專利名稱：：能夠產(chǎn)生抗體的轉(zhuǎn)基因家蠶及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及利用家蠶的重組抗體制備方法，該方法能夠大量生產(chǎn)與哺乳動物產(chǎn)生的抗體相近的抗體。本發(fā)明還涉及產(chǎn)生該抗體的轉(zhuǎn)基因家蠶。
背景技術(shù)：
：近年來，在醫(yī)藥品和診斷試劑領(lǐng)域中，疾病的診斷和治療需要大量特異性高的抗體?？贵w一般是使用小鼠、大鼠、兔等哺乳動物制造的，但近年來開展了依賴于微生物或哺乳動物細(xì)胞、重組動物、重組植物等的抗體生產(chǎn)。重組抗體具有可大量生產(chǎn)相同品質(zhì)的產(chǎn)品、不引入病毒等致病因素因而安全等特點(diǎn)，今后可能越來越重要。然而另一方面，它也存在許多問題。在大腸桿菌等微生物中僅能生產(chǎn)抗體的一部分，此外，產(chǎn)生的抗體本身糖基化或磷酸化不充分，還不能說充分適合于醫(yī)藥品、診斷試劑用途。而且，還知道當(dāng)使用大腸桿菌等制備人類抗體時(shí)，通常會出現(xiàn)不溶化的問題。因此，在純化時(shí)，必須要有用SDS等變性劑以使蛋白可溶化的步驟、采用透析等方法緩慢除去溶液中的變性劑以使蛋白恢復(fù)活性的步驟。此外，如果使用哺乳動物細(xì)胞，則生產(chǎn)成本提高，因此難以大量生產(chǎn)。因而，嘗試了使用重組動物、植物等進(jìn)行抗體生產(chǎn)，但都尚停留在研究階段。當(dāng)使用其它真核生物細(xì)胞等時(shí)，由于要將其分泌至細(xì)胞外，必須要有特殊的信號。家蠶具有稱作絲腺的器官，一只家蠶的最大蛋白生產(chǎn)能力為0.5g。近年來，開發(fā)出了重組家蠶的制備技術(shù)，外源基因?qū)敕椒?、?dǎo)入基因表達(dá)調(diào)控方法的開發(fā)也有所進(jìn)展，因此，在絲腺表達(dá)外源基因從而生產(chǎn)重組蛋白成為可能。家蠶是真核生物，因此，與大腸桿菌等微生物或植物相比，可以生產(chǎn)更接近于哺乳動物類型的蛋白。此外，由于可以使用人工飼料進(jìn)行潔凈銅養(yǎng)，因而能夠容易地進(jìn)行數(shù)萬只水平的大量飼養(yǎng)。[專利文獻(xiàn)1]特開2006-137739:TamuraT."a/."Methodofproteinproductionusingasilkwormmiddlesilkgland-specificgeneexpressionsystem",filedbyNationalInstituteofAgrobiologicalSciencesonMarch15,2005[非專利文南足1]TamuraT.,SezutsuH.,KobayashiI.,KojimaK.，KandaT.,andUc.hinoK.(1999)"Methodsforproducingtransformedsilkwormsusingatransposon'，Abstractsofthe7thWorkshoponInsectFunction,p.10-22[非專利文南犬2]Tamura，T.,Thibert,C.,Royer，C.,Kanda,T.，Abraham,E"Kamba,M.,Komoto,N.,Thomas,J.-L.,Mauchamp,B.,Chavancy,G"Shirk,P.,Fraser，M.,Prudhomme,J.-C.,andCouble,P.(2000)"ApiggyBacelement-derivedvectorefficientlypromotesgerm-linetransformationinthesilkwormBombyxmoriL."NatureBiotechnology18,81-84[非專利文獻(xiàn)3]TomitaM，M.H.,SatoT，AdachiT,HinoR，HayashiM，ShimizuK，NakamuraN,TamuraT,YoshizatoK.(2003)"TransgenicsilkwormsproducerecombinanthumantypeIIIprocollagenincocoons."NatBiotechnol21，52-56[非專利文南史4]TamuraT.(2000)"Transgenicsilkworms:Currentstatusandprospects',丄Sericul.Sci.Japan,69,1-12[非專利文南史5]TamuraT.(2000)"IntroductionofusefUlgenesinsilkwormdevelopment"Reportsofthe21stSymposiumonBasicBreeding:Advancementofdevelopmentalengineeringinmolecularbreedingofanimalsandplants,p.23-29[非專利文獻(xiàn)6]Tamura，T.,Quan,G.X.,Kanda,T.,andKuwabara,N.(2001)"TransgenicsilkwormresearchinJapan:Recentprogressandfuture"ProceedingofJointInternationalSymposiumofInsectCOEResearchProgramandInsectFactoryResearchProject,p.77-82[非專利文南夂7]Imamura，M,Nakai,J.,Inoue,S.,Quan,G-X.,KandaT.，andTamura,T.(2003)"TargetedgeneexpressionusingtheGal4/UASsysteminthes川cwormBombyxmori."Genetics,165,1329-1340[非專利文南^_8]Tamura，T.(2004)"Developmentandprospectofaproductionsystemforusefulsubstancesusingtransgenicsilkworms"BioIndustry20(3),28-35[非專利文獻(xiàn)9]Tamura,T.,Uchino,K"Kanda,T.,Kobayashi,I.,andKojima,K.(2004)"Productionofamiddlesilkgland-specificgeneexpressionsystemthatusestheyeastGAL4/UASsystem"AbstractsoftheMeetingoftheJapaneseSocietyofSericulturalScience74,p.51[非專利文南史10]TamuraT.(2004)"Establishmentofmethodsforproducingtransgenicsilkworms-expectedtobeappliedtoproductionoffiberswithnovelfunctions"KagakutoSeibutsu(ChemistryandBiology)42,634-635[非專利文南夂11]Tamura,T.(2004)"Productionoftransgenicsilkwormsandusefulsubstances"Biologies:Developmentofproductsusingbiologicalsubstances(TheSocietyofPolymerScience,ed.)pp.45-68.[非專利文獻(xiàn)12]Ueda,K.(2004)"Theforefrontofantibodyengineering"p.122.CMCPublishing,Tokyo.[非專利文獻(xiàn)13]Kiyol(awa，I"Kobayashi,I,,Uchino,K"Sezutsu,H.，Kanda,T.,Tamura,T.,Miura，T.，Ohashi,T.,andKatayamaK.(2006)"Productionofhexokinaseandanti-humantransferrinantibodyforclinicaldiagnosticreagentusingtransgenicsilkworm"Abstractsofthe7thInternationalWorkshopontheMolecularBiologyandGeneticsoftheLepidoptera,p94
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的問題如上述，盡管重組載體的重要性與日俱增，但其制備中還存在許多問題。鑒于上述狀況進(jìn)行了本發(fā)明，本發(fā)明所要解決的問題是提供一種利用重組家蠶大量制備與哺乳類產(chǎn)生的抗體相近的重組抗體的方法。解決問題的手段本發(fā)明人等為解決上述問題進(jìn)行了創(chuàng)造性研究。具體而言是使用絲腺特異性表達(dá)的基因的上游作為啟動子區(qū)，將其插入到GAL4基因的上游。進(jìn)而，將該融合基因插入到重組家蠶制備用載體質(zhì)粒中。重組家蠶的制備按Tamura等(2000)的方法進(jìn)行。使所得的重組家蠶與UASFvaTf抹系進(jìn)行交配，該UASFvaTf抹系是釆用Imamura等(2003)的方法制備的，在GAL4目標(biāo)序列IJAS的下游具有與轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferrin)反應(yīng)的scFv型抗體基因。從交配得到的重組家蠶的吐絲期絲腺提取樣品，對該樣品進(jìn)行Western印跡，結(jié)果確認(rèn)了在絲腺中產(chǎn)生了抗體。此外，使同樣提取的樣品與抗原進(jìn)行了反應(yīng)，結(jié)果，隨著絲腺提取物的量增加，與抗原反應(yīng)的物質(zhì)的量也增加，由此可見樣品具有抗體的活性。即，本發(fā)明涉及在家蠶的絲腺中制備重組蛋白的方法，其提供了以下項(xiàng)[1][49]。1.重組抗體的制備方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備導(dǎo)入了下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟，所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體；(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。2.重組抗體的制備方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA,且將重組抗體分泌至絲腺；Cb)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。3.項(xiàng)2的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游。4.項(xiàng)2的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下迷DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。5.項(xiàng)3或4的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。6.項(xiàng)25任一項(xiàng)的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。7.項(xiàng)6的方法，其中，所述編.碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。7-1.項(xiàng)7的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白1蛋白的DNA的啟動子是(a)包含SEQIDN〇:16的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:16的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。7-2.項(xiàng)7的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白2蛋白的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:17的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:17的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的石威基序列的DNA。8.項(xiàng)6的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。8-1.項(xiàng)8的方法，其中，所述編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:18的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:18的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。9.一種帶有信號序列的重組抗體。9-1.項(xiàng)9的抗體，其中所述信號序列來自動物。9-2.項(xiàng)9的抗體，其中所述信號序列來自動物抗體。9-3.項(xiàng)9的抗體，其中所述信號序列為人酸性磷酸酶的信號序列、小鼠免疫球蛋白L鏈K的信號序列或者小鼠IgGl的信號序列。10.項(xiàng)9的抗體，該抗體為全長抗體或4氐分子量抗體。10-1.項(xiàng)10的抗體，其中，所述低分子量為scFv型抗體。10-2.項(xiàng)0-1的scFv型抗體，其中，以單鏈多肽N末端側(cè)為基準(zhǔn)點(diǎn)，按信號序列、VH、接頭、VL，或者信號序列、VL、接頭、VH的順序排列。10-3.項(xiàng)10的scFv型抗體，其抗原為轉(zhuǎn)鐵蛋白、CRP、IgG、IgA、IgM、〖gD、IgE、白蛋白、前白蛋白、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、a-l微球蛋白、卩-2微球蛋白、AFP、CA19-9、CA15-3、PSA、載脂蛋白、腫瘤壞死因子、白介素、千擾素、骨橋蛋白、HBs抗原、RF、HCG、膠原、Hb、HbAlc、HCV抗體、肌4丐蛋白、月/L紅蛋白、FDP、CEA、c-erbB-2、觸珠蛋白。10—4.項(xiàng)10-3的scFv型抗體，其中，VH、接頭、VL分別包含SEQIDNO:6、9、12的氨基酸序列。10-5.項(xiàng)10-3的scFv型抗體，其中，信號序列包含SEQIDNO:3、21和29中任意一個(gè)的氨基酸序列。10-6.包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的scFv型抗體。10-7.包含L鏈和H鏈的抗體，所述L鏈具有SEQIDNO:3、21和29中任意一個(gè)所示的氨基酸序列作為信號序列，所述H鏈具有SEQIDNO:3、21和29中任意一個(gè)的氨基酸序列作為信號序列。10-8.包含L鏈和H鏈的抗體，所述L鏈具有SEQIDNO:3、21和29中任意一個(gè)所示的氨基酸序列作為信號序列、具有SEQIDNO:23所示的氨基酸序列作為L鏈可變區(qū)、具有SEQIDNO:25所示的氨基酸序列作為Jk片段、具有SEQ1DN0:27所示的氨基酸序列作為k鏈恒定區(qū)；所述H鏈具有SEQ1DN0:3、21和29中任意一個(gè)所示的氨基酸序列作為信號序列、具有SEQIDNO:31所示的氨基酸序列作為H鏈可變區(qū)、具有SEQIDNO:33所示的氨基酸序列作為CH1、具有SEQIDNO:35所示的氨基酸序列作為鉸鏈區(qū)、具有SEQIDNO:37所示的氨基酸序列作為CH2、具有SEQIDNO:39所示的氨基酸序列作為CH3。10-9.包含L鏈和H鏈的抗體，所述L鏈具有SEQIDNO:49所示的氨基酸序列，所述H鏈具有SEQIDNO:51所示的氨基酸序列。11.編碼項(xiàng)910-9中任一項(xiàng)的抗體的DNA。11-1.編碼scFv型抗體的DNA，其包含SEQIDNO:2、20、28任意一個(gè)所示的堿基序列作為信號序列，包含SEQIDNO:5所示的堿基序列作為VH,包含SEQIDNO:8所示的堿基序列作為接頭、包含SEQIDNO:ll所示的44基序列作為VL。11-2.編碼scFv型抗體的DNA，其包含SEQIDNO:l、20、28任意一個(gè)所示的堿基序列作為信號序列，包含SEQIDNO:4所示的^威基序列作為VH，包含SEQIDNO:7所示的堿基序列作為接頭、包含SEQIDNO:10所示的堿基序列作為VL。11-3.編碼scFv型抗體的DNA，其包含SEQIDNO:14所示的堿基序列。11_4.編碼scFv型抗體的DNA,其包含SEQIDNO:13所示的石威基序列。11-5.—種DNA,其包含編碼抗體L鏈的DNA,其具有SEQIDNO:l、2、20、28任意一個(gè)所示的堿基序列作為信號序列；和編碼抗體H鏈的DNA，其具有SEQIDNO:l、2、20、28任意一個(gè)所示的堿基序列作為信號序列。11-6.—種DNA,其包含編碼抗體L鏈的DNA和編碼抗體H鏈的DNA,所述編碼抗體L鏈的DNA具有SEQIDNO:l、2、20和28中任意一個(gè)所示的堿基序列作為信號序列、具有SEQIDNO:22所示的堿基序列作為L鏈可變區(qū)、具有SEQIDNO:24所示的堿基序列作為Jk片段、具有SEQIDNO:26所示的堿基序列作為k鏈恒定區(qū)；所述編碼抗體H鏈的DNA具有SEQIDNO:1、2、20和28中任意一個(gè)所示的堿基序列作為信號序列、具有SEQIDNO:30所示的堿基序列作為H鏈可變區(qū)、具有SEQIDNO:32所示的堿基序列作為CHl、具有SEQIDNO:34所示的堿基序列作為鉸鏈區(qū)、具有SEQIDNO:36所示的堿基序列作為CH2、具有SEQIDNO:38所示的堿基序列作為CH3。11-7.一種DNA，其包含具有SEQIDNO:48所示的堿基序列作為抗體L鏈的DNA,以及具有SEQIDNO:50所示的堿基序列作為抗體H鏈的DNA。12.具有項(xiàng)1111-7任一項(xiàng)的DNA的載體。13.攜帶項(xiàng)12的載體的細(xì)胞。14.分泌重組抗體的轉(zhuǎn)基因家蠶的制備方法，該方法包括制備家蠶卵的步驟，其中所述家蠶卵具有編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA。15.將重組抗體分泌至絲腺的轉(zhuǎn)基因家蠶的制備方法，該方法包括以下步驟制備具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及下述DNA的家蠶卵，所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控。16.項(xiàng)15的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于.所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。17.項(xiàng)15的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。18.項(xiàng)16或17的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。19.項(xiàng)1518任一項(xiàng)的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。20.項(xiàng)19的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白l蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。20-1.項(xiàng)20的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:16所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:16所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入所示的堿基序列的DNA。20-2.項(xiàng)20的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:17所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:17所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。21.項(xiàng)19的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。21-1.項(xiàng)2!的方法，其中，所述編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:18所示的石威基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:18所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)石咸基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。