專利名稱：一種五味子醇甲的提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明所要保護(hù)的技術(shù)方案屬于提取五味子醇甲工藝的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
五味子中包括五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子醇乙等多種成分。五味子為中醫(yī)常用的收斂固澀，益氣生津，補(bǔ)腎寧心、止咳鎮(zhèn)靜的藥物。五味子中主要含有揮發(fā)油，木脂素等成分，五味子醇甲(schisandrin)是一種藏于五味子中的全天然成分，屬于木脂素類固體粉末物質(zhì)，《中國(guó)藥典》(2000年版中藥一部)規(guī)定藥用五味子中五味子醇甲的重量含量不低于0.4％。隨著純度的增高，顏色由深變淺，直至白色粉末。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)并經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明五味子醇甲可以用作保健食品的功能添加劑以及藥品開發(fā)的原料，因此對(duì)五味子醇甲提取工藝的研究也越來(lái)越迫切，而目前國(guó)內(nèi)外對(duì)五味子醇甲的提取方法報(bào)道極少。現(xiàn)已知五味子醇甲的提取有以下二種方法一種為化學(xué)溶劑提取法，將五味子粉碎，加乙醇浸泡并在恒溫水浴上回流數(shù)小時(shí)，溶液過(guò)濾，回收溶劑，即可獲得五味子醇甲。以五味子醇甲重量含量在0.4％的五味子原藥為例，(以下同)此種方法從五味子原藥中提取五味子醇甲的提取率一般在0.2％左右，但是純度僅在2％左右，顏色為淡褐色。另一種為超臨界流體萃取方法，將五味子粉碎后用CO2超臨界設(shè)備直接進(jìn)行萃取，即可獲得五味子醇甲，其原藥中五味子醇甲的提取率接近0.4％，但是純度也僅在10％左右，顏色為深綠色。同時(shí)萃取設(shè)備復(fù)雜，投資大，操作要求嚴(yán)格，運(yùn)行成本高。綜合以上兩種方法，它們共同存在的缺陷在于所得五味子醇甲的純度都不高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種具有較高提取率、同時(shí)能提高品質(zhì)純度、工藝簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的五味子醇甲提取方法。
解決上述技術(shù)問(wèn)題的方案是一種五味子醇甲的提取工藝，五味子在經(jīng)過(guò)溶劑法提取后，將含有五味子醇甲的提取液進(jìn)行萃取，再將含有五味子醇甲的萃取物經(jīng)過(guò)柱層析分離后，將含有五味子醇甲的洗脫液中的洗脫溶劑回收，所得濃縮物即為五味子醇甲。對(duì)于原藥中五味子醇甲重量含量達(dá)到0.4％五味子而言采用上述方法獲得五味子醇甲的純度可達(dá)到50％或50％以上，為淡綠色粉末，而且收率不低于0.2％。
上述層析過(guò)程中，使用的吸附劑為硅膠粉末，在層析柱中，吸附劑與上樣量重量比不小于0.5，較佳的重量比為吸附劑∶上樣量＝0.8-1.2∶1；洗脫液為石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑，二者混合的體積比為石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1，較佳的體積比為8.5-7.5∶1，洗脫收集至無(wú)醇甲時(shí)，停止洗脫，五味子醇甲包含在洗脫液中。
