專利名稱：組織蛋白酶半胱氨酸蛋白酶抑制劑的制作方法
組織蛋白酶半胱氨酸蛋白酶抑制劑背景技術(shù)人類和其它哺乳動物中的多種疾病都涉及或者與異常的骨吸收相關(guān)。這些疾病包括但不限于骨質(zhì)疏松癥、腎上腺糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨質(zhì) 疏松癥、佩吉特病、異常升高的骨轉(zhuǎn)換、牙周病、牙齒損害、骨折、類 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍溶骨癥、骨脆癥病、惡性腫瘤的高 釣血癥或者多發(fā)性骨髓瘤。這些疾病中最常見的一種疾病是骨質(zhì)疏松 癥，它在絕經(jīng)后的女性中發(fā)生最為頻繁。骨質(zhì)疏松癥是一種全身骨骼疾 病，其特征在于低骨重量和骨組織微結(jié)構(gòu)退化，同時隨之而來的使得骨 骼脆性和易遭受骨折性增加。骨質(zhì)疏松骨折是導(dǎo)致老年人群發(fā)病和致死的主要原因。多達(dá)50%的女性和三分之一的男性會遭受骨質(zhì)疏松骨折。 大部分老年人群已經(jīng)具有低骨骼密度并且具有高骨折風(fēng)險。顯著需要預(yù) 防和治療骨質(zhì)疏松癥以及其它與骨吸收相關(guān)的癥狀。因為骨質(zhì)疏松癥以 及其它與骨骼損害相關(guān)的疾病通常都是慢性癥狀，因此，人們確信適當(dāng) 的療法一般將需要慢性處理。組織蛋白酶屬于半胱氨酸蛋白酶的木瓜蛋白酶總科。這些蛋白酶在 正常生理學(xué)以及病理的結(jié)締組織退化中起作用。組織蛋白酶在細(xì)胞內(nèi)蛋 白質(zhì)降解、代謝轉(zhuǎn)換和改造中起著舉足輕重的作用。迄今為止，多種組 織蛋白酶已經(jīng)在多種來源中得到了鑒定和排序。這些組織蛋白酶天然地 存在于多種組織中。例如，組織蛋白酶B、 C、 F、 H、 L、 K、 O、 S、 V、 W和Z已經(jīng)得到了克隆。組織蛋白酶L與正常的溶菌酶蛋白質(zhì)水解以及 若干病態(tài)相牽連，包括但不限于黑素瘤轉(zhuǎn)移。組織蛋白酶S與阿爾茨海 默氏病、動脈粥樣硬化癥、慢性阻塞性肺病和某些自身免疫疾病相牽連， 包括但不限于青少年發(fā)作糖尿病、多發(fā)性硬化、慢性天皰瘉、Gmves， 疾病、重癥肌無力、全身紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和橋本氏甲狀腺炎； 與變應(yīng)性紊亂相牽連，包括但不限于哮喘；以及與外源性免疫反應(yīng)相牽 連，包括但不限于器官移植排斥或者組織移植排斥。升高的組織蛋白酶 B水平和酶的重新分配在腫瘤中得到了發(fā)現(xiàn)，這表示它在胂瘤發(fā)病和轉(zhuǎn) 移中起作用。此外，異常的組織蛋白酶B活性與某類疾病狀態(tài)相牽連， 如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、肺孢子蟲肺炎、急性胰炎、炎性的氣道疾病和骨與關(guān)節(jié)病癥。哺乳動物組織蛋白酶與引起疾病的寄生蟲表達(dá)的類木瓜蛋白酶半 胱氨酸蛋白酶相關(guān)，所述寄生蟲包括原生動物、扁蠕蟲、植物線蟲和節(jié) 肢動物家族的寄生蟲。這些半胱氨酸蛋白酶在這些有機(jī)體的生命周期中 起著主要作用。人類I型膠原，骨中的主要膠原，是組織蛋白酶K的優(yōu)良底物。參見Kafienah, W.等人,1988, BiochemJ， 331:727-732，其全部內(nèi)容在此 I入作為參考。對組織蛋白酶K使用反義寡核苷酸的體外試驗已經(jīng)顯示 了降低的體外骨吸收，這可能是由于組織蛋白酶K信使RNA翻譯的減 少。參見Inui, T.等人，1997, J Biol Chem， 272:8109-8112,其全部內(nèi) 容在此引入作為參考。組織蛋白酶K的晶體結(jié)構(gòu)已經(jīng)得到了解析。參見 McGrath， M.E.等人,1997, Nat Struct Biol, 4:105-109; Zhao， B.等人， 1997, Nat Struct Biol, 4:109-11，其全部內(nèi)容在此引入作為參考。同樣， 對選擇性肽基的組織蛋白酶K抑制劑已經(jīng)進(jìn)行了研究。參見Bromme， D.等人，1996, Biochem J， 315:85-89; Thompson, S.K.等人，1997， Proc Natl Acad Sci USA， 94:14249-14254,其全部內(nèi)容在此引入作為參 考。因此，組織蛋白酶K抑制劑可以降低骨吸收。這些抑制劑對治療涉 及骨吸收的病癥將會有用，涉及骨吸收的病癥例如骨質(zhì)疏松癥。本領(lǐng)域所需要的是治療與組織蛋白酶K活性關(guān)聯(lián)的疾病的治療劑， 所述疾病包括骨質(zhì)疏松癥、腎上腺糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥、佩吉 特病、異常疾病、牙齒損害、骨折、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體 周圍溶骨癥、骨脆癥病、動脈粥樣硬化、肥胖癥、青光眼、慢性肺梗塞 疾病和癌癥，包括轉(zhuǎn)移性骨疾病、惡性腫瘤的高鈣血癥和多發(fā)性骨髓瘤。發(fā)明概述本發(fā)明涉及能夠在需要其的哺乳動物中治療和預(yù)防組織蛋白酶依 賴癥狀或者疾病狀態(tài)的化合物。本發(fā)明的一種實(shí)施方案通過式I化合物 和其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體和N-氧化物衍生物進(jìn)行說明<formula>formula see original document page 6</formula> I.發(fā)明詳述本發(fā)明涉及以下化學(xué)式的化合物:<formula>formula see original document page 6</formula>其中R1是卣代； R2是卣代；R3是氫、C1-6烷基、C1-6卣代烷基、C3-6環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體、或N-氧化物衍生物。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，或者W是氟或氯。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，或者W是氟或氯。在本發(fā)明的一個實(shí)施方案中，W是氫、6烷基或C"卣代烷基。 在本發(fā)明的一個類別中，RS是Cw卣代烷基。在本發(fā)明的一個子類中， R 是2,2,2-三氟乙基。除非另有說明，如上所述的優(yōu)選實(shí)施方案意指包括所有具體和優(yōu)選 基團(tuán)的組合。本發(fā)明的具體實(shí)施方案包括但不限于 (1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氟-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷曱酰胺；(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5畫二氟畫2國[4-[4-(甲基磺?；?苯基]-l-曱基-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺；(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氯國2國[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l-甲基-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺；(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5>二氟-2畫[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基]環(huán)己烷曱酰胺;(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氯陽2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l- (2,2，2-三氟乙基)-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷曱酰胺;或其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體或N -氧化物衍生物。 在本發(fā)明范圍內(nèi)還包括含有如上所述的式I化合物和藥學(xué)上可接受 的載體的藥物組合物。本發(fā)明還預(yù)期包括含有藥學(xué)上可接受的載體和任 何在本申請中明確公開的化合物的藥物組合物。根據(jù)本文所含的教導(dǎo)， 本發(fā)明的這些和其它方面將是顯而易見的。 應(yīng)用本發(fā)明化合物為組織蛋白酶抑制劑，并且因此可以用于治療或者預(yù) 防哺乳動物組織蛋白酶依賴疾病或者癥狀，優(yōu)選人類。特別地，本發(fā)明 化合物為組織蛋白酶K抑制劑，并且因此可以用于治療或者預(yù)防哺乳動 物組織蛋白酶K依賴性疾病或者癥狀，優(yōu)選人類。與現(xiàn)有技術(shù)中已知的結(jié)構(gòu)類似化合物相比，本發(fā)明化合物的優(yōu)點(diǎn)在 于它們具有顯著的改良代謝和藥物動力學(xué)分布。明確而言，本發(fā)明化合 物具有優(yōu)良的生物利用度，例如但不限于，在0.5-1%曱基纖維素 (methocel)或PEG-200中，劑量為10毫克/千克雄性Sprague Dawley 大鼠。另外，本發(fā)明化合物在很多臨床前動物種類中具有改進(jìn)的半壽期， 從而提供了比本領(lǐng)域已知的結(jié)構(gòu)類似化合物更長的全身藥物曝置期。"組織蛋白酶依賴疾病或者癥狀"是指依賴 一種或多種組織蛋白酶 活性的病理情況。"組織蛋白酶K依賴疾病或者癥狀，，是指依賴組織蛋 白酶K活性的病理情況。與組織蛋白酶K活性相關(guān)的疾病包括骨質(zhì)疏松 癥、腎上腺糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、異常疾病、牙齒 損害、骨折、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍溶骨癥、骨脆癥、 動脈粥樣硬化癥、肥胖病、青光眼、慢性阻塞性肺病和癌癥(包括轉(zhuǎn)移 性骨骼疾病、惡性腫瘤的高鉤血癥和多發(fā)性骨髓瘤)。在用本發(fā)明要求 保護(hù)的化合物治療這些癥狀中，需要的治療劑量將根據(jù)具體疾病而不 同，并且本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員可以輕易確定該劑量。雖然治療和預(yù)防都預(yù)期在本發(fā)明范圍內(nèi)，但是這些癥狀的治療是優(yōu)選的用途。本發(fā)明的 一種實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中抑制組織蛋白酶活性的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任何藥物組合物。本發(fā)明的 一 類實(shí)施方案是方法，其中組織蛋白酶活性是組織蛋白酶K活性。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療或者預(yù)防組 織蛋白酶依賴癥狀的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所 述的任何化合物或者任何藥物組合物。本發(fā)明的一類實(shí)施方案是方法，其中組織蛋白酶活性是組織蛋白酶 K活性。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中抑制骨損害的方 法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任 何藥物組合物。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中降低骨 損害的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合 物或者任何藥物組合物。組織蛋白酶K抑制劑在抑制骨吸收(其包括異 常升高的骨轉(zhuǎn)換、骨折、佩吉特病、骨脆癥病和假體周圍溶骨癥)中的 應(yīng)用在文獻(xiàn)中是已知的，參見Stroup， G.B.， Lark, M.W., Veber， DF., Bhattacharrya, A., Blake, S.， Dare， L.C.， Erhard， K.F.， Hoffman, S.J., James, I.E., Marquis, R.w., Ru, Y.， Vasko-Moser, J.A.， Smith, B.R., Tomaszek, T.和Gowen, M. Potent and selective inhibition of human cathepsin K leads to inhibition of bone resorption in vivo in a nonhuman primate. J. Bone Miner. Res. ， 16:1739-1746; 2001;和Votta, B.J.， Levy, M.A.， Badger, A., Dodds, R.A., James, I.E.， Thompson, S., Bossard， M.J., Carr， T., Connor, J.R., Tomaszek, T.A., Szewczuk, L., Drake, F.H., Veber, D.和Gowen, M. Peptide aldehyde inhibitors of cathepsin K inhibit bone resorption both in vivo and in vitro. J. Bone Miner, Res. 12:1396-1406; 1997。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療或者預(yù)防骨 質(zhì)疏松癥(包括腎上腺糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥)的方法，包括給 藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任何上述藥 物組合物。組織蛋白酶K抑制劑在治療或者預(yù)防骨質(zhì)疏松癥中的應(yīng)用在文獻(xiàn)中是已知的，參見Saftig， P., Hunziker， E.， Wehmeyer, O.， Jones, S.， Boyde, A., Rommerskirch, W., Moritz, J.D.， Schu， P.和Vonfigura, K. Impaired osteoclast bone resorption leads to osteopetrosis in cathepsin K-deficient mice. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:13453-13458; 1998。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療或者預(yù)防牙 周病(包括牙齒損害)的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如 上所述的任何化合物或者任何上述藥物組合物。組織蛋白酶K抑制劑在 治療或者預(yù)防牙周病和牙齒損害中的應(yīng)用已經(jīng)在文獻(xiàn)中進(jìn)行了論述，參 見Tsuji Y等人,Expression of cathepsin K mRNA and protein in odontoclasts after experimental tooth movement in the mouse maxilla by in situ hybridization and immunoelectron microscopy. Cell Tissue Res. 2001 Mar; 303 ( 3 ) :359-69。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療或者預(yù)防類 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎癥狀的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所 述的任何化合物或者任何藥物組合物。在文獻(xiàn)中，已知關(guān)節(jié)周的骨的漸 進(jìn)破壞是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)病人中關(guān)節(jié)機(jī)能障礙和關(guān)節(jié)無力的主要 原因,參見Goldring SR， "Pathogenesis of bone erosions in rheumatoid arthritis" . Curr. Opin. Rheumatol. 