22.轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,并且分泌所述重組抗體。23.轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA,并且將所述重組抗體分泌至絲腺。24.項(xiàng)23的轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA，所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游。25.項(xiàng)23的轉(zhuǎn)基因家蠶，是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶，所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶，所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可搡作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。26.項(xiàng)24或25的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。27.項(xiàng)2326任一項(xiàng)的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。28.項(xiàng)27的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白l蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。28-1.項(xiàng)28的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:16所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:16所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。28-2.項(xiàng)28的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲膠蛋白2蛋白的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:17所示的石成基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:17所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。29.項(xiàng)27的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。29-1.項(xiàng)29的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDN0:18所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:18所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。30.轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA，所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。31.項(xiàng)30的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。32.重組抗體的制備方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子、以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA，并且將重組抗體分泌至脂肪體；(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。33.項(xiàng)32的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。34.項(xiàng)32的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。35.項(xiàng)33或34的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。35-1.項(xiàng)35的方法，其中，所述編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:19所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:19所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。36.—種制備將重組抗體分泌至脂肪體的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備家蠶卵的步驟，所述家蠶卵具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子、以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。37.項(xiàng)36的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA，所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。38.項(xiàng)36的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。39.項(xiàng)37或38的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。39-1.項(xiàng)39的方法，其中，所述編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:19所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:19所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。40.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子、以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA;并且將所述重組抗體分泌至脂肪體。41.項(xiàng)40的轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA，所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。42.項(xiàng)40的轉(zhuǎn)基因家蠶，其是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。43.項(xiàng)41或42的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。43-1.項(xiàng)43的方法，其中，所述編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:19所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:19所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)石咸基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。44.測定生物體中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量的方法，該方法包括以下步驟(a)和(b):(a)使受試者來源的生物樣品與項(xiàng)910-9中任意一項(xiàng)的抗體或者采用項(xiàng)卜8-l、3235-1、5057-1或76~79-1中任意一項(xiàng)的方法制備的抗體接觸的步驟，(b)檢測生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白與抗體的結(jié)合的步驟。45.診斷糖尿病性腎病的方法，該方法包括以下步驟(a)和(b):(a)使受試者來源的生物樣品與項(xiàng)910-9中任意一項(xiàng)的抗體或者采用項(xiàng)141、3235-1、50~57-1或7679-1中任意一項(xiàng)的方法制備的抗體接觸的步驟，⑨檢測與生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的抗體的步驟；其中，與正常對照相比，當(dāng)轉(zhuǎn)鐵蛋白的量多時(shí)，判定為患有糖尿病性腎病、或者患病風(fēng)險(xiǎn)高。46.診斷糖尿病性腎病的方法，該方法包括以下步驟(a)和(b):(a)使受試者來源的生物樣品與項(xiàng)910-9中任意一項(xiàng)的抗體或者采用項(xiàng)1~8-1、32~35-1、50~57-1或76~79-1中任意一項(xiàng)的方法制備的抗體接觸的步驟，(b)檢測與生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的抗體的步驟；其中，當(dāng)與已確定患有糖尿病性腎病的對照相比，轉(zhuǎn)鐵蛋白的量程度相同時(shí)，判定為患有糖尿病性腎病、或者患病風(fēng)險(xiǎn)高。47.評價(jià)營養(yǎng)狀態(tài)的方法，該方法包括以下步驟(a)和(b):(a)使受試者來源的生物樣品與項(xiàng)910-9中任意一項(xiàng)的抗體或者采用項(xiàng)18-1、3235-1、50~57-1或7679-1中任意一項(xiàng)的方法制備的抗體接觸的步驟，(b)檢測與生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的抗體的步驟；其中，與正常對照相比，當(dāng)轉(zhuǎn)鐵蛋白的量少時(shí)，判定為營養(yǎng)不良的風(fēng)險(xiǎn)高、或者處于營養(yǎng)不良狀態(tài)。48.糖尿病性腎病的診斷試劑，其含有項(xiàng)910-9中任意一項(xiàng)的抗體或者采用項(xiàng)18-1、32~35-1、50-57-1、76~79-1任意一項(xiàng)的方法制備的抗體作為有效成分。49.用于評價(jià)營養(yǎng)狀態(tài)的試劑，其含有項(xiàng)9~10-9中任意一項(xiàng)的抗體或者采用項(xiàng)18-1、32~35-1、5057-1或7679-1中任意一項(xiàng)的方法制備的抗體作為有效成分。50.制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備導(dǎo)入了編碼重組抗體的DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟；(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。51.制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA，且將重組抗體分泌至絲腺；(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。52.項(xiàng)51的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。53.項(xiàng)51的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼重組抗體，并可4喿作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。54.項(xiàng)52或53的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。55.項(xiàng)5154任一項(xiàng)的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。56.項(xiàng)55的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白i蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。56-1.項(xiàng)56的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:16所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:16所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。56-2.項(xiàng)56的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:17所示的石威基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:17所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。57.項(xiàng)55的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。57-1.項(xiàng)57的方法，其中，所述編碼絲心蛋白的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:18所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:18所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的石咸基序列的DNA。58.制備分泌重組抗體的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備具有編碼重組抗體的DNA的家蠶卵的步驟。59.制備將重組抗體分泌至絲腺的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備家蠶卵的步驟，所述家蠶卵具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。60.項(xiàng)59的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可搡作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連j妄于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。61.項(xiàng)59的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。62.項(xiàng)60或61的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。63.項(xiàng)5962任一項(xiàng)的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。64.項(xiàng)63的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。64-1.項(xiàng)64的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:16所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:16所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入所示的堿基序列的DNA。64-2.項(xiàng)64的方法，其中，所述編碼絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQ[DNO:17所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:17所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。65_1.項(xiàng)65的方法，其中，所述編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:18所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:18所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入所示的堿基序列的DNA。66.具有編碼重組抗體的DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶，其分泌所述重組抗體。67.轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA并且將重組抗體分泌至絲腺。68.項(xiàng)67的轉(zhuǎn)基因家蠶，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所迷的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼重組抗體的DNA，所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。69.項(xiàng)67的轉(zhuǎn)基因家蠶，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可搡作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼重組抗體，并可才喿作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。70.項(xiàng)68或69的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。71.項(xiàng)6770任一項(xiàng)的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。72.項(xiàng)71的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白或絲膠蛋白2蛋白的DNA的啟動子。72-1.項(xiàng)72的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:16所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:16所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。72-2.項(xiàng)72的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲膠蛋白2蛋白的DNA的啟動子是以下的(a)或(b》(a)包含SEQIDNO:17所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:17所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。73.項(xiàng)71的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。73-1.項(xiàng)73的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:18所示的石咸基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:18所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。74.轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼重組抗體的DNA,所述DNA可^I喿作地連接于轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。75.項(xiàng)74的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。76.制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA;并且將重組抗體分泌至脂肪體，(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。77.項(xiàng)76的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。78.項(xiàng)76的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。