上述層析過(guò)程還可以設(shè)定成兩道層析過(guò)程，即首先將含有五味子醇甲的萃取物，按照萃取物硅膠不大于1.5的重量比添加硅膠混合均勻后，將混合物上層析柱用石油醚進(jìn)行洗脫，洗脫至石油醚無(wú)顏色時(shí)，停止洗脫，取出含五味子醇甲的吸附劑部分，將該部分上第二道層析柱，第二道層析柱使用的洗脫液為石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑，二者混合的體積比為石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1，洗脫收集至無(wú)醇甲時(shí)，停止洗脫，五味子醇甲包含在洗脫液中里。兩道層析柱中的吸附劑為硅膠粉末，在層析柱中，吸附劑與上樣量的重量比不小于0.5。這一過(guò)程的優(yōu)化方案是五味子醇甲的萃取物按照萃取物∶硅膠＝0.8-1.2∶1的重量比添加硅膠混合均勻，兩次層析按照吸附劑∶上樣量＝0.8-1.2∶1的重量比裝柱，第二道層析洗脫液為石油醚∶乙酸乙酯＝8.5-7.5∶1的體積比混合而成。
第一道層析洗脫時(shí)，由于石油醚的極性低，因此五味子醇甲不易被洗脫而包含在硅膠中，使一些極性低的雜質(zhì)被洗脫，第二道層析洗脫時(shí)，由于洗脫劑中增加了乙酸乙酯，改善了洗脫劑的極性，從而將五味子醇甲洗脫下來(lái)。
五味子醇甲的溶劑法提取過(guò)程為將五味子粉碎加入乙醇(40％-95％V/V)后進(jìn)行不少于兩次的回流、冷卻、過(guò)濾；首次回流加入3-4倍五味子重量的乙醇，將冷卻、過(guò)濾所得藥渣再加入2-3倍量的乙醇進(jìn)行一次或一次以上的回流、冷卻、過(guò)濾；合并所得的乙醇提取液，回收乙醇，得到浸膏狀的五味子醇甲提取物。
將含有五味子醇甲的提取液進(jìn)行萃取的過(guò)程為將五味子提取液與不小于其0.8倍體積的水混合，再加入石油醚，所用石油醚的體積不小于五味子提取液和水混合后的總體積的0.8倍，最好為0.8-1.2倍體積萃取后取其分離水層，將分離出的水層按照初次萃取的方法同樣再至少萃取2次合并所得的石油醚提取液，回收石油醚，即可得到五味子醇甲萃取物。
將含有五味子醇甲的洗脫液中的洗脫溶劑回收過(guò)程是指將含有五味子醇甲的洗脫液中用水浴等設(shè)備通過(guò)常壓蒸餾法回收，根據(jù)石油醚與乙酸乙酯的沸點(diǎn)與醇甲不一樣而分別進(jìn)行蒸餾回收。
經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)硅膠對(duì)五味子醇甲的吸附專屬性特別強(qiáng)，吸附層的分界尤為明顯清晰。此外層析濾出液的其它有用成分損失少，可以作為提取五味子甲素、五味子乙素的原料。
本發(fā)明的積極效果體現(xiàn)在1、以原藥中五味子醇甲重量含量達(dá)到0.4％五味子為例，本發(fā)明采用吸附層析法來(lái)提取五味子醇甲，具有很高的提取率和純度，五味子醇甲的提取率最高可接近0.4％，純度可達(dá)到50％以上。2、本發(fā)明同時(shí)還具有工藝簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)、五味子醇甲性質(zhì)穩(wěn)定優(yōu)點(diǎn)。3、本發(fā)明特別之處是采用硅膠作為吸附劑，它對(duì)五味子醇甲的吸附專屬性特別強(qiáng)，因此提取的純度也高，提取后的五味子可作為提取五味子甲素、五味子乙素的原料，經(jīng)濟(jì)效益更具顯著。
具體實(shí)施例方式具體實(shí)施方式
1是一種優(yōu)選的五味子醇甲的提取工藝，其工藝過(guò)程如下1、將甘肅產(chǎn)北五味子5000克粉碎到10-30目之間，加入15升的95％V/V的食用乙醇(以下同)，用回流提取罐中回流120分鐘，冷卻至室溫，抽濾，濾液另置。
2、將抽濾所得藥渣再加入10升乙醇，回流120分鐘，冷卻至室溫，進(jìn)行第二次抽濾，濾液另置。
3、將第二次抽濾所得藥渣再加入10升乙醇，回流120分鐘，冷卻至室溫，進(jìn)行第三次抽濾。合并三次所得的無(wú)水乙醇濾液，蒸餾回收乙醇，使濾液濃縮得到浸膏狀五味子醇甲提取物。
4、將上述浸膏用同重量的蒸餾水混合，混合物中加入與混合物重量相同的沸程為60-90℃上海恒源牌(以下同)石油醚，劇烈振搖30分鐘，分離水層。
5、將上述過(guò)程4所得的水層加入與過(guò)程4重量相同沸程為60-90℃石油醚，劇烈振搖30分鐘，分離水層。
