐘~180分鐘，然后調(diào)節(jié)pH為 4.5 5.0，采用選自超濾膜、微濾膜的方法進(jìn)行濃縮。
6. 高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)，其為采用權(quán)利要求3~5 中任一項所述的方法制造的高濃縮乳糖基?；拾贝?lactosylcemmide)。
全文摘要
本發(fā)明提供乳糖基酰基鞘氨醇(lactosylceramide)的制造方法。具體為通過在pH為3～5，溫度為70℃～100℃的范圍，對神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GD<sub>3</sub>及/或神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)GM<sub>3</sub>進(jìn)行加熱處理30分鐘～180分鐘，進(jìn)一步調(diào)節(jié)pH為4.5～5.0，用超濾膜等方法進(jìn)行濃縮，從而制造作為醫(yī)學(xué)、藥學(xué)以及生物化學(xué)等領(lǐng)域中的試劑有用、且作為醫(yī)藥品、化妝品、飲食品以及飼料等的材料有用的乳糖基?；拾贝?lactosylceramide)。
文檔編號C07H15/04GK101636405SQ200880008780
公開日2010年1月27日 申請日期2008年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月27日
發(fā)明者三浦晉, 加藤健, 吉岡俊滿, 村上元威, 田中禮央, 磯貝朋之 申請人:雪印乳業(yè)株式會社