79.項(xiàng)77或78的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。79-1.項(xiàng)79的方法，其中，所述編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:19所示的堿基序列的DNA,(b)包含在SEQIDNO:19所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。80.制備將重組抗體分泌至脂肪體的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備家蠶卵的步驟，所述家蠶卵具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。81.項(xiàng)80的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可搡作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼重組抗體的DNA，所述DNA可#:作地連4妻于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游。82.項(xiàng)S0的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游。83.項(xiàng)81或82的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。83-1.項(xiàng)83的方法，其中，所述編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:19所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:19所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。84.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。并將所述重組抗體分泌至脂肪體。85.項(xiàng)84的轉(zhuǎn)基因家蠶，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)編碼重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。86.項(xiàng)84的轉(zhuǎn)基因家蠶，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼重組抗體，并可#:作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。87.項(xiàng)85或86的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。87-1.項(xiàng)87的方法，其中>所述編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子是以下的(a)或(b):(a)包含SEQIDNO:19所示的堿基序列的DNA，(b)包含在SEQIDNO:19所示的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代、缺失、增加和/或插入的堿基序列的DNA。88.采用項(xiàng)18-1、32~35-1、5057-1或76~87-1中任意一項(xiàng)的方法制備的抗體。圖1顯示用于生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因家蠶的pUASFvaTF載體的結(jié)構(gòu)及其構(gòu)建程序。圖2顯示通過SerlGAL4株系與UASFvaTf抹系的交配來生產(chǎn)抗體表達(dá)家蠶的程序。圖3顯示具有GAL4基因的個(gè)體以及具有UAS的個(gè)體的熒光立體顯微照片。圖4是顯示通過RT-PCR驗(yàn)證在雜交抹系中FvaTf基因的轉(zhuǎn)錄的照片。圖5是顯示利用Western印跡鑒定抗體蛋白的照片。圖6顯示利用ELISA測定重組抗體針對其抗原的活性的結(jié)果。圖7顯示pBacN/loxpUASIgLSV40質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)以及構(gòu)建程序，該質(zhì)粒載體編碼用于制造轉(zhuǎn)基因家蠶的抗體基因的L鏈。圖8顯示pDNA/UASIgHSV40質(zhì)粒載體的結(jié)構(gòu)以及構(gòu)建程序，該質(zhì)粒載體編碼用于制造轉(zhuǎn)基因家蠶的抗體基因的H鏈。圖9顯示pBacN/loxpUASIgHUASIgH載體結(jié)構(gòu)以及構(gòu)建程序，該載體用于制造具有抗體基因的轉(zhuǎn)基因家蠶。圖10顯示通過交配SerlGAL4抹系與UASIgL-UASIgH抹系來生產(chǎn)抗體表達(dá)家蠶的程序。圖11顯示具有GAL4基因的個(gè)體以及具有UAS的個(gè)體的熒光立體顯微照片。圖12是顯示通過RT-PCR驗(yàn)證在雜交抹系中IgL基因和IgH基因轉(zhuǎn)錄的照片。圖13是顯示下述內(nèi)容的照片雜交抹系所表達(dá)的重組抗體是IgGl，并且作為L鏈的免疫原性為kappa。圖14顯示利用ELISA測定重組抗體針對其抗原的活性的結(jié)果。發(fā)明的具體實(shí)施方式本發(fā)明涉及利用家蠶生產(chǎn)重組抗體的方法。本發(fā)明是基于活性重組抗體在本發(fā)明者所確立的轉(zhuǎn)基因家蠶體內(nèi)的成功生產(chǎn)。更具體的說，本發(fā)明提供用于生產(chǎn)重組抗體的方法，該方法包括以下步驟(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，在該家蠶中導(dǎo)入了編碼重組抗體的DNA;并且(b)從制備的該轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體。此外，本發(fā)明提供了生產(chǎn)重組抗體的方法，該方法包括以下步驟(a)制備一種轉(zhuǎn)基因家蠶，在該家蠶中導(dǎo)入了編碼重組抗體并具有信號序列的DNA;并且(b)從制備的該轉(zhuǎn)基因家蠶中回收重組抗體。在本發(fā)明的生產(chǎn)重組抗體方法的一個(gè)具體實(shí)施方案中，重組抗體是在家蠶的絲腺中產(chǎn)生的。更具體的說，本發(fā)明涉及生產(chǎn)重組抗體的方法，該方法包括以下步驟(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，該轉(zhuǎn)基因家蠶包括編碼在絲腺中特異性表達(dá)的蛋白的DNA的啟動子和編碼重組抗體的DNA,并且該家蠶將重組抗體分泌到絲腺中，其中，所述編碼重組抗體的DNA的表達(dá)是由所述啟動子直接或間接調(diào)控的；并且(b)從制備的該轉(zhuǎn)基因家蠶中回收所述重組抗體。本發(fā)明還涉及包括以下步驟的生產(chǎn)重組抗體的方法(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，該轉(zhuǎn)基因家蠶包括編碼在絲腺中特異性表達(dá)的蛋白的DNA的啟動子和編碼具有信號序列的重組抗體的DNA，并且該家蠶將重組抗體分泌到絲腺中，其中所述重組抗體的編碼DNA的表達(dá)是由所述啟動子直接或間接調(diào)控的；并且(b)從制備的該轉(zhuǎn)基因家蠶中回收所述重組抗體。在制備本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟中，首先制備家蠶卵，其包括編碼在絲腺中特異表達(dá)的蛋白的DNA的啟動子和編碼具有信號序列的重組抗體的I)NA，其中該重組抗體的編碼DNA的表達(dá)是由該啟動子直接或間接調(diào)控的(優(yōu)選地，該重組抗體包含信號序列)。此后，從制備的家蠶卵所孵化的家蠶中挑選出將重組抗體分泌到絲腺中的轉(zhuǎn)基因家蠶。在本發(fā)明中，為了挑選轉(zhuǎn)基因家蠶，可以利用例如選擇標(biāo)記。本發(fā)明的選4^標(biāo)記可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員所常規(guī)使用的標(biāo)記，如CFP，GFP,YFP和DsRed等熒光蛋白。通過使用這些標(biāo)記，僅利用熒光立體顯微鏡觀察即可檢測轉(zhuǎn)基因家蠶。此外，由于熒光的顏色不同，可以同時(shí)使用多種標(biāo)記。利用本發(fā)明的方法所能生產(chǎn)的抗體既包括全長(wholeantibody)的抗體(例如，完整IgG)也包括低分子量化(低分子化)的抗體。在本發(fā)明中，對于全長抗體的來源沒有特殊限制，可以生產(chǎn)來源于例如人，小鼠，大鼠，兔，驢，山羊，馬，鳥，狗，貓等的抗體。對于抗體的同種型也沒有限制，并且例如在人源抗體的例子中，可以生產(chǎn)IgGl,IgG2，IgG3，IgG4，IgAl,IgA2，IgD,IgE或IgM同種型的抗體。本發(fā)明中的全長抗體指包含恒定區(qū)和可變區(qū)的抗體，其中，恒定區(qū)如圖13所示具有補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒活性或者抗體依賴細(xì)胞毒活性，可變區(qū)如圖14所示可識別抗原。另一方面，本發(fā)明中的低分子量化抗體包括全長抗體的一部分發(fā)生了缺失的抗體片段，并且對于低分子量抗體沒有特殊限制，只要其具有抗原結(jié)合能力即可。對于本發(fā)明的抗體片段沒有限制，只要是全長抗體的一部分即可，但是優(yōu)選含有重鏈可變區(qū)(VH)和/或輕鏈可變區(qū)(VL)。VH或VL的氨基酸序列可以發(fā)生取代，缺失，增加和/或插入。此外，只要具有抗原結(jié)合能力，VH和/或VL可以缺失一部分?？勺儏^(qū)可以嵌合化或者人源化?？贵w片段的具體例子包括Fab，F(xiàn)ab，，F(xiàn)(ab，)2以及Fv等。低分子量抗體的具體例子包括Fab，F(xiàn)ab，，F(xiàn)(ab，)2,Fv，scFv(單鏈Fv),雙抗體以及sc(Fv)2(單鏈(Fv)2)等。在本發(fā)明中低分子量抗體特別優(yōu)選為scFv抗體。在此處，"Fv"片段是指最小的抗體片段，并且其包含完整抗原識別位點(diǎn)和抗原結(jié)合位點(diǎn)。"FV，片段是一個(gè)二聚體(VH-VL二聚體)，在該二聚體中一個(gè)VH和一個(gè)VL通過非共價(jià)鍵緊密地連接起來。每個(gè)可變區(qū)域上的三個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(CDRs)相互作用，在VH-VL二聚體表面上形成了抗原結(jié)合位點(diǎn)。六個(gè)CDR為抗體提供了抗原結(jié)合位點(diǎn)。然而，一個(gè)可變區(qū)(或者僅包含三個(gè)抗原特異性CDR的半個(gè)Fv)雖然親和力比完整的結(jié)合位點(diǎn)要低，仍可以識別并結(jié)合抗原。scFv包含抗體的VH和VL,并且這些區(qū)域存在于單一多肽鏈上。一般而言，F(xiàn)v多肽進(jìn)一步地包括位于VH和VL區(qū)域之間的多肽接頭，這樣使得scFv能夠形成結(jié)合抗原的必要結(jié)構(gòu)。(對于scFv的綜述，可參見Pluckthun"ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies"Vol.113,RosenburgandMooreed.，SpringerVerlag,NewYork,pp.269-315,1994)。本發(fā)明中對于接頭沒有特殊限制，只要該接頭不抑制連接在其兩端的抗體可變區(qū)的表達(dá)即可。VH和VL的順序不局限于上述的排列，并且可以按任意的順序排列。例如下述的排列N-末端-信號序列-[VH]-接頭-間-C畫末端N-末端-信號序列-[VL]-接頭-[VH]-C-末端本發(fā)明的scFv抗體優(yōu)選具有下述特征的抗體在該抗體中，一個(gè)VH和一個(gè)VL以單鏈多肽的N端為基準(zhǔn)點(diǎn)，按照VH、VL([VH]接頭[VL])的順序排列。本發(fā)明的scFv與全長抗體或者其它低分子量化抗體相比顯示特別高的抗體活性。及合成化合物接頭(例如，在ProteinEngineering,9(3)，299-305,1996中公開的接頭)，但是本發(fā)明優(yōu)選的是肽接頭。肽接頭的長度沒有特殊限制，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)目的來選擇。典型地來說，長度為l到100個(gè)氨基酸，優(yōu)選的是3到50個(gè)氨基酸，更加優(yōu)選的是5到30個(gè)氨基酸，并且特別優(yōu)選的是12到18個(gè)氨基酸(例如，15個(gè)氨基酸)。本發(fā)明中接頭的例子包括含有SEQIDNO:9所示氨基酸序列的接頭。此外，本發(fā)明中重組抗體的優(yōu)選實(shí)施方案包括人抗體，小鼠抗體以及修飾抗體例如人源化抗體、嵌合抗體和來自于除人和小鼠以外的抗體。嵌合抗體是通過將來源于不同動物的序列加以組合而生產(chǎn)的，包括例如，含有小鼠抗體的重、輕鏈可變區(qū)和人源抗體的輕、重鏈恒定區(qū)的抗體?？梢岳靡阎姆椒ǐ@得嵌合抗體，例如，通過將編碼抗體V區(qū)域的DNA與編碼人源抗體C區(qū)域的DNA連接起來，并將該連接序列插入到表達(dá)質(zhì)粒中，然后將該質(zhì)粒導(dǎo)入到宿主中使其生產(chǎn)抗體，來獲得抗體。人源化抗體也稱"重構(gòu)(reshaped)人抗體，，，該抗體是通過將非人哺乳動物例如小鼠的抗體的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)移植到人抗體的CDR中獲得的，用于此目的的常規(guī)基因工程技術(shù)也已為人所知(可見歐洲專利申請公報(bào)EP125023以及WO96/02576)。具體地，通過PCR反應(yīng)合成一段設(shè)計(jì)為將小鼠源抗體CDR連接到人源抗體框架區(qū)(FR)的DNA,該P(yáng)CR利用制備為包含與CDR和FR末端區(qū)有重疊部分的幾條寡核苷酸作為引物。(見W098/13388中所述方法).對于通過CDR連接的人源抗體框架區(qū)而言，選擇互補(bǔ)決定區(qū)形成良好的抗原結(jié)合位點(diǎn)者。在必要的情況下，可以在使得重構(gòu)人抗體的互補(bǔ)決定區(qū)能夠形成合適的抗原結(jié)合位點(diǎn)的條件下，對抗體可變區(qū)的框架區(qū)的氨基酸進(jìn)行取代(Sato，K.eza/.，CancerRes.(1993)53,851-856)。嵌合抗體和人源化抗體的恒定區(qū)使用人源抗體的恒定區(qū)，例如，Oyl，0/2，CY3或者0(4可以用于H鏈，而Ck或者CX可以用于L鏈。此外，人源抗體恒定區(qū)可以被修飾來提高抗體的穩(wěn)定性或抗體生產(chǎn)的穩(wěn)定性。通常來說，嵌合抗體是由來自非人哺乳動物的抗體可變區(qū)和人源抗體恒定區(qū)構(gòu)成的。另一方面，人源化抗體是由來自非人哺乳動物的抗體的互補(bǔ)決定區(qū)和人源抗體的框架區(qū)和恒定區(qū)組成的。在制備了嵌合抗體或人源化抗體后，可以用其它氨基酸取代可變區(qū)(例如，F(xiàn)R)或恒定區(qū)的氨基酸。制，并且可以是來源于任何動物。例如，可以使用小鼠抗體，大鼠抗體，兔抗體以及駱駝抗體的序列。本發(fā)明中優(yōu)選的抗體包括小鼠抗體，但不局限于此。對于本發(fā)明生產(chǎn)的抗體(全長抗體和低分子量抗體)所結(jié)合的抗原，也沒有特殊限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以利用已知的技術(shù)來設(shè)計(jì)能夠結(jié)合目的抗原的抗體。本發(fā)明涉及制備可以與目的抗原結(jié)合的抗體的方法，該抗體是利用已知技術(shù)這樣地設(shè)計(jì)的。本發(fā)明也涉及利用這樣的方法制備的抗體。作為一個(gè)例子，本發(fā)明中制備了結(jié)合人轉(zhuǎn)鐵蛋白的抗體。scFv型抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體的H鏈可變區(qū)氨基酸序列如SEQIDNO:6所示，而scFv型抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體L鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQIDNO:12所示。此外，IgGl抗體H鏈可變區(qū)氨基酸序列如SEQIDNO:31所示，并且IgGl抗體L鏈可變區(qū)氨基酸序列如SEQIDNO:23所示。如后所述，該抗體能夠用于諸如疾病的診斷等方面，例如作為糖尿病性腎病的診斷試劑以及用于測定活體中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量以及進(jìn)行營養(yǎng)評價(jià)，等等。關(guān)于本發(fā)明所提供的抗體的其它實(shí)施方案的一個(gè)例子是結(jié)合癌胚抗原(CEA)的抗體。目前，CEA被廣泛用作腫瘤標(biāo)志。其腫瘤標(biāo)志譜在各種臟器中表達(dá)，其中不僅包括胃癌、食道癌等消化系統(tǒng)腫瘤，還包括肺癌等呼吸循環(huán)系統(tǒng)腫瘤。因此，結(jié)合CEA的抗體可以用于檢測腫瘤復(fù)發(fā)或者觀察治療過程。此外，還可以列舉結(jié)合c-erbB-2的抗體。c-erbB-2在經(jīng)過芽基發(fā)育(blastogenesis)的腺組織的腫瘤細(xì)胞中表達(dá)。能夠結(jié)合c-erbB-2的抗體可以用于腫瘤的組織病理學(xué)檢測。此外，還可以列舉能夠結(jié)合觸珠蛋白的抗體。觸珠蛋白是一類從肝臟分泌到血液中的蛋白。該種蛋白可以結(jié)合游離血紅蛋白。因此，能夠結(jié)合觸珠蛋白的抗體可以用于測定血漿中的觸珠蛋白。本發(fā)明所生產(chǎn)的抗體包括例如，針對CRP、IgG、IgA、IgM、IgD、IgE、白蛋白、前白蛋白、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、a-l微球蛋白、(3-2微球蛋白、AFP、CA19-9、CA15-3、PSA、載脂蛋白、腫瘤壞死因子、白介素、干擾素、骨橋蛋白、HBs抗原、RF、HCG、膠原、Hb、HbAlc、HCV抗體、肌鈣蛋白、肌紅蛋白、FDP的抗體，但不局限于本文列舉的這些，對于抗體沒有特殊限制，只要是結(jié)合能夠應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域的抗體即可。此外，抗體不局限于那些結(jié)合蛋白的抗體，還包括針對諸如環(huán)境激素等小分子化合物的抗體。通過適當(dāng)?shù)馗淖冊趯?shí)施例中描述的結(jié)合人轉(zhuǎn)鐵蛋白的抗體的H鏈或L鏈的可變區(qū)或者高變區(qū)，可以生產(chǎn)能夠結(jié)合目的抗原的抗體。本發(fā)明中，優(yōu)選使用分泌信號(信號序列)，以保持所生產(chǎn)的重組抗體的活性或者促進(jìn)抗體的分泌來增加回收抗體的量。分泌蛋白或者膜整合蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)合性核糖體上合成后，必須通過脂質(zhì)雙分子層。信號序列是指此時(shí)必需的、位于蛋白N末端的氨基酸殘基。對于本發(fā)明中的信號序列，沒有特別限制，只要該信號序列具有上述的功能即可。一個(gè)例子包括動物來源的信號序列。其它的例子有動物抗體來源的信號序列。此處，動物的例子包括人，小鼠，大鼠，兔，驢，山羊，馬，鳥，狗，貓，酵母以及昆蟲。本發(fā)明優(yōu)選的信號序列的例子包括酸性磷酸酶信號序列。對于酸性磷酸酶的來源沒有特別限制，包括例如，人，小鼠，大鼠，兔，驢，山羊，馬，鳥，狗，貓，酵母以及昆蟲的酸性磷酸酶。本發(fā)明中特別優(yōu)選的信號序列是人酸性磷酸酶信號序列，小鼠免疫球蛋白L鏈K的信號序列以及小鼠IgGl的信號序列。使用這些信號序列，可以促進(jìn)表達(dá)的重組抗體向絲腺內(nèi)腔中轉(zhuǎn)移。相應(yīng)地，本發(fā)明中優(yōu)選使用信號序列。當(dāng)使用信號序列時(shí)，本發(fā)明中優(yōu)選的人酸性磷酸酶信號序列的例子是含有SEQIDNO:3的氨基酸序列的蛋白。本發(fā)明中優(yōu)選的小鼠免疫球蛋白L鏈K的信號序列的例子是包含SEQIDNO:21的氨基酸序列的蛋白。本發(fā)明中優(yōu)選的小鼠IgGl信號序列的例子是包含SEQIDNO:29的氨基酸序列的蛋白。此外，還可以是在SEQIDNO:3、21和29中任意一個(gè)所示的氨基酸序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的取代，缺失，增加和/或插入而得的氨基酸序列，只要其具有等同于SEQIDNO:3，21和29中任意一種蛋白的活性即可。