6、重復(fù)試驗(yàn)步驟5二次，并與實(shí)驗(yàn)步驟4和5四次所得的石油醚提取液合并，回收石油醚，即可得到五味子醇甲萃取物150克。
7、首先將含有五味子醇甲的萃取物，按照萃取物∶硅膠＝1∶1的重量比添加硅膠混合均勻后待用?；旌衔镏亓繛?00克。
8、設(shè)置2個(gè)層析柱，柱高均為30cm，柱徑為10cm，吸附劑為青島海洋牌目數(shù)為100目硅膠，硅膠裝填量為15cm，重量約合為300克。
9、將步驟7所制得的300克混合物上第1個(gè)層析柱，用60-90℃石油醚進(jìn)行洗脫，洗脫液流速為3ml/分鐘洗脫至石油醚無(wú)色時(shí)，停止洗脫，取出含五味子醇甲的吸附劑部分。該部分吸附劑位于層析柱的上層。
10、將步驟9所制得的五味子醇甲的吸附劑部分上第2個(gè)層析柱，洗脫液為石油醚和上海榮潤(rùn)牌乙酸乙酯(的混合溶劑，二者混合的體積比為石油醚∶乙酸乙酯＝8∶1，洗脫液流速為3ml/分鐘洗脫至醇甲出現(xiàn)時(shí)開始收集，收集至無(wú)醇甲時(shí)，收集至無(wú)醇甲時(shí)(TLC薄層層析鑒別法判定)停止洗脫。取洗脫液，該洗脫液中含有五味子醇甲。
11、將含有五味子醇甲的洗脫液用水浴加熱，通過(guò)常壓蒸餾回收石油醚和乙酸乙酯，到石油醚、乙酸乙酯收集完畢后停止(TLC薄層層析鑒別法判定)，得到五味子醇甲，其性狀為淡綠色粉末的結(jié)晶粉末。天平稱重得重量17.5克。
12、對(duì)五味子醇甲進(jìn)行檢驗(yàn)五味子原藥中五味子醇甲的重量含量為0.8％，檢驗(yàn)方法是利用高效液相色譜法測(cè)得五味子。
得到其收率為0.35％。取中國(guó)藥品生物制品鑒定所提供的五味子醇甲純品對(duì)照品(用于含量測(cè)定用)，精密稱取五味子醇甲對(duì)照品10mg，置50ml容量瓶中，用甲醇稀釋到刻度，搖勻。精密取五味子醇甲對(duì)照液3ml置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得作為對(duì)照品溶液。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水(13∶7)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為250nm。理論板數(shù)按五味子醇甲峰計(jì)算應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制造備取五味子醇甲對(duì)照品15mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每1ml含五味子醇甲0.3mg)。
供試品溶液的制備取本法所得提取物約30mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇約18ml，超聲處理20分鐘，取出，加甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定純度為55.6％。
具體實(shí)施例方式
2本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
1的不同處在于合并具體實(shí)施方式
1中的步驟8、9、10，其它相同，不同處具體為設(shè)置1個(gè)層析柱，將步驟7所制得的300克混合物上直接上這一個(gè)層析柱，洗脫液為石油醚和乙酸乙酯，洗脫至醇甲出現(xiàn)時(shí)開始收集，收集至無(wú)醇甲時(shí)，收集至無(wú)醇甲時(shí)(TLC薄層層析鑒別法判定)停止洗脫。取洗脫液，該洗脫液中含有五味子醇甲。
按同樣方法測(cè)得重量19.1g，收率0.38％，純度48.7％。
權(quán)利要求