2002; 14:406-10。患有RA的患者的關(guān) 節(jié)組織分析已經(jīng)提供證據(jù)，組織蛋白酶K陽性破骨細(xì)胞是介導(dǎo)與類風(fēng)濕 性滑液損害有關(guān)的病灶骨吸收的細(xì)胞類型，參見Hou， W-S, Li, W, Keyszer, G, Weber, E, Levy, R, Klein, MJ, Gravallese， EM, Goldring, SR， Bromme， D， "Comparison of Cathepsin K and S expression within the Rheumatoid and Osteoarthritic Synovium", Arthritis Rheumatism 2002; 46:663-74。此外，全身性骨損害是導(dǎo)致與嚴(yán)重RA有關(guān)的病狀的主要原 因。在患有慢性RA的患者中，臀部和脊柱的骨折頻率得到了顯著增加， 參見Gould A, Sambrook， P, Devlin J等人，"Osteoclastic activation is the principal mechanism leading to secondary osteoporosis in rheumatoid arthritis" . J. Rheumatol. 1998; 25:1282-9。組織蛋白酶K抑制劑在關(guān)節(jié) 下骨吸收和全身性骨損害的治療或者預(yù)防中的應(yīng)用表明了在類風(fēng)濕性 關(guān)節(jié)炎的進(jìn)行上藥理學(xué)介入的合理方法。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療或者預(yù)防骨 關(guān)節(jié)炎進(jìn)行的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任何藥物組合物。在文獻(xiàn)中，已知骨關(guān)節(jié)炎(OA)伴隨有明確的關(guān)節(jié)變化，包括關(guān)節(jié)軟骨表面侵蝕、周圍關(guān)節(jié)軟骨內(nèi)骨化/骨贅增生和軟骨下骨硬化和孢嚢形成，參見Oettmeier, R, Abendroth， K, "Osteoarthritis and bone: osteologic types of osteoarthritis of the hip", Skeletal Radiol. 1989; 18:165-74。最近，已經(jīng)提出了軟骨下骨硬化可能 具有促使OA開始和進(jìn)行的作用。當(dāng)關(guān)節(jié)響應(yīng)重復(fù)的沖動負(fù)載時，變硬 的軟骨下骨只能較差地減弱和分散通過關(guān)節(jié)的壓力，使得其遭受通過關(guān) 節(jié)軟骨表面的更大機(jī)械應(yīng)力。這進(jìn)而也促進(jìn)了軟骨磨損和纖化，參見 Radin, EL和Rose RM, "Role of subchondral bone in the initiation and progression of cartilage damage", Clin. Orthop. 1986; 213:34-40。通過抗 吸收試劑(例如組織蛋白酶K抑制劑)抑制過多的關(guān)節(jié)下骨吸收，將導(dǎo) 致軟骨下骨轉(zhuǎn)換受到抑制，由此可能會對OA進(jìn)行產(chǎn)生有利的影響。除上述假設(shè)之外，采自O(shè)A病人滑膜和關(guān)節(jié)軟骨樣品的滑液成纖維 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞相似細(xì)胞和軟骨細(xì)胞中的組織蛋白酶K蛋白質(zhì)表達(dá)最近 得到了鑒定，參見Hou, W-S, Li, W， Keyszer, G, Weber, E， Levy, R， Klein, MJ， G服allese, EM, Goldring, SR, Bromme, D, "Comparison of Cathepsin K and S expression within the Rheumatoid and Osteoarthritic Synovium" ， Arthritis Rheumatism 2002; 46:663-74;和Dodd, RA， Co畫r, JR, Dmke， FH, Gowen， M, "Expression of Cathepsin K messenger RNA in giant cells and their precursors in human osteoarthritic synovial tissues". Arthritis Rheumatism 1999; 42:1588-93;和Konttinen, YT, Mandelin, J, Li， T誦F, Salo, J, Lassus， J等人"Acidic cysteine endoproteinase cathepsin K in the degeneration of the superficial articular hyaline cartilage in osteoarthritis", Arthritis Rheumatism 2002; 46:953-60。由it匕，這些近,月 研究涉及組織蛋白酶K在破壞與骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)行相關(guān)的關(guān)節(jié)軟骨II型膠原 中的作用。由此，如本發(fā)明所述的組織蛋白酶K抑制劑在骨關(guān)節(jié)炎治療 或者預(yù)防中的應(yīng)用包括兩種不同的機(jī)制， 一種機(jī)制是抑制破骨細(xì)胞驅(qū)動 的軟骨下骨轉(zhuǎn)換，和第二種機(jī)制是直接抑制患有OA的患者的滑膜和軟 骨中的II型膠原變性。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療癌癥的方法， 包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任何 藥物組合物。在文獻(xiàn)中已知組織蛋白酶K在人類乳腺癌、前列腺癌和脊索癌中表達(dá)并且其具有基體分解能力，參見Littlewood-EvansAJ， Bilbe G, Bowler WB, Farley D, WlodarskiB, Kokubo T, I腸kaT， Sloane J， Evans DB, Gallagher JA, "The osteoclast誦associated protease cathepsin K is expressed in human breast carcinoma," Cancer Res 1997 Dec 1; 57 (23 ) :5386-90. BmbakerKD, VessellaRL， TmeLD, Thomas R， Corey E, " Cathepsin K mRNA and protein expression in prostate cancer progression, ，， J Bone Miner Res 2003 18, 222-30. Haeckel C, Kmeger S, KuesterD, OstertagH， Samii M, BuehlingF, BroemmeD, CzerniakB, Roessner A， "Expression of cathepsin K in chordoma, '， Hum Pathol 2000 Jul; 31 ( 7) :834-40。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療動脈粥樣硬 化癥的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合 物或者任何藥物組合物。以下文獻(xiàn)中已知組織蛋白酶K在人類動脈粥樣 化中表達(dá)并且具有顯著的彈性蛋白酶活性，參見SukhovaGK， Shi GP, Simon DI, Chapman HA, Libby P, " Expression of the elastolytic cathepsins S and K in human atheroma and regulation of their production in smooth muscle cells, ，， J Clin Invest 1998 Aug 102， 576-83。還已知Cat K裂的抗性增加，參見E. Lutgens， S.RM. Lutgens, B. C.G. Faber， S. Heeneman, M.M.J. Gijbels, M.P.J， de Winther， P. Frederik， I. van der Made, D. Black, M.J.A.P. Daemen, K.B.J.M. Cleutjens "Disruption of the Cathepsin K Gene Reduces Atherosclerosis Progression and Induces Plaque Fibrosis but Accelerates Macrophage Foam Cell Formation." Circulation 2006 113:98-107。對患者給藥治療有效量的如上所述的任何化合物或者 任何藥物組合物，增加的斑穩(wěn)定性會減少其心臟病和中風(fēng)本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療肥胖病的方 法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任 何藥物組合物。在文獻(xiàn)中已知組織蛋白酶K mRNA在數(shù)種肥胖病鼠模型 中的脂肪組織中和肥胖人類男性的脂肪組織中升高，參見Chiellini C， Costa M， Novelli SE, AmriEZ, Benzi L, BertaccaA, Cohen P, Del Prato S, Friedman JM, Maffei M， "Identification of cathepsin K as a novel marker of adiposity in white adipose tissue, ，， J Cell Physiol 2003, 195，309-21。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療青光眼的方 法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任 何藥物組合物。組織蛋白酶K在虹膜、睫狀體和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞中 高度表達(dá)并且由此可以用于治療青光眼，參見Ortega, J.，等，"Gene Expression of Proteases and Protease Inhibitors in the Human Ciliary Epithelium and ODM-2 cells," Exp. Eye Res ( 1997) 65, 289-299;國際 />開WO 2004/058238 (Alcon, Inc.)。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療慢性阻塞性 肺病的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合 物或者任何藥物組合物。在文獻(xiàn)中已知組織蛋白酶K在肺部纖維化中起 作用,參見Buhling, F.等人，"Pivotal role of cathepsin K in lung fibrosis,，， Am J Pathol. 2004 Jun; 164 ( 6) :2203-16。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療寄生蟲感染 的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或 者任何藥物組合物。在文獻(xiàn)中已知哺乳動物組織蛋白酶與在這些寄生蟲 的生命周期中起著重要作用的類木瓜蛋白酶半胱氨酸蛋白酶相關(guān)。所述 寄生蟲涉及癥疾、美洲錐蟲病、剛果錐蟲病、利什曼病、賈第蟲病、滴 蟲病、變形蟲病、血吸蟲病、片吸蟲病、肺吸蟲病和腸蛔蟲疾病，參見 Lecaille F, Kaleta J, Bromme D. ， Human and parasitic papain-like cysteine proteases: their role in physiology and pathology and recent developments in inhibitor design. Chem Rev 2002 102， 4459-88。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療嚴(yán)重急性呼 吸性綜合癥(SARS)的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如 上所述的任何化合物或者任何藥物組合物。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療轉(zhuǎn)移性骨骼 疾病的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合 物或者任何藥物組合物。在文獻(xiàn)中已知，破骨細(xì)胞引起骨吸收并且由轉(zhuǎn) 移性腫瘤誘發(fā)的骨組織破壞和高鈣血癥通過破骨細(xì)胞進(jìn)行。據(jù)此，對破 骨細(xì)胞的抑制可以預(yù)防骨組織石皮壞和骨骼轉(zhuǎn)移，參見Miyamoto, T.和 Suda， T., "Differentiation and function of osteoclasts, ，， Kdo J Med 2003 Mar; 52 ( 1 ) :1-7。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是在患有攜帶骨骼轉(zhuǎn)移危險的原發(fā)性腫瘤 的哺乳動物中預(yù)防轉(zhuǎn)移性骨骼疾病的方法，包括給藥所述哺乳動物治療 有效量的如上所述的任何化合物或者任何藥物組合物。在文獻(xiàn)中描述了 抑制破骨細(xì)胞功能的化合物可能防止腫瘤細(xì)胞粘合到骨骼，參見s.Boissier, M. Ferreras, 0. Peymchaud, S. Magnetto, F. H. Ebetino, M. Colombel， P. Delmas, J.曙M. Delaiss 6和P. CI 6 zardin "Bisphosphonates Inhibit Breast and Prostate Carcinoma Cell Invasion, an Early Event in the Formation of Bone Metastases" Cancer Research 60， 2949-2954, 2000。本發(fā)明的另 一 實(shí)施方案是在需要其的哺乳動物中治療惡性腫瘤高 鉤血癥或多發(fā)性骨髓瘤的方法，包括給藥所述哺乳動物治療有效量的如 上所述的任何化合物或者任何藥物組合物。已經(jīng)在文獻(xiàn)中已知組織蛋白 酶K在惡性腫瘤或多發(fā)性骨髓瘤高鈣血癥方面的作用，參見，F(xiàn)aust, J. 等人，Multiple myeloma cells and cells of the human osteoclast lineage share morphological and cell surface markers. J Cell Biochem. 1998 Dec 15; 71 ( 4 ) :559-68; A. lipton, New therapeutic agents for the treatment of bone diseases. Expert Opin Biol Ther. 2005 Jun; 5(6) :817-32。本發(fā)明的另一實(shí)施方案是給藥哺乳動物治療有效量的如上所述的任何化合物或者任何組合物，以治療與組織蛋白酶S相關(guān)的哺乳動物疾病，包括阿茲海默病、動脈粥樣硬化癥、慢性阻塞性肺病、癌癥和某些自身免疫疾病，包括但不限于青少年發(fā)作糖尿病、多發(fā)性硬化、慢性天皰皰、Gmves，疾病、重癥肌無力、全身紅斑狼瘠、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和橋本氏曱狀腺炎；變應(yīng)性疾病，包括但不限于哮喘；和異源性免疫反應(yīng)，包括但不限于器官移植排斥或者組織移植排斥。