此處，術(shù)語"功能上等同"指目的蛋白與由SEQIDNO:3、21和29中任意一種氨基酸序列組成的蛋白具有同樣的生物學(xué)或生物化學(xué)活性。優(yōu)選本發(fā)明的信號序列連接于重組抗體的N末端，但不局限于此。相應(yīng)地，本發(fā)明的抗體的特別優(yōu)選的實(shí)施方案包括結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白，CEA,c-erbB-2或觸珠蛋白，并具有人酸性磷酸酶信號序列的抗體，小鼠免疫球蛋白L鏈或小鼠IgGl。其中含有人酸性磷酸酶信號序列并且結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白的scFv型小鼠抗體是本發(fā)明特別優(yōu)選的抗體。詼抗體含有SEQIDNO:15所示的氨基酸序列。本發(fā)明的優(yōu)選抗體還包括在SEQIDNO:15的氨基酸序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的取代，缺失，增加和/或插入，并與包含SEQIDNO:15的氨基酸序列的抗體具有等同活性的抗體。在本發(fā)明中還特別優(yōu)選這樣的抗體其結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白、CEA、c-erbB-2或觸珠蛋白，并且包含帶有小鼠免疫球蛋白L鏈K的信號序列的L鏈和帶有小鼠IgGl信號序列的H鏈。這樣的抗體包含具有SEQIDNO:49的氨基酸序列的L鏈和具有SEQIDNO:51的氨基酸序列的H鏈。此外，本發(fā)明特別優(yōu)選的抗體是包含下述L鏈和下述H鏈的抗體其中，所述L鏈在SEQIDNO:49的氨基酸序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的取代，缺失，增加和/或插入、且具有等同于包含SEQIDNO:49的氨基酸序列的抗體的活性；所述H鏈在SEQIDNO:51的氨基酸序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的取代，缺失，增加和/或插入，且具有等同于包含SEQIDNO:51的氨基酸序列的抗體的活性。編碼結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白并且包含人酸性磷酸酶信號序列的scFv型小鼠抗體的DNA的優(yōu)選實(shí)施方案是包含SEQIDNO:13的堿基序列的DNA,或者更優(yōu)選的是包含SEQIDNO:14的堿基序列的DNA。此外，還可以列舉出下述DNA:其在SEQIDNO:13(或更加優(yōu)選的是SEQIDNO:14)的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的取代，缺失，增加和/或插入，并且編碼蛋白，且具有與SEQIDNO:13(或更加優(yōu)選的是SEQIDNO:14)所示的DNA等同的功能。編碼結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白的抗體的L鏈，并且編碼帶有小鼠免疫球蛋白L鏈K信號序列的L鏈的DNA的優(yōu)選實(shí)施方案，包括包含SEQIDNO:48的堿基序列的DNA。此外，還可以列舉下述DNA:其在SEQIDNO:48的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的取代，缺失，增加和/或插入，且具有與SEQIDNO:48所示的DNA等同的功能。編碼結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白的抗體的H鏈，并且編碼帶有小鼠IgGl信號序列的II鏈的DNA的優(yōu)選實(shí)施方案，包括具有SEQIDNO:50的堿基序列的DNA。此外，還可以列舉出下述DNA:所述DNA在SEQIDNO:50的石成基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)氨基酸的取代，缺失，增加和/或插入，且具有與SEQIDNO:50的DNA等同的功能。當(dāng)設(shè)計(jì)本發(fā)明的編碼抗體(優(yōu)選的抗體包含信號序列)的DNA時(shí)，優(yōu)選將這些密碼子轉(zhuǎn)換成昆蟲型密碼子。轉(zhuǎn)換成昆蟲型密碼子能夠增加重組抗體的表達(dá)水平。例如，包含人酸性磷酸酶信號序列的scFv小鼠源抗體，信號序列密碼子轉(zhuǎn)換之前的堿基序列如SEQIDNO:1所示，這些密碼子轉(zhuǎn)換之后的堿基序列如SEQIDNO:2所示。相似的，H鏈可變區(qū)(VH)的堿基序列在密碼子轉(zhuǎn)換前后分別如SEQIDNO:4和5所示；L鏈可變區(qū)(VL)的堿基序列在密碼子轉(zhuǎn)換前后分別如SEQIDNO:10和11所示；接頭的石咸基序列如SEQIDNO:7所示并且在密碼子轉(zhuǎn)換之后其堿基序列如SEQIDNO:8所示；全長抗體的;成基序列在密碼子轉(zhuǎn)換前后分別如SEQIDNO:13和14所示。在本發(fā)明的針對人轉(zhuǎn)鐵蛋白的scFv型小鼠抗體中，抗體的H鏈和L鏈區(qū)域的密碼子從脊推動物小鼠的密碼子轉(zhuǎn)換成昆蟲中所使用的密碼子。更具體的說，在本發(fā)明中，針對人轉(zhuǎn)鐵蛋白的scFv型小鼠抗體的密碼子被轉(zhuǎn)換成了在草地貪夜蛾GS;o^^&ra/n^z^erafa)中常用的密碼子，草地貪夜蛾在種屬上與斜紋夜蛾(^odo/^era似wra)近緣，并且和家蠶一樣也是一種昆蟲。此外，在草地貪夜蛾中常用的密碼子也被用于scFv抗體的接頭部分。更具體的說，如表1所示，本發(fā)明中將人和動物來源的密碼子中全部153個(gè)氨基酸和接頭部分的密碼子轉(zhuǎn)換成種屬上與斜紋夜蛾相關(guān)的草地貪夜蛾中常用的密碼子(轉(zhuǎn)換之前的序列對應(yīng)于SEQIDNO:13,轉(zhuǎn)換之后的序列對應(yīng)于SEQIDNO:14。在表1中"第1個(gè)密碼子"一欄是指該密碼子的第一個(gè)堿基相當(dāng)于SEQIDNO:13的堿基序列中的第幾個(gè)堿基。例如，在"第1個(gè)密碼子，，中的數(shù)值"13，，表示在SEQIDNO:13中，由從第13位到第15位的堿基構(gòu)成的密碼子發(fā)生了轉(zhuǎn)換(在該例子中，第15位的G被轉(zhuǎn)換成了C)。編碼本發(fā)明抗體的DNA包括至少有一個(gè)這樣的密碼子被轉(zhuǎn)換了的DNA。此外，在本發(fā)明中，密碼子可以被轉(zhuǎn)換成在果蠅、家蠶、蜜蜂中使用頻率高的密碼子，并且密碼子已經(jīng)被轉(zhuǎn)換為在這些昆蟲中使用頻率高的密碼子的DNA也包含在本發(fā)明中。在這些昆蟲中使用頻率高的密碼子是公知的。相應(yīng)地，在本發(fā)明中，在設(shè)計(jì)帶有人酸性磷酸酶信號序列的scFv型小鼠抗體的編碼DNA時(shí)，密碼子轉(zhuǎn)換成昆蟲密碼子的DNA也包括在其中。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>在本發(fā)明中，上述的重組抗體被分泌到絲腺中。絲腺是在家蠶體內(nèi)成對存在的一種器官，是絲蛋白的合成器官。絲腺可以分為后、中、前絲腺，絲蛋白是在后絲腺和中絲腺中合成的。本發(fā)明中優(yōu)選的絲腺是中絲腺和后絲腺。對于利用本發(fā)明方法生產(chǎn)的抗體沒有特殊限制，只要是利用本發(fā)明的方法生產(chǎn)的即可，該抗體可含有也可不含有信號序列。更具體的說，利用本發(fā)明生產(chǎn)抗體的方法生產(chǎn)的抗體既包括含有信號序列的抗體也包括不含有信號序列的抗體。在本發(fā)明中，含有特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子和受該啟動子直接調(diào)控的重組蛋白的編碼DNA的家蠶卵的例子包括含有下述DNA的家蠶卵，其中，在所述DNA中編碼重組抗體的DNA可沖喿作地連接到特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子下游。這樣的家蠶卵可以通過將下述DNA導(dǎo)入到家蠶卵中來生產(chǎn)，其中，在所述DNA中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子下游。在本發(fā)明中，含有特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子和受該啟動子間接調(diào)控的重組蛋白的編碼DNA的家蠶卵的例子包括含有以下DNA的家蠶卯(i)一種DNA，在該DNA中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子下游，和(ii)一種DNA,在該DNA中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游。在本發(fā)明中，由編碼絲腺特異性表達(dá)的蛋白的DNA的啟動子直接或間接調(diào)控的重組抗體的編碼DNA優(yōu)選的是包含促進(jìn)抗體分泌和增加回收量的信號序列的DNA。信號序列的具體實(shí)施方案如前所述。術(shù)語"可操作連接，，表示將啟動子和DNA連接起來，以便定位在啟動子下游的DNA的表達(dá)可以被轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與啟動子的結(jié)合調(diào)控。因此，即使該DNA被連接到另一個(gè)基因上并且由連接的基因生產(chǎn)了融合蛋白，只要融合蛋白的表達(dá)被轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與啟動子的結(jié)合所誘導(dǎo)，該DNA就可以認(rèn)為是上述的"可操作連接"。上述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子與目標(biāo)序列的組合的例子包括GAL4與UAS以及TctR與TRE。通過利用GAL4與UAS或TetR與TRE,精確地調(diào)控目標(biāo)基因的表達(dá)部位、時(shí)期以及表達(dá)量，并且該基因可以很容易地表達(dá)到多種組織中。此外，即使需要表達(dá)的基因是致死基因，也可以建立含有該基因的林系。可以選擇各種方法作為生產(chǎn)上述家蠶卵的方法。例如，可以將上述的(i)和(ii)中的DNA導(dǎo)入到各別的家蠶卵中。含有兩種DNA的家蠶卵可以這樣獲得從分別導(dǎo)入了單一DNA的家蠶卵孵化轉(zhuǎn)基因家蠶，使這些轉(zhuǎn)基因家蠶交配。在此情況下，可以通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子來調(diào)整表達(dá)的組織，時(shí)期，表達(dá)量等等的因素，因此具有下述優(yōu)點(diǎn)通過與導(dǎo)入了需要表達(dá)的基因的抹系雜交，即可以改變表達(dá)的組織、時(shí)期、表達(dá)量等指標(biāo)，而不需制備很多株系。即使目標(biāo)基因的表達(dá)會引起不育仍可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。另一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是與使用單獨(dú)的啟動子相比，可以得到導(dǎo)入基因的產(chǎn)物的更高水平。此外，具有上述(i)和(ii)的DNA的家蠶卵可以通過下述方法獲得將其中一種DNA導(dǎo)入到由已經(jīng)導(dǎo)入了另一種DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所產(chǎn)的卵中。具有上述(i)和(ii)中的DNA的家蠶卵也可以通過將兩種DNA導(dǎo)入到同一枚卵中的方法獲得(lmamura,M.，Nakai,J.，Inoue,S.,Quan,G.-X.,Kanda，T.andTamura，丁.(2003)TargetedgeneexpressionusingtheGAL4/UASsysteminthesilkwormBombyxmori.FourthInternationalWorkshoponTmnsgenesisandGenomicsofInvertegrateOrganisms,Asilomar，p.53)。DNA可以導(dǎo)入到家蠶卵中，例如按照將轉(zhuǎn)座子作為載體注射到發(fā)育早期的家蠶卵中的方法進(jìn)行(Tamura,T.,Thibert，C.，Royer，C.,Kanda,T.,Abraham,E.,Kamba,M.，Komoto，N.，Thomas,J.-L.，Mauchamp,B.,Chavancy,G.，Shirk,P.，F(xiàn)raser,M.,Pmdhomme,J.-C.andCouble,R，2000,NatureBiotechnology18,81-84)。例如，將上述DNA插入到轉(zhuǎn)座子的末端反向重復(fù)序列之間而成的載體(HandlerAM，McCombsSD,FraserMJ,SaulSH.(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.95(13):7520-5)和包含轉(zhuǎn)座酶編碼DNA的載體(輔助載體)一起導(dǎo)入到家蠶卵中。輔助載體的一個(gè)例子是pHA3PIG(Tamura，T.，Thibert，C.,Royer,C.，Kanda,T.,Abraham,[<:.,Kamba,M.，Komoto,N.，Thomas,J.-L.,Mauchamp,B.,Chavancy,G，Shirk,P.,Fraser,M.，Prudhomme，J.-C.andCouble，P.,2000,NatureBiotechnology18，81-84),j旦不局限于此。本發(fā)明的轉(zhuǎn)座子的優(yōu)選實(shí)例是piggyBac,但不局限于此?？梢允褂美鏜ARINER和MINOS這樣的轉(zhuǎn)座子(Shimizu,K.,Kamba,M.,Sonobe,H.，Kanda，T.,Klinakis，A.G.,Savakis,C.andTam腦，T.(2000)InsectMol.Biol.,9，277-281;WangW，SweversL，IatrouK.(2000)InsectMolBiol9(2):145-55)。在本發(fā)明中，也可以利用桿狀病毒載體來生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因家蠶(Yamao,M.，N.Katayama,H.Nakazawa,M.Yamakawa,Y.Hayashia/.,1999,GenesDev13:511-516)。在中絲腺中，本發(fā)明的絲腺特異性表達(dá)蛋白的編碼DNA的啟動子有例如絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的編碼DNA的啟動子。絲膠蛋白或者絲膠蛋白2的編碼DNA的啟動子的例子包括含有SEQIDNO:16或17的堿基序列的DNA。包含SEQIDNO:16或17堿基序列的DNA的例子有由SEQIDNO:16或17所示的堿基序列構(gòu)成的DNA、和包含由SEQIDNO:16或17的堿基序列構(gòu)成的DNA的上游區(qū)或下游區(qū)的DNA,但不局限于此。由SEQIDNO:16或17所示的堿基序列所組成的DNA的上游區(qū)和下游區(qū)在參考文獻(xiàn)中已有公開Okamoto，H.，Ishikawa,E.andSuzuki,Y.(1982)Structuralanalysisofsericingenes.Homologieswithfibroingeneinthe5，flankingnucleotidesequences.J.Biol.Chem.,257,15192-15199;Garel，A.,Deleage,G.andPrudhomme,J.C.(1997)Structureandorganizationofthe/;函6yxmon'sericin1geneandofthesericins1deducedfromthesequenceoftheSerIBcDNA.InsectBiochem.Mol.Biol.,27,469-477;Michaille,J.J.,Garel,A.andPrudhomme，J.C.(1990)CloningandcharacterizationofthehighlypolymorphicSer2geneof^ScwiZ^xwonf.Gene，86,177-184。此外，在本發(fā)明中，在中絲腺中特異表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子的例子可以是在結(jié)構(gòu)上與包含SEQIDNO:1.6或17的堿基序列的DNA相近的DNA，并且該DNA與包含SEQIDNO:16或17石威基序列的DNA相比，具有等同的或者更好的啟動子活性。這樣的DNA可以是例如，包含在SEQIDNO:16或17的堿基序列中發(fā)生了一個(gè)或多個(gè)堿基的取代，缺失，增加和/或插入的堿基序列的DNA。該DNA可以通過例如雜交技術(shù)，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)，定點(diǎn)誘變以及DNA合成等方法制備。制備的DNA是否具有啟動子活性可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員通過利用公知的報(bào)道基因的報(bào)道分子分析法等方法來觀'J定。對于報(bào)道基因沒有特殊限制，只要其表達(dá)是可檢測的即可，報(bào)道基因包括CAT基因，kcZ基因，螢光素酶基因，(3-葡糖醛酸糖苷酶基因(GUS)以及GFP基因等，這些基因?yàn)楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員所廣泛使用。報(bào)道基因表達(dá)水平依照報(bào)道基因的類型可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的方法來測量。例如，當(dāng)報(bào)道基因是CAT基因時(shí)，可以通過測定基因產(chǎn)物催化的氯霉素乙?；饔脕泶_定報(bào)道基因的表達(dá)水平。報(bào)道基因的表達(dá)水平可以通過以下方法測量當(dāng)報(bào)道基因是lacZ基因時(shí)，測定該基因表達(dá)產(chǎn)物催化的色素化合物的生色反應(yīng)；當(dāng)報(bào)道基因是螢光素酶基因時(shí)，測定該基因表達(dá)產(chǎn)物催化的熒光化合物的菱光；當(dāng)報(bào)道基因是(3-葡糖醛酸糖香酶基因(GUS)時(shí)，測定該基因表達(dá)產(chǎn)物催化的葡萄糖醛酸(ICN)的發(fā)光或測定5-溴-4-氯-3-p引咮-P-葡萄糖酸苷(X-Gluc)的生色反應(yīng)；而當(dāng)報(bào)道基因是GFP基因時(shí)，測定GFP蛋白的熒光。另一方面，在本發(fā)明中，在后絲腺中特異表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子有，例如，絲心蛋白L鏈蛋白的編碼DNA的啟動子。絲心蛋白L鏈蛋白的編碼DNA的啟動子的例子包括包含SEQIDNO:18所示堿基序列的DNA。包含SEQIDNO:18所示堿基序列的DNA的例子有由SEQIDNO:18所示堿基序列組成的DNA和包含由SEQIDNO:18堿基序列組成的DNA的上游區(qū)或下游區(qū)的DNA,但不局限于此。由SEQIDNO:18堿基序列組成的DNA的上游區(qū)和下游區(qū)在以下的參考文獻(xiàn)中已有公開KIKUCHI，Y.，K.MORJ，S.SUZUKI,K.YAMAGUCHIandS.MIZUNO，1992StructureoftheSo附Zja'war/fibroinlight-chain-encodinggene:upstreamsequenceelementscommontothelightandheavychain.Gene110:151-158)。此外，在本發(fā)明中，在后絲腺中特異表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子的例子可以是在結(jié)構(gòu)上與包含SEQIDNO:18所示^咸基序列的DNA相近的DNA,并且該DNA與包含SEQIDNO:18所示堿基序列的DNA相比、具有等同的或者更好的啟動子活性。這樣的啟動子可以通過上述方法制備。本發(fā)明生產(chǎn)重組抗體的方法包括回收在家蠶體內(nèi)合成的抗體的步驟。合成的抗體沒有不溶化，以其活性形式分泌到中絲腺或后絲腺中。因此，可以從中絲腺或后絲腺中回收重組抗體。以下舉例說明從中絲腺或后絲腺中回收重組抗體的方法，解剖吐絲期的家蠶，在20mMTris-HC1pH7.4中將中絲收重組抗體。本發(fā)明的重組抗體也可以從例如轉(zhuǎn)基因家蠶所織的繭中回收?；厥辗椒ǖ睦影ū绢I(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的方法，例如將繭溶解在60%VSCN中、然后在含有20mMTris和5M尿素的溶液中透析來回收的方法(Inoue,S.，Ts油，H.