1.一種五味子醇甲的提取工藝，五味子在經(jīng)過(guò)溶劑法提取后，其特征在于將含有五味子醇甲的提取液進(jìn)行萃取，將含有五味子醇甲的萃取物經(jīng)過(guò)柱層析分離后，將含有五味子醇甲的洗脫液中的洗脫溶劑回收，所得濃縮物即為五味子醇甲。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種五味子醇甲的提取工藝，其特征在于層析過(guò)程中，使用的吸附劑為硅膠粉末，在層析柱中，吸附劑與上樣量重量比不小于0.5，洗脫液為石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑，二者混合的體積比為石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述一種五味子醇甲的提取工藝，其特征在于吸附劑與上樣量的重量比為吸附劑∶上樣量＝0.8-1.2∶1；石油醚和乙酸乙酯的體積比為8.5-7.5∶1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種五味子醇甲的提取工藝，其特征在于層析過(guò)程設(shè)定成兩道層析過(guò)程，首先將含有五味子醇甲的萃取物，按照萃取物硅膠不大于1.5的重量比添加硅膠混合均勻后，將混合物上層析柱用石油醚進(jìn)行洗脫，洗脫至石油醚無(wú)顏色時(shí)，停止洗脫，取出含五味子醇甲的吸附劑部分，將該部分上第二道層析柱，第二道層析柱使用的洗脫液為石油醚和乙酸乙酯的混合溶劑，二者混合的體積比為石油醚∶乙酸乙酯＝10-5∶1，兩道層析柱中的吸附劑為硅膠粉末，在層析柱中，吸附劑與上樣量的重量比不小于0.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種五味子醇甲的提取工藝，其特征在于五味子醇甲的萃取物按照萃取物∶硅膠＝0.8-1.2的重量比添加硅膠混合均勻，兩次層析按照吸附劑∶上樣量＝0.8-1.2∶1的重量比裝柱，第二道層析洗脫液為石油醚∶乙酸乙酯＝8.5-7.5∶1的體積比混合而成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一所述一種五味子醇甲的提取工藝，其特征在于五味子醇甲的溶劑法提取過(guò)程為將五味子粉碎加入40％-95％V/V乙醇后進(jìn)行不少于兩次的回流、冷卻、過(guò)濾；首次回流加入3-4倍五味子重量的乙醇，將冷卻、過(guò)濾所得藥渣再加入2-3倍量的乙醇進(jìn)行一次或一次以上的回流、冷卻、過(guò)濾；合并所得的乙醇提取液，回收乙醇，得到浸膏狀的五味子醇甲提取物。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一所述一種五味子醇甲的提取工藝，其特征在于將含有五味子醇甲的提取液進(jìn)行萃取的過(guò)程為將五味子提取液與不小于其0.8倍體積的水混合，再加入石油醚，所用石油醚的體積不小于五味子提取液和水混合后的總體積的0.8倍，萃取后取其分離水層，將分離出的水層按照初次萃取的方法同樣再至少萃取2次合并所得的石油醚提取液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一所述一種五味子醇甲的提取工藝，其特征在于將含有五味子醇甲的洗脫液中的洗脫溶劑回收過(guò)程是指將含有五味子醇甲的洗脫液中用水浴等設(shè)備通過(guò)常壓蒸餾法回收。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種五味子醇甲的提取工藝，該工藝為五味子在經(jīng)過(guò)溶劑法提取后，將含有五味子醇甲的提取液進(jìn)行萃取，其特征在于將含有五味子醇甲的萃取物經(jīng)過(guò)柱層析分離后，將含有五味子醇甲的洗脫液中的洗脫溶劑回收，所得濃縮物即為五味子醇甲。本發(fā)明具有五味子醇甲純度高、收率高、品質(zhì)穩(wěn)定、提取工藝簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的等特點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07C41/00GK1817839SQ20051005236
公開日2006年8月16日 申請(qǐng)日期2005年2月8日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月8日
發(fā)明者朱蕭俊 申請(qǐng)人:朱蕭俊