在文獻(xiàn)中已知組織蛋白酶S活性與上述疾病狀態(tài)相關(guān)，參見Munger JS, Haass C, Lemere CA,Shi GP， Wong WS, Teplow DB, Selkoe DJ, Chapman HA. Lysosomal processing of amyloid precursor protein to A beta peptides: a distinct role for cathepsin S. Biochem J 1995 311， 299-305， Sukhova GK, Zhang Y， Pan JH, Wada Y, Ya咖moto T， Naho M， Kodama T, Tsimikas S' Whzt咖JL， Lu ML, Sakara Y, Chin MT， Libby P, Shi GP. Deficiency of cathepsin S reduces atherosclerosis in LDL receptor-deficiem mice. J Clin Invest 2003 111, 897-906, Zheng T， Zhu Z Wang Z, Homer RJ， Ma B, Riese RJ Jr, Chapman HA Jr, Shapiro SD, Elias JA. Inducible targeting of IL-13 to the adult lung causes matrix metalloproteinase- and cathepsin-dependent emphysema. J Clin Invest 2000 106,1081-93， Shi GP, Sukhova GK, Kuzuya M, Ye Q, Du J, Zhang Y, Pan JH, Lu ML, Cheng XW， Iguchi A， Perrey S, Lee AM, Chapman HA, Libby P. Deficiency of the cysteine protease cathepsin S impairs microvessel growth.Circ Res 2003 92,493-500, Nakagawa TY, Brissette WH, Lira PD, Griffiths RJ, Petrushova N' Stock J, McNeish JD. Eastman SE, Howard ED, Clarke SR. Rosloniec EF, Elliott EA， Rudensky AY, Impaired invariant chain degradation and antigen presentation and diminished collagen-induced arthritis in cathepsin S null mice. Immunity 1999 10, 207-17 。本發(fā)明的例證是任何如上所述化合物在制備用于在需要其的哺乳動物中治療和/或預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的藥物中的用途。本發(fā)明更進(jìn)一 步的例證是任何如上所述化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療和/或預(yù)防骨損害、骨吸收、骨折、轉(zhuǎn)移性骨疾病和/或與組織蛋白酶功能 相關(guān)的病癥。本發(fā)明化合物可以單獨(dú)給藥或者優(yōu)選協(xié)同藥學(xué)上可接受的載體或 者稀釋劑聯(lián)合給藥至哺乳動物，優(yōu)選人類，在藥物組合物中，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn) 藥物實(shí)踐，任選與已知的輔劑聯(lián)合，輔劑例如明礬。所述化合物可以口 服給藥或者胃腸外給藥，包括靜脈內(nèi)的、肌內(nèi)的、腹膜內(nèi)的、皮下的、 直腸的和局部的給藥途徑。在用于口服使用的片劑的情況下，通常加入常規(guī)使用的載體，包括 乳糖和玉米淀粉，和潤滑劑，例如硬脂酸鎂。對于膠嚢形式的口服給藥， 有益的稀釋劑包括乳糖和干玉米淀粉。對于根據(jù)本發(fā)明的治療化合物的 口服應(yīng)用，選擇的化合物可以通過以下方式給藥，例如以片劑或者膠嚢 形式，或者以水溶液或者懸浮液形式給藥。對于片劑或者膠嚢形式的口 服給藥，藥物活性成分可以與口服的、無毒的、藥學(xué)上可接受的惰性載 體聯(lián)合使用，惰性載體例如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、曱基纖維素、 硬脂酸鎂、磷酸氫鈣、硫酸鈣、甘露醇和山梨糖醇等等；對于液態(tài)形式 的口服給藥，口服的藥物組分可以與任何口服的、無毒的、藥學(xué)上可接 受的惰性載體聯(lián)合使用，惰性載體例如乙醇、甘油和水等等。此外，當(dāng) 期望或者需要時，也可以將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑結(jié) 合入混合物中。適當(dāng)?shù)慕Y(jié)合劑包括淀粉、明膠、天然糖類(例如葡萄糖 或者(3-乳糖)、玉米甜味劑、天然樹膠和合成樹膠(例如阿拉伯膠、西 黃蓍膠或者海藻酸鈉)、羧曱基纖維素、聚乙二醇和石蠟等等。用于這 些劑型中的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸 鈉和氯化鈉等等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、皂土 和黃原膠等等。當(dāng)含水混懸劑需要口服應(yīng)用時，將活性成分與乳化劑和 懸浮劑聯(lián)合使用。如果需要，可以將某些甜味劑和/或增香劑加入其中。 對于肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi)應(yīng)用，通常制備活性成分的無菌液，并且應(yīng)當(dāng)對溶液的pH值進(jìn)行適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)和緩沖。對于靜脈內(nèi)使用，應(yīng) 該對溶質(zhì)的總濃度進(jìn)行控制，以便使得制劑等滲。
本發(fā)明化合物還可以以微脂粒輸送系統(tǒng)的形式進(jìn)行給藥，微脂粒輸 送系統(tǒng)例如小單層嚢、大單層嚢和多層嚢。脂質(zhì)體可以由多種磷脂形成， 例如膽固醇、十八胺或者卵磷脂。
本發(fā)明化合物也可以通過利用單克隆抗體作為個體載體進(jìn)行遞送， 所述化合物分子連接到單克隆抗體上。本發(fā)明化合物也可以與作為目標(biāo) 藥物載體的可溶性聚合物結(jié)合。上述聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、 吡喃共聚物、多羥丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、多羥基-乙基天冬酰胺-苯酚 或者棕櫚?；〈木垩趸蚁?聚賴氨酸。此外，可以將本發(fā)明化合物 結(jié)合到一類用于實(shí)現(xiàn)藥物控釋的可生物降解的聚合物上，可生物降解的
聚合物例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚s-己內(nèi)
酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和 交聯(lián)的或者水凝膠兩性嵌段共聚物。
本發(fā)明化合物還可以用于與已知可以用于治療或者預(yù)防以下疾病 的試劑聯(lián)合使用，所述疾病為骨質(zhì)疏松癥、腎上腺糖皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨 質(zhì)疏松癥、佩吉特病、異常升高的骨轉(zhuǎn)換、牙周病、牙齒損害、骨折、 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍溶骨癥、骨脆癥、轉(zhuǎn)移性骨骼疾 病、惡性肺瘤的高鈣血癥和多發(fā)性骨髓瘤。本發(fā)明公開的化合物與其它 對治療或者預(yù)防骨質(zhì)疏松癥或者其它骨病癥有用的試劑的聯(lián)合同樣包 括在本發(fā)明范圍內(nèi)?；谒幬锏奶匦砸约八婕暗募膊?，本領(lǐng)域普通技
術(shù)人員將可以辨別哪些試劑的聯(lián)合有效。所述試劑包括以下有機(jī)雙膦 酸酯；選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑；雄激素受體調(diào)節(jié)劑；破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP 酶抑制劑；HMG-CoA還原酶抑制劑；整聯(lián)蛋白受體拮抗劑；成骨細(xì)胞 合成代謝劑例如PTH;維生素D;合成維生素D類似物；非甾族抗炎藥 物；選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑；白細(xì)胞間介素-l(3抑制劑；LOX/COX抑 制劑；及其藥學(xué)上可接受的鹽和混合物。優(yōu)選的聯(lián)合為本發(fā)明化合物和 有機(jī)雙膦酸酯的聯(lián)合。另一優(yōu)選的組合為本發(fā)明化合物和選擇性雌激素 受體調(diào)節(jié)劑的組合。另 一優(yōu)選的組合為本發(fā)明化合物和雄激素受體調(diào)節(jié)
合/ 乙、、、 、 、 、、'、
"有機(jī)雙膦酸酯"包括但不限于下面化學(xué)式的化合物<formula>formula see original document page 16</formula>
其中n為0~7的整數(shù)，和其中A和X獨(dú)立地選自H、 OH、卣素、NH2、 SH、苯基、d-C3。烷基、C3-C3Q支鏈或者環(huán)烷基、具有兩個或者三個N 的二環(huán)結(jié)構(gòu)、d-C3o取代的烷基、C-C1()烷基取代的NH2、 C3-do支鏈 或者環(huán)烷基取代的NH2、d-do二烷基取代的NH2、d-do烷氧基、d-Cu) 烷基取代的硫基、苯硫基、由代苯硫基、CVdo烷基取代的苯基、吡啶 基、呋喃基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑并吡啶基和芐基，從而使得當(dāng)n 為O時A和X都不選自H或者OH;或者A和X與它們連接的碳原子
合起來形成C3-Cu)環(huán)。
在上述化學(xué)式中，所述烷基可以是直鏈、支鏈或者環(huán)狀的烷基，條
件是對化學(xué)式選擇充足的原子。C!-C3Q取代烷基可以包含多種取代基，
取代基的非限制性實(shí)例包含選自以下的取代基苯基、吡啶基、呋喃基、 吡咯烷基、咪唑基、NH2、 C廣do烷基或者二烷基取代的NH2、 0H、 SH
和C!-d。烷氧基。
就A和/或X取代基來說，上述化學(xué)式還意圖包含復(fù)雜碳環(huán)結(jié)構(gòu)、 芳香結(jié)構(gòu)和雜原子結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)的非限制性實(shí)例包括萘基、壹啉基、 異喹淋基、金剛烷基和氯代苯硫基。
在此還可以使用雙膦酸酯的藥學(xué)上可接受的鹽和衍生物。這些鹽的 非限制性實(shí)例包含選自以下的鹽堿金屬鹽、堿土金屬鹽、銨鹽和單-、 二-、三-或者四-C-C3o烷基取代的銨鹽。優(yōu)選的鹽選自鈉鹽、鉀鹽、鈣 鹽、鎂鹽和銨鹽。更優(yōu)選鈉鹽。所迷衍生物的非限制性實(shí)例包含選自以 下的衍生物酯、水合物和酰胺。
應(yīng)當(dāng)指出，在此使用的涉及本發(fā)明治療劑的術(shù)語"雙膦酸酯"的含 義還包括二膦酸酯、雙膦酸和二膦酸，以及這些物質(zhì)的鹽和衍生物。除 非明確說明，在關(guān)于雙膦酸酯中使用的具體命名法并不意味著對本發(fā)明 范圍的限制。因為當(dāng)前本領(lǐng)域普通技術(shù)人員使用混合命名法，因此除非 在本文中另有說明，在本發(fā)明中涉及雙膦酸酯化合物的具體重量或者百分比基于酸活性重量。例如，短語"基于阿侖膦酸活性重量，約5 mg選自阿侖膦酸酯、其藥學(xué)上可接受的鹽及其混合物的骨吸收抑制雙膦酸酯"是指選擇的雙膦酸酯化合物的量以5mg阿侖膦酸為基準(zhǔn)進(jìn)行計算。在此有用的雙膦酸酯的非限制性實(shí)例包括以下阿侖膦酸酯(其也已知為阿侖膦酸)、4-氨基-l-羥基亞丁基-l,l-雙 膦酸、阿侖膦酸鈉或者阿侖膦酸單鈉三水合物、4-氨基-1-羥基亞丁基-1,1-雙膦酸單鈉三水合物。阿侖膦酸酯描述于美國專利4,922,007中，Kieczykowski等人，頒 布于1990年5月1日；5，019,651， Kieczykowski等人,頒布于1991年 5月28日；5,510,517， Dauer等人，頒布于1996年4月23日；5,648,491, Dauer等人，頒布于1997年7月15日，它們的全部內(nèi)容在此引入作為 參考。環(huán)庚基氨基亞甲基-l,l-雙膦酸，YM 175, Yamanouchi(英卡磷酸酯， 以前稱為cimadronate )，如Isomura等人的頒布于1990年11月13日的 美國專利4,970,335所述，其全部內(nèi)容在此引入作為參考。1,1-二氯亞甲基-l,l-二磷酸(氯膦酸)和二鈉鹽(氯膦酸鹽，Procter and Gamble),描述于比利時專利672,205 ( 1966)和J. Org. Chem, 32, 4111 ( 1967)中，它們的全部內(nèi)容都在此引入作為參考。1-羥基-3- ( l-吡咯烷基)-亞丙基-l，l-雙膦酸(EB匿1053 )。l-羥基乙烷-l,l-二膦酸(依替膦酸)。1-羥基-3- ( N-甲基-N-戊基氨基)亞丙基-l，l-雙膦酸，又名 BM-210955, Boehringer誦Mannheim (埃本膦酸鹽)，描述于1990年5月 22日頒布的美國專利No. 4,927,814中，其全部內(nèi)容在此引入作為參考。1-羥基-2-咪唑并-(1,2-a)吡啶-3-基亞乙基(米諾膦酸酯)。6-氨基-l-羥基亞己基-l，l-雙膦酸(奈立膦酸酯)。3- (二曱基氨基)-l-羥基亞丙基-l,l-雙膦酸(奧帕膦酸酯)。3-氨基-l-羥基亞丙基-l,l-雙膦酸(帕米膦酸酯)。[2- (2-吡啶基)亞乙基]-l,l-雙膦酸(pirid匪te)，描述于美國專利 編號4,761,406中，其全部內(nèi)容在此引入作為參考。1-羥基-2- (3-吡啶基)-亞乙基-l,l-雙膦酸(利塞膦酸酯)。 (4-氯苯基)硫曱烷-l,l-二膦酸(替魯膦酸酯)，如美國專利 4,876,248, Breliere等人，1989年10月24日中所述，其全部內(nèi)容在此引入作為參考。
1-羥基-2- (1H-咪唑-l-基)-亞乙基-l,l-雙膦酸(唑來磷酸酯)。 雙膦酸酯的非限制性實(shí)例包含阿侖膦酸酯、cimadronate、氯屈膦酸 酯、依替膦酸酯、埃本膦酸酯、英卡磷酸酯、米諾膦酸酯、奈立膦酸酯、 奧帕膦酸酯、帕米膦酸酯、piridronate、利塞膦酸酯、替魯膦酸酯和唑 來磷酸酯，及其藥學(xué)上可接受的鹽和酯。特別優(yōu)選的雙膦酸酯是阿侖膦 酸鹽，特別是阿侖膦酸的鈉、鉀、鈣、鎂或者銨鹽。優(yōu)選的雙膦酸鹽的 例證是阿侖膦酸鈉鹽，特別是水合阿侖膦酸鈉鹽。所述鹽可以與整摩爾 數(shù)的水或者非整摩爾數(shù)的水進(jìn)行水合。優(yōu)選的雙膦酸鹽的其它例證是水 合阿侖膦酸鈉鹽，特別是當(dāng)水合鹽是阿侖膦酸單鈉三水合物時。
應(yīng)當(dāng)認(rèn)可，可以使用兩種或更多種雙膦酸酯活性物質(zhì)的混合物。 有機(jī)雙膦酸酯的精確劑量將隨著給藥方案、選擇的具體雙膦酸酯、 哺乳動物或者人類的年齡、大小、性別和狀態(tài)、要進(jìn)行治療的病癥的性 質(zhì)和嚴(yán)重程度以及其它相關(guān)的醫(yī)療和物理因素而變化。因此，精確的藥 學(xué)有效量不能預(yù)先規(guī)定，可以由護(hù)理者或者臨床醫(yī)生即時確定。適宜的 量可以通過動物模型和人類臨床研究的常規(guī)試驗進(jìn)行確定。通常，對雙 膦酸酯的適宜量進(jìn)行選擇以獲得骨吸收抑制作用，即給藥骨吸收抑制量 的雙膦酸酯。對于人類，雙膦酸酯的有效口服劑量一般為約1.5 ~約6000 )ug/kg體重，并且優(yōu)選約10~約2000 pg/kg體重。對于阿侖膦酸單鈉三 水合物， 一般人類給藥劑量通常為約2毫克/天~約40毫克/天，優(yōu)選為 約5毫克/天~約40毫克/天。對于阿侖膦酸單鈉三水合物，美國目前批 準(zhǔn)的用于預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的劑量是5毫克/天，用于治療骨質(zhì)疏松癥的劑 量是10毫克/天，用于治療佩吉特疾病的劑量是40毫克/天。
在另一種給藥方案中，雙膦酸酯可以每隔一段時間給藥而不是每天 給藥，例如每周一次給藥、每周兩次給藥、每兩周一次給藥和每月兩次 給藥。在每周一次的給藥方案中，阿侖膦酸單鈉三水合物將按35毫克/ 周或者70毫克/周的劑量給藥。