，Tanaka，H.,Magoshi,Y.,andMizuno(2001)Sericologia4,157-163)?；厥盏鞍椎钠渌椒òㄊ褂帽砻婊钚詣┑姆椒ê陀盟芤喝芙獾姆椒āτ诒景l(fā)明的家蠶沒有特殊限制。然而，為了生產(chǎn)大量的重組抗體，優(yōu)選使用這樣的家蠶，其中構(gòu)成蠶絲的蛋白(例如絲心蛋白)的產(chǎn)量因編碼構(gòu)成蠶絲的蛋白的I)NA區(qū)域(包括編碼區(qū)，啟動子區(qū)和非翻i斧區(qū))的突變而受到抑制。這樣的家蠶的例子包括突變的家蠶抹系，在該突變抹系的家蠶中，構(gòu)成蠶絲的蛋白的產(chǎn)量因編碼這些蛋白的DNA區(qū)域的突變而受到抑制；并且優(yōu)選地包括這樣的家蠶離蛹其中構(gòu)成蠶絲的蛋白的產(chǎn)量因該突變所抑制；或者更優(yōu)選包括Nd-sD家蠶抹系。然而，只要構(gòu)成蠶絲的蛋白的產(chǎn)量被抑制，任何的家蠶都是合適的，不論該類蛋白產(chǎn)量的抑制是人工造成的，還是依賴于自然發(fā)生的突變。該類家蠶的一個(gè)實(shí)施方案是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的家蠶如絲膠蛋白家蠶。通過絲膠蛋白家蠶的使用，可以在中絲腺大量生產(chǎn)重組抗體，并且由導(dǎo)入染色體中的編碼重組抗體的DNA所合成的抗體的純化變得更容易。此外，當(dāng)在后絲腺中生產(chǎn)重組抗體時(shí)，從產(chǎn)量的觀點(diǎn)來看優(yōu)選絲膠家蠶。本發(fā)明的家蠶可以使用具有產(chǎn)非滯育卵的特性的家蠶，也可以使用具有產(chǎn)滯育卵的特性的家蠶(例如，實(shí)際應(yīng)用中的家蠶種類包括Gunma，200,Shunrei,Shogetsu，Kinshu以及Showa)。此處，術(shù)語"滯育卵"是指在產(chǎn)卵之后胚胎發(fā)育短暫停止的卵，術(shù)語"非滯育卵"是指產(chǎn)卵之后胚胎發(fā)育沒有停止并且醉化成幼蟲的卯。當(dāng)使用具有產(chǎn)滯育卵的特性的家蠶時(shí)，產(chǎn)出非滯育卵后將DNA導(dǎo)入到該卯中。例如，可以誘導(dǎo)Gunma型家蠶產(chǎn)非滯育卵，所采用的方法可以為在15。C到21。C培養(yǎng)滯育卵來誘導(dǎo)由滯育卵孵化成的成蟲產(chǎn)非滯育卵，優(yōu)選的方法是在16。C到20。C培養(yǎng)滯育卵來誘導(dǎo)由滯育卵孵化成的成蟲產(chǎn)非滯育卵，更優(yōu)選的方法是在18。C培養(yǎng)滯育卵來誘導(dǎo)由滯育卵孵化成的成蟲產(chǎn)非滯育卵，最優(yōu)選的方法是在18。C培養(yǎng)滯育卵，并且在持續(xù)光照下飼養(yǎng)由滯育卵孵化出來的幼蟲，來誘導(dǎo)由滯育卵孵化成的成蟲產(chǎn)非滯育卵?？梢哉T導(dǎo)200型家蠶產(chǎn)非滯育卵，所采用的方法可以為在15。C到21。C培養(yǎng)滯育卵來誘導(dǎo)由滯育卵孵化成的成蟲產(chǎn)非滯育卵，優(yōu)選的方法是在16。C到20°C培養(yǎng)滯育卵來誘導(dǎo)由滯育卵孵化成的成蟲產(chǎn)非滯育卵，更優(yōu)選的方法卵，最優(yōu)選的方法是在25。C培養(yǎng)滯育卵，并且在持續(xù)光照下飼養(yǎng)由滯育卵孵化出來的幼蟲，來誘導(dǎo)由滯育卵孵化成的成蟲產(chǎn)非滯育卵?？梢岳缭?8°C到25。C的孵卵器或者恒溫室中培養(yǎng)蟲卵?？梢栽诜敝呈以?0。C到29。C條件下利用人工飼料飼養(yǎng)幼蟲。上述的本發(fā)明的滯育卵可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員常用的培養(yǎng)家蠶卵的方法來培養(yǎng)。例如，可以利用在"Monbusho(MinistryofEducation)(1978)SanshuSeizo(Productionofsilkwormvarieties)p.193，JikkyoShuppan,Tokyo"中描述的方法來進(jìn)行培養(yǎng)?？梢岳帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的方法來飼養(yǎng)本發(fā)明的家蠶幼蟲。例如，可以按照在"Monbusho(MinistryofEducation)(1978)SanshuSeizo(Productionofsilkwormvarieties)p.193,JikkyoShuppan,Tokyo."中描述的方法來飼養(yǎng)家蠶幼蟲。在本發(fā)明中，所產(chǎn)的卵是否是非滯育卵可以通過卵的顏色來確定。已公知的是滯育卵呈褐色，非滯育卵是黃白色。因此，在本發(fā)明中，如果所產(chǎn)的卵的顏色不是褐色(優(yōu)選是黃白色)，則判定為非滯育卵。在下文中，將會對將DNA導(dǎo)入家蠶卵的方法的例子進(jìn)行詳細(xì)的描述，但是本發(fā)明的將DNA導(dǎo)入家蠶卵的方法并不局限于此。例如，可以利用DNA注射管將DNA直接導(dǎo)入家蠶卵。在優(yōu)選實(shí)施方案中，預(yù)先在卵殼上用化學(xué)或者物理學(xué)的方法打孔，然后通過該孔將DNA導(dǎo)入。在該例子中，可以通過調(diào)整DNA注射管插入的角度使DNA注射管基本上垂直于卵的腹側(cè)面來將DNA注射管通過該孔插入到卵中。在本發(fā)明中，在卵殼上打孔的物理學(xué)方法的例子包括利用針，顯微激光等方法打孔。優(yōu)選的是利用針在卵殼上所打的孔。對針的材質(zhì)、強(qiáng)度等沒有特殊限制，只要該針能夠在家蠶卵殼上打孔即可。在本發(fā)明中的針通常是指具有鋒利尖端的棒狀針，但不局限于此形狀。只要針能夠在卵殼上打孔，對其整體形狀沒有特別的限制。例如，具有鋒利尖端的金字塔形狀的物體，或者具有鋒利尖端的三角錐形的物體也包含在本發(fā)明的"針，，的定義，優(yōu)選使用的是鴒針。本發(fā)明的針具有足夠的粗度(直徑)以便于其打的孔能夠允許以下描述的毛細(xì)管通過。通常來說針的厚度是2到20pm，優(yōu)選的是5到10pm。另一方面，在卵殼上打孔的化學(xué)方法的例子包括使用化學(xué)試劑(例如，次氯酸)或諸如此類的打孔方法。在本發(fā)明中，對孔的位置沒有特殊限制，只要DNA注射管插入的角度使DNA注射管能以基本上垂直于卵的腹側(cè)面的角度通過該孔插入到卵中即可。優(yōu)選的是卵的腹側(cè)面或者其對側(cè)面；更優(yōu)選的是腹側(cè)面；進(jìn)一步優(yōu)選的是腹側(cè)面中心部分微偏向后端的位置。在本發(fā)明中，術(shù)語"基本上垂直"意味著70°到120。，優(yōu)選的是80。到90°。在本發(fā)明中，術(shù)語"將來會成為生殖細(xì)胞的位置"通常指卵的腹側(cè)面接近卵表面的位置(通常在卵表面以下0.01mm到0.05mm),并且優(yōu)選的位置是腹側(cè)面中心部分微偏向后極并接近卵表面的位置。在本發(fā)明中，對用于注射DNA的管子的材料、強(qiáng)度、內(nèi)徑等參數(shù)沒有特殊限制。然而，當(dāng)在插入DNA注射管之前通過物理學(xué)或者化學(xué)的方法在印殼上打孔時(shí)，該管優(yōu)選的是具有足夠的粗度(外徑)來穿過打出的孔。在本發(fā)明中，DNA注射管的例子包括玻璃毛細(xì)管等。在本發(fā)明DNA導(dǎo)入方法的優(yōu)選實(shí)施方案中，使用裝備了DNA注射管和針的一體化搡作裝置來進(jìn)行以下的步驟物理地或者化學(xué)地在家蠶卵上打孔；通過該孔將DNA注射管插入到卵中，其插入角度為基本上垂直于卵的腹側(cè)面；并且注射DNA。優(yōu)選的是利用含有操作裝置作為其構(gòu)成要素之一的儀器來進(jìn)行本發(fā)明。這樣的儀器由解剖顯微鏡、照明裝置、可移動操作臺、利用金屬配件固定在顯微鏡上的粗動操作裝置、該操作裝置上附帶的顯微操作器、以及能夠調(diào)節(jié)用于DNA注射的空氣壓力的注射器組成。該注射器所使用的壓力是由氮?dú)夤尢峁┑?，并且可以使用腳踩開關(guān)來控制壓力的開關(guān)。注射是在固定在諸如載玻片這樣的基片上的卵上進(jìn)行的，并且可以使用可移動操作臺來調(diào)節(jié)卵的位置。顯微操作器的玻璃毛細(xì)管被連接到連有四個(gè)管子的操作部分并由該操作部分所操控。實(shí)際規(guī)程中，與鴒針與卵的相對位置是由粗操作裝置調(diào)整的，然后通過利用操作臺桿在水平方向上移動卯來打孔。此后，操作部分的顯微操作器的桿將玻璃毛細(xì)管的尖端引導(dǎo)到該孔的位置，并且利用操作臺桿將毛細(xì)管插入到卯中。在該例子中，玻璃毛細(xì)管必須垂直地插入卵的腹側(cè)面。然后開起腳踩開關(guān)來注射DNA，并且操作杠桿將毛細(xì)管從卵中拔出。利用瞬間粘合劑或諸如此類的物質(zhì)將被打的孔封閉，并且將該卵保存在恒溫恒濕的孵卵器中。在本發(fā)明中所使用的儀器優(yōu)選的是在專利第1654050號中描述的儀器或者該儀器的改良版本。此外，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，用于導(dǎo)入DNA的家蠶卵優(yōu)選固定在一個(gè)基片上。在本發(fā)明中所使用的基片的例子包括載玻片和塑料片材，但不局限于此。在本發(fā)明的該實(shí)施方案中，優(yōu)選的是使卵方向一致之后再將它們固定，以便于將DNA準(zhǔn)確地注射到家蠶卵上將來會成為生殖細(xì)胞的位置中。此外，在該實(shí)施方案中，對固定在基片上的家蠶卵的數(shù)目沒有特殊限制。當(dāng)使用多個(gè)家蠶卵時(shí)，優(yōu)選的是將家蠶卵按背腹取向一定的方向固定在基片上。在本發(fā)明中，可以通過例如下述方法來將家蠶卵固定在基片上誘導(dǎo)家蠶在預(yù)先涂有水性膠水的市售卡片(各種排卵卡片)上排卵，然后向卡片上加水來分離卵，并將濕的卵排列在基片上，然后風(fēng)干。優(yōu)選的是將這些卵以同一方向固定在玻璃片上。卵在基片上的固定也可以使用雙面膠帶，粘合劑等完成。為了確認(rèn)DNA是否已經(jīng)被成功導(dǎo)入到家蠶卵中，可以使用例如從卵中重新提取注入的DNA并進(jìn)行分析的方法(Nagaraju,J.，Kanda,T.，Yukuhiro,K.,Chavancy，G.,Tam腦，T.andCoub'le,P.(1996)Attemptoftransgenesisofthesilkworm(BombyxmoriL)byegg-injectionofforeignDNA.Appl.r':ntomol.Zool.，31，589-598),或觀察注入的DNA在卵中的表達(dá)的方法(丁amura,T.,Kanda，T.，Takiya,S.,Okano,K.andMaekawa，R(1990)TransientexpressionofchimericCATgenesinjectedintoearlyembryosofthedomesticatedsilkworm,Bombyxmori.Jpn.J.Genet.,65,401-410)。此外，可以通過將藥學(xué)上可接受的載體與用本發(fā)明的方法回收的重組抗體相組合來制備藥物組合物。所述載體的例子包括表面活性劑、賦形劑、著色劑、調(diào)味劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、助懸劑、等滲劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、流態(tài)化劑(fluidizingagent)以及矯味劑，但不局限于這些。其它的常規(guī)載體也可以適當(dāng)?shù)厥褂?。特別是，可以使用輕質(zhì)無水硅酸，乳糖，微晶纖維素，甘露醇，淀粉，羧曱纖維素鈣，羧曱纖維素鈉，羥丙基纖維素，輕丙基曱基纖維素，二乙基氨基乙酸聚乙烯縮醛，聚乙烯吡咯烷酮，明膠，中鏈脂肪酸甘油三酯，聚氧乙烯氫化蓖麻油60,蔗糖，羥曱基纖維素，玉米淀粉，無機(jī)鹽以及諸如此類的物質(zhì)。在本發(fā)明另一個(gè)生產(chǎn)重組抗體的方法的具體實(shí)施方案中，重組抗體是在家蠶脂肪體中生產(chǎn)的。更具體的說，本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)重組抗體的方法，該方法包括下述的(a)和(b)步驟(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，該轉(zhuǎn)基因家蠶包括編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子和受該啟動子直接或間接表達(dá)調(diào)控的、編碼重組抗體的DNA,并且將重組抗體分泌到脂肪體中；和(b)從制備的轉(zhuǎn)基因家蠶中回收重組抗體。本發(fā)明還涉及包括下述的(a)和(b)步驟的生產(chǎn)重組抗體的方法(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，該轉(zhuǎn)基因家蠶包括編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子和受該啟動子直接或間接表達(dá)調(diào)控的、編碼含有信號序列的重組抗體的DNA，并且將重組抗體分泌到脂肪體中；和(b)從制備的轉(zhuǎn)基因家蠶中回收重組抗體。.在本發(fā)明中制備轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟中，首先制備家蠶卵，其包含編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子和編碼重組抗體的DNA，該編碼重組抗體的DNA受該啟動子直接或間接的表達(dá)調(diào)控。此后，從家蠶卵孵化生產(chǎn)的家蠶中，挑選出將重組抗體分泌到脂肪體中的轉(zhuǎn)基因家蠶。轉(zhuǎn)基因家蠶的4兆選可以通過前述方法進(jìn)行。在本發(fā)明中，含有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子和受該啟動子直接調(diào)控的編碼重組蛋白的DNA的家蠶卵的例子包括含有下述DNA的家蠶卵，其中在所述DNA中重組抗體的編碼DNA可操作地連接到編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游。這樣的家蠶卵可以通過將下述DNA導(dǎo)入到家蠶卵中來生產(chǎn)，其中在所述DNA中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的編碼DNA的啟動子下游。此外，在本發(fā)明中，含有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子和受該啟動子間接調(diào)控的重組蛋白的編碼DNA的家蠶卵是例如含有以下DNA的家蠶卯(i)一種DNA，在該DNA中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子下游，(ii)一種DNA，在該DNA中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游。術(shù)語"可操作地連接"如前述所定義。轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和目標(biāo)序列的組合的例子包括前述的例子。可以通過前述方法來生產(chǎn)家蠶卵。例如，可以將上述的(i)和(ii)中的DNA導(dǎo)入到獨(dú)立的家蠶卵中。含有兩種DNA的家蠶卯可以通過使下述轉(zhuǎn)基因家蠶交配來獲得，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是從分別導(dǎo)入了每種DNA的家蠶卵發(fā)育來的?；蛘撸?i)和(ii)中的DNA的家蠶卵可以通過將其中一種DNA導(dǎo)入到由已經(jīng)導(dǎo)入另一種DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所排的卵來獲得。此外，包含(i)和(ii)中的DNA二者的家蠶卵也可以通過將兩種DNA導(dǎo)入到同一枚卵中的方法獲得。也可以通過前述的方法將DNA導(dǎo)入到家蠶卵中。此外，當(dāng)在家蠶脂肪體中生產(chǎn)重組抗體時(shí)，也可以使用桿狀病毒載體來生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因家蠶(Yamao,M.，N.Kataya腿，H.Nakazawa,M.Yamakawa，Y.Hayashida/.,1999,GenesDev.13:511-516)。細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的編碼DNA的啟動子的例子包括含有SEQIDNO:19所示》咸基序列的DNA。包含SEQIDNO:19所示石威基序列的DNA的例子是由SEQIDNO:19所示堿基序列組成的DNA和包含由SEQIDNO:19所示堿基序列所組成的DNA的上游區(qū)或下游區(qū)的DNA,但不局限于此。此外，在本發(fā)明中，編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的例子可以是在結(jié)構(gòu)上與包含SEQIDNO:19堿基序列的DNA相近，并且與包含SEQIDNO:19堿基序列的DNA相比具有等同的或者更好的啟動子活性的DNA。這樣的啟動子也可以通過前述的方法來制備。由SEQIDNO:19所示的堿基序列組成的DNA的上游區(qū)和下游區(qū)在以下的參考文獻(xiàn)中已有公開MANGE,A.，E,JIJLIEN,J.CPRUDHOMMEandP.COUBLE，1997Astronginhibitoryelementdown-regulatesSRE隱stimulatedtranscriptionoftheA3cytoplasmicactingeneofBowZ_yxmoW.丄Mol.Biol.265:266-274。轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和目標(biāo)序列的組合可以使用上文所述的那些?；蚪M中插入了通過將GAL4基因連接到編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的DNA的啟動子下游所制備的基因(由具有上述(i)的DNA的家蠶卵制備的轉(zhuǎn)基因家蠶)的轉(zhuǎn)基因家蠶的制備方法的具體實(shí)施方案在如下的參考文獻(xiàn)中已有公開IMAMURA,M.,J.NAKAI，S.INOUE，GX.QUAN，T.KANDAe/a/.，2003TargetedgeneexpressionusingtheGAL4/UASsysteminthesilkworm/6>m6_yxGenetics165:1329-1340。在本發(fā)明中，受編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子直接或間接的表達(dá)調(diào)控、并編碼重組抗體的DNA，優(yōu)選含有信號序列。該信號序列的具體實(shí)施方案如前述?？梢詮睦缰倔w中回收由上述方法制備的重組抗體?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員所知的方法從脂肪體回收重組抗體，例如，從幼蟲體內(nèi)分離脂肪體、并在用于蛋白提取的緩沖液中勻漿該脂肪體，或者誘導(dǎo)脂肪體中的蛋白分泌到體液中，然后分級體液。對通過本發(fā)明的方法所制備的抗體沒有特殊限制，只要是通過本發(fā)明的方法制備的即可，并且該抗體可以包含也可以不包含信號序列。更具體也包括不含有信號序列的抗體。本發(fā)明還涉及編碼重組抗體的DNA。本發(fā)明更優(yōu)選的是涉及編碼含有信號序列的重組抗體的DNA。更具體的說，本發(fā)明涉及編碼含有人酸性磷酸酉爭的scFv抗體的DNA。該DNA包括例如SEQIDNO:13或14所示的DNA。此外，還包括編碼下述蛋白的DNA:所述蛋白由在嚴(yán)緊條件下與含有SEQIDNO:13或14的堿基序列的DNA雜交的核酸編碼，并且具有與含有SEQIDNO:15的氨基酸序列的蛋白等同的功能。本發(fā)明進(jìn)一步涉及編碼抗體的DNA,所述抗體包含具有小鼠免疫球蛋白L鏈k信號序列的L鏈和具有小鼠IgGl信號序列的H鏈。包含小鼠免疫球蛋白L鏈k信號序列的L鏈的編碼DNA的例子是SEQIDNO:48的DNA。此外，還包括編碼下述蛋白的DNA，所述蛋白由在嚴(yán)緊條件下與含有SEQIDNO:48所示石成基序列的DNA雜交的核酸編碼，并且具有與含有SEQIDNO:48的氨基酸序列的蛋白等同的功能。包含小鼠IgGl信號序列的H鏈的編碼DNA的例子是SEQIDNO:50所示的DNA。此外，還包括編碼下述蛋白的DNA,所述蛋白由在嚴(yán)緊條件下與含有SEQIDNO:50所示的4^基序列的DNA雜交的核酸編碼，并且具有與含有SEQIDNO:50所示的氨基酸序列的蛋白等同的功能。本發(fā)明提供含有編碼重組抗體的DNA的載體以及轉(zhuǎn)化細(xì)胞。本發(fā)明也提供包含編碼具有信號序列的重組抗體的DNA的載體和轉(zhuǎn)化細(xì)胞。在本發(fā)明中所4吏用的載體包括例如，M13系列載體，pUC系列載體，pBR322，pBlucscript以及pCR-Script,但不局限于此。