"選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑"是指千擾或者抑制雌激素結(jié)合至受體 的化合物，與機(jī)制無關(guān)。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包含但不限于雌激素、 孕激素、雌二醇、屈洛昔芬、雷洛昔芬、拉索昔芬、TSE-424、他莫昔 芬、伊多昔芬、LY353381、 LY117081、托瑞米芬、氟維司群、4-[7-( 2,2-二曱基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2- (l-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-l-苯并吡喃-3-基]-苯基-2,2-二甲基丙酸酯、4,4'-二羥基二苯甲酮-2,4-二硝基苯 基-腙和SH646。
"雌激素受體(3調(diào)節(jié)劑"是一種選擇性激動或者拮抗雌激素受體P 的化合物(ER (3激動ER(3經(jīng)ER(3介導(dǎo)作用促進(jìn)色氨酸羥化酶基因的轉(zhuǎn)錄
(TPH, 5-羥色胺合成中的關(guān)鍵酶))。雌激素受體(3激動劑的實(shí)例可以 PCT國際公開WO 01/82923(公開于2001年11月8日)和WO 02/41835
(公開于2002年5月20日)中發(fā)現(xiàn)，它們的全部內(nèi)容都在此引入作為 參考。
"雄激素受體調(diào)節(jié)劑"是指干擾或者抑制雄激素結(jié)合至受體的化合 物，與機(jī)制無關(guān)。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包含非那甾胺以及其它5oc-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他米特、必卡他胺、利阿唑和阿比特龍醋酸鹽。
"破骨細(xì)胞質(zhì)子三磷酸腺苷酶抑制劑，，是指質(zhì)子三磷酸腺苷酶的抑 制劑，發(fā)現(xiàn)于破骨細(xì)胞的頂膜上，并且據(jù)報道，其在骨吸收過程中起著 顯著的作用。此質(zhì)子泵代表著設(shè)計可能可以用于治療和預(yù)防骨質(zhì)疏松癥 和相關(guān)代謝疾病的骨吸收抑制劑的誘人目標(biāo)。參見C. Farina等人， "Selective inhibitors of the osteoclast vacuolar proton ATPase as novel bone anti謂rptive agents", DDT, 4:163-172 ( 1999)，其全部內(nèi)容在此 引入作為參考。
"HMG-CoA還原酶抑制劑"是指3-羥基-3-曱基戊二酰-輔酶A還 原酶的抑制劑。對HMG-CoA還原酶具有抑制活性的化合物可以通過使
用現(xiàn)有技術(shù)中眾所周知的驗定法輕易得到鑒定。例如，參見美國專利 4,231,938第6欄和WO 84/02131第30 ~ 33頁中描述或者引用的測定法。 當(dāng)在此使用時，術(shù)語"HMG-CoA還原酶抑制劑"和"HMG-CoA還原酶 的抑制劑"具有相同的含義。
可以使用的HMG-CoA還原酶抑制劑的實(shí)例包括但不限于洛伐他汀 MEVACOR ;參見美國專利Nos. 4,231,938, 4,294,926和4,319,039 )、 辛伐他汀(ZOCOR ;參見美國專利Nos. 4,444,784、 4,820,850和 4,916,239)、普伐他汀(PRAVACHOL ;參見美國專利Nos. 4,346,227、 4,537,859、 4,410,629, 5,030,447和5,180,589 )、氟伐他汀(LESCOL ; 參見美國專利Nos. 5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、 5,290,946和5,356,896 )、阿伐他汀(LIPITOR ;參見美國專利Nos.5,273,995、 4,681,893、 5,489,691和5,342,952 )和西立伐他汀(還稱為 西伐他汀和BAYCHOL ;參見美國專利No. 5,177,080 )。這些和另外可 以用于本發(fā)明方法中的HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)式描述于M. Yalpani的"Cholesterol Lowering Drugs", Chemistry & Industry, 85 ~ 89 頁的第87頁(1996年2月5日)中和美國專利Nos. 4,782，084以及 4,885,314中。在此使用的術(shù)語"HMG-CoA還原酶抑制劑"包含所有藥學(xué)上可接受的內(nèi)酯和開放酸形式(即，其中內(nèi)酯環(huán)開放從而形成游離 酸)，以及具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物的鹽和酯形式，并 且因此上述鹽、酯、開放酸和內(nèi)酯形式的用途都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。 內(nèi)酯部分的實(shí)例及其相應(yīng)的開放酸形式如下結(jié)構(gòu)I和II所示。在其中可以存在開放酸形式的HMG-CoA還原酶抑制劑中，鹽形式 和酯形式優(yōu)選可以由開放酸形成，并且所有這些形式都包含在在此使用 的術(shù)語"HMG-CoA還原酶抑制劑"的含義內(nèi)。優(yōu)選HMG-CoA還原酶 抑制劑選自洛伐他汀和辛伐他汀，并且最優(yōu)選辛伐他汀。在此，關(guān)于 HMG-CoA還原酶抑制劑的術(shù)語"藥學(xué)上可接受的鹽"將意指用于本發(fā) 明中的化合物的無毒鹽，它們通常通過游離酸與適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)或者無機(jī)石咸 進(jìn)行反應(yīng)制備，尤其是那些由陽離子形成的鹽，陽離子例如鈉、鉀、鋁、 4丐、鋰、鎂、鋅和四曱銨，以及由胺形成的鹽，胺例如氨、乙二胺、N-甲基葡萄糖胺、賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸、膽堿、N,N'-二千基乙二胺、 氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、l-對氯芐基-2-四氫 吡咯-l'-基-曱基苯并咪唑、二乙胺、哌嗪和三(羥曱基)氨基曱烷。 HMG-CoA還原酶抑制劑的鹽形式的其它實(shí)例可以包含但不限于，醋酸 鹽、苯磺酸鹽、苯曱酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、 溴化物、乙二胺四乙酸鉤鹽、右旋樟腦磺酸、碳酸鹽、氯化物、克拉維開放酸 II酸鹽、檸檬酸鹽、二鹽酸化物、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、依托紅 霉素、乙磺酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙 醇?；⑸⑺猁}、己基間苯二酸鹽、哈胺、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥基萘 曱酸鹽、碘化物、異硫代硫酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果 酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、曱基硫酸鹽、粘酸鹽、萘磺酸
鹽、硝酸鹽、油酸鹽、乙二酸鹽、pamaote、棕櫚酸鹽、泛酸鹽、磷酸 酯/二磷酸鹽、多聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式醋酸鹽、 琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、8-氯茶堿鹽、曱苯磺酸鹽、三乙基碘 化物和戊酸鹽。
所述HMG-CoA還原酶抑制劑化合物的酯類衍生物可以作為前藥， 當(dāng)將其吸收到恒溫動物血液中去時，酯類衍生物可以以一定方式裂開以
釋放藥物形式和使得藥物提供改善的治療效能。
以上所應(yīng)用的"整聯(lián)蛋白受體拮抗劑"是指選擇性拮抗、抑制或者 抵消生理配體結(jié)合至avP3整聯(lián)蛋白的化合物，指選擇性拮抗、抑制或者 抵消生理配體結(jié)合至avPs整聯(lián)蛋白的化合物，指拮抗、抑制或者抵消生 理配體結(jié)合至av(33整聯(lián)蛋白和avp5整聯(lián)蛋白的化合物，和指拮抗、抑制 或者抵消表達(dá)于毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞上的特定整聯(lián)蛋白的化合物。該術(shù)語 還指avP6、 av)38、 0df3j、 ot2pi、 a5(3i、 ot6^和016(34整聯(lián)蛋白4吉抗劑。該 術(shù)語還指avp3、 avp5、 owp6、 av(38、 a!p!、 0^、 a^、 006|31和016卩4整聯(lián) 蛋白任何組合的拮抗劑。H. N. Lode和其同事，PNAS USA，96:1591-1596, 1999年，在自發(fā)肺瘤轉(zhuǎn)移的根除中，已經(jīng)觀察到血管原性av整聯(lián)蛋白拮 抗劑和腫瘤特異性抗體細(xì)胞因子(白細(xì)胞介素-2)融合蛋白之間的協(xié)同 作用。他們的結(jié)果表明這種聯(lián)用對于癌癥和轉(zhuǎn)移性腫瘤生長的治療可能 有用。av|33整聯(lián)蛋白受體拮抗劑通過與所有現(xiàn)有藥物不同的新機(jī)理抑制 骨吸收。整聯(lián)蛋白是介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)相互作用的異源二聚的 橫跨膜粘著受體。ot和(3整聯(lián)蛋白亞單位非共價相互作用，并且以二階陽
離子依賴方式結(jié)合細(xì)胞外基質(zhì)配體。破骨細(xì)胞上最大量的整聯(lián)蛋白是 av|33 (>107/破骨細(xì)胞)，它們看來似乎在對細(xì)胞遷移和極化至關(guān)重要的 細(xì)胞骨架組織中起著限速的作用。av(33的拮抗作用選自骨吸收抑制作 用、再狹窄抑制作用、黃斑變性抑制作用、關(guān)節(jié)炎抑制作用和癌癥以及 轉(zhuǎn)移性生長抑制作用。
"成骨細(xì)胞合成代謝劑"是指構(gòu)造骨的試劑，例如PTH。已經(jīng)表明，甲狀旁腺激素(PTH)或者它的氨基末端片段及其類似物的間歇給藥在 動物和人類中預(yù)防、阻止、部分逆轉(zhuǎn)骨損害和刺激骨生成。關(guān)于其論述，參考D. W. Dempster等人，"Anabolic actions of parathyroid hormone on bone"， EndocrRev, 14:690=709 ( 1993 )。研究已經(jīng)表明了甲狀旁腺激素在刺激骨生成并且從而提高骨質(zhì)量和強(qiáng)度中的臨床益處。結(jié)果報道于 RMNeer等的NewEng JMed, 344:1434-1441 (2001 )中。此外，曱狀旁腺激素相關(guān)蛋白質(zhì)片段或者其類似物，例如PTHrP-(1-36)已經(jīng)表明具有有效的抗鈣尿作用[參見M. A. Syed等人， "Parathyroid hormone-related protein- ( 1-36) stimulates renal tubular calcium reabsorption in normal human volunteers: implications for the pathogenesis of humoral hypercalcemia of malignancy " , JCEM , 86:1525-1531 ( 2001 )],并且還可以具有成為治療骨質(zhì)疏松癥的合成代 謝劑的可能性。"維生素D"包括但不限于維生素D3 (膽鈣化醇)和維生素D2 (麥 角鈣化醇)，它們是天然存在的維生素D ( loc-羥基維生素D; 25-羥基維 生素D和la,25-二羥基維生素D )的羥基化生物學(xué)活性代謝產(chǎn)物的生物學(xué)惰性前體。維生素D2和維生素D3在人類中具有相同的生物學(xué)效力。當(dāng)維生素D2或者D3進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)時，它通過細(xì)胞色素P45o-維生素D-25-羥化酶進(jìn)行羥基化，從而得到25-羥基維生素D。所述25-羥基維生素D 代謝產(chǎn)物是生物學(xué)惰性的，并且它在腎中通過細(xì)胞色素P450-單加氧酶 25 (OH) D-la-羥化酶得到進(jìn)一步羥基化，從而給出1,2S二羥基維生素 D。當(dāng)血清鈣降低時，甲狀旁腺激素(PTH)的形成增加，它通過將25-羥基維生素D轉(zhuǎn)化成1,25-二羥基維生素D調(diào)節(jié)4丐的體內(nèi)平衡和提高血 漿鈣水平。認(rèn)為1,25-二羥基維生素D是維生素D對鈣和骨骼代謝產(chǎn)生作用的 物質(zhì)。所述1,25-二羥基代謝產(chǎn)物是保持鈣吸收和骨骼完整性所需的活性 激素。通過將單核細(xì)胞干細(xì)胞誘化異化成破骨細(xì)胞和將鈣保持在正常范 圍內(nèi)，鉤的體內(nèi)平衡通過1,25-二羥基維生素D得到保持，這通過將鉤 羥磷灰石沉積在骨骼表面上導(dǎo)致骨鹽沉積，參見Holick， MF, Vitamin D photobiology， metabolism, and clinical applications, ，， In: DeGrootL， BesserH， Burger HG等人編輯，Endocrinology,第三版，990-1013( 1995 )。 然而，升高的la,25-二羥基維生素D3的水平會導(dǎo)致血液中鈣濃度升高和由骨骼代謝對鈣濃度的異常調(diào)節(jié)，導(dǎo)致高鈣血癥。la,25-二羥基維生 素D3還間接調(diào)節(jié)骨骼代謝中的破骨活性，并且可以預(yù)期其升高的水平 可以增強(qiáng)骨質(zhì)疏松癥中的過度骨吸收。"合成維生素D類似物，，包括與維生素作用相似的非天然存在的化合物。"非甾族抗炎藥物"或者NSAIDs經(jīng)環(huán)加氧酶(COX) -1和COX-2 抑制花生四烯酸向促炎性前列腺素的代謝。NSAIDs的非限制性實(shí)例包 括阿斯匹林、布洛芬、萘普生、雙氯芬酸、依托度酸、fenoporfen、 氟比洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、美洛昔康、萘丁美酮、奧沙普 秦、吡羅昔康、舒林酸、托美汀、二氟苯水楊酸、-曱氯胺苯酸鹽和苯丁 峻酮。"選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑"或者COX-2抑制劑是指抑制COX-2 輔酶的非甾族抗炎藥物(NSAID)，其有助于體內(nèi)疼痛和炎癥。COX-2 抑制劑的非限制性實(shí)例包括塞來考昔、艾托考昔、帕瑞考昔、羅非考 昔、伐地考昔和魯米昔布。"白細(xì)胞間介素-ip抑制劑，，或者IL-1(3是指IL-1的抑制劑，它是由 活化T-淋巴細(xì)胞和加強(qiáng)它們對促細(xì)胞分裂劑或者抗原的響應(yīng)的單核細(xì) 胞、巨噬細(xì)胞和其它細(xì)胞形成的可溶性因子。IL-1(3抑制劑的非限制性實(shí) 例包括雙醋瑞因和大黃酸。"LOX/COX抑制劑，，是指所有涉及花生四烯酸途徑的三種主要酶 (即，5-LOX、 COX-l和COX-2)的抑制劑。LOX/COX抑制劑的非限 制性實(shí)例為利克飛龍(licofelone )。如果配制成固定劑量，那么所述組合產(chǎn)品使用如下所述劑量范圍的 本發(fā)明化合物和在其批準(zhǔn)劑量范圍內(nèi)的其它藥學(xué)活性劑。當(dāng)組合制劑不 適宜時，本發(fā)明化合物可以另外與已知的藥學(xué)上可接受的試劑 一起順序 使用。與本發(fā)明化合物相關(guān)的術(shù)語"給藥"及其變形(例如，"用藥"化 合物)，意指將化合物或者化合物的前體藥物引入到需要治療的動物系 統(tǒng)中。當(dāng)本發(fā)明化合物或者其前藥與一種或多種其它活性劑(例如細(xì)胞 毒素劑等等)組合提供時，應(yīng)當(dāng)將"給藥"及其變形理解為包含所述化 合物或者其前藥和其它試劑同時和順序引入。本發(fā)明包括本發(fā)明化合物 的前藥。通常，所述前藥將是可以在體內(nèi)輕易轉(zhuǎn)換成所需要的化合物的本發(fā)明化合物的功能性衍生物。因此，在本發(fā)明治療方法中，術(shù)語"給 給藥患者后體內(nèi)轉(zhuǎn)化成指定化合物的化合物進(jìn)行的多種所述癥狀的治療。選擇和制備合適前藥衍生物的常規(guī)程序記載在例如"Design of Prodrugs",編者H. Bundgaard， Elsevier, 1985，將其全文引入作為參考。的活性物質(zhì)。在本文中使用的術(shù)語"組合物"意圖包括含有指定量的指定成分的 產(chǎn)品，以及任何由指定量的指定成分的組合直接或者間接得到的產(chǎn)品。在此使用的術(shù)語"治療有效量"是指能夠在組織、系統(tǒng)、動物或者 人類中引起生物反應(yīng)或者藥物反應(yīng)的活性化合物或者藥物制劑的量，其 由研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)療醫(yī)生或者其他臨床醫(yī)生進(jìn)行探索。在此使用的術(shù)語疾病的"治療"包括預(yù)防疾病，即導(dǎo)致疾病的臨 床癥狀不在哺乳動物中發(fā)展，所述哺乳動物可能暴露于疾病或者易感染 所述疾病，但是又沒有經(jīng)歷或者顯示疾病癥狀；抑制疾病，即阻止或者 降低疾病或者其臨床癥狀的發(fā)展；或者減輕疾病，即導(dǎo)致疾病或者其臨 床癥狀消退。在此使用的術(shù)語"骨吸收"是指一個過程，經(jīng)該過程破骨細(xì)胞降解骨。本發(fā)明還包含用于治療骨質(zhì)疏松癥或者其它骨骼病癥的藥物組合 物，包括給藥治療有效量的本發(fā)明化合物，含有或者不含有藥學(xué)上可接 受的載體或者稀釋劑。本發(fā)明適宜的組合物包括含有本發(fā)明化合物和藥 理學(xué)上可接受的載體(例如鹽水，pH值水平為例如7.4)的水溶液。所 述溶液可以通過局部彈丸注射引入到患者血液中。當(dāng)將根據(jù)本發(fā)明的化合物給藥入人類對象時，每日劑量通常由開藥 醫(yī)師確定，同時劑量通常依據(jù)個體患者的年齡、體重和反應(yīng)以及患者癥 狀的嚴(yán)重程度而不同。在一個示范性應(yīng)用中，將適宜量的化合物給藥到對組織蛋白酶依賴 狀態(tài)進(jìn)行治療的哺乳動物。當(dāng)用來產(chǎn)生所顯示的效果時，本發(fā)明的口服 劑量為約0.01毫克/千克體重/天(mg/kg/天)~約100 mg/kg/天，優(yōu)選 0.01 ~ 10 mg/kg/天，并且最優(yōu)選O.l ~5.0 mg/kg/天。對于口服給藥，組 合物優(yōu)選以片劑形式提供，其中含有0.01、 0.05、 0.1、 0.5、 1.0、 2.5、5.0、 10.0、 15.0、 25.0、 50.0、 100和500毫克的活性成分以便根據(jù)進(jìn)行 治療的患者的癥狀調(diào)整給藥劑量。所述藥物一般含有約0.01 mg~約500 mg活性成分，優(yōu)選約lmg 約100mg活性成分。對于靜脈內(nèi)給藥，在 恒速輸液期間，最優(yōu)選的劑量為約0.1 約10mg/kg/min。有利地，本發(fā) 明化合物可以以單一 日劑量給藥，或者每日總劑量可以分為每日兩次、 三次或者四次劑量給藥。此外，本發(fā)明的優(yōu)選化合物可以以鼻內(nèi)形式經(jīng) 局部使用合適的鼻內(nèi)載體進(jìn)行給藥，或者經(jīng)透過皮膚路線，利用那些本 領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的皮膚表層貼片形式進(jìn)行給藥。為了以透皮分配 系統(tǒng)的形式進(jìn)行給藥，劑量給藥當(dāng)然將持續(xù)整個給藥方案期間而非間歇 性的給藥。本發(fā)明化合物可以與其它用于治療組織蛋白酶介導(dǎo)癥狀的試劑組分開或者單一組合的形式同時給藥。因此，應(yīng)當(dāng)將^發(fā)明理解為1含所 有上述聯(lián)合治療或者輪流治療的方案，并且術(shù)語"給藥"應(yīng)當(dāng)據(jù)此進(jìn)行 理解。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明化合物與其它可用于治療組織蛋白酶介導(dǎo)狀態(tài) 的試劑的組合范圍原則上包含任何與可用于治療與雌激素功能相關(guān)病 癥的藥物組合物的組合。因此，本發(fā)明的范圍包含本發(fā)明要求保護(hù)的化合物協(xié)同第二試劑的 應(yīng)用，所述第二試劑選自有機(jī)雙膦酸酯；選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑； 雄激素受體調(diào)節(jié)劑；破骨細(xì)胞質(zhì)子三磷酸腺苷酶抑制劑；HMG-CoA還 原酶抑制劑；整聯(lián)蛋白受體拮抗劑；成骨細(xì)胞合成代謝劑，例如PTH; 維生素D;合成維生素D類似物；非甾族抗炎藥物；選擇性環(huán)加氧酶-2 抑制劑；白細(xì)胞間介素-ip抑制劑；LOX/COX抑制劑；和其藥學(xué)上可接 受的鹽及其混合物。根據(jù)包含于本文中的教導(dǎo)，本發(fā)明的這些和其它方面將是顯而易見的。 定義本發(fā)明化合物可以具有不對稱中心、手性軸和手性面(如E丄.Eliel 和S.H. Wilen, Stereochemistry of Carbon Compounds, John Wiley & Sons, New York, 1994， pi 119-1190中所述)，并且可以作為外消旋物、夕卜消 旋混合物和單一非對映異構(gòu)體存在，所有可能的異構(gòu)體及其混合物(包 括旋光異構(gòu)體)都包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。此外，在此公開的化合物可以以互變異構(gòu)體形式存在，兩種互變異構(gòu)形式都意圖包括在本發(fā)明范圍 內(nèi)，即便僅僅表明了一種互變結(jié)構(gòu)。例如，以下化合物A的任何權(quán)利要求都應(yīng)當(dāng)理解為包括互變結(jié)構(gòu)B，并且反之亦然，及其混合物。
當(dāng)任何組成部分中的任何變量(例如R1、 R2、 W等等)出現(xiàn)多于 一次時，其各次出現(xiàn)時的定義獨(dú)立于其再次出現(xiàn)時的定義。并且，只有 當(dāng)組合能夠產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物時，取代基和/或變量的組合才是允許的。 從取代基畫入環(huán)系統(tǒng)中的線表示所示鍵可以連接在任何可取代環(huán)碳原 子上。如果所述環(huán)為多環(huán)，那么該鍵僅僅連接在最接近的環(huán)上的任何適 宜碳原子上。
和取代形式進(jìn)行選擇，從而提供化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定并且可以通過本領(lǐng)域已知 的方法以及以下所述方法由易于得到的原料輕易合成的化合物。如果取 代基自身被多于一個基團(tuán)取代，那么應(yīng)當(dāng)理解所述多個基團(tuán)可以在相同 碳原子上或者在不同碳原子上，只要得到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)即可。短語"任選被 一個或者多個取代基取代"應(yīng)當(dāng)理解為等價于短語"任選被至少一個取 代基取代"，在所述情形中，優(yōu)選實(shí)施方案將具有0 3個取代基。除非另作說明，在此使用的"烷基"意圖包括具有1 ~ IO個碳原子 的支鏈和直鏈的飽和脂族烴基。例如，在"C^ Cu)烷基"中的d do 定義為包括在直鏈、支鏈或者環(huán)狀結(jié)構(gòu)中具有1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9或者IO個碳原子的基團(tuán)。例如，"Ci do烷基"特別包括曱基、乙基、 丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基等等。
除非另有說明，術(shù)語"鹵代烷基"指由1-5個，優(yōu)選l-3個卣素取 代的如上定義的烷基。代表性實(shí)例包括但不限于三氟曱基、二氯乙基等。在此使用的"芳基"是指任何穩(wěn)定的在各環(huán)中具有至多12個原子 的單環(huán)或者二環(huán)碳環(huán)，其中至少一個環(huán)是芳香環(huán)。上述芳基單元的實(shí)例 包括苯基、萘基、四氫萘基、茚滿基、聯(lián)苯基、菲基、蒽基或者苊基。在芳基取代基是二環(huán)并且一個環(huán)是非芳香環(huán)的情況中，可以理解，所述 連接是通過芳環(huán)進(jìn)行的。在此使用的術(shù)語"雜芳基"表示各環(huán)中具有至多10個原子的穩(wěn)定 的單環(huán)、二環(huán)或者三環(huán)，其中至少一個環(huán)是芳香環(huán)并且含有1~4個選 自O(shè)、 N、和S的雜原子。在此定義范圍內(nèi)的雜芳基包括但不限于苯 并咪峻基、苯并吹喃基、苯并吹咱基、苯并吡唑基、苯并三哇基、苯并 p塞吩基、苯并哺唑基、咕唑基、呼啉基、噌啉基、呋喃基、二氬巧l哚基、 吲哚基、中氮茚基(mdolazinyl)、吲唑基、異苯并呋喃基、異氮雜茚基、 異喹啉基、異噻唑基、異嗜唑基、萘吡啶基、嗜二唑基、嚅唑基、嚅唑 啉、異p惡唑啉、吡喃基、吡漆基、吡唑基、噠漆基、吡，定并吡咬基、吡 口定基、嘧咬基、口比咯基、會唑啉基、喹啉基、p奎喔啉基、四唑基、四唑 并吡咬基、噻二唑基、p塞哇基、噻吩基、三唑基、二氫苯并咪峻基、二 氫苯并呋喃基、二氬苯并噻吩基、二氫苯并哺唑基、二氫吲哚基、二氫 喹啉基、亞曱二氧基苯、苯并噻唑基、苯噻吩基、喹啉基、異喹啉基、 哺唑基和四氫喹啉。在其中雜芳基取代基是二環(huán)取代基并且一個環(huán)是非 芳香環(huán)或者不包含雜原子的情況下，可以理解，所述連接分別通過芳環(huán) 或者通過含雜原子的環(huán)進(jìn)行。如果雜芳基含有氮原子，可以理解，其相 應(yīng)的N-氧化物也包含在該定義中。如熟練的技術(shù)人員所理解，在此使用的"卣代"或者"卣素"意指 包括氯、氟、溴和碘。在某些情況下，取代基可以被定義具有一定范圍(包括零)的碳， 例如(CQ-C6)亞烷基-芳基。如果芳基為苯基，則該定義將包括苯基自 身以及-CH2Ph, -CH2CH2Ph， CH ( CH3) CH2CH (CH3) Ph等等。本發(fā)明還包括式I化合物的N-氧化物衍生物和受保護(hù)的衍生物。例 如，當(dāng)式I化合物含有可氧化的氮原子時，可以通過本領(lǐng)域熟知的方法 將氮原子轉(zhuǎn)化成N-氧化物。并且，當(dāng)式I化合物含有比如羥基、羧基、 硫醇或者任何含有氮原子的基團(tuán)時，可以用適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基對這些基團(tuán)進(jìn) 行保護(hù)。適當(dāng)保護(hù)基的綜合目錄可以在T.W.Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley&Sons, Inc., 1981中發(fā)現(xiàn)，其全部內(nèi)容在 此引入作為參考。式I化合物的受保護(hù)衍生物可以通過本領(lǐng)域熟知的方 法進(jìn)行制備。本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括無機(jī)或者有機(jī)酸形式的本發(fā)明化合物的常規(guī)無毒鹽。例如，常規(guī)的無毒鹽包括由無機(jī)酸得到的鹽， 所述無機(jī)酸比如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、胺磺酸、磷酸和硝酸等等，以 及由有機(jī)酸制備的鹽，所述有機(jī)酸比如醋酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、 硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、樸酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯基乙酸、谷氨酸、安息香酸、水楊酸、磺胺酸、2-乙酰氧基-安息香酸、富馬酸、曱苯磺酸、曱磺酸、乙基二磺酸、草酸、羥乙 磺酸和三氟乙酸等等。如上所述藥學(xué)上可接受的鹽以及其它一般藥學(xué)上可接受的鹽的制備由Berg等人，"Pharmaceutical Salts", J.Pharm.Sci., 1977, 66:1-19進(jìn)行了更全面的描述，其全文在此引入作為參考。本發(fā)明 化合物藥學(xué)上可接受的鹽，可以由含有堿性或者酸性部分的本發(fā)明化合 物通過常規(guī)化學(xué)方法進(jìn)行合成。通常，堿性化合物的鹽或者通過離子交 換色譜法進(jìn)行制備，或者通過在適當(dāng)溶劑或者多種溶劑組合中，使游離 堿與化學(xué)計算量或者與過量的形成期望鹽的無機(jī)酸或有機(jī)酸反應(yīng)進(jìn)行 制備。類似地，酸性化合物的鹽通過與適宜的無機(jī)或者有機(jī)堿反應(yīng)而得 到形成。對于本說明書目的，以下縮略語具有所示含義 BuLi二正丁基鋰 CBr廣四溴甲烷 CH2C1^二氯曱烷 CHClf氯仿 (CH30) 20)=碳酸二曱酯 DAST二二乙基氨基三氟化硫 DIBAL-H^二異丁基氬化鋁 DIPEA-二異丙基乙胺 DNfi^N,N-二曱基曱酰胺 DMSO二曱亞砜 Et3E^三乙胺 EtOKH乙醇 KH2PO產(chǎn)磷酸二氫鉀 HCH氫氯酸 1XH離去基團(tuán) MeOH-曱醇MgB產(chǎn)溴化鎂MgSO廣硫酸鎂Na2CO產(chǎn)碳酸鈉NaOMe-甲醇鈉Na2SOf硫酸鈉PC1^五氯化磷PdCl2 (dppf) =[1,1'誦二 (二苯膦基)二茂鐵]二氯化鈀(II)PG—呆護(hù)基PPh^三苯基膦Pr2NEt=N,N-:異丙基乙胺PyBOP-苯并三唑-l-基氧基三(吡咯烷基)轔-六氟磷酸鹽 rt:室溫sat. aq.:飽和水溶液TBAF^四丁基氟化銨丁們=三氟曱烷磺酸鹽THF二四氫吹喃tlc-薄層色譜法TMSB產(chǎn)溴代三曱基曱硅烷Et二乙基n-P產(chǎn)正丙基i-P產(chǎn)異丙基n-Bi^正丁基i-Bi^異丁基s-BuH中丁基t-Bi^叔丁基方案本發(fā)明的化合物可以根據(jù)如下所示的方案1制備。被結(jié)合到可接受 的手性助劑的受保護(hù)的4-羥基-2-丁烯酸與合適的2-取代的-l,3-丁二烯 在合適的路易斯酸催化劑的存在下于低溫進(jìn)行Diels-Alder反應(yīng)。非對映體富集烯醇-醚的中間體與含水酸的水解產(chǎn)生酮，其通過用合適的卣化試 劑例如DAST 、 PC15或肼/CuCl2/Et3N處理而轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的偕-二鹵化的化合物(Ri,R^氯或氟)。備選地，該助劑可以在引入囟素取代基之前被除 去。手性助劑的還原去除將對映體富集(其被氧化為醛并且與4-(曱硫 基)-苯基乙酸酯的金屬化衍生物反應(yīng))的醇釋放出來。所得羥醇的氧化 得到了酮-S旨，其與N-單取代的-肼在合適的催化劑存在下反應(yīng)得到羥基 吡唑。該羥基基團(tuán)隨后轉(zhuǎn)化為合適的離去基團(tuán)(例如氯、溴、碘或烷基 /芳基磺酸酯)并且曱基硫醚被氧化為相應(yīng)的曱基砜。用氫在鈀/炭的存 在下處理得到離去基團(tuán)的還原去除。保護(hù)基團(tuán)隨后的斷裂將伯醇釋放出 來，其被氧化為相應(yīng)的羧酸并且偶合到1-氨基環(huán)丙烷腈得到本發(fā)明的化 合物。方案1本發(fā)明的化合物也可以根據(jù)方案2制備，如下所示。由此，來自1,3-丁二烯和W-取代-(2E )-3-( 4-溴-lH-吡唑-3-基)-丙-2-烯酸的Diels-Alder 加成物(參見 WO 2005/000800 的實(shí)施例 4 )可以通過 TMSBr/DMSO/DIPEA而轉(zhuǎn)化為溴代內(nèi)酯(參見Miyashita, K.; Tanaka,A.; Mizuno, H.; Tanaka, M.; Iwata, C. J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 1994, 847-851 )。曱醇鹽催化的內(nèi)酯開環(huán)提供了溴代羥基酯，其通過氧 化醇隨后例如用鋅的還原脫溴化而轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酮。所述酮隨后通過用 DAST或肼/CuCl2/Et3N處理來分別轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的偕-二浹(W,R^F)或 偕-二氯(R^,R^C1)化合物(參見Takeda， T.; Sasaki, R.; Yamauchi, S.; Fujiwara, T. Tetrahedron 1997， 53， 557 )。用含水石咸來皂化酯官能 團(tuán)，用1-氨基-環(huán)丙烷腈偶合，氧化曱基硫醚為相應(yīng)的甲基砜，提供本 發(fā)明的化合物。