另外，在以cDNA的亞克隆和切出為目的的場合，除了以上的載體以外，還可以使用例如pGEM-T、pDIRECT，以及pT7等。當(dāng)使用載體來制備本發(fā)明的抗體時(shí)，表達(dá)載體是特別有用的。當(dāng)將例如JM109、DH5a,HB101或XL1-Blue等大腸桿菌作為宿主細(xì)胞時(shí)，除了上述用于大腸桿菌中擴(kuò)增的性質(zhì)以外，載體應(yīng)該具有例如lacZ啟動子(Ward"a/.(1989)Nature341:544-546;(1992)FASEBJ.6:2422-2427),araB啟動子(Better&a/.(1988)Science240:1041-1043)或者T7啟動子來保證目標(biāo)基因在大腸桿菌中的高效表達(dá)。其它載體的例子包括pGEX-5x-l(Pharmacia),"QIAexpresssystem"(QIAGEN),pEGFP以及pET。此外，載體優(yōu)選包含用于多肽分泌的信號序列。在使多肽產(chǎn)生到大腸桿菌的周質(zhì)中的場合，pelB信號序列(Lei，S.P."a/.J.Bacteriol.169:4379(1987))可以用作多肽分泌的信號序列。例如，可以使用氯化4丐法或者電穿孔法來將載體導(dǎo)入到宿主細(xì)胞中。除了大腸桿菌之外，來源于哺乳動物的表達(dá)載體(例如pCDNA3(Invitrogen),pEGF陽BOS(NucleicAcidsRes.(1990)18(17)，p.5322)，pEF,pCDM8)，來源于昆蟲細(xì)胞的表達(dá)載體(例如"Bac-to-BAC桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)"(GIBCO-BRL)，pBacPAK8),來源于植物的表達(dá)載體(例如pMHl，pMH2),來源于動物病毒的表達(dá)載體(例如pHSV，pMV,pAdexLcw),來源于逆轉(zhuǎn)錄病毒的表達(dá)載體(例如pZIPneo),來源于酵母的表達(dá)載體(例如"PichiaExpressionKit"(Invitrogen),pNVll,SP-Q01)以及來源于枯草桿菌的表達(dá)載體(例如pPL608，pKTH50)可以用作制備本發(fā)明的抗體的載體。為了在CHO,COS以及NIH3T3等哺乳動物細(xì)胞中表達(dá)，具有啟動子的載體對于在這樣的細(xì)胞中表達(dá)是必需的，這樣的啟動子例如SV40啟動子(MulliganWa/.(1979)Nature277:108),MMLV畫LTR啟動子，EFla啟動子(Mizushimae"/.(19卯)NucleicAcidsRes.18:5322)以及CMV啟動子。更優(yōu)選的是還具有用于篩選細(xì)胞轉(zhuǎn)化的基因(例如，可以利用諸如新霉素和G418等藥物進(jìn)行鑒定的抗藥基因)的載體。具有此類特性的載體的例子包括pMAM、pDR2、pBK-RSV、pBK-CMV、pOPRSV以及pOP13等?？梢允褂弥T如電穿孔法等本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法來將編碼重組抗體的DNA導(dǎo)入到細(xì)月包內(nèi)。此外，本發(fā)明涉及含有編碼重組抗體的DNA、并分泌該重組抗體的轉(zhuǎn)基因家蠶。更具體的說，本發(fā)明涉及將重組抗體分泌到絲腺中的轉(zhuǎn)基因家蠶，在該家蠶中含有編碼特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的DNA的啟動子以及編碼重組抗體的DNA,其中該編碼重組抗體的DNA的表達(dá)受該啟動子直接或間接調(diào)控?；蛘撸景l(fā)明提供包含下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶(i)一種I)NA，其中編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA可操作地連接到特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子的下游，和(ii)一種DNA，其中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到轉(zhuǎn)錄因子的目標(biāo)啟動子的下游；以及包含下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶，在所述DNA中編碼重組抗體的DNA可4喿作地連接到特異性地在絲腺中表達(dá)的蛋白的編碼DNA的啟動子下游。在本發(fā)明中，受絲腺特異性表達(dá)蛋白的編碼DNA的啟動子直接或間接表達(dá)調(diào)控的、編碼重組抗體的DNA,優(yōu)選含有用于4足進(jìn)抗體分泌、增加回收量的信號序列。信號序列的具體實(shí)施方案如前述。此外，本發(fā)明涉及下述轉(zhuǎn)基因家蠶其含有(i)編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子和(ii)受該啟動子直接或間接表達(dá)調(diào)控的、編碼重組抗體的DNA,并將重組抗體分泌到脂肪體中。更具體的說，本發(fā)明提供包含下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶(i)一種DNA,其中轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的編碼DNA可操作地連接到細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白的編碼DNA的啟動子的下游，和(ii)一種DNA,其中編碼重組抗體的DNA可操作地連接到轉(zhuǎn)錄因子的目標(biāo)啟動子的下游。或者提供包含下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶在該DNA中，編碼重組抗體的DNA可操作地連接到編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子的下游。在本發(fā)明中，受細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的編碼DNA的啟動子直接或間接表達(dá)調(diào)控的、編碼重組抗體的DNA,優(yōu)選含有用于促進(jìn)抗體分泌、增加回收量的信號序列。信號序列的具體實(shí)施方案如前述?？梢酝ㄟ^前述的方法來制備該轉(zhuǎn)基因家蠶。此外，對于本發(fā)明中的轉(zhuǎn)基因家蠶，沒有特殊限制，并且可以是例如卵的形式。可以使用本發(fā)明中的轉(zhuǎn)基因家蠶來生產(chǎn)大量的目的重組抗體。本發(fā)明還提供這樣的轉(zhuǎn)基因家蠶，其包含可操作地連接到轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游的、編碼重組抗體的DNA。轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和目標(biāo)啟動子的例子如前述?？梢允褂么祟惣倚Q來制備帶有上述(i)和(ii)的DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶，以及制備這些家蠶的卯。在本發(fā)明中，受絲腺特異性表達(dá)蛋白的編碼DNA的啟動子直接或間接表達(dá)調(diào)控的、編碼重組抗體的DNA，優(yōu)選含有用于促進(jìn)抗體分泌、增加回收量的信號序列。信號序列的具體實(shí)施方案如前述。此外，本發(fā)明提供由本發(fā)明的轉(zhuǎn)基因家蠶所織的繭?？梢詫⒋祟惱O作為含有大量的目標(biāo)重組抗體的繭使用。本發(fā)明還提供由含有重組抗體的繭所制備的蠶絲。可以利用已知的方法生產(chǎn)含有本發(fā)明的蠶絲的絲織物，例如含有重組抗體的絲織物。本發(fā)明還提供此類絲織物。本發(fā)明提供可用于本發(fā)明的方法的DNA。此類DNA包括(a)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的編碼DNA，該DNA可操作地連接到編碼絲膠蛋白或絲芯蛋白的DNA的啟動子的下游，(b)編碼重組抗體的DNA，該DNA可操作地連接到所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游，以及(c)編碼重組抗體的DNA可操作連接于絲膠蛋白或絲芯蛋白的編碼DNA的啟動子的下游的DNA等；并且還提供含有上述DNA的組合的試劑盒。本發(fā)明還提供這樣的載體，其中(a)-(c)所述的DNA被插入到轉(zhuǎn)座子的末端反向重復(fù)序列之間。此外，本發(fā)明提供含有該載體和含有轉(zhuǎn)座酶的編碼DNA的載體(輔助載體)的試劑盒?？刹僮鞯剡B接到轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子的下游的編碼重組抗體的DNA,和編碼重組抗體的DNA可操作連接于絲膠蛋白或絲芯蛋白的編碼DNA的啟動子的下游的DNA，優(yōu)選含有促進(jìn)抗體分泌、增加回收量的信號序列。該信號序列的具體例子如前述。此外，本發(fā)明涉及糖尿病性腎病的診斷試劑以及營養(yǎng)狀況評估試劑，其中含有利用本發(fā)明的抗體制備方法獲得的抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體作為有效成分。利用本發(fā)明的抗體制備方法獲得的重組抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體中既包括含有信號序列的抗體，也包括不含信號序列的抗體。當(dāng)使用信號序列時(shí)，優(yōu)選的例子如前述。本發(fā)明的抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體包括全長抗體和低分子量化抗體。全長抗體的具體例子包括具有如下所述的L^t連和H鏈的抗體，該L鏈具有SEQIDNO:3,21和29中任意一個(gè)所示的氨基酸序列作為信號序列，SEQIDNO:23所示的氨基酸序列作為L鏈可變區(qū)，SEQIDNO:25所示的氨基酸序列作為Jk片段，以及SEQIDNO:27的氨基酸序列作為k鏈恒定區(qū)；該H鏈具有SEQIDNO:3,21和29中任意一個(gè)所示的氨碁酸序列作為信號序列，SEQIDNO:31的氨基酸序列作為H鏈可變區(qū)，SEQIDNO:33的氨基酸序列作為CHI,SEQIDNO:35的氨基酸序列作為鉸鏈區(qū)，SEQIDNO:37的氨基酸序列作為CH2,以及SEQIDNO:38的氨基酸序列作為CH3。更具體的例子是包含這樣的L鏈和H鏈的抗體所述L鏈含有SEQIDNO:49所示的氨基酸序列，所述H鏈含有SEQIDNO:51所示的氨基酸序列。另一方面，低分子量化抗體的具體例子，如前文所述的，包括例如Fab，F(xiàn)ab，，F(xiàn)(ab，)2,Fv,scFv(單鏈Fv),雙抗體以及sc(Fv)2(單鏈(Fv)2)。本發(fā)明中特別優(yōu)選的低分子量化抗體是scFv抗體。在scFv抗體中，優(yōu)選的是以單鏈多肽的N端為基準(zhǔn)點(diǎn)，按照信號序列、VL、接頭以及VH這樣的順序排列。VL、接頭以及VH的具體實(shí)施方案分別在SEQIDNO:6、9和12中顯示。因此，在本發(fā)明中，抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體優(yōu)選下述scFv抗體，該抗體包括SEQIDNO:15的氨基酸序列，且具有人酸性磷酸酶信號序列。此外，本發(fā)明涉及測定從受試者獲得的生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白的量的方法。轉(zhuǎn)鐵蛋白是一種存在于血，尿等樣品中的分子量為79,000的蛋白，并且該蛋白是鐵代謝和造血作用的重要指示物?；铙w中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量可反映消化器官，腎等器官的疾病，還可反映腫瘤的病理生理學(xué)狀態(tài)，發(fā)炎等現(xiàn)象；因此,通過測定轉(zhuǎn)鐵蛋白的量可以診斷這些疾病。本發(fā)明的測定生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白量的方法中，首先，從需要測定轉(zhuǎn)鐵蛋白的量的受試者獲得生物樣品。然后，使該生物樣品接觸本發(fā)明的抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體。對用于本發(fā)明測定方法的生物樣品沒有特殊限制，例如包括血(血清)和尿。本發(fā)明的測定方法中的抗體的優(yōu)選實(shí)施方案如前述。在本發(fā)明的測定方法中，接下來，測定抗體與生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合?？贵w與轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的方法來測定，這些方法包括但不局限于ELISA和EIA。本發(fā)明的檢測方法是通過測定抗體與樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合來測定生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量。即，如果完全檢測不到抗體與轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合，即可判斷在生物樣品中沒有轉(zhuǎn)鐵蛋白相反地，如果能夠檢測到抗體與轉(zhuǎn)鐵蛋白的結(jié)合，即可判斷在生物樣品中有轉(zhuǎn)鐵蛋白的存在。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以依照所測定轉(zhuǎn)鐵蛋白與抗體的結(jié)合程度來確定生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量。因此，在本發(fā)明中對于轉(zhuǎn)鐵蛋白的量的測定不僅包括確定在生物樣品是否有轉(zhuǎn)鐵蛋白的存在，還包括依照結(jié)合的程度來對生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白進(jìn)行定量。本發(fā)明進(jìn)一步涉及診斷糖尿病性腎病的方法。在本發(fā)明的診斷方法中，首先按照上述測定轉(zhuǎn)鐵蛋白的量的方法所述的方法來測定生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量。此后，將測定的轉(zhuǎn)鐵蛋白的量與從知道沒有患糖尿病性腎病的受試者所獲得的生物樣品進(jìn)行比較。當(dāng)測定的轉(zhuǎn)鐵蛋白的量比正常對照的量大時(shí)，提供該生物樣品的受試者被判斷為已患病或者在未來有更高的患糖尿病性腎病的風(fēng)險(xiǎn)。在本發(fā)明的診斷糖尿病性腎病的方法中，將測定的轉(zhuǎn)鐵蛋白的量與從已知患糖尿病性腎病的受試者所獲得的生物樣品進(jìn)行比較。作為比較的結(jié)果，如果轉(zhuǎn)鐵蛋白的量與從已知患有糖尿病神經(jīng)病的受試者所獲得的生物樣品的程度等同，則提供該生物樣品的受試者被判斷為已患糖尿病性腎病。術(shù)語"程度等同，，不僅包括轉(zhuǎn)鐵蛋白的量完全相等的情況，還包括實(shí)質(zhì)上相等的情況。量是否實(shí)質(zhì)上相等可由本領(lǐng)域技術(shù)人員按照受試者的病情及其它特征來進(jìn)行適當(dāng)?shù)呐袛唷Ｃ枋鲇糜诖祟惻袛嗟臉?biāo)準(zhǔn)的參考文獻(xiàn)的例子包括Yamaguchi，T.:NipponRinsho,53(supplementaryissue),227-229(1995');Ando,Y:HorumontoRinsho(ClinicalEndocrinology),42(6),91-95(1994);Ko訓(xùn)，M:IgakutoYakugaku,32(3)，555-565(1994);Ishibashi,F.:Tonyobyo(Diabetes)35(12),949-954(1992);Aoki,Y.:RinshoYakuriReview(ReviewsinClinicalPharmacology)specialissueNo,127，12-16,(2003，10);Sakurabayashi，I.andYamada，T.:Gekkan(Monthly)MedicalTechnology,Supplement,RinshoKensakoJiten(DictionaryofClinicalExaminationItems),(2003);andHigashi,T.andGoto,H.:MedicalTechnology,Vol.30，906-911，No,8(2002.8).本發(fā)明的用于檢測糖尿病性腎病的方法可以單獨(dú)使用，或者作為輔助方法與其它的各種診斷糖尿病性腎病的方法聯(lián)合使用。將此類方法與其它的各種診斷糖尿病性腎病的方法聯(lián)合使用使得對于糖尿病性腎病的診斷更加準(zhǔn)確和有效。因此，優(yōu)選將利用本發(fā)明的檢測糖尿病性腎病的方法所獲得的認(rèn)識與各種對于糖尿病性腎病患者的特征性臨床認(rèn)識加以綜合利用。本發(fā)明還涉及評估受試者的營養(yǎng)狀態(tài)的方法。在本發(fā)明的評估營養(yǎng)狀態(tài)的方法中，當(dāng)轉(zhuǎn)鐵蛋白的量比正常對照的量少的時(shí)候，受試者被判斷為具有高的營養(yǎng)不良風(fēng)險(xiǎn)或者患有營養(yǎng)不良。在本發(fā)明中，轉(zhuǎn)鐵蛋白的量下降的程度越顯著，則判斷受試者患營養(yǎng)不良的風(fēng)險(xiǎn)越高，或者所患的營養(yǎng)不良越嚴(yán)重。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以從轉(zhuǎn)鐵蛋白量的下降程度上來判斷受試者患營養(yǎng)不良的風(fēng)險(xiǎn)或者營養(yǎng)不良的程度。例如，當(dāng)受試者的轉(zhuǎn)鐵蛋白完全檢測不到或者實(shí)質(zhì)上檢測不到時(shí)，受試者被判斷為患有嚴(yán)重的營養(yǎng)不良。在本發(fā)明的評估營養(yǎng)狀態(tài)的方法中，首先測定生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量。此后，將測定的轉(zhuǎn)鐵蛋白的量與正常對照進(jìn)行比較。對生物樣品中轉(zhuǎn)鐵蛋白的量的測定可以按照上述方法進(jìn)行。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以按照上述的通常使用的標(biāo)準(zhǔn)來判斷受試者具有患營養(yǎng)不良的風(fēng)險(xiǎn)是否高，或者是否已經(jīng)患有營養(yǎng)不良。本發(fā)明的評估營養(yǎng)狀態(tài)的方法可以與臨床診察、體檢、飲食調(diào)查等檢查方法聯(lián)合使用來全面地評估和判斷個(gè)人或者特殊人群的營養(yǎng)狀況(nutritionassessment("RinshoEiyo(ClinicalNutrition)"extraedition,volume99，No.5,"JissenEiyoAssessment(PracticalNutritionAssessment)")。在本發(fā)明的評估營養(yǎng)狀態(tài)的方法中，受試者可以是任意個(gè)體或者任意群體。通過實(shí)施本發(fā)明的評估營養(yǎng)狀態(tài)的方法，可以測定個(gè)體或者群體的營養(yǎng)狀態(tài)。如上所述，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以通過測定的結(jié)果來確定受試者營養(yǎng)不良的有無或者程度。在本發(fā)明中，術(shù)語"營養(yǎng)不良"是指特定的或多種營養(yǎng)成分不足或過剩的狀態(tài)，或者營養(yǎng)成分的相互平衡被擾亂的狀態(tài)。作為本發(fā)明評估營養(yǎng)狀態(tài)的方法的一個(gè)實(shí)施方案，例如，本發(fā)明評估營養(yǎng)狀態(tài)的方法可以用于已住院的受試者。例如，當(dāng)受試者住院時(shí)所采的樣品的轉(zhuǎn)鐵蛋白測定值低于該受試者在正常健康狀態(tài)下的值(如果存在一定范圍的波動應(yīng)加以考慮)的時(shí)候，該受試者可以被確診為有高的患營養(yǎng)不良的風(fēng)險(xiǎn)或者患有營養(yǎng)不良。通過本發(fā)明的生產(chǎn)方法所生產(chǎn)的抗體，在重組抗體提取物中除了目標(biāo)抗體以外，不可能含有其它抗體。因此，發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性低，并且可以精確地測定僅與目標(biāo)抗原反應(yīng)的抗體。