方案2<formula>formula see original document page 33</formula>以下實(shí)施例描述了所選的本發(fā)明化合物的合成，且用于闡述性目 的，并不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氟-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-^基]環(huán)己烷曱酰胺二異丙基乙基胺(51 mL， 290 mmol)被緩慢加入到機(jī)械攪拌的0 。C漿料(由在乙腈(260 mL)中的{2-[ (4R) -4-芐基-2-氧代-1>嚅唑烷 -3-基]-2-氧代乙基}膦酸酯(94.8 g， 267 mmol;參見Shapiro， G.; Chengzhi, C. Tetrahedron Lett. 1992, 33， 2447 )和干燥的氯化鋰(12.5 g, 280 mmol) 組成)。攪拌10mn之后，將2-芐基氧基乙醛(40.0 g， 267 mmol)在 乙腈(20mL)中的溶液在10分鐘內(nèi)滴加。隨后除去冷卻浴，將反應(yīng)混 合物在室溫攪拌12小時，隨后在醚和水之間分配，層分離。用額外的 醚萃取含水相，將合并的有機(jī)相(總共700mL)與2MHC1 ( 350 mL ) 在rt攪拌l小時。隨后用飽和NaCl和NaHC03水溶液洗滌有機(jī)相，然 后經(jīng)Na2S04和MgS04的混合物干燥，真空濃縮。硅膠上的殘余物的快 速色譜法(用10/90丙酮/苯洗脫)得到(4R) -4-芐基-3-[ (2E) -4-(芐 基氧基)丁-2-烯酰基]-l，3-p惡唑烷-2-S同，用醚研制則為無色固體。NMR (500 MHz， d6-丙酮)6 7.57 (1H, d, J = 15.6 Hz), 7.43-7.27 (IOH， m), 7.21-7.15 (1H, m), 4.84 (1H, t, J = 8.2 Hz), 4.64 (2H, s), 4.43 (1H, t, J - 8.5 Hz). 4.32 (2H, m)， 4.29 (1H' dd, J - 2.9, 8.9 Hz)， 3.24 (1H, dd, J = 3.1, 13.5 Hz), 3.03 (IH， dd, J = 8.4, 13.5 Hz).Et2AlCl ( 1.8 M，在曱苯中，158 mL, 284 mmol)溶液沿?zé)⑼弑诰?慢加入到(4R) -4-千基-3-[ (2E) -4-(千基氧基)丁-2-烯?；鵠-l,3,惡唑 烷-2-酮(70.9 g， 202 mmol)在CH2C12 ( 200 mL )中的-78。C溶液。10 分鐘之后，將2-(三甲基曱硅烷基)氧基-l,3,-丁二烯(100g， 700 mmol) 在CH2Cl2(120mL)中的溶液以相同方式在15分鐘內(nèi)引入。在-78。C繼 續(xù)攪拌過夜(18h)。然后將反應(yīng)燒瓶內(nèi)容物溫?zé)岬?5(TC。然后在45分 鐘內(nèi)小心加入THF (150mL)和6M HC1 (150mL)組成的溶液，隨后 在rt攪拌l小時。隨后將水、乙酸乙酯和(3鹽@加入，混合物過濾通過 。鹽@墊。將濾出物轉(zhuǎn)移到分液漏斗并且分層。用飽和NaCl水溶液洗滌 有機(jī)相，經(jīng)Na2S04和MgS04的混合物干燥并真空濃縮。對硅膠上的殘余物進(jìn)行快速色譜法(用13/87乙酸乙酯/苯洗脫)得到(4R) -4-芐基-3-({ (1R,2R)國2-[(芐基氧基)曱基]-4-氧代環(huán)己基}羰基)-1,3,惡唑烷-2-酮，為無色固體。'HNMR(40OMHz，dr丙酮)5 7.38-7.32 (6H, m), 7.31-7.25 (4H' m)， 4.59 4.53 (1H, m), 4.47 (2H, q, / = 8.5 Hz), 4.19 (1H， dd, / = 3.0， 9.0 Hz), 4.154.09 (1H, m), 4,03 (1H, t,- 8.6 Hz)， 3.53-3.47 (2H, m)， 3.13 (1H， dd, / = 3.4,13.6 Hz), 2.97 (1H, dd， J - 8.2,13.5 Hz), 2.70-2.60 (1H, m), 2.54-2.46 (1H, m), 2.44 (2H, d, J = 9.3 Hz), 2.41-2.29 (2H,m). 1.92-1.82 (1H,m).將Deoxofluor ( 21 mL, 110 mmol)在5分鐘內(nèi)緩慢加入到CH2C12(100 mL)中(4R) -4-千基-3- ( { (1R,2R ) -2-[(芐基氧基)甲基]-4-氧代環(huán)己基}羰基)-1,3-嚅唑烷-2-酮(18.7 g, 44.4mmo1)的(TC溶液中。在該溫度2小時之后，通過小心加入等體積的冰水猝滅反應(yīng)。相分離之后，用CH2C12萃取水層，合并的有機(jī)物用水和飽和NaHC03水溶液洗滌，干燥(Na2S04)。將含有粗產(chǎn)物的二氯曱烷溶液濃縮到100mL體積，用純化的間氯過苯甲酸(6.0 g, 35 mmol)在rt攪拌處理3小時。隨后加入額夕卜的CH2C12( 100 mL)，然后是Me2S(3mL)和Ca(OH)2(20g),在rt攪拌15分鐘。通過C鹽⑤過濾漿料并且真空濃縮濾出物。對在硅膠上的殘余物進(jìn)行的快速色譜法(用1/3乙酸乙酯/己烷洗脫)得到(4R)-4-千基-3-( {(1R,2R )-2-[(千基氧基)甲基]-4,4-二氟環(huán)己基)羰基)-l,3-貸惡唑烷-2-酮，為稠的無色液漿。'H NMR S (500 MHz, d6-丙酮)7.36>7.32 (6H, m)， 7.26 (4H, dd, / = 7.3, 24.1 Hz), 4.544.50 (1H， m), 4.484.42 (2H, m), 4.194.15 (1H, m), 3.99 (1H， t, / = 8.6 Hz), 3.80-3.74 (1H, m), 3.47 (2H, = 5.5 Hz), 3.13-3.09 (1H, m)， 2.94 (1H， dd, / = 8.2,13.5 Hz), 2.56-2.48 (1H, m), 2.26-2.12 (3H, m)' 1.95-1.71 (3H， m).在0。C將n-BuLi溶液(2.5M,在己烷中，10mL)緩慢加入到千硫 醇(3.6mL， 40 mmol)在THF ( 40 mL )中的溶液中。將所得淺黃色溶 液在(TC攪拌10 mm,隨后引入(4R ) -4-卡基-3- ( { (1R,2R) -2-[(千 基氧基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己基}羰基)-1,3-嚅唑烷-2-酮(8.52 g, 19.2 mmol)在THF ( 30 mL )中的溶液。10min之后,將LiAlH4溶液(1.0 M， 在THF中，22 mL)緩慢加入到反應(yīng)混合物中，在0。C繼續(xù)攪拌45 min。 然后將冰水緩慢加入以破壞過量的氫化物，隨后加入6MHC1 (20mL) 到pHl。用兩份乙酸乙酯萃取混合物，并且用飽和含水NaCl洗滌合并 的有機(jī)物，經(jīng)Na2S04干燥。真空濃縮并且對在硅膠上的殘余物進(jìn)行的快速色譜法(用45/55乙酸乙酯/己烷洗脫)得到{ (1R,2R) -2-[(,基 氧基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己基}甲醇，其為稠的無色液漿。'H NMR (500 MHz, d6-丙酮)S 7.36 (4H' m), 7.34-7.28 (1H, m〉, 4.564.49 (2H, m)' 3.67-3.53 (5H, m), 2.20-2.12 (1H, m), 2.09-2.02 (1H. m), 1.91-1.71 (4H, m), 1.58-1.50 (2H, m).在(TC將Dess-Martin penodinane( 9.84 g, 23.2 mmol )力口入到(1R，2R) -2-[(千基氧基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己基}甲醇(5.01 g, 20.2 mmol)在 CH2Cl2(50mL)中的溶液。將混合物在0。C攪拌5 min,然后在rt攪拌 lh。加入乙酸乙酯(100mL)、 NaHCOs的飽和水溶液(100mL)、水和 Na2S203 ' 5H20 ( 28.9 g, 120 mmol),在rt攪拌30分鐘。各層分離且水 相由額外的乙酸乙酯萃取。用飽和NaCl水溶液洗滌合并的有機(jī)物并干 燥(Na2S04)。真空濃縮，且用16/84乙酸乙酯/己烷洗脫的硅膠上的快 速色譜法得到(1R,2R) -2-[(千基氧基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己烷曱醛，為 無色液體。'HNMR (500 MHz， dj-丙酮)5 9.66 (1H， d，J - 3.0 Hz), 7,37-7.33 (4H， m), 7.31-7,29 (1H, ra), 4.52 (2H， m), 3.55 (1H, dd, / - 4,8, 9.3他),3.51-3.45 (1H, m), 2.43-2.33 (2H， m), 2.20-2.12 (2H， m), 1.98-1.66 (4H， m).n-BuLi ( 11 mL, 23 mmol)在己烷中的2.1 M溶液被緩慢加入到二 異丙基胺(4.0mL, 28mmo1)在THF ( 10mL)中的0。C溶液。在該溫 度繼續(xù)攪拌額外的IO分鐘，隨后冷卻到-78匸。[4-(甲硫基)苯基]乙酸 乙酯(4.64 g, 18.9 mmol)在THF ( 15 mL)中的溶液隨后被引入且混 合物在-78。C攪拌10 min,在-4(TC攪拌10 min,最后在(TC攪拌5 min。 將溶液再冷卻到-78。C且在5min內(nèi)沿著燒瓶壁加入(1R,2R) -2-[(芐基 氧基)曱基]-4，4-二氟環(huán)己烷曱醛(4.64g, 18.9mmo1)在THF ( 15mL) 中的溶液。在-78。C繼續(xù)攪拌30min,然后在-40。C攪拌1 h。加入NH4C1 的飽和水溶液，然后將反應(yīng)混合物溫?zé)岬絩t且在乙酸乙酯和水之間分 配。用飽和NaCl水溶液洗滌有機(jī)相并經(jīng)Na2S04干燥。真空濃縮且在由 3/7乙酸乙酯/己烷洗脫的硅膠上的快速色譜法得到3-{2-[(千基氧基) 曱基]_4,4-二氟環(huán)己基}-3-羥基-2-[4-(曱硫基)苯基]丙酸乙酯，為淺黃 色稠液漿。'H NMR (400 MHz, d6-丙酮)5 7.43-7.33 (5H, m), 7.33-7.29 (2H, m), 7.15-7.11 (2H, m), 4.66 (1H, m)， 4.574.49 (2H, m), 4.1".00 (2H, m)， 3.74 (2H, <!，■/- 10.7 Hz), 3.45 (1H， dd, J -2.8, 9.5 Hz), 2.46 (3H, s)，.84-1.75 (2H, m) 13.5 Hz)， 1.73-1.63 (1H, m), 1.17 (3H, t. / = 7.1 Hz).將草酰氯(2.9mL, 34mmol)滴加到-78。C的二曱基亞砜(2.9 mL, 41 mmol)在CH2Cl2(40mL)中的溶液。在-78。C繼續(xù)攪拌額外的10 min， 隨后沿著燒瓶壁緩慢引入3-{2-[(芐基氧基)甲基]-4,4-二氟環(huán)己基}-3-羥基-2-[4-(曱硫基)苯基]丙酸乙酯(5.09 g, 10.6 mmol)和三乙基胺 (16mL, 120 mmol)在CH2C12 (40 mL)中的溶液。混合物在-78。C保 持額外的10min,隨后快速溫?zé)岬絩t，隨后傾入分液漏斗中的2 M HC1。振蕩各層且分層，用額外份額的CH2Cl2萃取含水相。合并的有機(jī)物用水洗滌，千燥(Na2S04)且濃縮。對在硅膠上的殘余物進(jìn)行的快速色譜 法(用1/4乙酸乙酯/己烷洗脫)得到3-{2-[(芐基氧基)曱基]-4,4-二氟 環(huán)己基}-2-[4-(曱硫基)苯基]-3-氧代丙酸乙酯，為稠的棕褐色液漿。將3-{2-[(千基氧基)甲基]-4,4-二氟環(huán)己基}-2-[4-(曱硫基)苯基]-3-氧代丙酸乙酯(4.43 g, 9.31 mmol)， 1,1,2,2-四氯乙烷(100 mL)和MgS04 (50 g)組成的漿料在12(TC加熱3天。隨后在冰和水(200 mL)中冷 卻混合物，隨后加入6 M HC1至pH 1 。分層且用兩份CH2C12萃取含水 相。用水洗滌合并的有機(jī)物，干燥(Na2S04)并濃縮。在用15/85丙酮/ 苯洗脫的硅膠上的快速色譜法得到3-{(限,211)-2-[(卡基氧基)甲基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(甲硫基)苯基]-l- (2，2,2-三氟乙基)-lH-吡唑-5-醇， 作為黃色泡沫。'H NMR (400 MHz, d6-丙酮)5 9.66 (1H, br s), 7.36-7.26 (5H, m), 7.20 (4H, m), 4.78 (1H， m), 4.37 (1H， d, / = 11 Hz), 4.30 (1H' d， 《/ = 11 Hz)， 3.38 (2H' m), 2.75-2.92 (3H, m), 2.50 (3H, s), 2.41 (1H, m), 2.23 (1H, m), 2.00-1.75 (4H' m).3-((lR,2R)-2-[(千基氧基)甲基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(甲硫基)苯基]-l- ( 2,2,2-三氟乙基)"H-吡唑-5-醇(3.95 g, 7.5 mmol)和吡。定(0.95mL, 12 mmol)在CH2C12 (30 mL)中的溶液被冷卻到(TC且用三氟曱坑磺酸酐(1.5mL, 9.2mmol)處理。在0。C15分鐘后，反應(yīng)容器內(nèi)容物在水和CH2Cl2之間分配，分離各層。用額外份額的CH2Cl2萃取含水層且合并的有機(jī)物用水洗滌，干燥(Na2S04)且濃縮。在用15/85乙酸 乙酉旨/己烷洗脫的硅膠上的快速色譜法得到3-{ (1R,2R) -2-[(千基氧基) 甲基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(曱硫基)苯基]-l誦(2,2,2-三氟乙基)誦IH-吡唑-5-基三氟曱烷磺酸酯，為淺黃色固體。在0。C加入1份純化的間-氯代過氧化苯甲酸(2.62 g, 15.2mmo1) 到3-{ (1R,2R) -2-[(千基氧基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(曱硫基)苯基]-l曙(2，2,2-三氟乙基)-111-吡唑-5-基三氟曱烷磺酸酯(4.36 g， 6.63 mmol)在CH2Ch ( 40 mL )中的溶液。所得漿料在(TC攪拌5 mm,然 后在rt攪拌30min，隨后用CH2C12 ( 40 mL)稀釋處理，用二甲基硫化 物(0.25 mL)和Ca (OH) 2 (9.0 g, 160mmol)處理。在rt攪拌10min 之后，過濾(<3鹽@)混合物，真空濃縮濾出物。在用3/7乙酸乙酯/己 烷洗脫的硅膠上的快速色譜法得到3-{( 1R,2R)-2-[(芐基氧基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(曱基磺?；?苯基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-lH-吡唑-5-基三氟曱烷磺酸酯，為無色泡沫。'HNMRS 'HNMR(400 MHz, de-丙酮)8 7.97 (2H, d， = 8.1 Hz), 7.70 (2H, d, / = 8.1 Hz), 7.36-7.26 (3H， m), 7.19 (2H, m), 5.17-5.07 (2H, m), 4.35 (1H， d， J = 11.9 Hz)' 4.28 (1H, d, J = 11.9 Hz), 3.37-3,27 (2H, m), 3.13 (3H, s)， 2.97 (1H, m) 2.41 (1H m), 2.22 (1H, m)， 2.10-2.02 (2H, m), 2.00-1,80 (3H， m).將3-{ (1R,2R)隱2-[(千基氧基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(曱 基磺?；?苯基]-l-( 2,2,2-三氟乙基)-lH-吡唑-S-基三氟曱烷磺酸酯(4.54 g, 6.58mmo1)和10%釔/炭(2.20g)的混合物在乙酸乙酯(60 mL )中 于rt在氫氣氛下一起攪拌16 h。通過C鹽@過濾，濃縮濾出物且在用45/55 乙酸乙西旨/己烷洗脫的硅膠上的快速色譜法得到3-UlR,2R)-2-[(千基氧 基)曱基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(曱基磺?；?苯基]-l- (2,2,2-三氟乙 基)-lH-吡唑，為無色稠液漿。將3-{ (1R,2R)國2-[(千基氧基)甲基]-4,4-二氟環(huán)己基}-4-[4-(曱 基磺酰基)苯基]-l國(2,2,2-三氟乙基)-lH-吡唑(2.15 g， 3.97mmo1)和 Pearlman's催化劑(1.0 g)的混合物在含有乙酸(5 mL )的乙酸乙酯(50 mL)中于rt在氫氣氛下一起攪拌20 h。隨后將反應(yīng)混合物過濾通過C 鹽⑧墊，且濾出物用NaHC03和NaCl的飽和水溶液洗滌，隨后經(jīng)Na2S04 干燥。真空溶劑去除得到{ (1R,2R)誦5,5-二氟-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-lH-吡唑-3-基]環(huán)己基)曱醇，為淺黃色稠液漿。'HNMR(400M他，丙酮d ) S 8.06 (1H， s), 7.96 (2H, d, / = 8.4 Hz)' 7.79 (2H, d, / = 8.4 Hz), 5.08 (2H, q, / = 8.8 Hz), 3.70 (1H, m), 3.47 (1H, m), 3.36 (1H, m), 3.16 (3H' s), 3.09 m)， 2.38 (1H， m), 2.25 (1H, m)， 2.15-1.30 (5H,m).在(TC用Jones試劑(3.8mL)處理丙酮(40 mL )中的{ (1R,2R) -5,5-二氟-2-[4-[4-(甲基磺酰基)苯基]國l國(2,2,2-三氟乙基)-lH-吡唑-3-基]環(huán)己基)曱醇(1.64 g, 3.63mmol)溶液，隨后在rt攪拌30 min。加入水并且混合物用兩份乙酸乙酯萃取。用水洗滌合并的有機(jī)物兩次，然后用飽和的NaCl水溶液洗滌，隨后經(jīng)Na2S04干燥。真空濃縮得到 (1R,2R )隱5，5-二氟-2-[4國[4-(曱基磺?；?苯基]-l- ( 2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基]環(huán)己烷羧酸，為淺黃色泡沫。加入l份二異丙基乙基胺(3.2mL, 18mmo1)到(1R,2R) -5,5-二 氟-2-[4-[4-(曱基磺酰基)苯基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-lH-吡唑-3-基]環(huán)己 烷羧酸(1.69 g， 3.63 mmol), l-氨基環(huán)丙烷腈鹽酸鹽(1.16 g, 9.83 mmol) 和HATU(1.72g， 4.53 mmol)在DMF ( 10 mL)中的溶液，在rt攪拌 2.5h。隨后反應(yīng)容器內(nèi)容物在乙酸乙酯和水之間分配且各層分離。用額 外的乙酸乙酯萃取含水相且用2M HC1、 10% Na2C03和飽和NaCl水溶 液洗滌合并的有機(jī)物，隨后經(jīng)Na2S04干燥。真空濃縮且在用22.5/77.5 丙酮/苯洗脫的硅膠上的快速色譜法提供標(biāo)題化合物，其一旦用己烷和醚 的混合物研制則成為無色粉末.'H固R (400MHz,丙酮d6) S 8.03 (1H, s), 7.99 (2H， (!, / = 8.5 Hz), 7.83 (1H, 重疊m). 7.81 (2H， d， 《/ = 8.5 Hz). 5.05 (2H, q. / = 8.8 Hz), 3.36 (1H, m), 3.18 (3H, s), 3.12 (1H, m), 2.23 (iH, m), 2.15-1.95 (4H， m), 1.79 (1H, m), 1.37 (2H， m), 1.05 (1H, m), 0.81 (1H， m). MS: (+ESI) 531.0M+HT.實(shí)施例2(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)國5,5-二氯-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-111-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺將三氟曱烷磺酸三曱基曱硅烷基酯(2.5 mL)滴加到(4R) -4-芐基 -3- ( { (1R,2R) -2-[(千基氧基)甲基]-4-氧代環(huán)己基}羰基)-1,3-噹唑烷 -2-酉同(57.89 g， 138 mmol)和1,2陽雙-(三曱基曱硅烷基氧基)乙烷(35.4 g， 172mmo1)在CH2Cl2 ( 400 mL)中的(TC溶液，隨后在rt攪拌4h。隨后在0。C加入三乙基胺(3 mL)，且混合物由飽和NaHC03水溶液洗滌 并經(jīng)Na2S04干燥。真空濃縮得到(4R) -4-千基-3- ( { (7R,8R) -7畫[(千 基氧基)甲基]-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基}羰基)-1,3-嚅唑烷-2-酮，為棕褐色稠液漿。'H NMR (500 MHz, d -丙酮)5 7.36-7.22 (10H, m), 4.48 (1H. m), 4.42 (2H, s), 4.11 (1H, dd, / = 3.1, 8.9他)，3,97 (4H, m), 3.94-3.90 (1H, t, J = 9.0 Hz), 3.67 (1H, m)， 3.44-3.38 (2H, m)' 3.09 (1H, dd' J = 3.3, 13.5 Hz), 2.92 (1H, dd, / - 8.3, 13.5 Hz), 2.52 (IH, m), 1.97 (lH'm), 1.86-1.76 (3H， m), 1.57-1.50 (1H, m)， 1.44 (1H, t, /= 12.8 Hz).在0。C將n-BuLi溶液(2.4 M,在己烷中，75 mL )緩慢加入到卡基 硫醇(25mL, 210mmo1)在THF ( 250 mL )中的溶液。將所得淺黃色 的溶液在(TC攪拌15 min，然后引入(4R ) -4-芐基-3- ( { ( 7R,8R) -7-[(節(jié) 基氧基)曱基H,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基)羰基)-1,3-嚅唑烷-2-酮(64.2 g, 138 mmol)在THF ( 250 mL )中的溶液。30 min之后，將LiAlH4溶液 (1.0 M,在THF中，150 mL)緩慢加入到反應(yīng)混合物中，在0。C繼續(xù) 攪拌30 min。隨后將冰水(15 mL)緩慢加入以破壞過量氫化物，隨后 加入6MHC1 (110mL)至pH 4。用兩份乙酸乙酯萃取混合物且用飽和 的NaCl水溶液洗滌合并的有機(jī)物并經(jīng)Na2S04干燥。真空濃縮且對在硅 膠上的殘余物進(jìn)行的快速色譜法(用20/80丙酮/苯洗脫)得到((7R,8R) -7-[(千基氧基)曱基]-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基}曱醇，為淺黃色稠液漿。NMR (500 MHz, d6-丙酮)8 7.36 (4H， m), 7,29 (1H, m), 4.50 (2H, q， / = 9.6 Hz), 3.90 (4H, s)， 3.61 (1H， m)， 3.52-3.42 (3H, m)， 3.43 (1H， t，5.5 Hz), 1.88-1.72 (4H, m)， 1.55-1.41 (4H, m)..將在乙酸(220 mL )和水(80 mL )混合物中的{ ( 7R,8R) -7-[(千 基氧基)甲基]-1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-基}曱醇(33.6g, 115mmol)組成 的溶液在85。C加熱2h。減壓下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，殘余物在乙酸乙酯 和水之間分配。用額外份額的乙酸乙酯萃取含水相，且用飽和的NaHC03 和NaCl水溶液洗滌合并的有機(jī)物，經(jīng)Na2S04和MgS04的混合物千燥。 真空濃縮得到黃色液漿，將其置于甲醇(250 mL)中，用K2CO3(20g, 150 mmol)在rt攪拌處理30 min。隨后蒸發(fā)曱醇且將殘余物至于乙酸乙 酯中且用水、飽和的NaCl溶液洗滌，經(jīng)NazS04和MgS04的混合物千 燥。真空濃縮得到(3R,4R) -3-[(千基氧基)曱基]-4-(羥基甲基)環(huán) 己酮，其為黃色的稠液漿。'H NMR <50O MHz, (V丙酮)S 7.36 (4H， m), 7.30 (1H, m〉, 4,564.50 (2H, m〉， 3.70 (1H, m), 3.66-3.60 (2H， m), 3.56 (1H， dd' 5.4,9.3 Hz), 3.54-3.48 (1H, dd， / = 4.0， 9.3 Hz), 2,44-2.26 (4H， m), 2.13-2.07 (2H, m), 1.91 (1H, m), 1.67 (1H, m).將水合肼(110 mL. 2.3 mol)加入到活性4A分子篩粉末(110 g) 在甲醇(350 mL )中的懸浮液，在rt攪拌15分鐘。隨后將曱醇(300 mL ) 中(3R,4R) -3-[(千基氧基)甲基]-4-(羥基曱基)環(huán)己酮(27.7g， 112 mmol)的溶液加入，混合物在rt攪拌3h。過濾除去分子篩，用甲醇充 分洗滌。在高度真空下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)來蒸發(fā)掉甲醇和過量肼并在5(TC加熱除 去最后痕量的肼。同時，在rt用三乙基胺(55 mL, 400 mmol)攪拌處 理甲醇(370 mL)中的CuCl2 ( 106.6 g， 795 mmol)溶液15 mm,隨后 冷卻到0。C。將甲醇(300 mL)中的粗腙溶液隨后在35min內(nèi)滴加，隨 后在4h內(nèi)緩慢溫?zé)岬絣(TC。蒸發(fā)甲醇，殘余物在乙酸乙酯和水之間分 配，且加入濃縮的NH4OH直到所有固體溶解。振蕩各層并分離，用額 外的乙酸乙酯萃取含水相。用濃縮的NH4OH水溶液、飽和NH4C1和NaCl 水溶液洗滌合并的有機(jī)物，隨后經(jīng)Na2S04和MgS04的混合物干燥。真 空濃縮，對在硅膠上的殘余物進(jìn)行的快速色譜法(用2/3乙酸乙酯/己烷 洗脫)得到{ (1R,2R) -2-[(千基氧基)曱基]-4,4-二氯環(huán)己基}甲醇，為 淺黃色液漿。力NMR (500 MHz, d -丙酮)5 7.37 (4H, m>， 7.31 (1H, m), 4.51 (2H, q, / - 12.2 Hz), 3.65-3.51 (5H, m), 2.66 (1H, dt, / = 3.9, R3 Hz), 2.54 (1H, dq' J - 3.3,13.8 Hz〉， 2.29-2.19 (2H, m〉, 1.86 (1H， m)， 1.75 (1H, m), 1.56 (1H, m).由{ ( 1R,2R) -2-[(千基氧基)甲基]-4,4-二氟環(huán)己基}甲醇根據(jù)用于制備實(shí)施例1的流程將該物質(zhì)轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物(無色粉末)。'HNMR(50OMHz,丙酮ds) S 8.03 (1H, s), 8.01 (1H, 重疊br s)， 7.98 (2H, d， J - 8.4 Hz), 7.80 (2H' d， J = 8,4 Hz), 5.06 (2H, q, J- 8.8 Hz)， 3.43 (1H, nO, 3.29 (1H， dt， J = 3.3， 11.7 Hz)， 3.19 (3H, s〉, 2.71 (1H, m), 2.58-2.68 (3H, m), 2.00-1.94 (2H. m), I.43-1.3I (2H, m). 1.10 (1H, m)' 0.86 (1H, m). MS: (+ESI) 563.M十HT.實(shí)施例3(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氟-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l-甲基-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺N-(氰基甲基)-5,5-二氟-2-{1-甲基-3-[4-(甲硫基)苯基]-lH-吡唑-4-基}環(huán)己烷曱酰胺(參見WO 2005/000800實(shí)施例4 ) ( 795 mg, 1.84 mmol)在CH2C12 ( 10 mL )中的溶液在(TC由純化的m-CPBA ( 760 mg, 4.40 mmol)處理，在該溫度攪拌30 min。加入二甲基好u化物以猝滅過 量m-CPBA且混合物在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。有機(jī) 相被干燥(Na2S04)且濃縮，殘余物通過在二氧化硅上的快速色譜法純 化得到無色粉末的標(biāo)題化合物。=8.5 Hz)， 7.80 (1H， s), 7.77 (1H， s)， 7,72 (2H, d, / = 8.5 Hz), 3.88 (3H, s), 3.28 (1H, m), 3.14 (3H, s)， 3.03(1H,m), 2.20(1H,m)， 2.10-1.90 (4H， m), 1.80(1H'm)， 1.35(1H,m), 1.30(1H，m)， 1,00(1H,m)， 0.77 (1H, m). MS: (+ESI) 463.1〖M+H]+.實(shí)施例4(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氯-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l-甲基-1 H-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺；根據(jù)實(shí)施例3的流程制備為無色粉末，用DAST替代肼/CuCl2/Et3E (參見Takeda, T.; Sasaki, R.; Yamauchi, S.; Fujiwara, T. Tetrahedron 1997, 53, 557)用于反應(yīng)。 / - 8.5 Hz)' 7.87 (1H' s), 7.80 (1H, s), 7.71 (2H, d， / = 8,5 Hz), 3.88 (3H, s)， 3.33 (1H. m)' 3.20 (1H, m),HNMR(500MHz，丙酮d ): S 7.92 (2H, d, 7Cl、 p'HNMR(500MHz,丙酮d ): S 7.92 (2H, d,3.13 (3H, s)， 2.67 (1H, m)， 2.55-2.40 (3H, m), 1.95-1.90 (2H, m), 1.38 (1H, m), 1.32 (1H， m), 1.03 (1H. m)， 0.80 (1H, ro). MS (+ESI): 495.0M+H]+,實(shí)施例5(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氟-2-[4-[4國(甲基磺酰基)苯 基]-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷曱酰胺；根據(jù)Butler和Dewald (參見Butler， D. E.; Dewald， H. A; J. Org. Chem. 1975, 40， 1353 )的流程對5,5-二氟-2-{1-甲基-4-[4-(甲硫基)苯 基]-lH-吡唑-3-基)環(huán)己烷羧酸中的吡唑脫曱基(參見WO 2005/000800中 的實(shí)施例4)得到5,5-二氟-2-{4-[4-(甲硫基)苯基]-lH-吡唑-3-基)環(huán)己 烷羧酸。通過與1-氨基環(huán)丙烷腈偶合且用m-CBPA氧化(根據(jù)前述實(shí)施 例中的標(biāo)準(zhǔn)流程)將該化合物轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物。'HNMR(400MHz，丙酮d6): S 12.2 (1H， br s), 7.97 (2H, m), 7.92 (1H, br s), 7.78 (2H. m), 7.77 (1H, s), 3.38 (1H, br m), 3.18 (3H' s), 3,10 (1H, m)， 2.22 (2H, m)， 2.10 (2H， m), 2.00 (2H, m)， 1.35 (2H, m), O.訴(1H, m)' 0.74 (1H' m). MS (+ESI): 449 [M+Hf藥物組合物作為本發(fā)明的具體實(shí)施方案，將100 mg (1R,2R) -5,5-二氟-:^- (1-氰基環(huán)丙基)誦2匿[4-[4-(曱基磺?；?苯基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-lH-吡 唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺與充分細(xì)碎的乳糖一起進(jìn)行配制，從而得到總量 580 5卯mg，將其裝填在O號的硬膠嚢中。在本申請中公開的化合物在以下測定中顯示出了活性。此外，公開 于本申請中的化合物相對于先前公開的化合物具有增強(qiáng)的藥理學(xué)譜。測定組織蛋白酶K測定在二甲亞砜(DMSO)中，對試驗化合物濃度為500 |uM~ 0.0085 pM 的系列稀釋物(1/3 )進(jìn)行制備。