這樣，在本發(fā)明的生物樣品中的轉(zhuǎn)鐵蛋白量測定方法、糖尿病性腎病診斷方法和營養(yǎng)狀態(tài)評估方法中，可以正確地測定轉(zhuǎn)鐵蛋白的量。實(shí)施例以下，參考實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行更具體的說明，但是本發(fā)明不受這些實(shí)施例的限制。[實(shí)施例1]材料與方法1.質(zhì)粒載體的構(gòu)建在本研究中，構(gòu)建了pUASFvaTf(圖l)質(zhì)粒載體，用來通過轉(zhuǎn)基因家蠶生產(chǎn)scFv型抗體，該抗體是可與人轉(zhuǎn)鐵蛋白反應(yīng)的小鼠抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體(scFv型抗-轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體在下文中記作aTf)。用于生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因家蠶的該載體是通過在piggyBac轉(zhuǎn)座子反向末端重復(fù)序列之間插入融合了UAS啟動子的抗體蛋白基因FvaTf來構(gòu)建的，UAS啟動子在酵母轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子GAL4存在的情況下促進(jìn)基因表達(dá)。scFv型抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體是按照下述方法設(shè)計(jì)的。設(shè)計(jì)具有按照以下結(jié)構(gòu)的DNA:抗體H鏈可變區(qū)(VH)、柔性4妄頭肽(Linker)以及抗體L鏈可變區(qū)(VL)依次連接于人酸性磷酸酶分泌信號序列的下游。對于VH-接頭-VL的氨基酸序列，包括各基因之間的連接序列(connection),均使用已知的序列。本實(shí)驗(yàn)中所使用的scFv型抗體基因的堿基序歹ij(密碼子轉(zhuǎn)換之前和之后)和由該堿基序列產(chǎn)生的氨基酸序列，及它們與SEQIDNO的關(guān)系示于表2。將基因密碼子轉(zhuǎn)換成了適合于在昆蟲中表達(dá)的密碼子(pUC57/FvaTf)。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table>按照圖1所示程序構(gòu)建了GAL4/UAS系統(tǒng)中的基因質(zhì)粒。更詳細(xì)地說，利用限制性內(nèi)切酶SpeI消化pUC57/FvaTf獲得FvaTf片段，然后將其插入到經(jīng)限制性內(nèi)切酶BinI消化的供體載體pBluescriptII/UAS-SV40中(pBluescriptII/UAS-FvaTf-SV40UTR)。為了在目標(biāo)部位表達(dá)該基因，使用了已經(jīng)抹系化的SerlGAL4/3XP3DsRed抹系的家蠶(Tamura等，2004)。已經(jīng)確認(rèn)在該轉(zhuǎn)基因家蠶中GAL4基因僅在中絲腺表達(dá)，并且導(dǎo)入基因的表達(dá)由UAS調(diào)控(Tamura等，2004)。為了表達(dá)導(dǎo)入的抗體基因，將獲得的具有抗體基因的UASFva丁f抹系與上述的GAL4抹系進(jìn)行了交配(圖2)。該質(zhì)粒攜帶綠色熒光蛋白基因3XP3GFP作為用于鑒定轉(zhuǎn)基因家蠶的標(biāo)志基因，該綠色熒光蛋白基因具有能夠促進(jìn)在胚胎單眼、蛾類復(fù)眼以及神經(jīng)來源組織中表達(dá)的啟動子(Horn，C.,andE.A.Wimmer,(2000)Dev.GenesEvol.210:630-637;Murizio&a/.(1994)ProteinScience,3:1476-1484)。2.Western印跡Western印跡是按照下述方法進(jìn)行的。將SerlGAL4/3XP3DsRed林系與UASFvaTr抹系進(jìn)行交配獲得了下一代的卵，產(chǎn)卵之后6天在熒光立體顯微鏡下觀察所產(chǎn)的卵來鑒定GAL4/UAS個(gè)體(圖3)。僅飼養(yǎng)兼有兩種基因的個(gè)體，在5齡蠶吐絲的第0天、5齡蠶吐絲的第1天以及5齡蠶吐絲的第2天分離家蠶的絲腺；利用2%的十二烷基石克酸鋰、5mMEDTA以及50mMTris-HCl(pH7.4)從細(xì)胞層中提取了蛋白。相似地，作為陰性對照，在不攜帶UASFvaTf的SerlGAL4抹系的5齡蠶吐絲的第0天分離絲腺并提取了蛋白。向兩倍體積的提取樣品中加入一倍體積的SDS樣品緩沖液(6。/。SDS、24%甘油、12%2-巰基乙醇以及0.1%BPB)，用SuperSep5-20%(WakoPureChemicalIndustries)進(jìn)行SDS-PAGE,然后按照下述方法進(jìn)行Western印跡實(shí)驗(yàn)。在完成SDS-PAGE之后，以0.8mA/cm2的電流進(jìn)行1小時(shí)的轉(zhuǎn)膜，將蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜(Millipore)上，然后利用BlockAce(DainipponPharmaceutical)進(jìn)行封閉。用PBS-T(0.05%Tween、150mMNaCl、10mM磷酸緩沖液、pH7.4)洗膜，然后把膜放置在用BlcokAce稀釋100倍的HRP標(biāo)記兔抗小鼠Ig抗體(AmershamBiosciences)的溶液中，在室溫下振蕩6小時(shí)。在HRP標(biāo)記的兔抗小鼠Ig抗體反應(yīng)之后，進(jìn)行與上述相同的清洗操作，并且利用PODImmunostainSet(WakoPureChemicalIndustries)進(jìn)4亍才全測。3.RT-PCRRT-PCR是按照下述方法進(jìn)行的。如前述，飼養(yǎng)同時(shí)具有GAL4/UAS兩種基因的個(gè)體，并且在5齡蠶吐絲的第0天、5齡蠶吐絲的第1天以及5齡蠶吐絲的第2天分離了家蠶的中絲腺。相似地，作為陰性對照，對于不攜帶UASFvaTf的SerlGAL4抹系，同樣在5齡蠶吐絲的第0天分離了絲腺。此后，將分離的中絲腺轉(zhuǎn)移到玻璃勻漿器(WHEATON)中，并且利用ISOGEN(NipponGene)提取總RNA。利用DPEC水將總RNA調(diào)整到50嗎/20然后利用First-strandcDNASynthesisKit(AmershamBiosciences)4安照所附文"f牛的說明將該RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。利用該反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物作為^^莫板，按照下述方法進(jìn)行PCR。取KODplus(TOYOBO)附帶的10xPCR緩沖液5|il、150的引物(SEQIDNO:16)、150|iM的引物(SEQIDNO:17)、ImMMgS04、0.2mMdNTP以及2單位的KODplus混合，并且將總體積調(diào)整到50fil。利用Eppendorf公司的DNA熱循環(huán)儀進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)條件為一個(gè)循環(huán)的94。C2分鐘，35個(gè)循環(huán)的94°C15秒，62°C15秒和72。C30秒，再進(jìn)行一個(gè)循環(huán)72。Cl分鐘的延伸反應(yīng)。以pUASFvaTf質(zhì)粒載體作為PCR反應(yīng)的陽性對照模板。4.重組抗體活性的測定按照下述程序通過酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)測定了重組抗體對抗原的活性。在5齡蠶吐絲的第0天分離了SerlGAL4/UASFvaTf抹系以及不攜帶UASFvaTf的SerlGAL4抹系的家蠶的中絲腺，并且向每200mg的分離的組織中加入1mlTris緩沖液(20mMTris-HCl,pH7.4)。將該混合物利用玻璃勻漿器進(jìn)行粉碎，并且14,000rpm離心20分鐘，然后用Tris緩沖液將上清分別稀釋5倍(40mg/ml)和10倍(10mg/ml)。將這些樣品以及未稀釋的樣品(初始濃度200mg/ml)用作ELISA測定的樣品。此外，使用相似的操作制備了SerlGAL4抹系家蠶的樣品作為ELISA測定的陰性對照。將這樣制備的100|ulELISA樣品分加到用100昭/孔的轉(zhuǎn)鐵蛋白(Biogenesis)預(yù)先致敏的微孔板中(NUNC)，并且將微孔板在室溫下振蕩2小時(shí)。此后，將ELISA測定用樣品從孔中移出，然后以200(ilPBS-T洗孔3次。向每個(gè)孔中分別加入100(il預(yù)先用PBS(150mMNaCl,10mM磷酸緩沖液，pH7.4)稀釋100倍的HRP標(biāo)記兔抗小鼠Ig抗體，然后將微孔板在室溫下振蕩六小時(shí)。接著，清洗微孔板，并加入100^1的3,3，,5,5，-四甲基聯(lián)苯胺(RocheJapan)使其顯色。在加入3,3，,5,5，-四曱基聯(lián)苯胺之后準(zhǔn)確計(jì)時(shí)3分鐘，然后分別加入100pl的1N硫酸來終止顯色反應(yīng)。顯色終止后，利用550型酶標(biāo)儀(BioRad)測量了450nm處的吸光度。結(jié)果與討論在家蠶卵發(fā)育的早期，將按照前述方法構(gòu)建的質(zhì)粒與編碼轉(zhuǎn)移酶基因的輔助質(zhì)粒pA3PIG(Tamura^a/.，2000)共同注射到大約1000枚家蠶卵中，檢測了在下一代胚胎單眼中的GFP表達(dá)。結(jié)果如表3所示，在2窩蛾中發(fā)現(xiàn)了表達(dá)GFP的個(gè)體。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>飼養(yǎng)這些轉(zhuǎn)基因家蠶的結(jié)果是僅成功地建立了一個(gè)抹系。將獲得的UASFvaTf/3XP3GFP抹系與SerlGAL4/3XP3DsRed林系進(jìn)行交配，在下一代中具有每種熒光蛋白基因的個(gè)體的分離比如表4所示。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>因此可知兩種基因是分別插入到不同染色體中并獨(dú)立遺傳的。在此情況下，可以很容易地鑒定兼具3XP3GFP和3XP3DsReD兩種基因或僅具有其中一種基因的轉(zhuǎn)基因家蠶，這是因?yàn)槿鐖D3所示，在熒光立體顯微鏡下觀察處于胚胎期的家蠶時(shí)，可以觀察到單眼或神經(jīng)來源組織所顯示的熒光。此后，將如此獲得的帶有3XP3GFP和3XP3DsRed兩種基因的個(gè)體作為兼具UASFvTr和SerlGAL4兩種基因的個(gè)體來飼養(yǎng)，并且用從吐絲期幼蟲中絲腺中提取的樣品進(jìn)行Western印跡實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如圖5所示，確認(rèn)了在絲腺中有抗體產(chǎn)生。此外，如圖6所示，在對利用相同的方法獲得的提取物進(jìn)行抗體反應(yīng)時(shí)，當(dāng)絲腺提取物的量增加時(shí)，與抗原反應(yīng)的物質(zhì)的量也增加，由此可知該提取物具有抗體活性。與Western印跡相似，從吐絲期的中絲腺中提取總RNA,進(jìn)行了RT-PCR反應(yīng)。結(jié)果如圖4所示，可知導(dǎo)入的基因的轉(zhuǎn)錄在5齡的第五天達(dá)到最大，并且隨時(shí)間推移而受到抑制。因此可知基因轉(zhuǎn)錄在5齡的第五天變得活躍，而蛋白在吐絲期被翻譯并存在于中絲腺中。[實(shí)施例2]材料與方法l.質(zhì)粒載體的構(gòu)建在本研究中，構(gòu)建了pBacN/loxpUASIgLUASIgH(圖7到9)質(zhì)粒載體，用于在轉(zhuǎn)基因家蠶中生產(chǎn)與人轉(zhuǎn)鐵蛋白反應(yīng)的小鼠抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白IgG抗體。這種用于生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因家蠶的載體是通過在piggyBac轉(zhuǎn)座子反向末端重復(fù)序列之間插入融合了UAS啟動子的該抗體蛋白的L鏈和H鏈基因來構(gòu)建的，該UAS啟動子在酵母轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子GAL4存在下促進(jìn)基因的表達(dá)。IgG型小鼠抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體的L鏈?zhǔn)前凑障率龇椒ㄔO(shè)計(jì)的。首先，為抗體L鏈的設(shè)計(jì)具有以下結(jié)構(gòu)(IgL)的DNA:在小鼠免疫球蛋白L鏈k信號肽的下游依次連接抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體Lk鏈可變區(qū)、小鼠L鏈J片段、和小鼠Lk鏈恒定區(qū)。然后為IgG型小鼠抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體H鏈設(shè)計(jì)具有以下結(jié)構(gòu)(IgH)的DNA:在小鼠IgGl的信號肽的下游依次連接抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體H鏈可變區(qū)、小鼠IgGl的H鏈恒定區(qū)1(CH1)、小鼠IgGl鉸鏈區(qū)、小鼠IgGl的H鏈恒定區(qū)2(CH2)以及小鼠IgGl的H鏈恒定區(qū)3(CH3)。在本實(shí)驗(yàn)中所設(shè)計(jì)的IgG抗體的亞類是IgGl，并且具有k鏈的抗原性，同時(shí)作為L鏈和H鏈連接的均是已知的氨基酸序列。本實(shí)驗(yàn)中所使用的基因的堿基序列和由該堿基序列產(chǎn)生的氨基酸序列，及它們與SEQIDNO的關(guān)系示于表5。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table>2.質(zhì)粒載體的構(gòu)建按照圖7到9所示的規(guī)程，構(gòu)建了GAL4/UAS系統(tǒng)中的基因質(zhì)粒。更詳細(xì)地說，利用限制性內(nèi)切酶NheI消化pUC57/IgL獲得IgL片段，并且將其插入到已由限制性內(nèi)切酶BlnI消化的供體載體pBluescriptII/UAS-SV40中，從而獲得了pBluescriptII/UASIgLSV40。然后，利用限制性內(nèi)切酶SpeI酶切pBluescriptII/UASIgLSV40獲得UASIgLSV40UTR片段，將其插入到已由限制性內(nèi)切酶BinI酶切的供體載體pBacN/loxp中，乂人而獲得了pBacN/loxpUASIgLSV40(圖7)。利用限制性內(nèi)切酶NheI酶切pUC57/IgH獲得IgH片段，將其插入到已由限制性內(nèi)切酶BinI酶切的供體載體pDNR/UAS-SV40中，從而獲得了pDNR/UASIgHSV40(圖8)。此后，利用Cre重組酶將UASIgHSV40UTR片4殳插入到pBacN/loxpUASIgLSV40中(圖9:pBacN/loxpUASIgLUASIgH)。3.重組蛋白表達(dá)抹系的確立為了在目標(biāo)部位表達(dá)該基因，使用了已經(jīng)確立的SerlGAL4/3XP3DsRed抹系的家蠶(Tamura，efa/.,2004)。已經(jīng)確認(rèn)了在該轉(zhuǎn)基因家蠶中，僅在中絲腺表達(dá)GAL4基因，并且導(dǎo)入基因的表達(dá)受UAS調(diào)控(Tamura，"a/.,2004)。為了表達(dá)導(dǎo)入的IgG型抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體，將獲得的具有IgG型抗人轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體基因的UASIgL-UASIgH抹系與上述的GAL4抹系進(jìn)行了交配(圖10)。該質(zhì)粒攜帶綠色熒光蛋白3xP3GFP作為用于鑒定轉(zhuǎn)基因家蠶的標(biāo)志基因，該綠色熒光蛋白具有能夠促進(jìn)在胚胎單眼、蛾復(fù)眼以及神經(jīng)來源組織中表達(dá)的啟動子(Horn，C.,andE.A.Wimmer，(2000)Dev.GenesEvol.210:630-637;Murizio"a/.(1994)ProteinScience3:1476-1484)。4.RT-PCRRT-PCR是按照下述方法進(jìn)行的。如前述，詞養(yǎng)同時(shí)具有GAL4/UAS兩種基因的個(gè)體，并且從即將到5齡吐絲期的家蠶分離中絲腺。然后，將分離的中絲腺轉(zhuǎn)移到玻璃勻漿器(WHEATON)中，并且利用ISOGEN(NipponGene)提取總RNA。利用DEPEC水將總RNA的濃度調(diào)整到50昭/20(il,然后矛J用First-strandcDNASynthesisKit(GE-HealthcareBio-sciences)4姿照所附文件的說明將該RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA。以下描述的PCR反應(yīng)是利用表6中所示的引物組合、以上述反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行的，其目的是擴(kuò)增IgL、IgH、GAL4以及細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白。添加TaKaRaExT叫HotStartVersion(TaKaRaBio)附帶的10xPCR緩沖液5^1、lOO^iM正向引物(表6),100|iM反向引物(表6)、0.2(iM的dNTP、以及2.5單位的TaKaRaExTaqHotStartVersion,將總體積調(diào)整到50利用eppendorf公司的DNA熱循環(huán)儀進(jìn)行PCR反應(yīng)，反應(yīng)條件為一個(gè)循環(huán)的94。C2分鐘，40個(gè)循環(huán)的94。C15秒，60°C15秒，72°C30秒，再進(jìn)行72°C1分鐘的延伸反應(yīng)。表6<table>tableseeoriginaldocumentpage60</column></row><table>5.IgGl抗體的檢測按照下述方法檢測IgG型小鼠抗體。通過將SerlGAL4/3xP3DsRed抹系與UASIgL-UASIgH抹系交配獲得下一代的卵，在產(chǎn)卵后第6天，利用熒光立體顯微鏡對卵進(jìn)行觀察，鑒定GAL4/UAS個(gè)體(圖11)。僅伺養(yǎng)兼具兩種基因的個(gè)體，分離5齡吐絲期蠶的絲腺，用20mMTris-HClpH7.4(Tris緩沖液)4是取絲月泉中的蛋白。利用MouseMonoclonalAntibodyIsotypingKit(GEHealthcareBio-Sciences)來4全測該蛋白溶液中的抗體。更具體地i兌，將分型棒(typingstick)浸入從家蠶絲腺中提取的蛋白溶液中，在室溫下振蕩18個(gè)小時(shí)。然后在按照說明書的清洗規(guī)程清洗，再加入過氧化物酶標(biāo)記的抗小鼠抗體，在室溫下振蕩六小時(shí)。然后進(jìn)行清洗操作，然后將棒浸入底物溶液中來確定條帶。6.測定重組抗體與抗原的反應(yīng)性抗原的活性。從SerlGAL4/UASIgL-UASIgH抹系以及不攜帶UASIgL-UASIgH的SerlGAL4抹系的吐絲期家蠶分離中絲腺，并且加入3mlTris緩沖液。將該混合物利用玻璃勻漿器進(jìn)行粉碎，并且用12，000rpm離心20分鐘，然后將上清作為中絲腺提取樣品的儲備液。將該儲備液用Tris緩沖液分別稀釋2倍和4倍。將這些樣品以及未稀釋的樣品(儲備液)用作ELISA測定的樣品。此外，通過類似的程序?qū)erlGAL4抹系家蠶制備ELISA測定樣品作為陰性對照。利用Bradford法(QuickStart蛋白測定染色液BIO-RAD)對Ser1GAL4/UASIgL-UASIgH抹系和Ser1GAL4株系儲備液樣品中的蛋白進(jìn)行定量(表7)。將如上述制備的ELISA樣品100pl分別加到用1嗎/孔轉(zhuǎn)鐵蛋白(Biogenesis)預(yù)先致敏的微孔板(NUNC)中，并且將微孔板在室溫下振蕩3小時(shí)。然后，A/v孔中棄去ELISA測定用樣品，然后以200filPBS-T洗滌孔3次。再分別加入100|_il過氧化物酶標(biāo)記山羊抗小鼠Ig多克隆抗體(Dako)，將微孔板在室溫下振蕩4小時(shí)。然后用200[ilPBS-T洗滌孔5次。加入3,3，,5,5，-四曱基聯(lián)苯胺(RocheJapan)使其顯色。加入3,3，，5,5，-四曱基聯(lián)苯胺準(zhǔn)確計(jì)時(shí)4分鐘后，分別加入100pi1N疏酸來終止顯色反應(yīng)。此后，利用550型酶標(biāo)儀(BioRad)測量450nm處的吸光度。