然后將2 jliL取自各稀釋物的DMSO加入到50 |uL測定緩沖液(MES, 50 mM ( pH值5.5 ); EDTA, 2.5 mM; DTT, 2.5 mM和10% DMSO)和在測定緩沖液溶液中的25 ^L人類組 織蛋白酶K(0.4nM)中。在搖動板上將上述測定溶液混合5 IO秒鐘 并且在室溫下將其培養(yǎng)15分鐘。將在25 jliL測定緩沖液中的 Z-Leu-Arg-AMC ( 8 j^M )加入到上迷測定溶液中。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC)，隨后進(jìn)行10分鐘分光熒光測定法(ExX=355 nm; Em^460 nm)。通過將實(shí)驗值擬合至劑量響應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型，對抑制作用 百分比進(jìn)行計算。 組織蛋白酶L測定在二曱亞砜(DMSO)中，對濃度為500 |uM~ 0.0085 iuM的試驗化 合物的系列稀釋物(1/3 )進(jìn)行制備。然后將2 取自各稀釋物的DMSO 加入到50nL測定緩沖液(MES, 50 mM (pH值5.5); EDTA, 2.5 mM; DTT， 2.5 mM和10%DMSO)和25 |uL人類組織蛋白酶L (0.5nM)的 測定緩沖液溶液中。在搖動板上將上述測定溶液混合5 ~ 10秒鐘并且在 室溫下將其培養(yǎng)15分鐘。將在25 )LiL測定緩沖液中的Z-Leu-Arg-AMC(8|uM)加入到上述測定溶液中。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC),隨后 進(jìn)行IO分鐘分光熒光測定法(ExX=355 nm; Em人-460 nm )。通過將實(shí) 驗值擬合至劑量響應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型，對抑制作用百分比進(jìn)行計 算。組織蛋白酶B測定在二甲亞砜(DMSO)中，對濃度為500 )LiM 0.0085 iuM的試驗化 合物的系列稀釋物(1/3 )進(jìn)行制備。然后將2 mL取自各稀釋物的DMSO 加入到50 iuL測定緩沖液(MES， 50mM (pH值5.5); EDTA, 2.5 mM; DTT, 2.5 mM和10% DMSO)和25 juL人類組織蛋白酶B (4.0nM)的 測定緩沖液溶液中。在搖動板上將上述測定溶液混合5 ~ 10秒鐘并且在 室溫下將其培養(yǎng)15分鐘。將在25 |liL測定緩沖液中的Z-Leu-Arg-AMC (8)LiM)加入到上述測定溶液中。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC)，隨后 進(jìn)行10分鐘分光熒光測定法(ExX=355 nm; EmX=460 nm )。通過將實(shí) 驗值擬合至劑量響應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型，對抑制作用百分比進(jìn)行計 算。組織蛋白酶S測定在二曱亞砜(DMSO)中，對濃度為5000.0085 的試驗化合物的系列稀釋物(1/3 )進(jìn)行制備。然后將2 取自各稀釋物的DMSO 加入到50^L測定緩沖液(MES， 50mM(pH值5.5); EDTA， 2.5 mM; DTT, 2.5mM和10%DMSO)和25iuL人類組織蛋白酶S (20nM)的 測定緩沖液溶液中。在搖動板上將上述測定溶液混合5 ~ 10秒鐘并且在 室溫下將其培養(yǎng)15分鐘。將在25 pL測定緩沖液中的Z-Leu-Arg-AMC (8 jaM)加入到上述測定溶液中。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC)，隨后 進(jìn)行10分鐘分光熒光測定法(ExX=355 nm; EmX=460 nm )。通過將實(shí) 驗值擬合至劑量響應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型，對抑制作用百分比進(jìn)行計 算。在大鼠中的藥物動力學(xué) 在大鼠中的口服(PO)藥物動力學(xué) 方法顧。在各次PO血液水平研究之前，將雄性Sprague Dawley大鼠(250-400g)禁食過夜。一次將大鼠置于制動器中 一 只并且將箱體牢牢固定。通過從尾部頂 端劃破一小片(1 mm或者更小)傷口，獲得零血樣。然后通過穩(wěn)定但 是平緩的從頂部到底部的動作對尾部進(jìn)行沖擊將血液擠出。將大約0.5 mL血液收集入肝素化的真空采血管中。根據(jù)需要，將化合物制備成10 mL/kg的標(biāo)準(zhǔn)劑量體積，并且通過 16號(gauge )、 3"灌食針進(jìn)行口服給藥進(jìn)入食道內(nèi)。隨后按照與零血樣相同的方式進(jìn)行血液收集，但是不再需要劃破尾 部。用一片紗布將尾部擦凈并且如上所述擠入/沖擊入適當(dāng)標(biāo)記的管中。在取樣之后，立即對血液進(jìn)行離心、分離，將血漿置入清楚標(biāo)記的管形瓶中并且將其貯存入冷凍機(jī)中，直至進(jìn)行分析。在PO給藥之后，測定大鼠血液的一般時點(diǎn)為0、 15min、 30 min、 lh、 2h、 4h、 6h、 8h、 24h在放血4小時時點(diǎn)之后，將食物任意提供給大鼠。在研究期間一直 提供水。 賦形劑可以將以下賦形劑(具有相應(yīng)的劑量體積)用于PO大鼠血液水平測定中PEG 200/300/400 (在水中為0-60% ):等于或者小于10 mL/kg 曱基纖維素制劑(在水中為0.5%-1.0%):等于或者小于10mL/kg Tween80 (在水中為1-10%):等于或者小于10 mL/kg 用于PO血液水平研究的化合物可以為混懸劑形式。為了荻得更好 的均一性，可以將上述混懸劑置入超聲波發(fā)生器中大約5分鐘。為了進(jìn)行分析，用1.2~ 1.5倍體積的任選含有內(nèi)標(biāo)的乙腈對試樣進(jìn) 行稀釋并且對其進(jìn)行離心，從而除去蛋白沉淀物。將上清液直接注射入 帶有質(zhì)譜(MS )或者紫外線吸光度(UV)或者熒光(Fluo )檢測的C-l8 HPLC柱中。相對于利用摻入了在任選含有內(nèi)標(biāo)的乙腈中已知量藥物的 清潔血樣得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行定量。將另外任選含有內(nèi)標(biāo)的乙腈加入 至初始血液量的1.2 ~ 1.5倍體積以對應(yīng)于樣品情形。通過比較i.v.對p.o 曲線下的面積(AUC),對生物利用度(F)進(jìn)行評價。<formula>formula see original document page 46</formula>和<formula>formula see original document page 46</formula>其中C是在給定時間T時通過MS或者UV或者Fluo測定的濃度 大鼠中的靜脈內(nèi)藥物動力學(xué) 方法根據(jù)加拿大議會關(guān)于動物飼養(yǎng)的準(zhǔn)則對動物進(jìn)行圈養(yǎng)、進(jìn)食和照顧。在這些研究中使用雄性SpragueDawley ( 325-375 g)非禁食大鼠。 根據(jù)需要，將化合物制備為1 mL/kg的標(biāo)準(zhǔn)劑量體積。 利用25號的針，經(jīng)頸靜脈靜脈內(nèi)給藥有意識的大鼠所述劑量。這 構(gòu)成零時點(diǎn)。通過劃破尾部頂端的一塊(1-2 mm),在5分鐘時進(jìn)行放血。然后通過穩(wěn)定但是平緩的從尾部的頂部到底部的動作對尾部進(jìn)行沖擊以將 血液從尾部擠出。將大約0.5mL血液收集入肝素化收集管形瓶中。隨后按照相同的方式進(jìn)行放血，但是不再需要劃破尾部。用一片紗布將尾部 擦凈并且如上所述采血入適當(dāng)標(biāo)記的管中。在I.V.給藥之后，測定大鼠血液的一般時點(diǎn)為以下任意時點(diǎn)0, 5 min, 15min, 30min， lh, 2h, 4h， 6h 或 0, 5 min， 30min, 1 h, 2h, 4h， 6h, 8h' 24h賦形劑可以將以下賦形劑用于IV大鼠血液水平測定中 葡萄糖1 mL/kg Moleculosol 25%: 1 mL/kgDMSO (二甲亞砜)限制為10%的劑量體積至高達(dá)0.1 mL/千克動物PEG 200:不多于80%的PEG 200與20%無菌水混合-1 mL/kg 如果溶液渾濁，可以將葡萄糖或者碳酸氫鈉加入其中。 為了進(jìn)行分析，用1.2~ 1.5倍體積的任選含有內(nèi)標(biāo)的乙腈對試樣進(jìn) 行稀釋并且對試樣進(jìn)行離心，從而除去蛋白沉淀物。將上清液直接注射 入帶有質(zhì)譜(MS)或者紫外線吸光度(UV)或者熒光(Fluo)檢測的 C-18 HPLC柱中。相對于利用摻入了在任選含有內(nèi)標(biāo)的乙腈中已知量藥 物的清潔血樣得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行定量。將另外任選含有內(nèi)標(biāo)的乙腈 加入至初始血液量的1.2~ 1.5倍體積以對應(yīng)于樣品情形。通過比較i.v. 對p.o曲線下的面積(AUC),對生物利用度(F)進(jìn)行評價。F =AUCpo x DOSEiv x 100% AUCiv DOSEpo和AUC = (Cl+C2)*(T2-Tl)/2其中C是在給定時間T時通過MS或者UV或者Fluo測定的濃度。肝細(xì)胞培養(yǎng)對于大鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)，在0.5 mL的Krebs-Henseleit緩沖液中稀釋的 1 x 106個細(xì)胞先在37。C在95%: 5% 02: C02(B0C氣體Montreal,Canada )下于48孔板中制備20min，然后將5 pL溶解在乙腈中的10 mM 化合物溶液加入到每個孔中至50 |LiM的最終濃度。在37匸在95%: 5% 〇2: C02氣氛下培養(yǎng)2h之后，在每個孔中加入1體積的乙腈。還制備 摻入了母體化合物和空白物的被猝滅的培養(yǎng)物作為對照。 一旦樣品被轉(zhuǎn) 移，貝'J用Eppendorf 5415C離心才幾(Hamburg, Germany)在14000 rpm 離心樣品10 min,上清液用作LC/UV/MS分析。
權(quán)利要求
1.一種以下化學(xué)式的化合物其中R1是鹵代；R2是鹵代；R3是氫、C1-6烷基、C1-6鹵代烷基、C3-6環(huán)烷基、芳基或雜芳基；或其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體、或N-氧化物衍生物。
2. 權(quán)利要求l的化合物，其中Ri是氟或氯；或其藥學(xué)上可接受的 鹽、立體異構(gòu)體、或N-氧化物衍生物。
3. 權(quán)利要求2的化合物，其中W是氟或氯；或其藥學(xué)上可接受的 鹽、立體異構(gòu)體、或N-氧化物衍生物。
4. 權(quán)利要求3的化合物，其中R 是氫、C"烷基或d-6卣代烷基； 或其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體、或N-氧化物衍生物。
5. 權(quán)利要求4的化合物，其中W是Cw卣代烷基；或其藥學(xué)上可 接受的鹽、立體異構(gòu)體、或N-氧化物衍生物。
6. 權(quán)利要求4的化合物，其中W是2,2,2-三氟乙基；或其藥學(xué)上 可接受的鹽、立體異構(gòu)體、或N-氧化物衍生物。
7. 權(quán)利要求l的化合物，其為(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氟-2-[4-[4-(曱基磺酰基)苯 基]-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷曱酰胺；(1R，2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氟-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l-曱基-1 H-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺；(1R，2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氯-2-[4-[4-(甲基磺酰基)苯 基]-l-曱基-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺；(1R,2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氟-2-[4-[4-(曱基磺?；?苯 基]-l- (2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-3-基]環(huán)己烷曱酰胺;(1R，2R) -N- (l-氰基環(huán)丙基)-5,5-二氯-2-[4-[4-(甲基磺?；?苯 基]-l- (2,2，2-三氟乙基)-lH-吡唑-3-基]環(huán)己烷甲酰胺;或其藥學(xué)上可接受的鹽、立體異構(gòu)體或N-氧化物衍生物。
8. —種藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接 受的載體。
9. 權(quán)利要求1的化合物在制備可用于在需要其的哺乳動物中治療 以下疾病的藥物中的用途，所述疾病為骨質(zhì)疏杠、癥、腎上腺糖皮質(zhì)激 素誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特疾病、異常升高的骨轉(zhuǎn)換、牙周病、牙齒 損害、骨折、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍溶骨癥、骨脆癥、 動脈粥樣硬化癥、肥胖病、青光眼、慢性阻塞性肺病、轉(zhuǎn)移性骨骼疾病、 惡性胂瘤的高釣血癥或者多發(fā)性骨髓瘤，所述藥物含有有效量的根據(jù)權(quán) 利要求1的化合物。
10. —種藥物組合物，包括權(quán)利要求1的化合物和另一種選自以下 的試劑有機(jī)雙膦酸酯、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雌激素受體(3調(diào)節(jié) 劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原 酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑或者成骨細(xì)胞合成代謝劑、維生素D、 合成維生素D類似物、非甾族抗炎藥物、選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑、白 細(xì)胞間介素-l(3抑制劑、LOX/COX抑制劑及其藥學(xué)上可接受的鹽和混合 物。
11. 權(quán)利要求1的化合物和另一種試劑在制備可用于在需要其的哺 乳動物中治療以下疾病的藥物中的用途，所述另一種試劑選自有機(jī)雙 膦酸酯、選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子 ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑、成骨 細(xì)胞合成代謝劑、維生素D、合成維生素D類似物、非甾族抗炎藥物、 選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑、白細(xì)胞間介素-l(3抑制劑、LOX/COX抑制劑 及其藥學(xué)上可接受的鹽和混合物，所述疾病為骨質(zhì)疏松癥、腎上腺糖 皮質(zhì)激素誘發(fā)的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特疾病、異常升高的骨轉(zhuǎn)換、牙周病、 牙齒損害、骨折、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍溶骨癥、骨脆 癥、動脈粥樣硬化癥、肥胖病、青光眼、慢性阻塞性肺病、轉(zhuǎn)移性骨骼 疾病、惡性腫瘤的高鈣血癥或者多發(fā)性骨髓瘤。
全文摘要
本發(fā)明涉及一類新的化合物，由右式表示，其中R¹、R²、和R³的含義由本文表示，其為半胱氨酸蛋白酶抑制劑，包括但不限于組織蛋白酶K、L、S和B。這些化合物適用于治療其中顯示了骨吸收抑制的疾病，例如骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。
文檔編號C07D231/12GK101218207SQ200680024616
公開日2008年7月9日 申請日期2006年7月5日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月6日
發(fā)明者C·布萊克, J·羅比肖, R·奧巴拉, S·克蘭 申請人:默克弗羅斯特加拿大有限公司