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>將按照前述方法構(gòu)建的質(zhì)粒與編碼轉(zhuǎn)移酶基因的輔助質(zhì)粒pA3PIG(Tamura&a/.,2000)共同注射到大約700枚發(fā)育早期的家蠶卵中，檢測了在下一代胚胎單眼中的GFP表達(dá)。結(jié)果如表8所示，在7窩蛾卵中發(fā)現(xiàn)了表達(dá)GFP的個(gè)體。表8<table>tableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table>飼養(yǎng)這些轉(zhuǎn)基因家蠶的結(jié)果是成功地建立了三個(gè)抹系。此外，將建立的UASIgL-IgH抹系中的一個(gè)與SerlGAL4抹系進(jìn)行交配，在下一代中具有每種熒光蛋白基因的個(gè)體的分離比如表9中所示。表9<table>tableseeoriginaldocumentpage62</column></row><table>此可知兩種基因是分別插入到不同染色體中并獨(dú)立遺傳的。在此情況下，可以很容易地鑒定兼具3XP3GFP和3XP3DsRed兩種基因或僅具有其中一種基因的轉(zhuǎn)基因家蠶，這是因?yàn)槿鐖Dll所示，在熒光立體顯微鏡下觀察處于胚胎期的家蠶時(shí)，可以觀察到單眼或神經(jīng)來源組織所顯示的萸光。然后，將如此獲得的帶有3XP3GFP和3XP3DsRed兩種基因的個(gè)體作為兼具UASIgLUASIgH和SerlGAL4兩種基因的個(gè)體來飼養(yǎng)，并且利用MouseMonoclonalAntibodyIsotypingKit確認(rèn)從吐絲期幼蟲中絲腺中提取的樣品中是否含有IgGl型抗體。結(jié)果如圖13所示，可知在絲腺中產(chǎn)生了具有K鏈的小鼠IgGl型抗體。此外，當(dāng)使同樣從絲腺中提取的樣品與抗原反應(yīng)時(shí)，如圖14所示，轉(zhuǎn)基因家蠶產(chǎn)生的重組蛋白發(fā)揮了抗體的作用。與檢測IgGl型抗體的方法相似地，從中絲腺中提取了總RNA并進(jìn)行了RT-PCR反應(yīng)。結(jié)果如圖12所示，可知抗體L鏈和H鏈的基因均發(fā)生了轉(zhuǎn)錄。工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明提供了用家蠶生產(chǎn)重組抗體的方法。昆蟲并不具有抗體分子。因此，利用家蠶生產(chǎn)重組抗體的優(yōu)勢在于例如，在重組抗體提取物中除了所需的抗體以外，不會有其它的抗體。這意味著，與如小鼠等哺乳動物不同，不需要制備敲除個(gè)體。當(dāng)利用哺乳動物來源的培養(yǎng)細(xì)胞等時(shí)，哺乳動物細(xì)胞來源的抗體可能會包含在所生產(chǎn)的重組抗體的純化產(chǎn)物中。這會導(dǎo)致交叉反應(yīng)，并且干擾對抗原量的準(zhǔn)確測定。當(dāng)利用家蠶來源的重組抗體時(shí)，發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性小，并且可以僅針對與目標(biāo)抗原反應(yīng)的抗體進(jìn)行準(zhǔn)確測定。此外，利用家蠶可以大量生產(chǎn)抗體。本發(fā)明在需要大量高特異性的抗體的醫(yī)藥和診斷試劑領(lǐng)域很有價(jià)值。權(quán)利要求1.一種制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b)(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，所述轉(zhuǎn)基因家蠶中導(dǎo)入了編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA；(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體。2.—種制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子，以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA并且將重組抗體分泌至絲腺；和(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。3.權(quán)利要求2的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子之下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA，其可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。4.權(quán)利要求2的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子之下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可搡作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。5.權(quán)利要求3或4的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。6.權(quán)利要求25任一項(xiàng)的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。7.權(quán)利要求6的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。8.權(quán)利要求6的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。9.一種帶有信號序列的重組抗體。10.權(quán)利要求9的抗體，該抗體為完整抗體或低分子量抗體。11.編碼權(quán)利要求9或10的抗體的DNA。12.具有權(quán)利要求11的DNA的載體。13.攜帶權(quán)利要求12的載體的細(xì)胞。14.一種制備轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，所述轉(zhuǎn)基因家蠶分泌帶有信號序列的重組抗體，該方法包括制備包含編碼所述重組抗體的DNA的家蠶卵的步驟。15.—種制備將重組抗體分泌至絲腺中的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備家蠶卵的步驟，所述家蠶卵具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子，以及編碼帶有信號序列的重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。16.權(quán)利要求15的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子之下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA，其可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。17.權(quán)利要求15的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制得的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子之下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。18.權(quán)利要求16或17的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。19.權(quán)利要求1518任一項(xiàng)的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。20.權(quán)利要求19的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白l蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。21.權(quán)利要求19的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。22.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA并且分泌該重組抗體。23.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子，以及編碼帶有信號序列的重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA，并且將所述重組抗體分泌至絲腺中。24.權(quán)利要求23的轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA，其可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子之下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,其可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。25.權(quán)利要求23的轉(zhuǎn)基因家蠶，其是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子的下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子下游。26.權(quán)利要求24或25的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。27.權(quán)利要求2326任一項(xiàng)的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。28.權(quán)利要求27的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。29.權(quán)利要求27的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。30.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。31.權(quán)利要求30的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。32.—種制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶的步驟，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子，以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA并且將重組抗體分泌至脂肪體中；和(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體的步驟。33.權(quán)利要求32的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子之下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,其可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。34.權(quán)利要求32的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制得的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可搡作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子之下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。35.權(quán)利要求33或34的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。36.—種制備將重組抗體分泌至脂肪體中的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備家蠶卵的步驟所述家蠶卵具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子、以及編碼帶有信號序列的重組抗體，并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。37.權(quán)利要求36的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子之下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA，所述DNA可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。38.權(quán)利要求36的方法，其中，所述轉(zhuǎn)基因家蠶是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子之下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。39.權(quán)利要求37或38的方法，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4,所述目標(biāo)啟動子為UAS。40.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子、以及編碼帶有信號序列的重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA,并且將所述重組抗體分泌至脂肪體中。41.權(quán)利要求40的轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有以下(i)和(ii)所述的DNA:(i)編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的DNA,其可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子之下游；(ii)編碼帶有信號序列的重組抗體的DNA,其可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。42.權(quán)利要求40的轉(zhuǎn)基因家蠶，其是通過使以下(i)和(ii)所述的轉(zhuǎn)基因家蠶交配而制備的(i)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，并可操作地連接于編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子之下游；(ii)具有下述DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶所述DNA編碼帶有信號序列的重組抗體，并可操作地連接于所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。43.權(quán)利要求41或42的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子為GAL4，所述目標(biāo)啟動子為UAS。44.一種制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備導(dǎo)入了編碼重組抗體的DNA的轉(zhuǎn)基因家蠶；(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體。45.—種制備重組抗體的方法，該方法包括下述步驟(a)和(b):(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA并且將重組抗體分泌至絲腺中；和(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體。46.權(quán)利要求45的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。47.權(quán)利要求46的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。48.權(quán)利要求46的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。49.一種制備分泌重組抗體的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備具有編碼重組抗體的DNA的家蠶卵的步驟。50.—種制備將重組抗體分泌至絲腺中的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備家蠶卵的步驟，所述家蠶卵具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子，以及編碼重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。51.權(quán)利要求50的方法，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。52.權(quán)利要求51的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。53.權(quán)利要求51的方法，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。54.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼重組抗體的DNA，并分泌所述重組抗體。55.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA,并且將所述重組抗體分泌至絲腺中。56.權(quán)利要求55的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述絲腺為中絲腺或后絲腺。57.權(quán)利要求56的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲膠蛋白1蛋白質(zhì)或絲膠蛋白2蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。58.權(quán)利要求56的轉(zhuǎn)基因家蠶，其中，所述編碼絲腺特異性表達(dá)蛋白的DNA的啟動子是編碼絲心蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子。59.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼重組抗體的DNA,所述DNA可操作地連接于轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的目標(biāo)啟動子之下游。60.—種制備重組抗體的方法，該方法包括下述步-腺(a)和(b).-(a)制備轉(zhuǎn)基因家蠶，所述轉(zhuǎn)基因家蠶具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA并且將所述重組抗體分泌至脂肪體中；和(b)從所制備的轉(zhuǎn)基因家蠶回收所述重組抗體。61.—種制備將重組抗體分泌至脂肪體中的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，該方法包括制備家蠶卯的步驟，所述家蠶卵具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA。62.—種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有編碼細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白蛋白質(zhì)的DNA的啟動子、以及編碼重組抗體并直接或間接受所述啟動子表達(dá)調(diào)控的DNA，并且將重組抗體分泌至脂肪體中。63.采用權(quán)利要求18、32~35、44~48或60中任一項(xiàng)的方法制備的抗全文摘要本發(fā)明制備了一種轉(zhuǎn)基因家蠶，其具有絲腺特異性表達(dá)的蛋白質(zhì)的編碼DNA的啟動子和受該啟動子直接或間接表達(dá)調(diào)控的重組抗體編碼DNA，并且將所述重組抗體分泌到絲腺中。確認(rèn)了從該轉(zhuǎn)基因家蠶的絲腺產(chǎn)生的重組抗體具有活性。文檔編號C07K16/00GK101331228SQ200680047658公開日2008年12月24日申請日期2006年10月18日優(yōu)先權(quán)日2005年10月18日發(fā)明者內(nèi)野惠郎,大橋建也,小林功,新井久枝,清川巌,片山勝博,田村俊樹,神田俊男,船橋范行申請人:獨(dú)立行政法人農(nóng)業(yè)生物資源研究所;日東紡績株式會社;優(yōu)尼泰克株式會社